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1、(10)授权公告号 CN 102670821 B (45)授权公告日 2014.04.02 CN 102670821 B (21)申请号 201110063755.2 (22)申请日 2011.03.17 A61K 36/804(2006.01) A61P 37/08(2006.01) A61P 9/00(2006.01) (73)专利权人 辽宁中医药大学 地址 110032 辽宁省沈阳市皇姑区崇山东路 79 号辽宁中医药大学科研处 (72)发明人 张君 (74)专利代理机构 沈阳利泰专利商标代理有限 公司 21209 代理人 刘忠达 CN 101623383 A,2010.01.13, 全文。
2、 . CN 101129823 A,2008.02.27, 全文 . JP 昭 60-120879 A,1985.06.28, 全文 . WO 02/069963 A2,2002.09.12, 全文 . CN 101721540 A,2010.06.09, 全文 . 郜燕霞等 . 过敏性紫癜辨治十法 .中外医 疗 .2009,( 第 11 期 ), 第 126-127 页， 尤其是第 126 页 “1 辨证施治” ， 第 127 页左栏倒数第 2 段 . (54) 发明名称 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂及制备 方法 (57) 摘要 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 其特 征是由中药材紫草。
3、 100-370g、 蒲公英 100-500g、 牡 丹 皮 100-250g、白 鲜 皮 100-230g、白 芍 100-300g、 墨旱莲 100-300g、 小蓟 100-500g、 牛膝 75-300g、 甘草 50-240g、 生地黄 100-400g 和茯苓 100-400g 制备成。本发明具有解毒、 凉血、 化瘀功 效， 能够在较短的时间内缓解症状， 缩短疗程， 减 少病情反复， 减少肾损害的发生概率， 且无激素的 阶断效应。 本发明具有很好的应用前景， 具有重大 社会效益和经济效益。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 于秀培 权利要求书 2 页 说明书 8 页。
4、 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书2页 说明书8页 (10)授权公告号 CN 102670821 B CN 102670821 B 1/2 页 2 1. 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 其特征是由中药材紫草 100 370g、 蒲公英 100500g、 牡丹皮100250g、 白鲜皮100230g、 白芍100300g、 墨旱莲100300g、 小蓟 100 500g、 牛膝 75 300g、 甘草 50 240g、 生地黄 100 400g 和茯苓 100 400g 制备而成 ； 制备方法是 ：（1） 取生地黄 100 400g 和茯苓 100 400g。
5、 加水煎煮 2 3 次， 每次加 6 8 倍量水， 每次煎煮 1 1.5 小时， 合并煎煮液， 过滤， 滤液浓缩至在 60下相对密度为 1.05 1.10 的清膏 ； （2） 取紫草 100 370g、 蒲公英 100 500g、 牡丹皮 100 250g、 白鲜皮 100 230g、 白芍 100 300g、 墨旱莲 100 300g、 小蓟 100 500g、 牛膝 75 300g 和甘草 50 240g 用质量浓度为 90的乙醇提取 2 3 次， 每次加 6 8 倍量乙醇， 分别回流提取 1 1.5 小时， 合并提取液， 过滤， 滤液回收乙醇后浓缩至 60温度下相对密度为 1.05 1.。
