高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺 【技术领域】
本发明涉及一种液体酶的制备工艺， 特别涉及一种高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺。 背景技术 木瓜蛋白酶广泛应用于食品、 化妆品、 饲料、 皮革加工等行业， 用途广泛。 目前全球 年生产木瓜蛋白酶达 1000 吨以上， 而美国每年的需求量就在 300 吨左右， 其中大部分靠进 口。我国目前木瓜蛋白酶市场需求量为 300 吨， 但木瓜蛋白酶年产量仅为 100 吨左右， 而且 多为粗制品， 即木瓜浆的干燥制品。近年来， 国际上木瓜蛋白酶的需求量每年都在以 5％左 右的速度增长。市场对木瓜蛋白酶的需求量巨大。
木瓜蛋白酶是一种植物蛋白酶， 主要由从木瓜中提取。常见的木瓜蛋白酶有固体 和液体两种。 固体酶虽然有利于长期保存， 但是在生产操作中， 存在酶的添加不均匀导致工 艺波动、 酶的粉尘易致过敏等问题， 故实际生产中， 使用液体酶更为方便。
目前， 我国液体木瓜蛋白酶的生产工艺主要有以下二种 ： ①自然静置浸提， 提取率 一般仅有 70% 左右， 商品活力通常低于 10 万单位 / 毫升， 生产效率低下且周期长， 一般长达 15 天 ； ②将干木瓜乳研磨成浆状， 杂质没有分离， 商品活力不超过 20 万单位 / 毫升。工艺 ①的产品活力低、 生产效率低下且周期长 ； 工艺②的生产周期虽短， 但杂质多， 卫生指标也 差。 由于木瓜蛋白酶产品的品质差， 导致木瓜这一易于栽培的农作物的附加值低， 也影响了 瓜农的收益。
因此寻求一种产品活力高、 卫生指标及经济性方面都较好的高活力液体木瓜蛋白 酶提取生产工艺非常重要。
发明内容 本发明的目的在于提供一种简单、 高效的高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺。
本发明所采取的技术方案是 ： 高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺， 包括以下步骤 ： 1) 将干木瓜乳与水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 在木瓜乳悬浊液加入淀粉酶、 果胶酶、 糖化酶， 酶解 ； 2) 将酶解液过滤， 取滤液 ； 3) 将滤液进行膜过滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
优选的， 每 100g 木瓜乳 （干重） ， 加入 1000 ～ 3000U 的淀粉酶。
优选的， 每 100g 木瓜乳 （干重） ， 加入 1000 ～ 20000U 的果胶酶。
优选的， 每 100g 木瓜乳 （干重） ， 加入 5000 ～ 10000U 的糖化酶。
优选的， 木瓜乳 （干重） 与水的质量比为 10 ～ 100 ： 100。
酶解的温度为 21 ～ 57℃。
本发明的工艺制备的液体木瓜蛋白酶， 酶活不低于 50 万单位 /ml， 细菌数不高于
10000 个 /ml。
本发明的工艺， 生产周期短， 5 天之内即可完成整个生产过程， 生产效率大大提高。 各工艺参数易于控制， 使用的设备也易于维修。
本发明的工艺， 提取率可接近 100%， 大大减少了原料的浪费。
本发明的工艺， 能耗低， 节能环保， 综合生产成本较常规自然静置浸提降低 30% 以 上， 是一种绿色、 环保的提取工艺。 具体实施方式
高活力液体木瓜蛋白酶的制备工艺， 包括以下步骤 ： 将干木瓜乳与水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 在木瓜乳悬浊液加入淀粉酶、 果胶酶、 糖化 酶， 酶解 ； 将酶解液过滤， 取滤液 ； 将滤液进行膜过滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
优选的， 每 100g 木瓜乳 （干重） ， 加入 1000 ～ 3000U 的淀粉酶。
优选的， 每 100g 木瓜乳 （干重） ， 加入 1000 ～ 20000U 的果胶酶。 优选的， 每 100g 木瓜乳 （干重） ， 加入 5000 ～ 10000U 的糖化酶。
优选的， 木瓜乳 （干重） 与水的质量比为 10 ～ 100 ： 100。
