相关申请的交叉参照
本申请要求2009年9月18日提交的美国临时申请号61/243,973的权 益，其通过引用结合到本文中。
技术领域
本发明涉及可用于治疗与钙通道功能相关的病症，且特别是与N和 T-型钙通道活性相关的病症的化合物。更特别地，本发明涉及包括可 用于治疗例如心血管疾病、癫痫、癌症和疼痛的病症的环烷基芳基砜 衍生物的化合物。
发明背景
钙通道介导各种正常的生理学功能并且也涉及许多人类疾病。钙-介导 的人类疾病的实例包括但不限于先天性偏头痛、小脑共济失调、绞 痛、癫痫、高血压、局部缺血、及某些心律失常(见，例如，Janis等， Ion Calcium Channes：Their Properties，Functions，Regulation and Clinical Relevance(1991)CRC Press，London)。T-型，或低电压-激活 的通道描述一大类分子，其在负电位短暂激活并对静电位的变化高度 敏感，因而与各种医学病症有关。例如，在缺乏基因表达3.1亚单位 (CaV 3.1)的小鼠中，观察到对失神癫痫发作的阻抗(resistance to absence seizures)(Kim等，Mol Cell Neurosci 18(2)：235-245，2001)。其它的研 究也提示3.2亚单位(CaV 3.2)涉及癫痫的发生(Su等，J Neurosci 22： 3645-3655，2002)。
因此迫切需要新的钙通道，例如，N或T-型钙通道的变构调节剂。调 节剂可影响例如，CaV3.2通道的动力学和/或电压潜能。
本发明提供在这些N和T-型钙通道上起作用并可用于治疗与这些钙 通道相关的各种病症，例如疼痛和癫痫的化合物。本发明也提供包含 这些化合物的药用组合物和单独使用它们或与其它药物联合使用的 方法。
发明概述
本发明涉及可用于治疗通过钙通道活性调节的病症且特别是通过T- 型通道活性介导的病症的化合物。本发明的化合物是环烷基芳基砜衍 生物，其具有促进化合物的钙通道阻断活性的结构特征。
在第一个方面，本发明的特征是具有依据下式的结构的化合物，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，或其立体异构体，或其轭 合物，其中
Ar是任选取代的苯基；
L1是亚甲基、亚乙基或亚丙基；
X是任选取代的环己基、任选取代的环丁基，任选取代的哌啶基或二 甲基亚甲基；
n是0或1；
L2是(CH2)0-3CONR’(CH2)0-2、(CH2)0-3NR’CO、CH2NR’CH2CONR’、 (CH2)0-3NR’CONR’、NR’COCH2NR’、NR’CH2CONR’、 CH2NHCH2CONR’、NR’COO、NR’(CH2)1-3NR’CO、 (CH2)0-3NR’SO2、(CH2)0-3SO2NR’(CH2)0-2、(CH2)1-2NR’(CH2)0-1、 (CH2)1-2SO2或咪唑基；
Y是H或任选取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C2-C10 杂烷基、C2-C10杂烯基、C2-C10杂炔基、C4-C10杂环烷基、C6-C10 芳基、杂芳基(5-12个环成员)、C3-C10环烷基、杂环基(5-12个环成 员)、芳基(5-12个环成员)-C1-C10烷基；或L2的R’和Y可一起形成 任选取代的杂环(4-8个环成员)；和
各R’独立地为H、甲基、乙基或丙基。
在一些实施方案中，Ar包括选自以下的取代基：卤代、CN、CF3、OCF3、 COOR”、CONR”2、OR”、SR”、SOR”、SO2R”、C1-C6烷基、C2-C6 烯基、C2-C6炔基、C2-C6杂烷基、C2-C6杂烯基、C2-C6杂炔基； C6-C10芳基、杂芳基(5-12个环成员)、O-(C6-C10)芳基、O-杂芳基(5-12 个环成员)、C6-C10芳基-C1-C6烷基或杂芳基(5-12个环成员)-烷基 (1-6C)，且其中各R”独立地为H或选自以下的任选取代的基团：C1-C6 烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C2-C6杂烷基、C2-C6杂烯基或C2-C6 杂炔基。
在一些实施方案中，Y包括选自以下的取代基：卤代、CN、CF3、OCF3、 COOR”、CONR”2、OR”、SR”、SOR”、SO2R”、C1-C6烷基、C2-C6 烯基、C2-C6炔基、C2-C6杂烷基、C2-C6杂烯基、C2-C6杂炔基； C6-C10芳基、杂芳基(5-12个环成员)、O-(C6-C10)芳基、O-杂芳基(5-12 个环成员)、C6-C10芳基-C1-C6烷基、杂芳基(5-12个环成员)-烷基 (1-6C)、＝O、＝NOR”、NO2、NR”2、NR”(CO)R”或NR”SO2R”，和 其中各R”独立地为H或选自以下的任选取代的基团：C1-C6烷基、 C2-C6烯基、C2-C6炔基、C2-C6杂烷基，C2-C6杂烯基、C2-C6杂 炔基。
在某些实施方案中，在X上的任选的取代基独立地选自卤代、甲基、 乙基、丙基，和OR’，和各R’独立地为H、甲基、乙基或丙基。
在一些实施方案中，Ar是被F、CF3或OCF3取代的苯基。
在其它实施方案中，当X是任选取代的环己基或任选取代的哌啶基 时，ArSO2(L1)nX-和-L2之一位于C1，而另一个位于C4或N4。在另 外的其它实施方案中，当X是任选取代的环丁基时，ArSO2(L1)nX-和 -L2之一位于C1，而另一个位于C3。
在某些实施方案中，当X是环己基时，所述环己基为未取代的或被甲 基取代。
在一些实施方案中，Y是苯基、杂芳基或C1-C6烷基，其包含选自以 下的取代基：CF3、F、Cl、OCF3、SO2Me和SO2(iPr)。
在另外的其它实施方案中，L2是-NHCO-、-NCH3CO-或-NHSO2-。
在一些实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的C1-C3烷基、及 卤素；RC是CF3或OCF3；RD是H、卤素或CF3；两个p均是0或两 个p均是1；q是0或1；L2选自-NR’CO-、 -CONR’-、-NR’CH2CONH-、-CH2NR’CO-、-CH2NR’CH2CONR’-、 -NR’COCH2NR’-、-NR’CONR’-、-NR’COO-、-NR’SO2-；各R’独立 地选自H或CH3；和Y是H，任选取代的苯基，任选取代的杂芳基， 未取代的C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基，C3-C6环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，两个p均是0。
在某些实施方案中，两个p均是1。
在其它实施方案中，q是0。
在另外的其它实施方案中，q是1。
在一些实施方案中，各R’独立地为H或CH3。
在另外的其它实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中RA和RB各自独立地选自H，OH，任选取代的C1-C3烷基、及 卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在某些实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中s 是0或1；t是0或1；RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的 C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。 进一步的实施方案中，t是0和s是0或t是0和s是1。在其它实施 方案中，t是1和s是0或t是1和s是1。
在其它实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中RA是H、OH、任选取代的C1-C3 烷基、及卤素；q是0，1或2；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素 或CF3。
在另外的其它实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中RA和RB各自独立地选自H、 OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是 H、卤素或CF3。
在一些实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中RA和RB各自独立地选自H、 OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是 H、卤素或CF3。
在某些实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中r是1或2；s是0或1；RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在另外的其它实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中r是1或2；s是0或1；RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在一些实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
(XIV)，其中s是0或1；t是0或1；RA和RB各自独立地选自H、OH、 任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤 素或CF3。进一步的实施方案中，t是0和s是0或t是0和s是1。 在其它实施方案中，t是1和s是0或t是1和s是1。
在其它实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中RA和RB各自独立地选自H、 OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是 H、卤素或CF3。
在另外的其它实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中s是0或1；t是0或1； RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素； RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在某些实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中s是0或1；t是0或1；RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在一些实施方案中，所述化合物具有依据下式的结构，
其中s是0或1；t是0或1；RA和RB各自独立地选自H、OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。在某些实施方案中，t是0 和s是0或t是0和s是1。在其它实施方案中，t是1和s是0或t 是1和s是1。
在另外的其它实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中RA和RB各自独立地选自H、 OH、任选取代的C1-C3烷基、及卤素；RC是CF3或OCF3；和RD是 H、卤素或CF3。
在一些实施方案中，RA是H，F或CH3。在某些实施方案中，RA是F 或CH3。在其它实施方案中，RA是H。
在某些实施方案中，RB是H、OH或CH3.
在其它实施方案中，RA和RB两者均为H。
在另外的其它实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中R’是H或CH3；RC是CF3或OCF3； 和RD是H、卤素或CF3。
在一些实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中r是1或2；R’是H或CH3；RC是 CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在其它实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中R’是H或CH3；RC是CF3或 OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在另外的其它实施方案中，化合物具有依据以下的结构：
其中r是1或2；R’是H或CH3；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在某些实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中r是1或2；R’是H或CH3；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在其它实施方案中，所述化合物具有依据以下的结构：
其中r是1或2；R’是H或CH3；RC是CF3或OCF3；和RD是H、卤素或CF3。
在一些实施方案中，Y是任选取代的C1-C10烷基或任选取代的 C2-C10杂烷基。在其它实施方案中，Y是任选取代的C1-C5烷基或 任选取代的C2-C6杂烷基。
在其它实施方案中，Y是任选取代的C6-C10芳基、任选取代的杂芳 基，任选取代的C3-C10环烷基或任选取代的杂环基(5-12个环成员)。 在某些实施方案中，Y是任选取代的四氢吡喃基、任选取代的1，4-吗 啉代、任选取代的环丁基，任选取代的环戊基，任选取代的环己基， 任选取代的苯基，任选取代的嘧啶基，任选取代的吡啶基，任选取代 的吡唑基，任选取代的噁唑基，任选取代的异噁唑基，任选取代的苯 并咪唑基，任选取代的三唑基，任选取代的噻唑基，任选取代的异噻 唑基，任选取代的呋喃基，任选取代的噻吩基，任选取代的咪唑基， 任选取代的咪唑并[1，2-a]吡啶，任选取代的1，6-萘啶，任选取代的2，3- 二氢吲哚基，任选取代的苯二甲酰亚氨基或任选取代的氧代-异吲哚 基。在进一步的实施方案中，Y是任选取代的苯基，任选取代的嘧啶 基或任选取代的吡啶基。在一些实施方案中，Y被F、Cl、CF3、-SO2Me 或-SO2iPr取代，且任选被卤素、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3卤 代烷基、C3-C6环烷基、卤代苯基或-SO2(C1-C4烷基)取代。在另外的 其它实施方案中，Y为未取代的或被NH2、卤代、任选取代的苯基、 任选取代的苄基或任选取代的吡啶基取代。
在一些实施方案中，RA和RB彼此为顺式。
在其它实施方案中，RA和RB彼此为反式。
在某些实施方案中，被RA取代的碳具有S构型。
在另外的其它实施方案中，被RA取代的碳具有R构型。
在一些实施方案中，被RB取代的碳具有S构型。
在其它实施方案中，被RB取代的碳具有R构型。
在一些实施方案中，RC是CF3。
在另外的其它实施方案中，RC是OCF3。
在某些实施方案中，所述化合物具有表1中化合物1-780的任一化合 物的结构，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，或其立体异构 体，或其轭合物。
在一些实施方案中，所述化合物是或其 药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，或其立体异构体，或其轭合物。
在另一方面，本发明的特征是药用组合物，其包含上述任一化合物(如， 式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中化合物1-780中的任何一个)，或 其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，或其立体异构体，或其轭合 物，及药学上可接受的载体或赋形剂。在一些实施方案中，所述药用 组合物按单位剂型配制。在进一步的实施方案中，单位剂型是片剂、 胶囊形糖衣片、胶囊、锭剂、薄膜片、条、gelcap或糖浆剂。
本发明也涉及本文所述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表 1中的化合物1-780的任一化合物)在制备用于治疗需要调节钙通道活 性，且特别是N或T-型钙通道活性的病症的药物中的用途。
在另一方面，本发明的特征是治疗由钙通道活性调节的病症的方法， 其中所述方法包括给予需要这样的治疗的患者有效量的本文描述的 任一化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780 的任一化合物)，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，或其立体 异构体，或其轭合物或其任何药用组合物。在一些实施方案中，所述 钙通道是T-型钙通道(如，CaV 3.1、CaV 3.2或CaV 3.3通道)。
在其它实施方案中，钙通道是N-型钙通道(如，CaV 2.2通道)。
在一些实施方案中，所述病症是疼痛、癫痫、帕金森氏病、抑郁症、 精神病(如，精神分裂症)或耳鸣。
在一些实施方案中，所述病症是疼痛或癫痫症。在某些实施方案中， 疼痛是炎性疼痛或神经性疼痛。
在另外的其它实施方案中，疼痛是慢性疼痛(如，外周神经性疼痛；中 枢神经性疼痛、肌与骨骼疼痛、头痛、内脏疼痛或混合性疼痛)。在一 些实施方案中，外周神经性疼痛是疱疹后神经痛、糖尿病性神经性疼 痛、神经性癌症疼痛、失败的背部-手术综合征、三叉神经痛或幻肢痛。
在其它实施方案中，中枢神经性疼痛是多发性硬化相关疼痛、帕金森 氏病相关疼痛、中风后疼痛、创伤后脊柱损伤性疼痛或痴呆症头痛。
在另外的其它实施方案中、肌与骨骼疼痛是骨关节炎疼痛和纤维肌痛 (fibromyalgia)综合征；炎性疼痛例如类风湿性关节炎或子宫内膜异位。
在一些实施方案中，头痛是偏头痛、丛集性头痛、紧张性头痛综合征、 面部疼痛或由其它疾病引起的头痛。在某些实施方案中，内脏疼痛是 间质性膀胱炎、肠易激惹综合征或慢性腰痛综合征。在其它实施方案 中，混合性疼痛是下背痛、颈和肩疼痛、烧口综合征(burning mouth syndrome)或复杂局部疼痛综合征。
在一些实施方案中，头痛是偏头痛。
在其它实施方案中，疼痛是急性疼痛(如，感受伤害性疼痛或手术后疼 痛)。在一些实施方案中，急性疼痛是手术后疼痛。
在一些实施方案中，所述病症是癫痫症。
本文所用的术语“烷基”、“烯基”和“炔基”包括当未取代时仅含有C和 H的直链、支链和环状一价取代基，以及这些的组合。实例包括甲基、 乙基、异丁基、环己基、环戊基乙基、2-丙烯基、3-丁炔基等。典型 地、烷基、烯基和炔基包含1-10C(烷基)或2-10C(烯基或炔基)。在一 些实施方案中、它们包含1-8C、1-6C、1-4C、1-3C或1-2C(烷基)； 或2-8C、2-6C、2-4C或2-3C(烯基或炔基)。此外，在这些基团之一 上的任何氢原子可被卤原子，且特别是氟代或氯代基团取代，并且仍 然在烷基、烯基和炔基的定义范围内。例如，CF3是1C烷基。这些基 团也可被其它取代基取代。
杂烷基、杂烯基和杂炔基被类似地定义，并且在主链残基内包含至少 一个碳原子，而且也包含一个或多个O、S或N杂原子或其组合，从 而在杂烷基、杂烯基或杂炔基中的每个杂原子替代所述杂形式 (heteroform)对应的烷基、烯基或炔基的一个碳原子。在一些实施方案 中，杂烷基、杂烯基和杂炔基在该基团连接于其它基团的末端上具有 C，且存在的杂原子不位于末端位置。正如本领域所理解的，这些杂 形式不包含3个以上的相邻杂原子。在一些实施方案中，杂原子是O 或N。
烷基、烯基和炔基的杂形式中的指定碳原子数包括杂原子数。例如， 如果杂烷基被限定为1-6C，它将包含1-6个C、N、O或S原子，以 使杂烷基包含至少一个C原子和至少一个杂原子，例如1-5C和1N或 1-4C和2N。类似地，当杂烷基被限定为1-6C或1-4C，它将分别包 含1-5C或1-3C，即，至少一个C被O、N或S替代。因此，当杂烯 基或杂炔基被限定为2-6C(或2-4C)，它将包含2-6或2-4个C、N、O 或S原子，因此杂烯基或杂炔基包含至少一个碳原子和至少一个杂原 子，如2-5C和1N或2-4C和2O。此外，杂烷基、杂烯基或杂炔基取 代基也可包含一个或多个羰基。杂烷基、杂烯基和杂炔基的实例包括 CH2OCH3、CH2N(CH3)2、CH2OH、(CH2)nNR2、OR、COOR、CONR2、 (CH2)n OR、(CH2)n COR、(CH2)nCOOR、(CH2)nSR、(CH2)nSOR、 (CH2)nSO2R、(CH2)nCONR2、NRCOR、NRCOOR、OCONR2、OCOR 等，其中R基团包含至少一个C，而取代基的大小(size)与如本文描述 的烷基、烯基和炔基的定义一致。
本文所用的术语“亚烷基”、“亚烯基”和“亚炔基”指具有指定大小的二 价或三价基团，典型地对于饱和基团为1-2C、1-3C、1-4C、1-6C或 1-8C和对于不饱和基团为2-3C、2-4C、2-6C或2-8C。它们包括当未 取代时仅含有C和H的直链、支链和环状形式，以及这些的组合。由 于它们是二价的，它们可将分子的两部分连接在一起，如在本文描述 的化合物中的X所例证的。实例是亚甲基、亚乙基、亚丙基、环丙-1，1- 二基、乙叉基(ethylidene)、2-丁烯-1，4-二基等。这些基团可被典型地 适合作为如本文所述烷基、烯基和炔基的取代基的基团取代。因此， 例如C＝O是被＝O取代的C1亚烷基。
杂亚烷基、杂亚烯基和杂亚炔基被类似地定义为具有指定大小的二价 基团，典型地对于饱和基团为1-3C、1-4C、1-6C或1-8C和对于不饱 和基团为2-3C、2-4C、2-6C或2-8C。它们包括直链、支链和环状基 团以及这些的组合，且它们还包含至少一个碳原子，而且在主链残基 内也包含一个或多个O、S或N杂原子或其组合，从而杂亚烷基、杂 亚烯基或杂亚炔基基团中的每个杂原子替代与杂形式对应的亚烷基， 亚烯基或亚炔基基团的一个碳原子。正如本领域所理解的，这些杂形 式不包含3个以上的相邻杂原子。
“芳族的”部分或“芳基”部分指任何单环或稠合环双环系统，其具有就 整个环系统并包括单环或稠合双环部分例如苯基或萘基的电子分布 而言的芳香性特征；“杂芳族的”或“杂芳基”也指包含一个或多个选自 O、S和N的杂原子的这样的单环或稠合的双环环系统。杂原子的包 含在内使得包括的5-元环被认为是芳族的及6-元环。因此，典型的芳 族的/杂芳族系统包括吡啶基、嘧啶基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并三 唑基、异喹啉基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、噻吩基、呋喃 基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、 咪唑基等。由于互变异构体在理论上是可能的，苯二甲酰亚氨基也被 认为是芳族的。典型地，环系统包含5-12环成员原子或6-10环成员 原子。在一些实施方案中，芳族或杂芳族部分是任选地包含1-2个氮 原子的6-元芳族环系统。更特别地，所述部分是任选取代的苯基、吡 啶基、吲哚基、嘧啶基、哒嗪基、苯并噻唑基或苯并咪唑基、吡唑基、 咪唑基、异噁唑基、噻唑基、苯并噻唑基、吲哚基。甚至更特别地， 这样的部分是苯基、吡啶基或嘧啶基。甚至更特别地是苯基。 “O-芳基”或“O-杂芳基”指通过氧原子与另一个残基连接的芳族或杂芳 族系统。O-芳基的典型的实例是苯氧基。类似地，“芳基烷基”指通过 饱和或不饱和的碳链与另一个残基连接的芳族和杂芳族系统，所述碳 链典型地当饱和时为1-8C、1-6C或更特别是1-4C或1-3C，当不饱和 时为2-8C、2-6C、2-4C或2-3C，包括其杂形式。为更大的确定性， 因此芳基烷基包括连接于如上定义的烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、 炔基或杂炔基部分的如上定义的芳基或杂芳基。典型的芳基烷基应为 芳基(6-12C)烷基(1-8C)、芳基(6-12C)烯基(2-8C)或芳基(6-12C)炔基 (2-8C)，加上杂形式。典型的实例是苯甲基，通常称为苄基。
芳族或杂芳族基团上的典型的任选取代基独立地包括卤代、CN、NO2、 CF3、OCF3、COOR’、CONR’2、OR’、SR’、SOR’、SO2R’、NR’2、 NR’(CO)R’，NR’C(O)OR’、NR’C(O)NR’2、NR’SO2NR’2或NR’SO2R’， 其中各R’独立地为H或选自以下的任选取代的基团：烷基、烯基、 炔基、杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂芳基和芳基(全部均如上所定义)； 或取代基可以是选自以下的任选取代的基团：烷基、烯基、炔基、杂 烷基、杂烯基、杂炔基、芳基、杂芳基、O-芳基、O-杂芳基和芳基烷 基。
非-芳族基团上的任选的取代基典型地选自适合于芳族或杂芳族基团 的取代基的相同列表且可进一步选自＝O和＝NOR’，其中R’是H或选 自以下的任选取代的基团：烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂烯基、杂 炔基、杂芳基和芳基(全部均如上所定义)。
卤代可以是卤原子，特别是F、Cl、Br或I，和更特别是氟代、氯代 或溴代。甚至更特别地是氟代或氯代。
一般来说，包含在取代基中的任何烷基、烯基、炔基或芳基(包括所有 的上述限定的杂形式)基团本身可任选地被另外的取代基取代。这些取 代基的性质类似于关于上述基本结构上的取代基所述的那些。因此， 其中取代基的实施方案是烷基，该烷基可任选地被如组成化学意义的 取代基列出的其余取代基取代，且其中这并不破坏烷基本身的大小限 制；例如，对这些实施方案而言，被烷基或被烯基取代的烷基将简单 地延长碳原子的上限，而不被包括在内。然而，被芳基、氨基，卤代 等取代的烷基将包括在内。
一般来说，取代基(例如，烷基、烯基、炔基或芳基(包括所有的上述 限定的杂形式)本身可任选地被另外的取代基取代。这些取代基的性质 类似于关于上述基本结构上的取代基所述的那些。因此，其中取代基 的实施方案是烷基，该烷基可任选地被如组成化学意义的取代基列出 的其余取代基取代，且其中这并不破坏烷基本身的大小限制；例如， 对这些实施方案而言，被烷基或被烯基取代的烷基将简单地延长碳原 子的上限，而不被包括在内。然而，被芳基、氨基，卤代等取代的烷 基将包括在内。例如，当基团被取代时，该基团可以被1、2、3、4、 5或6个取代基取代。任选的取代基包括，但不限于：1C-6C烷基或 杂芳基、2C-6C烯基或杂烯基、2C-6C炔基或杂炔基、卤素；芳基、 杂芳基、叠氮基(-N3)、硝基(-NO2)、氰基(-CN)、酰氧基(-OC(＝O)R’)、 酰基(-C(＝O)R’)、烷氧基(-OR’)、酰氨基(-NR’C(＝O)R”或-C(＝O)NRR’)、 氨基(-NRR’)、羧酸(-CO2H)、羧酸酯(-CO2R’)、氨基甲酰基 (-OC(＝O)NR’R”或-NRC(＝O)OR’)、羟基(-OH)、异氰基(-NC)、磺酸酯 (-S(＝O)2OR)、磺酰胺(-S(＝O)2NRR’或-NRS(＝O)2R’)或磺酰基 (-S(＝O)2R)，其中各R或R’独立地选自H、1C-6C烷基或杂芳基、2C-6C 烯基或杂烯基、2C-6C炔基或杂炔基、芳基或杂芳基。取代的基团可 具有例如1、2、3、4、5、6、7、8或9个取代基。
本文所用的术语“有效量”的药物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表 1中的化合物1-780的任一化合物)，是指足以产生有益的或所需结果， 例如临床效果的量，并且同样地，“有效量”取决于其应用的范围。例 如，给予为钙通道调节剂的药物(如，CaV 3.1、CaV 3.2或CaV 3.3或 CaV 2.2)的范围，药物的有效量是例如与不给予该药物所获得的反应相 比，足以获得钙通道活性的变化的量。
本文所用的术语“药用组合物”表示包含与药学上可接受的赋形剂一起 配制的、本文所述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中 的化合物1-780的任一化合物)的组合物。在一些实施方案中，药用组 合物经政府管理机构批准被作为用于治疗哺乳动物疾病的治疗方案 的一部分而生产或销售。药用组合物可配制为，例如，以单位剂型(如， 片剂、胶囊、囊形糖衣片、gelcap或糖浆剂)用于口服给药；用于局部 给药(如，作为霜剂、凝胶剂、洗剂或软膏剂)；用于静脉内给药(如， 作为不含颗粒栓塞子的无菌溶液和在适合于静脉内使用的溶剂系统 中)；或作为上述的任何其它制剂。
本文所用的“药学上可接受的赋形剂”，指不同于本文所述的化合物且 在患者中具有非毒性和非-炎性性质的任何成分(例如，能够悬浮或溶 解活性化合物的溶媒)。赋形剂可包括，例如：抗粘附剂、抗氧剂、粘 合剂、包衣剂、压制助剂、崩解剂、染料(色料)、软化剂、乳化剂、 填料(稀释剂)、成膜剂或包衣料、调味剂、香料、助流剂(流动促进剂)、 润滑剂、防腐剂、印墨、吸附剂、助悬剂或分散剂、增甜剂或水合作 用的水。示例性赋形剂包括、但不限于：丁羟甲苯(BHT)、碳酸钙、 磷酸钙(二元的)、硬脂酸钙、交联羧甲基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷 酮、柠檬酸、交联聚乙烯吡咯烷酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、 羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘 露醇、甲硫氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚 乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚烯吡酮、预胶化淀粉(pregeltinized starch)、 对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素 钠、柠檬酸钠、羟基乙酸淀粉钠、山梨醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、硬 脂酸、蔗糖、滑石粉、二氧化钛、维生素A、维生素E、维生素C、 和木糖醇。
本文所用的术语“药学上可接受的前药”，表示本发明化合物的那些前 药，所述化合物在合理的医学判断范围内，适用于与人和动物的组织 接触，具有异常毒性、刺激性、变态反应等，与合理的利益/风险比相 称，且有效于其预定用途，以及在可能时包括本发明的化合物的两性 离子形式。
本文所用的术语“药学上可接受的盐”，表示本文描述的化合物(如，式 (I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合物)的那 些盐，其在合理的医学判断范围内，适用于与人和动物的组织接触而 无异常毒性、刺激性、变态反应等，且与合理的利益/风险比相称。药 学上可接受的盐是本领域熟知的。例如，药学上可接受的盐被描述于： Berge等，J.Pharmaceutical Sciences 66：1-19，1977和在药用盐：特性、 选择和应用(Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use，(Eds. P.H.Stahl和C.G.Wermuth)，Wiley-VCH，2008。盐可在本文描述的 化合物的最终分离和纯化期间原位制备或通过游离碱基团与合适的 有机酸反应分别制备。
本发明的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物 1-780的任一化合物)可具有电离基团以便能够作为药学上可接受的盐 制备。这些盐可以是涉及无机或有机酸的酸加成盐或所述盐在本发明 的化合物的酸性形式的情况下，可由无机或有机碱制备。频繁地，所 述化合物被制备或用作制备为药学上可接受的酸或碱的加成产物的 药学上可接受的盐。合适的药学上可接受的酸和碱是本领域熟知的， 例如用于酸加成盐的盐酸、硫酸、氢溴酸、乙酸、乳酸、柠檬酸或酒 石酸，和用于形成碱性盐的氢氧化钾、氢氧化钠、氢氧化铵、咖啡因、 各种胺等。制备适宜的盐的方法是本领域熟知的。
代表性的酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天 冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑 酸、樟脑磺酸、柠檬酸、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸 盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(glucoheptonate)、甘油磷酸盐、 半硫酸盐(hemisulfate)、庚酸盐(heptonate)、己酸盐、氢溴酸盐、盐酸 盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳二糖酸盐(lactobionate)、乳酸盐、 月硅酸盐、十二烷基月硅酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲 磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、 双羟萘酸盐、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、 苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石 酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一碳酸盐(undecanoate)、戊酸盐等。 代表性的碱或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁等，以及无毒的铵、 季铵，和胺阳离子，包括但不限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲基胺、 二甲基胺、三甲基胺、三乙基胺、乙基胺等。
本文所用的术语“药学上可接受的溶剂合物”意指如本文所述的化合物 (如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合 物)，其中合适的溶剂的分子结合到晶格中。合适的溶剂在给予的剂量 下是生理学上可耐受的。例如，溶剂合物可通过结晶、重结晶或从包 括有机溶剂、水或其混合物的溶液中沉淀来制备。合适的溶剂的实例 为乙醇、水(例如，一-、二-、和三-水合物)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、 二甲亚砜(DMSO)、N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N’-二甲基乙酰胺 (DMAC)、1，3-二甲基-2-咪唑烷酮(DMEU)、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢 -2-(1H)-嘧啶酮(pyrimidinone)(DMPU)、乙腈(ACN)、丙二醇、乙酸乙 酯、苄醇、2-吡咯烷酮、苯甲酸苄酯等。当水是溶剂时，该分子称为“水 合物”。
本文所用的术语“预防”，指预防性治疗或治疗，其预防本文所述的疾 病、紊乱或病症(例如、疼痛(如、慢性或急性疼痛)、癫痫、阿尔茨海 默氏病、帕金森氏病、心血管疾病、糖尿病、癌症、睡眠障碍、肥胖、 精神病例如精神分裂症、活动过度的膀胱、肾病、神经保护 (neuroprotection)、成瘾，和雄性节育)的一个或多个症状或病状。预防 性治疗可在例如，先于疾病、紊乱或病症的起病的事件之前(“暴露前 预防”)或之后(“暴露后预防”)启动。包括给予本文描述的化合物(如， 式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合物)或 其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药用组合物的预防性治疗，可以 是紧急的，短期的或长期的。在预防性治疗的过程中，给予的剂量可 以是变化的。