6、10 的清 膏 ； （3） 合并步骤 （1） 和步骤 （2） 所得的清膏， 减压浓缩至 60温度下相对密度为 1.15 1.25的稠膏， 再加入适量糊精和阿司帕坦， 混匀， 干燥， 粉碎成细粉， 按设定粒度制粒， 即得。 2. 根据权利要求 1 所述的一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 其特征是中药复方制 剂制成颗粒剂。 3. 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 其特征是由中药材紫草 367g、 蒲公英 239g、 牡丹皮239g、 白鲜皮239g、 白芍239g、 墨旱莲239g、 小蓟239g、 牛膝184g、 甘草239g、 生地黄 239g 和茯苓 239g 制备而成 ； 制备方法是 。
7、： 取生地黄 239g 和茯苓 239g 加水煎煮二次， 每次加 8 倍量水， 各煎煮 1.0 小时， 合并煎液， 过滤， 浓缩至在 60下相对密度为 1.05 1.10 的清膏， 另器收集 ； 取紫草 367g、 蒲公英239g、 牡丹皮239g、 白鲜皮239g、 白芍239g、 墨旱莲239g、 小蓟239g、 牛膝184g 和甘草239g用90乙醇提取二次， 每次加8倍量， 各回流提取1小时， 合并提取液， 过滤， 滤 液回收乙醇并浓缩至60温度下相对密度为1.051.10的清膏， 与上述清膏合并， 减压浓 缩至 60温度下相对密度为 1.15 1.25 的稠膏， 加入 550g 糊精。
8、， 20g 阿司帕坦， 混匀， 干 燥， 粉碎成细粉， 制粒， 制成 1000g， 即得。 4. 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 其特征是由中药材紫草 370g、 蒲公英 500g、 牡丹皮250g、 白鲜皮230g、 白芍300g、 墨旱莲300g、 小蓟500g、 牛膝300g、 甘草200g、 生地黄 400g 和茯苓 400g 制备而成。 5. 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 其特征是由中药材紫草 100g、 蒲公英 100g、 牡丹皮 100g、 白鲜皮 100g、 白芍 100g、 墨旱莲 100g、 小蓟 100g、 牛膝 75g、 甘草 50g、 生地黄 100g 和茯。
9、苓 100g 制备而成。 6. 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂的制备方法， 其特征包括下述工艺步骤 ： （1） 取生地黄 100 400g 和茯苓 100 400g 加水煎煮 2 3 次， 每次加 6 8 倍量水， 每次煎煮 1 1.5 小时， 合并煎煮液， 过滤， 滤液浓缩至在 60下相对密度为 1.05 1.10 的清膏 ； （2） 取紫草 100 370g、 蒲公英 100 500g、 牡丹皮 100 250g、 白鲜皮 100 230g、 白芍 100 300g、 墨旱莲 100 300g、 小蓟 100 500g、 牛膝 75 300g 和甘草 50 240g 用质量浓度为 90的。
10、乙醇提取 2 3 次， 每次加 6 8 倍量乙醇， 分别回流提取 1 1.5 权 利 要 求 书 CN 102670821 B 2 2/2 页 3 小时， 合并提取液， 过滤， 滤液回收乙醇后浓缩至 60温度下相对密度为 1.05 1.10 的清 膏 ； （3） 合并步骤 （1） 和步骤 （2） 所得的清膏， 减压浓缩至 60温度下相对密度为 1.15 1.25的稠膏， 再加入适量糊精和阿司帕坦， 混匀， 干燥， 粉碎成细粉， 按设定粒度制粒， 即得。 权 利 要 求 书 CN 102670821 B 3 1/8 页 4 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂及制备方法 技术领域 0001 本发明是。
