发明领域
本发明涉及一种新型的具有苯并噻吩或噻吩骨架的异羟肟酸衍 生物。所述异羟肟酸化合物可用于治疗癌症。所述异羟肟酸化合物 还可抑制组蛋白脱乙酰酶并且适用于选择性诱导瘤性细胞终末分 化、细胞生长停滞和/或凋亡，从而抑制这类细胞增殖。因此，本发 明的化合物可用于治疗患有肿瘤的特征在于瘤性细胞增殖的患者。 本发明的化合物还可用于预防和治疗TRX(硫氧还蛋白)-介导的疾 病，例如自身免疫性疾病、变应性和炎性疾病，以及用于预防和/或 治疗中枢神经系统(CNS)疾病，例如神经变性性疾病。
发明背景
具有异羟肟酸部分的化合物已显示出具有有用的生物活性。例 如已知含有异羟肟酸部分的许多肽基化合物抑制基质金属蛋白酶 (MMPs)，其为含锌内肽酶家族。MMPs在生理学上和病理学上的组 织老化中起重要作用。因此，能抑制MMPs活性的肽基化合物可用 于治疗或预防涉及组织衰变和炎症的病症。此外，至少部分基于异 羟肟酸基团与锌结合的特性，含有异羟肟酸部分的化合物已显示出 抑制组蛋白脱乙酰酶(HDACs)。
抑制HDACs可阻遏基因表达，包括与肿瘤抑制相关的基因表 达。抑制组蛋白脱乙酰酶可导致肿瘤抑制基因对组蛋白脱乙酰酶-介 导的转录阻遏。例如，抑制组蛋白脱乙酰酶可提供一种治疗癌症、 血液疾病(例如造血疾病)和与基因相关的代谢疾病的方法。更具体地 讲，转录调控为细胞分化、增殖和凋亡中的重要事件。有多个证据 表明通过组蛋白乙酰基化和脱乙酰基化机理来完成细胞的转录调节 (Grunstein，M.，Nature，389：349-52(1997))。人们认为这些作用通过染 色质结构的变化来发生，这种变化通过转变组蛋白对核小体中卷曲 螺旋型DNA的亲和性来实现。已鉴定出5种组蛋白。在核小体中发 现组蛋白H2A、H2B、H3和H4，H1是位于核小体之间的连接体。 除单独存在于核小体结构外部的H1外，每个核小体在其核中含其中 的两种组蛋白。认为当组蛋白低乙酰化时，组蛋白与磷酸DNA骨架 的亲合力更大。该亲合力导致DNA与组蛋白紧密结合，致使DNA 难以转录调节元件和器件。
通过组蛋白乙酰化转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰酶(HDAC)两种 酶复合物之间的活性平衡调节乙酰化状态。认为低乙酰化状态抑制 有关DNA转录。该低乙酰化状态通过包括HDAC酶在内的大多蛋 白(large multiprotein)复合物催化。尤其已证实HDACs催化除去染色 质核组蛋白上的乙酰基。
几个实例表明，扰乱HAT或HDAC的活性涉及恶性表型发育。 例如，在急性早幼粒细胞白血病中，PML和αRAR融合产生的癌蛋 白质似乎通过募集HDACs抑制特异性基因转录(Lin，R.J.等，Nature 391：811-14(1998))。按这种方式瘤性细胞不能完成分化，导致白血病 细胞系过度增殖。
美国专利5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990 公开了可用于选择性诱导瘤性细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡 的异羟肟酸衍生物，这些文献通过引用结合在本文中。除了其作为 抗肿瘤药物的生物活性外，最近认为这些异羟肟酸衍生物可用于治 疗或预防各种各样的硫氧还蛋白(TRX)-介导的疾病和病征，例如炎 性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、与氧化应激性有关的疾病 和特征为细胞过度增殖的疾病(美国专利申请第10/369,094号，2003 年2月15日提交，该文献通过整体引用结合到本文中)。此外，认为 这些异羟肟酸衍生物可用于治疗中枢神经系统(CNS)疾病如神经变性 性疾病以及用于治疗脑癌(参见美国专利申请第10/273,401号，2002 年10月16日提交，该文献通过整体引用结合到本文中)。
认为经X-射线晶体分析法研究证实，用含异羟肟酸的化合物辛 二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)抑制HDAC通过与酶的催化部位直接相互 作用进行(Finnin，M.S.等，Nature 401：188-193(1999))。认为抑制 HDAC的结果对基因组无普遍性作用，而是仅影响基因组的小子集 (Van Lint，C.等，Gene Expression 5：245-53(1996))。用与HDAC抑制 剂一起培养的恶性肿瘤细胞系的DNA微排序(microarrays)提供的证 据表明有其产物改变的有限数量(1-2％)的基因。例如，在培养基中用 HDAC抑制剂处理细胞出现连续诱导依赖细胞周期蛋白的激酶抑制 剂p21(Archer，S.Shufen，M.Shei，A.，Hodin，R.(1998)PNAS 95：6791- 96)。该蛋白在抑制细胞周期中起重要作用。认为HDAC抑制剂通过 在p21基因区域中蔓延组蛋白的高乙酰化状态增加p21转录率，因 而使基因可以转录机器。其表达不受HDAC抑制剂影响的基因在区 域关联组蛋白的乙酰化中没有变化(Dressel，U.等，Anticancer Research 20(2A)：1017-22(2000))。
此外，异羟肟酸衍生物例如SAHA能诱导肿瘤细胞生长停止、 分化和/或凋亡(Richon等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，93：5705- 5708(1996))。这些化合物靶向成为恶性肿瘤细胞能力的内在机制， 因为它们在有效抑制动物肿瘤生长的剂量下未出现毒性(Cohen，L.A. 等，Anticancer Research 19：4999-5006(1999))。
考虑到含有异羟肟酸部分的化合物具有广泛的应用，因此非常 需要开发新型的具有改进性能的异羟肟酸衍生物，例如改进的效能 或增加的生物可利用率。
发明概述
本发明涉及一种新型的具有苯并噻吩或噻吩骨架的异羟肟酸衍 生物。该异羟肟酸化合物可用于治疗癌症。该异羟肟酸化合物还可 抑制组蛋白脱乙酰酶，并适用于选择性诱导瘤性细胞终末分化、细 胞生长停滞和/或凋亡，从而抑制这类细胞增殖。因此，本发明的化 合物可用于治疗患有的肿瘤的特征在于瘤性细胞增殖的患者。本发 明的化合物还可用于预防和治疗TRX-介导的疾病，例如自身免疫性 疾病、变应性和炎性疾病，以及用于预防和/或治疗中枢神经系统(CNS) 疾病，例如神经变性性疾病。本发明还提供了包含所述异羟肟酸衍 生物的药物组合物以及易依从并且使得体内异羟肟酸衍生物的量为 治疗有效量的这些药物组合物的安全剂量方案(dosing regimen)。
意外地发现具有噻吩或苯并噻吩骨架的某些异羟肟酸衍生物作 为组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂表现出增加的活性。
因此，本发明涉及式I表示的化合物及其药学上可接受的盐、 溶剂合物和水合物，这点如本文详细所述。
由下述更具体的本发明优选实施方案的描述显而易见本发明的 上述目的、特征和优点和其他目的、特征和优点。
发明详述
本发明涉及一种新型的具有苯并噻吩或噻吩骨架的异羟肟酸衍 生物。在一个实施方案中，该异羟肟酸衍生物可抑制组蛋白脱乙酰 酶，并适用于选择性诱导瘤性细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋 亡，从而抑制这类细胞增殖。因此，本发明的化合物可用于治疗患 者所患的癌症。本发明的化合物还可用于预防和治疗TRX-介导的疾 病，例如自身免疫性疾病、变应性和炎性疾病，以及用于预防和/或 治疗中枢神经系统(CNS)疾病，例如神经变性性疾病。
意外地并惊奇地发现具有噻吩或苯并噻吩骨架的某些异羟肟酸 衍生物作为组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂表现出增加的活性。
化合物
本发明涉及式I表示的化合物(即苯并噻吩异羟肟酸衍生物)和/或 其立体异构体(包括对映体)、外消旋体、药学上可接受的盐、溶剂合 物、水合物或多晶型。
其中A为烷基、芳基或选自下式的基团：
其中R1-R16各自相互独立为氢或为未取代或取代的烷基、烯基、 芳基、环烷基、杂环基、烷基芳基(alkylaryl)、烷基环烷基(alkylcycloalkyl) 或烷基杂环基(alkylheterocyclyl)；或一个或多个R1和R2、R6和R7以 及R11和R12与其连接的氮原子一起形成含氮的杂环；
m、p和q各自相互独立为0、1或2；
或其立体异构体、对映体、外消旋体、药学上可接受的盐、溶 剂合物、水合物或多晶型。
本发明还涉及式I表示的化合物(即苯并噻吩异羟肟酸衍生物)和/ 或其立体异构体(包括对映体)、外消旋体、药学上可接受的盐、溶剂 合物、水合物或多晶型。
其中A为烷基、芳基或选自下式的基团：
其中R1-R16各自相互独立为氢或为未取代或取代的烷基、烯基、 芳基、环烷基、杂环基、烷基芳基、烷基环烷基或烷基杂环基；或 一个或多个R1和R2、R6和R7以及R11和R12与其连接的氮原子一起 形成含氮的杂环；
m、p和q各自相互独立为0、1或2；
或其立体异构体、对映体、外消旋体、药学上可接受的盐、溶 剂合物、水合物或多晶型。
本发明还涉及式I表示的化合物，其中A选自：
在一个特别的实施方案中，式I的化合物用以下结构表示：
本发明还涉及式II表示的化合物(即噻吩异羟肟酸衍生物)和/或 其立体异构体(包括对映体)、外消旋体、药学上可接受的盐、溶剂合 物、水合物或多晶型。
其中
A为烷基、芳基或选自下式的基团：
其中R1-R17各自相互独立为氢或为未取代或取代的烷基、烯基、 芳基、杂烷基(heteroalkyl)、环烷基、杂环基、烷基芳基、环烷基芳 基、烷基环烷基、酰基、磺酰基或烷基杂环基；或一个或多个R1和 R2、R6和R7以及R11和R12与其连接的氮原子一起形成含氮的杂环；
B为
n为0或1；
m和p各自相互独立为0、1或2；
或其立体异构体、对映体、外消旋体、药学上可接受的盐、溶 剂合物、水合物或多晶型。
本发明还涉及式II表示的化合物(即噻吩异羟肟酸衍生物)和/或 其立体异构体(包括对映体)、外消旋体、药学上可接受的盐、溶剂合 物、水合物或多晶型。
其中
A为烷基、芳基或选自下式的基团：
其中R1-R16各自相互独立为氢或为未取代或取代的烷基、烯基、 芳基、环烷基、杂环基、烷基芳基、烷基环烷基或烷基杂环基；或 一个或多个R1和R2、R6和R7以及R11和R12与其连接的氮原子一起 形成含氮的杂环；
B为
n为0或1；
m、p和q各自相互独立为0、1或2；
或其立体异构体、对映体、外消旋体、药学上可接受的盐、溶 剂合物、水合物或多晶型。
在式I或式II的一个实施方案中，A为
其中R1和R2如上所述。在一个特别的实施方案中，R1和R2中 至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R3和R4如上所述。在一个特别的实施方案中，R3和R4中 至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R5如上所述。在一个特别的实施方案中，R5为苯基、萘基、 联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、环己基、喹啉基、异喹啉 基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、 甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R6和R7如上所述。在一个特别的实施方案中，R6和R7中 至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R8如上所述。在一个特别的实施方案中，R8为苯基、萘基、 联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、环己基、喹啉基、异喹啉 基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、 甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R9如上所述。在一个特别的实施方案中，R9为苯基、萘基、 联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、环己基、喹啉基、异喹啉 基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、 甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R10如上所述。在一个特别的实施方案中，R10为苯基、萘 基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、环己基、喹啉基、异 喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异喹啉基、吡啶基、 -CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔 丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R11和R12如上所述。在一个特别的实施方案中，R11和R12中至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R1和R2如上所述。在一个特别的实施方案中，R1和R2中 至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中R3和R4如上所述。在一个特别的实施方案中，R3和R4中 至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中p、R13和R14如上所述。在一个特别的实施方案中，R13和 R14中至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。在一个特别的实施方案中，p为0。在另一 个特别的实施方案中，p为1。在另一个特别的实施方案中，p为2。
在式I或式II的另一个实施方案中，A为
其中q、R15和R16如上所述。在一个特别的实施方案中，R15和 R16中至少一个为苯基、萘基、联苯基、苄基、-CH2CH2Ph、-CH＝CHPh、 环己基、喹啉基、异喹啉基、-CH2-环己基、-CH2-喹啉基、-CH2-异 喹啉基、吡啶基、-CH(Ph)2、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异 丁基、仲丁基或叔丁基。在一个特别的实施方案中，q为0。在另一 个特别的实施方案中，q为1。在另一个特别的实施方案中，q为2。
在式I或式II的一个实施方案中，R1和R2、R6和R7以及R11和 R12与其连接的氮原子一起形成含氮的杂环。所述杂环可为单环或可 为稠合的二环或三环。此外，除了氮外，所述杂环还可包含一个或 多个杂原子，例如O、S、N和P。
此外，在式II的一个特别的实施方案中，B为：
在式II的另一个特别的实施方案中，B为：
-CH2-CH2-
在式II的另一个特别的实施方案中，B为：
式I的苯并噻吩异羟肟酸衍生物的非限制性实例的具体实施方 案见下文实验部分的表1。式II的噻吩异羟肟酸衍生物的非限制性实 例的具体实施方案见下文实验部分的表2。
化学定义
本文所用的“烷基”包括具有特定的碳原子数的支链和直链的饱 和脂族烃基。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10定义为1、2、3、4、5、 6、7、8、9或10个线形或支化排列的碳原子。例如，“C1-C10烷基” 具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、 戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。术语“环烷基”是指具有特 定的碳原子数的单环饱和脂族烃基。例如，“环烷基”包括环丙基、甲 基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。在本发 明的某些实施方案中，术语“环烷基”包括上述的基团并且还包括单环 不饱和脂族烃基。例如，在这些实施方案中定义的“环烷基”包括环丙 基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基、环 戊烯基、环丁烯基等。在一个实施方案中，如果没有具体规定碳原 子数，则“烷基”是指C1-C12烷基，且在另一个实施方案中，“烷基”是 指C1-C6烷基。在一个实施方案中，如果没有具体规定碳原子数，则 “环烷基”是指C3-C10环烷基，且在另一个实施方案中，“环烷基”是指 C3-C7环烷基。在一个实施方案中，“烷基”的实例有甲基、乙基、正 丙基、异丙基、正丁基、叔丁基和异丁基。
术语“亚烷基”是指具有特定的碳原子数的二价烃基。例如，“亚 烷基”包括-CH2-、-CH2CH2-等。在一个实施方案中，如果没有具体规 定碳原子数，则“亚烷基”是指C1-C12亚烷基，且在另一个实施方案中， “亚烷基”是指C1-C6亚烷基。
当用在短语“烷基芳基”、“烷基环烷基”和“烷基杂环基”中时，术 语“烷基”是指该基团的烷基部分，并且未描述该基团的芳基和杂芳基 部分的原子数。在一个实施方案中，如果没有具体规定碳原子数， 则“烷基芳基”、“烷基环烷基”和“烷基杂环基”的“烷基”是指C1-C12烷 基，且在另一个实施方案中，“芳烷基(aralkyl)”中的烷基是指C1-C6烷基。
如果未具体规定碳原子数，则术语“烯基”是指包含2-10个碳原 子和至少一个碳碳双键的直链、支链或环状的非芳族烃基。优选存 在一个碳碳双键，并且可存在最高达四个非芳族碳碳双键。因此“C2- C6烯基”是指具有2-6个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、 丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。所述烯基的直链、支链和环状部 分可包含双键，并且如果指的是取代的烯基，则所述烯基的直链、 支链和环状部分可被取代。
术语“炔基”是指包含2-10个碳原子和至少一个碳碳三键的直 链、支链或环状的烃基。可存在最高达三个碳碳三键。因此，“C2-C6炔基”是指具有2-6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁 炔基、3-甲基丁炔基等。所述炔基的直链、支链或环状部分可包含三 键，并且如果指的是取代的炔基，则所述炔基的直链、支链或环状 部分可被取代。
在某些情况下，取代基所定义的碳原子范围可包括0，例如(C0- C6)亚烷基-芳基。如果芳基为苯基，则该范围包括苯基本身以及 -CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
在一个实施方案中，本文所用的“芳基”是指各环的原子数最高 达7个的任何稳定的单环或二环的碳环，其中至少一个环为芳环。 这类芳基的实例包括苯基、萘基、四氢萘基、茚满基和联苯基。在 所述芳基取代基为双环且一个环为非芳族环的情况下，应当理解的 是通过芳环连接。
在另一个实施方案中，“芳基”为5-14个碳原子的芳环，并且包 括与5-或6-元环烷基稠合的碳环芳基，例如茚满。碳环芳基的实例 包括但不限于苯基；萘基，例如1-萘基和2-萘基；蒽基，例如1-蒽 基、2-蒽基；菲基；芴酮基，例如9-芴酮基；茚满基等。碳环芳基任 选被如下所述的指定数目的取代基取代。
本文所用的术语“杂芳基”表示各环的原子数最高达7个的稳 定的单环或二环，其中至少一个环为芳环且包含1-4个选自O、N和 S的杂原子。在另一个实施方案中，术语“杂芳基”是指由碳原子和 1-4个选自O、N或S的杂原子组成的5-14个环原子的单环、二环或 三环的芳环。在该定义范围内的杂芳基包括但不限于以下基团：吖 啶基、咔唑基、肉啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、 呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、 唑基、异唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、 吡咯基、四氢喹啉基。按照下述对杂环的定义，还应当理解“杂芳基” 包括任何含氮的杂芳基的氮氧化物衍生物。在所述杂芳基取代基为 双环且一个环为非芳族环或不含杂原子的情况下，应当理解的是分 别通过芳环或含杂原子的环连接。
在另一个实施方案中，“杂芳基”为由碳原子和1-4个选自O、 N或S的杂原子组成的5-14个环原子的单环、二环或三环的芳环。 杂芳基的实例包括但不限于吡啶基，例如2-吡啶基(也称作α-吡啶 基)、3-吡啶基(也称作β-吡啶基)和4-吡啶基(也称作γ-吡啶基)；噻吩 基，例如2-噻吩基和3-噻吩基；呋喃基，例如2-呋喃基和3-呋喃基； 嘧啶基，例如2-嘧啶基和4-嘧啶基；咪唑基，例如2-咪唑基；吡喃 基，例如2-吡喃基和3-吡喃基；吡唑基，例如4-吡唑基和5-吡唑基； 噻唑基，例如2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基；噻二唑基；异噻唑 基；唑基，例如2-唑基、4-唑基和5-唑基；异唑基；吡 咯基；哒嗪基；吡嗪基等。如上定义的杂环芳族基团(或杂芳基)可任 选被指定数目的用于芳族基团的所述的取代基取代。
在一个实施方案中，“杂芳基”还可包括“稠合的多环芳基”，其为 与一个或多个其他杂芳基或非芳族的杂环稠合的杂芳基。其实例包 括喹啉基和异喹啉基，例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基、5-喹啉 基、6-喹啉基、7-喹啉基和8-喹啉基、1-异喹啉基、3-喹啉基、4-异 喹啉基、5-异喹啉基、6-异喹啉基、7-异喹啉基和8-异喹啉基；苯并 呋喃基，例如2-苯并呋喃基和3-苯并呋喃基；二苯并呋喃基，例如2，3- 二氢苯并呋喃基；二苯并噻吩基；苯并噻吩基，例如2-苯并噻吩基 和3-苯并噻吩基；吲哚基，例如2-吲哚基和3-吲哚基；苯并噻唑基， 例如2-苯并噻唑基；苯并唑基，例如2-苯并唑基；苯并咪唑基， 例如2-苯并咪唑基；异吲哚基，例如1-异吲哚基和3-异吲哚基；苯 并三唑基；嘌呤基；硫茚基、吡嗪基等。稠合的多环芳族环体系可 任选被指定数目的本文所述的取代基取代。
本文所用的术语“杂环”或“杂环基”是指包含1-4个选自O、N和S的杂原子的3至10元芳族或非芳族杂环，并且包括二环基团。 因此“杂环基”包括上述的杂芳基及其二氢和四氢类似物。“杂环基”的 其他实例包括但不限于以下基团：氮杂环丁烷基、苯并咪唑基、苯 并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、 苯并唑基、咔唑基、咔啉基、肉啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲 哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异 喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘啶基、二唑基、唑基、唑 啉基、异唑啉基、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒 嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉 基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢异喹啉基、 四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮 杂环丁烷基、1，4-二烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡啶- 2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯 并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢 咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑，二 氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、 二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑 基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲基二氧基 苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基及其氮氧化物。杂环基取代基 可通过碳原子或通过杂原子连接。
在一个实施方案中，“杂环”(本文中也称作“杂环基”)为由5-14个 环碳原子和1-4个选自O、N、S或P的杂原子组成的单环、二环或 三环的饱和或不饱和环。杂环的实例包括但不限于：吡咯烷基、哌 啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、 二氢吡喃基、四氢吡喃基(tetrahydrodropyranyl)、二氢喹啉基、四氢 喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、二氢吡嗪基、四氢吡嗪基、 二氢吡啶基、四氢吡啶基等。
“烷基芳基”(芳烷基)为被芳基、优选苯基取代的烷基。优选的烷 基芳基为苄基。适合的芳基如本文所述，适合的烷基如本文所述。 适合的烷基芳基的取代基如本文所述。
“烷基杂环基”为被杂环基取代的烷基。适合的杂环基如本文所 述，适合的烷基如本文所述。适合的烷基杂环基的取代基如本文所 述。
“烷基环烷基”为被环烷基取代的烷基。适合的环烷基如本文所 述，适合的烷基如本文所述。适合的烷基环烷基的取代基如本文所 述。
“芳氧基”为通过氧与化合物连接的芳基(例如苯氧基)。
本文所用的“烷氧基”(烷基氧基)为通过氧原子与化合物连接的直 链或支链的C1-C12或环状的C3-C12烷基。烷氧基的实例包括但不限于 甲氧基、乙氧基和丙氧基。
“芳基烷氧基”(芳基烷基氧基)为通过与芳基烷基的烷基部分连接 的氧与化合物连接的芳基烷基(例如苯基甲氧基)。
本文所用的“芳基氨基”为通过氮与化合物连接的芳基。
本文所用的“芳基烷基氨基”为通过与芳基烷基的烷基部分连接 的氮与化合物连接的芳基烷基。
本文所用的多个部分或基团被称作“取代或未取代的”。当称 某一部分被取代时，是指可在该部分的本领域技术人员公知的任何 取代位置上取代。在一个实施方案中，“任选被一个或多个取代基取 代”是指“0-5个取代基”，在另外的实施方案中是指一个取代基、两个 取代基、三个取代基、四个取代基或五个取代基。例如，可被取代 的基团可为被除氢之外的基团(即取代基)置换的氢原子。可有多个取 代基。当有多个取代基时，各取代基可相同或不同，且可在任何可 取代的位置取代。这意味着取代为本领域所公知。取代基的实例包 括但不限于：烷基(还可进一步被一个或多个取代基取代)、烷氧基(可 被取代)、卤素或卤基(F、Cl、Br、I)、羟基、硝基、氧代、-CN、-COH、 -COOH、氨基、叠氮基、N-烷基氨基或N，N-二烷基氨基(其中的烷基 还可进一步被取代)、N-芳基氨基或N，N-二芳基氨基(其中的芳基还 可进一步被取代)、酯基(-C(O)-OR，其中R可为例如烷基、芳基等， 这些基团可被取代)、芳基(可被取代)、环烷基(可被取代)、烷基芳基 (可被取代)、烷基杂环基(可被取代)、烷基环烷基(可被取代)和芳氧 基。
立体化学
许多有机化合物存在具有使平面偏振光的平面旋转能力的旋光 形式。在描述旋光性化合物时，用前缀D和L或R和S表示关于其 手性中心的分子绝对构型。用前缀d和l或(+)和(-)代表化合物使平 面偏振光旋转的符号，用(-)或表示该化合物是左旋的。具有前缀(+) 或d的化合物是右旋的。对于确定的化学结构，除它们是彼此的非 叠加镜像之外，被称作立体异构体的这些化合物是相同的。一种特 殊的立体异构体又可称为对映体，此类异构体的混合物通常称为对 映体混合物。50∶50的对映体混合物称为外消旋混合物。本文中所述 的多种化合物可具有一个或多个手性中心，因此可存在不同的对映 体。如果需要可用星号(*)表示手性碳。当在本发明式中，连接手性 碳的键绘成直线时，应理解为手性碳的(R)和(S)两种构型，因此该式 包括对映体及其混合物两者。与本领域用法相同，当需要指定手性 碳的绝对构型时，可将手性碳的一个键绘成楔形(与平面以上的原子 连接)，且另一个可绘成虚线或短平行线的楔形(与平面以下的原子连 接)。可用Cahn-Inglod-Prelog系统表示手性碳的(R)或(S)构型。
当本发明的HDAC抑制剂含有一个手性中心时，这些化合物存 在两种对映体形式，且本发明包括对映体和对映体的混合物两者， 例如称为外消旋混合物的特殊的50∶50混合物。可通过本领域技术 人员已知的方法例如通过形成可分离的非对映体盐：例如通过结晶(参 见CRC Handbook of Optical Resolutions via Diastereomeric Salt Formation by David Kozma(CRC Press，2001))；形成可分离的非对映 体衍生物或络合物，例如通过结晶、气相-液相或液相色谱；使一种 对映体与对映体特异性试剂选择性反应例如酶促酯化；或在手性环 境中进行气相-液相或液相色谱，例如在手性载体例如键合手性配体 的硅胶上，或在手性溶剂存在下，拆分这些对映体。本领域技术人 员将认识到，当通过上述分离方法之一将需要的对映体转化为另一 种化学实体时，需要进一步释出需要对映体的步骤。或者，可用旋 光性试剂、底物、催化剂或溶剂，通过不对称合成或通过不对称转 化，将一种对映体转化为另一种对映体，合成具体的对映体。
本发明化合物手性碳的具体绝对构型的符号应理解为表示该化 合物的指定对映体形式为对映体过量(ee)，或换言之基本上不含另一 种对映体。例如，“S”形式化合物中基本上不含“R”形式化合物，因 此是“S”形式对映体过量。相反，“R”形式化合物中基本上不含“S”形 式化合物，因此是“R”形式对映体过量。本文中使用的对映体过量是 某种对映体存在大于50％。例如，对映体过量可为约60％或更多， 例如约70％或更多，例如约80％或更多，例如约90％或更多。在一 个特别的实施方案中，当指明特定的绝对构型时，所述化合物的对 映体过量至少约90％。在更特别的实施方案中，化合物的对映体过 量至少约95％，例如至少约97.5％，例如至少99％对映体过量。
当本发明化合物有两个或多个手性碳时，它可具有大于两个的 旋光异构体，且存在非对映体。例如，当有两个手性碳时，化合物 可具有最高达4个旋光异构体和两对对映体((S，S)/(R，R)和 (R，S)/(S，R))。对映体对(例如(S，S)/(R，R))互为镜像立体异构体。不为 镜像的立体异构体(例如(S，S)和(R，S))是非对映体。非对映体对可通过 本领域技术人员已知的方法例如色谱或结晶分离，且每对中的各对 映体可按上述方法分离。本发明包括此类化合物的每个非对映体及 其混合物。
除本文另有明确规定外，本文中使用的表达形式和定冠词“该” 包括单数和复数指示物。因此，例如“活性药物”或“药理活性药 物”包括一种活性药物和两种或多种不同的活性药物的组合，“载 体”包括两种或多种载体的混合物和一种载体等。
本发明还包括本文公开的异羟肟酸衍生物的前药。可用熟知的 药物学技术制备此类化合物的任何前药。
除以上列举的化合物外，本发明还包括此类化合物的同系物和 类似物的用途。在本文中，同系物是具有基本上与上述化合物结构 相似的分子，类似物是具有基本上生物相似性的分子，而无论结构 是否相似。
药学上可接受的盐
如上所述，本文所述的异羟肟酸衍生物可制备成其药学上可接 受的盐的形式。药学上可接受的盐为保持了母体化合物所需的生物 活性并且没有有害的毒性作用的盐。这种盐的实例有有机和无机酸 的酸加成盐，例如所述酸为盐酸、硫酸、甲磺酸、富马酸、马来酸、 琥珀酸、乙酸、苯甲酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸等。 药学上可接受的盐还可通过用无机碱和有机碱处理得到，无机碱例 如为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氢氧化钙或氢氧化铁，有机 碱例如异丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因等。药 学上可接受的盐还可为由元素(如氯、溴和碘)形成的阴离子。
如上所述，所公开的活性化合物还可制备成其水合物形式。术 语“水合物”包括但不限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、 四水合物等。