本文所用的术语“前药”，表示在体内迅速转化为上式的母体化合物的 化合物，例如，通过在血液中水解。本文所述的化合物(如，式(I)-(XXVII) 的任一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合物)的前药可以是常 用的酯。已被用作前药的一些常用的酯是苯基酯，脂族(C1-C8或 C8-C24)酯，胆固醇酯，酰氧基甲基酯，氨基甲酸酯，和氨基酸酯。 例如，包含OH基团的化合物可以以其前药的形式在这个位置上被酰 化。详细的讨论在T.Higuchi and V.Stella，作为新传递系统的前药 (Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，A.C.S.专题论文集丛书(A.C.S. Symposium Series)第14卷，Edward B.Roche，ed.，药物设计中的生 物可逆性载体(Bioreversible Carriers in Drug Design)，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987，和Judkins等， Synthetic Communications 26(23)：4351-4367，1996中提供，这些文献 中的每一篇均通过引用结合到本文中。优选地，本发明化合物的前药 适用于与人和动物的组织接触而无异常毒性、刺激性、变态反应等， 与合理的利益/风险比相称，且有效于其预定用途。
此外，本发明的化合物可以通过共轭作用与被设计来改变药代动力 学，用于靶向或为了其它理由的物质偶合。因此，本发明还包括这些 化合物的轭合物。例如，聚乙二醇常常被偶合至提高半衰期的物质； 所述化合物可共价地或非共价地偶合至脂质体或其它特殊的载体。它 们往往也可通过接头部分偶合至靶向药物例如抗体或肽模拟物 (peptidomimetics)。因此，本发明也涉及修饰的化合物(如，式(I)-(XXVII) 的任一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合物)，以便包括在这 种类型的轭合物中。
如本文所用的，以及本领域充分理解的，“治疗”病症或病症的“治疗” (如，本文描述的病症例如疼痛(如，慢性或急性疼痛)、癫痫、阿尔茨 海默氏病、帕金森氏病、心血管疾病、糖尿病、癌症、睡眠障碍、肥 胖、精神病例如精神分裂症、活动过度的膀胱、肾病、神经保护、成 瘾和雄性节育)是用于获得有益或所需效果，例如临床效果的途径。有 益或所需效果可包括，但不限于一个或多个症状或病症的缓解或改 善；疾病、紊乱或病症的程度的减轻；疾病、紊乱或病症的状态的稳 定(即，没有恶化)；防止疾病、紊乱或病症的扩散；延迟或减慢疾病、 紊乱或病症的进展；改善或减轻疾病、紊乱或病症；和症状缓解(不管 是部分或是全部缓解)，不管是可检测的或不可检测的。“缓解”疾病、 紊乱或病症意指疾病、紊乱或病症的程度和/或不需要的临床表现减轻 和/或进展的时间过程减慢或延长，如与未治疗的程度或时间过程所比 较的。
术语“单位剂型”指适合作为单一剂量用于人类患者和其它哺乳动物的 物理离散单位，每一单位包含与任何合适的一种或多种药用赋形剂混 合的经计算可产生所需治疗效果的预定量的活性物质(如，式 (I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合物)。示 例性的非-限制性单位剂型包括片剂(如，可咀嚼片)、囊形糖衣片、胶 囊(如、硬胶囊或软胶囊)、糖锭剂、薄膜剂(film)、条剂(strip)、软胶囊 和糖浆剂。
在某些情况下，本发明的化合物含有一个或多个手性中心。本发明包 括各个分离的立体异构形式以及各种立体异构体的不同程度的手性 纯度的混合物，包括外消旋混合物。也包括可形成的各种非对映异构 体和互变异构体。
本发明的其它特征和优点将从以下详细描述的说明书、附图和权利要 求书变得显而易见。
发明详述
化合物
本发明的特征在于具有依据下式结构的化合物，
或其药学上可接受的盐、溶剂合物或前药，或其立体异构体，或其轭 合物，其中
Ar是任选取代的苯基；
L1是亚甲基、亚乙基或亚丙基；
X是任选取代的环己基、任选取代的环丁基，任选取代的哌啶基或二 甲基亚甲基；
n是0或1；
L2是(CH2)0-3CONR’(CH2)0-2、(CH2)0-3NR’CO、CH2NR’CH2CONR’、 (CH2)0-3NR’CONR’、NR’COCH2NR’、NR’CH2CONR’、 CH2NHCH2CONR’、NR’COO、NR’(CH2)1-3NR’CO、 (CH2)0-3NR’SO2、(CH2)0-3SO2NR’(CH2)0-2、(CH2)1-2NR’(CH2)0-1、 (CH2)1-2SO2或咪唑基；
Y是H或任选取代的C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C2-C10 杂烷基、C2-C10杂烯基、C2-C10杂炔基、C4-C10杂环烷基、C6-C10 芳基、杂芳基(5-12个环成员)、C3-C10环烷基、杂环基(5-12个环成 员)、芳基(5-12个环成员)-C1-C10烷基；或L2的R’和Y可一起形成 任选取代的杂环(4-8个环成员)；和
各R’独立地为H、甲基、乙基或丙基。
本发明的其它化合物可以是依据本文描述的任何下式化合物：
用途和给药
本文描述的化合物可用于本发明的方法中，并且不受理论的束缚，相 信可通过其调节钙通道的活性，特别是N和/或T-型钙通道的活性的 能力而发挥其所需作用。这使得它们用于治疗其中N-或T-型钙通道 的调节是需要的某些病症，包括疼痛、癫痫、偏头痛、帕金森氏病、 抑郁症、精神分裂症、精神病和耳鸣。
钙通道的调节
钙通过电压-门控钙通道进入细胞介导各种细胞和生理学反应，包括 激发-收缩偶合、激素分泌和基因表达(如，Miller等，Science 235：46-52(1987)；Augustine等，Annu Rev Neurosci 10：633-693 (1987))。在神经元中，钙通道直接影响膜电位并导致带电性质例如兴 奋性、反复的放电模式和起搏活性。钙进入还通过直接调节钙-依赖性 离子通道和调节钙-依赖性酶例如蛋白激酶C和钙调蛋白-依赖性蛋白 激酶II的活性影响神经元功能。在突触前神经末端的钙浓度的增加引 发神经递质的释放，其也影响轴突的长出和发展的神经元中的生长锥 迁移。
钙通道介导各种正常的生理学功能，并且也参与如本文所述的多种人 类疾病。例如，也已显示钙通道介导与神经性疼痛有关的的神经元敏 化和超兴奋性过程的发生和维持，并提供用于开发镇痛药的吸引人的 靶标(评述于Vanegas等，Pain 85：9-18(2000)中)。天然的钙通道以根 据其电生理学和药理学特性分类为T-、L-、N-、P/Q-和R-型(评述于 Catterall，Annu Rev Cell Dev Biol 16：521-555，2000；Huguenard，Annu Rev Physiol 58：329-348，1996中)。L-、N-和P/Q-型通道在更多的正 电压处激活(高电压-激活的)并显示不同的动力学和电压-依赖特性 (Id.)。
本文所述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物 1-780的任一化合物)对离子通道的调节可依据本技术领域(如，在本文 提供的参考文献中)已知的方法测定。离子通道，例如，电压-门控钙 离子通道的调节剂，以及可以鉴定这样的化合物的药物化学或方法也 在例如：Birch等，今日药物开发(Drug Discovery Today)，9(9)：410-418 (2004)；Audesirk，“第6章-离子通道功能的电生理学分析(Chapter 6-Electrophysiological Analysis of Ion Channel Function)，” Neurotoxicology：Approaches and Methods，137-156(1995)；Camerino 等，“第4章：离子通道疾病的治疗途径(Chapter 4：Therapeutic Approaches to Ion Channel Diseases，”Advances in Genetics，64：81-145 (2008)；Petkov，“通道第16章-离子通道(Channel Chapter 16-Ion Channels)，”Pharmacology：Principles and Practice，387-427(2009)； Standen等，“第15章-贴剂固定方法和离子通道的分析(Chapter 15-Patch Clamping Methods and Analysis of Ion Channels，”Principles of Medical Biology，Vol.7，Part 2，355-375(1997)；Xu等，今日药物开 发(Drug Discovery Today)，6(24)：1278-1287(2001)；和Sullivan等， Methods Mol.Biol.114：125-133(1999)中描述。示例性实验方法也在实 施例中提供。
T-型钙通道
T-型通道可以通过具有更负性范围的激活和失活、快速失活、缓慢减 活作用和较小的单通道电导率而区分。存在三种已经经分子学 (molecularly)、药理学和电生理学(elecrophysiologically)鉴定的T-型钙 通道亚型：这些亚型已被称为α1G、α1H和α1I(或者分别称作CaV 3.1、 CaV 3.2和CaV 3.3)。
T-型钙通道涉及各种医学病症。在缺乏表达3.1亚基的基因的小鼠中， 观察到缺少癫痫发作的电阻(Kim等，Mol.Cell Neurosci.18(2)：235-245 (2001))。其它的研究也涉及发生癫痫症的3.2亚基(Su等，J.Neurosci. 22：3645-3655(2002))。也有证据表明一些现有的抗惊厥药，例如乙琥 胺(ethosuximide)，通过T-型通道的阻断起作用(Gomora等，Mol. Pharmacol.60：1121-1132(2001))。
低电压-激活的钙通道在心血管系统的组织中高度表达。也存在不断增 加的大量证据，提示T-型钙通道在癌细胞中异常表达且这些通道的阻 断除了减少细胞凋亡外，还可减少细胞增殖。最近的研究也表明T- 型钙通道在乳癌细胞中的表达是依赖性的增殖状态，即所述通道在快 速复制期间是以高水平表达的，且一旦细胞处于非增殖状态，这种通 道的表达是最小的。因此，选择性地阻断钙通道进入癌细胞对于预防 肿瘤生长可以是有价值的途径(如，PCT专利公布号WO 05/086971和 WO 05/77082；Taylor等，World J.Gastroenterol.14(32)：4984-4991 (2008)；Heo等，Biorganic & Medicinal Chemistry Letters 18：3899-3901 (2008))。
T-型钙通道也可能与其它病症有关。最近的研究也已表明T-型钙通道 拮抗剂抑制高脂肪膳食-诱导的小鼠体重增加。此外，给予选择性T- 型通道拮抗剂减少体重和脂肪量，同时还增加精瘦的肌肉的量(如， Uebele等，The Journal of Clinical Investigation，119(6)：1659-1667 (2009))。T-型钙通道也可与疼痛有关(见例如：US专利公布号 2003/0086980；PCT公布号WO 03/007953和WO 04/000311)。除了心 血管疾病、癫痫症(也参见US专利公布号2006/0025397)、癌症和慢 性或急性疼痛，T-型钙通道还涉及糖尿病(US专利公布号 2003/0125269)、睡眠障碍(US专利公布号2006/0003985)、帕金森氏病 和精神病例如精神分裂症(US专利公布号2003/0087799)；活动过度的 膀胱(Sui等，British Journal of Urology International 99(2)：436-441 (2007)；US专利公布号2004/0197825)、肾病(Hayashi等，Journal of Pharmacological Sciences 99：221-227(2005))、焦虑症和酒精中毒(US 专利公布号2009/0126031)、神经保护，以及雄性节育。
N-型钙通道
动物中钙通道α1亚单位基因的调节可提供对疼痛干预的潜在治疗靶 标的重要线索。几个独立的小组(Ino等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 98：5323-5328(2001)；Kim等，Mol Cell Neurosci 18：235-245(2001)； Kim等，Neuron 31：35-45(2001)；Saegusa等，Proc.Natl.Acad.Sci. USA 97：6132-6137(2000)；和Hatakeyama等，NeuroReport 12：2423-2427(2001))已经报道了遗传改变的裸小鼠(mice null)的α1B N-型钙通道基因。这些研究表明N-型通道可以是情感障碍和疼痛的可 能靶标。
在各种动物模型中，通过鞘内给予齐考诺肽选择性阻断N-型通道显 著抑制福尔马林2期响应、热痛觉过敏、机械痛觉异常(allodynia)和术 后疼痛(如，Malmberg等，J Neurosci 14：4882-4890(1994)； Bowersox等，J Pharmacol Exp Ther 279：1243-1249(1996)；Sluka，J Pharmacol Exp Ther 287：232-237(1998)；和Wang等，Soc Neurosci Abstr 24：1626(1998))。
加巴喷丁(1-(氨基甲基)环己烷乙酸(Neurontin))是也作用于N-型通道 的抗惊厥药。虽然对N-型钙通道不是特异性的，但随后的工作已经证 实加巴喷丁在许多不同的动物疼痛模型，包括慢性缩窄性损伤 (constriction injury)(CCI)、热痛觉过敏、炎症、糖尿病性神经病、与 术后疼痛相关的静止和动态机械痛觉异常中，在预防痛觉过敏方面也 是成功的(如，Cesena等，Neurosci Lett 262：101-104(1999)；Field等， Pain 80：391-398(1999)；Cheng等，Anesthesiology 92：1126-1131 (2000)；和Nicholson，Acta Neurol Scand 101：359-371(2000))。
疾病和病症
可用本文所述的化合物治疗的示例性病症包括疼痛(如，慢性或急性疼 痛)、癫痫、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、糖尿病；癌症；睡眠障碍； 肥胖；精神病例如精神分裂症；活动过度的膀胱；肾病、神经保护和 成瘾。例如，所述病症可以是疼痛(如，神经性疼痛或术后疼痛)、癫 痫、偏头痛、帕金森氏病、抑郁症、精神分裂症、精神病或耳鸣。
本文所用的癫痫包括但不限于部分癫痫发作例如颞叶癫痫、失神癫痫 发作、全身发作和紧张性发作/阵挛发作。
本文所用的癌症包括但不限于乳腺癌、成神经细胞瘤、视网膜母细胞 瘤、神经胶质瘤、前列腺癌、食管癌、纤维肉瘤、结肠直肠癌、嗜铬 细胞瘤、肾上腺癌(adrenocarcinoma)、胰岛瘤、肺癌、黑色素瘤和卵 巢癌。
本文所用的急性疼痛包括但不限于感受伤害性疼痛和手术后疼痛。慢 性疼痛包括但不限于：外周神经性疼痛例如疱疹后神经痛、糖尿病性 神经性疼痛、神经性癌症疼痛、失败的背部-手术综合征、三叉神经痛 和幻肢痛；中枢神经性疼痛例如多发性硬化相关疼痛、帕金森氏病相 关疼痛、中风后疼痛、创伤后脊柱损伤性疼痛和痴呆症头痛；肌与骨 骼疼痛例如骨关节炎疼痛和纤维肌痛综合征；炎性疼痛例如类风湿性 关节炎和子宫内膜异位；头痛例如偏头痛、丛集性头痛、紧张性头痛 综合征、面部疼痛、由其它疾病引起的头痛；内脏疼痛例如间质性膀 胱炎、肠易激惹综合征和慢性腰痛综合征；和混合性疼痛例如下背痛、 颈和肩疼痛、烧口综合征和复杂局部疼痛综合征。
在治疗骨关节炎疼痛方面，关节灵活性也可随着根本的慢性疼痛的减 轻而改善。因此，本发明化合物治疗固有的骨关节炎疼痛的用途包括 这样的化合物改进患有骨关节炎的患者的关节灵活性的用途。
可测试本文描述的化合物对任何标准动物的疼痛模型的效力。各种模 型测试正常动物对强烈的或有毒的刺激(生理的或感受伤害性疼痛)的 敏感性。这些试验包括对热。机械或化学刺激的响应。热刺激通常涉 及热刺激(典型地在42-55℃之间变化)的应用，包括，例如：辐射热 至尾部(弹尾试验(tail flick test))、辐射热至后爪(hindpaw)的跖面(足底 测痛仪(Hargreaves test))、热板试验和后爪或尾部浸入热水中。浸入冷 水中，丙酮蒸发或冷板(cold plate)试验也可用以试验冷痛反应性。包 括机械刺激的试验典型地测量后爪对分级强度单丝弗莱毛测痛法(von Frey hairs)或对爪持续的压力刺激(如，Ugo Basile测痛仪 (analgesiometer))诱发的缩爪反射的阈值。也可测量对标准针刺响应的 持续时间。当使用化学刺激时，测量施用或注射化学刺激物(如，辣椒 素、芥子油、缓激肽、ATP、福尔马林、乙酸)对皮肤，肌肉、关节或 内脏(如，膀胱或腹膜)的反应。
此外，各种试验通过测量疼痛神经通路的周围或中枢组件的兴奋性的 变化来评价疼痛的敏感性。在这点上，外周敏感性(即，阈值的变化和 高阈值伤害感受器的反应性)可通过重复热刺激以及施用或注射敏化 的化学物(如，前列腺素、缓激肽、组胺，血清素，辣椒素或芥子油) 而诱导。中枢敏感性(即，周围疼痛纤维的活性诱导的中枢神经系统中 神经元的兴奋性的变化)可由有害的刺激(如，热)、化学刺激(如，施用 或注射化学刺激物)或感觉纤维的电激活诱导。
为测量外周炎症对疼痛敏感性的效应而开发的各种疼痛试验也可用 以研究化合物的效力(Stein等，Pharmacol.Biochem.Behav.(1988)31： 445-451；Woolf等，Neurosci.(1994)62：327-331)。另外，各种试验采 用外周神经系统的损伤，评价外周神经性疼痛。一个这样的实例是“轴 索显微外科术疼痛模型”(Watson，J.Physiol.(1973)231：41)。其它的 类似试验包括涉及脊柱节段神经结扎的SNL试验(Kim和Chung， Pain(1992)50：355)、涉及部分神经损伤的Seltzer模型(Seltzer，Pain (1990)43：205-18)、附加(spared)神经损伤(SNI)模型(Decosterd和 Woolf，Pain(2000)87：149)、慢性缩窄性损伤(CCI)模型(Bennett(1993) Muscle Nerve 16：1040)、涉及中毒性神经病例如糖尿病(链佐星模型)、 吡哆醇神经病、紫杉醇、长春新碱和其它抗肿瘤药-诱导的神经病的试 验，涉及神经局部缺血的试验、外周神经炎模型(如，周围神经 (peri-neurally)施用的CFA)、使用HSV感染的疱疹后神经痛模型，和 压制模型。
在所有以上试验中，可例如，依据行为、电生理学、神经化学或成像 技术以检测神经活性的变化来评价结果测量。
疼痛的示例性模型也在此提供的实施例中描述。
除了能够调节特定的钙通道(如，CaV 3.1、CaV 3.2或CaV 3.3)，化合物 对于hERG K+通道具有非常低的活性可能是理想的，这在心脏中得到 表达：高效能阻断该通道的化合物可引起致命的反应。见，例如， Bowlby等，“hERG(KCNH2或KV 11.1K+Channels：Screening for Cardiac Arrhythmia Risk，”Curr.Drug Metab.9(9)：965-70(2008))。因 此，对于调节钙通道活性的化合物，与对靶标的基本通道的抑制作用 比较，也可以显示hERG K+通道不受抑制或仅受到最低限度的抑制。 类似地，化合物不抑制细胞色素p450(一种需要药物解毒的酶)可能是 需要的。这样的化合物可特别用于本文描述的的方法。
本发明的化合物调节钙通道的活性；一般来说，所述调节是通道转运 钙的能力的抑制。如下所述的，特定化合物对钙通道活性的作用可以 常规测定法容易地确定，从而调节病症以便激活通道，并评价化合物 对这种激活的作用(不论是正性或负性)。示例性测定法也在实施例中 描述。
化合物库和筛选(Libraries and Screening)
本发明的化合物可采用本领域已知的方法本身分别地合成或作为组 合化合物库(combinatorial library)的成员。
本领域已知组合化合物库的合成。这样的合成的合适的描述在，例如， Wentworth等，Current Opinion in Biol.(1993)9：109-115，和Salemme 等，Structure(1997)5：319-324中发现。所述库包含携带各种取代基和 各种不饱和度，以及不同的链长的化合物。可包含少至10个，但典 型地几百个成员至几千个成员的化合物库，然后可筛选特别有效针对 钙通道，例如，N-或T-型通道的特异性亚型的化合物。此外，使用标 准筛选方案，所述库可筛选阻断另外的通道或受体例如钠通道、钾通 道等的化合物。
施行这些筛选功能的方法是本领域熟知的。这些方法也可用于分别确 定化合物激动或拮抗通道的能力。典型地，为靶标的通道在重组宿主 细胞例如人胚肾细胞的表面上表达。例如，通过所述库中的化合物置 换标记的结合配体例如通常与通道结合的配体或与通道结合的抗体 的能力，测定库的成员结合至待测通道的能力。更典型地，拮抗通道 的能力在钙、钡或其它磁导(permeant)二价阳离子的存在下测量和化合 物干扰产生的信号的能力使用标准技术测定。更详细地说，一种方法 涉及对钙通道有影响的放射性同位素标记试剂的结合，平衡结合测量 的随后的分析包括，但不限于，结合率(on rates)、分解率(off rates)、 Kd值和其它分子的竞争性结合。
其它方法包括筛选经电生理学测定的化合物的效果，从而用微电极刺 穿各细胞并记录在施用本化合物之前和之后通过钙通道的电流。
另一种方法，高-通过量分光光度测定法，采用用对细胞内钙浓度敏感 的荧光染料加载细胞系，随后检查化合物对通过氯化钾去极化的能力 或改变细胞内钙水平的其它方法的作用。
如上所述，与通过促进通道失活或作为静止通道阻断剂起作用的那些 阻断剂相反，一种更确定的测定法可用以鉴别作为开放通道阻断剂起 作用的钙流抑制剂。区别这些类型的抑制作用的方法更特别在以下的 实施例中描述。一般来说，当在候选化合物的存在和不存在下对 约-100mV背景静电位施加去极化时，通过测量峰电流的水平评价开 放-通道阻断剂。成功的开放-通道阻断剂将减少观察到的峰电流并可 加快该电流的衰减。使通道阻断剂失活的化合物通常通过它们转移对 更负电位失活的电压依赖性的能力来测定。这也反映了它们在更去极 化的维持电位(如，-70mV)上和在更高频率的刺激，例如，0.2Hz对 0.03Hz下减少峰电流的能力。最后，静止通道阻断剂在施用药物后首 次去极化(在去极化期间无另外的抑制作用)期间将减少峰电流幅度。 因此，式(I)化合物的化合物库，例如可用于鉴别具有所需活性的组合 的化合物，所述活性包括针对至少一种类型的钙通道的活性。例如， 库可用于鉴别对N和/或T-型钙通道具有合适的活性水平，而对HERG K+通道具有最小活性的化合物。
应用和给药
药用组合物
为用作人和动物患者的治疗剂，本发明的化合物可被配制为药用或兽 药组合物。取决于待治疗的患者、给药方式，和所需治疗的类型--如， 防止、预防或治疗--所述化合物可以与这些参数一致的方式配制。这 样的技术的概述在Remington：The Science and Practice ofPharmacy， 第21版，Lippincott Williams & Wilkins，(2005)；和Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，eds.J.Swarbrick和J.C.Boylan， 1988-1999，Marcel Dekker，New York中可发现，这些文献均通过引 用结合到本文中。
本文描述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物 1-780的任一化合物)可以以组合物总重量的总共1-95％重量的量存 在。组合物可以以适合于关节内、口服、胃肠外(如，静脉内、肌内)、 直肠、皮肤、皮下、局部、经皮、舌下、经鼻、阴道、囊内、尿道内、 鞘内、硬膜外、耳或眼给药或通过注射、吸入或直接与鼻接触、泌尿 生殖道、胃肠道、生殖道或口腔粘膜的剂型提供。因此，药用组合物 可以呈例如，片剂、胶囊、丸剂、散剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶 液剂、凝胶剂包括水凝胶剂、膏剂、软膏剂、霜剂、硬膏剂、敷剂、 渗透传递装置、栓剂、灌肠剂、注射剂、植入物、喷雾剂、适合于离 子电渗(inotophoretic)传递的制剂或气溶胶的形式。组合物可依据常规 制药实践配制。
一般来说，为了用于治疗，本文描述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任 一化合物或表1中的化合物1-780的任一化合物)可以单独使用，作为 两种或更多种化合物的混合物或与其它药物组合使用。与本文所述的 化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780的任 一化合物)联合的其它药物的实例将包括用于治疗相同的适应症的药 物。例如，在疼痛的治疗中，化合物可以与另一种镇痛剂例如NSAID 或选择性抑制COX-2的化合物或阿片类或辅助镇痛剂例如抗抑郁药 组合。与本文所述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中 的化合物1-780的任一化合物)组合的强效药物的另一实例将包括用于 治疗不同的但是有联系的或相关的症状或适应症的药物。取决于给药 模式，所述化合物将被配制为合适的组合物以便容易递药。复合治疗 的各化合物可以以本领域已知的各种方式配制。例如，复合治疗第一 种和第二种药物可以一起配制或分开配制。理想地，将第一种和第二 种药物配制在一起供同时或近乎同时给予各种药物。
本发明的化合物可以被制备并用作药用组合物，其包含有效量的本文 描述的化合物(如，式(I)-(XXVII)的任一化合物或表1中的化合物1-780 的任一化合物)和药学上可接受的载体或赋形剂，如本领域所熟知的。 在一些实施方案中，组合物包含至少两种不同的药学上可接受的赋形 剂或载体。
可以适合于系统给药或局部或部位给药的方式制备制剂。系统制剂包 括被设计用于注射(如，肌内，静脉内或皮下注射)或可以配制为用于 经皮、经粘液或口服给药的那些制剂。制剂将一般包含稀释剂以及， 在某些情况下，包含辅助剂。缓冲剂、防腐剂等。化合物也可以脂质 体组合物或作为微乳剂给予。
对于注射，制剂可以以作为流体溶液或混悬液的常规形式或作为适合 于在注射前配制成在液体中的溶液或混悬液的固体形式或作为乳剂 形式制备。合适的赋形剂包括，例如水、盐水、葡萄糖、甘油等。这 样的组合物也可包含一定量的无毒辅助物质例如湿润剂或乳化剂、pH 缓冲剂等，例如，乙酸钠、脱水山梨醇单月桂酸酯等。
也设计了药物的各种持续释放系统。见，例如，美国专利号5,624,677， 其通过引用结合到本文中。
系统给药也可包括相对的非侵害方法例如使用栓剂、经皮贴剂、经粘 膜传递和鼻内给药。口服给药也适合于本发明的化合物。合适的形式 包括糖浆剂、胶囊和片剂，如本领域所理解的。
为给予动物或人患者，本发明的化合物的剂量可以是例如， 0.01-50mg/kg(如，0.01-15mg/kg或0.1-10mg/kg)。例如，剂量可以 是10-30mg/kg。
如本文描述的复合治疗的各化合物可以以本领域已知的各种方式配 制。例如，复合治疗第一种和第二种药物可以一起配制或分开配制。 单独或分别配制的药物可以包装在一起作为药剂盒。非限制性实例包 括，但不限于含有例如，两种丸剂、一种丸剂和一种散剂、一种栓剂 和一种在管制瓶中的液体剂、两种局部用霜剂等的药剂盒。药剂盒可 包含任选的帮助将单位剂量给予患者，例如用于重新构成的粉剂形式 的管制瓶、用于注射的管针，定制的IV递药系统，吸入器等组件。 此外，单位剂量药剂盒可包含用于配制和给予组合物的使用说明书。 药剂盒可配制为用于某一患者的单次使用的单位剂量、用于特定患者 的多个剂量(以恒量剂量或其中各化合物的剂量可随着治疗进展的效 力而变化)；或药剂盒可包含适合于给予多个患者的多个剂量(“成批包 装”)。药剂盒组件可以装配在纸板盒、泡罩包装、瓶装、管口瓶(tubes) 等中。
口服使用的制剂包括片剂，其包含与非-毒性药学上可接受的赋形剂混 合的活性成分。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂或填充剂(如、 蔗糖、山梨醇、糖、甘露醇、微晶纤维素、淀粉包括马铃薯淀粉、碳 酸钙、氯化钠、乳糖、磷酸钙、硫酸钙或磷酸钠)；成粒剂和崩解剂(如、 纤维素衍生物包括微晶纤维素、淀粉包括马铃薯淀粉、交联羧甲基纤 维素钠、藻酸盐或藻酸)；粘合剂(如、蔗糖、葡萄糖、山梨醇、阿拉 伯胶、藻酸、藻酸钠、明胶、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、硅酸 铝镁、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维 素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)；和润滑剂、助流剂和抗结合剂(如、 硬脂酸镁、硬脂酸锌、硬脂酸、二氧化硅、氢化植物油或滑石粉)。其 它的药学上可接受的赋形剂可以是着色剂、矫味剂、增塑剂、湿润剂、 缓冲剂等。
两种或多种化合物可以以片剂、胶囊或其它媒介物混合在一起或可以 被分配。在一个实施例中，第一种化合物被包含在片剂的内部，而第 二种化合物在外部，以致第二种化合物的基本部分在第一种化合物释 放之前被释放。
口服使用的制剂也可作为可咀嚼片或作为硬明胶胶囊剂提供，其中活 性成分与惰性固体稀释剂(如，马铃薯淀粉、乳糖、微晶纤维素、碳酸 钙、磷酸钙或高岭土)混合或作为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油 性介质，例如，花生油、液体石蜡或橄榄油混合。散剂、颗粒剂和 丸剂可使用上文在片剂和胶囊下提及的成分，以常规方式，使用例如 混合器、流化床设备或喷雾干燥设备制备。
溶解或扩散控制释放可通过对化合物的片剂、胶囊、丸剂(pellet)或颗 粒制剂适当地包衣物或通过将所述化合物掺入合适的基质中来实现。 控制释放包衣可包括一种或多种上述的包衣物质和/或，例如虫胶、蜂 蜡、glycowax、蓖麻蜡、巴西棕榈蜡、硬脂醇、单硬脂酸甘油酯、二 硬脂酸甘油酯、棕榈基硬脂酸甘油酯(glycerol palmitostearate)、乙基纤 维素、丙烯酸树脂、dl-聚乳酸、乙酸丁酸纤维素、聚氯乙烯、聚乙烯 乙酸酯、乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲 酯、甲基丙烯酸2-羟基酯、甲基丙烯酸酯水凝胶、1，3-丁二醇、乙二 醇甲基丙烯酸酯和/或聚乙二醇。在控制释放基质制剂中，基质物质也 可包括，例如，水合甲基纤维素，巴西棕榈蜡和硬脂醇、聚羰乙烯934， 硅酮，甘油基三硬脂酸酯，丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯，聚氯乙烯， 聚乙烯和/或卤化碳氟化合物。
其中可掺入本发明的化合物和组合物的用于口服给予的液体剂型包 括水性溶液、适当调味的糖浆剂、水性或油性混悬剂并用食用油调味 的乳剂，所述食用油有例如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油，以及 酏剂和类似的药用媒介物。一般来说，当给予人时，本发明的组合的 任一化合物的口服剂量将取决于化合物的性质，并可容易地由本领域 技术人员确定。典型地，这样的剂量通常为约0.001mg-2000mg每日， 理想地为约1mg-1000mg每日，且更理想地为约5mg-500mg每日。 至多200mg每日的剂量可以是必要的。如本文描述的，复合治疗的 各种药物的给予可独立地为每日1-4次，持续1天至1年，并且甚至 可持续患者终生。慢性、长期给药可以是适合的。
实施例
本发明化合物的合成
以下反应流程和实施例意欲举例说明代表性的编号化合物的合成。因 此，以下实施例意欲举例说明，但不限止本发明。另外的未特别举例 的化合物可使用常规方法结合本文以下描述的方法合成。
粗制有机混合物的纯化通过高通量有机纯化实验室(High Throughput Organic Purification(HiTOP)Laboratory)使用反相制备型HPLC进行。 根据目标物的性质，采用两条途径；高pH途径或低pH途径。采用 分析度盘层析(Analytical scale chromatography)确定用于每个实施例的 所需制备方法的类型以及进行最终的纯度检验和对收集的最终物质 进行产物确认。分析方法不在此处讨论，但都是本领域已知的。
实施例1：通过制备N-叔丁基-2-氯代乙酰胺(2a)举例说明合成2-氯代 乙酰胺(2a-f)的通用方法
于0℃，将叔丁基胺(5g，68.3mmol)和DIPEA(23.8mL，136.7mmol) 在DCM(200mL)中搅拌。滴加入2-氯代乙酰氯(6.53mL，82.03mmol)， 将反应物搅拌16小时，使升温至室温。真空浓缩该混合物，使残留 物溶于EtOAc。有机层用2N HCl洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩， 定量地得到N-叔丁基-2-氯代乙酰胺(3)。该物质无需进一步纯化而使 用。如需要时使用自动化快速层析和适宜的有机洗脱液纯化2-氯代乙 酰胺(2)。
除了化合物(2a-f)外，还使用可市售获得的2-氯代乙酰胺。
实施例2：合成N-(2-氯代乙基)新戊酰胺(pivalamide)(5)的方法
于室温下，将2-氯代乙胺盐酸盐(3)(8.50g，73.3mmol)、TEA(25.5 mL，183mmol)和新戊酰氯(4)(9.02mL，73.3mmol)在DMF(250mL) 中搅拌16小时。真空浓缩反应物，使残留物溶于EtOAc，用饱和 NaHCO3水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，并减压除去溶剂。粗物质经自 动化快速层析法纯化(50％EtOAc/PE)，得到N-(2-氯代乙基)新戊酰胺 (5)(3.71g，31％)；1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.21(s，9H)，3.62(m，4 H)，6.08(br s，1H)。
实施例3：合成3-(甲基磺酰基)-5-(三氟甲基)吡啶甲酸(7)的方法
于110℃，将3-氯代-5-(三氟甲基)吡啶甲酸(6)(2.11g，10.0mmol)， K2CO3(1.38g，10.0mmol)和NaSMe(1.20g，25.0mmol)在DMF(15 mL)中搅拌16小时。真空浓缩反应物，并使残留物溶于MeOH(80mL) 和H2O(80mL)中。加入Oxone单过硫酸盐(30g，49mmol)，于室温 下搅拌该反应物16小时。通过过滤除去固体，并用10％NaOH碱化 滤液30min。真空除去MeOH，用6N HCl将含水部分酸化至pH 1 并用EtOAc(3×80mL)提取。干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩，残留 物从EtOAc/己烷中重结晶(用1eq.DMF)，得到含一个DMF分子的 3-(甲基磺酰基)-5-(三氟甲基)吡啶甲酸(1.70g，51％)；1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ2.88(s，3H，DMF)，3.01(s，3H，DMF)，3.45(s，3H)，8.00 (s，1H，DMF)，8.73(s，1H)，9.22(s，1H).