11、属于中药制剂， 具体是一种治疗过敏性紫癜的中药。 背景技术 0002 过敏性紫癜(Henoch Schonlein purpura HSP)属过敏性血管炎范畴， 是一种以小 血管炎为主要病变的血管炎综合征。 临床表现为特征性皮疹， 常伴关节痛、 关节积液、 腹痛、 便血及蛋白尿、 血尿。常发于儿童及青少年。 0003 中医古籍无专门记载， 根据其临床症状特点属中医学 “葡萄疫” 、“肌衄” 、“尿血” 、 “水肿” “虚劳” 等病证范畴。我们从治疗过敏性紫癜 20 余年的临床经验中体会到， 过敏性 紫癜的病因不外乎毒、 热、 瘀三方面因素。 毒郁化热， 热盛伤络， 热毒郁于血分， 外伤阳络， 。
12、内 伤阴络， 阳络伤则皮肤紫癜， 阴络伤则便血尿血。 而在整个病理改变过程中毒、 热、 瘀为病机 关键。 0004 现代医学对本病的发病机理尚不十分清楚， 一般认为属于免疫发病， 是 IgA 或其 免疫复合物主要通过旁路途径激活补体并造成组织的免疫病理损伤。近几年过敏性紫癜 的发病呈逐年上升和流行， 有文献提示患病率从 0.43上升为 1.21。因有 47.3-60的 病儿并发肾损害而严重影响了本病的预后， 其中 14可发展至终末肾功能衰竭。目前国内 外尚缺乏有效的特异的治疗药物， 治疗主要应用糖皮质激素， 免疫抑制剂等， 但疗效尚难肯 定。 0005 综合目前国内中医、 中西医结合治疗过敏性。
13、紫癜的文献， 多以中医辨证分型治疗 为主或中医辨证加西药， 并且以回顾性病例总结为主， 缺乏前瞻性研究。 王氏以清热凉血的 紫癜消胶囊 ( 紫草茜草仙鹤草旱莲草雷公藤焦黄柏土牛膝丹参薏苡仁生地丹皮生黄芪等 ) 为主治疗过敏性紫癜 82 例， 证属血热妄行， 临床观察 14 天， 总有效率 83.33 ( 王振生 ； 紫 癜消胶囊治疗过敏性紫癜的临床观察 ； 中国中西医结合杂志 2002.22(1) ： 32)。张氏等以 蝉乌消斑饮加减治疗过敏性紫癜 44 例， 采用清热凉血之法， 方药组成为金银花、 丹参、 生地 黄、 蒲公英、 旱莲草、 仙鹤草、 小蓟、 丹皮、 紫草、 蝉衣、 乌梅、 甘草。
14、等， 临床平均连服 12 剂， 总 有效率 93 ( 张伟萍、 徐素珍 ； 蝉乌消斑饮治疗过敏性紫癜 44 例 ； 四川中医 ； 2002 ； 20(4) ： 44)。杭氏以清热凉血， 活血化瘀之法组方生紫藤汤， 药物为生地、 紫草、 雷公藤、 白茅根、 丹 皮、 赤芍、 甘草、 防风等。以生紫藤汤为基本方加减治疗过敏性紫癜 51 例， 中医证属湿热瘀 阻病例， 临床观察 15 天， 总有效率 82.3 ( 杭守云 ； 生紫藤汤治疗过敏性紫癜 51 例 ； 皮肤 病与性病 ； 2000 ； 22(1) ； 28)。 贾氏以疏风清络法治疗过敏性紫癜36例， 证属风热伤络， 基本 方为荆芥、 防风。
15、、 秦艽、 忍冬藤、 芦根、 紫草等， 随证加减， 临床观察 4 周， 取得较好效果。( 贾 丽丽 ； 疏风清络法治疗过敏性紫癜 36 例 ； 北京中医 ； 2000 ； 19(30) ： 27) 0006 过敏性紫癜由于发病率高、 肾损害严重， 已成为严重危害儿童及青少年健康及生 命的重要多发疾病。但目前国内外尚未见到通过早期干预可以减少肾损害发生率的报导。 发明内容 说 明 书 CN 102670821 B 4 2/8 页 5 0007 本发明的目的， 是提供一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 本发明具有清热解 毒、 凉血、 化瘀功效， 对过敏性紫癜病具有良好的疗效。 0008 本发明的另。