酶解的温度为 21 ～ 57℃。
下面结合实施例， 进一步说明本发明。
以下实施例中所使用的份数， 如无特别说明， 均指质量份。
实施例 1 将 10 份干木瓜乳与 100 份水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 1) 按每 100g 干木瓜乳加入 1000U 淀粉酶、 6000U 果胶酶、 6000U 糖化酶的比例加入淀 粉酶、 果胶酶、 糖化酶， 30℃酶解 ； 2) 将酶解液通过鼓膜压榨过滤， 取滤液 ； 3) 将滤液超滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
整个生产周期为 4 天 5 小时， 木瓜蛋白酶的收率为 99.8%， 酶活为 60 万单位 /ml。
实施例 2 1) 将 50 份干木瓜乳与 100 份水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 2) 按每 100g 干木瓜乳加入 1800U 淀粉酶、 10000U 果胶酶、 5000U 糖化酶的比例加入 淀粉酶、 果胶酶、 糖化酶， 37℃酶解 ； 3) 将酶解液通过鼓膜压榨过滤， 取滤液 ； 4) 将滤液超滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
整个生产周期为 4 天， 木瓜蛋白酶的收率为 99.5%， 酶活为 70 万单位 /ml。
实施例 3 1) 将 30 份干木瓜乳与 100 份水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 2) 按每 100g 干木瓜乳加入 1300U 淀粉酶、 1000U 果胶酶、 7000U 糖化酶的比例加入淀 粉酶、 果胶酶、 糖化酶， 57℃酶解 ； 3) 将酶解液通过鼓膜压榨过滤， 取滤液 ；
将滤液超滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
整个生产周期为 3 天 15 小时， 木瓜蛋白酶的收率为 97.2%， 酶活为 50 万单位 /ml。
实施例 4 1) 将 80 份干木瓜乳与 100 份水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 2) 按每 100g 干木瓜乳加入 2500U 淀粉酶、 20000U 果胶酶、 10000U 糖化酶的比例加入 淀粉酶、 果胶酶、 糖化酶， 42℃酶解 ； 3) 将酶解液通过鼓膜压榨过滤， 取滤液 ； 4) 将滤液超滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
整个生产周期为 4 天 14 小时， 木瓜蛋白酶的收率为 99.0%， 酶活为 67 万单位 /ml。
实施例 5 1) 将 100 份干木瓜乳与 100 份水混合， 得到木瓜乳悬浊液， 2) 按每 100g 干木瓜乳加入 3000U 淀粉酶、 15000U 果胶酶、 8500U 糖化酶的比例加入 淀粉酶、 果胶酶、 糖化酶， 21℃酶解 ； 3) 将酶解液通过鼓膜压榨过滤， 取滤液 ； 4) 将滤液超滤除菌， 得到高活力液体木瓜蛋白酶。
整个生产周期为 4 天 20 小时， 木瓜蛋白酶的收率为 98.5%， 酶活为 68 万单位 /ml。
本发明通过选取合适的酶以及合适的量， 可以快速地将木瓜蛋白酶从木瓜乳中释 放出来， 有效缩短了整个工艺流程， 提高了生产效率。
虽然高温下也可以进行提取， 但是整个生产工艺的温度可控制在 40℃以下， 这样 可以保持木瓜蛋白酶的酶活在较高的水平。 同时， 过滤、 超滤都是纯物理操作， 处理量大， 能 耗低， 可进一步提高生产效率， 降低生产成本。
本发明的工艺制备的液体木瓜蛋白酶， 酶活不低于 50 万单位 /ml， 细菌数不高于 10000 个 /ml， 是一种性能优异的产品。这一工艺的实施， 也将进一步提高木瓜的附加值， 有 利于提高瓜农的收入。
本发明的工艺， 生产周期短， 5 天之内即可完成整个生产过程， 生产效率大大提高。 各工艺参数易于控制， 使用的设备也易于维修。
本发明的工艺， 提取率可接近 100%， 大大减少了原料的浪费。
本发明的工艺， 能耗低， 节能环保， 综合生产成本较常规自然静置浸提降低 30% 以 上， 是一种绿色、 环保的提取工艺。4)5