实施例4：合成2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)烟酸(9)的方法
以类似的方式，使用2-氯代-6-(三氟甲基)烟酸(8)(5.35g，25.3 mmol)，制备3-(甲基磺酰基)-5-(三氟甲基)吡啶甲酸(9)，得到所需产物 (5.97g，69％)(含1eq DMF)；1H NMR(300MHz，CD3OD)δ2.88(s， 3H，DMF)，3.01(s，3H，DMF)，3.40(s，3H)，8.00(s，1H，DMF)，8.22(d， 1H，J＝7.5Hz)，8.49(d，1H，J＝7.5Hz).
实施例5：合成2-(异丙基磺酰基)-6-(三氟甲基)烟酸(10)的方法
以类似的方式，使用3-氯代-5-(三氟甲基)吡啶甲酸(6)(1.50g，7.09 mmol)，制备2-(异丙基磺酰基)-6-(三氟甲基)烟酸(10)，得到产物(1.4g， 62％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.06(s，1H)，8.56(s，1H)，4.09(m， 1H)，1.31(d，6H，J＝6.8Hz).
实施例6：合成2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)异烟酸(13)的方法
A.制备2-溴-4-碘-6-(三氟甲基)吡啶(12)
于-85℃、氩气下，将二异丙基胺(2.83g，28.0mmol)在无水THF(60mL) 中搅拌。滴加入nBuLi(1.6M在己烷中，17.5mL，28mmol)，并将反 应物搅拌1小时。滴加入在无水THF(6mL)中的2-溴-6-(三氟甲基)吡 啶(11)(3.00g，13.3mmol)，并将反应物搅拌2小时。分批加入I2(3.37 g，13.3mmol)。将反应物搅拌30分钟，用H2O猝灭并用EtOAc(3×30 mL)提取。干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩并经自动化柱层析纯化 (EtOAc/PE，1∶8)，得到2-溴-4-碘-6-(三氟甲基)吡啶(2.3g，49％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.98(s，1H)，8.03(s，1H).
B.制备2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)异烟酸(13)
于-10℃、氩气下，将2-溴-4-碘-6-(三氟甲基)吡啶(12)(2.70g，7.67 mmol)在无水THF(30mL)中搅拌。加入iPrMgCl(2.0M，THF，4.5mL， 9.0mmol)，于0℃将该混合物搅拌30分钟。将CO2鼓泡通入反应物 中，并继续搅拌1.5小时。然后使反应物升温至室温。真空浓缩反应 物，溶于DMF(20mL)，并于100℃与NaSMe(0.90g，19mmol)一起 搅拌2小时。真空浓缩反应物，溶于MeOH(50mL)和H2O(50mL)(含 oxone单过硫酸盐(30g，49mmol))，并于室温下搅拌3小时。过滤反 应物，用10％NaOH碱化滤液30min，和真空除去MeOH。含水残留 物用6N HCl酸化并用EtOAc(3×50mL)提取。干燥(Na2SO4)有机物， 真空浓缩，在1eq.DMF的存在下，使残留物从EtOAc/己烷中重结晶， 得到2-(甲基磺酰基)-6-(三氟甲基)异烟酸(13)(1.70g，51％)。1H NMR (300MHz，CD3OD)δ2.88(s，3H，DMF)，3.01(s，3H，DMF)，3.34(s，3H)， 8.00(s，1H，DMF)，8.52(s，1H)，8.73(s，1H).
实施例7：合成2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸(18)的方法
A.制备2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯硫基)丙酸乙基酯(16)
将3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(25g，140.3mmol)、2-溴-2-甲基丙酸乙基 酯(15)(27.4g，140.3mmol)和K2CO3(24.2g，175.4mmol)在MeCN (400mL)中回流加热16小时。冷却反应物，过滤，真空浓缩，残留物 经柱层析纯化(PE/DCM(80/20))，得到2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯硫基) 丙酸乙基酯(16)，为澄清的油(34.9g，85％)。1H NMR(300mHz-CH3Cl) δ1.49(s，6H)，3.65(s，3H)，7.45(t，1H，J＝7.74Hz)，7.63(m，2H)， 7.07(s，1H).
B.制备2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸乙基酯(17)
于室温下，将2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯硫基)丙酸乙基酯(16)(34.9g， 119.4mmol)和Oxone(220.2g，358.2mmol)在H2O/MeOH(330 mL/550mL)中搅拌72小时。过滤反应物，真空除去MeOH，含水层 用EtOAc提取。干燥(Na2SO4)有机物并真空浓缩，得到2-甲基-2-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)丙酸乙基酯(17)，为澄清无色油，其无须进一步纯 化而使用(38.4g，100％)。1H NMR(300mHz-CH3Cl)δ1.63(s，6H)， 3.70(s，3H)，7.73(t，1H，J＝7.86Hz)，7.95(d，1H，J＝7.83Hz)，8.06(d， 1H，J＝7.98Hz)，8.11(s，1H).
C.制备2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸(18)
于室温下，将2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸乙基酯(17) (20g，61.7mmol)和LiOH·H2O(3.9g，92.5mmol)在THF/MeOH/H2O (175mL，3/1/1)中搅拌16小时。真空浓缩反应物，使残留物溶于 H2O，用6M HCl酸化至pH 2，用EtOAc提取产物。干燥(Na2SO4)有 机物并真空浓缩，得到2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸(18) (17.1g，93％)，其无须进一步纯化而使用。1H NMR(300mHz-CH3Cl) δ1.65(s，6H)，7.74(t，1H，J＝7.71Hz)，7.95(d，1H，J＝7.83Hz)，8.12 (d，1H，J＝8.04Hz)，8.16(s，1H).
实施例8：制备6-苯氧基吡啶-3-胺(22)的通用方法
通过6-(3-氯代-4-氟代苯氧基)吡啶-3-胺(25)的方法举例说明
A.制备2-(3-氯代-4-氟代苯氧基)-5-硝基吡啶(24)
将2-氯代-5-硝基吡啶(19)(1.0g，6,31mmol)、3-氯代-4-氟代苯酚(23) (0.92g，6.31mmol)和NaH(60％在矿物油中的分散液)(250mg，6.9 mmol)在氩气下，在DMF(20mL)回流下搅拌3小时。将反应物用H2O 猝灭，用EtOAc(3x 10mL)提取。干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩， 残留物经自动化快速层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到2-(3-氯代-4-氟 代苯氧基)-5-硝基吡啶(24)(0.92g.54％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ 7.04-7.10(m，2H)，7.19-7.25(m，2H)，8.52(dd，1H，J＝2.79，9.00Hz)， 9.03(d，1H，J＝2.55Hz).
B.制备6-(3-氯代-4-氟代苯氧基)吡啶-3-胺(25)
将2-(3-氯代-4-氟代苯氧基)-5-硝基吡啶(24)(0.92g，3.4mmol)和 SnCl2(3.1g，13.73mmol)在MeOH(15mL)中回流下搅拌16小时。真 空浓缩反应物并于室温下在NaHCO3(sat)/CH2Cl2(1∶1)中搅拌45min。 生成的悬浮液通过Celite(硅藻土)过滤，且使滤液分配于DCM和H2O 之间。干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩，残留物经自动化快速层析法 纯化(5％EtOAc/PE)，得到6-(3-氯代-4-氟代苯氧基)吡啶-3-胺(25)(0.43 g，82％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ6.79(d，1H，J＝8.58Hz)，6.97(m， 1H)，7.08(m，3H)，7.70(d，1H，J＝2.88Hz).LCMS m/z 238.8(对 C11H8ClFN2O的计算值为238.0).
实施例9：合成(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(30)的方法
A.制备(4-羟基环己基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(27)
于室温下，将硼氢化钠(60mg，1.5mmol)加入到(4-氧代环己基)甲基 氨基甲酸叔丁基酯(26)(310mg，1.4mmol)的MeOH(10mL)溶液中。 将反应物在氩气下搅拌30分钟，真空浓缩，使残留物分配于DCM和 H2O之间。干燥(MgSO4)有机物并真空浓缩，得到(4-羟基环己基)甲基 氨基甲酸叔丁基酯(27)(270mg，84％)。产物无须进一步纯化或光谱证 实而使用。
B.制备甲烷磺酸4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)环己基酯(28)
于室温下，将(4-羟基环己基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(27)(270mg，1.17 mmol)和TEA(391μL，2.8mmol)在DCM中搅拌。加入甲烷磺酰氯(110 μL，1.4mmol)，并将反应物于室温下搅拌16小时。真空浓缩反应物， 粗物质经自动化快速层析法纯化(35％EtOAc/PE)，得到甲烷磺酸4-((叔 丁氧基羰基氨基)甲基)环己基酯(28)(200mg，58％)；1H NMR(300mHz， CDCl3)δ1.50(m，14H)，1.86(d，2H，J＝13.1Hz)，2.20(m，3H)，2.98 (m，5H)，4.59(m，2H).).
C.制备(4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(29)
将甲烷磺酸4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)环己基酯(28)(200mg，0.67 mmol)、3-(三氟甲基)苯硫酚(9)(142mg，0.67mmol)和K2CO3(110 mg，0.8mmol)在MeCN中回流加热16小时。冷却反应物，真空浓缩， 并分配于DCM和H2O之间。分离有机物，干燥(MgSO4)，真空浓缩， 残留物经自动化快速层析法纯化(10％EtOAC/PE)，得到(4-(3-(三氟甲 基)苯硫基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(29)(200mg，77％)；1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.51(m，19H)，1.79(m，5H)，3.03(m，3H)， 3.60(m，1H)，4.68(m，2H)，7.39(m，2H)，7.51(d，2H，J＝7.17Hz)， 7.58(s，1H).
D.制备(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(30)
于室温下，将(4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁基酯 (29)(200mg，0.52mmol)和Oxone(1g，1.6mmol)在MeOH/H2O (15mL，3/2vv)中搅拌16小时。过滤反应物，真空浓缩滤液，使残留 物分配于DCM和H2O之间。有机物用饱和NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4) 并真空浓缩，得到(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(30)(40 mg，24％)，其无须进一步纯化而使用。
实施例10：合成顺式(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺盐酸 盐(35)的方法
A.制备反式甲烷磺酸4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)环己基酯(32)
于室温下，将反式(4-羟基环己基)甲基氨基甲酸叔丁酯(31)(1.5g，6.6 mmol)和TEA(2.8mL，20mmol)在DCM中搅拌(25mL)。加入甲烷磺 酰氯(621μL，8.0mmol)，并将反应物于室温下搅拌16小时。真空浓 缩反应物，粗物质经自动化快速层析法纯化(20％EtOAc/PE)，得到反 式甲烷磺酸4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)环己基酯(32)(1.77g，91％)..
B.制备顺式(4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁酯(33)
将反式甲烷磺酸4-((叔丁氧基羰基氨基)甲基)环己基酯(32)(1.77g，6 mmol)、3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(1.24g，6.0mmol)和K2CO3(1g，7.2 mmol)在MeCN中回流加热16小时。冷却反应物和过滤。真空浓缩滤 液，粗物质经自动化快速层析法纯化(5％EtOAC/PE)，得到顺式 (4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁基酯(33)(1.56g， 67％)。1HNMR(300mHz，CDCl3)δ1.65(m，20H)，1.81(m，5H)，2.07 (m，2H)，3.05(m，3H)，3.61(m，1H)，4.62(bs，1H)，5.66(s，1H)，7.45 (m，2H)，7.54(d，2H)，7.60(s，1H).
C.制备顺式(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁 基酯(34)
于室温下，将顺式(4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基)甲基氨基甲酸叔丁 基酯(33)(1.56g，4.0mmol)和mCPBA(77％，2.1g，12.0mmol)在DCM 中(50mL)搅拌16小时。过滤反应物，加入额外的DCM(50mL)，有 机物用2M NaOH、H2O和饱和NaCl溶液顺序洗涤。干燥(MgSO4)有 机物并真空浓缩，得到顺式(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己基)甲基 氨基甲酸叔丁基酯(34)(1.27g，82％)；1H NMR(300mHz，CDCl3)δ 1.53(m，21H)，1.77(m，5H)，3.06(m，5H)，4.58(bs，1H)，7.74(t，1H，J ＝7.77Hz)，7.93(d，1H，J＝7.65Hz)，8.08(d，1H，J＝8.04Hz)，8.15(s， 1H)。产物无须进一步纯化而使用。
D.制备顺式-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-甲胺盐酸盐(35)
于室温下，将顺式(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲基氨基甲酸 叔丁酯(34)(1.27g，3.3mmol)在EtOAc(30mL)搅拌。使气态HCl鼓 泡通入该溶液1分钟，然后将反应物于室温下搅拌20分钟。真空除 去溶剂，得到顺式(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-甲胺盐酸盐(35) (1.18g，100％)。产物经随后的衍生化证实和无须进一步纯化而使用。
实施例11：合成(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(44) 的方法
A.制备4-(甲基磺酰基氧基)环己烷羧酸乙基酯(37)
于室温下，将4-羟基环己烷羧酸乙基酯(36)(顺式和反式的混合物)(10 g，58mmol)和TEA(16.1mL，116mmol)在THF(150mL)中搅拌。加 入甲烷磺酰氯(4.97mL，64mmol)，并将反应物于室温下搅拌30分钟。 通过过滤除去沉淀，用额外的THF(80mL)洗涤，真空浓缩滤液。使 残留物溶于DCM(150mL)并用饱和NH4Cl溶液和饱和NaHCO3溶液 顺序洗涤。分离有机物，干燥(MgSO4)，并真空浓缩，得到4-(甲基磺 酰基氧基)环己烷羧酸乙基酯(37)(14.5g，100％)。1H NMR(300mHz， CDCl3)δ1.23(t，3H，J＝14.3Hz)，1.98(m，10H)，3.0(s，3H)，4.10(q，2 H，J＝7.56Hz)，4.60(m，0.5H)，4.90(m，0.5H)。产物无须进一步纯化 而使用。
B.制备4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己烷羧酸乙基酯(38)
将4-(甲基磺酰基氧基)环己烷羧酸乙基酯(37)(14.5g，58mmol)、3-(三 氟甲基)苯硫酚(14)(10.3g，58.0mmol)和TEA(16mL，116mmol)在 MeCN中回流加热16小时。冷却反应物并真空浓缩。使残留物溶于 DCM(150mL)并用饱和NH4Cl溶液和饱和NaHCO3溶液顺序洗涤。 分离有机物，干燥(MgSO4)，真空浓缩，粗物质经自动化快速层析法 纯化(5％EtOAc/PE)，得到4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己烷羧酸乙基酯 (38)(8.24g，43％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.24(m，3H)，1.44(m， 2H)，1.73(m，3H)，2.05(m，3H)，2.26(m，0.5H)，2.44(m，0.5H)，3.08 (m，0.5H)，3.44(m，0.5H)，4.12(m，2H).
C.制备1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己烷羧酸乙基酯(39)
于-78℃、氩气下，将4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己烷羧酸4-乙基酯(38) (8.24g，24.8mmol)在无水THF(100mL)中搅拌。滴加入LDA(2.0M 在庚烷/THF/乙基苯中的溶液；37mL，74mmol)，并将该溶液搅拌30 分钟。滴加入在无水THF(20mL)中的碘代甲烷(3.1mL，50mmol)， 并将反应物于-78℃搅拌1小时，然后使升温至室温。将反应物用H2O 猝灭，用Et2O提取，分离有机物，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。粗产 物经自动化快速层析法纯化(3％EtOAc/PE)，得到1-甲基-4-(3-(三氟甲 基)苯硫基)环己烷羧酸乙基酯(39)(6.14g，72％)。1H NMR(300mHz， CDCl3)δ1.13(s，3H)，1.15(t，3H，J＝4.32Hz)，1.35(q，2H，J＝10.53 Hz)，1.85(d，2H，J＝5.61Hz)，2.19(d，2H，J＝14.1Hz)，2.99(m，1H)， 4.07(q，2H，J＝7.14Hz)，7.34(m，2H)，7.47(d，1H，J＝7.53Hz)，7.54 (s，1H).
D.制备1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷羧酸乙基酯(40)
于室温下，将1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己烷羧酸乙基酯(39) (6.14g，17.7mmol)和mCPBA(77％，9.4g，53.2mmol)在DCM中搅 拌(50mL)16小时。通过过滤除去生成的沉淀，滤液用10％NaOH溶 液和H2O顺序洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩，得到1-甲基-4-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)环己烷羧酸乙基酯(40)(5.9g，88％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)δ1.10(m，9H)，1.42(q，2H，J＝13.23Hz)，1.91(d，2H，J ＝11.46Hz)，2.27(d，2H，J＝13.32Hz)，2.84(m，1H)，4.03(q，2H，J＝ 7.08Hz)，7.66(t，1H，J＝7.83Hz)，7.85(d，1H，J＝7.77Hz)，7.98(d，1 H，J＝7.83Hz)，8.05(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
E.制备(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲醇(41)
于室温、氩气下，将1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷羧酸乙 基酯(40)(2.0g，5.3mmol)在无水THF(30mL)中搅拌。加入LiAlH4(239mg，6.3mmol)，并将反应物搅拌30分钟。采用滴加入的10％ NaOH使反应猝灭，和过滤，用额外的THF洗涤。真空浓缩滤液。使 残留物溶于EtOAc，用NH4Cl饱和溶液，NaHCO3饱和溶液和H2O顺 序洗涤，和干燥(MgSO4)。真空浓缩有机物，得到(1-甲基-4-(3-(三氟 甲基)苯基磺酰基)环己基)甲醇(41)。(1.69g，95％)。1H NMR(300mHz， CDCl3)δ0.92(s，3H)，1.14(m，3H)，1.28(t，1H，J＝5.52Hz)，1.74(m， 10H)，2.92(m，1H)，3.47(d，2H，J＝5.40Hz)，3.75(m，1H)，7.74(t，1 H，J＝7.83Hz)，7.93(d，1H，J＝7.77Hz)，8.08(d，1H，J＝7.83)，8.15(s， 1H)。产物无须进一步纯化而使用。
制备甲烷-磺酸(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲基酯(42)
于室温下，将1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲醇(41) (1.69g，5.0mmol)和TEA(2.1mL，15mmol)在THF(30mL)中搅拌。 加入甲烷磺酰氯(466μL，6mmol)并搅拌30分钟。通过过滤除去生成 的沉淀，真空浓缩滤液，溶于EtOAc并用NH4Cl饱和溶液、NaHCO3饱和溶液和H2O顺序洗涤。干燥(MgSO4)有机物并真空浓缩，得到甲 烷磺酸(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲基酯(42)(2.07 g，100％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ0.92(s，3H)，1.17(m，3H)，1.32 (m，6H)，1.70(m，11H)，2.72(s，1H)，2.97(m，5H)，3.81(t，2H，J＝ 6.03Hz)，3.96(s，2H)，7.68(t，1H，J＝7.83Hz)，7.87(d，1H，J＝7.77)， 8.01(d，1H，J＝7.83Hz)，8.07(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
G.制备1-(4-(叠氮基甲基)-4-甲基环己基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(43)
将甲烷磺酸(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲基酯(42) (2.07g，5.0mmol)、NaN3(1.63g，25mmol)和TEA(2.1mL，15mmol) 在DMF(15mL)中回流加热16小时。冷却反应物，真空浓缩，溶于 EtOAc并用H2O、NH4Cl饱和溶液和NaHCO3饱和溶液顺序洗涤。干 燥(MgSO4)有机物，真空浓缩，粗物质经自动化快速层析法纯化(10％ EtOAc/PE)，得到1-(4-(叠氮基甲基)-4-甲基环己基磺酰基)-3-(三氟甲基) 苯(43)(1.11g，61％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ0.94(s，3H)，1.20(m， 3H)，1.75(m，7H)，2.05(s，1H)，2.90(m，1H)，3.26(s，2H)，7.75(t，1H， J＝7.80Hz)，7.94(d，1H，J＝7.77Hz)，8.08(d，1H，J＝7.83Hz)，8.15(s， 1H).
H.制备(1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(44)
使1-(4-(叠氮基甲基)-4-甲基环己基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(43) (1.11g，3.1mmol)和Pd(OH)2(100mg，cat)溶于EtOH(20mL)并置于 巴尔氢化器(parr hydrogenator)中。于室温下，将反应物在H2(50PSI) 搅动1h。通过硅藻土过滤反应物，和真空浓缩滤液，得到(1-甲基 -4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(44)(1.01g，97％)，其无须 进一步纯化而使用。
实施例12：合成1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺盐酸盐(46) 的方法
A.制备1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷羧酸(45)
于室温下，将1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷羧酸乙酯(40) (3.1g，8.2mmol)和LiOH·H2O(447mg，10.7mmol)在 THF/H2O/MeOH(3/3/1，20ml)中搅拌16小时。加入额外的 LiOH·H2O(1.3g，31mmol)，将反应物回流加热16小时。真空除去有 机物，反应物用H2O稀释，用浓HCl酸化至pH 1，并用EtOAc提取。 干燥(Na2SO4)有机物并真空浓缩，得到1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺 酰基)环己烷羧酸(45)；1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.02(m，6H)，1.63 (m，6H)，2.18(m，2H)，2.74(t，1H，J＝11.9Hz)，7.56(t，1H，J＝7.8Hz)， 7.76(d，1H，J＝8.04Hz)，7.90(d，1H，J＝7.68Hz)，7.97(s，1H).
B.制备1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺盐酸盐(46)
于室温、氩气下，将1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷羧酸(45) (1.60g，4.57mmol)和DMF(1滴，cat.)在DCM(25mL)中搅拌。加入 (COCl)2(2.5mL，过量)，并将反应物加热至回流1小时。真空浓缩反 应物和在高真空下干燥2小时。于0℃、氩气下，将残留物在苯(10mL) 中搅拌，缓慢加入在水(7mL)中的NaN3(0.59g，9.1mmol)，使反应 物升温至室温和搅拌2小时。分离有机物，用饱和NaHCO3溶液洗涤， 干燥(Na2SO4)，然后加热至65℃2小时。将反应物用6M HCl(30mL) 处理并加热至90℃16小时。然后将反应物真空浓缩，得到1-甲基 -4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺盐酸盐(46)(1.37g，84％)。1H NMR (300mHz，CDCl3)δ1.35(s，1H)，1.69(m，2H)，1.85(m，2H)，2.02(m，4 H)，3.37(m，1H)，7.92(t，1H，J＝7.92Hz)，8.11(d，1H，J＝7.70Hz)， 8.21(m，2H)。产物无须进一步纯化而使用。
实施例13：合成(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲 胺(51)的方法
A.制备4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷-羧酸乙基酯 (47)
于-78℃、氩气下，将1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己烷羧酸乙基 酯(40)(2.5g，6.6mmol)在无水THF(30mL)中搅拌。滴加入nBuLi(1.6 M在己烷中的溶液)(5mL，7.9mmol)，并将反应物搅拌30分钟。滴 加入在无水THF(20mL)中的N-氟代苯磺酰亚胺(NFSI)(2.48g，7.9 mmol)。然后将反应物于-78℃搅拌30分钟，接着经1小时使温热至 室温。冷却反应物至0℃，用NH4Cl饱和溶液猝灭，并用EtOAc提取。 干燥(MgSO4)有机物，真空浓缩，残留物经自动化快速层析法纯化 (10％EtOac/PE)，得到4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷 羧酸乙基酯(47)(1.17g，45％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.27(m，7 H)，2.08(m，10H)，4.14(q，2H，J＝4.71Hz)，7.77(t，1H，J＝7.86Hz)， 7.98(d，1H，J＝7.83Hz)，8.13(d，1H，J＝7.83Hz)，8.19(s，1H).
B.制备(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲醇(48) 于室温、氩气下，将4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己烷 羧酸乙基酯(47)(1.17g，3.0mmol)在无水THF(20mL)中搅拌。加入 LiAlH4(133mg，3.5mmol)，并将反应物搅拌30分钟。用滴加入的10％ NaOH使反应物猝灭，然后过滤，用额外的THF洗涤。真空浓缩滤液。 使残留物溶于EtOAc，用NH4Cl饱和溶液、NaHCO3饱和溶液和H2O 顺序洗涤，和干燥(MgSO4)。有机物经真空浓缩，得到(4-氟-1-甲基 -4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲醇(48)(0.93g，88％)。1H NMR (300mHz，CDCl3)δ1.00(s，3H)，1.26(m，1H)，1.55(m，7H)，1.90(m，2 H)，2.05(s，1H)，2.23(m，3H)，3.34(s，2H)，4.13(m，1H)，7.76(t，1H，J ＝7.86Hz)，7.98(d，1H，J＝7.86Hz)，8.14(d，1H，J＝7.89Hz)，8.20(s， 1H)。产物无须进一步纯化而使用。
C.制备甲烷磺酸(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲 基酯(49)
于室温下，将(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲醇 (48)(0.93g，2.63mmol)和TEA(920μL，6.6mmol)在THF(20mL)中 搅拌。加入甲烷磺酰氯(218μL，2.8mmol)，并将反应物搅拌30分钟。 通过过滤除去生成的沉淀。真空浓缩滤液，溶于DCM，并用NH4Cl 饱和溶液、NaHCO3饱和溶液和H2O顺序洗涤。干燥(MgSO4)有机物 并真空浓缩，得到甲烷磺酸(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 环己基)甲基酯(49)(0.97g，85％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ0.87(s， 3H)，1.04(t，2H，J＝7.14Hz)，1.36(m，5H)，1.68(m，2H)，1.82(s，2H)， 2.34(m，2H)，2.77(s，3H)，3.67(s，2H)，3.92(q，1H，J＝4.35Hz)，7.55 (t，1H，J＝7.86Hz)，7.76(d，1H，J＝7.86Hz)，7.91(d，1H，J＝7.92Hz)， 8.07(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
D.制备1-(4-(叠氮基甲基)-1-氟-4-甲基环己基磺酸基)-3-(三氟甲基)- 苯(50)
将甲烷磺酸(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲基酯 (49)(0.97g，2.2mmol)、NaN3(600mg，9.2mmol)和TEA(1.3mL， 9.2mmol)在DMF(15mL)中回流加热16小时。冷却反应物，用EtOAc (50mL)，并用H2O(2×30mL)洗涤。干燥(MgSO4)有机物，真空浓缩， 粗物质经自动化快速层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到1-(4-(叠氮基甲 基)-1-氟-4-甲基环己基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(50)(630mg，72％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ0.96(s，3H)，1.19(t，1H，J＝7.17Hz)，1.45 (m，5H)，1.83(m，2H)，1.97(s，1H)，2.12(m，2H)，3.06(s，2H)，4.05(q， 1H，J＝7.14Hz)，7.69(t，1H，J＝7.86Hz)，7.91(d，1H，J＝7.83Hz)， 8.06(d，1H，J＝7.89Hz)，8.12(s，1H).
E.制备(4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(51)
使1-(4-(叠氮基甲基)-1-氟-4-甲基环己基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(50) (630mg，1.66mmol)和Pd(OH)2(60mg，cat)溶于EtOH(20mL)并置 于巴尔氢化器中。于室温下，将反应物在H2(50PSI)下搅动1小时。 通过硅藻土过滤反应物，和真空浓缩滤液，得到(4-氟-1-甲基-4-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)环己基)甲胺(51)(520mg，89％)其无须进一步纯 化而使用。
实施例14：合成2-氯-1-(4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基) 乙酮(58)的方法
A.制备4-(甲基磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(53)
于0℃、在氩气下，将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁基酯(52)(12.03g，59.8 mmol)和TEA(12.5mL，89.7mmol)在DCM(100mL)中搅拌。加入甲 烷磺酰氯，并将反应物搅拌55分钟。将反应物用饱和NaHCO3溶液 洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，得到4-(甲基磺酰基氧基)哌啶-1- 羧酸叔丁基酯(53)(16.0g，96％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)1.45(s， 9H)，1.82(m，2H)，1.95(m，2H)，3.03(s，3H)，3.29(m，2H)，3.69(m，2 H)，4.89(m，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
B.制备4-(3-(三氟甲基)苯硫基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(54)
将4-(甲基磺酰基氧基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(53)(2.0g，7.2mmol)、 3-(三氟甲基)苯硫酚(9)(1.28g，7.2mmol)和K2CO3(2.1g，156mmol) 在MeCN中回流加热2小时。真空浓缩反应物，使残留物分配于DCM 和H2O之间。分离有机物，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。粗物质经自 动化快速层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到4-(3-(三氟甲基)苯硫基)哌 啶-1-羧酸叔丁基酯(54)(2.0g，77％)；1H NMR(300mHz，CDCl3)1.51 (m，14H)，1.93(m，2H)，2.95(m，2H)，3.24(m，1H)，3.96(m，2H)，7.49 (m，2H)，7.57(d，1H，J＝7.62Hz)，7.64(s，1H).