16、一目的， 是提供一种制备治疗过敏性紫癜的中药复方制备的方法。 0009 采用的技术方案是 ： 0010 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 是由中药材紫草 100-370g、 蒲公英 100-500g、 牡丹皮 100-250g、 白鲜皮 100-230g、 白芍 100-300g、 墨旱莲 100-300g、 小蓟 100-500g、 牛膝 75-300g、 甘草 50-240g、 生地黄 100-400g 和茯苓 100-400g 制备成。 0011 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂的制备方法， 包括下述工艺步骤 ： 0012 1、 取生地黄 100-400g 和茯苓 100-400g 加。
17、水煎煮 2-3 次， 每次加 6-8 倍量水， 每次 煎煮 1-1.5 小时， 合并煎煮液， 过滤， 滤液浓缩至在 60下相对密度为 1.05-1.10 的清膏 ； 0013 2、 取紫草 100-370g、 蒲公英 100-500g、 牡丹皮 100-250g、 白鲜皮 100-230g、 白芍 100-300g、 墨旱莲 100-300g、 小蓟 100-500g、 牛膝 75-300g 和甘草 50-240g 用质量浓度为 90的乙醇提取 2-3 次， 每次加 6-8 倍量乙醇， 分别回流提取 1-1.5 小时， 合并提取液， 过 滤， 滤液回流乙醇后浓缩至 60温度下相对密度为 1.0。
18、5-1.10 的清膏 ； 0014 3、 合并步骤 1 和步骤 2 所得的清膏， 减压浓缩至 60温度下相对密度为 1.15-1.25 的稠膏， 再加入适量糊精和阿司帕坦， 混匀， 干燥， 粉碎成细粉， 按设定粒度制粒， 即得。 0015 功能 ： 清热解毒化瘀。 0016 主治 ： 过敏性紫癜。 0017 服用量 ： 10 岁以下， 每次 10g， 每日 3 次， 10 岁以上， 每次 20g， 每日 3 次。 0018 本发明的有益效果 ： 0019 过敏性紫癜由于发病率高、 肾损害严重， 已成为严重危害儿童及青少年健康及生 命的重要多发疾病。国内虽有采用中药复方汤剂或煎剂治疗过敏性紫癜的。
19、文献报道， 但已 研制成中药新药 ( 类 ) 的尚未见到。我们从事过敏性紫癜的临床治疗与研究近 30 年， 基 于祖国医学对本病的认识， 确立了解毒、 凉血、 化瘀之法治疗过敏性紫癜的方法， 并在进行 了大量临床用药的基础上筛选有效药味， 形成有效固定经验处方， 并在中药水煎剂的基础 上进行了工艺改革， 制成紫丹颗粒剂， 并在临床进行了科学规范的多中心临床观察， 证实该 中药复方具有解毒、 凉血、 化瘀功效， 能够在较短的时间内缓解症状， 缩短疗程， 减少病情反 复， 减少肾损害的发生概率， 且无激素的阶断效应。本发明具有很好的应用前景， 具有重大 社会效益和经济效益。 具体实施方式 0020。
20、 实施例一 0021 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 是由中药材紫草 367g、 蒲公英 239g、 牡丹 皮239g、 白鲜皮239g、 白芍239g、 墨旱莲239g、 小蓟239g、 牛膝184g、 甘草239g、 生地黄239g 和茯苓 239g 制备成。 0022 实施例二 0023 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 是由中药材紫草 370g、 蒲公英 500g、 牡丹 皮250g、 白鲜皮230g、 白芍300g、 墨旱莲300g、 小蓟500g、 牛膝300g、 甘草200g、 生地黄400g 说 明 书 CN 102670821 B 5 3/8 页 6 和茯苓 400g 。