如上所述，所公开的活性化合物还可制备成与任何有机或无机 溶剂的溶剂合物，例如醇(如甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇)、酮(如丙 酮)、芳族溶剂等。
所公开的活性化合物还可制备成任何固体或液体外形，例如所 述化合物可为晶体形态、无定形形态，并且可为任何粒径。该化合 物颗粒可被微粉化或可成团状、颗粒状、粉末状、油状、油状悬浮 液或微固体或液体的任何其他形式。
本发明的化合物也存在多晶型现象。本发明还包括本发明化合 物的不同的多晶型。术语“多晶型”是指物质的特定的结晶状态，该 结晶状态具有特定的物理特性例如X-射线衍射、IR光谱、熔点等。
除本文另有明确规定外，本文中使用的表达形式和定冠词“该” 包括单数和复数指示物。因此，例如“活性药物”或“药理活性药 物”包括一种活性药物和两种或多种不同的活性药物组合，“载体” 包括两种或多种载体的混合物和一种载体等。
治疗方法
本发明还涉及使用本文所述的异羟肟酸衍生物的方法。如本文 所证明，本发明的异羟肟酸衍生物可用于治疗癌症。此外，发现该 异羟肟酸衍生物还可用于多种其他疾病。非限制性的实例为本文所 述的硫氧环蛋白(TRX)-介导的疾病以及本文所述的中枢神经系统 (CNS)疾病。
1.治疗癌症
如本文证明，本发明异羟肟酸衍生物可用于治疗癌症。因此， 在一个实施方案中，本发明涉及治疗有治疗需要受治疗者的癌症的 方法，该方法包括给予所述受治疗者治疗有效量的本文中所述的异 羟肟酸衍生物。
术语“癌症”是指由瘤性细胞增殖造成的任何癌症，例如实体 瘤、瘤、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤等。例如，癌症包括但不限于： 白血病，包括急性白血病和慢性白血病，例如急性淋巴细胞白血病 (ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢 性骨髓性白血病(CML)和毛细胞白血病；淋巴瘤，例如皮肤T-细胞 淋巴瘤(CTCL)、非皮肤周围T-细胞淋巴瘤、与人嗜T淋巴细胞病毒 (HTLV)有关的淋巴瘤如成人T-细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、霍奇金 病和非霍奇金淋巴瘤、大细胞淋巴瘤、弥散性大B-细胞淋巴瘤 (DLBCL)；伯基特淋巴瘤；原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤；多发 性骨髓瘤；儿童实体瘤例如脑瘤、成神经细胞瘤、成视网膜细胞瘤、 维尔姆斯瘤、骨瘤和软组织肉瘤、成人普通实体瘤例如头和颈癌(例 如口、喉和食管癌)、泌尿生殖癌(例如前列腺、膀胱、肾、子宫、卵 巢、睾丸、直肠和结肠癌)、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其他 皮肤癌、胃癌、脑瘤、肝癌和甲状腺癌。
2.治疗硫氧环蛋白(TRX)-介导的疾病
在另一个实施方案中，所述异羟肟酸衍生物用于治疗需要治疗 的受治疗者的硫氧环蛋白(TRX)-介导的疾病或病症的方法中，所述 方法包括给予受治疗者治疗有效量的一种或多种本文所述的异羟肟 酸化合物。
TRX-介导的疾病的实例包括但不限于急性和慢性炎性疾病、自 身免疫性疾病、变应性疾病、与氧化应激性有关的疾病以及特征为 细胞过度增殖的疾病。
非限定性实例有关节炎症包括类风湿性关节炎(RA)和银屑病性 关节炎；炎性肠病例如节段性回肠炎和溃疡性结肠炎；脊锥关节病； 硬皮病；银屑病(包括T细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病例如皮炎、 湿疹、特应性皮炎、过敏性接触性皮炎、荨麻疹；脉管炎(例如坏死 性、皮肤和过敏性脉管炎)；嗜酸性肌炎、嗜酸性筋膜炎；伴有皮肤 或器官白细胞浸润的癌症、局部缺血性损伤包括脑缺血(例如创伤所 致脑损伤、癫痫、出血或中风，其中每种情形可导致神经变性)；HIV、 心力衰竭；慢性、急性或恶性肝病、自身免疫性甲状腺炎；全身性 红斑狼疮、斯耶格伦(Sjorgren’s)综合征、肺病(例如ARDS)；急性胰 腺炎；肌萎缩性侧索硬化症(ALS)；早老性痴呆；恶病质/厌食症；哮 喘；动脉粥样硬化；慢性疲劳综合征、发烧；糖尿病(例如胰岛素糖 尿病或青少年糖尿病)；肾小球肾炎；移植物对宿主排斥(例如在移植 手术中)；出血性休克；痛觉过敏；炎性肠病；多发性硬化症；肌病(例 如肌蛋白代谢，尤其在脓毒症中)；骨质疏松症；帕金森病；疼痛； 早产；银屑病；再灌注损伤；细胞因子引起的毒性(例如脓毒性休克、 内毒性休克)；放疗所致副作用、颞的下颌骨关节病、肿瘤转移；或 劳损、扭伤、软骨损伤、创伤例如灼伤、矫形手术、感染或其他疾 病过程导致的炎症。变应性疾病和病症包括但不限于呼吸变应性疾 病例如哮喘、过敏性鼻炎、过敏性肺病、过敏性肺炎、嗜酸性肺炎(例 如吕弗勒(Loeffler’s)综合征、慢性嗜酸性肺炎)、迟发型超敏反应、 间质性肺病(ILD)(例如特发性肺纤维变性或与类风湿性关节炎、全身 性红斑狼疮、关节强硬性脊椎炎、全身性硬化症、斯耶格伦综合征、 多肌炎或皮肌炎有关的ILD)；全身性过敏反应或超敏反应、药物过 敏(例如对青霉素、头孢菌素类)、昆虫叮咬过敏等。
3.治疗中枢神经系统疾病(CNS)
在另一个实施方案中，所述异羟肟酸衍生物可用于治疗需要治 疗的受治疗者的中枢神经系统疾病的方法中，所述方法包括给予受 治疗者治疗有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸化合物。
在一个特别的实施方案中，所述CNS疾病为神经变性性疾病。 在另一个实施方案中，所述神经变性性疾病为遗传性神经变性性疾 病，例如为多谷氨酰胺扩展疾病。通常神经变性性疾病可分为以下 疾病：
I.特征在于无其他显著神经病学体征的进行性痴呆的病症，例 如早老性痴呆；阿尔茨海默病型老年性痴呆和皮克(Pick’s)病(脑叶萎 缩)。
II.合并进行性痴呆与其他明显神经异常的综合征，例如：A)主 要在成人中出现的综合征(例如亨廷顿舞蹈病、合并痴呆与运动失调 和/或帕金森病、进行性核上麻痹(Steel-Richardson-Olszewski)、弥散 性雷维小体病和皮质齿状核(corticodentatonigral)变性表现的多系统萎 缩)；和B)主要出现在儿童或青年成人中的综合征(例如哈-施 (Hallervorden-Spatz)病和进行性家族性肌阵挛性癫痫)。
III.体态和运动逐渐发展异常的综合征，例如震颤性麻痹(帕金 森病)、纹状体黑质变性、进行性核上麻痹、扭转性肌张力障碍(扭转 性痉挛；畸形性肌张力障碍)、痉挛性斜颈和其他运动障碍、家族性 震颤和图雷特(Gilles de la Tourette)综合征。
IV.进行性运动失调的综合征，例如小脑退化(例如小脑皮质变 性和橄榄体脑桥小脑萎缩(OPCA))；和脊髓小脑退化(弗里德赖希 (Friedreich’s)共济失调及有关病症)。
V.中枢自主神经系统衰竭综合征(夏-德雷格(Shy-Drager)综合 征)。
VI.无感觉改变的肌无力和消瘦的综合征(运动神经元疾病例如 肌萎缩性侧索硬化、脊髓性肌萎缩(例如婴儿脊髓性肌萎缩(Werdnig- Hoffman)、青少年脊髓性肌萎缩(Wohlfart-Kugelberg-Welander)和其 他形式的家族性脊髓性肌萎缩)、原发性侧索硬化和遗传性痉挛性截 瘫。
VII.合并有感觉改变的肌无力和消瘦的综合征(进行性神经性肌 萎缩；慢性家族性多神经病)，例如腓肌型肌萎缩(Charcot-Marie- Tooth)、肥大间质性多神经病(Dejerine-Sottas)和各种形式的慢性进行 性神经病。
VIII.进行性视觉缺失的综合征，例如视网膜色素变性(色素性视 网膜炎)和遗传性视神经萎缩(勒伯尔(Leber’s)病)。
定义：
与本发明有关的术语“治疗”的各种语法形式是指预防(即化学预 防)、治愈、逆转、减轻、缓解、最小化、抑制或停止疾病状态、疾 病发展、疾病病原体(例如细菌或病毒)或其他异常病症的有害作用。 例如，治疗可涉及缓解疾病症状(即不一定是全部症状)或减缓疾病发 展。因为某些本发明方法涉及物理去除病原体，技术人员会认识到， 在暴露于病原体前或同时给予本发明化合物(预防治疗)和暴露于病原 体后(甚至康复后)给予本发明化合物的情形中，它们同等有效。
本文中所用的癌症治疗是指部分或完全抑制、延迟或预防癌症 包括癌转移的进程；抑制、延迟或预防包括癌转移的癌的复发；或 预防(化学预防)哺乳动物例如人的癌症发作或发展。
本文中所用的术语“治疗有效量”将包括能够获得需要治疗或 生物反应的任何量。治疗效果取决于待治疗的疾病或病症或者所需 的治疗效果。因此，治疗作用可为减轻所述疾病或病症的相关症状 和/或抑制(部分或完全)疾病的恶化。引起治疗反应所需的量取决于受 治疗者的年龄、健康、个头和性别。可通过检测受治疗者的治疗反 应来确定最佳的用量。
在本发明中，当所述化合物用于治疗或预防癌症时，所需的生 物反应为部分或完全抑制、延迟或预防哺乳动物(例如人)的癌症恶化 包括癌症转移；抑制、延迟或预防哺乳动物(例如人)的癌症复发包括 癌症转移；或者阻止哺乳动物(例如人)的癌症发作或发展(化学预防)。
此外，在本发明中，当所述化合物用于治疗和/或预防硫氧环蛋 白(TRX)-介导的疾病和病症时，治疗有效量为将需要治疗的受治疗 者体内的TRX水平调节(例如增加、减少或保持)在生理学上适当的 水平以产生所需的治疗效果所需的量。所述治疗效果取决于具体的 待治疗的TRX-介导的疾病或病症。因此，治疗作用可为减轻所述疾 病或病症的相关症状的严重性和/或抑制(部分或完全)疾病的恶化或 疾病。
此外，在本发明中，当所述化合物用于治疗和/或预防中枢神经 系统疾病或病症(CNS)时，治疗有效量取决于具体的待治疗的疾病或 病症。因此，治疗作用可为减轻所述疾病或病症的相关症状和/或抑 制(部分或完全)疾病的恶化或疾病。
此外，治疗有效量可为抑制组蛋白脱乙酰酶的量。
此外，治疗有效量可为选择性诱导瘤性细胞终末分化、细胞生 长停滞和/或凋亡的量，或者为诱导肿瘤细胞终末分化的量。
本发明的方法用于治疗或化学预防患有癌症的病人。但是，所 述方法也可有效地用于治疗其他受治疗者受治疗者的癌症。本文所 述的“受治疗者”受治疗者是指动物，如哺乳动物包括但不限于灵 长目动物(例如人)、母牛、绵羊、山羊、马、猪、狗、猫、兔子、几 内亚猪、大鼠、小鼠或其他牛类、羊类、马类、犬类、猫类、啮齿 类或鼠科类。
组蛋白脱乙酰酶和组蛋白脱乙酰酶抑制剂
如本文所述，本发明的异羟肟酸衍生物作为组蛋白脱乙酰酶 (HDAC)抑制剂具有改善的活性。在一个实施方案中，化合物对组蛋 白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)低于1000nm。在另一个实施方案 中，化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)为500-1000nm。 在另一个实施方案中，化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50) 为100-500nm。在另一个实施方案中，化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％ 抑制浓度(IC50)低于100nm。在另一个实施方案中，化合物对组蛋白 脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)为10-100nm。在另一个实施方案中， 化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)低于50nm。在另一 个实施方案中，化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)为 10-50nm。在另一个实施方案中，化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑 制浓度(IC50)低于10nm。在另一个实施方案中，化合物对组蛋白脱 乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)为1-10nm。在另一个实施方案中，化 合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)低于1nm。在另一个 实施方案中，化合物对组蛋白脱乙酰酶的50％抑制浓度(IC50)为0.1- 1nm。
如本文所述，本发明的异羟肟酸衍生物作为组蛋白脱乙酰酶 (HDAC)抑制剂具有改善的活性。因此，在一个实施方案中，本发明 涉及一种抑制组蛋白脱乙酰酶活性的方法，所述方法包括将组蛋白 脱乙酰酶与有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸化合物接触。
在一个实施方案中，所述异羟肟酸衍生物为第I组组蛋白脱乙 酰酶(Class I HDACs)的有效抑制剂。Class I HDACs包括组蛋白脱乙 酰酶1(HDAC-1)、组蛋白脱乙酰酶2(HDAC-2)、组蛋白脱乙酰酶 3(HDAC-3)和组蛋白脱乙酰酶8(HDAC-8)。在一个特别的实施方案 中，所述异羟肟酸衍生物为组蛋白脱乙酰酶I(HDAC-1)的有效抑制 剂。在另一个实施方案中，所述异羟肟酸衍生物为第II组组蛋白脱 乙酰酶(Class II HDACs)的有效抑制剂。Class II HDACs包括组蛋白 脱乙酰酶4(HDAC-4)、组蛋白脱乙酰酶5(HDAC-8)、组蛋白脱乙酰 酶6(HDAC-6)、组蛋白脱乙酰酶7(HDAC-7)和组蛋白脱乙酰酶 9(HDAC-9)。
本文中使用的术语组蛋白脱乙酰酶(HDACs)是催化除去核小体 核组蛋白氨基末尾上的赖氨酸残基中的乙酰基的酶。因此，HDACs 与组蛋白乙酰化转移酶(HATs)一起调节组蛋白的乙酰化状态。组蛋 白乙酰化影响基因表达，且HDACs抑制剂例如基于异羟肟酸的杂化 极性化合物辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)体外诱导转化细胞生长停 滞、分化和/或凋亡，体内抑制肿瘤生长。根据结构同源性，HDACs 可分为三类。第I类HDACs(HDACs 1、2、3和8)具有酵母RPD3 蛋白相似性，位于细胞核内，在与转录辅阻遏物相关的复合物中发 现。第II类HDACs(HDACs 4、5、6、7和9)与酵母HDA1蛋白相 似，并且具有核和胞质亚细胞定位。基于异羟肟酸的HDAC抑制剂 例如SAHA抑制第I和II类HDACs。第III类HDACs形成结构远源 类NAD依赖性酶，它们与酵母SIR2蛋白相关，不受基于异羟肟酸 的HDAC抑制剂的抑制。
本文中使用的术语组蛋白脱乙酰酶抑制剂或HDAC抑制剂是体 内、体外或两者能够抑制组蛋白脱乙酰化的化合物。因此，HDAC 抑制剂抑制至少一种组蛋白脱乙酰酶的活性。由于抑制至少一种组 蛋白脱乙酰化，出现乙酰化组蛋白增加且乙酰化组蛋白蓄积是评价 HDAC抑制剂活性的合适生物标记。因此，可测定乙酰化组蛋白蓄 积的方法可用于测定目的化合物的HDAC抑制活性。应理解可抑制 组蛋白脱乙酰酶活性的化合物也可与其他底物结合，并因此可抑制 其他生物活性分子例如酶。还应理解本发明化合物能抑制以上阐述 的任何组蛋白脱乙酰酶或任何其他组蛋白脱乙酰酶。
例如，在接受HDAC抑制剂的患者中，可用适当对照测定在用 HDAC抑制剂处理的外周单核细胞和组织中的乙酰化组蛋白蓄积。
可用例如显示抑制至少一种组蛋白脱乙酰酶的酶试验体外测定 具体化合物的HDAC抑制活性。另外，测定在用具体组合物处理的 细胞中乙酰化组蛋白的蓄积可测定化合物的HDAC抑制活性。
测定乙酰化组蛋白蓄积的方法在文献中已熟知。参见，例如Marks， P.A.等，J.Natl.Cancer Inst.，92：1210-1215，2000；Butler，L.M.等， Cancer Res.60：5165-5170(2000)；Richon，V.M.等，Proc.Natl.Acad. Sci.，USA，95：3003-3007，1998和Yoshida，M.等，J.Biol.Chem.，265： 17174-17179，1990。
例如，测定HDAC抑制剂化合物活性的酶测定可进行如下。简 单地说，可通过在冰上，无底物存在下，将酶制剂与设定量的抑制 剂化合物温育约20分钟，测定HDAC抑制剂化合物对纯化的人已附 加表位的(旗型)HDAC1亲合力的影响。可加入底物([3H]乙酰基标记 的源自鼠红白血病细胞的组蛋白)，可将样品在37℃下，在总体积30 μL中温育20分钟。然后可终止反应，可萃取释放出的乙酸酯，通过 闪烁计数测定释放的放射量。另一种用于测定HDAC抑制剂化合物 活性的测定方法是BIOMOL Research Laboratories，Inc.，Plymouth Meeting，PA提供的“HDAC荧光活性测定；药物发现试剂盒(Drug Discovery Kit)-AK-500”。
可如下进行体内研究。可给动物例如小鼠腹膜内注射HDAC抑 制剂化合物。给药后，可在预定时间分离选择的组织例如脑、脾、 肝等。可从基本上同Yoshida等，J.Biol.Chem.265：17174-17179，1990 所述的组织中分离组蛋白。可在15％SDS-聚丙烯酰胺凝胶进行等量 组蛋白(约1μg)电泳，然后可转移至Hybond-P滤器(得自Amersham)。 滤器可用3％乳阻塞，可用兔纯化多克隆抗乙酰化组蛋白H4抗体 (αAc-H4)和抗乙酰化组蛋白H3抗体(αAc-H3)(Upstate Biotechnology， Inc.)探测。可用轭合辣根过氧化物酶的山羊抗兔抗体(1∶5000)和 SuperSignal化学发光底物(Pierce)目测检查乙酰化组蛋白水平。作为 组蛋白的载样对照，可进行平行凝胶电泳，然后用考马斯蓝(CB)染 色。
此外，已表明基于异羟肟酸的HDAC抑制剂上调p21WAF1基因 表达。用标准方法使多种转化细胞与HDAC抑制剂一起培养，2小 时内诱导出p21WAF1蛋白。p21WAF1基因诱导与在该基因的染色质区域 中乙酰化组蛋白蓄积有关。因此，可认为p21WAF1诱导涉及由HDAC 抑制剂导致的转化细胞中G1细胞周期停止。
通常，HDAC抑制剂大致分成5类：1)异羟肟酸衍生物；2)短链 脂肪酸(SCFAs)；3)环四肽；4)苯甲酰胺；和5)亲电性酮。这些HDAC 抑制剂的实例如下所示：
A.异羟肟酸衍生物，例如辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)(Richon 等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，3003-3007(1998))；间羧基肉桂酸二 羟酰胺(CBHA)(Richon等，同上)；pyroxamide；曲古抑菌素类似物 例如曲古抑菌素A(TSA)和曲古抑菌素C(Koghe等1998.Biochem. Pharmacol.56：1359-1364)；水杨酰基异羟肟酸(Andrews等， Intemational J.Parasitology 30，761-768(2000))；辛二酰二异羟肟酸 (SBHA)(美国专利号5,608,108)；壬二异羟肟酸(ABHA)(Andrews等， 同上)；壬二酸-1-异羟肟酸酯-9-酰苯胺(AAHA)(Qiu等，Mol.Biol.Cell 11，2069-2083(2000))；6-(3-氯苯基脲基)己异羟肟酸(3C1-UCHA)； oxamflatin[(2E)-5-[3-[(苯磺酰基)氨基苯基]-戊-2-烯-4-炔酰异羟肟酸 (ynohydroxamic acid)](Kim等Oncogene，18：2461 2470(1999))；A- 161906、Scriptaid(Su等2000Cancer Research，60：3137-3142)；PXD- 101(Prolifix)；LAQ-824；CHAP；MW2796(Andrews等，同上)； MW2996(Andrews等，同上)；或美国专利5,369,108、5,932,616、 5,700,811、6,087,367和6,511,990中公开的任何异羟肟酸。
B.环四肽，例如trapoxin A(TPX)-环四肽(环-(L-苯丙氨酰基-L- 苯丙氨酰基-D-(2-甲基)哌啶基-L-2-氨基-8-氧代-9，10-表氧癸酰 基))(Kijima等，J Biol.Chem.268，22429-22435(1993))；FR901228(FK 228，酯肽)(Nakajima等，Ex.Cell Res.241，126-133(1998))；FR225497 环四肽(H.Mori等，PCT申请WO 00/08048(2000年2月17日))； apicidin环四肽[环(N-O-甲基-L-色氨酰基-L-异亮氨酰基-D-(2-甲基)哌 啶基-L-2-氨基-8-氧代癸酰基)](Darkin-Rattray等，Proc.Natl.Acad.Sci. USA 93，1314313147(1996))；apicidin Ia、apicidin Ib、apicidin Ic、apicidin IIa和apicidin IIb(P.Dulski等，PCT中请WO 97/11366)；CHAP、HC- 毒素环四肽(Bosch等，Plant Cell 7，1941-1950(1995))；WF27082环四 肽(PCT申请WO 98/48825)；和chlamydocin(Bosch等，同上)。
C.短链脂肪酸(SCFA)衍生物，例如丁酸钠(Cousens等，J.Biol. Chem.254，1716-1723(1979))；异戊酸盐(酯)(McBain等，Biochem. Pharm.53：1357-1368(1997))；戊酸盐(酯)(McBain等，同上)；4-苯基 丁酸盐(酯)(4-PBA)(Lea和Tulsyan，Anticancer Research，15，879-873 (1995))；苯基丁酸盐(酯)(PB)(Wang等，Cancer Research，59，2766- 2799(1999))；丙酸盐(酯)(McBain等，同上)；丁酰胺(Lea和Tulsyan， 同上)；异丁酰胺(Lea和Tulsyan，同上)；苯基乙酸盐(酯)(Lea和Tulsyan， 同上)；3-溴丙酸盐(酯)(Lea和Tulsyan，同上)；三丁精(Guan等，Cancer Research，60，749-755(2000))；丙戊酸、丙戊酸盐(酯)和PivanexTM。
D.苯甲酰胺衍生物，例如CI-994；MS-275[N-(2-氨基苯基)-4- [N-(吡啶-3-基甲氧基羰基)氨基甲基]苯甲酰胺](Saito等，Proc.Natl. Acad.Sci.USA 96，4592-4597(1999))；和MS-275的3′-氨基衍生物 (Saito等，同上)。
E.亲电性酮衍生物，例如三氟甲基酮(Frey等，Bioorganic & Med. Chem.Lett.(2002)，12，3443-3447；U.S.6,511,990)和α-酮酰胺例如N- 甲基-α-酮酰胺
F.其他HDAC抑制剂，例如天然产物、psammaplins和Depudecin (Kwon等1998.PNAS 95：3356-3361)。
联合用药
本发明的异羟肟酸化合物可单独给予或者与适用于所治疗疾病 或病症的其他药物联合给予。当采用独立的剂型时，所述异羟肟酸 化合物和其他药物可基本同时(一并)或分别错开时间给药(顺次)。应 当理解的是联合用药包括所有这些情形。这些不同的给药方法均适 合于本发明，只要在基本同时在患者体内实现所述异羟肟酸化合物 和其他药物的有利的治疗作用。优选当基本同时保持各活性药物的 目标血液浓度时，达到了所述有利的效果。
所述异羟肟酸衍生物可与任何一种或多种HDAC抑制剂、烷基 化剂、抗生素、抗代谢药、激素药物、植物来源药物、抗血管生成 药(anti-angiogenic agent)、分化诱导剂、细胞生长停滞诱导剂、凋亡 诱导剂、细胞毒素剂、生物试剂、基因药物或其组合。
烷化剂
烷化剂与亲核性残基例如在生成DNA的核苷酸前体上的化学实 体反应。它们通过使这些核苷酸烷基化并阻止其装配到DNA中，影 响细胞分裂过程。
烷化剂的实例包括但不限于双氯乙胺(氮芥例如苯丁酸氮芥、环 磷酰胺、异环磷酰胺、氮芥、美法仑、乌拉莫司汀)、吖丙啶(例如塞 替派)、烷基酮磺酸酯(例如白消安)、亚硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫 司汀、链佐星)、非典型烷化剂(六甲蜜胺、达卡巴嗪和丙卡巴肼)、 铂化合物(卡铂和顺铂)。这些化合物与磷酸酯、氨基、羟基、巯基 (sulfihydryl)、羧基和咪唑基反应。
在生理条件下，这些药物离子化，产生与敏感核酸和蛋白质连 接的带正电荷的离子，导致细胞周期抑制和/或细胞死亡。烷化剂是 细胞周期阶段非特异性(cell cycle phase nonspecific)药物，因为它们独 立于细胞周期的具体期而发挥它们的活性。氮芥和烷基酮磺酸酯对 G1或M期细胞最有效。亚硝基脲、氮芥和吖丙啶影响由G1和S期 到M期的发展。Chabner和Collins编辑(1990)“Cancer Chemotherapy： Principles and Practice”，Philadelphia：JB Lippincott。
烷化剂对多种瘤性疾病有活性，治疗白血病和淋巴瘤以及实体 瘤具有显著的活性。在临床上，此类药物通常用于治疗急性和慢性 白血病；霍奇金病；非霍奇金淋巴瘤；多发性骨髓瘤；原发性脑瘤； 乳腺、卵巢、睾丸、肺、膀胱、子宫颈、头和颈的癌和恶性黑素瘤。
抗生素
抗生素(例如细胞毒抗生素)通过直接抑制DNA或RNA合成起 作用，因而在整个细胞周期中有效。抗生素药物的实例包括蒽环霉 素(例如多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星和蒽二酮)、丝裂 霉素C、博来霉素、放线菌素D和plicatomycin。这些抗生素通过靶 向不同的细胞成分而干扰细胞生长。例如，通常认为蒽环霉素在转 录活性DNA的区域中干扰DNA拓扑异构酶II的作用，导致DNA 解链。
通常认为博来霉素螯合铁，且形成活化络合物，然后它与DNA 的碱基结合，导致解链和细胞死亡。
抗生素药物已用作多种瘤性疾病的治疗药物，包括乳腺、肺、 胃和甲状腺的癌、淋巴瘤、骨髓性白血病、骨髓瘤和肉瘤。
抗代谢药
抗代谢药(即抗代谢物)是一类干扰对癌细胞的生理机能和增殖至 关重要的代谢过程的药物。增殖活跃的癌细胞需要不断合成大量核 酸、蛋白质、脂质和其他重要的细胞成分。
许多抗代谢物抑制嘌呤或嘧啶核苷合成或抑制DNA复制的酶。 某些抗代谢物还干扰核糖核苷和RNA合成和/或氨基酸代谢和蛋白质 合成。通过干扰重要的细胞成分合成，抗代谢物可延迟或抑制癌细 胞生长。抗代谢药物的实例包括但不限于氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5- FUdR)、甲氨蝶呤、亚叶酸、羟基脲、硫鸟嘌呤(6-TG)、巯嘌呤(6-MP)、 阿糖胞苷、喷司他丁、磷酸氟达拉滨、克拉曲滨(2-CDA)、天冬酰胺 酶和吉西他滨。
抗代谢药物已广泛用于治疗若干常见种类的癌症，包括结肠、 直肠、乳腺、肝、胃和胰腺的癌、恶性黑素瘤、急性和慢性白血病、 毛细胞性白血病。
激素药物
激素药物是调节其靶器官生长和发育的一类药物。大多数激素 药物是性类固醇及其衍生物和类似物，例如雌激素、孕激素、抗雌 激素药、雄激素、抗雄激素药和孕酮。这些激素药物可作为性类固 醇受体的拮抗剂，下调受体表达和重要基因转录。此类激素药物的 实例有合成雌激素(例如己烯雌酚)、抗雌激素药(例如他莫昔芬、托 瑞米芬、fluoxymesterol和雷洛昔芬)、抗雄激素药(比卡鲁胺、尼鲁 米特、氟他胺)、芳化酶抑制剂(例如氨鲁米特、阿那曲唑和四唑)、 促黄体激素释放激素(LHRH)类似物、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙 立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
激素药物用于治疗乳腺癌、前列腺癌、黑素瘤和脑膜瘤。因为 激素的主要作用通过类固醇受体介导，所以60％受体-阳性乳腺癌对 一线激素治疗产生反应；且小于10％受体-阴性肿瘤产生反应。孕激 素尤其用于治疗子宫内膜癌，因为这些癌症发生在暴露于孕激素不 能拮抗的高水平雌激素的妇女中。抗雄激素药主要用于治疗前列腺 癌，它是激素依赖性的。它们用于降低睾酮水平，因而抑制肿瘤生 长。
激素治疗乳腺癌涉及在乳腺瘤性细胞中降低依赖激活雌激素受 体的雌激素水平。抗雌激素药通过与雌激素受体结合并防止募集辅 激活物因而抑制雌激素信号起作用。
LHRH类似物用于治疗前列腺癌，降低睾酮水平从而使肿瘤生 长减少。
芳化酶抑制剂通过抑制合成激素所需的酶起作用。在绝经后的 妇女中，雌激素的主要来源是通过芳化酶转化雄烯二酮。
植物来源药物
植物来源药物是来源于植物的药物或在这些药物的分子结构基 础上修饰的一类药物。它们通过阻止对细胞分裂至关重要的细胞成 分装配来抑制细胞复制。
植物来源药物的实例包括长春花生物碱(例如长春新碱、长春 碱、长春酰胺、长春利定和长春瑞滨)、鬼臼毒素(例如依托泊苷(VP- 16)和替尼泊苷(VM-26))、紫杉烷类(例如紫杉醇和多西他赛)。这些植 物来源药物通常与抗有丝分裂药物的作用相同，它们与微管蛋白结 合而抑制有丝分裂。认为鬼臼毒素例如依托泊苷通过与拓扑异构酶II 相互作用，导致DNA解链干扰DNA合成。
植物来源药用于治疗多种癌症。例如，长春新碱用于治疗白血 病、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤和儿童肿瘤成神经细胞瘤、横纹肌肉 瘤和维尔姆斯瘤。长春碱用于抗淋巴瘤、睾丸癌、肾细胞癌、蕈样 真菌病和卡波西肉瘤。已证实多西他赛有望具有抗晚期乳腺癌、非 小细胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌的活性。
依托泊苷具有抗多种瘤的活性，其中小细胞肺癌、睾丸癌和 NSCLC最敏感。
生物药
生物药是单独使用或与化疗和/或放疗联合使用时引起癌症/肿瘤 消褪的一类生物分子。生物药的实例包括免疫调节蛋白，例如细胞 因子、抗肿瘤抗原的单克隆抗体、肿瘤抑制基因和癌疫苗。
细胞因子具有极强的免疫调节活性。某些细胞因子例如白介素- 2(IL-2，阿地白介素)和α-干扰素(IFN-α)证实抗肿瘤活性，已批准用 于治疗患有转移性肾细胞癌和转移性恶性黑素瘤的患者。IL-2是对T 细胞介导的免疫反应很重要的T细胞生长因子。认为IL-2对某些患 者的选择性抗肿瘤作用是细胞介导的自我和非自我之间有区别免疫 反应的结果。
α-干扰素包括具有叠加活性的大于23个的有关亚型。IFN-α证 实具有抗多种实体瘤和血液恶性肿瘤的活性，后者似乎尤其敏感。
干扰素的实例包括α-干扰素、β-干扰素(成纤维细胞干扰素)和γ- 干扰素(成纤维细胞干扰素)。其他细胞因子的实例包括红细胞生成素 (α-红细胞生成素)、粒细胞-CSF(非格司亭)和粒细胞、巨噬细胞-CSF (沙格司亭)。其他非细胞因子免疫调节剂包括卡介苗、左旋咪唑和奥 曲肽，作用类似天然产生的激素生长抑素的长效八肽。
此外，抗癌治疗可包括使用抗体和肿瘤接种疫苗方法使用的试 剂的免疫疗法的治疗。此类疗法中的主要药物是单独或携带例如毒 素或化疗药物/对癌细胞产生细胞毒的化合物的抗体。抗肿瘤抗原的 单克隆抗体是引起抗肿瘤表达抗原的抗体，优选肿瘤特异性抗原。 例如，提出用单克隆抗体HERCEPTIN(曲妥单抗)抗在某些乳腺肿 瘤中过度表达的人表皮生长因子受体2(HER2)，包括转移性乳腺癌。 HER2蛋白过度表达与更具攻击性疾病和临床预后较差有关。 HERCEPTIN单独用于治疗患有肿瘤过度表达HER2蛋白的转移性 乳腺癌患者。
抗肿瘤抗原的单克隆抗体的另一个实例为RITUXAN(利妥昔 单抗)，提出其抗淋巴瘤性细胞上的CD20和选择性减少正常和恶性 CD20+前B细胞和成熟B细胞。
RITUXAN单独用于治疗患有复发或顽固性低级别或滤泡性、 CD20+B细胞非霍奇金淋巴瘤的患者。MYELOTARG(吉姆单抗奥 佐米星)和CAMPATH(阿仑单抗)是可使用的抗肿瘤抗原的单克隆 抗体的又一个实例。
肿瘤抑制基因是作用为抑制细胞生长和分裂周期的基因，因而 阻止瘤发展。肿瘤抑制基因突变导致细胞忽略一种或多种抑制信号 网络成分，克服细胞周期关卡，且导致控制细胞更高速度的生长-癌。 肿瘤抑制基因的实例包括Duc-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA1 和BRCA2。
DPC4涉及胰腺癌，并参与抑制细胞分裂的胞质途径。NF-1编 码抑制Ras的蛋白，它是胞质抑制蛋白。NF-1涉及神经系统的神经 纤维瘤和嗜铬细胞瘤和骨髓性白血病。NF-2编码涉及神经系统的脑 膜瘤、神经鞘瘤和室管膜细胞瘤的核蛋白。RB编码pRB蛋白，它是 细胞周期的主要抑制剂核蛋白。RB涉及成视网膜细胞瘤和骨、膀胱、 小细胞肺和乳腺癌。P53编码调节细胞分裂的p53蛋白，并可诱导调 亡。发现在多种癌中p53突变和/或失活。WTI涉及肾维尔姆斯瘤。 BRCA1涉及乳腺和卵巢癌，BRCA2涉及乳腺癌。肿瘤抑制基因可转 移到其中可发挥其肿瘤抑制功能的肿瘤细胞中。