C.制备4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(55)
于室温下，将4-(3-(三氟甲基)苯硫基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(54)(2.0 g，5.5mmol)和Oxone10.2g，16.6mmol)在MeOH/H2O(50mL，3/2 vv)中搅拌16小时。过滤反应物，真空除去MeOH，含水层用EtOAc 提取。分离有机物，干燥(MgSO4)，并真空浓缩，得到4-(3-(三氟甲基) 苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(55)(1.24g，57％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)1.37(s，9H)，1.57(m，4H)，1.91(d，2H，J＝12.78Hz)， 2.60(m，2H)，3.00(m，1H)，4.18(d，2H，J＝11.31Hz)，7.69(t，1H，J＝ 7.83Hz)，7.88(d，1H，J＝7.86Hz)，8.00(d，1H，J＝7.86Hz)，8.08(s，1 H)。产物无须进一步纯化而使用。
D.制备4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(56)
于-78℃、氩气下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基 酯(55)(676mg，1.72mmol)在无水THF(10mL)中搅拌。加入nBuLi (1.6M溶液在己烷中；1.3mL，2.08mmol)，并将反应物搅拌30分钟。 加入碘代甲烷(0.5mL，8.1mmol)，并将反应物搅拌16小时，使温热 至室温。将反应物用NH4Cl饱和溶液猝灭，分离有机物，稀释(EtOAc)， 用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到4-甲基-4-(3-(三氟甲基) 苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(56)，产物无须进一步纯化而使用。
E.制备4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(57)
于室温下，将4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基 酯(56)(730mg，1.8mmol)在EtOAc(10mL)中搅拌。将气态HCl鼓泡 通入该溶液中1分钟，然后于室温下搅拌20分钟。真空浓缩反应物， 得到4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(57)(566mg， 91％)。
F.制备2-氯-1-(4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)哌啶-1-基)乙酮(58)
于0℃，将4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(57)(518 mg，1.5mmol)和DIPEA(0.6mL，3.3mmol)在DCM(15mL)中搅拌。 加入氯代乙酰氯(130μL，1.63mmol)并将反应物搅拌15小时，然后使 温热至室温。真空浓缩反应物和经自动化快速层析法纯化(20％ EtOAc/DCM)，得到2-氯-1-(4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1- 基)乙酮(58)(400mg，69％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)1.36(s，3H)， 1.59(m，2H)，2.10(m，2H)，2.81(t，1H，J＝11.28Hz)，3.21(t，1H，J＝ 11.31Hz)，3.84(d，1H，J＝13.98Hz)，3.99(s，2H)，4.42(d，1H，J＝ 13.71Hz)，7.70(t，1H，J＝7.83Hz)，7.90(d，1H，J＝7.77Hz)，8.00(d，1 H，J＝7.83Hz)，8.04(s 1H).
实施例15：合成2-氯-1-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基)乙酮 (60)的方法
A.制备4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(59)
于室温下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(55) (1.5g，3.93mmol)在EtOAc(10mL)中搅拌。将气态HCl鼓泡通入该 溶液0.5分钟，然后将反应物于室温下搅拌20分钟。真空浓缩反应物， 得到4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(59)(1.29g，100％).
B.制备2-氯-1-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基)乙酮(60)
于室温下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(59)(1.29g，3.93 mmol)和TEA(1.67mL，12mmol)在DCM(20mL)中搅拌。加入氯代 乙酰氯(313μL，3.93mmol)，并将反应物搅拌16小时。浓缩反应物， 粗物质经自动化快速层析法纯化(50％EtOAc/PE)，得到2-氯 -1-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基)乙酮(60)(700mg，48％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)1.74(m，5H)，2.35(m，2H)，3.17(m，2H)，4.05 (m，3H)，4.69(d，2H)，7.78(t，1H，J＝7.86Hz)，7.98(d，1H，J＝8.04 Hz)，8.09(d，1H，J＝7.86Hz)，8.16(s，1H).
实施例16：合成4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(68)的方法
A.制备1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-醇(62)
于室温在MeOH(80mL)中搅拌1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-醇(61)(12.44g， 79.65mmol)。分批加入NaBH4(1.51g，39.83mmol)，搅拌反应物25 分钟。真空除去溶剂，残留物用5％NaOH水溶液处理并用EtOAc提 取(两次)。合并有机物，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到1，4- 二氧杂螺[4.5]癸-8-醇(62)(11.10g，88％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ 1.59(m，4H)，1.81(m，4H)，3.78(m，1H)，3.93(br s，4H).
B.制备甲烷磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基酯(63)
于0℃、氩气下，将1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-醇(62)(11.10g，70.17mmol) 和TEA(14.67mL，105.3mmol)在无水DCM(150mL)中搅拌。缓慢加 入甲烷磺酰氯(5.70mL，73.7mmol)，并将反应物搅拌1小时。将反应 物用饱和NH4Cl水溶液，饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到甲烷磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8- 基酯(63)(15.12g，91％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.64(m，2H)，1.85 (m，2H)，1.99(m，4H)，3.01(s，3H)，3.94(br t，4H，J＝3.74Hz)，4.84(m， 1H).
C.制备8-(3-(三氟甲基)苯硫基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(4)
在氩气下，将甲烷磺酸1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基酯(63)(15.12g，63.99 mmol)、3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(11.40g，63.99mmol)、TEA(14.10 mL，83.19mmol)和KI(cat.)在MeCN(200mL)中回流加热4小时。加 入额外的3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(2.00g，11.2mmol)、TEA(5.0mL， 29mmol)和K2CO3(2.00g，14.5mmol)，并将反应物回流另外16小 时。真空除去溶剂。使残留物溶于EtOAc，用H2O、2M NaOH水溶 液(两次)和盐水顺序洗涤。干燥(Na2SO4)有机物，过滤，真空浓缩，粗 物质经自动化快速层析法纯化(Rf＝0.65在5∶1PE∶EtOAc中)，得到 8-(3-(三氟甲基)苯硫基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(64)(14.85g，73％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.72(m，6H)，2.00(m，2H)，3.25(m，1H)， 3.94(s，4H)，7.43(m，2H)，7.56(d，1H，J＝7.70Hz)，7.63(br s，1H).
D.制备8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(65)
将8-(3-(三氟甲基)苯硫基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(64)(3.32g，10.43 mmol)，NaHCO3(4.38g，52.2mmol)和m-CPBA(5.84g，26.08mmol) 在DCM中于室温下搅拌(130mL)16小时。加入H2O(50mL)和 MeOH(20mL)，并将该混合物搅拌30分钟。有机层用饱和NaHCO3水溶液、饱和Na2S2O5水溶液、饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4- 二氧杂螺[4.5]癸烷(65)(3.54g，97％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.53 (m，2H)，1.83(m，4H)，2.07(m，2H)，2.97(m，1H)，3.92(br t，4H，J＝ 3.52Hz)，7.74(t，1H，J＝7.70Hz)，7.93(d，1H，J＝7.92Hz)，8.08(d，1 H，J＝8.36Hz)，8.15(s，1H).
E.制备4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(66)
将8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(65)(18.64g， 53.20mmol)在MeOH(120mL)和6MHCl水溶液(80mL)回流下搅拌 20小时。将反应物用水稀释并用DCM提取两次。合并有机物，干燥 (Na2SO4)，过滤，和真空除去溶剂。将粗物质在1，4-二氧六环(150mL) 和6MHCl水溶液(100mL)中回流加热16小时。浓缩反应物至一半体 积并用DCM提取两次。干燥(Na2SO4)有机物，过滤，并真空浓缩， 得到4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(66)(15.25g，94％)。1H NMR (300mHz，CDCl3)δ2.02(m，2H)，2.36(m，4H)，2.59(m，2H)，3.39(m， 1H)，7.78(t，1H，J＝8.14Hz)，7.97(m，1H)，8.14(m，2H).
F.制备N-苄基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(67)
于室温下将4-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环己酮(66)(2.77g，9.04 mmol)、苄基胺(0.99mL，9.04mmol)、AcOH(0.52mL，9.04mmol) 和NaHB(OAc)3(2.68g，12.7mmol)在DCE(100mL)中搅拌3小时。 用1M NaOH(100mL)猝灭反应物，用Et2O提取两次。有机物用盐水 洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到N-苄基-4-(3-(三氟甲基) 苯磺酰基)环己胺(67)(3.45g，96％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.78 (m，2H)，1.49(m，2H)，1.93(m，6H)，2.94(m，2H)，3.70(s，2H)，7.27 (m，5H)，7.74(m，1H)，7.94(m，1H)，8.09(m，1H)，8.16(m，1H).
G.制备4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(68)
于室温下，将N-苄基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(67)(2.77g， 6.97mmol)和Pd(OH)2(cat.)在MeOH(100mL)中搅拌。将H2鼓泡通入 混合物中10分钟，接着在H2(1atm)下搅拌16小时。通过硅藻土过滤 反应物并真空浓缩，得到4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(68)(2.15 g，定量的)；1HNMR(300mHz，MeOD)δ1.57(m，2H)，1.86(m，2H)， 3.05(m，1H)，3.36(s，1H)，7.89(m，1H)，8.08(m，1H)，8.18(m，2H).
实施例17：合成4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(72)的方法
A.制备8-甲基-8-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(69)
于室温、氩气下，将8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸 烷(65)(6.50g，18.6mmol)和MeI(6.76mL，108mmol)在无水DMF(80 mL)中搅拌。加入NaH(60％在矿物油中的分散液；4.70g，117mmol)， 并将悬浮液搅拌120小时。将反应物用H2O稀释，用EtOAc提取， 有机物用H2O、盐水(两次)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩。 粗产物经自动化快速层析法纯化(Rf＝0.7在1∶1 PE∶EtOAc中)，得到 8-甲基-8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(69)(4.63g， 68％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.36(s，3H)，1.64(m，4H)，1.81(m， 2H)，2.24(m，2H)，3.92(s，4H)，7.72(t，1H，J＝7.92)，7.92(d，1H，J＝ 7.92)，8.00(d，1H，J＝7.92)，8.14(br s，1H).
B.制备4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(70)
于室温下，将8-甲基-8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5] 癸烷(69)(4.63g，12.7mmol)在二氧六环(150mL)和10％HCl水溶液(50 mL)中搅拌120小时。浓缩反应物至一半体积，并用EtOAc提取。有 机物用饱和NaHCO3水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空除去溶 剂，得到4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(70)(4.25g，定量 的)；1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.50(s，3H)，1.98(m，2H)，2.38(m，4 H)，2.57(m，2H)，7.76(m，1H)，7.95(m，1H)，8.11(m，2H).
C.制备N-苄基-4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(71)
于室温下，将4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(70)(3.03g， 9.46mmol)、苄基胺(1.03mL，9.46mmol)、AcOH(0.54mL，9.46 mmol)和NaHB(OAc)3(2.81g，13.2mmol)在DCE(80mL)中搅拌2小 时。将反应物用1M NaOH水溶液(100mL)猝灭并用Et2O提取(两次)。 有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩。粗产物经自 动化快速层析法纯化(Rf＝0.2在95∶5CH2Cl2∶MeOH中)，得到N-苄基 -4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(71)(2.89g，74％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.36(m，7H)，1.61(m，2H)，1.81(m，2H)， 2.31(m，1H)，3.70(m，2H)，7.26(m，5H)，7.72(m，1H)，7.93(m，1H)， 8.12(m，2H).
D.制备4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(72)
将N-苄基-4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(71)(2.31g，5.61 mmol))和Pd(OH)2(cat.)在MeOH(100mL)中搅拌。将H2鼓泡通入悬 浮液10分钟，然后将反应在H2(1atm)下搅拌16小时。通过硅藻土过 滤反应物并真空浓缩，得到甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺 (72)(1.76g，98％)。1H NMR(300mHz，MeOD)δ1.23(s，3H)，1.50(m， 2H)，1.80(m，4H)，2.27(m，2H)，3.37(s，2H)，7.89(m，1H)，8.13(m，3 H).
实施例18：合成4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(77) 的方法
A.制备8-氟-8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(73)
于-78℃、氩气下，将8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5] 癸烷(65)(7.5g，21.4mmol)在THF(150mL)中搅拌。滴加入丁基锂(1.6 M溶液在己烷中)(16mL，25.7mmol)，并将反应物于-78℃搅拌30 分钟。滴加入在THF(10mL)中的N-氟代苯磺酰亚胺(6.75g，21.4 mmol)，使残留物温热至室温，继续搅拌1小时。将反应物用NH4Cl 饱和溶液猝灭(50mL)，然后用EtOAc提取(3x150mL)。有机物用盐 水洗涤，干燥(Na2SO4)，并浓缩至三分之一体积。通过过滤除去生成 的沉淀，和真空浓缩滤液。将粗物质在20％EtOAc-己烷中重结晶， 得到8-氟-8-(3-(三氟甲基)苯基-磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(73) (6.31g，82％)；1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.82(dd，4H，J＝2.7，7.8 Hz)，2.12(m，2H)，2.31(m，1H)，2.45(m，1H)，7.76(t，1H，J＝7.83Hz)， 7.97(d，1H，J＝7.80Hz)，8.13(d，1H，J＝7.80Hz)，8.20(s，1H).
B.制备4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(74)
将8-氟-8-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(73)(6.3g， 17.12mmol)在MeOH(120mL)和6MHCl水溶液(80mL)中回流加热 20小时。将反应物用H2O稀释并用DCM提取两次。干燥(Na2SO4)有 机物，过滤并真空浓缩。使粗物质溶于1，4-二氧六环(150mL)和6MHCl 水溶液(100mL)并回流16小时。浓缩反应物至一半体积并用DCM提 取(两次)。合并有机部分，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到4- 氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己酮(74)(4.0g，73％)。1H NMR (300mHz CDCl3)δ2.37(m 2H)，2.58(m，6H)，7.81(t，1H，J＝7.80Hz)， 8.02(d，1H，J＝7.83Hz)，8.18(d，1H，J＝7.89Hz)，8.24(s，1H).
C.制备N-(4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)亚环己基)-1-苯基-甲胺 (75)
于室温下，将4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(74)(2.62g，8.08 mmol)、苄基胺(0.88mL，8.08mmol)和分子筛(3.5g)在DCM中 搅拌(50mL)16小时。通过硅藻土过滤反应物并真空浓缩，得到N-(4- 氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)亚环己基)-1-苯基-甲胺(75)(3.34g，定 量的)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ2.29(m，4H)，2.59(m，2H)，3.00 (m，2H)，4.56(s，2H)，7.29(m，5H)，7.79(m，1H)，7.99(m，1H)，8.20 (m，2H).
D.制备N-苄基-4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(76)
于-78℃、氩气下，将N-(4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)亚环己基)-1- 苯基甲胺(75)(2.52g，6.10mmol)在无水THF(100mL)中搅拌。加入 BF3·OEt2(1.51mL，12.2mmol)，搅拌反应物1小时。加入MeLi(1.6M 溶液在Et2O中)(11.4mL，18.3mmol)，于-78℃搅拌反应物1h，然 后温热至室温35分钟。用10％NaOH水溶液猝灭反应物并用Et2O提 取(两次)。有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。粗物 质经自动化快速层析法纯化(CH2Cl2∶MeOH)，得到N-苄基-4-氟-1-甲基 -4-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环己胺(76)(1.12g，43％)。
E.制备4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(77)
将N-苄基-4-氟-1-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(76)(0.37 g，0.86mmol)(55)和Pd(OH)2在MeOH(50mL)中在H2(1atm)下16 小时。通过硅藻土过滤反应物并真空浓缩，得到-氟-1-甲基-4-(3-(三氟 甲基)苯基磺酰基)环己胺(77)(260mg，89％)。产物经LCMS和证实并 无须进一步纯化而使用。
实施例19：合成(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(83)的方法
A.制备(反式)-4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯(79).
于室温下，将(反式)-4-氨基环己醇(78)(24.44g，212.2mmol)和 (BOC)2O(50.95g，233.4mmol)在DCM(600mL)、MeOH(200mL)、和 二氧六环(200mL)中搅拌16小时。真空浓缩反应物，粗物质用EtOH 研磨，得到(反式)-4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯(79)(21.04g，46％)。
1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.17(m，2H)，1.42(m，11H)，2.00(m，4 H)，3.41(br s，1H)，3.60(m，1H)，4.35(br s，1H).
B.制备(反式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基酯(80) 于0℃、氩气下，将(反式)-4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯(79)(7.53 g，35.0mmol)和DIEA(3.25mL，42.0mmol)在无水THF(170mL)中 搅拌。加入MsCl(2.98mL，38.5mmol)，并将反应物于室温下搅拌6h。 此时，然后用EtOAc稀释反应物，用H2O和饱和NaHCO3水溶液洗 涤，干燥(Na2SO4)，过滤和真空除去溶剂，得到(反式)-甲烷磺酸4-(叔 丁氧基羰基氨基)环己基酯(80)(10.26g，定量的)。1H NMR(300mHz， CDCl3)δ1.04(m，2H)，1.21(s，9H)，1.46(m，2H)，1.89(m，4H)，2.79(s， 3H)，3.25(br s，1H)，4.18(br s，1H)，4.40(m，1H).
C.制备(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(81)
在氩气下，将(反式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基酯 (80)(10.26g，35.0mmol)、DIEA(18.3mL，105mmol)和3-(三氟甲基) 苯硫酚(14)(7.48g，42.0mmol)在MeCN(250mL)中回流下搅拌16小 时。浓缩反应物，溶于EtOAc，用5％NaOH水溶液(两次)、盐水洗涤， 干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩。粗物质经自动化快速层析法纯化 (Rf＝0.65在5∶1PE∶EtOAc中)，得到(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环 己基氨基甲酸叔丁基酯(81)(3.27g，25％)。1H NMR(300mHz，CDCl3) δ1.45(s，9H)，1.77(m，8H)，3.47(m，1H)，3.60(br s，1H)，4.57(br s，1 H)，7.42(m，2H)，7.53(m，1H)，7.61(m，1H).
D.制备(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基甲酸叔丁基酯 (82)
于室温下，将(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基氨基甲酸叔丁基酯 (81)(3.27g，8.71mmol)、NaHCO3(2.20g，26.1mmol)和m-CPBA (77％，4.88g，21.8mmol)在DCM(150mL)中搅拌2小时。加入H2O (50mL)和MeOH(20mL)，并将反应物再搅拌30分钟。有机物用饱和 Na2S2O5水溶液(两次)和饱和NaHCO3水溶液(两次)顺序洗涤。然后干 燥(Na2SO4)有机物，过滤，并真空浓缩，得到(顺式)-4-(3-(三氟甲基) 苯基磺酰基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(82)(3.35g，94％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)δ1.44(s，9H)，1.55(m，2H)，1.86(m，6H)，2.96(m，1H)， 3.81(br s，1H)，4.69(br s，1H)，7.75(m，1H)，7.93(m，1H)，8.08(m，1 H)，8.15(m，1H).
E.制备(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(83)
将(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(82) (3.35g，8.22mmol)在EtOAc(100mL)中搅拌。使气态HCl鼓泡通入 该溶液50秒，然后搅拌25分钟。真空浓缩反应物，得到(顺式)-4-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(83)，为HCl盐(2.83g，定量的)；1H NMR (300mHz，MeOD)δ1.93(m，4H)，2.08(m，4H)，3.36(m，1H)，3.44(m， 1H)，7.92(m，1H)，8.11(m，1H)，8.22(m，2H).
实施例20：合成(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(89)的方法
A.制备(顺式)-4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯(85)
于室温下，将(顺式)-4-氨基环己醇盐酸盐(84)(7.34g，48.4mmol)和 TEA(13.5mL，96.8mmol)在二氧六环(100mL)和MeOH(40mL)中搅 拌。加入在DCM(40mL)中的(BOC)2O(11.6g，53.3mmol)，并将反 应物搅拌3小时。真空浓缩反应物，加入H2O，混合物用EtOAc提取 (两次)。干燥(Na2SO4)有机物，过滤，并真空浓缩，得到(顺式)-4-羟基 环己基氨基甲酸叔丁基酯(85)(10.42g，定量的)；1H NMR(300mHz， CDCl3)δ1.46(s，9H)，1.67(m，8H)，3.54(br s，1H)，3.71(s，1H)，3.90 (m，1H)，4.54(br s，1H).
B.制备(顺式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基酯(86)
于0℃、氩气下，将(顺式)-4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯(85)(4.36 g，20.3mmol)和DIEA(7.05mL，40.5mmol)在无水DCM(120mL)中 搅拌。加入MsCl(1.72mL，22.3mmol)并将反应物于0℃搅拌2小时， 和于室温下搅拌1h。将反应物用1MHCl水溶液、饱和NaHCO3水溶 液顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到(顺式)-甲烷磺 酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基酯(86)(5.55g，93％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)δ1.45(s，9H)，1.60(m，2H)，1.78(m，4H)，2.05(m，2H)， 3.02(s，3H)，3.53(br s，1H)，4.47(br s，1H)，4.89(m，1H).
C.制备(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(87)
在氩气下，将(顺式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基酯(86) (5.55g，18.9mmol)、DIEA(4.94mL，28.4mmol)和3-(三氟甲基)苯硫 酚(14)(4.04g，22.7mmol)在MeCN(120mL)中回流下搅拌18小时。 真空浓缩反应物并溶于EtOAc。有机层用1MHCl水溶液、5％NaOH 水溶液，饱和NaHCO3和盐水顺序洗涤。干燥(Na2SO4)有机层，过滤， 并真空浓缩。粗物质经自动化快速层析法纯化(Rf＝0.65在5∶1 PE∶EtOAc中)，得到(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基氨基甲酸叔 丁基酯(87)(2.67g，38％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.20(m，2H)， 1.43(m，11H)，2.06(m，4H)，3.04(m，1H)，3.45(br s，1H)，4.39(br s，1 H)，7.44(m，2H)，7.55(m，1H)，7.62(m，1H).
D.制备(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环己基氨基甲酸叔丁酯(88)
于室温下，将(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯硫基)环己基氨基甲酸叔丁酯(87) (2.67g，7.11mmol)、NaHCO3(1.79g，21.3mmol)和m-CPBA(77％， 3.98g，17.8mmol)在DCM中搅拌(125mL)16小时。加入H2O(50 mL)和MeOH(20mL)，并将该混合物再搅拌30分钟。有机物饱和 Na2S2O5水溶液(两次)和饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤。干燥(Na2SO4) 有机物，过滤，并真空浓缩，得到(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 环己基氨基甲酸叔丁基酯(88)(2.70g，93％)。1H NMR(300mHz，CDCl3) δ1.04(m，2H)，1.34(s，9H)，1.46(m，2H)，2.06(m，4H)，2.82(m，1H)， 3.28(br s，1H)，4.34(m，1H)，7.67(m，1H)，7.87(m，1H)，8.00(m，1H)， 8.06(m，1H).
E.制备(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(89)
于室温下，将(顺式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基甲酸叔丁 基酯(88)(2.70g，6.65mmol)在EtOAc(80mL)中搅拌。将气态HCl鼓 泡通入该溶液50秒，然后于室温下搅拌45分钟。真空浓缩反应物， 得到(反式)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(89)，为HCl盐.(2.28 g，定量的)；1H NMR(300mHz，MeOD)δ1.46(m，2H)，1.63(m，2H)， 2.16(m，4H)，3.11(m，1H)，7.91(m，1H)，8.11(m，1H)，8.20(m，2H).
实施例21：合成(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己胺(97) 的方法
A.制备(反式)-4-(叔丁氧基羰基氨基)环己烷羧酸乙基酯(91)
于室温下，将(反式)-4-氨基环己烷羧酸盐酸盐(90)(7.45g，41.5mmol) 在无水EtOH(80mL)中搅拌。将气态HCl鼓泡通入该溶液1分钟，将 反应物回流加热20小时，然后真空浓缩。于室温下，将粗残留物在 含TEA(17.3mL，124mmol)的DCM(100mL)和(BOC)2O(10.86g， 49.76mmol)中搅拌6小时。真空浓缩反应物，溶于EtOAc，用1MHCl 水溶液和饱和NaHCO3水溶液洗涤。干燥(Na2SO4)有机层，过滤，并 真空浓缩，得到(反式)-4-(叔丁氧基羰基氨基)环己烷羧酸乙基酯(91) (11.25g，定量的)；1HNMR(300mHz，CDCl3)δ1.11(m，2H)，1.25(t，3 H，J＝7.70Hz)，1.44(s，9H)，2.05(m，5H)，2.20(m，1H)，3.41(br s，1 H)，4.12(q，2H，J＝7.70Hz)，4.38(bs，1H).
B.制备(反式)-4-(羟基甲基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(92)
于室温下，将(反式)-乙基4-(叔丁氧羰基氨基)环己烷羧酸酯(91)(11.25 g，41.46mmol)和MeOH(1.00mL，25.3mmol)在Et2O(200mL)中搅 拌。加入LiBH4(3.00g，124mmol)，接着滴加入MeOH(4.04mL，98.7 mmol)。将反应物搅拌45分钟，用MeOH猝灭，并真空浓缩。使残留 物溶于10％NaOH水溶液并用EtOAc提取(两次)。有机物用盐水洗涤， 干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到(反式)-4-(羟基甲基)环己基氨 基甲酸叔丁基酯(92)(9.15g，定量的)；1H NMR(300mHz，MeOD)δ 1.05(m，2H)，1.21(m，2H)，1.45(s，9H)，1.84(m，2H)，1.94(m，2H)， 3.26(m，1H)，3.37(d，2H，J＝6.38Hz)，3.62(m，1H)，4.64(br s，1H).
C.制备((反式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基)甲基酯(93)
于0℃、氩气下，将(反式)-4-(羟基甲基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(92) (5.00g，21.8mmol)和TEA(4.56mL，32.71mmol)在1∶1CH2Cl2∶THF (110mL)中搅拌。加入MsCl(1.77mL，22.9mmol)，并将反应物于0℃ 搅拌30分钟，然后使升温至室温。将反应物搅拌16小时。加入TEA (6.08mL，43.6mmol)和MsCl(1.77mL，22.9mmol)，并继续搅拌另 外6小时。真空浓缩反应物，溶于EtOAc，用1MHCl水溶液、饱和 NaHCO3洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到((反式)-甲烷 磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基)甲基酯(93)(7.45g，定量的)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.12(m，4H)，1.44(s，9H)，1.51(m，1H)， 1.71(bs，1H)，1.86(m，2H)，2.06(m，2H)，3.01(s，3H)，3.40(bs，1H)， 4.03(d，2H，J＝6.38Hz)，4.39(bs，1H).
D.制备(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)环乙基氨基甲酸叔丁基 酯(94)
在氩气下，将((反式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基)甲基酯 (93)(6.70g，21.8mmol)、DIEA(7.59mL，43.6mmol)和3-(三氟甲基) 苯硫酚(14)(4.66g，26.15mmol)在MeCN(240mL)中回流16小时。 真空除去溶剂，使残留物溶于EtOAc，用1MHCl水溶液、饱和NaHCO3洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩。粗产物经自动化快速层析法纯 化(5∶1PE∶EtOAc)，得到(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)环己基氨 基甲酸叔丁基酯(94)(4.31g，51％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.03 (m，4H)，1.37(s，9H)，1.43(m，2H)，1.92(m，4H)，2.77(d，2H，J＝6.82 Hz)，3.31(br s，1H)，4.30(m，1H)，7.33(m，4H).
E.制备(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己基-氨基甲酸叔 丁基酯(95)
于室温下，将(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)环己基氨基甲酸叔 丁基酯(94)(4.31g，11.1mmol)、NaHCO3(2.79g，33.2mmol)和 m-CPBA(77％，6.20g，27.7mmol)在DCM(300mL)中搅拌16小 时。加入H2O(50mL)和MeOH(20mL)并将该混合物搅拌30分钟。 有机物用饱和Na2S2O5水溶液(两次)和饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤。 然后干燥(Na2SO4)有机物，过滤，并真空浓缩，得到(反式)-4-((3-(三氟 甲基)苯基磺酰基)甲基)环己基-氨基甲酸叔丁基酯(95)(2.70g，93％)。 1HNMR(300mHz，CDCl3)δ1.16(m，4H)，1.44(s，9H)，2.01(m，5H)， 3.00(d，2H，J＝6.60Hz)，3.37(br s，1H)，4.40(m，1H)，7.74(m，1H)， 7.92(m，1H)，8.11(m，1H)，8.19(m，1H).
F.制备(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己胺(96)
于室温下，将(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己基氨基甲 酸叔丁基酯(95)(4.27g，10.13mmol)在EtOAc(200mL)中搅拌。将气 态HCl鼓泡通入溶液40秒，然后将反应物搅拌25分钟。真空浓缩反 应物，得到(反式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己胺(96)，为 HCl盐(3.63g，定量的)；1HNMR(300mHz，MeOD δ1.36(m，4H)， 2.04(m，5H)，3.07(m，1H)，3.27(d，2H，J＝6.60Hz)，7.90(m，1H)， 8.09(m，1H)，8.24(m，2H).
实施例22：合成(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己胺(104) 的方法
A.制备(顺式)-4-(叔丁氧基羰基氨基)环己烷羧酸乙基酯(98)
于室温下，将(顺式)-4-氨基环己烷羧酸(97)(5.00g，34.9mmol)在无水 EtOH(60mL)中搅拌。将气态HCl鼓泡通入60秒，然后将反应物回 流加热3小时。真空浓缩反应物，使残留物溶于DCM(100mL)。加 入TEA(14.6mL，105mmol)和(BOC)2O(9.15g，41.9mmol)，将反应 物于室温下搅拌16小时。真空浓缩反应物，溶于EtOAc，用1MHCl 水溶液、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并 真空浓缩，得到(顺式)-4-(叔丁氧基羰基氨基)环己烷羧酸乙酯(98) (9.48g，定量的)；1HNMR(300mHz，CDCl3)δ1.25(t，3H，J＝7.04Hz)， 1.43(s，9H)，1.55(m，2H)，1.69(m，4H)，1.84(m，2H)，2.43(m，1H)， 3.63(br s，1H)，4.12(q，2H，J＝7.04Hz)，4.59(br s，1H).