21、制备成。 0024 实施例三 0025 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 是由中药材紫草 100g、 蒲公英 100g、 牡丹 皮 100g、 白鲜皮 100g、 白芍 100g、 墨旱莲 100g、 小蓟 100g、 牛膝 75g、 甘草 50g、 生地黄 100g 和茯苓 100g 制备成。 0026 实施例四 0027 一种治疗过敏性紫癜的中药复方制剂， 是取生黄地 239g 和茯苓 239g 加水煎煮二 次， 每次加8倍量水， 各煎煮1.0小时， 合并煎液， 滤过， 浓缩至相对密度为1.05-1.10(60) 的清膏， 另器收集。取紫草 367g、 蒲公英 239g、 牡丹皮 239。
22、g、 白鲜皮 239g、 白芍 239g、 墨旱 莲 239g、 小蓟 239g、 牛膝 184g 和甘草 239g 用 90乙醇提取二次， 每次加 8 倍量， 各回流提 取1小时， 合并提取液， 滤过， 滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.05-1.10(60)的清膏， 与上述清膏合并， 减压浓缩至相对密度为 1.15 1.25(60 ) 的稠膏， 加入糊精适量 ( 约 550g)、 阿司帕坦适量 ( 约 20g)， 混匀， 干燥， 粉碎成细粉， 制粒， 制成 1000g， 即得。 0028 临床研究 ： 0029 清热凉血化瘀治疗过敏性紫癜 75 例临床分析。 0030 1 资料与方法 00。
23、31 1.1 临床资料全部病例均为 2008 年 1 月 2009 年 12 月医院门诊病例。男 45 例， 女 30 例， 男女比例为 1.5 1。5-7 岁 21 例， 7-14 岁 49 例， 14 岁 5 例。春季发病 22 例， 夏季 25 例， 秋季 9 例， 冬季 19 例。 0032 1.2 病例选择 0033 (1) 西医诊断标准 ： 参照 实用儿科学 中关于过敏性紫癜的诊断标准制定 1。 0034 (2) 中医诊断及辨证标准 ： 参照国家中医药管理局 中医病证诊断疗效标准 中关 于紫癜的诊断标准制定 2。 0035 风热伤络型 ： 症见起病急， 皮肤紫斑色鲜红， 双下肢对称。
24、分布， 或有痒感， 伴有发 热、 烦渴等， 舌尖红， 苔薄黄， 脉浮数。 0036 血热伤络型 ： 症见皮疹色鲜红， 双下肢对称分布， 多而密集， 有点融合成片， 腹部剧 痛， 烦躁不安， 大便秘结， 小便短赤， 可伴有鼻衄， 舌质红， 舌苔白厚腻或黄腻。 0037 全部病例均符合中西医诊断标准。 0038 1.3 治疗方法 0039 中医治疗 ： 清热解毒化瘀， 方用紫丹水煎剂， 药物组成 ： 紫草、 蒲公英、 牡丹皮、 白 鲜皮、 白芍、 墨旱莲、 小蓟、 牛膝、 甘草、 生地黄、 茯苓等。5+-7 岁， 每次 50ml， 每日两次口服， 7+-10 岁， 每次 80ml， 每日两次口服 。
25、； 10+岁以上， 每次 100ml， 每日两次口服。并配合口服维 生素C、 芦丁等， 疗程一个月。 在外院已使用激素疗法， 则继续口服强的松， 1mg/kg.d， 分次口 服， 并减量至停药。 0040 1.4 疗效评定标准 0041 参照国家中医药管理局 中医病证诊断疗效标准 判定 2。治愈 ： 紫癜全部消退， 伴随症状消失， 实验室检查各项指标恢复正常 ； 显效 ： 皮肤紫癜消失或明显减少， 全身症状 减轻， 实验室各项指标明显好转 ； 无效 ： 皮肤紫癜未退或退而复发， 实验室检查无改善。总 有效率 ( 治愈例数 + 显效例数 )/ 总例数。 说 明 书 CN 102670821 B 。
26、6 4/8 页 7 0042 1.5 随访方法 0043 疗程结束 3 个月内， 每周复查尿常规 1 次， 三个月后每 2 周复查一次尿常规， 随访 6 个月， 以血尿、 蛋白尿为评价肾损害的终点事件。 0044 2 结果 0045 2.1 临床治疗结果临床治愈 55 例， 显效 14 例， 无效 6 例， 治愈率 73.3， 显效率 18.7， 有效率为 92。 0046 2.2随访结果出现尿检异常改变7例， 其中单纯性蛋白尿1例， 单纯性血尿5例， 无 症状性血尿、 蛋白尿 1 例， 继发肾脏损害为 9。 0047 结果表明 ： 采用解毒凉血化瘀法筛选的中药紫丹水煎剂， 对过敏性紫癜的治疗。