癌疫苗是诱导身体对肿瘤产生特异性免疫反应的一类药物。处 于研究、开发和临床试验中的大多数癌疫苗是肿瘤相关抗原(TAAs)。 TAAs是存在于肿瘤细胞上，且在正常细胞上相对不存在或减少的结 构(即蛋白、酶或碳水化合物)。由于对肿瘤细胞相当独特，TAAs为 免疫系统识别提供靶，并导致它们的破坏。TAAs的实例包括神经节 苷脂(GM2)、前列腺特异性抗原(PSA)、甲胎球蛋白(AFP)、癌胚抗原 (CEA)(由结肠癌和其他腺癌例如乳腺、肺、胃和胰腺癌产生)、黑素 瘤有关的抗原(MART-1、gap100、MAGE 1，3酪氨酸酶)、乳头瘤病 毒E6和E7片断、自体肿瘤细胞和异源肿瘤细胞的全细胞或部分/溶 胞产物。
其他疗法
除用传统的细胞毒和激素疗法治疗癌症外，还引入新近发展的 治疗癌症的其他疗法。
例如，多种形式的基因疗法正在进行临床前或临床试验。
此外，目前在开发基于肿瘤血管形成(血管发生)抑制的方法。该 概念的目的是切断由新形成的肿瘤血管系统提供的肿瘤营养和氧供 给。
此外，还尝试通过诱导瘤性细胞终末分化的癌疗法。合适的分 化剂包括在以下任何一篇或多篇参考文献中公开的化合物，这些文 献的内容通过引用结合到本文中。
a)极性化合物(Marks等(1987)；Friend，C.，Scher，W.，Holland，J. W.和Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68：378-382；Tanaka， M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A. (1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)72：1003-1006；Reuben，R.C.，Wife， R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad. Sci.(USA)73：862-866)；
b)维生素D和维甲酸的衍生物(Abe，E.，Miyaura，C.，Sakagami， H.，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.和Suda，T.(1981) Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)78：4990-4994；Schwartz，E.L.，Snoddy，J. R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.，and Sartorelli，A.C.(1983)Proc.Am. Assoc.Cancer Res.24：18；Tanenaga，K.，Hozumi，M.和Sakagami，Y. (1980)Cancer Res.40：914-919)；
c)类固醇激素(Lotem，J.和Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer 15：731- 740)；
d)生长因子(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274：535，Metcalf，D. (1985)Science，229：16-22)；
e)蛋白酶(Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1983)Exp. Hematol.11：490-498；Scher，W.，Scher，B.M.和Waxman，S.(1982) Biochem.& Biophys.Res.Comm.109：348-354)；
f)肿瘤启动子(Huberman，E.和Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl. Acad.Sci.(USA)76：1293-1297；Lottem，J.和Sachs，L.(1979)Proc.Natl. Acad.Sci.(USA)76：5158-5162)；和
g)DNA或RNA合成抑制剂(Schwartz，E.L.和Sartorelli，A.C. (1982)Cancer Res.42：2651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.， Salmon，J.，Fibach，E.，Rifkind，R.A.和Marks，P.A.(1978)Proc.Natl. Acad.Sci.(USA)75：2795-2799；Morin，M.J.和Sartorelli，A.C.(1984) Cancer Res.44：2807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.， Marsh，J.C.和Sartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.43：2725-2730； Sugano，H.，Furusawa，M.，Kawaguchi，T.和Ikawa，Y.(1973)Bibl. Hematol.39：943-954；Ebert，P.S.，Wars，I.和Buell，D.N.(1976)Cancer Res.36：1809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.和Hozumi，M.(1979)Gann 70：235-238)，
所有这些方法与本文所述的异羟肟酸化合物联合使用的用途在 本发明范围内。
剂量和剂量方案
使用本发明的异羟肟酸衍生物的剂量方案可根据多种因素选 择，包括种类、物种、年龄、体重、性别和所治疗癌症类型；所治 疗疾病的严重程度(即阶段)；给药途径；患者的肾和肝功能；和使用 的具体化合物或其盐。普通医师或兽医可容易确定和处方治疗例如 预防、抑制(完全或部分)或使该疾病发展停止所需有效量的药物。
用于口服给药，适合的日剂量例如为约5-4000mg/m2，口服， 一日一次、一日两次或一日三次，连续(每天)服用或间断服用(例如 一周3-5天)。例如，当用于治疗目标疾病时，所述异羟肟酸的日剂 量可为约2mg-约2000mg，例如约20mg-约2000mg，例如约400mg- 约1200mg。例如口服日剂量为约2、约20、约200、约400、约800、 约1200、约1600或约2000mg。
例如，患者可接受的剂量为约2mg/天-约2000mg/天，例如约 20-2000mg/天，例如约200-约2000mg/天，例如约400mg/天-约1200 mg/天。因此每日服用一次时，适合的成品药物可包含约2mg-约2000 mg，例如约20mg-约2000mg，例如约200mg-约1200mg，例如约400 mg/天-约1200mg/天。因此每日服用两次时，适合的成品药物包含所 需日剂量的一半的药物活性成分。
可一日一次(QD)给予所述异羟肟酸衍生物，或分为多个日剂量， 例如一日两次(BID)和一日三次(TID)。因此每日服用一次时，适合的 成品药物包含所需的全部日剂量。每日服用两次时，适合的成品药 物包含一半的所需日剂量。每日服用三次时，适合的成品药物包含 三分之一的所需日剂量。
适合的日剂量为每日的总剂量最高达800mg，例如150mg、200 mg、300mg、400mg、600mg或800mg，该总剂量可如上所述每日 给药一次，或者可分成多个日剂量。优选采用口服给药。所述化合 物可单独给予或者以包含所述化合物和药学上可接受的载体或赋形 剂的药物组合物的形式给予。
在一个实施方案中，按约200-600mg的剂量每日一次给予所述 组合物。在另一个实施方案中，按约200-400mg的剂量每日两次给 予所述组合物。在另一个实施方案中，按约200-400mg的剂量每日 两次间断给予所述化合物，例如每周3天、4天或5天。在另一个实 施方案中，按约100-250mg的剂量每日三次给予所述组合物。
在一个实施方案中，日剂量为200mg，可一日一次、一日两次 或一日三次给予。在一个实施方案中，日剂量为300mg，可一日一 次、一日两次或一日三次给予。在一个实施方案中，日剂量为400mg， 可一日一次或一日两次给予。在一个实施方案中，日剂量为150mg， 可一日两次或一日三次给予。
此外，给药可连续(即每日)或间断进行。本文使用的术语“间断” 是指以固定间隔或不固定间隔停止或开始给药。例如，间断给予HDAC 抑制剂可为每周给药1-6天，或者可以周期形式给药(例如每日给药， 连续进行2-8周，然后停止给药最高达一周)或者可表示隔日给药。
在一个实施方案中，所述治疗法方案包括每日一次、每日两次 或每日三次连续给药(即每日给药)，总日剂量为约200mg-约600mg。
在另一个实施方案中，所述治疗法方案包括每日一次、每日两 次或每日三次每周3-5天间断给药，总日剂量为约200mg-约600mg。
在一个特别的实施方案中，按400mg剂量每日一次或按200mg 剂量每日两次连续给药。
在另一个特别的实施方案中，按400mg剂量每日一次或按200 mg剂量每日两次每周3天间断给药。
在另一个特别的实施方案中，按400mg剂量每日一次或按200 mg剂量每日两次每周4天间断给药。
在另一个特别的实施方案中，按400mg剂量每日一次或按200 mg剂量每日两次每周5天间断给药。
在另一个特别的实施方案中，按600mg剂量每日一次、300mg 剂量每日两次或200mg剂量每日三次连续给药。
在另一个特别的实施方案中，按600mg剂量每日一次、300mg 剂量每日两次或200mg剂量每日三次每周3天间断给药。
在另一个特别的实施方案中，按600mg剂量每日一次、300mg 剂量每日两次或200mg剂量每日三次每周4天间断给药。
在另一个特别的实施方案中，按600mg剂量每日一次、300mg 剂量每日两次或200mg剂量每日三次每周5天间断给药。
此外，给药可按照上述的任何方案进行，连续数周，然后停药 一段时间。例如，所述化合物或组合物可按照上述任一方案进行2-8 周，然后停药一周，或者按300mg剂量每日两次每周3-5天。在另 一个特别的实施方案中，所述化合物或组合物可每日三次连续给予 两周，然后停药一周。
对于静脉内或皮下给药，患者可接受的HDAC抑制剂的量为每 天约5-4000mg/m2，例如，每天约5、30、60、90、180、300、600、 900、1200或1500mg/m2。可以多种适合的方法给予这样的量，例如 在一天中分一次或数次在较长的时间内给予大体积低浓度的活性化 合物。该量可每周给予一个或多个连续天、间断天或其组合(7天周 期)。或者在较短的时间内给予小体积高浓度的活性化合物，例如每 周给予一个或多个连续天、间断天或其组合(7天周期)。例如，可以 每天300mg/m2的剂量连续用5天，每个疗程的总剂量为1500 mg/m2。在另一个给药方案中，连续的用药天数也可为5天，治疗持 续2或3周，每个疗程的总剂量为3000mg/m2-4500mg/m2。
通常，可制备的静脉内制剂包含浓度为约1.0mg/mL-约10mg/mL， 例如2.0mg/mL、3.0mg/mL、4.0mg/mL、5.0mg/mL、6.0mg/mL、 7.0mg/mL、8.0mg/mL、9.0mg/mL和10mg/mL的异羟肟酸衍生物， 并且以达到上述剂量的量给予。在一个实例中，可在一天内给予患 者足量的静脉内制剂，使得总日剂量为约300-约1500mg/m2。
皮下制剂，优选按照本领域公知的方法制备，pH为约5-约12， 还包括适当的缓冲剂和等渗剂，这点如下所述。可配制这样的制剂 以便通过每日一次或多次皮下给药来输送日剂量的HDAC抑制剂， 例如每日一次、二次或三次。
所述化合物还可以鼻内形式通过局部使用适当的鼻内溶媒和使 用本领域技术人员公知的透皮贴剂形式通过透皮途径给予。在整个 给药方案中，当然以透皮传送体系给药剂量给予比间断给药更连续。
本领域技术人员显而易见的是这里所描述的不同给药方式、剂 量和剂量方案仅给出了具体的实施方案，不应当认为是对本发明的 范围的限制。任何剂量和剂量方案的变动、变化和组合物均包括在 本发明的范围内。
药用组合物
可将本发明化合物及其衍生物、片断、类似物、同系物、药学 上可接受的盐或水合物与药学上可接受的载体或赋形剂一起组合成 适用于口服给药的药用组合物。此类组合物通常含治疗有效量的任 何以上化合物和药学上可接受的载体。优选有效量是有效选择性诱 导合适瘤性细胞终末分化并小于导致患者中毒的量。
常用作载体或稀释剂的任何惰性赋形剂，例如胶、淀粉、糖、 纤维素物质、丙烯酸酯或其混合物可用于本发明制剂。优选的稀释 剂是微晶纤维素。组合物还可含崩解剂(如交联羧甲基纤维素钠)和润 滑剂(如硬脂酸镁)，此外，可含一种或多种选自以下的添加剂：粘合 剂、缓冲剂、蛋白酶抑制剂、表面活性剂、增溶剂、增塑剂、乳化 剂、稳定剂、增粘剂、甜味剂、成膜剂或其任何组合。此外，本发 明组合物可以是控制释放形式或即释制剂。
在一个实施方案中，口服给予药用组合物，因此配制成适用于 口服给药的形式，即固体或液体制剂。合适的固体口服制剂包括片 剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、微丸等。合适的口服液体制剂包括溶 液剂、混悬剂、分散体、乳剂、油等。在本发明的一个实施方案中， 组合物配制成胶囊剂。按该实施方案，本发明组合物除含异羟肟酸 衍生物活性化合物和惰性载体或稀释剂外，还含硬明胶胶囊。
本文中使用的“药学上可接受的载体”将包括与给予药物配伍的 任何和所有溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌和抗真菌剂、等渗剂 和延迟吸收剂等，例如无菌无热原水。合适的载体在本领域中的标 准参考教材最新版Remington′s Pharmaceutical Sciences中有描述，其 通过引用结合到本文中。优选的此类载体或稀释剂的实例包括但不 限于水、盐水、finger′s溶液、葡萄糖溶液和5％人血清白蛋白。还可 使用脂质体和非水溶媒例如不挥发油。本领域中熟知用于药物活性 物质的此类介质和试剂的用途。除与活性化合物不配伍的任何常规 介质或试剂外，其在组合物中的用途可以预期。也可将辅助活性化 合物加入组合物中。
固体载体/稀释剂包括但不限于胶、淀粉(例如玉米淀粉、预胶化 淀粉)、糖(例如乳糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖)、纤维素物质(例如微 晶纤维素)、丙烯酸酯(例如聚甲基丙烯酸酯)、碳酸碳、氧化镁、滑 石粉或其混合物。
对于液体制剂，药学上可接受的载体可以是水或非水溶液、混 悬液、乳液或油。非水溶剂的实例有丙二醇、聚乙二醇和注射有机 酯例如油酸乙酯。水性载体包括水、醇/水溶液、乳液或混悬液，包 括盐水和缓冲介质。油的实例有石油、动物、植物或合成来源的那 些油，例如花生油、大豆油、矿物油、橄榄油、葵花油和鱼肝油。 溶液或混悬液还可包括以下组分：无菌稀释剂例如注射用水、盐水 溶液、不挥发油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其他合成溶剂；抗细 菌剂例如苯甲醇或尼泊金甲酯；抗氧化剂例如抗坏血酸或亚硫酸氢 钠；螯合剂例如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲剂例如乙酸盐、柠檬酸 盐或磷酸盐和调节张度的试剂例如氯化钠或葡萄糖。可用酸或碱例 如盐酸或氢氧化钠调节pH。
此外，组合物还可含粘合剂(例如阿拉伯胶、玉米淀粉、明胶、 卡波姆、乙基纤维素、瓜尔胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、 聚乙烯吡咯烷酮)、崩解剂(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸、二氧 化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、瓜尔胶、淀粉 羟乙酸钠、羧甲基淀粉钠(Primogel))、各种pH和离子强度的缓冲剂(例 如tris-HCl、乙酸盐、磷酸盐)、阻止表面吸附的添加剂例如白蛋白或 明胶、清洁剂(例如吐温20、吐温80、Pluronic F68、胆酸盐)、蛋白 酶抑制剂、表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠)、渗透促进剂、增溶剂 (例如甘油、聚乙二醇)、助流剂(例如胶体二氧化硅)、抗氧化剂(例如 抗坏血酸、焦亚硫酸钠、丁基化羟基苯甲醚)、稳定剂(例如羟丙基纤 维素、羟丙基甲基纤维素)、增粘剂(例如卡波姆、胶体二氧化硅、乙 基纤维素、瓜尔胶)、甜味剂(例如蔗糖、阿司帕坦、柠檬酸)、矫味 剂(例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味香精)、防腐剂(例如硫柳汞、苯甲 醇、尼泊金酯)、润滑剂(例如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇、十二烷 基硫酸钠)、助流剂(例如胶体二氧化硅)、增塑剂(例如酞酸二乙酯、 枸橼酸三乙酯)、乳化剂(例如卡波姆、羟丙基纤维素、十二烷基硫酸 钠)、聚合物包衣剂(例如泊洛沙姆或其乙二胺衍生物(poloxamines))、 包衣剂和成膜剂(例如乙基纤维素、丙烯酸酯和聚甲基丙烯酸酯)和/或 助剂。
在一个实施方案中，使活性化合物和防止化合物在体内快速消 除的载体一起制备，例如控释制剂包括植入物和微囊释药系统。可 使用生物降解、生物相容聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚 乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备此类制剂的方法对本领域 技术人员而言显而易见。也可从Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc购买原料。也可用脂质体混悬液(包括用病毒抗原 的单克隆抗体靶向感染细胞的脂质体)作药学上可接受的载体。这些 可按本领域技术人员已知的方法例如按美国专利号4,522,811中所述 方法制备。
配制便于给药和剂量均匀的剂量单位形式的口服组合物尤其最 好。本文中所用的剂量单位形式是指适用于受治疗者治疗的单位剂 量的物理分隔单位；每单位含预计产生需要疗效的预定量活性化合 物和组合应用的需要药用载体。本发明剂量单位形式的规格由活性 化合物的独特特征、欲达到的具体疗效和用于治疗个体的组合此类 活性化合物技术的内在限定所决定并直接取决于这些因素。
可将药用组合物和用药说明书一起包括在容器、包装或分配器 中。
在治疗的第一日，可静脉内给予本发明化合物，第二日和随后 日子连续口服给药。
可给予本发明化合物用于预防疾病发展或使肿瘤生长停滞的目 的。
在本领域中容易理解含活性成分的药用组合物的制备，例如通 过混合、制粒或片剂形成方法。活性治疗成分通常与药学上可接受 和与活性成分配伍的赋形剂混合。用于口服给药的活性药物与通常 用于该目的的添加剂例如溶媒、稳定剂或惰性稀释剂混合，通过常 用方法转化为合适的给药形式，例如以上详述的片剂、包衣片剂、 硬或软明胶胶囊剂；水、醇或油溶液等。
给予患者的化合物量小于患者中毒量。在某些实施方案中，给 予患者的化合物量小于导致患者血浆中化合物浓度等于或超过该化 合物毒性水平的量。优选使患者血浆中化合物的浓度保持在约10 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约25 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约50 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约100 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约500 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约1000 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约2500 nM。在另一个实施方案中，使患者血浆中化合物的浓度保持在约5000 nM。在实施本发明中，应给予患者的最佳化合物量取决于具体使用 的化合物和所治疗癌症的类型。
体外方法：
本发明还提供了使用本发明的异羟肟酸衍生物诱导瘤性细胞终 末分化、细胞生长停滞和/或凋亡，因而抑制该类细胞增殖的方法。 该方法可在体内或体外进行。
在一个实施方案中，本发明提供了用于选择性诱导瘤性细胞终 末分化、细胞生长停滞和/或凋亡从而抑制该类细胞增殖的体外方法， 所述方法通过将所述细胞与有效量的一种或多种本文所述的异羟肟 酸衍生物接触。
在一个特别的实施方案中，本发明涉及一种选择性诱导瘤性细 胞终末分化从而抑制该类细胞增殖的体外方法。所述方法包括在适 当的条件下将所述细胞与有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸 化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种选择性诱导瘤性细胞细 胞生长停滞从而抑制该类细胞增殖的体外方法。所述方法包括在适 当的条件下将所述细胞与有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸 化合物接触。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种选择性诱导瘤性细胞凋 亡从而抑制该类细胞增殖的体外方法。所述方法包括在适当的条件 下将所述细胞与有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸化合物接 触。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种诱导肿瘤中的肿瘤细胞 终末分化的体外方法，所述方法包括将所述细胞与有效量的一种或 多种本文所述的异羟肟酸化合物接触。
尽管本发明的方法可体外实施，但还是认为对于选择性诱导瘤 性细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡的方法以及抑制HDAC的 方法的优选的实施方案包括在体内与细胞接触，即通过将所述化合 物给予需要治疗的带有(harboring)瘤性细胞或肿瘤细胞的受治疗者。
因此，本发明提供了用于选择性诱导受治疗者瘤性细胞终末分 化、细胞生长停滞和/或凋亡从而抑制受治疗者体内该类细胞增殖的 体内方法，所述方法通过给予受治疗者有效量的任何一种或多种本 文所述的异羟肟酸衍生物。
在一个特别的实施方案中，本发明涉及一种选择性诱导瘤性细 胞终末分化从而抑制受治疗者体内该类细胞增殖的方法。所述方法 包括给予受治疗者有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸衍生 物。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种选择性诱导瘤性细胞细 胞生长停滞从而抑制受治疗者体内该类细胞增殖的方法。所述方法 包括给予受治疗者有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸衍生 物。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种选择性诱导瘤性细胞凋 亡从而抑制受治疗者体内该类细胞增殖的方法。所述方法包括给予 受治疗者有效量的一种或多种本文所述的异羟肟酸衍生物。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种治疗所患肿瘤的特征在 于瘤性细胞增殖的肿瘤受治疗者的方法。所述方法包括给予受治疗 者一种或多种本文所述的异羟肟酸衍生物。所述化合物的量能有效 选择性诱导瘤性细胞终末分化、诱导细胞生长停滞和/或诱导凋亡从 而抑制其增殖。
本发明在下述实验部分详述的实施例中进一步说明。该部分的 作用有助于理解本发明，而不是并且不应当认为是以任何方式限制 如下面的权利要求中所提出的本发明。
实验部分详述
实施例1-合成
采用下面的合成流程中列出的通用方法合成本发明的化合物， 并详述如下。
A.苯并噻吩
A1.氨基苯并噻吩流程1表示由5-和6-氨基苯并噻吩合成苯并 噻吩的酰胺、磺酰胺、脲和烷基化胺衍生物。
流程1
A2.羧基苯并噻吩。流程2表示由5和6-羧基苯并噻吩合成苯并 噻吩的酰胺和酯衍生物。
流程2
A3.由5-甲酰基苯并噻吩制备的化合物
流程6表示使用5-甲酰基苯并噻吩来制备1和2胺、醚和酰基 化的氨基甲基化合物。
流程6
A4.由6-甲酰基苯并噻吩制备的化合物。
流程7表示使用6-甲酰基苯并噻吩来制备1和2胺、醚、酰基 化的氨基甲基化合物。
流程7
B.噻吩
B1.苯基噻吩。流程3表示由取代的5-芳基噻吩合成5-苯基-噻 吩的酰胺和酯衍生物。
流程3
B2.烷基噻吩和烯基噻吩。流程4表示由取代的5-烷基噻吩和5- 烯基噻吩合成5-烷基噻吩和5-烯基噻吩的酰胺和酯衍生物。
流程4
B3.氨基噻吩。流程5表示由5-氨基噻吩合成噻吩的酰胺和酯衍 生物。
流程5
实验
苯并噻吩
制备6-氨基苯并噻吩
6-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。往2，4-二硝基苯甲醛(6.45g，32.9 mmol)和K2CO3(5.45g，39.4mmol)在DMF(60mL)中的混合物中缓慢 加入巯基乙酸甲酯(3.0mL，32.9mmol)。将该混合物在室温下搅拌1 小时，随后在50℃下搅拌2小时。将得到的混合物倾入H2O/冰中并 搅拌直到生成沉淀。滤出固体并与热MeOH一起研磨。滤出浅褐色 固体。1H NMR(DMSO-d6)δ9.13(s，1H)，8.33(s，1H)，8.30-8.17(m，2H)， 3.89(s，3H).MS(EI)：计算值(MH+)238.01，实测值(MH+)238.10。
6-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。往搅拌的6-硝基-苯并[b]噻吩- 2-甲酸甲酯(3.9g，15.8mmol)的DMF(120mL)溶液中加入10％ Pd/C(700mg、10％重量)。往反应物中通入氢、脱气并重新通入氢， 共计三次。在气囊压力、室温下将浆料搅拌4天，随后经硅藻土(Celite) 塞过滤，减压除去溶剂。用EtOAc洗涤固体并过滤得到所需的胺。1H NMR(CDCl3)δ7.92(s，1H)，7.65(d，J＝8.4Hz，1H)，7.08(s，1H)，6.78(d，J ＝8.4Hz，1H)，3.92(s，3H).MS(EI)：计算值(MH+)208.04，实测值(MH+) 208.1。
酰胺
酰化6-氨基-苯并噻吩的通用方法
6-苯基乙酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。往6-氨基-苯 并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(75mg、0.36mmol)和NMM(51.7μL，0.47mmol) 的THF/CH2Cl2(2/1mL)溶液中加入酰氯(0.434mmol)。24小时后，除 去溶剂。往所得混合物中加入DMA(2mL)和NH2OH(50％水溶液，1 mL)。搅拌所得溶液直到LC/MS分析结果表明已不含原料。除去溶 剂后，加入MeOH/H2O直到形成沉淀。滤出固体，得到所需的酰胺。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.38(br s，1H)，10.42(br s，1H)，9.21(br s，1H)， 8.38(s，1H)，7.90-7.75(m，2H)，7.50-7.15(m，6H)，3.65(s，2H).MS(EI)：计 算值(MH+)327.07，实测值(MH+)327.28。
6-苯甲酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.37(br s，1H)，10.46(br s，1H)，9.21(br s，1H)，8.53(s， 1H)，7.99-7.77(m，4H)，7.77-7.64(m，1H)，7.64-7.45(m，3H).MS(EI)：计 算值(MH+)313.1，实测值(MH+)313.3。
6-[(联苯基-4-羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.39(br s，1H)，10.50(br s，1H)，9.23(br s，1H)，8.56(s， 2H)，8.05(d，J＝7.8Hz，2H)，8.00-7.60(m，7H)，7.60-7.34(m，3H). MS(EI)：计算值(MH+)389.1，实测值(MH+)389.3。
6-(3-苯基-丙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.37(br s，1H)，10.13(br s，1H)，9.19(br s，1H)，8.37(s， 1H)，7.85-7.72(m，2H)，7.44-7.33(m，1H)，7.33-7.08(m，6H)，2.95-2.81(m， 2H)，2，70-2.59(m，2H).MS(EI)：计算值(MH+)341.1，实测值(MH+) 341.3。
6-[(萘-2-羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.39(br s，1H)，10.63(br s，1H)，9.22(br s，1H)，8.57(s， 2H)，8.15-7.92(m，4H)，7.92-7.80(m，2H)，7.80-7.70(m，1H)，7.70-7.54(m， 2H).MS(EI)：计算值(MH+)363.1，实测值(MH+)363.3。
6-异丁酰氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO- d6)δ11.35(br s，1H)，10.05(br s，1H)，9.20(br s，1H)，8.39(s，1H)，7.85- 7.70(m，2H)，7.44(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，2.68-2.48(m，1H)，1.08(d，J＝ 7.0Hz，6H).MS(EI)：计算值(MH+)279.0，实测值(MH+)279.2。
喹啉-2-[N-(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.94(br s，1H)，10.27(br s，1H)，9.22(br s，1H)，8.72- 8.57(m，2H)，8.30-8.18(m，2H)，8.10(d，J＝8.4Hz，1H)，8.04-7.82(m，4H)， 7.31(dd，J＝7.4，7.4Hz，1H).MS(EI)：计算值(MH+)364.1，实测值 (MH+)364.3。
N-(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基)-烟酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.40(m，1H)，10.66(br s，1H)，9.25(br s，1H)，9.11(s， 1H)，8.82-8.70(m，1H)，8.54(s，1H)，8.30(d，J＝7.5Hz，1H)，8.00-7.78(m， 2H)，7.70(d，J＝7.0Hz，1H)，7.65-7.50(m，1H).MS(EI)：计算值(MH+) 314.1，实测值(MH+)314.3。
6-二苯基乙酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.35(m，1H)，10.62(br s，1H)，9.19(br s，1H)，8.43(s， 1H)，7.90-7.72(m，2H)，7.50-7.15(m，11H)，5.17(s，1H).MS(EI)：计算值 (MH+)403.1，实测值(MH+)403.3。
6-[(萘-1-羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。(EI)：计算 值(MH+)363.1，实测值(MH+)363.3。
6-(3，4-二甲氧基-苯甲酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.39(br s，1H)，10.27(br s，1H)，9.22(br s，1H)， 8.48(s，1H)，7.90-7.75(m，2H)，7.75-7.55(m，2H)，7.52(s，1H)，7.08(d，J＝ 8.0Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.81(s，3H).MS(EI)：计算值(MH+)373.1，实 测值(MH+)373.2。