B.制备(顺式)-4-(羟基甲基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(99)
于室温下，将(顺式)-乙基4-(叔丁氧基羰基氨基)环己烷羧酸酯(98) (10.02g，36.93mmol)和MeOH(2.00mL，50.6mmol)在Et2O(100mL) 中搅拌。加入LiBH4(2.68g，111mmol)，接着滴加入MeOH(2.49mL， 60.4mmol)。将反应物搅拌1h，用MeOH猝灭并真空浓缩。残留物用 10％NaOH水溶液处理，用EtOAc提取(两次)，有机物用盐水洗涤， 干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到(顺式)-4-(羟基甲基)环己基氨 基甲酸叔丁基酯(99)(8.00g，94％)。1H NMR(300mHz，MeOD)δ1.26 (m，2H)，1.45(s，9H)，1.62(m，8H)，3.52(d，2H，J＝6.16Hz)，3.76(bs， 1H)，4.65(br s，1H).
C.制备((顺式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基)甲基酯(100)
于0℃、氩气下，将(顺式)-4-(羟基甲基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(99) (5.00g，21.8mmol)和TEA(9.12mL，65.4mmol)在无水THF(120mL) 中搅拌。加入MsCl(2.53mL，32.71mmol)，并将反应物搅拌1h，然 后使升温至室温并再搅拌16小时。真空浓缩反应物，溶于EtOAc， 用1MHCl水溶液、饱和NaHCO3洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真 空浓缩，得到((顺式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基)甲基酯 (100)(6.77g，定量的)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.30(m，2H)，1.44 (s，9H)，1.66(m，6H)，1.85(m，1H)，3.02(s，3H)，3.76(bs，1H)，4.09(d， 2H，J＝6.38Hz)，4.62(bs，1H).
D.制备(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)环己基氨基甲酸叔丁基 酯(101)
在氩气下，将((顺式)-甲烷磺酸4-(叔丁氧基羰基氨基)环己基)甲基酯 (100)(6.77g，22.0mmol)、DIEA(7.67mL，44.1mmol)和3-(三氟甲基) 苯硫酚(14)(4.71g，26.4mmol)在MeCN(400mL)中回流下搅拌16小 时。真空浓缩反应物。使残留物溶于EtOAc，用饱和NaHCO3水溶液 洗涤(两次)，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。粗产物经自动化快速层析法 纯化(Rf＝0.55在5∶1PE∶EtOAc中)，得到(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯硫 基)甲基)环己基氨基甲酸叔丁基酯(101)(7.08g，83％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)δ1.33(m，2H)，1.45(s，9H)，1.66(m，8H)，2.90(d，2H，J ＝6.82Hz)，3.73(bs，1H)，4.62(bs，1H)，7.41(m，3H)，7.52(m，1H).
E.制备(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己基-氨基甲酸叔 丁基酯(102)
于室温下，将(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)环己基氨基甲酸叔 丁基酯(101)(2.46g，6.32mmol)、NaHCO3(1.59g，19.0mmol)和 m-CPBA(77％，3.54g，15.8mmol)在DCM中搅拌(200mL)16小 时。加入H2O(50mL)和MeOH(20mL)并将该混合物再搅拌30分钟。 有机物用饱和Na2S2O5水溶液(两次)、饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤， 干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺 酰基)甲基)环己基-氨基甲酸叔丁基酯(102)(2.36g，89％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)δ1.30(m，11H)，1.55(m，7H)，2.04(br s，1H)，2.93(d，2 H，J＝6.60Hz)，3.54(br s，1H)，4.45(br s，1H)，7.61(m，1H)，7.80(m，1 H)，7.98(m，1H)，8.05(m，1H).
F.制备(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己胺(103)
于室温下，将(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己基氨基甲 酸叔丁基酯(102)(7.50g，17.8mmol)在EtOAc(200mL)中搅拌。将气 态HCl鼓泡通入该溶液45秒，然后将反应物搅拌25分钟。真空浓缩 反应物，得到(顺式)-4-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环己胺(103)， 为HCl盐(6.13g，96％)。1H NMR(300mHz，MeOD δ1.75(m，8H)，2.29 (m，1H)，3.27(m，1H)，3.37(d，2H，J＝6.60Hz)，7.91(m，1H)，8.09(m， 1H)，8.26(m，2H).
实施例23：合成4-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)哌嗪-2-酮(107) 的方法
A.制备4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(104)
于室温下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(66)(1.05g，3.43 mmol)在MeOH(30mL)中搅拌。加入NaBH4(65mg，1.7mmol)，并 将反应物搅拌25分钟。真空浓缩反应物，使残留物溶于EtOAc，用 10％HCl水溶液和饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，并 真空浓缩，得到4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(104)(1.05g， 99％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.26(m，2H)，1.58(m，2H)，1.90(m， 1H)，2.10(m，3H)，2.93(m，1H)，3.11(s，0.5H)，3.18(s，0.5H)，3.61(m， 1H)，7.75(m，1H)，7.95(m，1H)，8.09(m，2H)，8.16(m，1H).
B.制备4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基甲烷磺酸酯(105)
于0℃、氩气下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(104)(1.05g， 3.41mmol)和TEA(0.71mL，5.12mmol)在无水CH2Cl2(50mL)中搅 拌。加入MsCl(0.28mL)，并将反应物搅拌1小时。将反应物用H2O 猝灭，用1MHCl水溶液和饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤，干燥 (Na2SO4)，并真空浓缩，得到甲烷磺酸4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环 己基酯(105)(1.24g，94％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ1.63(m，4H)， 2.18(m，2H)，2.32(m，2H)，3.02(s，3H)，3.14(m，1H)，4.59(m，1H)， 7.77(m，1H)，7.95(m，1H)，8.08(m，1H)，8.15(m，1H).
C.制备4-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)哌嗪-2-酮(107)
将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基甲烷磺酸酯(105)(0.72g，1.86 mmol)、哌嗪-2-酮(106)(1.00g，9.99mmol)和KI(cat.)在微波反应器的 密闭容器中的DMF(4mL)中于140℃加热1小时。将反应物用EtOAc 稀释，用H2O和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩。粗物质 经反相HLPC纯化，得到4-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己基)哌嗪 -2-酮(107)(6.40mg，0.9％)。
实施例24：合成顺式-和反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己胺 (110和111)的通用方法
A.制备顺式和反式N-苄基-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己胺 (108和109)
于室温下，将4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己酮(74)(4.0g， 12.24mmol)、苄基胺(1.4mL，12.8mmol)、AcOH(0.7mL，12.04 mmol)和NaHB(OAc)3(3.85g，17.24mmol)在DCE(100mL)中搅拌3 小时。将反应物用NaHCO3饱和溶液猝灭并用Et2O提取(两次)。合并 有机物，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩。粗物质经 自动化快速层析法纯化，得到顺式N-苄基-4-氟-4-(3-(三氟甲基)-苯基 磺酰基)-环己胺108(2.6g，49％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.86(m 6H)，2.44(m，1H)，2.59(m，1H)，2.97(s，1H)，3.78(s，2H)，7.33 (m，5H)，7.75(t，1H，J＝7.80Hz)，7.97(d，1H，J＝7.92Hz)，8.13 (d，1H，J＝7.77Hz)，8.21(s，1H).MS(M+H＝416.0)(对 C20H21F4NO2S的计算值，415.12)和反式N-苄基-4-氟-4-(3-(三氟甲基)- 苯基磺酰基)-环己胺109(2.5g，48％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ 1.39(m，2H)，2.15(m 6H)，2.62(t，1H，J＝11.61Hz)，3.85(s，2H)，7.35 (m，5H)，7.75(t，1H，J＝7.87Hz)，7.97(d，1H，J＝7.77Hz)，8.13(d，1H， J＝7.80Hz)，8.18(s，1H).MS(M+H＝416.0)(对C20H21F4NO2S， 415.12的计算值).
B.制备顺式-和反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(110和 111)
将顺式N-苄基-4-氟-4-(3-(三氟甲基)-苯基磺酰基)-环己胺108(2.6g， 6.26mmol)和Pd(OH)2(cat.)溶于MeOH(100mL)并置于巴尔氢化器 中。于室温下，将反应物在H2(50PSI)下搅动28h。通过硅藻土过滤 反应物和真空浓缩滤液，得到顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 环己胺(110)(1.6g，80％)；1HNMR(300mHz CDCl3)δ1.78(m 6H)， 2.44(m，1H)，2.56(m，1H)，3.29(s，1H)，7.75(t，1H，J＝7.84Hz)，7.97 (d，1H，J＝7.71Hz)，8.13(d，1H，J＝7.77Hz)，8.21(s，1H).MS(M+H ＝325.9)(对C13H15F4NO2S，325.08的计算值).
按照用于(109)的相同方法(2.5g，6.00mmol)，得到反式-4-氟 -4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(111)；1H NMR(300mHz CDCl3) δ1.23(m，2H)，1.96(m 6H)，2.72(m，1H)，7.66(t，1H，J＝7.84Hz)， 7.90(d，1H，J＝7.80Hz)，8.04(d，1H，J＝7.83Hz)，8.11(s，1H).MS (M+H＝325.9)(对C13H15F4NO2S，325.08的计算值).
实施例25：合成顺式-和反式-4-氟-4-(3-(三氟甲氧基)苯基磺酰基)-环 己胺(112和113)的通用方法
通过使用3-(三氟甲氧基)苯硫酚代替3-(三氟甲基)苯硫酚，以对顺式- 和反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己胺(110和111)描述的相 同方式，制备顺式-和反式-4-氟-4-(3-(三氟甲氧基)苯基磺酰基)-环己胺 (112和113)。
实施例26：合成顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺 HCl盐(124)的方法
A.制备8-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(116)
于室温下，将Mg条(1.09g，44.9mmol)(用己烷/Et2O清洁)和I2(引发 剂)在无水THF(75mL)中搅拌。滴加入1-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯(114) (10.0g，41.2mmol)，并于室温下搅拌反应物2h(用加热枪启动反应)。 加入硫(1.32g，41.2mmol)，并将反应物于室温下搅拌45分钟。加入 1，4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基甲烷磺酸酯(63)(10.5g，44.5mmol)并将反应 物在回流下搅拌16小时。然后通过Celite过滤反应物，用EtOAc洗 涤。用盐水洗涤(200mL)滤液，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩。使残留 物溶于DCM(1L)并于室温下与NaHCO3(20g)和m-CPBA(max 77％， 30g，130mmol)一起搅拌16小时。加入1.5N NaOH(100mL)和饱和 Na2S2O3(50mL)，搅拌30分钟和分离有机物，用盐水洗涤(150mL)， 干燥(Na2SO4)，真空浓缩，残留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/PE， 1∶3)，接着从EtOAc/PE中重结晶，得到8-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰 基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(116)(10.6g，70％)；1H NMR(300MHz， CDCl3)δ1.56(m，2H)，1.84(m，4H)，2.08(m，2H)，2.99(m，1H)，3.93(m， 4H)，7.64(d，1H，6.9Hz)7.80(d，1H，J＝6.9Hz)，7.96(s，1H).
B.制备8-氟-8-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷 (117)
于-78℃、氩气下，将8-(3-氟-5-(三氟甲基(mrthyl))苯基磺酰基)-1，4-二 氧杂螺[4.5]癸烷(116)(20.0g，54.3mmol)在无水THF(160mL)中搅拌。 滴加入n-BuLi(10M在己烷中，5.7mL，57mmol)并将反应物搅拌30 分钟。加入在无水THF(20mL)中的N-氟代苯磺酰亚胺(16.7g，53.0 mmol)，将反应物于-78℃搅拌30min，然后升温至室温另外6小时。 加入EtOAc(100mL)并将该混合物通过硅藻土过滤，用EtOAc洗涤。 真空浓缩滤液，残留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/石油醚，1∶5)， 接着从EtOAc/石油醚中重结晶，得到8-氟-8-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基 磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(117)(12.8g，61％)；1H NMR(300MHz， CDCl3)δ1.82(m，4H)，2.04(m，2H)，2.33(m，1H)，2.46(m，1H)，3.98(s， 4H)，7.68(d，1H，6.9Hz)，7.85(d，1H，J＝6.9Hz)，8.01(s，1H).
C.制备4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(118)
将8-氟-8-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷(117) (12.8g，33.0mmol)和6N HCl(50mL)在MeOH(150mL)中回流下搅 拌2小时。将反应物用H2O稀释(200mL)，用DCM(3×100mL)提取， 真空浓缩有机物。使残留物溶于1，4-二氧六环(150mL)/6N HCl(50mL) 并在回流下搅拌3小时。将反应物用DCM(3×100mL)提取，有机物 用H2O(150mL)和饱和NaHCO3溶液(150mL)顺序洗涤，干燥(Na2SO4) 并真空浓缩，得到4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基-磺酰基)环己酮(118) (11.1g，97％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.4(m，2H)，2.6(m，6H)， 7.73(d，1H，6.9Hz)，7.90(d，1H，J＝6.9Hz)，8.05(s，1H).
D.制备顺式，反式-N-苄基-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环 己胺(120+121)
于室温、氩气下，将NaBH4(3.78g，100mmol)在DCM(200mL)搅拌。 经30min加入2-乙基己酸(119)(50.5g，350mL)，并将生成的悬浮液 于室温下搅拌16小时。过滤反应物并加入到在DCM(50mL)中的4- 氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己酮(118)(11.1g，32.1mmol) 和苄基胺(4.8g，45mmol)中。于室温下搅拌反应物2h，用2N NaOH (100mL)和盐水(200mL)顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩。使残 留物溶于Et2O(300mL)，并用HCl(2M在Et2O中，40mL)酸化。过 滤收集产生的沉淀，溶于含极少量MeOH的H2O(200mL)中，用2N NaOH碱化至pH＝13并用DCM提取(3×150mL)。干燥(Na2SO4)有 机物，真空浓缩，残留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/PE，1∶3-1∶1， MeOH/DCM，1∶20)，得到顺式-N-苄基-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基 磺酰基)环己胺(120)(10.0g，72％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.8(m， 6H)，2.5(m，1H)，2.6(m，1H)，7.3(m，5H)，3.76(s，2H)，7.67(d，1H，6.9 Hz)，7.86(d，1H，J＝6.9Hz)，8.02(s，1H).和反式-N-苄基-4-氟-4-(3-氟 -5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(121)(3.1g，22％).
E.制备顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺盐酸盐 (124)
于室温下，在Pd(OH)2/C(203wt.％，1.5g，3.8mmol)的存在下，将在 MeOH(50mL)中的顺式-N-苄基-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰 基)环己胺(120)(10.0g，23.0mmol)在H2(40psi)氢化72h。通过 Celite过滤反应物和真空浓缩滤液。使残留物溶于DCM(100mL)，加 入DIPEA(2mL)和Boc2O(7.0g，32mmol)，将反应物于室温下搅拌 30min，用饱和NH4Cl(100mL)和H2O(100mL)顺序洗涤，干燥 (Na2SO4)，真空浓缩残留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/PE，0∶10- 1∶10)，得到顺式4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环己基氨基甲 酸叔丁基酯(122)(6.6g，65％)和顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 环己基氨基甲酸叔丁基酯(123)(3.4g，35％)。使顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三 氟甲基)-苯基磺酰基)环己基氨基甲酸酯(122)溶于EtOAc(30mL)，将 HCl(g)鼓泡通入该溶液30s，于室温下将反应物搅拌30min，然后真 空浓缩，得到顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺盐酸 盐(124)(5.5g，65％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ2.1(m，6H)，2.4(m， 2H)，3.5(m，1H)，8.0(m，3H).
实施例27：合成顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-N-甲基环 己胺(125)的方法
A.制备顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基甲酸 叔丁基酯(122)
将顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯磺酰基)环己胺盐酸盐(124)(1.5g， 4.0mmol)、二碳酸二叔丁酯(125)(960mg，4.4mmol)和TEA(1.23mL， 8.8mmol)于室温搅拌5天。用DCM稀释反应物，用1M HCl、NaHCO3饱和溶液和NaCl饱和溶液顺序洗涤，分离，干燥并真空浓缩，得到 顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯磺酰基)环己基氨基甲酸叔丁酯(122) (1.46g，83.0％)，其无须进一步纯化而使用；1H NMR(300mHz CDCl3) δ130(s 9H)，1.87(m，7H)，2.21(m，2H)，3.85(bs，1H)，4.63(bs，1H) 7.69(d，1H，J＝7.83Hz)，7.84(d，1H，J＝7.05Hz)，8.00(s，1H).
B.制备顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-N-甲基环己胺 (125)
在氩气下，将顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基 甲酸叔丁基酯(122)(750mg，1.7mmol)和LiAlH4(77mg，2.04mmol) 在无水THF(10mL)中回流下加热30分钟。冷却反应物，用1M NaOH 猝灭，过滤，并真空浓缩。使残留物溶于EtOAc，用NH4Cl饱和溶液 和NaHCO3饱和溶液顺序洗涤，分离，干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得 到顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-N-甲基环己胺(125) (510mg，84％)，其无须进一步纯化而使用。所需产物通过随后的衍 生化证实。
实施例28：合成(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(135)的方法
A.制备3-氧代环丁烷羧酸甲基酯(127)
于室温下，将3-氧代环丁烷羧酸甲基酯(126)(5.0g，44mmol)在 MeOH/DCM(1∶6v/v，30mL)中搅拌。在搅拌下滴加入三甲基甲硅烷 基重氮甲烷(2.0M溶液，23mL，46mmol)直至出现持久的黄色。加 入AcOH直至溶液脱色，然后真空浓缩反应物，得到3-氧代环丁烷羧 酸甲基酯(127)(4.65g，83％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ3.25(m，5H)， 3.68(s 3H).
B.制备3-羟基环丁烷羧酸甲基酯(128)
于0℃，将3-氧代环丁烷羧酸甲基酯(127)(2.65g，21mmol)在MeOH (15mL)中搅拌。分批加入NaBH4(800mg，21mmol)，并将反应物搅 拌20分钟。加入H2O(2mL)并将反应物真空浓缩。使残留物溶于 EtOAc并用NH4Cl饱和溶液和NaHCOs饱和溶液顺序洗涤，分离有机 物，干燥(MgSO4)，和真空浓缩，得到3-羟基环丁烷羧酸甲基酯(128) (1.23g，45％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.12(m，2H)，2.12(m 3H)， 2.80(bs，1H)，3.62(s，3H)，4.08(m，1H).
C.制备3-(甲基磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲基酯(129)
于室温下，将3-羟基环丁烷羧酸甲基酯(128)(4g，30.5mmol)和TEA (8.5mL，61.1mmol)在THF(50mL)中搅拌。加入甲烷磺酰氯(2.5mL， 32mmol)并将反应物于室温下搅拌1小时。过滤反应物和真空浓缩滤 液。使残留物溶于DCM并用饱和NH4Cl溶液和饱和NaHCO3溶液顺 序洗涤。干燥(MgSO4)有机物并真空浓缩，得到3-(甲基磺酰基氧基) 环丁烷羧酸甲基酯(129)(3.36g，53％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ 2.73(m，6H)，2.98(s 3H)，3.68(s，3H)，4.90(m，1H)。产物无须进一步 纯化而使用。
D.制备3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯(130)
将3-(甲磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲酯(129)(3.36g，16.2mmol)、TEA (4.7mL，34mmol)和3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(2.9g，16.2mmol)在 MeCN中回流下搅拌16小时。真空浓缩反应物，残留物经自动化快 速层析法纯化(2％EtOAc/PE)，得到3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧 酸甲酯(130)(1.05g，22％)；1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.23(m，2H)， 2.74(m 2H)，3.26(m，1H)，3.64(s，3H)，4.00(m，1H)，7.30(m，4H).
E.制备3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁烷羧酸甲基酯(131) 于室温下，将3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯(130)(1.05g， 4.1mmol)和m-CPBA(77％，2.2g，12.3mmol)在DCM中搅拌(30mL) 16小时。过滤反应物，用DCM(30mL)洗涤，和有机物用10％NaOH 溶液洗涤两次并干燥(MgSO4)。真空除去DCM，得到3-(3-(三氟甲基) 苯基磺酰基)环丁烷羧酸甲基酯(131)(920mg，70％)。1H NMR(300 mHz CDCl3)δ2.50(m，2H)，2.76(m 2H)，3.25(m，1H)，3.64(s，3H)， 3.85(m，1H)，7.68(t，1H，J＝7.86Hz)，7.87(d，1H，J＝7.89Hz)，8.02 (d，1H，J＝7.86Hz)，8.09(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
F.制备(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲醇(132)
在氩气下，将3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁烷羧酸甲基酯(131)(920 mg，2.9mmol)在无水THF中搅拌。加入LiAlH4(122mg，3.2mmol)。 将反应物搅拌1小时，然后用滴加入的10％NaOH溶液猝灭。通过过 滤除去生成的沉淀，用额外的THF洗涤，真空浓缩有机物。使粗残留 物溶于EtOAc，用饱和NH4Cl溶液和饱和NaHCO3溶液顺序洗涤，干 燥(MgSO4)并真空浓缩，得到(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲醇 (132)(700mg，81％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.08(m，2H)，2.60 (m，2H)，3.59(d，2H，J＝5.31Hz)，3.73(m，1H)，4.16(d，2H，J＝5.61 Hz)，7.67(t，1H，J＝7.83Hz)，7.86(d，1H，J＝7.86Hz)，8.01(d，1H，J＝ 7.86Hz)，8.08(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
G.制备甲烷磺酸(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲基酯(133)
于室温下，将(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲醇(132)(700mg， 2.4mmol)和TEA(420μL，3.0mmol)在DCM(15mL)中搅拌。加入甲 烷磺酰氯(222μL，2.9mmoL)并将反应物搅拌30分钟，过滤并真空浓 缩。使粗物质溶于DCM，用饱和NH4CL溶液和饱和NaHCO3溶液顺 序洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩，得到(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 环丁基)甲基甲烷磺酸酯(133)(870mg，98％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.17(m，2H)，2.67(m，2H)，2.96(s，3H)，3.75(m，1H)，7.66(t， 1H，J＝7.86Hz)，7.84(d，1H，J＝7.86Hz)，8.01(d，1H，J＝7.86Hz)， 8.08(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
H.制备1-(3-(叠氮基甲基)环丁基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(134)
将(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲基甲烷磺酸酯(133)(870 mg，2.4mmol)、TEA(500μL，3.6mmol)和NaN3(312mg，4.8mmol) 在MeCN(15mL)中搅拌回流16小时。真空浓缩反应物，使残留物溶 于EtOAc，用H2O洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩，得到1-(3-(叠氮 基甲基)环丁基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(134)(630mg，82％)。1H NMR (300mHz CDCl3)δ2.10(m，2H)，2.64(m，2H)，3.33(d，2H，J＝5.67 Hz)，3.73(m，1H)，7.67(t，1H，J＝7.83Hz)，7.86(d，1H，J＝7.80Hz)， 8.02(d，1H，J＝7.68Hz)，8.08(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
I.制备(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(135)
使1-(3-(叠氮基甲基)环丁基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(134)(570mg，1.8 mmol)和Pd(OH)2(60mg，cat)溶于EtOH(20mL)并置于巴尔氢化器中。 于室温下将反应物在H2(50psi)搅动1h。通过硅藻土过滤反应物和真 空浓缩滤液，得到(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-环丁基)甲胺(135)(520 mg，100％)其无须进一步纯化而使用。
实施例29：合成反式-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(142) 的方法
A.制备顺和反式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲酯(136和137)
将3-(甲基磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲基酯(129)(1.53g，7.4mmol)， TEA(2.1mL，15mmol)和3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(1.3g，7.4mmol) 在MeCN中回流下搅拌16小时。真空浓缩反应物，残留物经自动化 快速层析法纯化(2％EtOAc/PE)，得到反式-甲基3-(3-(三氟甲基)苯硫 基)-环丁烷羧酸酯(136)(870mg，40.5％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ 2.24(m，2H)，2.74(m，2H)，3.27(m，1H)，3.64(s，3H)，3.96(m，1H)， 7.32(m，4H)和顺式-甲基3-(3-(三氟甲基)苯硫基)-环丁烷羧酸酯(137) (70mg，3.3％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.33(m，2H)，2.66(m，2H)， 3.03(m，1H)，3.61(s，3H)，3.69(m，1H)，7.34(m，4H)。使用选择性 NOE去偶合实验证实两种异构体。
B.制备反式-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(142)
按照与对(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(135)所述的相同合 成方案，使用反式-甲基3-(3-(三氟甲基)苯硫基)-环丁烷羧酸酯(136)制 备反式-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(142)。
实施例30：合成反式-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯 (152)的方法
方法A
A.制备硫代氨基甲酸O-3-氟-5-(三氟甲基)苯基二乙酯(144)
于室温下，将3-氟-5-(三氟甲基)苯酚(143)(10.0g，55.55mmol)和二乙 基硫代氨基甲酰氯(9.27g，61.04mmol)在DMF(100mL)中搅拌16小 时。将反应物用H2O稀释(100mL)，用Et2O提取(3x 50mL)，干燥 (Na2SO4)有机物，并真空浓缩，得到3-氟-5-(三氟甲基)苯基二乙基硫 代氨基甲酸酯(144)(15.3g，93％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.34(t， 6H，J＝7.08Hz)，3.71(q，2H，J＝7.05Hz)，3.88(q，2H，J＝7.14Hz)，7.04 (d，1H，J＝8.88Hz)，7.22(s，1H)，7.23(d，1H，J＝8.01Hz)。产物无须进 一步纯化而使用。
B.制备硫代氨基甲酸S-3-氟-5-(三氟甲基)苯基二乙酯(145)
将在密封容器中的硫代氨基甲酸3-氟-5-(三氟甲基)苯基二乙酯(144) (4.7g，15.9mmol)于230℃微波反应器中加热1h。然后粗物质经自 动化快速层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到硫代氨基甲酸S-3-氟-5-(三 氟甲基)苯基二乙酯(145)(2.79g，60％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 1.2-1.3(m，6H)，3.44(q，4H，J＝7.14Hz)，7.34(d，1H，J＝8.19Hz)，7.47 (d，1H，J＝8.31Hz)，7.57(s，1H).
C.制备3-氟-5-(三氟甲基)苯硫酚(146)
将硫代氨基甲酸S-3-氟-5-(三氟甲基)苯基二乙酯(145)(0.1g，0.3 mmol)和NaOH(70mg，1.69mmol)在脱气的EtOH(10mL)/H2O(2mL) 中回流加热2h。将反应物用H2O稀释，用1M HCl酸化并用Et2O(3x 10mL)提取。干燥(Na2SO4)有机物并真空浓缩，得到3-氟-5-(三氟甲基) 苯硫酚(146)；1H NMR(300mHz，CDCl3)δ7.11(d，1H，J＝8.34Hz)， 7.16(d，1H，J＝8.73Hz)，7.31(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
D.制备反式-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯(147) 将3-氟-5-(三氟甲基)苯硫酚(146)(0.82g，4.18mmol)、甲磺酸酯(129) (0.87g，4.18mmol)和K2CO3(0.84g，6.12mmol)在MeCN(50mL)中 回流加热3h。过滤反应物，真空浓缩滤液，使残留物分配于EtOAc 和H2O之间。干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩，残留物经自动化快速 层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到反式-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)环 丁烷羧酸甲基酯(147)(0.26g，20％)。1H NMR(300mHz，CDCl3)δ 2.31-2.38(m，2H)，2.84-2.87(m，2H)，3.32-3.34(m，1H)，3.73(s，3H)， 4.06(m，1H)，7.03(d，1H，J＝8.88Hz)，7.10(d，1H，J＝8.34Hz)，7.19(s， 1H).
按照与对(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(135)所述的相同的 合成方案，使用3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸酯(147)制备 反式-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(152)。
方法B
合成反式-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)-环丁烷羧酸甲酯(147)的方法
于室温下，将Mg条(1.20g，50.0mmol；用己烷/Et2O清洁)和I2(引 发剂)在无水THF(75mL)中搅拌。滴加入1-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯 (114)(10.9g，45.0mmol)，并于室温下将反应物搅拌3h(用加热枪启 动反应)。加入硫(1.44g，45.0mmol)并将反应物于室温下搅拌1小时。 加入额外的3-(甲基磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲基酯(129)(9.00g，43.3 mmol)并将反应物在回流下搅拌72h。加入0.5N HCl(200mL)，将反 应物用EtOAc提取(3×100mL)并干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩，残 留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/PE，0∶20-1∶20)，得到反式-3-(3- 氟-5-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯(147)(7.0g，52％)。1H NMR (300MHz，CDCl3)δ2.3(m，2H)，2.9(m，2H)，3.4(m，1H)，3.74(s，3H)， 4.07(m，1H)，7.03(d，1H，J＝8.7Hz)，7.10(d，1H，J＝8.7Hz)，7.19(s， 1H)；和顺式-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯(153)(0.7 g，5％)，1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.4(m，2H)，2.8(m，2H)，3.2(m， 1H)，3.71(s，3H)，3.86(m，1H)，7.1(m，2H)，7.23(s，1H).
实施例31：合成顺式3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(161)的 方法
A.制备3-(甲氧基羰基)环丁基4-硝基苯甲酸酯(155)
于0℃、氩气下，将3-氧代环丁烷羧酸甲酯(128)(5g，38.5mmol)、 对-硝基苯甲酸(154)(6.4g，38.5mmol)和三苯基膦(11.09g，42.3 mmol)在无水THF中搅拌。滴加入在无水THF(10mL)中的DIAD(8.3 mL，42.3mmol)，将反应物搅拌16h，然后使温热至室温。真空浓缩 反应物，残留物经自动化柱层析法纯化(10％EtOAc/PE)，得到4-硝基 苯甲酸3-(甲氧基羰基)环丁基酯(155)(7.52g，70.0％)。1H NMR(300 mHz CDCl3)δ2.54(m，2H)，2.81(m，2H)，3.23(m，1H)，3.75(s，3H)， 5.48(m，1H)，8.21(d，2H，J＝8.37Hz)，8.30(d，2H，J＝7.92Hz).
B.制备3-氧代环丁烷羧酸甲基酯(156)
于室温下，将3-(甲氧基羰基)环丁基4-硝基苯甲酸酯(155)(11.0g， 39.6mmol)和K2CO3在MeOH中搅拌3h。真空浓缩反应物，溶于 DCM(约15mL)。通过过滤除去生成的沉淀，用额外的DCM洗涤。 真空浓缩滤液，残留物经自动柱层析纯化(20％EtOAc/PE)，得到3- 氧代环丁烷羧酸甲酯(156)(2.07g，41％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ 2.21(m，3H)，2.56(m，2H)，3.03(m，1H)，3.69(s，3H)，4.55(m，1H).