27、， 疗 效确切。其随访结果肾损害的发生概率明显低于文献报道。研究已列入国家行业公益性项 目， 正在进行临床紫丹颗粒治疗过敏性紫癜的 RCT 研究。 0048 参考文献 0049 1 胡亚美， 江载芳， 诸福棠， 等。实用儿科学 M.7 版。北京 ： 人民卫生出版社， 2002 ： 689。 0050 2 国家中医药管理局。中医病证诊断疗效标准 S. 南京 ： 南京大学出版社， 1994 ： 18。 0051 实验研究 ： 0052 紫丹颗粒主要药效学实验研究 0053 摘要目的对紫丹颗粒主要药效学作用进行研究。 方法采用大鼠被动皮肤过敏反应 实验、 DNBC 所致小鼠迟发超敏反应实验， 观察紫。
28、丹颗粒对变态反应的影响 ； 采用醋酸所致 小鼠腹腔毛细血管通透性实验、 蛋清所致大鼠足肿胀实验， 观察紫丹颗粒抗炎作用。 结果紫 丹颗粒能明显抑制大鼠被动皮肤过敏反应， 抑制 DNBC 所致小鼠迟发超敏反应 ； 降低醋酸所 致小鼠毛细血管通透性， 抑制蛋清所致大鼠足肿胀。 结论紫丹颗粒具有抗变态反应、 抗炎作 用。 0054 紫丹颗粒是由紫草、 丹皮、 生地等 11 味药材组成， 具有解毒凉血， 化瘀功效。用于 治疗过敏性紫癜。本文针对其功效和临床应用， 对该药进行了主要药效学试验。 0055 一、 实验目的 0056 观察紫丹颗粒与功能主治有关的主要药效学作用， 为该药的临床应用提供参考。 。
29、0057 二、 实验材料 0058 受试药物 ： 紫丹颗粒， 由沈阳药科大学提供， 批号 ： ， 规格 ： 9g/ 袋、 2.702g 生药 / g， 中药阳性对照药裸花紫珠片， 海南九芝堂药业有限公司生产， 批号 ： 900820， 规格 ： 24 片 / 合、 0.5g( 干浸膏 )/ 片 ； 西药阳性对照药醋酸泼尼松片， 天津天药药业股份有限公司生产， 批号 ： 090603， 规格 ： 20 片 / 瓶， 50mg/ 片。 0059 受 试 动 物 ： SPF 级 小 白 鼠、 购 于 中 国 医 科 大 学 实 验 动 物 中 心， 许 可 证 号 ： SCXK-( 辽 )2008-。
30、0005， SPF 级大白鼠， 购于中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心， 许可证号 ： SCXK-( 军 )2007-004。 0060 实验环境 ： 辽宁省中医药研究院实验动物中心。许可证号 ： SYXK( 辽 )2007-0010。 实验室温度 ： 20 23， 实验室湿度 ： 50 60。 0061 仪器 ： 721 分光光度计， 上海第三分析仪器厂产。PV-200 足趾容积测量仪， 成都泰 说 明 书 CN 102670821 B 7 5/8 页 8 盟科技有限公司产。 0062 试剂 ： 伊文斯蓝， 批号 ： 20070207， 国药集团化学试剂有限公司生产。2.4- 二硝基 。
31、氯苯， 军事医学科学院药材供应站提供， 批号 ： 991223。丙酮， 天津市百世化工有限公司产。 批号 ： 20050408。醋酸， 开原化学试剂厂产， 批号 ： 900812。 0063 统计方法 ： 所有数据用均数 标准差表示。组间比较用 t 检验。 0064 三、 试验方法与结果 0065 1 紫丹颗粒对大鼠被动皮肤过敏反应 (PCA) 的影响 (1) 0066 1.1抗血清制备 ： 取体重100120g雄性大鼠10只， 除3只静脉注射生理盐水外， 其余 7 只静脉注射 1新鲜蛋清液， 按 50mg/kg， 同时腹腔注射 4 A12(SO4)3凝胶 2mL/ 只， 致敏后第 12 天静。