6-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.31(br s，1H)，8.35(s，1H)，7.85-7.72(m， 2H)，7.42(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，6.95-6.75(m，3H)，3.69(s，3H)，3.67(s， 3H)，3.54(s，2H).MS(EI)：计算值(MH+)387.1，实测值(MH+)387.2。
6-[2-(4-氟-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.39(br s，1H)，9.27(br s，1H)，8.37(s，1H)，7.88- 7.72(m，2H)，7.50-7.28(m，3H)，7.20-7.05(m，2H)，3.65(s，2H).MS(EI)： 计算值(MH+)345.1，实测值(MH+)345.2。
6-[2-(2，5-二甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.25(br s，1H)，9.27(br s，1H)，8.35(s，1H)， 7.85-7.69(m，2H)，7.45(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，6.92-6.68(m，3H)，3.66(s， 3H)，3.65(s，3H)，3.60(s，2H).MS(EI)：计算值(MH+)387.1，实测值 (MH+)387.2。
6-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.38(br s，1H)，9.27(br s，1H)，8.37(s，1H)， 7.87-7.73(m，2H)，7.45(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，7.21(t，J＝8.0，8.0Hz， 1H)，6.92-6.83(m，2H)，6.78(dd，J＝7.0，1.2Hz，1H)，3.71(s，3H)，3.61(s， 2H).MS(EI)：计算值(MH+)357.1，实测值(MH+)357.3。
6-[2-(4-氯-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ10.42(s，1H)，9.20(br s，1H)，8.36(s，1H)，7.87-7.71(m， 2H)，7.49-7.25(m，5H)，3.66(s，2H).MS(EI)：计算值361.1(MH+)，实 测值361.5(MH+)。
6-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(CDCl3)δ10.35(s，1H)，9.21(br s，1H)，8.37(s，1H)，7.85- 7.70(m，2H)，7.51-7.32(m，1H)，7.22(d，2H，J＝8.0Hz)，6.85(d，2H，J＝ 8.0Hz)，3.69(s，3H)，3.57(s，2H).MS(EI)：计算值357.1(MH+)，实测值 357.3(MH+)。
6-(2-苯基-丁酰氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.33(br s，1H)，10.31(s，1H)，9.19(br s，1H)，8.39(s，1H)， 7.83-7.71(m，2H)，7.45-7.15(m，6H)，3.56(t，1H，7.2Hz)，2.15-1.90(m， 1H)，1.78-1.55(m，1H)，0.83(t，3H，7.2Hz).MS(EI)：计算值355.1(MH+)， 实测值355.3(MH+)。
6-(甲基-苯基乙酰基-氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.48(br s，1H)，9.27(br s，1H)，8.01-7.85(m，3H)，7.33(d， 1H，J＝8.2Hz)，7.35-7.10(m，3H)，7.10-6.02(m，2H)，3.29(s，3H)，3.21(s， 2H).MS(EI)：计算值341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
6-(2-吡啶-2-基-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 MS(EI)：计算值328.1(MH+)，实测值328.2(MH+)。
6-(2-吡啶-3-基-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ10.45(s，1H)，9.22(br s，1H)，8.51-8.30(m，2H)，7.89- 7.65(m，3H)，7.58(d，1H，J＝8.0Hz)，7.50-7.22(m，2H)，3.71(s，2H). MS(EI)：计算值328.1(MH+)，实测值328.2(MH+)。
6-(2-苯基-丙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ10.27(s，1H)，9.19(br s，1H)，8.38(s，1H)，7.83-7.71(m， 2H)，7.49-7.15(m，6H)，3.85(q，1H，7.0Hz)，1.39(t，3H，7.0Hz).MS(EI)： 计算值341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
6-{[1-(4-氯-苯基)-环丙烷羰基]-氨基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。MS(EI)：计算值387.1(MH+)，实测值387.3(MH+)。
6-[(1-苯基-环丙烷羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。
MS(EI)：计算值353.1(MH+)，实测值353.2(MH+)。
6-{[1-(4-氯-苯基)-环丁烷羰基]-氨基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。MS(EI)：计算值401.1(MH+)，实测值401.2(MN+)。
6-[2-(4-氯-苯基)-2-甲基-丙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。MS(EI)：计算值389.1(MH+)，实测值389.2(MN+)。
6-(2S-苯基-丁酰氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)： 计算值355.1(MH+)，实测值355.2(MN+)。
6-(2R-苯基-丁酰氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)： 计算值355.1(MH+)，实测值355.2(MH+)。
由氨基甲基-苯并噻吩制备的酰基化化合物
6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯·盐酸盐。在0℃下往6-羟甲 基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(2.52g，10.7mmol)和三乙胺(3.00mL，21.5 mmol)的无水THF(80mL)溶液中加入甲磺酰氯(1.24mL，16.0mmol)。 将得到的混合物在0℃下搅拌30分钟，用EtOAc(400mL)稀释，随 后用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤。有机层经Na2SO4干燥。过滤后， 将滤液浓缩，随后将残余物溶解在无水DMF(60mL)中。加入叠氮化 钠(1.41g，21.6mmol)，将该混合物在50℃下加热30分钟。冷却至室 温后，用EtOAc(300mL)和水(60mL)稀释该混合物。再次用水和盐 水洗涤有机层，并经Na2SO4干燥。过滤后，将滤液浓缩并将残余物 溶解于THF(60mL)和水(6mL)中。加入三苯基膦(3.64g，13.9mmol)， 将该混合物在室温下搅拌过夜，随后浓缩。将残余物溶解于乙醚(400 mL)，随后滴加4M HCl二烷溶液(6mL)。形成的固体用乙醚(5×30 mL)洗涤并干燥，得到浅色固体形式的6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲 酸乙酯·盐酸盐。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.66(brs，2H)，8.24- 8.10(m，2H)，8.06(d，J＝8.6Hz，1H)，7.62(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，4.34(q， J＝7.4Hz，2H)，4.13(s，2H)，1.32(t，J＝7.0Hz，3H)。MS(EI)：计算值 236.1(MH+)，实测值236.1(MH+)。
6-羟甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。将6-羟甲基-苯并[b]噻吩-2- 甲酸乙酯(9.45g，40.0mmol)和DBU(6.00mL，40.1mmol)的无水 MeOH(200mL)溶液搅拌2天。浓缩后，将残余物溶解在EtOAc(800mL) 中并用1N HCl、水、饱和NaHCO3以及盐水洗涤。干燥有机层，过 滤并将滤液浓缩和干燥，得到灰白色固体形式的6-羟甲基-苯并[b]噻 吩-2-甲酸甲酯。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.03(d，J＝0.6Hz，1H)， 7.90-7.80(m，2H)，7.39(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，4.83(s，2H)，3.94(s，3H)， 1.98(brs，1H)。MS(EI)：计算值223.0(MH+)，实测值223.1(MH+)。
6-氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯·盐酸盐。按照类似于制备6- 氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯·盐酸盐的方法由6-羟甲基-苯并[b] 噻吩-2-甲酸甲酯制备该标题化合物。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ 8.70(brs，2H)，8.24-8.12(m，2H)，8.05(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(dd，J＝8.0， 1.0Hz，1H)，4.20-4.14(m，2H)，3.88(s，3H)。MS(EI)：计算值222.0(MH+)， 实测值222.1(MH+)。
6-(苯甲酰基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。往6-氨 基甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯·盐酸盐(109mg、0.40mmol)、 NMM(132μL，1.20mmol)、DMAP(10mg、0.08mmol)在无水THF(5mL) 中的混合物中加入苯甲酰氯(55.7μL，0.48mmol)和DMF(2.0mL)。反 应完全后，将反应混合物浓缩。往残余物中加入MeOH(1mL)和水(10 mL)。将形成的固体过滤，用水洗涤并干燥。将该固体残余物溶解于 无水MeOH(5mL)中并加入盐酸羟胺(106mg、1.52mmol)，随后加入 NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.70mL，3.1mmol)。让该混合物 在室温下搅拌直到反应完全。将该反应混合物浓缩并将残余物溶解 于最少量的水中。用2N HCl将得到的溶液酸化至pH≈8。过滤形成 的固体、水洗并通过快速柱色谱纯化，得到白色固体状的6-(苯甲酰 基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ11.44(brs，1H)，9.27(brs，1H)，9.13(t，J＝6.2Hz，1H)，8.00- 7.78(m，5H)，7.58-7.28(m，4H)，4.60(d，J＝5.8Hz，2H)。MS(EI)：计算 值327.1(MH+)，实测值327.1(MH+)。
采用类似于制备6-(苯甲酰基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺的方法制备以下化合物。
6-(苯基乙酰基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.64(t，J＝6.2Hz，1H)，7.94-7.70(m，3H)， 7.34-7.14(m，6H)，4.38(d，J＝5.8Hz，2H)，3.49(s，2H)。MS(EI)：计算值 341.1(MH+)，实测值341.1(MH+)。
6-{[(萘-1-羰基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.18(t，J＝5.8Hz，1H)，8.24-8.14(m，1H)， 8.06-7.84(m，5H)，7.69(dd，J＝7.0，1.0Hz，1H)，7.62-7.42(m，4H)， 4.67(d，J＝6.0Hz，2H)。MS(EI)：计算值377.1(MH+)，实测值 377.1(MH+)。
6-[(2-甲基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.46(brs，1H)，9.26(brs，1H)，8.87(t， J＝6.2Hz，1H)，7.98-7.82(m，3H)，7.46-7.16(m，5H)，4.55(d，J＝5.8Hz， 2H)，2.32(s，3H)。MS(EI)：计算值341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
6-[(4-甲基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.44(brs，1H)，9.25(brs，1H)，9.03(t， J＝4.6Hz，1H)，7.96-7.72(m，5H)，7.38(d，J＝8.0Hz，2H)，7.27(d，J＝8.2 Hz，2H)，4.58(d，J＝6.0Hz，2H)，2.34(s，3H)。MS(EI)：计算值 341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
6-[(3-甲氧基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.45(brs，1H)，9.25(brs，1H)，9.11(t， J＝6.0Hz，1H)，7.96-7.80(m，3H)，7.54-7.30(m，3H)，7.14-7.04(m，1H)， 4.59(d，J＝5.6Hz，2H)，3.79(s，3H)。MS(EI)：计算值357.1(MH+)，实 测值357.2(MH+)。
6-[(4-甲氧基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.44(brs，1H)，9.27(brs，1H)，8.89(t， J＝5.4Hz，1H)，8.00-7.78(m，5H)，7.39(d，J＝8.0Hz，2H)，7.00(d，J＝9.0 Hz，2H)，1H)，4.58(d，J＝5.8Hz，2H)，3.80(s，3H)。MS(EI)：计算值 357.1(MH+)，实测值357.2(MH+)。
6-[(3，4-二甲氧基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.45(brs，1H)，9.27(brs，1H)， 8.99(t，J＝6.0Hz，1H)，7.94-7.80(m，3H)，7.60-7.46(m，2H)，7.38(dd，J＝ 8.4，1.6Hz，1H)，7.02(d，J＝8.4Hz，1H)，1H)，4.59(d，J＝5.4Hz，2H)， 3.80(s，3H)，3.79(s，3H)。MS(EI)：计算值387.1(MH+)，实测值 387.2(MH+)。
N-(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基甲基)-烟酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.32(t，J＝5.6Hz，1H)，9.06(d，J＝1.4Hz， 1H)，8.71(dd，J＝4.8，2.0Hz，1H)，8.24(ddd，J＝7.8，2.0，2.0Hz，1H)， 7.96(s，1H)，7.92-7.80(m，2H)，7.60-7.46(m，1H)，7.40(dd，J＝8.4，1.4Hz， 1H)，4.62(d，J＝6.0Hz，2H).MS(EI)：计算值328.1(MH+)，实测值 328.2(MH+)。
6-(异丁酰氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.26(brs，1H)，8.34(t，J＝5.6Hz，1H)，7.94- 7.74(m，3H)，7.29(d，J＝8.0Hz，1H)，4.36(d，J＝6.0Hz，2H)，2.46- 2.30(m，1H)，1.03(d，J＝6.6Hz，6H)。MS(EI)：计算值293.1(MH+)，实 测值293.1(MH+)。
6-[(2-甲氧基-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.27(brs，1H)，8.80(t，J＝6.2Hz， 1H)，7.98-7.82(m，3H)，7.73(dd，J＝8.0，1.8Hz，1H)，7.54-7.36(m，2H)， 7.14(d，J＝8.6Hz，1H)，7.03(t，J＝7.4Hz，1H)，4.61(d，J＝5.8Hz，2H)， 3.89(s，3H)。MS(EI)：计算值357.1(MH+)，实测值357.1(MH+)。
6-[(4-氯-苯甲酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.20(t，J＝5.8Hz，1H)，7.98-7.80(m，5H)， 7.55(d，J＝8.4Hz，2H)，7.38(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，4.59(d，J＝5.8Hz， 2H)。MS(EI)：计算值361.0(MH+)，实测值361.1(MH+)。
磺酰胺
6-苯基甲磺酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。采用与制 备6-苯基乙酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺相同的方法。1H NMR(DMSO-d6)δ11.18(br s，1H)，9.99(br s，1H)，9.19(br s，1H)，7.91- 7.60(m，3H)，7.42-7.15(m，5H)，4.51(s，2H).MS(EI)：计算值(MH+) 363.04，实测值(MH+)363.28。
6-苯磺酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.38(br s，1H)，10.47(br s，1H)，9.22(br s，1H)，7.90- 7.40(m，8H)，7.20-7.03(m，1H)。MS(EI)：计算值(MH+)349.0，实测值 (MH+)349.2。
6-(联苯基-4-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.37(br s，1H)，10.46(br s，1H)，9.21(br s，1H)，7.96- 7.59(m，9H)，7.59-7.30(m，3H)，7.30-7.03(m，1H).MS(EI)：计算值(MH+) 425.1，实测值(MH+)425.3。
6-(萘-1-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计 算值(MH+)399.1，实测值(MH+)399.3。
6-(萘-2-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.32(br s，1H)，10.63(br s，1H)，9.17(br s，1H)，8.45(s， 1H)，8.25-7.96(m，2H)，7.93(d，J＝7.4Hz，1H)，7.61-7.58(m，6H)， 7.13(dd，J＝8.6，1.6Hz，1H).MS(EI)：计算值(MH+)399.1，实测值 (MH+)399.3。
6-(甲苯-4-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.35(br s，1H)，10.46(br s，1H)，9.20(br s，1H)，7.80- 7.57(m，5H)，7.28(d，J＝8.0Hz，2H)，7.14(d，J＝8.4Hz，1H)，5.72(s，1H)， 2.27(s，3H)。MS(EI)：计算值(MH+)363.0，实测值(MH+)363.2。
通用方法：
将2-甲氧基羰基-苯并[b]噻吩-6-基甲基-氯化铵(100mg、0.388 mmol)和二异丙基乙胺(160μL，0.919mmol)在2.5mL的无水DMF中 的细微悬浮液加入含有0.40mmol的磺酰氯的小瓶中。将混合物搅 拌，数分钟后混合物变得透明。将得到的溶液搅拌1小时。往该中 间溶液中缓慢加入羟胺的50％的水溶液(1mL，16.7mmol)。形成沉淀 后，加入足量的DMF得到透明的溶液。将该反应物在室温下搅拌2 天。加入水(4mL)和盐水(2mL)沉淀产物。过滤收集固体，与饱和 NaHCO3(1mL)和EtOAc(0.5mL)一起研磨，随后用水洗涤。过滤后， 在高真空下得到产物并分离为粉末。
数据(data)
6-(苯磺酰基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.26(t，J＝6.2Hz，1H)，7.94-7.72(m，5H)， 7.64-7.46(m，3H)，7.28(d，J＝8.6Hz，1H)，4.11(d，J＝5.8Hz，2H)。MS(EI)： 计算值363.0(MH+)，实测值363.0(MH+)。
6-(苯基甲磺酰基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.96-7.84(m，3H)，7.42-7.28(m，6H)，4.35(s， 2H)，4.21(d，J＝5.8Hz，2H)。MS(EI)：计算值377.1(MH+)，实测值 377.0(MH+)。
6-[(萘-1-磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.76-8.54(m，2H)，8.18-7.96(m，3H)，7.84- 7.48(m，6H)，7.16(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H)，4.16(d，J＝5.8Hz，2H)。 MS(EI)：计算值413.1(MH+)，实测值413.0(MH+)。
6-[(萘-2-磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.41(d，J＝1.6Hz，1H)，8.16-7.95(m，3H)， 7.88-7.56(m，6H)，7.28(d，J＝8.2Hz，1H)，4.14(s，2H)。MS(EI)：计算值 413.1(MH+)，实测值413.1(MH+)。
6-[(甲苯-4-磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.16(br t，1H)，7.86(s，1H)，7.81(d，J＝8.4Hz， 1H)，7.76(s，1H)，7.66(d，J＝8.2Hz，2H)，7.33(d，J＝8.0Hz，2H)，7.28(d， J＝8.0Hz，1H)，4.08(d，J＝4.4Hz，2H)，2.33(s，3H).MS(ES-)：计算值 375.05(M-H+)，实测值375.12(M-H+)。
6-[(2，4，6-三甲基-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.09(br t，1H)，7.83(s，1H)，7.76(d，J ＝8.4Hz，1H)，7.64(s，1H)，7.24(d，J＝8.0Hz，2H)，6.90(s，2H)，4.10(d，J ＝5.2Hz，2H)，2.51(s，6H)，2.16(s，3H).MS(ES+)：计算值405.10(MH+)， 实测值405.18(MH+)。
6-[(4-叔丁基-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)7.78-7.62(m，5H)，7.50(d，J＝8.4Hz， 2H)，7.20(d，J＝8.0Hz，2H)，4.09(br s，2H)，1.25(s，9H).MS(ES-)：计算 值417.09(M-H+)，实测值417.19(M-H+)。
6-[(4-氟-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.25(br s，1H)，7.85-7.77(m，5H)，7.40- 7.24(m，3H)，4.12(d，J＝1.0Hz，2H).MS(ES-)：计算值379.02(M-H+)， 实测值379.12(M-H+)。
6-[(4-氯-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)7.86(s，1H)，7.80(d，J＝8.4Hz，1H)，7.76(d，J ＝7.8Hz，2H)，7.58(d，J＝8.4Hz，2H)，7.27(d，J＝8.4Hz，1H)，4.13(s， 2H).MS(ES+)：计算值397.01(MH+)，实测值397.09(MH+)。
6-[(3-氯-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)7.84-7.66(m，5H)，7.66-7.50(m，2H)， 7.25(d，J＝8.4Hz，1H)，4.16(s，2H).MS(ES-)：计算值394.99(M-H+)， 实测值395.09(M-H+)。
6-[(4-溴-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)7.85-7.65(m，7H)，7.23(d，J＝8.4Hz，1H)， 4.11(s，2H).MS(ES-)：计算值438.94(M-H+)，实测值439.03(M-H+)。
6-[(3-溴-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NNR(DMSO-d6，200MHz)7.85-7.60(m，6H)，7.65(t，J＝8.2Hz，1H)， 7.26(d，J＝9.2Hz，1H)，4.16(s，2H).MS(ES+)：计算值440.96(MH+)，实 测值441.03(MH+)。
6-[(3-甲氧基-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.27(br s，1H)，7.85-7.70(m，3H)， 7.50-7.25(m，3H)，7.24(s，1H)，7.13(d，J＝8.4Hz，1H)，4.11(s，2H)， 3.76(s，3H).MS(ES+)：计算值393.06(MH+)，实测值393.14(MH+)。
6-[(4-硝基-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.28(d，J＝8.8Hz，1H)，7.96(d，J＝8.8 Hz，1H)，7.80-7.70(m，3H)，7.25(d，J＝8.4Hz，1H)，4.19(s，2H). MS(ES-)：计算值406.01(M-H+)，实测值406.10(M-H+)。
6-[(4-甲氧基-苯磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NNR(DMSO-d6，200MHz)7.80-7.65(m，5H)，7.23(d，J＝8.6Hz， 1H)，7.05(d，J＝8.8Hz，2H)，4.04(s，2H)，3.79(s，3H).MS(ES-)：计算值 391.04(M-H+)，实测值391.17(M-H+)。
6-[(噻吩-2-磺酰基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)7.90(d，J＝4.6Hz，1H)，7.90-7.70(m，3H)， 7.59(d，J＝3.8Hz，1H)，7.28(d，J＝8.2Hz，1H)，7.14(t，J＝3.8Hz，1H)， 4.18(s，2H).MS(ES+)：计算值369.01(MH+)，实测值369.07(MH+)。
6-{[3-(4-甲氧基-苯氧基)-丙烷-1-磺酰基氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩- 2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)7.95-7.70(m，4H)， 7.36(d，J＝8.4Hz，1H)，6.90-6.75(m，4H)，4.26(s，2H)，3.91(t，J＝6.2 Hz，2H)，3.67(s，3H)，3.08(t，J＝7.4Hz，2H)，2.01(m，2H).MS(ES-)：计 算值449.08(M-H+)，实测值449.15(M-H+)。
脲/氨基甲酸酯
6-(3-苄基-脲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。采用与制备6- 苯基乙酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺相同的方法。 1H(DMSO-d6)δ11.28(br s，1H)，9.19(br s，1H)，8.82(s，1H)，8.16(s，1H)， 7.80-7.62(m，2H)，7.38-7.17(m，5H)，6.68(t，J＝5.8Hz，1H)，4.28(d，J＝ 5.8Hz，2H)。MS(EI)：计算值(MH+)342.08，实测值(MH+)342.31。
(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基)-氨基甲酸乙酯。1H NNR(DMSO-d6)δ9.86(br s，1H)，9.18(br s，1H)，8.11(s，1H)，7.82-7.70(m， 2H)，7.38(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，4.11(q，J＝6.8Hz，2H)，1.22(t，J＝6.8 Hz，2H).MS(EI)：计算值(MH+)281.1，实测值(MH+)281.2。
(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基)-氨基甲酸苄酯。1H NMR(DMSO-d6)δ11.34(br s，1H)，10.02(br s，1H)，9.18(br s，1H)，8.13(s， 1H)，7.90-7.70(m，2H)，7.49-7.25(m，6H)，5.14(s，2H).MS(EI)：计算值 (MH+)343.1，实测值(MH+)343.2。
6-(3-苯乙基-脲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ8.74(br s，1H)，8.16(s，1H)，7.90-7.70(m，2H)，7.40- 7.10(m，5H)，6.21(m，1H)，3.40-3.22(m，2H)，2.72(t，J＝7.0Hz，2H)。 MS(EI)：计算值(MH+)390.1，实测值(MH+)390.3。
6-(3-苄基-脲基甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94-7.78(m，3H)，7.40-7.16(m，6H)，6.68- 6.46(m，2H)，4.34(d，J＝6.0Hz，2H)，4.23(d，J＝6.0Hz，2H)。MS(EI)： 计算值356.1(MH+)，实测值356.1(MH+)。