C.制备3-(甲基磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲基酯(129)
于室温、氩气下，将3-氧代环丁烷羧酸甲基酯(156)(2.27g，17.6mmol) 和TEA(3.7mL，26.3mmol)在无水THF(20mL)中搅拌。加入甲烷磺 酰氯(1.64mL，21.1mmol)，并将反应物于室温下搅拌1小时。过滤反 应物，真空浓缩滤液，使残留物溶于DCM并用饱和NH4Cl溶液和饱 和NaHCO3溶液顺序洗涤。干燥(MgSO4)有机物并真空浓缩，得到3-(甲 基磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲基酯(129)(3.66g，100％)。1H NMR(300 mHz CDCl3)δ2.65(m，4H)，3.0(s 3H)，3.15(m，1H)，3.72(s，3H)， 5.24(m，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
D.制备顺式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁烷羧酸甲基酯(137)
于90℃，将3-(甲基磺酰基氧基)环丁烷羧酸甲基酯(129)(3.66g，17.6 mmol)、K2CO3(4.8g，35mmol)和3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(3.1g，17.6 mmol)在DMF中搅拌16小时。将反应物用Et2O稀释并用饱和 NaHCO3和饱和NaCl溶液顺序洗涤。干燥(Na2SO4)有机物，真空浓缩 残留物经自动化快速层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到顺式-3-(3-(三氟 甲基)苯硫基)-环丁烷羧酸甲基酯(137)(1.56g，30％)。1H NMR(300 mHz CDCl3)δ2.33(m，2H)，2.66(m，2H)，3.03(m，1H)，3.61(s，3H)， 3.69(m，1H)，7.34(m，4H)
E.制备顺式-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(161)
使用顺式-甲基3-(3-(三氟甲基)苯硫基)-环丁烷羧酸酯(137)按照与对 (3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(135)所述的相同的合成方案 制备顺式-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)甲胺(161)。
实施例32：合成反式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁胺盐酸盐 (165)的方法
A.制备反式-3-((3-(三氟甲基)-苯硫基)甲基)-环丁基氨基甲酸叔丁基 酯(163)
于0℃、氩气下，将反式-3-(羟基甲基)环丁基氨基甲酸叔丁基酯(162) (480mg，2.38mmol)和i-Pr2NEt(0.87mL，4.78mmol)在无水CH2Cl2(20mL)中搅拌。缓慢加入MeSO2Cl(0.22mL，2.89mmol)，并将反应 物搅拌1小时，然后用饱和NH4Cl水溶液和饱和NaHCO3水溶液顺序 洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩。于90℃、氩气下，将生成的甲磺 酸酯、3-(三氟甲基)苯硫酚(0.85g，4.77mmol)和K2CO3(658mg，4.7 mmol)在DMF(5mL)中搅拌18小时。真空除去溶剂，使残留物溶于 EtOAc，用水和盐水顺序洗涤。干燥(Na2SO4)有机物，残留物经自动 化快速层析法纯化(5∶1PE∶EtOAc)，得到反式-3-((3-(三氟甲基)-苯硫基) 甲基)-环丁基氨基甲酸叔丁酯(163)(621mg，100％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.03(m，2H)，2.2(m，2H)，2.4(m，1H)，3.1(d，2 H，J＝7.92Hz)，4.22(m，1H)，4.7(bs，1H)，7.40(m，3H)，7.52(m，1H).
B.制备反式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁基-氨基甲酸叔丁 基酯(164)
于室温下，将反式-3-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)环丁基氨基甲酸叔丁 酯(163)(621g，2.38mmol)和m-CPBA(1.2g，70％，4.8mmol)在DCM 中搅拌(100mL)16小时。用DCM稀释反应物和有机物用10％NaOH 和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到反式-3-((3-(三氟甲 基)苯基磺酰基)甲基)环丁基-氨基甲酸叔丁基酯(164)(1.1g，100％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.09(m，4H)，2.66(m，1H)，3.2(d， 2H，J＝7.47Hz)，4.08(m，1H)，4.63(bs，1H)，7.70(t，1H，J＝7.55Hz)， 7.86(d，1H，J＝7.68Hz)，8.03(d，1H，J＝7.95Hz)，8.08(s，1H).
C.制备反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁胺盐酸盐(165)
于室温下，将反式-3-((3-(三氟甲基)-苯基磺酰基)甲基)环丁基-氨基甲 酸叔丁基酯(164)(1.1g，2.38mmol)溶于MeOH。将HCl气态鼓泡通 入该溶液5min并将反应物于室温下搅拌1小时。真空除去溶剂，得 到反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁胺盐酸盐(164)(600mg， 100％).MS(M+H＝293.9.0)(对C12H14F3NO2S的计算值，293.07)。产 物无须进一步纯化而使用。
实施例33：合成反式-3-(-1-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)乙基)环丁胺(168) 的方法
A.制备2-(反式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-甲基)环丁基)-异二氢吲 哚-1，3-二酮(166)
在氩气下，将反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁胺盐酸盐 (165)(730mg，2.2mmol)、苯二甲酸酐(328mg，2.2mmol)和Et3N(0.35 mL，2.2mmol)在甲苯(20mL)中回流下搅拌2小时。真空浓缩反应物， 溶于EtOAc，用H2O和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩，粗 产物经自动化快速层析法纯化(4∶1PE∶EtOAc)，得到2-(反式-3-((3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)-甲基)环丁基)-异二氢吲哚-1，3-二酮(166)(701mg， 83％)；1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.15(m，2H)，3.01(m，3H)，3.32(d， 2H，J＝7.17Hz)，4.82(m，1H)，7.64(m，2H)，7.74(m，3H)，7.86(d，1 H，J＝7.35Hz)，8.07(d，1H，J＝7.98Hz)，8.12(s，1H).
B.制备2-(反式-3(-1-(3-(三氟甲基)-苯基-磺酰基)-乙基)环丁基)异二 氢吲哚-1，3-二酮(167)
于-78℃、氩气下，将2-(反式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)-甲基)环 丁基)-异二氢吲哚-1，3-二酮(166)(701g，1.66mmol)在THF(7mL)中搅 拌。滴加入LDA(0.66M，8mL，5.28mmol)，并将反应物于-78℃ 搅拌30分钟。滴加入MeI(0.3mL，4.8mmol)，于0℃将反应物搅拌 2小时，然后用饱和NH4Cl(30mL)猝灭。用EtOAc提取水溶液，有机 物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩，粗物质经自动化快速层析 法纯化(5∶1PE∶EtOAc)，得到2-(反式-3(-1-(3-(三氟甲基)-苯基-磺酰基)- 乙基)环丁基)异二氢吲哚-1，3-二酮(167)(220mg，30％).
C.制备反式-3-(-1-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)乙基)环丁胺(168)
于室温下，将2-(反式-3(-1-(3-(三氟甲基)-苯基-磺酰基)-乙基)环丁基) 异二氢吲哚-1，3-二酮(167)(220mg，0.5mmol)和NH2NH2(0.1mL，1.8 mmol)在EtOH(5mL)中搅拌18小时。过滤反应物，真空浓缩滤液， 残留物经自动化快速层析法纯化(5∶1DCM∶MeOH)，得到反式 -3-(-1-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)乙基)环丁胺(168)(130mg，89％).MS (M+H＝307.9)(对C13H16F3NO2S的计算值，307.09).
实施例34：合成反式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁胺 (178)的方法
方法A：
A.制备顺式-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)环丁烷羧酸甲基酯(170)
于室温、氩气下，将顺式-3-羟基环丁烷羧酸甲基酯(169)(3.3g，25.19 mmol)、咪唑(1.72g，25.19mmol)和DMAP(cat.)在DCM(100mL)中 搅拌。加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(3.8g，25.19mmol)，将生成的 悬浮液搅拌3小时。将反应物用饱和NaHCO3(30mL)猝灭并用EtOAc 提取。有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩，粗残留物经自 动化快速层析法纯化(5/1PE∶EtOAc)，得到顺式-3-(叔丁基二甲基甲硅 烷氧基)环丁烷羧酸甲基酯(170)(3.5g，57％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ0.00(s，6H)，1.20(s，9H)，2.17(m，2H)，2.46(m，3H)，3.64(s， 3H)，4.10(m，1H).
B.制备顺式-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)环丁基)甲醇(171)
于0℃、氩气下，将顺式-甲基-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)环丁烷羧 酸酯(170)(2.63g，10.78mmol)在Et2O(60mL)中搅拌。分批加入LAH (517mg，12.94mmol)并将反应物搅拌2小时，使温热至室温。冷却 反应物至0℃，顺序用H2O(0.52mL)和1M NaOH(15％，1.56mL) 和H2O(0.52mL)猝灭，搅拌3小时，然后通过硅藻土过滤，用EtOAc 洗涤(300mL)。分离有机物，干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到顺式 -3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)环丁基)甲醇(171)(1.92g，82％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ0.00(s，6H)，0.89(s，9H)，1.53(m，3H)，1.91 (m，1H)，2.29(m，2H)，3.56(s，2H)，4.10(m，1H).
C.制备叔丁基二甲基(顺式-3-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)-环丁氧基) 硅烷(172)
于0℃、氩气下，将顺式-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)环丁基)甲醇(171) (1.92g，8.88mmol)和i-Pr2NEt(2.5mL，13.67mmol)在无水DCM(30 mL)中搅拌。加入MeSO2Cl(0.85mL，11.10mmol)，将反应物搅拌1 小时，用饱和NH4Cl溶液和饱和NaHCO3溶液顺序洗涤，干燥 (Na2SO4)，并真空浓缩。于90℃、氩气下，将甲磺酸酯(meslyate)、 3-(三氟甲基)苯硫酚(3.2g，17.95mmol)和K2CO3(2.5g，17.95mmol) 在DMF(20mL)中搅拌18小时。真空除去溶剂，使残留物溶于EtOAc， 有机物用水和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩和经自动化快 速层析法纯化(5∶1PE∶EtOAc)，得到叔丁基二甲基(顺式-3-((3-(三氟甲 基)苯基-硫基)甲基)-环丁氧基)硅烷(172)(3.2g，96％)。1H NMR(300 mHz CDCl3)δ0.00(s，6H)，0.90(s，9H)，1.64(m，2H)，1.98(m，1H)， 2.42(m，2H)，3.05(d，2H，J＝7.26Hz)，4.05(m，1H)，7.37(m，2H)， 7.45(m，1H)，7.53(s，1H).
D.制备叔丁基二甲基-顺式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁氧 基硅烷(173)
于室温下，将叔丁基-二甲基(顺式-3-((3-(三氟甲基)苯硫基)甲基)-环丁 氧基)硅烷(172)(1.9g，5.05mmol)和m-CPBA(3.1g，70％纯，12.6mmol) 在DCM中(70mL)搅拌16小时。加入额外的DCM(100mL)，有机物 用10％NaOH和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，得到叔 丁基二甲基-顺式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)环丁氧基)硅烷 (173)(2.04g，100％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ0.00(s，6H)，0.90(s， 9H)，1.64(m，2H)，2.16(m，1H)，2.42(m，2H)，3.28(d，2H，J＝7.2Hz)， 4.10(m，1H)，7.74(t，1H，J＝7.98Hz))，7.92(d，1H，J＝7.74Hz)，8.11 (d，1H，J＝7.77Hz)，8.17(s，1H).
E.制备叔丁基-二甲基-顺式-3-1-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)乙基)环丁 氧基)硅烷(174)
于-78℃、氩气下，将叔丁基二甲基-顺式-3-((3-(三氟甲基)苯基磺酰 基)-甲基)-环丁氧基)硅烷(173)(1.3g，3.014mmol)在THF(25mL)中搅 拌。滴加入n-丁基锂(2.3M溶液在己烷中)(1.9mL，4.37mmol)，并 将反应物搅拌30分钟。滴加入MeI(0.4mL，6.4mmol)，并于0℃将 反应物搅拌2小时，然后用饱和NH4Cl(30mL)溶液猝灭。用EtOAc 提取水溶液和有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩，粗物质经自 动化快速层析法纯化(5∶1PE∶EtOAc)，得到叔丁基二甲基-顺式 -3-1-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)乙基)环丁氧基)硅烷(174)(1.05mg，86 ％)；1H NMR(300mHz CDCl3)δ0.00(s，6H)，0.90(s，9H)，1.22(d，2H， J＝6.93)，1.73(m，2H)，2.03(m，1H)，2.34(m，2H)，3.12(m，1H)，4.06 (m，1H)，7.74(t，1H，J＝7.95Hz))，7.92(d，1H，J＝7.92Hz)，8.06(d，1 H，J＝7.98Hz)，8.14(s，1H).
F.制备叔丁基二甲基-顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环 丁氧基)硅烷(175) 于-78℃、氩气下，将叔丁基-二甲基-顺式-3-1-(3-(三氟甲基)-苯基-磺 酰基)乙基)环丁氧基)硅烷(174)(1.1g，2.6mmol)在THF(25mL)中搅 拌。滴加入n-丁基锂(2.3M溶液在己烷中)(1.8mL，3.9mmol)并将反 应物于-78℃搅拌30分钟。滴加入MeI(0.5mL，8.01mmol)，并将反 应物于0℃搅拌2小时，然后用饱和NH4Cl溶液(30mL)猝灭。用EtOAc 提取水溶液，有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩，粗物质 经自动化快速层析法纯化(5∶1PE∶EtOAc)，得到叔丁基二甲基-顺式 -3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁氧基)硅烷(175)(999mg， 87％)；1HNMR(300mHz CDCl3)δ0.00(s，6H)，0.90(s，9H)，1.22(s，6 H)，1.73(m，2H)，2.23(m，3H)，4.06(m，1H)，7.74(t，1H，J＝7.86Hz))， 7.92(d，1H，J＝7.71Hz)，8.06(d，1H，J＝7.74Hz)，8.14(s，1H).
G.制备顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇(176)
于-0℃、氩气下，将叔丁基二甲基-顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰 基)-丙-2-基)环丁氧基)硅烷(175)(990mg，2.27mmol)在THF(20mL) 中搅拌。加入TBAF(1M溶液在THF中，2.4mL，2.5mmol)，并将 反应物搅拌18小时，使温热至室温。真空除去溶剂，并使残留物溶 于EtOAc，用H2O和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩，粗物 质经自动化快速层析法纯化(3∶1PE∶EtOAc)，得到顺式-3-(2-(3-(三氟甲 基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇(176)(490mg，81％)：1H NMR(300 mHz CDCl3)δ1.30(s，6H)，1.76(m，3H)，2.33(m，3H)，4.16(m，1H)， 7.70(t，1H，J＝7.85Hz))，7.92(d，1H，J＝7.68Hz)，8.08(d，1H，J＝ 7.83Hz)，8.14(s，1H).
H.制备产物2-反式-3-(2-(3-(三氟甲基)-苯基-磺酰基)丙-2-基)环丁基) 异二氢吲哚-1，3-二酮(177)
于-0℃、氩气下，将顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)丙-2-基)-环丁 醇(176)(606mg，1.88mmol)、Ph3P(1.5g，5.64mmol)和邻苯二甲酰 亚胺(837mg，5.64mmol)在THF(25mL)中搅拌。加入DIAD(1.14mL， 5.64mmol)，搅拌反应物18小时，使温热至室温。真空除去溶剂，使 残留物溶于EtOAc，用H2O和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓 缩粗物质经自动快速层析纯化(4∶1PE∶EtOAc)，得到2-反式-3-(2-(3-(三 氟甲基)-苯基-磺酰基)丙-2-基)环丁基)异二氢吲哚-1，3-二酮(177)(696 mg，82％)；1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.40(s，6H)，2.6(m，2H)，2.87 (m，2H)，3.18(m，1H)，4.73(m，1H)，7.73(m，3H)，7.83(m，2H)，7.93 (d，1H，J＝7.68Hz)，8.08(d，1H，J＝7.86Hz)，8.15(s，1H).
I.制备反式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)-环丁胺(178)
于室温下，将反式-3-(2-(3-(三氟甲基)-苯基-磺酰基)-丙-2-基)环丁基) 异二氢吲哚-1，3-二酮(177)(696mg，1.54mmol)和NH2NH2(0.5mL， 9.90mmol)在EtOH(15mL)中搅拌18小时。过滤反应物，真空浓缩滤 液，粗品经自动化快速层析法纯化(5∶1DCM∶MeOH)，得到反式 -3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)-环丁胺(178)(395mg，80％)； 1HNMR(300mHz CDCl3)δ1.40(s，6H)，1.80(m，2H)，2.24(m，2H)， 2.92(m，1H)，3.46(m，1H)，7.72(t，1H，J＝7.78Hz))，7.92(d，1H，J＝ 7.77Hz)，8.05(d，1H，J＝7.68Hz)，8.12(s，1H).
方法B：合成顺式3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇(176) 的方法
J.制备5，甲烷磺酸5，8-二氧杂螺[3.4]辛-2-基甲基酯(179) 将3-氧代环丁烷羧酸甲基酯(126)(21g，160mmol)、TsOH(3.00g， 15.6mmol)和乙二醇(29.0g，468mmol)在迪安-斯塔克装置 (Dean-Stark apparatus)中的甲苯(200mL)中回流下搅拌16小时。加入 饱和NaHCO3(100mL)，并将该混合物用Et2O提取(3×100mL)。有 机物用盐水洗涤(150mL)，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，得到甲酯和 乙二醇酯的混合物，其无需分离或纯化而使用。于-0℃、氩气下，将 残留物在无水Et2O(400mL)中搅拌。分批加入LAH(6.83g，180 mmol)，并将反应物于室温下搅拌16小时。将反应物用H2O(7mL)， 4N NaOH(21mL)和H2O(7mL)猝灭，并将反应物搅拌16小时。混合 物通过Celite(硅藻土)过滤，用DCM/MeOH(1∶1V)洗涤，真空浓缩滤 液，残留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/PE，2∶1)，得到醇(17.4g， 76％)。于0℃在无水DCM(200mL)中搅拌醇。加入DIPEA(19.4g， 150mmol)和MsCl(15.6g，136mmol)，将反应物于室温下搅拌1小时， 然后用1M HCl(100mL)和盐水(2×100mL)顺序洗涤并真空浓缩，得 到5，8-二氧杂螺[3.4]辛-2-基甲基甲烷磺酸酯(179)(29.5g，98％(得自 醇))；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.2(m，2H)，2.5(m，3H)，3.02(s，3H)， 3.90(s，4H)，4.27(d，2H，J＝6.9Hz).
K.制备2-((3-三氟甲基)苯磺酰基)甲基)-5，8-二氧杂螺[3.4]辛烷(180)
于室温、氩气下，将Na(3.41g 148mmol)在EtOH(400mL)中搅拌。 加入3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(24.6g，138mmol)。将反应物于室温下 搅拌30min，然后加入5，8-二氧杂螺[3.4]辛-2-基甲基甲烷磺酸酯(179) (28.7g，129mmol)，并将该混合物于90℃加热1小时。加入EtOAc(300 mL)，将反应物通过硅藻土过滤，真空浓缩滤液，并使残留物溶于DCM (1L)。于0℃加入NaHCO3(100g)和m-CPBA(max 77％，80g，345 mmol)并将反应物于室温下搅拌16小时。加入1N NaOH(600mL)和 饱和Na2S2O3(50mL)，将混合物搅拌30分钟，分离有机层，含水层 用DCM(2×100mL)提取。合并的有机物用盐水(300mL)洗涤，干燥 (Na2SO4)，真空浓缩，残留物经自动化柱层析法纯化(EtOAc/PE，1∶2- 1∶1)，得到2-((3-三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)-5，8-二氧杂螺[3.4]辛烷 (180)(38.6g，89％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.1(m，2H)，2.5(m， 3H)，3.34(m，2H)，3.85(s，4H)，7.74(t，1H，J＝7.5Hz)，7.93(d，1H，J＝ 7.5Hz)，8.10(d，1H，J＝7.5Hz)，8.17(s，1H).
L.制备2-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)-5，8-二氧杂螺[3.4]辛烷 (181)
于室温、氩气下，将2-((3-三氟甲基)苯基磺酰基)甲基)-5，8-二氧杂螺[3.4] 辛烷(180)(37.0g，110mmol)在无水DMF(180mL)中搅拌。分批加入 NaH(60％在矿物油中，5.20g，130mmol)，并将反应物于室温下搅拌 30分钟。加入MeI(17.0g，120mmol)，并将反应物于室温下搅拌16 小时和于60℃搅拌1小时。将反应物用H2O猝灭并除去溶剂。加入 H2O(250mL)并将反应物用EtOAc提取(3×250mL)。有机物用盐水洗 涤(200mL)，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。使残留物(起始原料，单-甲基 化和二-甲基化原料的混合物)溶于DMF，如上用NaH和MeI处理另 外3次。粗产物硅胶柱纯化，用EtOAc/PE，1∶10和EtOAc/PE，1∶1顺 序洗脱，得到2-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)-5，8-二氧杂螺[3.4] 辛烷(181)(38.7g，97％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.30(s，6H)，2.3 (m，4H)，2.6(m，1H)，3.9(m，4H)，7.73(t，1H，J＝7.5Hz)，7.92(d，1H，J ＝7.5Hz)，8.07(d，1H，J＝7.5Hz)，8.13(s，1H).
M.制备3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁酮(182)
以与4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(118)类似的方式， 使用2-(2-(3-三氟甲基)苯磺酰基)丙-2-基)-5，8-二氧杂螺[3.4]辛烷(181) (38.5g，106mmol)制备产物。从EtOAc/石油醚中重结晶，得到3-(2-(3- 三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁酮(182)(33.1g，97％)；1H NMR (300MHz，CDCl3)δ1.30(s，6H)，3.0(m，1H)，3.10(m，4H)，7.77(t，1H，J ＝7.5Hz)，7.97(d，1H，J＝7.5Hz)，8.10(d，1H，J＝7.5Hz)，8.16(s，1H).
N.制备顺式-3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇(176)
于0℃，将3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁酮(182)(6.40g， 20.0mmol)在MeOH(80mL)中搅拌。加入NaBH4(1.10g，30.0mmol) 并将反应物于0℃搅拌30分钟。加入H2O(100mL)，真空除去MeOH， 含水层用EtOAc提取(3×50mL)。干燥(Na2SO4)有机物，并真空浓缩， 得到顺式-3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇(176)(6.60g， 100％)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.27(s，6H)，1.8(m，2H)，2.3(m， 3H)，4.1(m，1H)，7.73(t，1H，J＝7.5Hz)，7.93(d，1H，J＝7.5Hz)，8.07(d， 1H，J＝7.5Hz)，8.14(s，1H).
实施例35：合成顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁胺盐 酸盐(184)的方法
A.制备反式-3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇(183)
于0℃、氩气下，将顺式-3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇 (176)(5.60g，17.5mmol)、Ph3P(6.88g，26.3mmol)和4-硝基苯甲酸 (154)(3.84g，23.0mmol)在THF(60mL)中搅拌。滴加入DIAD(5.31 g，26.3mmol)，并将反应物于室温下搅拌16小时。真空除去溶剂。 使残留物溶于MeOH(150mL)，加入K2CO3(1.6g，12mmol)，并将 反应物于室温下搅拌1小时。真空浓缩反应物，残留物经自动化柱层 析法纯化(EtOAc/PE，1∶2-2∶1)，得到反式-3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰 基)丙-2-基)环丁醇(183)(5.0g，89％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.30 (s，6H)，2.0(m，2H)，2.3(m，2H)，2.9(m，1H)，4.3(m，1H)，7.73(t，1H，J ＝7.5Hz)，7.93(d，1H，J＝7.5Hz)，8.06(d，1H，J＝7.5Hz)，8.12(s，1H).
B.制备顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)丙-2-基)环丁胺盐酸盐(184)
以与反式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁胺盐酸盐(178) 类似的方式，使用反式-3-(2-(3-三氟甲基)苯基磺酰基)丙-2-基)环丁醇 (183)(4.80g，14.9mmol)制备产物，得到顺式-3-(2-(3-(三氟甲基)苯 基磺酰基)丙-2-基)环丁胺盐酸盐(184)(5.0g，94％)；1H NMR(300 MHz CD3OD)δ1.29(s，6H)，2.1(m，2H)，2.4(m，2H)，2.7(m，1H)，3.65 (m，1H)，7.92(t，1H，J＝7.5Hz)，8.1(m，3H)，8.19(d，1H，J＝7.5Hz).
实施例36：合成反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁胺盐酸盐(189) 的方法
A.制备反式甲烷磺酸-3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁基酯(186)
顺式-3-羟基环丁基氨基甲酸叔丁基酯(185)依据WO2005/116009A1中 详述的方法合成。
于0℃、氩气下，将顺式-3-羟基环丁基氨基甲酸叔丁基酯(185)(720 mg，3.89mmol)和i-Pr2NEt(1mL，5.40mmol)在无水CH2Cl2(15mL) 中搅拌。加入甲烷磺酰氯(0.37mL，4.85mmol)并将反应物搅拌1小时。 有机物用饱和NH4Cl水溶液和饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤，干燥 (Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到反式-3-(叔丁氧基羰基氨基)环丁 基甲烷磺酸酯(186)，其无须证实或进一步纯化而使用。
B.制备反式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁基氨基甲酸叔丁基酯(187)
于90℃、氩气下，将以上制备的粗反式-甲烷磺酸3-(叔丁氧基羰基氨 基)环丁基酯(186)、3-(三氟甲基)苯硫酚(14)(1.4g，7.85mmol)和 K2CO3(1.1g，7.78mmol)在DMF(5mL)中搅拌18小时。真空浓缩反 应物，使残留物溶于EtOAc，用H2O和盐水顺序洗涤。干燥(Na2SO4) 有机物，过滤，真空浓缩，粗物质经自动化快速层析法纯化(5∶1 PE/EtOAc)，得到反式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)-环丁基氨基甲酸叔丁基 酯(187)(1.1g，82％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.36(m， 4H)，3.77(m，1H)，3.82(bs，1H)，4.68(bs，1H)，7.30(m，4H).
C.制备反式-3-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环丁基氨基甲酸叔丁酯(188)
于室温下，将反式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁基氨基甲酸叔丁基酯 (187)(1.1g，3.17mmol)和m-CPBA(1.9g，70％，7.7mmol)在DCM (100mL)中搅拌16小时。加入额外的DCM(100mL)，有机物用10％ NaOH和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩，得到反 式-3-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环丁基氨基甲酸叔丁酯(188)(1.3g， 100％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.40(s，9H)，2.36(m，2H)，2.79(m， 2H)，3.71(m，1H)，4.24(m，1H)，4.68(bs，1H)，7.66(t，1H，J＝7.78 Hz)，7.86(d，1H，J＝7.98Hz)，8.01(d，1H，J＝7.89)，8.09(s，1H).
D.制备反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁胺盐酸盐(189)
于室温下，将反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基氨基甲酸叔丁基 酯(188)(1.3g，3.17mmol)在MeOH(20mL)中搅拌。将气态HCl鼓泡 通入5分钟，将反应物搅拌1小时，然后真空浓缩，得到反式-3-(3-(三 氟甲基)-苯基磺酰基)-环丁胺盐酸盐(189)(998mg，100％)。1H NMR (300mHz-CD3OD)δ2.60(m，2H)，2.83(m，2H)，4.06(m，2H)，7.88(t， 1H，J＝8.20Hz)，8.13(d，1H，J＝7.92Hz)，8.23(s，2H).
实施例37：合成顺式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁胺盐酸盐(193) 的方法
A.制备顺式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁基氨基甲酸叔丁酯(191)反 式-3-羟基环丁基氨基甲酸叔丁酯(190)依据WO2005/116009A1合成。
于0℃、氩气下，将反式-3-羟基环丁基氨基甲酸叔丁基酯(190)(587 mg，3.14mmol)和i-Pr2NEt(1.1mL，6.28mmol)在无水DCM(30mL) 中搅拌。滴加入MeSO2Cl(0.37mL，4.85mmol)，并将反应物搅拌1 小时。然后用饱和NH4Cl溶液和饱和NaHCO3水溶液顺序洗涤反应物。 干燥(Na2SO4)有机物，并真空浓缩。于90℃、氩气下，将甲磺酸酯，3-(三 氟甲基)苯硫酚(0.84g，4.7mmol)和K2CO3(866mg，6.36mmol)在DMF (10mL)中搅拌18小时。真空除去溶剂，使残留物溶于EtOAc，用水 和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩残留物经自动化快速层析 法纯化(5∶1PE∶EtOAc)，得到顺式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁基氨基 甲酸叔丁基酯(191)(700g，71％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.43(s，9 H)，1.93(m，2H)，2.93(m，2H)，3.52(m，1H)，4.14(bs，1H)，4.72(bs，1 H)，7.46(m，4H).
B.制备顺式-3-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环丁基氨基甲酸叔丁酯(192)
于室温下，将顺式-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)环丁基氨基甲酸叔丁酯(191) (700mg，2.02mmol)和m-CPBA(1.2g，70％纯，5.04mmol)在DCM 中(100mL)搅拌16小时。加入额外的DCM(100mL)，有机物用10％ NaOH和盐水顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，得到顺式-3-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)环丁基氨基甲酸叔丁基酯(192)(828mg，100％)。 1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.40(s，9H)，2.36(m，2H)，2.57(m，2H)， 3.41(m，1H)，4.10(m，1H)，4.85(bs，1H)，7.66(t，1H，J＝7.67Hz)， 7.86(d，1H，J＝7.17Hz)，7.97(d，1H，J＝7.44)，8.06(s，1H).
C.制备顺式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁胺盐酸盐(193)
使顺式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基氨基甲酸叔丁基酯(192) (828mg，2.02mmol)溶于MeOH。将HCl气体鼓泡通入该溶液5分钟， 然后将该反应物于室温下搅拌1小时。真空除去溶剂，得到顺式 -3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁胺盐酸盐(193)(470mg，75％).MS (M+H＝279.8)(对C11H12F3NO2S的计算值，279.05)；纯度：基于 LC/MS的100％。
实施例38：合成反式-1-(氨基甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇 (195)的方法
A.制备反式-1-(硝基甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(194) 于室温、氩气下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己酮(66)(1.81g， 6.0mmol)和硝基甲烷(524μL，9.75mmoL)在苯中搅拌。滴加入NaOEt 溶液(由Na(184mg，8mmol)和EtOH(10mL)制备)并将反应物搅拌 16小时。加入Et2O(80mL)，将反应物搅拌1小时，过滤收集生成的 沉淀。使收集的固体溶于H2O(50mL)，加入AcOH(0.5mL)并搅拌 30分钟。过滤收集产生的沉淀和在高真空下干燥，得到反式-1-(硝基 甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(194)(1.19g，54％)。1H NMR (300mHz-CD3OD)δ1.49(m，8H)，4.42(d，2H)，5.17(bs，1H)，8.18(m， 4H)。产物无须进一步纯化而使用。
B.制备反式-1-(氨基甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(195)
使反式-1-(硝基甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己醇(194)(1.19g， 3.2mmol)和Raney-Ni(cat)溶于AcOH(40mL)并置于巴尔氢化器中。 于室温下，将反应物在H2(50PSI)搅动2小时。通过硅藻土过滤反应 物和真空浓缩滤液，得到反式-1-(氨基甲基)-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰 基)环己醇(195)(520mg，100％)其无须进一步纯化而使用。
实施例39：合成2-溴-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)乙酮(197) 的方法
A.制备反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁烷羧酸(196)
于室温将反式-3-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环丁烷羧酸甲酯(136)(6.8g， 21.1mmol)和LiOH·H2O(1.26g，36mmol)在THF/H2O/MeOH(3/3/1， 50mL)中搅拌16小时。真空除去有机物，用1M HCl使水溶液为pH 1 并用EtOAc提取(2X100mL)。干燥(Na2SO4)有机物并真空浓缩，得 到反式-3-(3-(三氟甲基)苯磺酰基)环丁烷羧酸(196)(6.14g，94.5％)。1H NMR(300mHz CDCl3)δ2.57(m，2H)，2.86(m，2H)，3.35(m，1H)， 3.92(m，1H)，7.75(t，1H，J＝7.8Hz)，7.94(d，1H，J＝7.71Hz)，8.09(d， 1H，J＝7.89Hz)，8.16(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
B.制备2-溴-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)乙酮(197)
在氩气下，将反式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁烷羧酸(196)(2.00 g，6.49mmol)和DMF(1滴，cat.)在DCM(20mL)中搅拌。加入(COCl)2(3mL，过量)，并将反应物加热至回流1.5小时。真空浓缩反应物并 在0℃、氩气下，使残留物溶于THF/无水CH3CN(1/1，25mL)。加 入TMSCHN2(2.0M溶液在Et2O中)(7.14mL，14.3mmol)，并将反应 物于0℃搅拌6小时。缓慢加入48％HBr(10mL)，使残留物温热至 室温并搅拌16小时。真空浓缩反应物，使残留物溶于CH2Cl2，顺序 用H2O、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，真空浓缩， 残留物经自动化快速层析法纯化，得到2-溴-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺 酰基)环丁基)乙酮(197)(1.21g，48％)。1HNMR(300mHz，CDCl3)δ 2.53(m，2H)，2.81(m，2H)，3.52(m，0.5H)，3.81(m，1.5H)，3.90(s，2 H)，7.75(t，1H，J＝8.14Hz)，7.94(d，1H，J＝7.70Hz)，8.08(d，1H，J＝ 7.48Hz)，8.15(s，1H).