32、脉采血， 离心， 分离血清， -20保存， 2 周内备用。 0067 1.2 抗血清接种及抗原攻击 0068 取体重 180 220g 雄性大鼠 70 只， 按体重随机分 7 组， 空白对照 ( 等体积蒸馏 水 )， 模型对照组 ( 等体积蒸馏水 )， 紫丹颗粒低、 中、 高剂量组 (6.57g 生药 /kg、 13.13g 生 药/kg、 26.26g生药/kg)， 西药阳性对照药醋酸泼尼松片组(3.6mg/kg)， 中药阳性对照药裸 花紫珠片组 (0.54g 干浸膏 /kg)。灌胃给药， 每天 1 次， 连续 7 天， 在给药第 6 天， 分别在动 物背部中线两侧脱毛， 将上述抗血清用生理。
33、盐水稀释成 1 ： 8 稀释度后， 在各组大鼠背部脱 毛处皮内注射抗血清 0.1ml/ 点， 致敏后 48h( 末次给药后 30min) 进行抗原攻击， 各组大鼠 静脉注射 0.5伊文斯蓝蛋白注射液 ( 内含 1ml新鲜蛋清液 )1ml/ 只， 30min 后脱颈处死 大鼠， 将背部皮肤蓝斑皮片剪下， 剪碎， 加入丙酮一生理盐水 (7 3) 混合溶液 5mL 中浸泡， 次日离心， 取上清液， 用721分光光度计在610nm波长处测定其吸收度(0D值)， 组间比较差 异的显著性， 计算出抑制百分率。结果见表 1。 0069 表 1 紫丹颗粒对 PCA 反应的影响 0070 0071 *P 0.0。
34、5( 与模型对照组比 ) *P 0.01( 与模型对照组比 ) 0072 由表 1 可见， 紫丹颗粒中、 高剂量组 (13.13g 生药 /kg、 26.26g 生药 /kg) 光密度值 明显低于模型对照组， 与模型对照组相比差别有显著意义 (P 0.05)。表明紫丹颗粒能减 少蓝斑形成， 抑制大鼠被动皮肤过敏反应发生。 0073 2 紫丹颗粒对 DNCB 所致小鼠迟发超敏反应的影响 (1) 说 明 书 CN 102670821 B 8 6/8 页 9 0074 取小白鼠 60 只， 雄性。按体重随机分 6 组， 空白对照组 ( 等体积蒸馏水 )， 紫丹颗 粒低、 中、 高剂量组 (9.48g。
35、 生药 /kg、 18.96g 生药 /kg、 37.92g 生药 /kg)， 西药阳性对照药 醋酸泼尼松片组 (5.2mg/kg)， 中药阳性对照药裸花紫珠片组 (0.78 干浸膏 /kg)。灌胃给 药， 连续给药 9 天。首次给药第二日小鼠背部皮下注射 1.25 2.4 二硝基氯苯丙酮溶液 (DNCB)20l/只致敏， 末次给药后1小时， 在小鼠右耳两面涂抹1.25DNBC丙酮液20l/ 只， 攻击后 24h， 颈椎脱臼处死小鼠， 用直径 8mm 打孔器于左右耳相同部位打下耳片， 称重， 以左右耳片之重量差为肿胀度。统计处理各给药组与模型对照组的差异。结果见表 2。 0075 表 2 紫丹。
36、颗粒对 DNCB 所致小鼠迟发超敏反应的影响 0076 0077 *P 0.05( 与空白对照组比 )*P 0.01( 与空白对照组比 ) 0078 由表 2 可见， 紫丹颗粒低、 中、 高剂量组 (9.48 生药 /kg、 18.96g 生药 /kg、 37.92g 生药 /kg) 耳肿胀度明显低于空白对照组， 与空白对照组相比差别有显著意义 (P 0.05)。 表明紫丹颗粒能抑制 DNBC 所致小鼠耳肿胀。 0079 3 紫丹颗粒对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 (2) 0080 取小白鼠 60 只， 体重 18 22g， 雌、 雄各半， 分组及给药剂量同实验 2， 灌胃给 药， 每。
37、天 1 次， 连续 7 天， 末次给药 30min 后， 均尾静脉注射 0.5伊文斯蓝生理盐水溶液 0.1ml/10g 体重， 随即每只腹腔注射 0.6醋酸 0.2ml， 20min 后脱颈处死， 剪开腹部， 用 6ml 生理盐水分数次洗涤腹腔， 吸管吸出洗涤液， 合并后加入生理盐水至 10ml。放入离心机 3000rpm 离心 15min， 取上清液用分光光度计在 590nm 处测定光密度值， 组间比较差异的显 著性。并求出抑制率。 0081 结果见表 3。 0082 表 3 紫丹颗粒对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 0083 说 明 书 CN 102670821 B 9 7/8 页 。