(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基甲基)-氨基甲酸苄酯。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.98-7.80(m，4H)，7.40-7.26(m，6H)，5.05(s， 2H)，4.32(d，J＝6.0Hz，2H)。MS(EI)：计算值357.1(MH+)，实测值 357.1(MH+)。
6-[3-(4-异丙基-苯基)-脲基甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.42(br s，1H)，7.66(s，1H)，7.68- 7.50(m，2H)，7.16(d，J＝8.0Hz，2H)，7.20-7.10(m，1H)，6.93(d，J＝8.0 Hz，2H)，6.59(br s，1H)，4.23(br s，2H)，2.64(m，1H)，1.01(d，J＝4.8Hz， 6H).MS(ES+)：计算值384.14(MH+)，实测值384.19(MH+)。
6-[3-(4-叔丁基-苯基)-脲基甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.38(br s，1H)，7.76-7.64(m，3H)，7- 26-7.02(m，5H)，6.53(t，J＝4.8Hz，H)，4.26(d，J＝4.8Hz，H)，1.08(s， 9H).MS(ES+)：计算值398.15(MH+)，实测值398.22(MH+)。
6-[3-(3，5-双-三氟甲基-苯基)-脲基甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)9.32(br s，1H)，7.96(s，2H)，7.75- 7.68(m，3H)，7.41(s，1H)，7.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.02(br t，1H)，4.30(d，J ＝6.0Hz，2H).MS(ES+)：计算值478.07(MH+)，实测值478.15(MH+)。
6-[3-(3-苯氧基-苯基)-脲基甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)8.70(br s，1H)，7.69(d，J＝5.4Hz，2H)， 7.30-7.80(m，9H)，6.67(br s，1H)，6.38(d，J＝8.2Hz，1H)，4.22(br s，2H). MS(ES+)：计算值434.12(MH+)，实测值434.21(MH+)。
由5-氨基苯并噻吩制备的酰基化化合物
酰胺
5-苯甲酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。往5-苯甲酰基 氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(102.9mg、0.32mmol)中加入 NH2OH·HCl(76.2mg、0.97mmol)和5mL无水MeOH。加入NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.50mL，2.18mmol)。让得到的混合物在 室温下搅拌2天。将反应混合物浓缩，随后将残余物溶解于最少量 的水中。用5mL己烷/EtOAc(4∶1)萃取后，用2N HCl水溶液将水层 酸化至pH≈7。过滤、收集、干燥沉淀，得到浅色固体状的5-苯甲 酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ10.41(s，1H)，8.44(s，1H)，8.10-7.82(m，4H)，7.76(dd，J＝8.7，2.1 Hz，1H)，7.68-7.35(m，4H)。MS(EI)：计算值313.1(MH+)，实测值 313.2(MH+)。
5-苯基乙酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.36(s，1H)，8.28(s，1H)，7.91(d，J＝8.4 Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.52(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45-7.00(m，5H)，3.67(s， 2H)。MS(EI)：计算值327.1(MH+)，实测值327.3(MH+)。
5-(3-苯基-丙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.08(s，1H)，8.28(s，1H)，7.90(d，J＝8.8 Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.48(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，7.39-6.90(m，5H)， 2.93(t，J＝7.2Hz，2H)，2.65(t，J＝7.2Hz，2H)。MS(EI)：计算值 341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
5-(3-苯基-丙烯酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.45(s，1H)，8.42(s，1H)，8.10-7.20(m，9H)， 6.88(d，J＝15.6Hz，1H)。MS(EI)：计算值339.1(MH+)，实测值 339.3(MH+)。
5-[(萘-1-羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.74(s，1H)，8.54(s，1H)，8.28-7.86(m，5H)， 7.84-7.48(m，5H).MS(EI)：计算值363.1(MH+)，实测值363.3(MH+)。
5-[(萘-2-羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.59(s，1H)，8.61(s，1H)，8.49(d，J＝1.4 Hz，1H)，8.18-7.74(m，7H)，7.72-7.50(m，2H).MS(EI)：计算值 363.1(MH+)，实测值363.3(MH+)。
喹啉-2-[N-(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.50(brs，1H)，10.92(s，1H)，9.30(brs，1H)， 8.84-8.50(m，2H)，8.40-8.20(m，2H)，8.20-7.86(m，5H)，7.76(dd，J＝7.2， 7.2Hz，1H).MS(EI)：计算值364.1(MH+)，实测值364.3(MH+)。
N-(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-基)-烟酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.47(brs，1H)，10.60(s，1H)，9.30(brs，1H)， 9.13(d，J＝1.4Hz，1H)，8.77(dd，J＝4.6，1.4Hz，1H)，8.44(d，J＝1.4Hz， 1H)，8.32(ddd，J＝7.8，1.8，1，8Hz，1H)，8.00(d，J＝8.8Hz，1H)，7.91(s， 1H)，7.74(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)，7.58(dd，J＝7.8，4.6Hz，1H).MS(EI)： 计算值314.0(MH+)，实测值314.2(MH+)。
5-[(联苯基-4-羰基)-氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.14-7.94(m，3H)，7.86-7.60(m，6H)，7.58- 7.32(m，4H).MS(EI)：计算值389.1(MH+)，实测值389.3(MH+)。
5-二苯基乙酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.60(s，1H)，8.36(s，1H)，8.20-6.40(m， 13H)，5.20(s，1H).MS(EI)：计算值403.1(MH+)，实测值403.4(MH+)。
5-异丁酰氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO- d6，200MHz)δ11.41(brs，1H)，9.98(s，1H)，9.27(brs，1H)，8.32(d，J＝1.8 Hz，1H)，8.11(d，J＝8.8Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.52(dd，J＝8.8，2.0Hz， 1H)，2.61(？，J＝6.8Hz，1H)，1.10(d，J＝6.8Hz，6H).MS(EI)：计算值 279.1(MH+)，实测值279.3(MH+)。
5-[2-(4-氟-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.43(brs，1H)，10.34(s，1H)，9.28(brs，1H)， 8.29(d，J＝2.0Hz，1H)，7.92(d，J＝8.8Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.51(dd，J＝ 8.8，1.6Hz，1H)，7.44-7.28(m，2H)，7.24-7.04(m，2H)，3.67(s，2H). MS(EI)：计算值345.1(MH+)，实测值345.2(MH+)。
5-[2-(3-甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.36(brs，1H)，8.24(s，1H)，7.86(d，J ＝8.4Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.49(d，J＝9.8Hz，1H)，7.23(dd，J＝8.1，8.1 Hz，1H)，7.00-6.60(m，3H)，3.73(s，3H)，3.63(s，2H).MS(EI)：计算值 357.1(MH+)，实测值357.3(MH+)。
5-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.27(brs，1H)，8.26(s，1H)， 7.89(d，J＝8.8Hz，1H)，7.78(s，1H)，7.50(d，J＝8.6Hz，1H)，7.10-6.70(m， 3H)，3.74(s，3H)，3.71(s，3H)，3.57(s，2H).MS(EI)：计算值387.1(MH+)， 实测值387.3(MH+)。
5-[2-(2，5-二甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.22(brs，1H)，8.29(d，J＝1.6Hz， 1H)，7.90(d，J＝8.8Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.51(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H)， 7.05-6.60(m，3H)，3.70(s，3H)，3.69(s，3H)，3.63(s，2H).MS(EI)：计算值 387.1(MH+)，实测值387.3(MH+)。
5-(2-苯基-丁酰氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.26(brs，1H)，8.28(s，1H)，7.87(d，J＝8.8 Hz，1H)，7.77(s，1H)，7.60-7.10(m，6H)，3.58(t，J＝7.5Hz，1H)，2.18- 1.92(m，1H)，1.82-1.58(m，1H)，0.86(t，J＝7.1Hz，3H).MS(EI)：计算值 355.1(MH+)，实测值355.3(MH+)。
5-[2-(4-氯-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 MS(EI)：计算值361.0(MH+)，实测值361.2(MH+)。
5-[2-(4-甲氧基-苯基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。MS(EI)：计算值357.1(MH+)，实测值357.2(MH+)。
5-{[1-(4-氯-苯基)-环戊烷羰基]-氨基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。MS(EI)：计算值415.1(MH+)，实测值415.2(MH+)。
磺酰胺
5-(萘-2-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。采用与制 备5-苯甲酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺相同的方法，将5- (萘-2-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(163.6mg、0.40mmol)转 化为浅色固体形式的5-(萘-2-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.41(s，1H)，8.20-7.86(m，3H)， 7.86-7.40(m，6H)，7.15(d，J＝8.4Hz，1H)。MS(EI)：计算值399.04(MH+)， 实测值399.31(MH+)。
5-(甲苯-4-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.30(br s，1H)，9.25(br s，1H)，7.90-7.70(m，2H)， 7.68-7.50(m，3H)，7.27(d，J＝8.4Hz，2H)，7.12(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)， 2.27(s，3H)。MS(EI)：计算值(MH+)363.0，实测值(MH+)363.2。
5-苯磺酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.85(d，J＝8.8Hz，1H)，7.80-7.68(m，3H)， 7.62-7.42(m，4H)，7.16(dd，J＝8.6，2.0Hz，1H).MS(EI)：计算值 349.0(MH+)，实测值349.3(MH+)。
5-苯基甲磺酰基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.95(d，J＝8.8Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.68(s， 1H)，7.44-7.10(m，6H)，4.48(s，2H).MS(EI)：计算值363.0(MH+)，实测 值363.3(MH+)。
5-(萘-1-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.75(d，J＝8.4Hz，1H)，8.30-7.94(m，3H)， 7.88-7.38(m，6H)，7.08(dd，J＝8.6，2.2Hz，1H).MS(EI)：计算值 399.0(MH+)，实测值399.2(MH+)。
5-(联苯基-4-磺酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.92-7.73(m，6H)，7.72-7.58(m，3H)，7.53- 7.35(m，3H)，7.21(dd，J＝8.8，1.8Hz，1H).MS(EI)：计算值425.1(MH+)， 实测值425.3(MH+)。
脲/氨基甲酸酯
(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-基)-氨基甲酸苄酯。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.94(s，1H)，8.08(s，1H)，7.89(d，J＝8.8Hz， 1H)，7.82(s，1H)，7.60-7.10(m，6H)，5.17(s，2H).MS(EI)：计算值 343.1(MH+)，实测值343.3(MH+)。
(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-基)-氨基甲酸乙酯。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.43(brs，1H)，9.78(s，1H)，9.28(brs，1H)， 8.07(d，J＝1.8Hz，1H)，7.88(d，J＝9.2Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.45(dd，J＝ 8.8，2.2Hz，1H)，4.14(q，J＝7.0Hz，2H)，1.25(t，J＝7.0Hz，3H).MS(EI)： 计算值281.0(MH+)，实测值281.2(MH+)。
5-(3-苄基-脲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.40(brs，1H)，9.25(brs，1H)，8.74(s，1H)， 8.10(s，1H)，8.00-7.60(m，2H)，7.55-7.10(m，5H)，6.70(brs，1H)，4.31(d，J ＝4.4Hz，2H).MS(EI)：计算值342.1(MH+)，实测值342.3(MH+)。
由5-和6-氨基苯并噻吩制备的烷基化化合物
5-二苄基氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。5-氨基苯并噻吩-2-甲酸 乙酯(74mg、0.344mmol)溶解于1mL无水DMF中，并在80℃、氮 气气氛下在碳酸钾(97mg、0.70mmol)存在下与苄基溴(100μL，0.84 mmol)反应16小时。用水和饱和碳酸氢钠溶液稀释该反应混合物， 随后用乙酸乙酯萃取。有机相经硫酸钠干燥。减压除去溶剂并将粗 产物在高真空下干燥过夜。无需进一步纯化即可将粗产物用于下一 步骤。MS(EI)：计算值402(MH+)，实测值402(MH+)。
5-二苄基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。将粗制的乙酯溶 于无水甲醇(1mL)和DMF(2mL)的混合物中。往该溶液中加入盐酸羟 胺.(175mg、2.52mmol)，随后加入4.37M NaOMe溶液(1mL，4.37 mmol)。在氮气气氛下将该反应物搅拌16小时。往反应物中加入水 (5mL)，加入1M HCl将pH调整至6。收集沉淀并通过柱层析(硅胶， 己烷∶EtOAc 80∶20-20∶80)纯化，并分离出油状产物。1H-NMR(d6- DMSO)：δ＝11.27(s，1H)，9.17(s，1H)，7.68(d，J＝9.2Hz，1H)，7.60(s，1H)， 7.4-7.2(m，10H)，7.1-6.9(m，2H)，4.75(s，4H).MS(EI)：计算值 389(MH+)，实测值389(MH+)。
6-二苄基氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。将6-氨基苯并噻吩-2-甲 酸甲酯(29mg、0.140mmol)溶解于1mL无水DMF，并在80℃、氮 气气氛下在碳酸钾(41mg，0.30mmol)存在下与苄基溴(40μL，0.38 mmol)反应16小时。该反应混合物无需进一步分离即可用于下一步 骤。MS(EI)：计算值388(MH+)，实测值388(MH+)。
6-二苄基氨基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。0.7mL 50％的羟 胺水溶液处理粗制的甲酯的DMF溶液。加入一些DMA(0.5mL)以防 止沉淀。在室温下将该反应物搅拌40小时，随后再加入羟胺(0.7mL)。 总反应时间为5天。高真空除去溶剂，油状残余物与甲醇一起研磨。 过滤收集固体形式的不溶性产物。1H-NMR(d6-DMSO)：.δ＝10.31(s， 1H)，9.08(s，1H)，8.64(s，1H)，7.66(s，1H)，7.60(d，J＝8.8Hz，1H)，7.4- 7.2(m，10H)，6.88(dd，J1＝8.8Hz，J2＝1.4Hz，1H)，4.78(s，4H).MS(EI)： 计算值389(MH+)，实测值389(MH+)。
5-(双-苯基氨基甲酰基甲基-氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.74(s，1H)，10.34(s，1H)，10.21(br s，1H)， 7.66-7.26(m，11H)，7.07(t，J＝6.6Hz，2H)，6.49(d，J＝15.8Hz，1H)，4.33(s， 2H)，4.20(s，1H).MS(EI)：计算值(MH+)475.1，实测值(MH+)475.2。
6-(双-苯基氨基甲酰基甲基-氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.88(s，2H)，9.10(br s，1H)，7.76-7.63(m，6H)， 7.34(t，J＝7.0Hz，4H)，7.07(t，J＝7.2Hz，3H)，6.74(d，J＝9.08Hz，1H)， 4.44(s，4H).MS(EI)：计算值(MH+)475.1，实测值(MH+)475.2。
氯化物取代物(chloride displacement)的制备方法和由6-氨基苯并 噻吩得到的化合物
6-(2-氯-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯。往6-氨基-苯并[b] 噻吩-2-甲酸甲酯(1.0g，4.83mmol)和Na2CO3(2.05g，19.3mmol)在 DMF(10mL)中的混合物中加入氯乙酰氯(460μL，5.79mmoL)。搅拌 18小时后，用EtOAc稀释该混合物，过滤并浓缩。残余物通过柱层 析(2∶8；EtOAc∶己烷)纯化，得到浅白色固体状产物。MS(EI)：计算值 (MH+)284.01，实测值(MH+)284.15。还残留～50.5％的不纯部分。
用于酰化6-氨基-苯并噻吩的通用实验(由酰氯制备)
6-[2-(4-苯基-哌嗪-1-基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。往6-(2-氯-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(75mg、0.26 mmol)的DMF(2mL)溶液中加入胺(85.8mg、0.52mmol)。将反应混 合物加热至50℃。24小时后，往该溶液中加入NH2OH(50％水溶液，1 mL)。搅拌该溶液直到原料全部反应。除去溶剂后，加入MeOH/H2O直到沉淀形成。滤出固体，得到所需酰胺。1H NMR(DMSO-d6) δ11.32(br s，1H)，9.97(s，1H)，9.28(br s，1H)，8.39(s，1H)，7.85-7.72(m， 2H)，7.55(d，J＝7.0Hz，1H)，7.24-7.10(m，2H)，6.94-6.84(m，2H)，6.72(t， J＝7.0Hz，1H)，3.24-3.05(m，5H)，2.70-2.58(m，4H)。MS(EI)：计算值 (MH+)411.14，实测值(MH+)411.33。
6-(2-3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟 基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.37(br s，1H)，10.00(s，1H)，9.20(br s，1H)，8.41(s，1H)，7.85-7.75(m，2H)，7.56(d，J＝8.6Hz，1H)，7.15- 6.99(m，4H)，3.71(s，2H)，3.35-3.15(m，2H)，2.92-2.72(m，4H)。MS(EI)： 计算值(MH+)382.1，实测值(MH+)382.3。
6-[2-(4-苄基-哌啶-1-基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.32(br s，1H)，9.876(s，1H)，9.21(br s，1H)， 8.37(s，1H)，7.87-7.74(m，2H)，7.52(dd，1H，J＝8.2，1.8Hz)，7.30-7.05(m， 5H)，3.07(s，2H)，2.88-2.74(m，2H)，2.54-2.44(m，2H)，2.14-1.94(m，2H)， 1.60-1.20(m，5H).MS(EI)：计算值424.1(MH+)，实测值424.4(MH+)。
4-[(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基氨基甲酰基)-甲基]-哌嗪- 1-甲酸苄酯。1H NMR(CDCl3)δ11.28(br s，1H)，9.96(s，1H)，9.20(br s， 1H)，8.37(s，1H)，7.87-7.72(m，2H)，7.52(dd，1H，J＝8.2，1.8Hz)，7.40- 7.14(m，5H)，5.04(s，2H)，3.43(m，4H)，3.28(m，4H)，3.16(s，2H).MS(EI)： 计算值469.1(MH+)，实测值469.3(MH+)。
6-(2-二苄基氨基-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.83(s，1H)，9.21(br s，1H)，8.35(s，1H)，7.83-7.71(m，2H)， 7.45-7.15(m，11H)，3.74(s，4H)，3.15(s，2H).MS(EI)：计算值446.1(MH+)， 实测值446.3(MH+)。
6-{2-[4-(3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.38(br s，1H)，9.97(s，1H)，9.21(br s，1H)，8.39(s，1H)，7.87-7.75(M，2H)，7.56(dd，1H，J＝8.0，1.8Hz)， 7.07(dd，1H，J＝8.0，7.9Hz)，6.49(d，1H，J＝8.0Hz)，6.42(s，1H)，6.32(d， 1H，J＝8.0Hz)，3.67(s，3H)，3.20(s，2H)，3.15(m，4H)，2.63(m，4H). MS(EI)：计算值441.1(MH+)，实测值441.3(MH+)。
6-[2-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟 基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.38(br s，1H)，10.00(s，1H)，9.20(br s， 1H)，8.39(s，1H)，8.32(d，2H，J＝4.8Hz)，7.85-7.75(m，2H)，7.56(dd，1H， J＝8.0，1.8Hz)，6.58(t，1H，J＝4.8Hz)，3.77(m，4H)，3.19(s，2H)，2.54(m， 4H).MS(EI)：计算值413.1(MH+)，实测值413.3(MH+)。
6-{2-[4-(2-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙酰基氨基}-苯并[b]噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.38(br s，1H)，9.98(s，1H)，9.21(br s，1H)，8.40(s，1H)，7.88-7.74(m，2H)，7.56(d，1H，J＝8.2Hz)，6.94- 6.79(m，4H)，3.73(s，3H)，3.19(s，2H)，3.00(m，4H)，2.65(m，4H).MS(EI)： 计算值441.1(MH+)，实测值441.2(MH+)。
6-[2-(4-吡啶-2-基-哌嗪-1-基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟 基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.39(br s，1H)，10.00(s，1H)，9.22(br s， 1H)，8.40(s，1H)，8.07(br d，1H，J＝2.0Hz)，7.88-7.74(m，2H)，7.60- 7.40(m，2H)，6.79(d，1H，J＝8.3Hz)，6.61(dd，1H，J＝7.0，5.2Hz)， 3.53(m，4H)，3.20(s，2H)，2.59(m，4H).MS(EI)：计算值412.1(MH+)，实 测值412.3(MH+)。
6-[2-(4-乙酰基-哌嗪-1-基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.96(s，1H)，8.38(s，1H)，7.87-7.72(m，2H)， 7.54(d，1H，J＝8.0Hz)，3.45(m，4H)，3.17(s，2H)，2.46(m，4H)，1.95(s， 3H).MS(EI)：计算值377.1(MH+)，实测值377.3(MH+)。
6-(2-哌啶-1-基-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.86(s，1H)，8.38(s，1H)，7.87-7.72(m，2H)，7.55(d，1H，J ＝8.0Hz)，3.07(s，2H)，2.45(m，4H)，1.55(m，4H)，1.39(m，2H).MS(EI)： 计算值334.1(MH+)，实测值334.3(MH+)。
6-(2-吗啉-4-基-乙酰基氨基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.94(s，1H)，9.21(br s，1H)，8.38(s，1H)，7.87-7.72(m，2H)， 7.54(dd，1H，J＝8.0，1.8Hz)，3.61(m，4H)，3.13(s，2H)，2.48(m，4H). MS(EI)：计算值336.1(MH+)，实测值336.2(MH+)。
6-[2-(苄基-苯乙基-氨基)-乙酰基氨基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.32(br s，1H)，9.58(s，1H)，9.20(br s，1H)， 8.18(s，1H)，7.83-7.71(m，2H)，7.45-7.05(m，11H)，3.78(s，2H)，3.15(s， 2H)，2.85-2.60(m，4H).MS(EI)：计算值460.1(MH+)，实测值 460.3(MH+)。
{叔丁氧基羰基甲基-[(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基氨基 甲酰基)-甲基]-氨基}-乙酸叔丁酯。1H NMR(CDCl3)δ10.38(s，1H)， 9.19(br s，1H)，8.41(s，1H)，7.83-7.72(m，2H)，7.45(d，2H，J＝8.0Hz)， 3.49-3.45(m，4H)，3.15-3.11(m，2H)，1.38(s，18H).MS(EI)：计算值 494.1(MH+)，实测值494.3(MH+)。
6-{2-[4-(2-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-乙酰基氨基}-苯并[b]噻吩-2-(N- 羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.31(br s，1H)，9.98(s，1H)，9.20(br s， 1H)，8.40(s，1H)，7.88-7.76(m，2H)，7.56(dd，1H，J＝8.2，1.8Hz)，7.36(d， 1H，J＝7.2Hz)，7.27(dd，1H，J＝7.2，7.1Hz)，7.14(d，1H，J＝7.2Hz)， 7.00(dd，1H，J＝7.2，7.1Hz)，3.22(s，2H)，3.02(m，4H)，2.69(m，4H). MS(EI)：计算值445.1(MH+)，实测值445.2(MH+)。
6-{2-[4-(3-氯-苯基)-哌嗪-1-基]-乙酰基氨基}-苯并[b]噻吩-2-(N- 羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.98(s，1H)，9.20(br s，1H)，8.39(s，1H)， 7.88-7.76(m，2H)，7.56(d，1H，J＝8.2Hz)，7.17(dd，1H，J＝7.2，7.1Hz)， 6.95-6.82(m，2H)，6.74(d，1H，J＝7.2Hz)(s，1H)，3.26(m，4H)，3.20(s， 2H)，2.63(m，4H).MS(EI)：计算值445.1(MH+)，实测值445.2(MH+)。
