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1、10申请公布号CN104072494A43申请公布日20141001CN104072494A21申请号201410269097622申请日20140617C07D459/0020060171申请人南京泽朗医药科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼72发明人刘东锋杨成东54发明名称一种酶解协同双频超声提取利血平的方法57摘要本发明涉及一种酶解协同双频超声法提取利血平的方法，其处理步骤包括将催吐萝芙木的根粉碎，过60目筛，加入酸性乙醇溶液，调节PH值至3050，并加入14的纤维素酶，置于双频超声提取器中，于4060提取90120MIN，酶解液依次经灭活、离心。
2、、过滤、中和、树脂分离纯化、浓缩、有机溶剂萃取、重结晶等步骤，得到利血平晶体。本发明以催吐萝芙木为原料，充分利用酶解协同双频超声提取的双重作用，最大限度的溶出催吐萝芙木中的利血平，具有工艺简单、提取时间短、有机溶剂用量少、毒性小的优点，适用于大规模生产。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104072494ACN104072494A1/1页21一种酶解协同双频超声提取利血平的方法，其特征在于，包括以下步骤将催吐萝芙木的根粉碎，过60目筛，加入57倍的7090的酸性乙醇溶液，调节PH值至3050，并加入1。
3、4的纤维素酶，置于双频超声提取器中，超声频率分别为20KHZ、40KHZ，功率为400600W，于5060提取90120MIN，酶解液依次经90灭活15MIN、离心、取上清液，氢氧化钠中和至PH为7075，上树脂柱，1015BV的7080的乙醇洗脱，洗脱液浓缩得固体生物碱，乙酸乙酯石油醚溶解，搅拌，取上清液减压浓缩，乙酸乙酯重结晶2次，得到利血平晶体。2根据权利要求1所述的一种酶解协同双频超声提取利血平的方法，其特征在于，所述的调节乙醇溶液的酸为盐酸或乙酸。3根据权利要求1所述的一种酶解协同双频超声提取利血平的方法，其特征在于，所述的超声功率为双频超声作用时总功率（20KHZ与40KHZ各取一。
4、半）。4根据权利要求1所述的一种酶解协同双频超声提取利血平的方法，其特征在于，所述的树脂为D101、D72或HZ818。权利要求书CN104072494A1/2页3一种酶解协同双频超声提取利血平的方法技术领域0001本发明涉及一种提取催吐萝芙木中利血平的方法，具体涉及一种酶解协同双频超声提取利血平的方法，属于中药技术领域。背景技术0002药用催吐萝芙木为夹竹桃科植物催吐萝芙木的根，含有多种生物碱，包括蛇根碱、阿马灵碱、利血平等，具有清风热、降肝火、消肿毒的功效。利血平，为长棱柱状晶体，微溶于水，易溶于氯仿、二氯甲烷和冰醋酸，溶于苯和乙酸乙酯，略溶于丙酮、甲醇、乙醇和乙醚，具有降压、镇静和安定作。
5、用，是医药生产降压药的重要原料，具有广阔的发展前景。0003目前，传统的提取利血平的方法是用萝芙木根粉用水湿润，苯回流提取，酸性甲醇溶解，硫氰酸钾结晶，再脱盐、重结晶获得利血平。这种工艺虽然工艺简单，对设备要求也不高，但苯用量大，毒性比较大，同时使用了有毒的硫氰酸盐，容易导致萝芙木碱结构的改变。专利CN100494194C公开了一种利用乙醇浸提多次提取，大孔吸附树脂进行吸附分离、氯仿石油醚沉淀出胶质，结晶生产出利血平，该方法虽然在原有基础上有所改进，但是仍然采用回流提取，耗能高，提取率低，并且采用了氯仿除胶，毒性也较大，不利于环保。发明内容0004本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种酶解。
6、协同双频超声提取利血平的方法，该方法工艺简单、成本低、提取时间短、提取率高，适合工业化生产。0005本发明包括以下步骤A将催吐萝芙木的根粉碎，过60目筛，加入57倍的7090的酸性乙醇溶液，调节PH值至3050，并加入14的纤维素酶，置于双频超声提取器中，超声频率分别为20KHZ、40KHZ，功率为400600W，于5060提取90120MIN；B酶解液依次经90灭活15MIN、离心、取上清液，氢氧化钠中和至PH为7075，上树脂柱，1015BV的7080的乙醇洗脱，洗脱液浓缩得固体生物碱；C将步骤B中固体生物碱用乙酸乙酯石油醚溶解，搅拌，取上清液减压浓缩，得利血平粗品；D利血平粗品乙酸乙酯重。
7、结晶2次，得到利血平晶体；步骤A中所述的调节乙醇溶液的酸为盐酸或乙酸。0006步骤A中所述的超声功率为双频超声作用时总功率（20KHZ与40KHZ各取一半）。0007步骤B中所述的树脂为D101、D72或HZ818。0008本发明选用纤维素酶来破坏催吐萝芙木的细胞壁，使其疏松、膨胀、崩溃，释放出细胞质中的生物碱，提高了生物碱的溶出率。再结合双频超声波振动的空化作用，减少驻波所造成的死角，加速生物碱的溶出。该方法设备简单、成本低、提取时间短、提取率高，适合工业化生产。0009下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限说明书CN104072494A2/2页4于下列实施方。
8、式。0010具体实施方式实施例1将催吐萝芙木的根粉碎，过60目筛，取5KG粉末，加入5倍的70的盐酸乙醇溶液，调节PH值至30，并加入1的纤维素酶，置于双频超声提取器中，超声频率分别为20KHZ、40KHZ，功率为400W，于60提取90MIN，酶解液依次经90灭活15MIN、离心、取上清液，氢氧化钠中和至PH为75，上D101树脂柱，10BV的70的乙醇洗脱，洗脱液浓缩得固体生物碱，乙酸乙酯石油醚溶解，搅拌，取上清液减压浓缩，乙酸乙酯重结晶2次，得到利血平晶体142G。0011实施例2将催吐萝芙木的根粉碎，过60目筛，取5KG粉末，加入7倍的80的盐酸乙醇溶液，调节PH值至40，并加入2的纤。
9、维素酶，置于双频超声提取器中，超声频率分别为20KHZ、40KHZ，功率为500W，于55提取100MIN，酶解液依次经90灭活15MIN、离心、取上清液，氢氧化钠中和至PH为70，上D72树脂柱，15BV的80的乙醇洗脱，洗脱液浓缩得固体生物碱，乙酸乙酯石油醚溶解，搅拌，取上清液减压浓缩，乙酸乙酯重结晶2次，得到利血平晶体162G。0012实施例3将催吐萝芙木的根粉碎，过60目筛，取5KG粉末，加入6倍的90的乙酸乙醇溶液，调节PH值至50，并加入4的纤维素酶，置于双频超声提取器中，超声频率分别为20KHZ、40KHZ，功率为600W，于50提取120MIN，酶解液依次经90灭活15MIN、离心、取上清液，氢氧化钠中和至PH为72，上HZ818树脂柱，12BV的90的乙醇洗脱，洗脱液浓缩得固体生物碱，乙酸乙酯石油醚溶解，搅拌，取上清液减压浓缩，乙酸乙酯重结晶2次，得到利血平晶体156G。说明书CN104072494A。