实施例40：合成5-取代的-2-(三氟甲基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪 -4(5H)-酮(198)的方法
方法A：通过合成5-(顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己 基)-2-(三氟甲基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-4(5H)-酮(202)示例说明.
A.制备N-(顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-3-(三 氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(200)
于室温下，将顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺盐酸 盐(124)(500mg，1.32mmol)、3-三氟甲基-1H-吡唑-5-羧酸(199)(238 mg，1.32mmol)、HATU(668mg，1.8mmol)和TEA(740μL，5.3mmol) 在DCM中(15mL)搅拌16小时。将反应物用DCM稀释，用NH4Cl 饱和溶液和Na2HCO3饱和溶液顺序洗涤，干燥(Na2SO4)，并真空浓缩- 。残留物经自动化快速层析法纯化(20％EtOAc/PE)，得到N-(顺式-4- 氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5- 甲酰胺(200)(530mg，82％).
B.制备5-(顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-2-(三 氟甲基)-6，7-二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-4(5H)-酮(202)
将N-(顺式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-3-(三氟-甲 基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(200)(100mg，0.2mmol)、K2CO3(55mg，0.4 mmol)和二溴乙烷(201)(18μL，0.2mmol)在密封容器中，于175℃的 微波炉中加热30分钟。将反应物分配于EtOAc和H2O之间，分离有 机物，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。粗物质经反相HPLC纯化，得到5-(顺 式-4-氟-4-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-2-(三氟-甲基)-6，7- 二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪-4(5H)-酮(202).
方法B：
C.制备3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羧酸甲基酯(203)
于室温下，将3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羧酸(199)(1.0g，8.33mmol) 在MeOH(50mL)中搅拌。滴加入AcCl(1.18mL，16.67mmol)并将反 应物在回流下搅拌2小时。真空浓缩反应物，分配于EtOAc和饱和 NaHCO3溶液之间，干燥(Na2SO4)有机物并真空浓缩，得到3-(三氟甲 基)-1H-吡唑-5-羧酸甲基酯(203)(1.0g，93％)。1H NMR(300MHz， CDCl3)δ3.98(s，3H)，7.10(s，1H)。产物无须纯化而使用。
D.制备1-(2-溴代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羧酸甲基酯(204) 将3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羧酸甲基酯(203)(1.0g，5.15mmol)、1，2- 二溴乙烷(2.22mL，25.77mmol)和K2CO3(1.42g，10.31mmol)在 MeCN (50mL)中回流下搅拌3小时。真空浓缩反应物，使残留物分配 于EtOAc和H2O之间，干燥(Na2SO4)有机物并真空浓缩，得到1-(2- 溴代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羧酸甲基酯(204)(1.21g，78％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.74(t，2H，J＝6.78Hz)，3.94(s，3H)，5.02(t， 2H，J＝6.75Hz)，7.10(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
E.制备二氢吡唑并[1，5-a]吡嗪(198)
将1-(2-溴代乙基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-羧酸甲基酯(203)(100 mg，0.33mmol)、DIPEA(0.29mL，1.67mmol)和1当量胺在200℃ 微波反应器中，在密封容器的DMF(3mL)中搅拌45min。真空浓缩反 应物，和产物经反相HPLC纯化。
实施例41：合成6-(顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己 基)-2-(三氟甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮(207)的方法
A.制备2-甲基-6-(三氟甲基)烟酸乙基酯(205)
于室温下，将2-甲基-6-(三氟甲基)烟酸(204)(3.58g，17.5mmol)在 EtOH(50mL)中搅拌。滴加入AcCl(2.48mL，34.9mmol)，然后将反 应物加热至回流6小时。真空浓缩反应物，使残留物溶于EtOAc，用 饱和NaHCO3溶液洗涤(两次)，干燥(Na2SO4)，和真空除去溶剂，得到 2-甲基-6-(三氟甲基)烟酸乙基酯(205)(3.33g，82％)。1H NMR(300 mHz，CDCl3)δ1.42(t，3H，J＝7.26Hz)，2.89(s，3H)，4.24(q，2H，J＝ 7.26Hz)，7.59(d，1H，J＝8.58Hz)，8.34(d，1H，J＝8.14Hz)。产物无须 进一步纯化而使用。
B.制备2-(溴代甲基)-6-(三氟甲基)烟酸乙基酯(206)
在氩气下，将2-甲基-6-(三氟甲基)烟酸乙基酯(205)(3.33g，14.3 mmol)、NBS(2.54g，14.3mmol)和苯甲酰过氧化物(0.59g，4.3mmol) 在无水CCl4(80mL)中回流下搅拌16小时。将反应物用饱和NaHCO3溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，真空除去溶剂，得到含起始原料的2-(溴代 甲基)-6-(三氟甲基)烟酸乙基酯(206)的3∶1混合物(4.07g)；1HNMR(300 mHz，CDCl3)δ1.26(t，3H，J＝7.48Hz)，4.29(q，2H，J＝7.26Hz)， 4.85(s，2H)，7.51(d，1H，J＝8.58Hz)，8.25(d，1H，J＝8.58Hz)。 粗产物无需纯化或分离而使用。
C.制备6-(顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-2-(三氟-甲 基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮(207)
将粗2-(溴代甲基)-6-(三氟甲基)烟酸乙基酯(206)(120mg，0.384 mmol)、DIEA(0.17mL，0.96mmol)和顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基 磺酰基)环己胺(110)(62mg，0.19mmol)在CH3CN中于120℃加热25 分钟，然后在微波反应器中于130℃加热30分钟。浓缩反应物并经 反相HPLC纯化，得到6-(顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己 基)-2-(三氟-甲基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[3，4-b]吡啶-5-酮(207).
实施例42：合成2-(反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己 基)-5-(三氟甲基)异二氢吲哚-1，3-二酮(209)的方法
在氩气下，将反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(110)(206 mg，0.63mmol)和5-三氟甲基-苯二甲酸酐(208)(136mg，0.63mmol) 在甲苯(5mL)中回流下搅拌2小时。真空浓缩反应物并经反相HPLC 纯化，得到2-(反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-5-(三氟 甲基)异二氢吲哚-1，3-二酮(209).
实施例43：合成N-(2-氨基-2-甲基丙基)-2，2，2-三氟-N-反式-4-氟 -4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)乙酰胺盐酸盐(212)的方法
A.制备1-反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基)-2-甲基 丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(211)
于室温、氩气下，将反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(110) (309mg，1.2mmol)、2-甲基-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(210) (224mg，1.2mmol)和NaBH(OAc)3(374mg，1.68mmol)在DCM(10 mL)中搅拌3小时。将反应物用NaHCO3饱和溶液(30mL)猝灭并用 EtOAc提取。有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到1- 反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基氨基)-2-甲基丙-2-基氨 基甲酸叔丁基酯(211)(547g，91)；1H NMR(300mHz CDCl3)δ1.18(s 9 H)，1.69(m，6H)，2.23(m，2H)，2.58(s，2H)，2.79(m，1H)，4.66(s，1H)， 7.67(t，1H，J＝7.85Hz)，7.89(d，1H，J＝7.71Hz)，8.05(d，1H，J＝7.95 Hz)，8.12(s，1H).
B.制备N-(2-氨基-2-甲基丙基)-2，2，2-三氟-N-反式-4-氟-4-(3-(三氟甲 基)苯基磺酰基)环己基)乙酰胺盐酸盐(211)
于0℃。氩气下，将1-反式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基 氨基)-2-甲基丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(211)(788mg，1.59mmol)和 i-Pr2NEt(0.58mL，3.17mmol)在DCM(10mL)中搅拌。滴加入TFAA (0.33mL，2.37mmol)并将反应混合物搅拌3小时，使温热至室温。猝 灭反应物(饱和NaHCO3溶液(30mL))，含水层用EtOAc提取。有机物 用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。残留物用在MeOH中的HCl 处理，得到N-(2-氨基-2-甲基丙基)-2，2，2-三氟-N-反式-4-氟-4-(3-(三氟 甲基)苯基磺酰基)环己基)乙酰胺盐酸盐(212)。产物经反相HPLC纯化.
实施例44：合成6-异丙氧基-5-甲基嘧啶-4-羧酸(216)的方法
A.制备5-甲基-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4-羧酸乙基酯(215)
于室温、氩气下，将钠条(2.85g，124mmol)加入到无水EtOH(100mL) 中。将生成的溶液加入到甲脒盐酸盐(213)(10.0g，124mmol)中，并 将反应物于室温下搅拌45分钟。通过过滤除去生成的沉淀，加入二 乙基氧杂丙酸酯(oxapropionate)(214)(24g，119mmol)，并将反应物 于85℃加热16小时。将反应物用EtOAc(300mL)稀释，升温至70℃， 通过硅藻土塞过滤(用热EtOAc洗脱)，真空浓缩合并的有机物。将反 应物重复两次并合并所有的产物，得到5-甲基-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4- 羧酸酯(215)(11.0g，18％)。1H NMR(300mHz-CD3OD)δ1.28(t，3H， J＝7.08Hz)，2.09(s，3H)，4.29(q，2H，J＝7.14Hz)，7.99(s，1H).
B.制备6-异丙氧基-5-甲基嘧啶-4-羧酸(216)
于室温、氩气下，将5-甲基-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4-羧酸酯(215)(1.87g， 10.0mmol)在DMF(15mL)中搅拌。加入NaH((60％在矿物油中的分 散液)，288mg，12.0mmol)，并将反应物搅拌30分钟。加入2-溴丙 烷(1.5mL，16mmol)，将反应物于60℃搅拌16小时，用H2O猝灭 并真空浓缩。将残留物在2N NaOH/MeOH(30mL/30mL)中于50℃ 加热5小时，真空浓缩，用6N HCl酸化，并用EtOAc提取。干燥有 机物并真空浓缩，得到6-异丙氧基-5-甲基嘧啶-4-羧酸(216)和1-异丙 基-5-甲基-6-氧代-1，6-二氢嘧啶-4-羧酸(217)的混合物(750mg，3/1)， 其无须进一步纯化而使用。
实施例45：合成N，3-二甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺盐酸 盐(227)的方法
A.制备3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)丁酸(219)
于100℃、氩气下，将3-(三氟甲基)苯硫酚(218)(25g，140.3mmol)、 3，3-二甲基丙烯酸(14g，140mmol)和碘(6.9g，27mmol)加热4小 时。冷却后，将反应混合物溶于EtOAc，用饱和偏亚硫酸氢钠溶液洗 涤。分离有机物，干燥，并真空浓缩。残留物经自动化柱层析法纯化 (5％PE/EtOAc)，得到3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)丁酸(219)(30.6g， 79％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl)δ1.43(s，6H)，2.55(s，2H)，7.49(t，1 H，J＝7.74Hz)，7.65(d，1H，J＝7.8Hz)，7.78(d，1H，J＝7.71Hz)，7.84 (s，1H).
B.制备3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁酸(220)
于室温下，将3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)丁酸(219)(13.5g，48.6 mmol)和过硫酸氢钾制剂(oxone)(89g，145.7mmol)在MeOH/H2O(450 ml，2∶1)中搅拌16小时。过滤反应物，真空浓缩滤液，使残留物溶于 EtOAc，用H2O反复洗涤，干燥并真空浓缩，得到3-甲基-3-(3-(三氟 甲基)苯硫基)丁酸(220)(14.1g，94％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl)δ 1.50(s，6H)，2.77(s，2H)，7.77(t，1H，J＝7.83Hz)，7.97(d，1H，J＝7.6 Hz)，8.11(d，1H，J＝7.8Hz)，8.17(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
C.制备3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁酸甲基酯(221)
于室温下，将3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯硫基)丁酸(220)(10g，32.3 mmol)在MeOH(100mL)中搅拌。搅拌下滴加入AcCl(4.6mL，64.5 mmol)，并将反应物回流下加热2小时。然后将反应物真空浓缩，溶 于EtOAc，用H2O洗涤，干燥并真空浓缩，得到3-甲基-3-(3-(三氟甲 基)苯基磺酰基)丁酸酯(221)(9.55g，91％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl) δ1.49(s，6H)，2.72(s，2H)，3.69(s，3H)，7.78(t，1H，J＝7.8Hz)，7.96(d， 1H，J＝7.71Hz)，8.10(d，1H，J＝7.8Hz)，8.16(s，1H)。产物无须进一步 纯化而使用。
D.制备3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-醇(222)
于室温、氩气下，将甲基3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁酸酯 (9.55g，29.5mmol)(221)在THF中搅拌。加入LAH(1.3g，35.4mmol)， 将反应物搅拌2小时并用1M NaOH溶液猝灭。通过Celite过滤除去 生成的固体，真空浓缩滤液，使残留物分配于EtOAc和H2O之间。 干燥有机物并真空浓缩，得到3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1- 醇(222)(8.8g，94％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl)δ1.38(s，6H)，2.03 (m，2H)，3.86(m，2H)，7.75(t，1H，J＝7.8Hz)，7.94(d，1H，J＝7.71 Hz)，8.10(d，1H，J＝7.8Hz)，8.16(s，1H)。产物无须进一步纯化而使用。
E.制备甲烷磺酸3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基酯(223)
于室温、氩气下，将3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-醇(8.2g， 27.6mmol)(222)和TEA(5.0mL，36mmol)在THF中搅拌。分批加入 MsCl并将反应物搅拌45min。通过过滤除去生成的沉淀。真空浓缩 滤液，使残留物溶于DCM并用NH4Cl饱和溶液和NaHCO3溶液顺序 洗涤。干燥有机物并真空浓缩，得到甲烷磺酸3-甲基-3-(3-(三氟甲基) 苯基磺酰基)丁基酯(223)(10.08g，100％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl) δ1.38(s，6H)，2.22(t，2H，J＝6.9Hz)，3.03(s，3H)，4.47(t，2H，J＝ 6.81Hz)，7.76(t，1H，J＝7.8Hz)，7.95(d，1H，J＝7.71Hz)，8.09(m， 2H)。产物无须进一步纯化而使用。
F.制备1-(4-叠氮基-2-甲基丁-2-基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(224)
将3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-醇(10.08g，29.5mmol) (223)和NaN3(9.55g，147mmol)在MeCN中回流下搅拌16小时。真 空浓缩反应物，使残留物溶于EtOAc并用NH4Cl饱和溶液和NaHCO3溶液顺序洗涤。干燥有机物，真空浓缩，残留物经自动化柱层析法纯 化(20％EtOAc/PE)，得到1-(4-叠氮基-2-甲基丁-2-基磺酰基)-3-(三氟甲 基)苯(224)(6.31g，66.6％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl)δ1.36(s，6H)， 2.02(m，2H)，3.52(t，1H，J＝7.29Hz)，7.75(t，1H，J＝7.74Hz)，7.95(d， 1H，J＝7.74Hz)，8.08(d，1H，J＝7.83Hz)，8.13(s，1H).
G.制备3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺(225)
使1-(4-叠氮基-2-甲基丁-2-基磺酰基)-3-(三氟甲基)苯(224)(6.31g， 20.0mmol)和Pd(OH)2(600mg，cat)溶于EtOH(150mL)并置于巴尔氢 化器中。于室温下，将反应物在H2(50PSI)下搅拌1小时，通过硅藻 土过滤，和真空浓缩滤液，得到3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 丁-1-胺(225)(3.96g，62％)其无须进一步纯化而使用。
H.制备3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基氨基甲酸叔丁基酯 (226)
于室温下，将3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺(225)(750 mg，2.5mmol)、TEA(0.7mL，5.0mmol)和BOC碳酸酯(522mg，3.0 mmol)在DCM(30mL)中搅拌1小时。真空浓缩反应物，残留物经自 动化柱层析法纯化(20％EtOAc/PE)，得到3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基 磺酰基)丁基氨基甲酸叔丁基酯(226)(680mg，75％)。1H NMR(300 mHz-CD3Cl)δ1.36(s，6H)，1.43(s，9H)，1.94(m，2H)，3.31(m，2H)， 4.65(bs，1H)，7.74(t，1H，J＝7.8Hz)，7.94(d，1H，J＝7.89Hz)，8.09(d， 1H，J＝7.89Hz)，8.14(s，1H).
I.制备(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基)氨基甲酸叔丁基甲 基酯(227)
于室温、氩气下，将3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基氨基甲酸 叔丁基酯(226)(680mg，1.87mmol)在THF中搅拌。加入NaH((60％ 在矿物油中的分散液)，90mg，2.25mmol)，并将反应物搅拌30分钟。 加入MeI(140μL，2.25mmol)，将反应物于室温下搅拌16小时，用 H2O猝灭，并真空浓缩。使残留物溶于DCM，用NH4Cl饱和溶液和 NaHCO3溶液顺序洗涤，干燥，并真空浓缩，得到叔丁基甲基(3-甲基 -3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基)氨基甲酸酯(227)(690mg，90％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl)δ1.27(s，6H)，1.34(s，9H)，1.86(m，2H)， 2.78(s，3H)，3.29(m，2H)，7.67(t，1H，J＝7.8Hz)，7.87(d，1H，J＝ 7.71Hz)，8.02(d，1H，J＝7.86Hz)，8.07(s，1H).
J.制备N，3-二甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺盐酸盐(228)
于室温下，将(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基)氨基甲酸叔丁 基甲基酯(227)(690mg，1.68mmol)在EtOAc(30mL)中搅拌。将气态 HCl鼓泡通入该溶液1分钟，并将反应物于室温下搅拌20分钟。真空 除去溶剂，得到N，3-二甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺盐酸 盐(228)(1.18g，82％)。产物无须进一步纯化而使用。
实施例46：合成3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-3-甲基丁-1-胺(229) 的方法
A.制备N-3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)-3-甲基丁酸(232)
A1.制备3-氟-5-(三氟甲基)苯硫酚溴化镁(231)
于室温下，将Mg条(1.09g，44.9mmol；用己烷/Et2O清洁)和I2(引 发剂)在无水THF(75mL)中搅拌。滴加入1-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯 (230)(10.0g，41.2mmol)并将反应物于室温下搅拌2小时(用加热枪启 动反应)。加入硫(1.32g，41.2mmol)并将反应物于室温下搅拌2小时。 过滤反应物和真空浓缩滤液，得到粗3-氟-5-(三氟甲基)苯硫酚溴化镁 (231)，其无需证实或纯化而使用。
A2.制备3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)-3-甲基丁酸(232)
使粗3-氟-5-(三氟甲基)苯硫酚溴化镁(231)(5.03g，26.7mmol)分配于 1M HCl和Et2O之间。分离有机物，干燥并真空浓缩。加入3，3-二甲 基丙烯酸(2.67g，26.7mmol)和I2(2.25g，8.9mmol)并将反应物于 100℃加热3小时。冷却后，将反应混合物溶于EtOAc，用饱和偏亚 硫酸氢钠溶液洗涤直至脱色并分离有机物，干燥并真空浓缩。残留物 经自动化柱层析法纯化(8％PE/EtOAc)，得到3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯 硫基)-3-甲基丁酸(232)(2.0g，25％)。1H NMR(300mHz-CD3Cl)δ 1.46(s，6H)，2.58(s，2H)，7.37(d，1H，J＝8.01Hz)，7.53(d，1H，J＝ 8.07Hz)，7.65(s，1H).
B.制备3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯基磺酰基)-3-甲基丁-1-胺(229)
以与3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺(228)类似的方式，使 用3-(3-氟-5-(三氟甲基)苯硫基)-3-甲基丁酸(232)制备3-(3-氟-5-(三氟 甲基)苯基磺酰基)-3-甲基丁-1-胺(229)
实施例47：合成2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-1-胺(238)的方 法
A.制备2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯硫基)丙酸甲基酯(233)
将3-(三氟甲基)苯硫酚(114)(22.2g，124.6mmol)、2-溴-2-甲基丙酸甲 基酯(17.1mL，137.06mmol)和K2CO3回流加热16小时。过滤反应物， 真空浓缩滤液，使残留物分配于EtOAc和H2O。干燥有机物，真空浓 缩，残留物经自动化柱层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到2-甲基 -2-(3-(三氟甲基)苯硫基)丙酸甲基酯(233)(32.77g，95％)。1H NMR (300mHz-CD3Cl)δ1.49(s，6H)，3.65(s，3H)，7.44(d，2H，J＝7.77 Hz)，7.62(m，2H)，7.07(s，1H).
B.制备2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸甲基酯(234)
于室温下，将2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯硫基)丙酸甲基酯(233)(32.77 g，118mmol)和过硫酸氢钾制剂(217.4g，354mmol)在MeOH/H2O(600 ml，2∶1)中搅拌16小时。过滤反应物和真空浓缩滤液。使残留物溶于 EtOAc，用H2O反复洗涤，干燥，并真空浓缩，得到2-甲基-2-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)丙酸甲基酯(234)(32.19g，88％)。1H NMR(300 mHz-CD3Cl)δ1.64(s，6H)，3.70(s，3H)，7.72(t，1H，J＝7.86Hz)， 7.95(d，1H，J＝7.83Hz)，8.06(d，1H，J＝7.98Hz)，8.11(s，1H)。产物经 进一步纯化而使用。
C.制备2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-1-胺(238)
以与3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁-1-胺(228)类似的方式，使 用2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙酸甲基酯(234)，制备2-甲基 -2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-1-胺(238)。
实施例48：通用合成方案
A.合成具有通用结构(239)的化合物的通用偶合方案
通过合成N-环己基-2-(4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基) 乙酰胺(240)举例说明
于室温下，将4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶盐酸盐(57)(81 mg，0.26mmol)、TEA(109μL，0.78mmol)和2-氯-N-环己基乙酰胺(2b) (46mg，0.26mmol)在MeCN(2mL)中搅拌16小时。真空浓缩反应物 并经反相HPLC纯化，得到N-环己基-2-(4-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基 磺酰基)哌啶-1-基)乙酰胺(240).
B.合成具有通用结构(241)的化合物的通用偶合方案
通过合成3-氟-5-甲氧基-N-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)苯甲 酰胺(243)举例说明
于室温下，将4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(68)(100mg，0.32 mmol)、HATU(167mg，0.44mmol)、TEA(167μL，1.2mmol)和3- 氟-5-甲氧基苯甲酸(242)(54mg，0.32mmol)在DCM中(2mL)搅拌16 小时。真空浓缩反应物，残留物经反相HPLC纯化，得到3-氟-5-甲氧 基-N-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)苯甲酰胺(243).
以上给出的化学计量法被认为是示例性的，但可以变化。合适的有机 碱可以用作TEA的替代品(如DIPEA)。对于HCl盐，必需使用至少 一个额外当量的所述碱。DMF可取代DCM作为溶剂。
C.合成具有通用结构(244)的化合物的通用偶合方案
通过合成2-(环己基氨基)-1-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基)乙 酮(246)举例说明
于室温下，将2-氯-1-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基)乙酮(60) (70mg，0.2mmol)、TEA(83μL，0.6mmol)和环己基胺(245)(23μL， 0.2mmol)在MeCN(2mL)中搅拌16小时。真空浓缩反应物，残留物 经反相HPLC纯化，得到2-(环己基氨基)-1-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰 基)哌啶-1-基)乙酮(246).
以上给出的化学计量法被认为是示例性的，但可以变化。合适的有 机碱可以用作TEA的替代品(如DIPEA)。对于HCl盐，必需使用至 少一个额外当量的所述碱。
D.合成具有偶通用结构(247)的化合物的通用偶合方案
通过合成N-(2-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶-1-基)乙基)新戊酰胺 (248)举例说明
将N-(2-氯代乙基)新戊酰胺(5)(30mg，0.19mmol)、DIPEA(107μL， 0.62mmol)和4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)哌啶(59)(38mg，0.12mmol) 在密封管中的DMF/CH3CN(1/1，2mL)中于100℃加热168小时。将 反应物用EtOAc(4mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液洗涤，并真空浓 缩。粗物质经反相HPLC纯化，得到N-(2-(4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰 基)哌啶-1-基)乙基)新戊酰胺(248).
E.合成具有通用结构(249)的化合物的通用偶合方案
通过合成N-((1s，4s)-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基)-1，3，5-三 甲基-1H-吡唑-4-磺酰胺(251)举例说明
于室温下，将顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己胺(110)(75 mg，0.21mmol)、TEA(111μL，0.8mmol)和1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4- 磺酰氯(250)(0.21mmol)搅拌16小时。真空浓缩反应物粗物质经反相 HPLC纯化，得到N-(顺式-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环己基 -1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-磺酰胺(251).
F.合成具有通用结构(252)的化合物的通用偶合方案
通过合成反式-N-(4-(3-氯-4-氟代苯氧基)苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基磺 酰基)环丁烷甲酰胺(253)举例说明
于室温下，将顺式-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁烷羧酸(196)(60 mg，0.19mmol)、HATU(100mg，0.27mmol)、TEA(111μL，0.8 mmol)和6-(3-氯-4-氟代苯氧基)吡啶-3-胺(25)(0.19mmol)在DCM中搅 拌16小时。真空浓缩反应物，粗物质经反相HPLC纯化，得到反式 -N-(4-(3-氯-4-氟代苯氧基)苯基)-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁烷- 甲酰胺(253).
G.合成包含由合成1-氨基-N-(顺式)-4-氟-4-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基) 环己基)环己烷甲酰胺(254)举例说明的烷基胺的酰胺的通用偶合方案
使用HATU偶合方案，用Boc保护的-氨基羧酸和DCM作为溶剂， 制备化合物。反应溶液用饱和NaHCO3洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓 缩。产物用2M HCl在Et2O中处理，真空浓缩，粗物质经反相HPLC 纯化。
H.合成具有通用结构(255)的化合物的通用环化方案
通过合成6-(三氟甲基)-3-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)咪唑并 [1，2-a]吡啶(257)举例说明
将2-溴-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)乙酮(197)(133mg， 0.345mmol)和5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(256)(56mg，0.35mmol)在密封 容器中的EtOH(2mL)中于125℃微波反应器中加热50分钟。真空浓 缩反应物并经反相HPLC纯化，得到6-(三氟甲基)-3-(3-(3-(三氟甲基) 苯基磺酰基)环丁基)咪唑并[1，2-a]吡啶(257)。
I.合成具有通用结构(258)的化合物的通用环化方案
通过合成2-(三氟甲基)-5-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)-1H-咪 唑(260)举例说明
于室温下，将2-溴-1-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)乙酮(197) (100mg，0.260mmol)、DIEA(226μL，1.30mmol)和2，2，2-三氟乙脒 (acetimidamide)(259)(58mg，0.52mmol)在CH3CN(3mL)中搅拌4 天。真空浓缩反应物并经反相HPLC纯化，得到2-(三氟甲 基)-5-(3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)环丁基)-1H-咪唑(260).
J.合成具有通用结构(262)的化合物的通用还原性胺化方案
将2-甲基-2-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丙-1-胺(1eq)、4-取代的哌啶酮 (piperidinone)(4eq)、NaBH3CN(3eq)和HOAc(cat)在MeOH中于60℃ 加热16小时。真空浓缩反应物，残留物经反相HPLC纯化。
K.具有通用结构(263)的化合物的通用合成方案
通过合成1-(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基-磺酰基)-3-(三氟 甲氧基)苯(266)举例说明
K1.制备(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基)(3-(三氟甲氧基)-苯 基)硫烷(266)
将甲烷磺酸3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基酯(264)(250 mg，0.75mmol)、3-三氟甲氧基苯硫酚(142mg，0.75mmol)和TEA (152μL，1.5mmol)在MeCN中回流加热16小时。真空浓缩反应物， 残留物经自动化柱层析法纯化(5％EtOAc/PE)，得到(3-甲基-3-(3-(三 氟甲基)苯基磺酰基)丁基)(3-(三氟甲氧基)-苯基)硫烷(280mg，79％)。 产物经LCMS证实。
K2.制备1-(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基-磺酰基)-3-(三氟- 甲氧基)苯(267)
于室温下，将(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基)(3-(三氟甲氧 基)-苯基)硫烷(266)(200mg，0.42mmol)和mCPBA(213mg，1.2mmol) 在DCM中搅拌16小时。有机物用2M NaOH洗涤，分离，干燥并真 空浓缩，得到1-(3-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基磺酰基)丁基-磺酰 基)-3-(三氟-甲氧基)苯(267)(116mg，55％)。1H NMR(300mHz- CD3Cl)δ1.24(s，6H)，2.08(m，2H)，3.36(m，2H)，7.49(d，1H，J＝8.22 Hz)，7.64(m，3H)，7.75(d，1H，J＝7.87Hz)，7.86(m，2H)，7.93(s，1H)
实施例49：合成示例性化合物和质谱测定法
按照实施例1-48中提出的通用方法，制备下表1中列出的以下化合 物。就最终化合物和在合成期间的多个阶段采用质谱测定法，作为得 到产物特征的确认(M+1)。对于质谱测定法分析，以在含0.1％甲酸的 甲醇∶水(50∶50v/v)中的约1μg/mL浓度制备试样。然后将试样通过 Waters 3100 Applied Biosystems API3000单一四级杆质谱仪分析并在 250-700m/z范围进行扫描。
表1
实施例50：通道阻断活性
T-型通道阻断
HEK细胞的转化：
T-型钙通道阻断活性在用T-型钙通道亚基稳定转染的人胚肾细胞， HEK 293(Invitrogen)中测试。简言之，细胞在补充有10％胎牛血清、 200U/ml青霉素和0.2mg/mL链霉素的Dulbecco’s改良eagle培养基 (DMEM)中于37℃、5％CO2下培养。在85％汇合时，细胞用0.25％ 胰蛋白酶/1mM EDTA分裂并在10％汇合时接种在玻璃盖片上。于12 小时时，替换培养基，使用标准磷酸钙方案和合适的钙通道cDNA’s 稳定转染所述细胞。供给新鲜的(Fresh)DMEM，并将细胞转移至28 ℃/5％CO2中。在记录全细胞之前，将细胞培养1-2天。
使用标准膜片钳技术以鉴定T-型电流的阻断剂。简言之，前文描述的 稳定表达人α1G、α1H和α1I T-型通道的HEK细胞系用于所有的记录(传 代#：4-20，37℃，5％CO2)。使用连接于配备有pCLAMP软件的个人 电脑的Axopatch 200B扩增器(Axon Instruments，Burlingame，Calif.) 进行全细胞膜片钳实验。使用Clampfit(Axon Instruments)和SigmaPlot 4.0(Jandel Scientific)分析数据。为获得T-型电流，在用外部溶液替代 培养基后，使含半-汇合细胞的塑料器皿定位于ZEISS AXIOVERT S100显微镜台上(表2)。使用装配在具有电阻值～5MΩ(表3)的 SUTTER P-97拉出器的移液管(具有细丝的硼硅玻璃，O.D.：1.5mm， I.D.：0.86mm，10cm长)，获得全细胞膜片。
表2.