4-[(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基氨基甲酰基)-甲基]-[1，4] 二氮杂环庚烷-1-甲酸苄酯。1H NMR(CDCl3)δ10.25(br s，1H)，9.88(s， 1H)，8.38(s，1H)，7.87-7.72(m，2H)，7.52(d，1H，J＝8.0Hz)，7.32(m，5H)， 5.04(s，2H)，3.55-3.33(m，4H)，3.29(s，2H)，2.76(m，2H)，2.69(m，2H)， 1.77(m，2H).MS(EI)：计算值483.1(MH+)，实测值483.3(MH+)。
4-[(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基氨基甲酰基)-甲基]-哌嗪- 1-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3)δ10.37(br s，1H)，9.94(s，1H)，8.37(s，1H)， 7.87-7.72(m，2H)，7.54(dd，1H，J＝8.0，1.8Hz)，4.02(q，2H，J＝7.2Hz)， 3.95(m，4H)，3.16(s，2H)，1.14(t，3H，J＝7.2Hz).MS(EI)：计算值 407.1(MH+)，实测值407.3(MH+)。
6-{2-[4-(4-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙酰基氨基}-苯并[b]噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计算值441.1(MH+)，实测值441.2(MH+)。
由6-羧基苯并噻吩制备的化合物
苯并[b]噻吩-2，6-二甲酸二甲酯。往4-甲酰基-3-硝基苯甲酸甲酯 (6.68g，31.9mmol)和K2CO3(5.55g，38.3mmol)在DMF(70mL)中的混 合物中缓慢加入巯基乙酸甲酯(2.91mL，31.9mmol)。将该混合物在室 温下搅拌1小时，随后在50℃下搅拌24小时。将得到的混合物倾入 H2O/冰中并搅拌直到沉淀形成。滤出绿色固体。1H NMR(DMSO-d6) δ8.72(s，1H)，8.25(s，1H)，8.12(d，J＝8.0Hz)，7.95(d，J＝8.0Hz)，3.87(s， 6H).MS(EI)：计算值(MH+)251.03，实测值(MH+)251.18。
苯并[b]噻吩-2-甲酸-6-甲酸甲酯。往苯并[b]噻吩-2，6-二甲酸二甲 酯(139mg、0.56mmol)的THF/MeOH(2/2mL)溶液中加入1N NaOH(555μL)。5小时后，用CH2Cl2稀释该溶液并用5％的柠檬酸酸 化。干燥合并的有机相，过滤，浓缩，得到所需酸，该酸无需进一 步纯化即可使用。MS(EI)：计算值(MH+)237.01，实测值(MH+) 237.13。
2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸甲酯。往苯并[b]噻吩-2，6- 二甲酸二甲酯(115mg、0.46mmol)的DMA/MeOH(3/1mL)溶液中加 入NH2OH(50％水溶液，1.5mL)。搅拌所得溶液直到LC/MS分析结果 表明已不含原料。除去溶剂后，加入MeOH/H2O直到形成沉淀。滤 出固体，得到所需产物。1H NMR(DMSO-d6)δ11.57(br s，1H)，9.36(br s， 1H)，8.67(s，1H)，8.05-7.87(m，3H)，3.87(s，3H).MS(EI)：计算值(MH+) 252.07，实测值(MH+)252.20。
2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸甲酯。往苯并[b] 噻吩-2-甲酸-6-甲酸甲酯(3.4g，14.4mmol)、HOBT(2.92g，21.6 mmol)、三苯甲基保护的羟胺(4.76g，17.3mmol)的DMF(100mL)溶液 中加入EDCI(4.14g，21.6mmol)。18小时后，除去溶剂。用EtOAc(200 mL)稀释残余物并用H2O(100mL)和饱和NaHCO3(100mL)洗涤。将 有机相干燥，过滤，并浓缩。往残留物中加入甲醇后形成固体，滤 出浅黄色固体并再用MeOH洗涤，得到所需的保护的异羟肟酸，该 产物无需进一步纯化即可使用。1H NMR(DMSO-d6)δ11.37(br s，1H)， 8.56(br s，1H)，8.01-7.85(m，3H)，7.79(s，1H)，7.45-7.18(m，15H)，3.85(s， 3H).MS(EI)：计算值(MH+)494.1，实测值(MH+)，未见母峰。
2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸。往2-三苯甲基 氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸甲酯(4.12g，8.35mmol)的 THF/MeOH(50/10mL)溶液中加入2N NaOH(16mL)。1.5小时后，再 加入5mL 3N NaOH。又过了1小时后，再加入16mL 2N NaOH并 搅拌过夜。用EtOAc(100mL)和H2O(100mL)稀释该溶液，随后用 EtOAc洗涤。用5％的柠檬酸酸化水相，随后用EtOAc萃取。将合并 的有机相干燥，过滤并浓缩，得到所需的酸，该酸无需进一步纯化 即可使用。MS(EI)：计算值(M-)478.1，实测值(M-)478.6。
使用6-羧基苯并噻吩制备酰胺的通用实验
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-{N-[2-(1H-吲哚-2-基)-乙基]}甲 酰胺。
往2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸(130mg、0.271 mmol)、HOBT(55.0g，0.407mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入 EDCI(78.0mg、0.407mmol)。30分钟后，将得到的溶液加至胺(56.5 mg、0.352mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中。18小时后，加入 TFA/CH2Cl2(1/1；0.5mL)溶液，随后滴加Et3SiH，直到颜色褪去。除 去溶剂。用EtOAc(2mL)和饱和NaHCO3(1.5mL)洗涤残余物。滤出 得到的固体并用EtOAc洗涤，得到所需的异羟肟酸。1H NMR(CDCl3) δ10.75(br s，1H)，8.57(m，1H)，8.24(s，1H)，7.72(s，2H)，7.77(d，1H，J＝ 7.4Hz)，7.41(s，1H)，7.32-7.12(m，4H)，7.12-6.88(m，4H)，3.51(m，2H)， 2.93(m，2H).MS(EI)：计算值380.1(MH+)，实测值380.3(MH+)。
注意：在某些酰胺的制备反应中，在去三苯甲基保护之前将固 体滤出。有时也使用MeOH研磨最终的异羟肟酸。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-(N-苄基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.02(br t，1H，J＝6.0Hz)，8.32(s，1H)，7.80-7.70(m，2H)， 7.44(m，1H)，7.36-7.15(m，5H)，4.46(d，2H，J＝6.0Hz).MS(EI)：计算值 327.1(MH+)，实测值327.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(吡啶-2-基甲基)]甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ9.15(br t，1H，J＝5.2Hz)，8.52-8.40(m，2H)，7.80-7.80(m， 2H)，7.78-7.64(m，2H)，7.36-7.18(m，2H)，4.55(d，2H，J＝5.2Hz). MS(EI)：计算值326..1(MH+)，实测值326.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(1-苄基-哌啶-4-基)]甲酰 胺。1H NMR(CDCl3)δ8.42(br s，1H)，8.33(d，1H，J＝8.1Hz)，7.96- 7.76(m，3H)，7.35-7.10(m，5H)，3.73(m，1H)，3.43(s，2H)，2.78(m，2H)， 1.99(m，2H)，1.75(m，2H)，1.57(m，2H).MS(EI)：计算值410.1(MH+)，实 测值410.3(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(2，2-二苯基-乙基)]甲酰胺。 1H NMR(CDCl3)δ8.61(m，1H)，8.30(s，1H)，7.92-7.82(m，2H)，7.70(d， 1H，J＝8.0Hz)，7.36-7.06(m，10H)，4.41(t，1H，J＝7.0Hz)，3.90(m，2H). MS(EI)：计算值417.1(MH+)，实测值417.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[H-(1，2-二苯基-乙基)]甲酰胺。 1H NMR(CDCl3)δ11.51(br s，1H)，9.28(br s，1H)，8.96(d，1H，J＝8.2Hz)， 8.40(s，1H)，7.92-7.82(m，2H)，7.77(d，1H，J＝8.0Hz)，7.49-7.06(m， 10H)，5.28(m，1H)，3.20-3.00(m，2H).MS(EI)：计算值417.1(MH+)，实 测值417.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-(N-二苯甲基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.51(br s，1H)，8.35(d，1H，J＝8.2Hz)，8.59(s，1H)， 8.02-7.85(m，3H)，7.49-7.06(m，10H)，6.40(d，1H，8.2Hz).MS(EI)：计 算值403.1(MH+)，实测值403.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)]甲 酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.57(br s，1H)，9.54(br t，1H，J＝4.8Hz)， 8.59(s，1H)，8.12-7.88(m，3H)，7.71(m，2H)，7.42(m，2H)，4.90(d，2H，J ＝4.8Hz).MS(EI)：计算值367.1(MH+)，实测值367.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(2-吡啶-2-基-乙基)]甲酰 胺。1H NMR(CDCl3)δ11.51(br s，1H)，8.80-8.59(m，2H)，8.39(s，1H)， 8.15(m，1H)，7.92-7.82(m，2H)，7.77(d，1H，J＝8.0Hz)，7.70-7.55(m， 2H)，3.69(m，2H)，3.20-3.05(m，2H).MS(EI)：计算值342.1(MH+)，实测 值342.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(1，2，3，4-四氢-萘-1-基)]甲酰 胺。1H NMR(CDCl3)δ11.51(br s，1H)，9.30(br s，1H)，8.84(d，1H，J＝8.0 Hz)，8.53(s，1H)，7.98-7.84(m，3H)，7.30-7.02(m，4H)，5.22(m，1H)， 2.72(m，2H)，1.94(m，2H)，1.80(m，2H).MS(EI)：计算值367.1(MH+)，实 测值367.3(MH+)。
6-(哌啶-1-羰基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3) δ9.29(br s，1H)，8.01(s，1H)，7.98-7.82(m，2H)，7.35(dd，1H，J＝8.0，1.2 Hz)，3.69-3.12(m，4H)，1.52(m，6H).MS(EI)：计算值305.1(MH+)，实测 值305.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-(N-苯基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ10.32(br s，1H)，8.57(s，1H)，8.04-7.82(m，3H)，7.77(d， 2H，J＝7.2Hz)，7.33(dd，2H，J＝7.2，7.2Hz)，7.07(t，1H，7.2Hz).MS(EI)： 计算值313.1(MH+)，实测值313.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(茚满-1-基)]甲酰胺。MS(EI)： 计算值353.1(MH+)，实测值353.2(MH+)。
6-(4-苯基-哌嗪-1-羰基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.48(br s，1H)，9.28(br s，1H)，8.11(s，1H)，8.01-7.86(m， 2H)，7.42(d，1H，J＝8.1Hz)，7.30-7.00(m，2H)，6.92(m，2H)，6.77(m，1H). MS(EI)：计算值382.1(MH+)，实测值382.3(MH+)。
6-[4-(4-氯-苯基)-哌嗪-1-羰基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 MS(EI)：计算值416.1(MH+)，实测值416.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(3-苯基-丙基)]甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.54(br s，1H)，9.29(br s，1H)，8.56(br t，1H，J＝5.6Hz)， 8.43(s，1H)，7.98-7.86(m，2H)，7.83(d，1H，J＝8.4Hz)，7.30-7.00(m， 5H)，3.45-3.30(m，2H)，2.64-2.54(m，2H)，1.88-1.72(m，2H).MS(EI)：计 算值355.1(MH+)，实测值355.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-(N-苯乙基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ8.57(br s，1H)，8.28(br s，1H)，7.86-7.68(m，2H)，7.57(s， 1H)，7.34-7.10(m，5H)，3.56-3.35(m，2H)，2.88-2.74(m，2H).MS(EI)：计 算值341.1(MH+)，实测值341.3(MH+)。
6-(4-苄基-哌啶-1-羰基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.45(br s，1H)，9.26(br s，1H)，8.01(s，1H)，7.98-7.82(m， 2H)，7.68(d，1H，J＝8.0Hz)，7.30-7.00(m，5H)，3.50-3.12(m，4H)， 2.80(m，2H)1.88(m，1H)1.55(m，4H).MS(EI)：计算值395.1(MH+)，实 测值395.1(MH+)。
6-(4-苄基-哌嗪-1-羰基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(CDCl3)δ11.52(br s，1H)，9.30(br s，1H)，8.10(s，1H)，7.96-7.76(m， 2H)，7.60-7.25(m，5H)，3.43(s，2H)，3.30(m，4H)，3.00(m，4H)，1.75(m， 2H)，1.57(m，2H).MS(EI)：计算值396.1(MH+)，实测值396.1(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(喹啉-8-基)]甲酰胺。MS(EI)： 计算值364.1(MH+)，实测值364.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-6-[N-(4-苯基-噻唑-2-基)]甲酰 胺。MS(EI)：计算值396.1(MH+)，实测值396.2(MH+)。
由6-羧基苯并噻吩制备的化合物
3-甲酰基-4-硝基-苯甲酸甲酯。将3-甲基-4-硝基-苯甲酸甲酯 (24.99g，128.1mmol)和N，N-二甲基甲酰胺缩二甲醇(40.0mL，300 mmol)的溶液在140℃下加热22.5小时。冷却至室温后，浓缩反应混 合物，将残余物从MeOH中结晶，得到紫色固体。将该固体溶解于 THF(500mL)和水(500mL)中，加入高碘酸钠(62.62g，292.8mmol)， 随后在2小时后再次加入高碘酸钠(15.6g，72.9mmol)。在室温下再 搅拌1小时，使该反应混合物通过硅藻土过滤并同时用EtOAc(2L) 洗涤。用饱和NaHCO3(600mL)洗涤滤液，有机层经Na2SO4干燥。 过滤后，浓缩滤液并将残余物通过硅胶垫，用CH2Cl2/己烷(75％-100％) 洗涤。浓缩滤液并干燥，得到黄色固体形式的3-甲酰基-4-硝基-苯甲 酸甲酯。MS(EI)：计算值210.0(MH+)，实测值210.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-甲酸叔丁酯-5-甲酸甲酯。在0℃下，往硫化钠(7.95 g，102mmol)在无水DMF(200mL)的悬浮液中加入乙酸(5.80mL，102 mmol)和另外的DMF(100mL)。在0℃将该混合物搅拌30分钟，加 入氯乙酸叔丁酯(14.6mL，102mmol)，随后加入另外的DMF(50mL)。 将得到的混合物在0℃下搅拌30分钟，随后在室温下搅拌30分钟。 往该混合物中加入K2CO3(16.4g，119mmol)和3-甲酰基-4-硝基-苯甲 酸甲酯(17.68g，84.55mmol)的DMF(30mL)溶液。在55℃下将得到 的混合物加热22小时，冷却至室温并倾入水(1.2L)中。过滤形成的 固体，用水(300mL)洗涤并在MeOH中重结晶，得到浅色固体形式 的苯并[b]噻吩-2-甲酸叔丁酯-5-甲酸甲酯。MS(EI)：计算值237.0(M-t丁基+H+)，实测值237.1(M-t丁基+H+)。
苯并[b]噻吩-2-甲酸-5-甲酸甲酯。在室温下将苯并[b]噻吩-2-甲 酸叔丁酯-5-甲酸甲酯(3.018g，10.32mmol)和TFA(20mL)的CH2Cl2(50 mL)溶液搅拌4天。浓缩反应混合物并在高真空下干燥，得到浅色固 体形式的苯并[b]噻吩-2-甲酸-5-甲酸甲酯。MS(EI)：计算值237.0(MH+)， 实测值237.1(MH+)。
2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-甲酸甲酯。在室温下 将苯并[b]噻吩-2-甲酸-5-甲酸甲酯(2.592g，10.97mmol)、O-三苯甲基- 羟胺(3.020g，10.97mmol)、EDC(3.150g，16.48mmol)、HOBt(1.482g， 10.97mmol)和DIEA(4.80mL，27.6mmol)的无水THF(100mL)溶液搅 拌一周并浓缩。往残余物中加入MeOH(10ml)和水(100ml)。用水(10mL) 洗涤得到的浆状物，并与水(90mL)一起研磨得到浅色固体形式的2- 三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-甲酸甲酯。MS(EI)：计算值 243.1(M-苯并噻吩部分+H+)，实测值243.2(M-苯并噻吩部分+H+)。
2-(四氢-吡喃-2-基氧基氨基甲酰基)-苯并[b]噻吩-5-甲酸甲酯。在 室温下将苯并[b]噻吩-2-甲酸-5-甲酸甲酯(191.3mg、0.81mmol)、O-(四 氢-吡喃-2-基)-羟胺(93mg、0.79mmol)、EDC(231mg、1.20mmol)、 HOBt(107mg、0.79mmol)和DIEA(0.30mL，2.2mmol)的无水THF(8 mL)溶液搅拌3天，随后浓缩。往该残余物中加入MeOH(1mL)、水(10 mL)以及Et2O(5mL)。搅拌2小时后，用水(2×3mL)和Et2O(5mL)洗 涤形成的固体，干燥，得到浅色固体形式的2-(四氢-吡喃-2-基氧基氨 基甲酰基)-苯并[b]噻吩-5-甲酸甲酯。MS(EI)：计算值252.0(M- THP+H+)，实测值252.1(M-THP+H+)。
2-(四氢-吡喃-2-基氧基氨基甲酰基)-苯并[b]噻吩-5-甲酸。在室温 下将2-(四氢-吡喃-2-基氧基氨基甲酰基)-苯并[b]噻吩-5-甲酸甲酯 (131.6mg、0.39mmol)的THF(2mL)溶液和1M NaOH水溶液(4mL) 搅拌18小时。除去THF后，用HOAc将水相酸化为pH≈3。滤出形 成的固体，收集并干燥，得到白色固体形式的2-(四氢-吡喃-2-基氧基 氨基甲酰基)-苯并[b]噻吩-5-甲酸。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ 12.04(brs，1H)，8.54(s，1H)，8.22-8.08(m，2H)，7.97(dd，J＝8.4，1.2Hz， 1H)，5.01(s，1H)，4.18-3.94(m，1H)，3.68-3.46(m，2H)，1.88-1.40(m， 6H)。MS(EI)：计算值322.1(MH+)，实测值322.2(MH+)。
2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-甲酸。在室温下将2- 三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-甲酸甲酯(4.439g，8.99mmol) 的THF(50mL)溶液和2M NaOH水溶液(50mL)搅拌6天。除去THF 后，用HOAc/H2O(1∶1)酸化水相至pH≈4。滤出形成的固体，收集并 干燥，得到白色固体形式的2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩- 5-甲酸。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.33(brs，1H)，8.47(s，1H)， 8.10-7.80(m，3H)，7.56-7.14(m，15H)。MS(EI)：计算值243.1(M-苯并噻 吩部分+H+)，实测值243.1(M-苯并噻吩部分+H+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(2-甲氧基-苄基)]甲酰胺。往 2-三苯甲基氧基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-5-甲酸(960mg、2.00mmol) 的CH2Cl2(15mL)溶液中加入EDC(575mg、3.00mmol)和 HOBt(320mg、2.37mmol)。在室温下将该混合物搅拌40分钟，随后 分成10等份。随后将一等份加入2-甲氧基-苄胺(35μL，0.27mmol)的 CH2Cl2(0.5mL)溶液中。在室温下搅拌过夜后，浓缩该反应混合物。 将残余物悬浮于MeOH(1mL)中并加入水(10mL)。过滤、收集并在 高真空下干燥形成的固体。将得到的固体悬浮于CH2Cl2(4mL)中并 加入TFA(0.20mL)，随后加入Et3SiH直到黄色褪尽。在室温下将该 混合物搅拌20分钟，在此期间形成固体。加入CH2Cl2/己烷(1∶1，4mL) 后，滤出固体，用CH2Cl2/己烷(1∶1，4×1mL)洗涤并干燥，得到浅色 固体形式的苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(2-甲氧基-苄基)]甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.96(t，J＝5.4Hz，1H)，8.48(s，1H)， 8.11(d，J＝8.4Hz，1H)，8.06-7.84(m，2H)，7.21(d，J＝7.2Hz，2H)，7.06- 6.80(m，2H)，4.48(d，J＝5.8Hz，2H)，3.83(s，3H)。MS(EI)：计算值 357.1(MH+)，实测值357.2(MH+)。
采用制备苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(2-甲氧基-苄基)]甲 酰胺的类似方法制备以下化合物。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(3-甲氧基-苄基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.13(t，J＝5.8Hz，1Hz，8.45(s，1H)，8.11(d， J＝8.4Hz，1H)，8.06-7.84(m，2H)，7.24(d，J＝7.6Hz，1H)，7.00-6.70(m， 3H)，4.48(d，J＝6.0Hz，2H)，3.72(s，3H)。MS(EI)：计算值357.1(MH+)， 实测值357.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(4-甲氧基-苄基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.06(t，J＝5.8Hz，1H)，8.43(s，1H)，8.09(d， J＝8.4Hz，1H)，8.04-7.84(m，2H)，7.26(d，J＝8.8Hz，2H)，6.88(d，J＝8.8 Hz，2H)，4.43(d，J＝5.8Hz，2H)，3.72(s，3H)。MS(EI)：计算值 357.1(MH+)，实测值357.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(2-氯-苄基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.16(t，J＝6.0Hz，1H)，8.48(s，1H)，8.13(d， J＝8.4Hz，1H)，8.06-7.84(m，2H)，7.54-7.18(m，4H)，4.58(d，J＝5.8Hz， 2H)。MS(EI)：计算值361.0(MH+)，实测值361.1(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(3-氯-苄基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.20(t，J＝6.0Hz，1Hz，8.46(s，1H)，8.12(d， J＝8.4Hz，1H)，8.20-7.84(m，2H)，7.46-7.24(m，4H)，4.51(d，J＝5.4Hz， 2H)。MS(EI)：计算值361.0(MH+)，实测值361.1(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(4-氯-苄基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ9.19(t，J＝5.0Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.11(d， J＝8.8Hz，1H)，8.04-7.84(m，2H)，7.37(s，4H)，4.49(d，J＝5.8Hz，2H)。 MS(EI)：计算值361.0(MH+)，实测值361.1(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(5-茚满-1-基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.24(s，1H)，8.52(s，1H)，8.15(d，J＝8.6 Hz，1H)，8.10-7.90(m，2H)，7.69(s，1H)，7.50(d，J＝8.0Hz，1H)，7.18(d，J ＝8.2Hz，1H)，2.98-2.70(m，3H)，2.10-1.90(m，2H)。MS(EI)：计算值 353.1(MH+)，实测值353.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-{N-[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基]}甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.80(s，1H)，8.73(t，J＝5.2Hz， 1H)，8.40(s，1H)，8.10(d，J＝8.4Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.91(dd，J＝8.4， 1.6Hz，1H)，7.59(d，J＝7.4Hz，1H)，7.33(d，J＝7.6Hz，1H)，7.19(d，J＝ 2.2Hz，1H)，7.13-6.88(m，2H)，3.55(t，J＝7.0Hz，部分层叠(partially overlap)H2O，2H)，2.97(t，J＝7.6Hz，2H)。MS(EI)：计算值380.1(MH+)， 实测值380.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(3，3-二苯基-丙基)]甲酰胺。 1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.59(t，J＝4.8Hz，1H)，8.36(s，1H)， 8.08(d，J＝8.4Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.87(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，7.50- 7.10(m，10H)，4.05(t，J＝7.8Hz，1H)，3.40-3.04(m，2H)，2.42-2.20(m， 2H)。MS(EI)：计算值431.1(MH+)，实测值431.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(4-苯基-丁基)]甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.57(t，J＝5.0Hz，1H)，8.38(s，1H)，8.08(d， J＝8.6Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.88(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，7.40-7.02(m， 5H)，3.48-3.16(m，2H)，2.60(t，J＝6.8Hz，2H)，1.80-1.38(m，4H)。MS(EI)： 计算值369.1(MH+)，实测值369.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-(N-苯基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.61(brs，1H)，11.37(brs，1H)，9.36(brs， 1H)，8.53(s，1H)，8.17(d，J＝8.4Hz，1H)，8.10-7.90(m，2H)，7.79(d，J＝ 7.4Hz，2H)，7.36(dd，J＝7.8，7.8Hz，2H)，7.10(dd，J＝7.8，7.8Hz，1H)。 MS(EI)：计算值313.1(MH+)，实测值313.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-(N-苯乙基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.90(t，J＝5.2Hz，1H)，8.56(s，1H)，8.28(d， J＝8.0Hz，1H)，8.18(s，1H)，8.07(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，7.60-7.20(m， 5H)，3.80-3.60(m，2H)，3.05(t，J＝7.0Hz，2H)。MS(EI)：计算值 341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-(N-苄基)甲酰胺。在室温下将 2-(四氢-吡喃-2-基氧基氨基甲酰基)-苯并[b]噻吩-5-甲酸(53mg、0.16 mmol)、苄胺(25μL，0.23mmol)、EDC(50mg、0.26mmol)、HOBt(25 mg、0.18mmol)和DIEA(60μL，0.34mmol)的THF(3mL)溶液搅拌5 天。浓缩反应混合物，随后将残余物溶解于MeOH(0.5mL)，加入水。 形成的浆状物用MeOH处理并用水再处理一次。干燥后，将得到的 固体溶解于CH2Cl2(3mL)并加入TFA(75μL)和水(30μL)。在室温下 将该混合物搅拌过夜，在此期间形成固体。加入己烷(6mL)后，将固 体过滤，用己烷(2×3mL)洗涤并干燥，得到浅色固体状的苯并[b]噻 吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-(N-苄基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz) δ9.16(t，J＝6.0Hz，1H)，8.46(s，1H)，8.11(d，J＝8.8Hz，1H)，8.07- 7.86(m，2H)，7.50-7.10(m，5H)，4.51(d，J＝5.8Hz，2H)。MS(EI)：计算 值327.1(MH+)，实测值327.1(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-[N-(3-苯基-丙基)]甲酰胺。采用 制备苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-(N-苄基)甲酰胺的类似方法制备 该标题化合物。MS(EI)：计算值355.1(MH+)，实测值355.2(MH+)。
苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺-5-(N-双-苯基氨基甲酰基甲基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ11.50(s，1H)，10.34(s，1H)，10.23(s，1H)， 9.28(s，1H)，8.10(d，J＝8.2Hz，1H)，7.96(d，J＝8.8Hz，1H)，7.64(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.56-7.44(m，3H)，7.38-7.26(m，4H)，7.07(t，J＝7.4Hz，2H)， 4.35(s，2H)，4.23(s，2H).MS(EI)：计算值(MH+)503.1，实测值(MH+) 503.2。
使用5-甲酰基苯并噻吩制备的化合物
5-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在0℃下往2-氯-5-硝基-苯甲 醛(31.01g，167.1mmol)的330mL无水DMF溶液中加入K2CO3(27.80 g，201.1mmol)，随后缓慢滴加巯基乙酸乙酯(18.5mL，168.7mmol)。 在0℃下搅拌20分钟后，让得到的混合物升至室温并在室温下搅拌 过夜。随后将得到的反应混合物倾入1.5L水中。滤出形成的固体并 用600mL水洗涤。干燥后，得到浅色固体形式的5-硝基-苯并[b]噻 吩-2-甲酸乙酯。MS(EI)：计算值252.0(MH+)，实测值252.1(MH+)。
5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在室温、1大气压的H2作用 下，将5-硝基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(10.52g，41.89mmol)和10％ Pd/C(1.1g)在450mL的EtOH中的悬浮液氢化4天。将反应混合物 过滤，随后将滤液浓缩并干燥，得到绿色固体形式的5-氨基-苯并[b] 噻吩-2-甲酸乙酯。采用相同的方法用10.61g 5-硝基-苯并[b]噻吩-2- 甲酸乙酯进行平行反应。总计得到18.37g5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸 乙酯。MS(EI)：计算值222.0(MH+)，实测值222.2(MH+)。
5-碘-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。往5-氨基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙 酯(18.37g，83.02mmol)中加入HCl水溶液(21mL浓盐酸在200mL H2O中的溶液，252mmol)，随后将得到的混合物冷却至0℃。加入 NaNO2溶液(6.02g在60mL H2O中的溶液，87.25mmol)，在0℃下将 该混合物搅拌10分钟。缓慢加入NaI溶液(13.07g在60mL H2O中 的溶液，87.20mmol)。在加入NaI的过程中反应混合物变得难以搅拌。 分批加入共计300mL的水。加完后，让反应物升至室温，并在室温 下搅拌2小时。随后用CH2Cl2(800mL)和水(100mL)稀释该混合物。 分离有机层，用200mL饱和NaHCO3洗涤并经Na2SO4干燥。过滤 后，浓缩滤液，残余物经硅胶垫过滤，用EtOAc/己烷(0％-10％)洗涤。 随后将滤液浓缩，残余物在MeOH中重结晶，得到浅橙色固体状的 5-碘-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。MS(EI)：计算值332.9(MH+)，实测值 333.1(MH+)。
5-甲酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在-40℃下将溴化异丙基镁 溶液(0.7M的THF溶液，85mL，59.5mmol)缓慢加至5-碘-苯并[b]噻 吩-2-甲酸乙酯(14.09g，42.42mmol)溶液中。在-40℃下将该混合物 搅拌2小时，随后缓慢加入N-甲基-N-吡啶-2-基-甲酰胺(7.65mL，63.9 mmol)。升至室温后，在室温下再搅拌2.5小时。往该混合物中缓慢 加入250mL 1N的HCl。搅拌10分钟后，用CH2Cl2(800mL)稀释反 应混合物。分离有机层，用200mL饱和NaHCO3洗涤并经Na2SO4干燥。过滤后，浓缩滤液，残余物在MeOH中重结晶，得到黄色固 体状的5-甲酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3，200MHz) δ10.12(s，1H)，8.37(s，1H)，8.18(s，1H)，8.08-7.90(m，2H)，4.44(q，J＝7.2 Hz，2H)，1.44(t，J＝7.4Hz，3H)。MS(EI)：计算值235.0(MH+)，实测值 235.1(MH+)。
5-[(3-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 往5-甲酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(85mg、0.36mmol)和3-甲氧基- 苄胺(60μL，0.46mmol)的无水二氯乙烷(5mL)溶液中加入三乙酰氧基 硼氢化钠(230mg、1.08mmol)和乙酸(20μL，0.35mmol)。反应完全后， 加入4mL饱和NaHCO3。分离有机相，用4mL水洗涤，随后浓缩。 高真空干燥后，将残余物溶解于无水MeOH(5mL)中并加入盐酸羟胺 (95mg、1.37mmol)，随后加入NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.60 mL，2.6mmol)。在室温下搅拌该混合物直到反应完全。浓缩反应混 合物并将残余物溶解于最少量的水中。用2N HCl将得到的溶液的调 节至pH≈8。滤出形成的固体，用水洗涤，收集并通过快速柱层析 纯化，得到浅黄色浆状物形式的5-[(3-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b] 噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.4 Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.85(s，1H)，7.44(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，7.21(t，J＝ 7.6Hz，1H)，7.00-6.72(m，3H)，3.78(s，2H)，3.73(s，3H)，3.66(s，2H)。 MS(EI)：计算值343.1(MH+)，实测值343.2(MH+)。
采用类似于制备5-[(3-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺的方法制备以下化合物。
5-(苄基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.98-7.78(m，3H)，7.43(d，J＝8.0Hz，1H)， 7.38-7.14(m，5H)，3.78(s，2H)，3.68(s，2H)。MS(EI)：计算值313.1(MH+)， 实测值313.2(MH+)。
5-苯基氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.83(s，2H)，7.42(d， J＝8.8Hz，1H)，7.14-6.88(m，2H)，6.70-6.40(m，3H)，6.29(t，J＝6.2Hz， 1H)，4.36(d，J＝6.2Hz，2H)。MS(EI)：计算值299.1(MH+)，实测值 299.2(MH+)。
5-[(3-苄基氧基-苯基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.2Hz，1H)，7.84(s，2H)， 7.50-7.20(m，16H)，6.91(t，J＝8.0Hz，1H)，6.40-6.10(m，4H)，4.95(s，2H) 4.34(d，J＝5.8Hz，2H)。MS(EI)：计算值405.1(MH+)，实测值 405.2(MH+)。
5-[(4-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.91(s，2H)， 7.48(dd，J＝8.0，1.4Hz，1H)，7.31(t，J＝8.8Hz，2H)，6.90(d，J＝8.8Hz， 2H)，3.91(s，2H)，3.76(s，2H)，3.73(s，3H)。MS(EI)：计算值343.1(MH+)， 实测值343.2(MH+)。
5-[(2-氯-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，2H)， 7.58(dd，J＝7.4，1.8Hz，1H)，7.51-7.20(m，4H)，3.85(s，2H)，3.77(s， 2H)。MS(EI)：计算值347.0(MH+)，实测值347.1(MH+)。
5-[(4-氯-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，2H)，7.84(s， 1H)，7.50-7.30(m，5H)，3.77(s，2H)，3.67(s，2H)。MS(EI)：计算值 347.0(MH+)，实测值347.2(MH+)。
5-[(二苯甲基-氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.80(s， 1H)，7.50-7.12(m，11H)，4.77(s，1H)，3.71(s，2H)。MS(EI)：计算值 389.1(MH+)，实测值389.2(MH+)。
5-(苯乙基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.83(s， 1H)，7.42(dd，J＝8.6，1.6Hz，1H)，7.32-7.10(m，5H)，3.88(s，2H)，2.76(s， 4H)。MS(EI)：计算值327.1(MH+)，实测值327.2(MH+)。
5-[(2，2-二苯基-乙基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.84(s，1H)， 7.74(s，1H)，7.40-7.10(m，11H)，4.15(t，J＝7.4Hz，1H)，3.82(s，2H)， 3.11(d，J＝7.6Hz，2H)。MS(EI)：计算值403.1(MH+)，实测值 403.3(MH+)。
5-{[2-(3，4-双-苄基氧基-苯基)-乙基氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.97(d，J＝8.0Hz， 1H)，7.89(s，2H)，7.52-7.22(m，12H)，7.00-6.88(m，2H)，6.70(dd，J＝8.4， 2.0Hz，1H)，5.07(s，4H)，3.95(s，2H)，2.90-2.60(m，4H)。MS(EI)：计算 值539.2(MH+)，实测值539.4(MH+)。
5-[(3-苯基-丙基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.06-7.84(m，3H)，7.51(dd，J＝8.4，1.4Hz， 1H)，7.32-7.06(m，5H)，4.02(s，2H)，2.80-2.54(m，4H)，1.94-1.70(m， 2H)。MS(EI)：计算值341.1(MH+)，实测值341.2(MH+)。
5-[(3，3-二苯基-丙基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.02-7.82(m，3H)，7.44(d，J＝8.4Hz， 1H)，7.38-7.06(m，10H)，4.07(t，J＝8.0Hz，1H)，3.94(s，2H)，2.62-2.52(m， 2H)，2.38-2.18(m，2H)。MS(EI)：计算值417.2(MH+)，实测值 417.3(MH+)。
5-[(4-苯基-丁基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.96(d，J＝8.6Hz，1H)，7.89(s，2H)， 7.46(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，7.32-7.08(m 5H)，3.90(s，2H)，2.69-2.43(m， 4H)，1.68-1.40(m，4H)。MS(EI)：计算值355.1(MH+)，实测值 355.3(MH+)。
5-[(2-吗啉-4-基-乙基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.93(s，2H)， 7.49(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，3.96(s，2H)，3.55(t，J＝4.4Hz，4H)，2.72(t， J＝6.6Hz，2H)，2.46(t，J＝6.6Hz，2H)。MS(EI)：计算值336.1(MH+)，实 测值336.3(MH+)。
5-[(环己基甲基-氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.86(s， 1H)，7.44(d，J＝8.0Hz，1H)，3.84(s，2H)，2.38(d，J＝6.6Hz，2H)，1.84- 0.68(m，11H)。MS(EI)：计算值319.1(MH+)，实测值319.3(MH+)。
5-[(2-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.06-7.80(m，3H)，7.54-7.18(m，3H)，7.02- 6.84(m，2H)，3.92(s，2H)，3.75(s，5H)。MS(EI)：计算值343.1(MH+)，实 测值343.2(MH+)。
5-[(3-氯-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.00-7.78(m，3H)，7.50-7.38(m，2H)，7.36- 7.20(m，3H)，3.78(s，2H)，3.69(s，2H)。MS(EI)：计算值347.0(MH+)，实 测值347.2(MH+)。
5-{[(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.98(d，J＝8.4Hz，1H)，7.94- 7.86(m，2H)，7.56-7.44(m，3H)，7.20-7.08(m，2H)，3.98(s，2H)，3.96(s， 2H)。MS(EI)：计算值353.1(MH+)，实测值353.2(MH+)。
5-{[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.47(d，J＝3.4Hz，1H)，7.93(d，J＝ 8.0Hz，1H)，7.92-7.82(m，2H)，7.80-7.68(m，1H)，7.52-7.38(m，2H)，7.28- 7.18(m，1H)，3.83(s，2H)，3.78(s，2H)。MS(EI)：计算值314.1(MH+)，实 测值314.2(MH+)。
5-{[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟 基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.0Hz，1H)， 7.90-7.80(m，2H)，7.50-7.38(m，1H)，6.90-6.62(m，3H)，3.87(s，2H)， 3.70(s，3H)，3.69(s，3H)，2.80-2.66(m，4H)。MS(EI)：计算值387.1(MH+)， 实测值387.3(MH+)。
5-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.86(s， 2H)，7.54-7.40(m，2H)，7.31(d，J＝8.0Hz，1H)，7.18-6.86(m，3H)，3.90(s， 2H)，2.86(s，4H).MS(EI)：计算值366.1(MH+)，实测值366.3(MH+)。
5-[(1-苄基-哌啶-4-基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz，partial)δ7.89(d，J＝8.2Hz，1H)， 7.82(s，2H)，7.46-7.16(m，6H)，3.81(s，2H)，2.40(s，2H).MS(EI)：计算值 396.2(MH+)，实测值396.3(MH+)。
使用6-甲酰基苯并噻吩制备的化合物
苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯-6-甲酸甲酯。将4-甲酰基-3-硝基-苯甲 酸甲酯(15.22g，72.78mmol)、巯基乙酸乙酯(8.70mL，79.3mmol)和 K2CO3(12.87g，93.12mmol)在140mL无水DMF中的混合物在50℃ 下加热过夜。冷却至室温后，将该混合物倾入1L的冰水混合物中， 并将得到的混合物搅拌40分钟。滤出形成的固体并用70mL水洗涤 4次。干燥后，得到浅色固体状的苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯-6-甲酸甲 酯。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.56(s，1H)，8.09-7.97(m，2H)，7.88(d，J ＝8.0Hz，1H)，4.40(q，J＝7.2Hz，2H)，3.95(s，3H)，1.40(t，J＝6.8Hz， 3H)。MS(EI)：计算值265.0(MH+)，实测值265.0(MH+)。
苯并[b]噻吩-6-甲酸-2-甲酸乙酯。将苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯-6- 甲酸甲酯(14.90g，56.38mmol)和LiI(37.96g，283.6mmol)在120mL 无水吡啶中的混合物回流3小时。冷却至室温后，将该混合物倾入 用冰冷却的2N HCl(800mL)中。滤出形成的固体并用100mL水洗 涤3次。干燥后，在MeOH中将固体结晶，得到浅色固体形式的苯 并[b]噻吩-6-甲酸-2-甲酸乙酯。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.66(s， 1H)，8.21(s，1H)，8.08(d，J＝8.4Hz，1H)，7.96(dd，J＝8.4，1.0Hz，1H)， 4.34(q，J＝7.2Hz，2H)，1.40(t，J＝6.8Hz，3H)。MS(EI)：计算值 251.0(MH+)，实测值251.1(MH+)。
6-羟甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。在0℃下往苯并[b]噻吩-6-甲 酸-2-甲酸乙酯(6.40g，25.57mmol)的250mL无水THF中缓慢加入 BH3(1.5M的THF溶液，80.0mL，120mmol)。将得到的混合物在0℃ 下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌过夜。冷却至0℃后，用1N HCl(30 mL)猝灭该反应混合物。另外加入120mL水并真空除去THF。滤出 形成的固体，用2×20mL水洗涤。干燥后，得到浅色固体形式的6- 羟甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ8.00(s， 1H)，7.88-7.76(m，2H)，7.36(d，J＝9.4Hz，1H)，4.80(s，2H)，4.38(q，J＝ 7.0Hz，2H)，2.00(brs，1H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H)。MS(EI)：计算值 237.0(MH+)，实测值237.1(MH+)。
6-甲酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。往6-羟甲基-苯并[b]噻吩-2- 甲酸乙酯(2.651g，11.22mmol)的110mL CH2Cl2溶液中加入 MnO2(13.50g)。将混合物在室温下搅拌30分钟并通过Celite垫过滤。 浓缩滤液并干燥，得到浅色固体形式的6-甲酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸 乙酯。1H NMR(CDCl3，200MHz)δ10.09(s，1H)，8.34(s，1H)，8.07(s，1H)， 7.97(d，J＝8.0Hz，2H)，7.88(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，4.40(q，J＝7.0Hz， 2H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)。MS(EI)：计算值235.0(MH+)，实测值 235.1(MH+)。
2°胺
通用方法：
6-(苄基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。往6-甲酰基- 苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(85mg、0.36mmol)和苄胺(51μL，0.47mmol) 的无水二氯乙烷(5mL)溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(230mg、1.08 mmol)和乙酸(20μL，0.35mmol)。反应完全后，加入5mL饱和 NaHCO3。分离有机层，用5mL水洗涤，随后浓缩。高真空干燥后， 将残余物溶解于无水MeOH(5mL)中，加入盐酸羟胺(95mg、1.37 mmol)，随后加入NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.60mL，2.6 mmol)。将该混合物在室温下搅拌直到反应完全。浓缩反应混合物并 将残余物溶解于最少量的水中。用2N HCl将得到的溶液调整至pH≈ 8。过滤形成的固体，用水洗涤，收集并用快速柱层析纯化，得到浅 色固体形式的6-(苄基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.85(s， 1H)，7.44(dd，J＝8.4，1.4Hz，1H)，7.21(t，J＝7.6Hz，1H)，7.00-6.72(m， 3H)，3.78(s，2H)，3.73(s，3H)，3.66(s，2H)。MS(EI)：计算值343.1(MH+)， 实测值343.2(MH+)。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(s，1H)，7.90- 7.78(m，2H)，7.46-7.14(m，6H)，3.80(s，2H)，3.69(s，2H)。MS(EI)：计算 值313.1(MH+)，实测值313.1(MH+)。
采用制备6-(苄基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺的类 似方法制备以下的化合物。
6-[(2-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.95(s，1H)，7.90-7.78(m，2H)，7.46-7.30(m， 2H)，7.28-7.149m，1H)，7.00-6.82(m，2H)，3.82(s，2H)，3.75(s，3H)， 3.65(s，2H)。MS(EI)：计算值343.1(MH+)，实测值343.1(MH+)。
6-[(3-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(s，1H)，7.91-7.78(m，2H)，7.40(dd，J＝ 8.4，1.4Hz，1H)，7.21(t，J＝7.6Hz，1H)，6.97-6.84(m，2H)，6.82-6.72(m， 1H)，3.79(s，2H)，3.73(s，3H)，3.66(s，2H)。MS(EI)：计算值343.1(MH+)， 实测值343.1(MH+)。
6-苯基氨基甲基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.40(brs，1H)，9.25(brs，1H)，8.06-7.76(m， 3H)，7.42(d，J＝8.4Hz，1H)，7.16-6.92(m，2H)，6.66-6.40(m，3H)， 6.33(brs，1H)，4.37(d，J＝4.8Hz，2H)。MS(EI)：计算值299.1(MH+)，实 测值299.1(MH+)。
6-(苯乙基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.92-7.76(m，3H)，7.40-7.08(m，6H)， 3.83(s，2H)，2.72(s，4H)。MS(EI)：计算值327.1(MH+)，实测值 327.2(MH+)。
6-[(3-苯基-丙基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(部分，DMSO-d6，200MHz)δ7.94-7.78(m，3H)，7.39(d，J＝8.4Hz， 1H)，7.30-7.06(m，5H)，3.81(s，2H)，2.60(t，J＝7.6Hz，2H)，1.72(dd，J＝ 7.4，7.4Hz，2H)。MS(EI)：计算值341.1(MH+)，实测值341.1(MH+)。
6-[(2-氯-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.97(s，1H)，7.92-7.80(m，2H)，7.59(dd，J＝ 7.6，1.8Hz，1H)，7.48-7.18(m，4H)，3.85(s，2H)，3.76(s，2H)。MS(EI)：计 算值347.0(MH+)，实测值347.1(MH+)。
6-[(3-氯-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(s，1H)，7.90-7.80(m，2H)，7.46-7.22(m， 5H)，3.78(s，2H)，3.69(s，2H)。MS(EI)：计算值347.0(MH+)，实测值 347.1(MH+)。
6-[(4-氯-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(s，1H)，7.90-7.80(m，2H)，7.44-7.30(m， 5H)，3.78(s，2H)，3.67(s，2H)。MS(EI)：计算值347.0(MH+)，实测值 347.1(MH+)。
6-{[(苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩- 2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.93(s，1H)，7.90- 7.80(m，2H)，7.40(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，6.94(s，1H)，6.88-6.70(m，2H)， 5.96(s，2H)，3.76(s，2H)，3.60(s，2H)。MS(EI)：计算值357.1(MH+)，实 测值357.1(MH+)。
6-(茚满-1-基氨基甲基)-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.98-7.76(m，3H)，7.41(d，J＝8.0，Hz，1H)， 6.86(d，J＝8.2Hz，1H)，6.50-6.28(m，2H)，4.35(s，2H)，2.76-2.58(m，3H)， 1.98-1.78(m，2H)。MS(EI)：计算值339.1(MH+)，实测值339.2(MH+)。
6-[(9H-芴-9-基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94-7.66(m，7H)，7.44-7.26(m，5H)，4.99(s， 1H)，3.41(s，2H)。MS(EI)：计算值387.1(MH+)，实测值387.2(MH+)。
6-[(1，2-二苯基-乙基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.85(s，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)， 7.63(s，1H)，7.40-7.00(m，11H)，4.08(t，J＝7.0Hz，1H)，3.82-3.42(m，3H)， 2.84(d，J＝7.0Hz，2H)。MS(EI)：计算值403.1(MH+)，实测值 403.2(MH+)。
6-[(环己基甲基-氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.17(s，1H)，8.04-7.88(m，2H)，7.68-7.50(m， 1H)，4.20(s，2H)，2.70(brs，2H)，1.88-1.46(m，6H)，1.25-0.72(m，5H)。 MS(EI)：计算值319.1(MH+)，实测值319.2(MH+)。
6-[(1，2，3，4-四氢-萘-1-基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.00(s，1H)，7.92-7.76(m，2H)， 7.48(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H)，7.42-7.32(m，1H)，7.18-6.96(m，3H)，4.02- 3.75(m，2H)，3.66(t，J＝5.2Hz，1H)，2.84-2.52(m，2H)，2.06-1.50(m， 4H)。MS(EI)：计算值353.1(MH+)，实测值353.2(MH+)。