38、10 0084 *P 0.05( 与空白对照组比 )*P 0.01( 与空白对照组比 ) 0085 由表 3 可见， 紫丹颗粒中、 高剂量组 (18.96g 生药 /kg、 37.92g 生药 /kg) 光密度值 明显低于空白对照组， 与空白对照组相比差别有显著意义 (P 0.05)。表明紫丹颗粒能明 显抑制伊文思兰渗出量， 降低毛细血管通透性。 0086 4 对蛋清所致大鼠足肿胀的影响 (1) 0087 取大鼠 60 只， 体重 160 200g， 雄性， 按体重随机分为 6 组， 空白对照 ( 等体积蒸 馏水 )， 紫丹颗粒低、 中、 高剂量组 (6.57g 生药 /kg、 13.13g 。
39、生药 /kg、 26.26g 生药 /kg)， 西 药阳性对照药醋酸泼尼松片组(3.6mg/kg)， 中药阳性对照药裸花紫珠片组(0.54g干浸膏/ kg)。连续给药 7 天， 实验前在每只大鼠左后爪踝关节处用油性笔画一清晰横线， 先测出各 鼠正常的鼠爪体积， 末次给药 30min 后， 在各鼠左后脚跖皮下注射 10蛋清溶液 0.1ml/ 只 致炎， 致炎后 1h、 2h、 4h、 6h 测定各鼠足趾体积， 各鼠致炎前后足体积差值为肿胀度， 比较各 组肿胀度的差异。结果见表 4。 0088 表 4 紫丹颗粒对蛋清所致大鼠足肿胀的影响 0089 0090 *P 0.05( 与空白对照组比 )*P。
40、 0.01( 与空白对照组比 ) 0091 由表 4 可见， 紫丹颗粒低、 中、 高剂量组 (6.57g 生药 /kg、 13.13g 生药 /kg、 26.26g 生药 /kg) 在致炎后 1 6h 足肿胀度明显低于模型对照组， 与模型对照组相比差别有显著 意义 (P 0.05， P 0.01)。表明紫丹颗粒对蛋清所致大鼠足肿胀有显著抑制作用。 0092 3 结论 0093 大鼠被动皮肤过敏 (PCA) 反应实验结果显示、 紫丹颗粒中、 高剂量组 (13.13g 生 说 明 书 CN 102670821 B 10 8/8 页 11 药 /kg、 26.26g 生药 /kg) 光密度值明显低于。
41、模型对照组， 与模型对照组相比差别有显著意 义 (P 0.05)， 表明紫丹颗粒能减少蓝斑形成， 抑制大鼠被动皮肤过敏反应发生， 具有抗 I 型变态反应作用。DNBC 所致小鼠迟发超敏反应实验结果显示， 紫丹颗粒低、 中、 高剂量组 (9.48 生药 /kg、 18.96g 生药 /kg、 37.92g 生药 /kg) 耳肿胀度明显低于空白对照组， 与空白 对照组相比差别有显著意义 (P 0.05)， 表明紫丹颗粒具有抗迟发型 ( 型 ) 变态反应作 用。 0094 醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性实验结果显示， 紫丹颗粒中、 高剂量组 (18.96g 生药 /kg、 37.92g 生药 /kg。
42、) 光密度值明显低于空白对照组， 与空白对照组相比差别有显著 意义 (P 0.05)， 表明紫丹颗粒能明显抑制伊文斯蓝渗出量， 降低毛细血管通透性 ； 蛋清所 致大鼠足肿胀实验结果显示， 紫丹颗粒低、 中、 高剂量组 (6.57g 生药 /kg、 13.13g 生药 /kg、 26.26g 生药 /kg) 在致炎后 1 6h 足肿胀度明显低于模型对照组， 与模型对照组相比差别 有显著意义 (P 0.05， P 0.01)， 表明紫丹颗粒能显著抑制蛋清所致大鼠足肿胀， 具有抗 炎作用。 0095 参考文献 0096 1. 李仪奎， 等 . 中药药理实验方法学 M. 第二版 . 上海科学技术出版社， 2006 ： 744、 875、 774 0097 2. 陈奇 . 中药药理研究方法学 M. 人民卫生出版社， 1993， 305。 说 明 书 CN 102670821 B 11 。