外部溶液500ml-pH 7.4，265.5mOsm
盐 最终mM 储备液M 最终ml CsCl 142 1 71 CaCl2 2 1 1 MgCl2 1 1 0.5 HEPES 10 0.5 10 葡萄糖 10 ---- 0.9克
表3
内部溶液50ml-pH 7.3(含CsOH)，270mOsm
T-型电流通过使用两种电压方案可靠地获得：
“非-失活”和
“失活。”
在非-失活方案中，保持电位设定在-110mV，在-100mV前脉冲 (pre-pulse)1秒，然后在-40mV试验脉冲50ms。在失活方案中，前 脉冲为约-85mV经1秒钟，其失活约15％的T-型通道(方案1)。
方案1
使试验化合物溶于外部溶液，0.1-0.01％DMSO。静止～10分钟后，使 用WPI microfil管，通过接近细胞的比重供应它们。使用“非-失活的” 前脉冲检测化合物的静止阻断。采用“失活的”方案研究电压-依赖性阻 断。然而，下面所示的初始数据主要使用单独的非-失活的方案获得。 本发明的各化合物的IC50值示于表4。数值以nM显示，10000nM以 上的值表示为“10000nM”。数据显示，化合物1-3、5-9、17、19、20、 29-33、40-42、45、50-52、54和56-64各自显示出小于1μM的活性。 此外，化合物3，54和59显示出小于0.01μM的活性，而化合物59 显示出最低的IC50。
表4 T-型钙通道阻断
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 1 10000 7400 271 2630 1650 2 1380 1170 272 ＞10000 ＞10000 3 10000 273 ＞10000 ＞10000 4 8540 6740 274 2540 1050 5 10000 275 ＞10000 ＞10000 6 10000 10000 276 ＞10000 2300 7 10000 10000 277 2460 540 8 10000 6710 278 2480 2230 9 1130 1030 279 ＞10000 2090 10 4200 3820 280 -- -- 11 10000 10000 281 8530 1460 12 282 -- -- 13 10000 10000 283 -- -- 14 1320 330 284 -- -- 15 10000 4620 285 ＞10000 1280 16 10000 9180 286 3190 1540 17 2330 1420 287 6500 1130 18 3060 2720 288 ＞10000 3260 19 5240 3020 289 1400 1040 20 1970 1380 290 1180 570 21 6560 4020 291 ＞10000 6060 22 -- -- 292 -- ＞10000 23 2790 1190 293 4770 1850 24 -- -- 294 -- ＞10000 25 2790 4660 295 630 320 26 2790 10000 296 2830 850 27 760 720 297 850 300 28 1230 1270 298 880 240 29 260 430 299 640 210
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 30 1290 1410 300 280 430 31 1150 5540 301 ＞10000 -- 32 500 2690 302 970 850 33 -- -- 303 4340 4150 34 -- -- 304 1550 2440 35 1000 10000 305 ＞10000 ＞10000 36 5250 5110 306 4960 7350 37 9280 3620 307 2410 1540 38 308 4200 2270 39 -- 10000 309 9900 ＞10000 40 -- -- 310 6340 5710 41 -- -- 311 5080 8500 42 1510 2860 312 2960 1940 43 -- 313 ＞10000 ＞10000 44 -- 314 -- -- 45 10000 315 -- ＞10000 46 1250 910 316 3990 2910 47 -- -- 317 1140 860 48 1430 2330 318 2430 1330 49 10000 10000 319 4820 3430 50 10000 10000 320 290 190 51 -- 10000 321 -- ＞10000 52 860 790 322 3260 630 53 -- -- 323 1350 720 54 10000 7290 324 3180 1220 55 -- -- 325 2400 1330 56 820 480 326 ＞1000 1480 57 4940 1530 327 2790 750 58 1850 1480 328 10000 2470 59 9130 8090 329 ＞10000 ＞10000 60 6440 3900 330 8560 930 61 -- 10000 331 2650 1510 62 1080 550 332 1560 780 63 -- -- 333 1820 960 64 -- 10000 334 ＞10000 2390 65 10000 10000 335 ＞10000 4710 66 10000 10000 336 690 1350 67 -- -- 337 ＞10000 8660 68 10000 338 ＞10000 6790 69 10000 10000 339 5270 3330 70 8810 2580 340 9870 3170 71 -- -- 341 2190 2020 72 -- -- 342 1710 760 73 -- -- 343 630 270 74 1530 1210 344 ＞10000 ＞10000 75 -- -- 345 5530 1930 76 1030 510 346 1260 410
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 77 -- -- 347 2370 260 78 -- -- 348 4520 540 79 1190 440 349 ＞10000 ＞10000 80 900 460 350 ＞10000 ＞10000 81 380 220 351 ＞10000 7430 82 7490 1810 352 640 230 83 2850 960 353 5020 1980 84 2870 650 354 ＞10000 7060 85 2150 1230 355 1430 740 86 10000 1930 356 9510 3170 87 6440 2100 357 ＞10000 ＞10000 88 10000 3030 358 8370 ＞10000 89 1710 990 359 5420 20000 90 -- -- 360 ＞10000 ＞10000 91 2450 940 361 1620 200 92 2230 640 362 -- ＞10000 93 -- 10000 363 -- ＞10000 94 10000 10000 364 520 210 95 6970 2150 365 6480 2190 96 10000 3820 366 ＞10000 ＞10000 97 2140 10000 367 900 350 98 10000 10000 368 950 400 99 10000 10000 369 ＞10000 ＞10000 100 5390 1790 370 680 640 101 3670 3500 371 1060 660 102 10000 10000 372 7170 9630 103 10000 373 820 610 104 10000 10000 374 7730 2110 105 10000 2480 375 -- -- 106 2180 10000 376 -- -- 107 10000 377 2340 1040 108 6300 10000 378 2790 1630 109 10000 10000 379 1810 300 110 10000 380 -- ＞10000 111 -- -- 381 -- ＞10000 112 10000 8360 382 ＞10000 ＞10000 113 10000 5350 383 ＞10000 5950 114 10000 10000 384 ＞10000 4740 115 10000 10000 385 ＞10000 ＞10000 116 8320 4240 386 490 270 117 3100 3370 387 720 710 118 10000 10000 388 -- -- 119 -- -- 389 6080 8980 120 -- 10000 390 -- -- 121 720 930 391 -- -- 122 690 990 392 -- -- 123 30 440 393 -- --
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 124 350 540 394 -- -- 125 2910 2970 395 -- -- 126 1300 2120 396 -- -- 127 1140 1560 397 -- -- 128 -- -- 398 -- -- 129 -- -- 399 1250 1060 130 430 940 400 ＞10000 5920 131 160 610 401 ＞10000 9260 132 3670 4550 402 640 570 133 350 400 403 1190 1040 134 2630 1820 404 -- ＞10000 135 780 760 405 ＞10000 136 540 550 406 -- -- 137 430 330 407 ＞10000 1660 138 9880 2840 408 8000 420 139 1880 1020 409 2650 3620 140 1100 700 410 3490 1790 141 4250 3610 411 ＞10000 2430 142 8230 5880 412 6810 1550 143 10000 6750 413 -- -- 144 1350 670 414 -- -- 145 5830 1340 415 ＞10000 ＞10000 146 -- -- 416 ＞10000 8180 147 -- -- 417 ＞10000 4690 148 -- -- 418 ＞10000 2870 149 -- -- 419 ＞10000 ＞10000 150 6470 2050 420 2020 710 151 2900 421 -- -- 152 3600 422 2250 1390 153 5230 423 ＞10000 ＞10000 154 3600 424 2290 1040 155 960 425 1550 1070 156 -- -- 426 ＞10000 -- 157 -- -- 427 3820 880 158 10000 7200 428 -- ＞10000 159 10000 10000 429 ＞10000 8370 160 -- -- 430 -- -- 161 -- -- 431 920 240 162 10000 10000 432 1290 330 163 10000 -- 433 -- ＞10000 164 -- -- 434 1130 680 165 4370 1390 435 -- -- 166 10000 8470 436 -- -- 167 -- -- 437 -- -- 168 -- -- 438 -- -- 169 -- -- 439 -- -- 170 -- -- 440 -- --
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 171 -- -- 441 -- -- 172 10000 6730 442 -- -- 173 -- -- 443 -- -- 174 -- -- 444 -- -- 175 -- -- 445 -- -- 176 -- -- 446 -- -- 177 -- -- 447 -- -- 178 -- 10000 448 -- -- 179 -- -- 449 450 550 180 -- -- 450 610 4490 181 -- -- 451 260 2410 182 -- -- 452 570 9810 183 -- -- 453 690 3930 184 -- -- 454 610 3480 185 -- -- 455 400 2500 186 -- -- 456 710 910 187 -- -- 457 560 1200 188 -- -- 458 900 1920 189 -- -- 459 820 10000 190 5560 2530 460 100 10000 191 -- -- 461 190 10000 192 -- -- 462 560 10000 193 6970 1590 463 350 10000 194 -- -- 464 60 2140 195 -- -- 465 50 960 196 -- -- 466 1000 550 197 10000 5660 467 170 1170 198 10000 10000 468 350 4860 199 -- -- 469 430 5040 200 -- -- 470 130 5840 201 -- -- 471 610 10000 202 10000 10000 472 620 3470 203 2570 1890 473 680 9280 204 3550 6460 474 560 10000 205 -- -- 475 480 6970 206 3520 2550 476 400 5620 207 1340 1130 477 540 10000 208 1140 1110 478 270 5340 209 3410 2530 479 900 2090 210 4950 4140 480 720 5440 211 -- -- 481 720 10000 212 2220 -- 482 960 3690 213 940 -- 483 900 3850 214 -- -- 484 530 6690 215 -- -- 485 710 -- 216 -- -- 486 510 860 217 -- -- 487 210 3310
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 218 -- -- 488 290 2880 219 -- -- 489 900 10000 220 -- -- 490 460 10000 221 -- -- 491 470 10000 222 -- -- 492 590 9260 223 -- -- 493 680 10160 224 -- -- 494 400 3530 225 -- -- 495 190 2050 226 -- -- 496 170 350 227 -- -- 497 520 -- 228 330 -- 498 260 1380 229 -- -- 499 90 1010 230 1180 -- 500 340 3110 231 -- -- 501 420 10000 232 -- -- 502 360 3060 233 -- -- 503 190 2810 234 2120 -- 504 540 1760 235 -- -- 505 610 9930 236 -- -- 506 290 640 237 -- -- 507 380 8300 238 2780 -- 508 850 -- 239 1610 -- 509 650 -- 240 1360 -- 510 170 5870 241 1450 -- 511 960 -- 242 4300 -- 512 330 10000 243 4450 -- 513 490 10000 244 3570 -- 514 840 10000 245 3810 -- 515 610 -- 246 1720 -- 516 620 10000 247 -- -- 517 170 6140 248 950 430 518 600 4120 249 2650 360 519 550 3280 250 4280 990 520 110 470 251 3590 570 521 470 910 252 450 670 522 370 1360 253 1190 460 523 560 10000 254 740 260 524 380 2070 255 2010 3320 525 470 2880 256 2010 3320 526 240 2930 257 6900 9020 527 70 10000 258 7340 ＞10000 528 80 2410 259 6110 9620 529 780 9690 260 2300 3650 530 940 -- 261 ＞10000 7180 531 3560 10000 262 2890 1470 532 1630 10000 263 2230 1360 533 350 1080 264 4480 ＞10000 534 830 --
化合物 α1G(nM) α1H(nM) 化合物 α1G(nM) α1H(nM) 265 ＞10000 ＞10000 535 700 4140 266 3670 5560 536 640 10000 267 2630 490 537 470 740 268 ＞10000 1910 538 620 3080 269 ＞10000 ＞10000 270 2540 3580
N-型通道阻断活性
测定实施例1：对CaV2.2通道使用钾去极化以启动通道打开的荧光测 定法
在HEK293细胞与电压-门控钙通道的α2-δ和β亚基上稳定表达人CaV2.2通道。向内调节的钾通道(Kir2.3)也在这些细胞中表达以允许通过 细胞外钾浓度更精确地控制细胞膜电位。在低浴钾浓度下，膜电位是 相对负性的，且随着浴钾浓度升高而去极化。这样，浴钾浓度可用于 调节通道的电压-依赖性构象。将化合物与细胞在低(4mM)钾或升高的 (12、25或30mM)钾的存在下一起温育以确定化合物在4mM钾时阻 断静止(关闭的)通道的亲和力或在12、25或30mM钾时阻断打开和 失活的通道的亲和力。在温育期后，通过加入较高浓度的钾(70mM最 终浓度)来触发Cav2.2通道的打开，以进一步使细胞去极化。状态-依 赖性阻断的程度可由化合物以不同的钾浓度温育后的抑制效力来评 估。
通过CaV 2.2通道的钙通量使用钙敏荧光染料结合荧光板读出仪测定。 荧光变化用或者VIPR(Aurora Instruments)或者FLIPR(Molecular Devices)板读出仪测定。
方案
1.将细胞接种于聚-D-赖氨酸包被的(Poly-D-Lysine Coated)96或384- 孔板并保持在3rC-10％CO2培养箱中过夜。
2.除去培养基，用0.2mL(96-孔板)或0.05mL(384-孔板)含钙&镁 (Invitrogen；14040)的Dulbecco′s磷酸盐缓冲盐水(D-PBS)洗涤细胞。
3.加入0.1mL(96-孔板)或0.05mL(384-孔板)的4～M氟石-4(分子探针 (Molecular Probes)；F-14202)和0.02％Pluronic酸(分子探针(Molecular Probes)；P-3(00)在含钙&镁的补充有10mM葡萄糖&10mM HepeslNaOH；pH 7.4.的D-PBS(Invitrogen；14040)中制备。
4.于25℃黑暗中培养60-70min.
5.除去染料，用0.1mL(96-孔板)或0.06mL(384-孔板)的4、12、25或 30mM钾预极化缓冲液(Pre-polarization Buffer)(PPB)洗涤细胞。
6.加入0.1mL(96-孔板)或0.03mL(384-孔板)4、12、25、30mM PPB (含或不含试验化合物)。
7.于25℃黑暗中培养30min
8.在VIPR仪器上对细胞培养板读数，激发波长＝480nm，发射波长 ＝535nm。
9.用VIPR连续读数，向细胞培养板中加入0.1mL(96-孔板)或0.03mL (384-孔板)的去极化缓冲液(DB)，其为2x的最终测定浓度。
测定实施例2：使用自动化电生理学仪器对阻断Cav2.2通道的电生理 测量
N-型钙通道的阻断采用IonWorks HT 384孔自动化膜片钳电生理学装 置评价。这种仪器可从384孔(每次48孔)同步记录。单一全细胞记录 在各孔中进行。全细胞记录通过用两性霉素B充满内室来建立。 设计电压方案以检测应用-依赖性阻断和使用2Hz系列的去极化(二十 个25ms步长至+20mY)。试验程序包括控制系列(前-化合物 (pre-compound))、细胞与化合物一起培养5分钟，随后的第二个系列(后 -化合物(post-compound))。化合物的应用依赖性阻断通过比较该系列 中第一次脉冲的部分阻断与第20次(20th)脉冲的阻断来评估。
方案：
平行膜片钳电生理学使用基本如Kiss及其同事(Kiss等Assay and Drug Development Technologies，I：127-135，2003)所述IonWorks HT (Molecular Devices Corp)进行。简言之，表达N-型钙通道亚基(α1B、α2δ 和β3a)和向内调节的钾通道(Kir2.3)的稳定的HEK 293细胞系(称为 CBK)被用于记录通过N-型钙通道的钡流(barium current)。使用前，使 细胞在TI5培养板中生长至60-90％汇合。细胞用10mL PBS(无CalMg) 淋洗3次，接着向烧瓶中加入1.0mL Ix胰蛋白酶。于37℃培养细胞 直至呈圆形并从培养板脱离(通常1-3min)。然后将细胞转移至装有含 血清和抗生素的13ml CBK培养基的15mL圆锥管中并于桌面上设定 2级旋转来离心2分钟。流出上清液，并使细胞颗粒再次悬浮于含以 下成分的外部溶液中(以mM计)：120NaCI、20BaCl2、4.5KCl、0.5 MgCl2、10HEPES、10葡萄糖，pH 7.4)。调节细胞在悬浮液中的浓度 以达到1000-3000个细胞/孔。一旦细胞已经再次悬浮，则立即使用它 们。内部溶液包含(以mM计)：100葡萄糖酸钾(K-Gluconate)、40KCl、 3.2MgCl2、3EGTA、5HEPES，pH 7.3(含KOH)。穿孔膜片全细胞记 录通过加入穿孔的两性霉素B至内部溶液中实现。制备两性霉素B在 DMSO中的新鲜的36mg/mL储备液用于每次运行。将166μL的这种 储备液加入到50mL内部溶液中，得到120μg/ml的最终工作溶液。 使用IonWorks HT软件/硬件系统实施电压方案和膜电流的记录。电流 于1.25kHz处取样和使用10mV步长从保持电位减去漏电并推定线性 漏泄电导。未对液体接界电位采用校正。细胞以-70m V的电压夹持 10s，接着25ms步长的20脉冲系列至+20mV(2Hz)。控制系列后， 使细胞与化合物一起培养5分钟并施加第二个系列。使用化合物的依 赖性阻断通过比较第一次脉冲的部分阻断与第20次(20th)脉冲的阻断 来评估。从分析中排除在试验电位(+20mV)具有密封电阻低于70 MOhms或Ba流低于0.1nA的孔。电流振幅用IonWorks软件计算。 相对电流、百分抑制率和IC50值用常规Excel/Sigmaplot宏计算。 将化合物用射流头(fluidics head)从96-孔化合物培养板加入到细胞中。 为补偿加入期间稀释的化合物，化合物培养板浓度为膜片板上最终浓 度的3倍。
通常进行两种类型的实验：筛选和滴定。在筛选模式中，以单一浓度 (通常3μM)评价10-20种化合物。由在化合物的存在和不存在下电流 振幅的比率，归一化至媒介物对照孔的比率计算百分抑制率。为生成 IC50值，对每膜片板2-4种化合物进行10-点滴定。测试的浓度范围一 般为0.001-20μM。由Hill方程式与数据的拟合度计算IC50值。所用 的Hill方程的形式为：
相对电流＝(Max-Min)/((I+(conc/IC50)^斜率)+Min).
每块板用于归一化目的并确定最大值(Max)和最小值(Min)。
测定实施例3：使用全细胞电压钳和使用PatchXpress自动化电生理学 仪器对Cav2.2通道的阻断的电生理学测量
表达N-型钙通道亚基(α1B，α2δ和β3a)和向内调节的钾通道(Kir2.3)的稳 定的HEK 293细胞系(称为CBK)被用于记录通过N-型钙通道的钡流。
使细胞或者在聚-D-赖氨酸包被的(Poly-D-Lysine Coated)盖玻片 (manual EP)或者在TIS培养板(PatchXpress)上生长。对于膜片表达 (PatchExpress)，使用胰蛋白酶从烧瓶中释出细胞。在两种情况下，外 部溶液包含(以mM计)：130CsCl2、10EGTA、10HEPES、2MgCl2、 3MgATP，pH 7.3(用CsOH)。
钡流通过手工全细胞膜片钳，使用标准技术测定(Hamill et.al. Pfluegers Archiv 391：85-100(1981))。用硼硅玻璃制造微电极并经烧制 抛光。当用标准内部盐水填充时，电极电阻一般为2-4MOhm。参考 电极是银-氯化银颗粒。对于内部和外部溶液之间的液体接界电位未校 正电压并使用P/n程序减去漏电。通过重力经浴灌注将溶液施加于细 胞。实验的药室容积为-0.2mL，和灌注率为0.5-2mL/min。一直维持 通过所述药室的吸入流量。流的幅度的测量用PULSEFIT软件(HEKA Elektronik)进行。
PatchXpress(Molecular Diveces)是16-孔全细胞自动化膜片钳装置，其 用全集成射流技术(fully integrated fluidics)非同步地(asynchronously) 操作。以50-80％的成功率获得高电阻(千兆欧姆)密封。电容和串联电 阻补偿是自动的。对于液体接界电位未采用校正。使用P/n程序减去 漏电。用96-孔化合物培养板的吸移管管理器将化合物加入到细胞中。 使用PatchXpress软件/硬件系统实施电压方案和膜电流的记录。电流 振幅用DataXpress软件计算。
在手工和自动化膜片钳两者中，以-4mV或-90m V对细胞实施电压夹 持，每15秒施加50ms脉冲至+20mV(0.067Hz)。将化合物以递增剂 量加入以测定％抑制率。由在化合物的存在和不存在下电流振幅的比 率计算百分抑制率。当每个细胞获得多个剂量时，计算IC50值。测试 的浓度范围一般为0.1-30μM。由Hill方程式与数据的拟合度计算IC50值。所用的Hill方程的形式为：相对电流＝1/(1+(conc/IC50)^斜率)。
表5.N-型钙通道阻断
另外的通道阻断数据示于表6中。
表6.N-和T-型通道阻断数据
实施例51：L5/L6脊柱神经结扎(SNL)-Chung疼痛模型
脊柱神经结扎是表示外周神经损伤导致神经性疼痛综合征的动物模 型。在这种模型实验动物中出现触觉异常疼痛(allodynia)和痛觉过敏的 临床症状。L5/L6脊柱神经结扎(SNL)损伤在称重为200-250克的雄性 Sprague-Dawley大鼠(Harlan；Indianapolis，IN)中使用Kim和Chung (Kim等，Pain 50：355-363(1992))的程序诱导。
用2％异荧烷(isofluorane)在2L/min的O2中诱导麻醉并用在O2中的 0.5％异荧烷维持。然后对大鼠去毛并无菌处理以准备手术。在L4-S2 水平进行2cm的脊柱旁切口。通过用小的咬骨钳移去神经上面的横 突以暴露L4/L5。L5脊神经是横突下面两条可见神经中较大的一条并 位于最靠近脊柱处。L6脊神经位于斜骨(slope bone)角下面。使用自制 的Chung玻璃棒勾住L5或L6并将预先制备的4.0丝缝线的活结放置 在刚好神经上面的棒尖上并向下拉扯以使结扎紧固。将背根神经节远 端的L5和L6脊神经紧紧结扎。闭合切口，使动物恢复5天。显示出 运动缺乏(如拖爪(paw-dragging))不能显示随后的触觉异常疼痛的大鼠 从进一步的试验中排除。
假手术对照(Sham control)大鼠经历与试验动物相同的手术和处理， 但不进行SNL。
在启动药物传递之前，获得基线行为试验数据。然后在选择的时间上 可在输入后再次收集试验或对照关节行为数据。
A.触觉异常疼痛-Von Frey的评价
触觉异常疼痛的评价包括测量与用一系列已校准的von Frey细丝的 (无害刺激)探测的响应的神经损伤部位同侧爪缩回的阈值。在试验前 使动物适应悬挂金属丝网格笼30分钟。将每根von Frey细丝垂直施 用于大鼠绑扎的爪的趾面5秒钟。爪的急速缩回表明阳性反应，对于 大鼠，第一根试验细丝为4.31。在给予试验物品之前和之后进行测量。 缩爪阈值通过Dixon的非-参数方法(Dixon，Ann.Rev.Pharmacol. Toxicol.20：441-462(1980))确定，其中刺激以增量增加，直至观察到阳 性反应，然后降低刺激直至观察到阴性反应。重复方案直至测定行为 的三种变化(“上和下”方法)(Chaplan等，J.Neurosci.方法53：55-63 (1994))。50％的缩爪阈值被测定为(10[Xf+kδ])/10,000，其中Xf＝最后施 用的von Frey细丝的值，k＝阳性/阴性模式的Dixon值，和δ＝刺激之 间差异的对数。对大鼠的截止(cut-off)值不低于0.2g和不高于15g (5.18细丝)；对于小鼠不低于0.03g和不高于2.34g(4.56细丝)。与预 -治疗基线相比的缩爪阈值的显著降低应被认为是触觉疼痛异常。
B.热超敏感性的评价-Hargreaves
可采用Hargreaves和同事的方法(Hargreaves等，Pain 32：77-8(1988)) 评价对于有害的热刺激的缩爪潜伏期。可使大鼠在透明玻璃板上的有 机玻璃围栏中适应30分钟。然后辐射热源(如，连接红外滤光片的卤 素灯泡)可用定时器激活并聚焦在已处理大鼠的受累爪的趾面。当爪缩 回时，缩爪潜伏期可通过中断灯泡和定时器两者的光电池测量。从辐 射热源缩回爪的潜伏期可在L5/L6SNL之前，在L5/L6SNL之后7-14 天，但在给药前，以及在给药后测定。33秒的最大截止值通常用于防 止组织损伤。因此缩爪潜伏期可测定至最接近0.1秒。缩爪潜伏期从 基线显著下降指示热痛觉过敏的状态。抗伤害感受通过热痛觉过敏向 预-治疗基线的逆转或在该基线上的缩爪潜伏期的显著(p＜0.05)增加 来指示。通过下式将数据转化为％抗痛觉过敏或％抗伤害感受：(100× (试验潜伏期-基线潜伏期)/(截止值-基线潜伏期)，其中截止值对于 测定抗痛觉过敏是21秒和对于测定抗伤害感受是40秒。
实施例52：部分癫痫的6Hz精神运动性癫痫发作模型
依据Barton et al，“部分癫痫的6Hz精神运动性癫痫发作模型的药理 学特征(Pharmacological Characterization of the 6Hz Psychomotor Seizure modal of Partial Epilepsy)，”Epilepsy Res.47(3)：217-27(2001)描 述的程序，也可评价化合物对由6Hz，3s持续时间的0.2ms矩形脉 冲幅度，以32mA(CC97)的刺激强度施加于雄性CF1小鼠(20-30g) 的角膜诱导的癫痫发作的保护作用。癫痫发作的特征是一种或多种以 下行为的表现：惊吓、前肢阵挛、电刺激后的触须颤搐和Straub-尾颤 搐。如果用化合物预-治疗后，6Hz刺激不能引起如上所述的行为响 应，则动物被认为是受“保护的”。示例性数据示于表7中。
表7
实施例53：小鼠转棒(Rotarod)试验
为评价化合物的不需要的副作用(毒性)，可监测动物的损伤神经学或 肌肉功能的明显征候。在小鼠中，转棒程序(Dunham和Miya，J.Am. Pharmacol.Assoc.46：208-209(1957))被用于公开极轻微的肌肉或神经 性损伤(MMI)。当将小鼠置于以6rpm的速度旋转的棒上时，动物可 维持其平衡较长的一段时间。如果动物在1分钟期限内从这种旋转棒 上掉下3次，则认为是中毒的。除了MMI，动物可显示循环或曲折步 态，异常的身体姿式和腿的伸展、震颤、活动过度、探究行为缺乏、 嗜眠、昏迷、僵直，定位反应丧失和肌肉张力变化。示例性数据示于 表8。
表8
实施例54：层试验和数据
层I/II脊髓神经元的记录.
通过腹膜内注射Inactin(Sigma)麻醉雄性Wistar大鼠(P6-P9对于电压- 钳和P15-P18对于电流钳记录)。然后快速切开脊髓并置于冰冷的溶液 保护的含以下成分的蔗糖溶液中(以mM计)：50蔗糖、92NaCl、15D- 葡萄糖、26NaHCO3、5KCl、1.25NaH2PO4、0.5CaCl2、7MgSO4、1 犬尿喹啉酸并用5％CO2/95％O2鼓泡。然后在解剖显微镜下，从腰 区脊髓取出脊膜、硬脑脊膜，以及背根和腹根。将脊髓的“清洁的”腰 区胶合到振动切片机台上并立即浸入冰冷的、鼓泡的蔗糖溶液中。对 于电流钳记录，切割300-350μm旁矢状面切片以b保持层I神经元的 树突轴(dendritic arbour)，同时制备350-400μm的横切片用于电压-钳 NaV通道记录。使切片在35℃的Ringer溶液中恢复1小时，所述Ringer 溶液含(以mM计)：125NaCl、20D-葡萄糖、26NaHCO3、3KCl、1.25 NaH2PO4、2CaCl2、1MgCl2、1犬尿喹啉酸酸、0.1木防己苦毒素， 用5％CO2/95％O2鼓泡。然后使切片恢复室返回至室温(20-22℃) 和所有记录在该温度下进行。
使用IR-DIC光学显微镜(Zeiss Axioskop 2FS plus，Gottingen，德国) 观察神经元，基于其相对于胶体层的位置，选择来自层I和层II的外 层的神经元。使用具有3-6MΩ的电阻的硼硅玻璃膜片移液管，钳夹 神经元。完整切片中的层I/II神经元的电流钳记录，外部记录溶液是 上面的Ringer溶液，而内部膜片移液管溶液含有(以mM计算)：140 葡萄糖酸钾、4NaCl、10HEPES、1EGTA、0.5MgCl2、4MgATP、 0.5Na2GTP，用5M KOH调节至pH 7.2并用D-甘露醇(如果必要)调 节至290mOsm。选择唯一的激励激发的神经元用于电流钳实验，而 弃去相位的、延迟开始的和单尖峰信号神经元(22)。以50kHz和以2.4 kHz低通过滤使记录数字化。
示例性数据示于表9。
表9
其它实施方案
尽管已经结合其具体实施方案描述本发明，但仍应理解，进一步修饰 是可能的，且一般说来，本申请打算涵盖根据本发明的原则的本发明 的任何变化、应用或修改，包括本公开的这类偏离也落在本发明所属 领域内的已知或惯常的实践中并可适用于上文中提出的必要特征。
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