6-{[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N- 羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ10.68(s，1H)，7.96-7.78(m， 3H)，7.44-7.28(m，2H)，7.19(d，J＝7.0Hz，1H)，7.00-6.78(m，2H)，3.86(s， 2H)，2.88-2.60(m，4H)，2.29(s，3H)。MS(EI)：计算值380.1(MH+)，实测 值380.2(MH+)。
6-{[(吡啶-2-基甲基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.48(d，J＝4.0Hz，1H)，8.00-7.82(m， 3H)，7.76(ddd，J＝8.2，8.2，1.8Hz，1H)，7.53-7.37(m，2H)，7.30-7.18(m， 1H)，3.88(s，2H)，3.82(s，2H)。MS(EI)：计算值314.1(MH+)，实测值 314.1(MH+)。
6-[(1-苄基-哌啶-4-基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.96-7.78(m，3H)，7.40(dd，J＝8.0， 1.4Hz，1H)，7.36-7.18(m，5H)，3.84(s，2H)，3.40(s，2H)，2.82-2.62(m，2H)， 2.44-2.30(m，1H)，2.00-1.70(m，4H)，1.48-1.18(m，2H)。MS(EI)：计算值 396.2(MH+)，实测值396.2(MH+)。
6-[(4-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.93(s，1H)，7.90-7.78(m，2H)，7.40(d，J＝ 8.0Hz，1H)，7.25(d，J＝8.6Hz，2H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，3.77(s，2H)， 3.72(s，3H)，3.62(s，2H)。MS(EI)：计算值343.1(MH+)，实测值 343.1(MH+)。
6-{[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.94(s，1H)，7.91-7.78(m，2H)， 7.52-7.36(m，2H)，7.31(d，J＝7.6Hz，1H)，7.16-6.84(m，3H)，3.92(s，2H)， 2.86(s，4H)。MS(EI)：计算值366.1(MH+)，实测值366.1(MH+)。
3°胺
6-[(4-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。往6-甲 酰基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(1.05g，4.48mmol)和4-甲氧基-苄胺 (0.76mL，5.86mmol)的无水二氯乙烷(40mL)溶液中加入三乙酰氧基 硼氢化钠(2.87g，13.5mmol)和乙酸(0.25mL，4.4mmol)。反应完全后， 用60mL的CH2Cl2和40mL饱和的NaHCO3稀释反应混合物。分离 有机层，用50mL水、50mL盐水洗涤，随后经Na2SO4干燥。过滤 后，将滤液浓缩，残余物使用快速柱层析纯化，得到白色固体状的6-[(4- 甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。MS(EI)：计算值 356.1(MH+)，实测值356.1(MH+)。
6-{[环己基-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。往6-[(4-甲氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(122 mg、0.34mmol)和环己酮(46μL，0.44mmol)的无水二氯乙烷(5mL)溶 液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(216mg、1.02mmol)和乙酸(20μL，0.35 mmol)。反应完全后，加入5mL饱和的NaHCO3。分离有机层，用 5mL水洗涤并浓缩。在高真空下浓缩后，将残余物溶解于无水 MeOH(6mL)，加入盐酸羟胺(90mg、1.30mmol)，随后加入NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.57mL，2.5mmol)。将该混合物在室温 下搅拌直到反应完全。将该反应混合物浓缩并将残余物溶解于最少 量的水。用2N HCl将该溶液调节至pH≈8。过滤形成的固体，用水 洗涤，收集并通过快速柱层析纯化，得到浅褐色固体形式的6-{[环己 基-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.35(brs，1H)，9.23(brs，1H)，7.90(s，1H)， 7.87-7.74(m，2H)，7.40(d，J＝8.2Hz，1H)，7.23(d，J＝8.8Hz，2H)，6.83(d， J＝8.4Hz，2H)，3.69(s，3H)，3.67(s，2H)，3.51(s，2H)，2.46-2.24(m，1H)， 1.92-0.86(m，10H)。MS(EI)：计算值425.2(MH+)，实测值425.1(MH+)。
采用制备6-{[环己基-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩- 2-(N-羟基)甲酰胺的类似方法制备以下的化合物。
6-{[(4-甲氧基-苄基)-(四氢-吡喃-4-基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩- 2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.42(brs，1H)， 9.24(brs，1H)，7.92(s，1H)，7.90-7.76(m，2H)，7.40(d，J＝9.2Hz，1H)， 7.24(d，J＝8.8Hz，2H)，6.84(d，J＝8.4Hz，2H)，3.74-3.64(m，5H)，3.54(s， 2H)，3.94-3.78(m，2H)，3.14-3.00(m，2H)，2.80-2.54(m，1H)，1.78-1.46(m， 4H)。MS(EI)：计算值427.2(MH+)，实测值427.1(MH+)。
6-{[(2-羟基-乙基)-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.43(brs，1H)， 9.26(brs，1H)，7.96(s，1H)，7.90-7.78(m，2H)，7.41(d，J＝8.4Hz，1H)， 7.27(d，J＝8.8Hz，2H)，6.87(d，J＝8.4Hz，2H)，4.39(t，J＝5.4Hz，1H)， 3.71(s，3H)，3.67(s，2H)，3.58-3.38(m，6H)。MS(EI)：计算值387.1(MH+)， 实测值387.1(MH+)。
6-{[异丙基-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.92(s，1H)，7.88-7.76(m，2H)， 7.41(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，7.24(d，J＝8.8Hz，2H)，6.84(d，J＝8.8Hz， 2H)，3.69(s，3H)，3.59(s，2H)，3.43(s，2H)，2.90-2.68(m，1H)，1.02(d，J＝ 6.6Hz，6H)。MS(EI)：计算值385.2(MH+)，实测值385.2(MH+)。
6-{[(4-甲氧基-苄基)-甲基-氨基]-甲基}-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.93(s，1H)，7.90-7.80(m，2H)， 7.40(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H)，7.26(d，J＝8.4Hz，2H)，6.88(d，J＝8.4Hz， 2H)，3.72(s，3H)，3.57(s，2H)，3.44(s，2H)，2.05(s，3H)。MS(EI)：计算值 357.1(MH+)，实测值357.2(MH+)。
酰化的胺
6-(苄基氨基-甲基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯。采用制备6-[(4-甲 氧基-苄基氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯的类似方法制备标题 化合物。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.13(s，1H)，7.98-7.86(m，2H)， 7.44(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H)，7.38-7.14(m，5H)，4.32(q，J＝7.0Hz，2H)， 3.79(s，2H)，3.68(s，2H)，1.31(t，J＝6.8Hz，3H)。
6-[(乙酰基-苄基-氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。在 0℃下往6-(苄基氨基)-甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(112mg、0.34 mmol)、NMM(0.12mL，1.09mmol)和DMAP(10mg、0.08mmol)的无 水二氯甲烷(5mL)溶液中加入乙酸酐(48μL，0.51mmol)。让该反应混 合物升至室温。反应完全后，加入5mL饱和NaHCO3。分离有机层， 用5mL水洗涤并浓缩。高真空干燥后，将残余物溶解于无水MeOH(6 mL)，加入盐酸羟胺(90mg、1.30mmol)，随后加入NaOMe溶液(4.37 M的MeOH溶液，0.57mL，2.5mmol)。将该混合物在室温下搅拌直 到反应完全。浓缩该反应混合物，将残余物溶解于最少量的水。用2N HCl将得到的溶液酸化至pH≈8。滤出形成的固体，用水洗涤，收集 并经快速柱层析纯化，得到浅色固体形式的6-[(乙酰基-苄基-氨基)- 甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺(83.3mg、69％)。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.47(brs，1H)，9.30(brs，1H)，7.98-7.74(m， 3H)，7.44-7.10(m，6H)，4.65-4.40(m，4H)，2.12(s，3H)。MS(EI)：计算值 355.1(MH+)，实测值355.2(MH+)。
6-[(苄基-甲磺酰基-氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 采用制备6-[(乙酰基-苄基-氨基)-甲基]-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺 的类似方法制备标题化合物。在制备该标题化合物时，使用甲磺酰 氯代替乙酸酐。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.46(brs，1H)，9.29(brs， 1H)，7.90-7.76(m，3H)，7.36-7.16(m，6H)，4.43(s，2H)，4.33(s，2H)，2.99(s， 3H)。MS(EI)：计算值389.1(M-H-)，实测值389.2(M-H-)。
流程8
6-苄基氧基甲基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。在室温下往6- 羟甲基-苯并[b]噻吩-2-甲酸乙酯(103mg、0.44mmol)溶液中加入 NaH(60％分散液，54mg、1.35mmol)。在室温下将得到的混合物搅拌 15分钟，加入苄基溴(60μL，0.50mmol)。在室温下再搅拌30分钟后， 将该混合物倾入1N HCl(3mL)和H2O(30mL)的混合物中，用 EtOAc(30mL)萃取该溶液。用20mL盐水洗涤有机相并经Na2SO4干 燥。过滤后浓缩滤液，在高真空下干燥，将残余物溶解于无水MeOH(7 mL)中，加入盐酸羟胺(116mg、1.67mmol)，随后加入NaOMe溶液(4.37 M的MeOH溶液，0.74mL，3.2mmol)。在室温下将该混合物搅拌直 到反应完全。浓缩反应混合物，将残余物溶解于4mL水。用2N HCl将得到的溶液酸化至pH≈8。滤出形成的固体，用水洗涤并干燥， 得到浅橙色固体形式的6-苄基氧基甲基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.96(s，1H)，7.92-7.81(m，2H)， 7.42-7.20(m，6H)，4.64(s，2H)，4.55(s，2H)。MS(EI)：计算值314.1(MH+)， 实测值314.1(MH+)。
含有其他取代基的化合物
3-氯-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。采用类似于制备2-羟基氨 基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸甲酯的方法进行。1H(DMSO-d6) δ11.23(br s，1H)，9.45(br s，1H)，8.15-8.02(m，1H)，7.90-7.80(m，1H)， 7.63-7.50(m，2H).MS(EI)：计算值(MH+)228.03，实测值(MH+) 228.17。
6-硝基-苯并[b]噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。采用类似于制备2-羟基 氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-甲酸甲酯的方法进行。MS(EI)：计算值 (MH+)239.03，实测值(MH+)239.16。
N-羟基-N′-(2-羟基氨基甲酰基-苯并[b]噻吩-6-基)-草酰胺。1H NMR(DMSO-d6)δ10.80(br s，1H)，8.47(s，1H)，7.90-7.70(m，3H)， 6.37(s，1H).MS(EI)：计算值(MH+)296.1，实测值(MH+)296.2。
噻吩
由5-苯基噻吩制备的化合物
5-(4-羧基-苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯。在氮气气氛下，将5-溴噻吩- 2-甲酸乙酯(318mg、1.35mmol)和4-羧基苯基硼酸(203mg、1.23mmol) 悬浮于1mL水中。加入四丁基溴化铵(403mg、1.25mmol)、乙酸钯 (2mg、0.009mmol)和碳酸钾(422mg、3.05mmol)，随后在70℃下将 该混合物搅拌1小时。通过加入1M HCl将该溶液调整至pH 2，用10％ MeOH的EtOAc溶液萃取产物。干燥有机相并除去溶剂。该固体与 乙酸乙酯一起研磨，得到固体产物。1H-NMR(CDCl3)：δ＝7.99(d，J＝8.6 Hz，2H)，7.88(d，J＝8.6Hz，2H)，7.83(d，J＝4Hz，1H)，7.49(d，J＝4Hz，1H)， 4.31(q，J＝7.4Hz，2H)，1.31(t，J＝7.4Hz，3H).MS(EI)：计算值 277(MH+)，实测值277(MH+)。
5-(4-甲酰基-苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯。采用制备5-(4-羧基-苯基)- 噻吩-2-甲酸乙酯的类似方法制备标题化合物。产物与EtOAc∶己烷 为2∶1的混合物一起研磨，并分离得到固体。1NMR(CDCl3)：δ＝10.03(s， 1H)，7.99(m，4H)，7.85(d，J＝4Hz，1H)，7.80(d，J＝4Hz，1H)，4.31(q，J＝ 7.4Hz，2H)，1.31(t，J＝7.4Hz，3H).MS(EI)：计算值261(MH+)，实测值 261(MH+)。
5-(3-甲酰基-苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯。采用制备5-(4-羧基-苯基)- 噻吩-2-甲酸乙酯的类似方法制备标题化合物。粗产物经层析(硅胶， 己烷∶EtOAc 100∶0-100∶12)纯化，得到白色固体。1NMR(CDCl3)： δ＝10.07(s，1H)，8.14(m，1H)，7.92-7.80(m，2H)，7.79(d，J＝4Hz，1H)， 7.60(t，J＝7.8Hz，1H)，7.39(d，4H，1H)，4.31(q，J＝7.4Hz，2H)，1.31(t，J＝ 7.4Hz，3H).MS(EI)：计算值261(MH+)，实测值261(MH+)。
用(甲酰基-苯基)-噻吩制备胺的通用实验
N-烷基-5-(3-氨基甲基-苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯。将5-(3-甲酰基- 苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯(0.6mmo1)与伯胺(1.1当量)在甲醇中回流4小 时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.5当量)，在氮气气氛下将溶液在室 温下搅拌过夜。减压除去溶剂，将残余物溶解于二氯甲烷中，用饱 和碳酸氢钠溶液洗涤。干燥有机相，除去溶剂，等量地得到油状产 物，该产物无需进一步分离即可用于下一步骤。
N，N-二烷基-5-(3-氨基甲基-苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯。将由上一步 骤制备的仲胺溶解于二氯乙烷。往该溶液中加入乙醛(1.5当量)和三 乙酰氧基硼氢化钠(2.5当量)。在氮气气氛下将得到的悬浮液在室温 下搅拌过夜。减压除去溶剂，经柱层析纯化该产物(硅胶，己烷∶EtOAc100∶0-70∶30)。
N，N-二烷基-5-(3-氨基甲基-苯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。将由 上一步骤得到的叔胺乙酯溶解于无水甲醇中。加入盐酸羟胺(5-10当 量)的无水甲醇溶液，随后加入甲醇钠的甲醇溶液(1.8当量，相对于 盐酸羟胺)。立刻形成沉淀(NaCl)。在室温下将该反应物搅拌过夜。 减压除去溶剂并将残余物再次溶解于水中。加入1M HCl中和该溶 液。过滤分离该粗产物，或用EtOAc萃取。再经过柱层析或制备薄 层色谱(硅胶，己烷-EtOAc)纯化。
5-{3-[(二苄基氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H- NMR(CD3OD)：δ＝7.70(s，1H)，7.56(m，1H)，7.45-7.20(m，13H)，3.56(s， 2H)，3.55(s，4H).MS(EI)：计算值429(MH+)，实测值429(MH+)。
5-{3-[(苄基-喹啉-3-基甲基-氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H-NMR(d6-DMSO)：δ＝11.28(s，1H)，9.18(m，1H)，8.90(d，J＝1.8 Hz，1H)，8.29(d，J＝1.8Hz，1H)，8.01-7.96(m，2H)，7.77-7.20(m，13H)， 3.75(s，2H)，3.63(s，2H)，3.61(s，2H).MS(EI)：计算值480(MH+)，实测 值480(MH+)。
5-[3-(3，4-二氢-1H-异喹啉-2-基甲基)-苯基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H-NMR(CD3OD，200MHz)：δ＝7.75(brs，1H)，7.64-7.50(m，2H)， 7.43-7.39(m，3H)，7.12-7.06(m，3H)，7.04-6.96(m，1H)，3.76(s，2H)， 3.67(s，2H)，2.96-2.86(m，2H)，2.86-2.76(m，2H).MS(ED：计算值 365(MH+)，实测值365(MH+)。
5-[3-(4-苯基-哌嗪-1-基甲基)-苯基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H- NMR(CD3OD，200MHz)：δ＝8.64(d，J＝4.4Hz，1H)，8.11(d，J＝8.8Hz， 1H)，7.95(d，J＝7.0Hz，1H)，7.74-7.64(m，1H)，7.58-7.40(m，5H)，7.28- 7.10(m，6H)，7.10-7.03(m，2H)，4.12(s，2H)，3.76(s，2H)，2.88(br s，4H). MS(EI)：计算值394(MH+)，实测值394(MH+)。
5-{3-[(苄基-喹啉-4-基甲基-氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H-NMR(CD3OD，200MHz)：δ＝8.73(d，J＝4.8Hz，1H)，8.16(dd， J1＝8.4Hz，J2＝0.8Hz，1H)，7.96(d，J＝9.2Hz，1H)，7.78-7.62(m，3H)， 7.60-7.46(m，3H)，7.42-7.18(m，8H)，4.05(s，2H)，3.64(s，2H)，3.62(s，2H). MS(EI)：计算值480(MH+)，实测值480(MH+)。
5-{3-[(苄基-苯乙基-氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 1H-NMR(CD3OD，200MHz)：δ＝7.60-7.45(m，3H)，7.31-7.00(m，13H)， 3.62(s，2H)，3.61(s，2H)，2.80-2.72(m，2H)，2.72-2.60(m，2H).MS(EI)：计 算值443(MH+)，实测值443(MH+)。
5-{3-[(双-苯基氨基甲酰基甲基-氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟 基)甲酰胺。1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)：δ＝11.25(br s，1H)，10.68(s， 1H)，10.26(s，2H)，9.92(s，1H)，7.77(br s，1H)，7.61(d，J＝8.0Hz，4H)， 7.62-7.59(m，1H)，7.46-7.39(m，3H)，7.32(t，J＝8.0Hz，1H)，7.34-7.30(m， 1H)，7.05(t，J＝7.0Hz，2H)，3.34(s，2H)，2.93(s，2H)，2.77(s，2H).MS(EI)： 计算值515(MH+)，实测值515(MH+)。
5-{3-[(苯乙基-喹啉-3-基甲基-氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)：δ＝11.23(brs，1H)，9.18(br s， 1H)，8.79(d，J＝1.8Hz，1H)，8.13(br s，1H)，7.97(d，J＝8.0Hz，1H)，7.87(d， J＝7.6Hz，1H)，7.76-7.50(m，5H)，7.44(d，J＝3.6Hz，1H)，7.42-6.98(m， 7H)，3.83(s，2H)，3.75(s，2H)，2.92-2.80(m，2H)，2.76-2.64(m，2H). MS(EI)：计算值494(MH+)，实测值494(MH+)。
5-{3-[(苯乙基-喹啉-4-基甲基-氨基)-甲基]-苯基}-噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺。1H-NMR(CD3OD，200MHz)：δ＝8.64(d，J＝4.4Hz，1H)，8.11(d， J＝8.8Hz，1H)，7.95(d，J＝7.0Hz，1H)，7.69(t，J＝7.0Hz，1H)，7.59- 7.42(m，5H)，7.29-7.02(m，8H)，4.11(s，2H)，3.76(s，2H)，2.87(br s，4H). MS(EI)：计算值494(MH+)，实测值494(MH+)。
5-(3-{[(3-苯基-丙基)-喹啉-4-基甲基-氨基]-甲基}-苯基)-噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)：δ＝11.22(br s，1H)， 9.18(br s，1H)，8.80(d，J＝4.4Hz，1H)，8.25(d，J＝7.4Hz，1H)，8.01(d，J＝ 7.4Hz，1H)，7.78-7.54(m，5H)，7.43-7.26(m，4H)，7.20-6.94(m，5H)， 4.05(s，2H)，3.69(s，2H)，3.38-3.28(m，4H)，1.88-1.72(m，2H).MS(EI)：计 算值508(MH+)，实测值508(MH+)。
5-(3-{[(3-苯基-丙基)-喹啉-3-基甲基-氨基]-甲基}-苯基)-噻吩-2- (N-羟基)甲酰胺。1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)：δ＝11.22(br s，1H)， 9.18(br s，1H)，8.88(d，J＝2.2Hz，1H)，8.22(br s，1H)，7.97(t，J＝8.8Hz， 2H)，7.76-7.30(m，8H)，7.16-6.98(m，5H)，3.78(s，2H)，3.67(s，2H)，2.60- 2.40(m，4H)，1.90-1.74(m，2H).MS(EI)：计算值508(MH+)，实测值 508(MH+)。
5-(3-{[苄基-(3-苯基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲 酰胺。1H-NMR(DMSO-d6，200MHz)：δ＝11.23(br s，1H)，9.17(br s，1H)， 7.68-7.56(m，3H)，7.48(d，J＝4.0Hz，1H)，7.40-7.02(m，13H)，3.57(s，2H)， 3.56(s，2H)，2.56-2.37(m，4H)，1.86-1.68(m，2H).MS(EI)：计算值 457(MH+)，实测值457(MH+)。
使用(羧基-苯基)-噻吩制备酰胺的通用实验
5-(4-烷基氨基甲酰基-苯基)-噻吩-2-甲酸乙酯。往5-(4-羧基-苯基)- 噻吩-2-甲酸乙酯(0.26mmol)的1∶1无水乙腈∶DMF溶液中加入芳基- 或烷基-胺(1.6当量)，随后加入EDC(2当量)。在室温下将该溶液搅 拌6小时，随后在40℃下搅拌3小时。减压除去溶剂，将残余物溶 解于EtOAc(20mL)并用1M HCl、饱和碳酸氢钠和水洗涤。有机相经 硫酸钠干燥，除去溶剂，得到白色固体形式的产物。
5-(4-烷基氨基甲酰基-苯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。将由上述 反应制备的酰胺酯(amide ester)溶解于无水甲醇中并在室温下用盐酸 羟胺(7当量)和NaOMe(1.8当量，相对于盐酸羟胺)处理过夜。减压 除去溶剂，将残余物溶解于水中。加入1M HCl中和该溶液，过滤 收集产物。在需要的情况下，将该产物与二氯甲烷一起研磨进一步 纯化该产物。
5-(4-苯基氨基甲酰基-苯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H- NMR(d6-DMSO)：δ＝10.15(s，1H)，8.05-7.60(m，8H)，7.36(t，J＝8.4Hz， 2H)，7.10(t，J＝7.2Hz，1H)，3.56(s，2H)，3.55(s，4H).MS(EI)：计算值 339(MH+)，实测值339(MH+)。
5-(4-苄基氨基甲酰基-苯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H- NMR(d6-DMSO))：δ＝9.11(m，1H)，8.62(s，1H)，7.96(d，J＝8.4Hz，2H)， 7.80(d，J＝8.4Hz，2H)，7.63(s，2H)，7.33-7.2(m，4H)，4.48(d，J＝6.2Hz， 2H).MS(EI)：计算值353(MH+)，实测值353(MH+)。
由5-烷基噻吩制备的化合物
5-(2-苯基氨基甲酰基-乙烯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。往5-(2- 羧基-乙烯基)-噻吩-2-甲酸乙酯(80mg、0.35mmol)、HOBt(50mg、0.37 mmol)和EDC(105mg、0.55mmol)的THF(5mL)溶液中加入苯胺(40μL， 0.44mmol)。在室温下将得到的混合物搅拌2天。浓缩后，往残余物 中加入1mL MeOH，随后加入约10mL水。在室温下搅拌2小时后， 过滤形成的固体，收集并干燥，并直接用于下一反应。
往通过上述方法得到的固体在5mL无水MeOH中的溶液中加 入NH2OH·HCl(73mg、1.05mmol)，随后加入NaOMe溶液(4.37M 的MeOH溶液，0.44mL，1.92mmol)。在室温下搅拌20.5小时后，浓 缩该反应混合物。随后将残余物溶解于最少量的水中并用2N HCl水 溶液酸化至pH≈8。过滤形成的固体，用2mL水洗涤2次，收集并 高真空干燥，得到浅褐色固体形式的5-(2-苯基氨基甲酰基-乙烯基)- 噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计算值289.06(MH+)，实测值 289.18(MH+)。
5-(2-苯基氨基甲酰基-乙基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。使用类似 于制备5-(2-苯基氨基甲酰基-乙烯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺的两步 法，将5-(2-羧基-乙基)-噻吩-2-甲酸乙酯(0.50M的THF溶液，0.70mL， 0.35mmol)转化成浅色固体形式的5-(2-苯基氨基甲酰基-乙基)-噻吩- 2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计算值291.07(MH+)，实测值 291.20(MH+)。
使用类似于制备5-(2-苯基氨基甲酰基-乙烯基)-噻吩-2-(N-羟基) 甲酰胺的两步法，制备以下各种噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。
5-(2-苄基氨基甲酰基-乙烯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.31(brs，1H)，9.23(brs，1H)，8.68(t，J＝ 5.7Hz，1H)，7.72-7.08(m，8H)，6.52(d，J＝15.4Hz，1H)，4.38(d，J＝5.6 Hz，2H).MS(EI)：计算值303.1(MH+)，实测值303.2(MH+)。
5-(2-苯乙基氨基甲酰基-乙烯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.32(brs，1H)，9.21(brs，1H)，8.26(t，J＝ 5.5Hz，1H)，7.62-7.44(m，2H)，7.40-7.08(m，6H)，6.44(d，J＝15.4Hz， 1H)，3.41(t，J＝7.3Hz，2H)2.75(t，J＝7.3Hz，2H).MS(EI)：计算值 317.1(MH+)，实测值317.2(MH+)。
5-[2-(3-苯基-丙基氨基甲酰基)-乙烯基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.29(brs，1H)，9.22(brs，1H)，8.22(t，J＝ 5.2Hz，1H)，7.64-7.44(m，2H)，7.40-7.06(m，6H)，6.46(d，J＝15.4Hz， 1H)，3.16(td，J＝6.6，5.8Hz，2H)2.60(t，J＝7.7Hz，2H)，1.73(tt，J＝7.3， 7.3Hz，2H).MS(EI)：计算值331.1(MH+)，实测值331.3(MH+)。
5-[2-(环己基甲基-氨基甲酰基)-乙烯基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ11.26(brs，1H)，9.20(brs，1H)，8.13(t， J＝5.5Hz，1H)，7.64-7.40(m，2H)，7.33(d，J＝4.0，1H)，6.48(d，J＝15.8 Hz，1H)，3.00(dd，J＝6.3，6.3Hz，2H)，1.94-0.68(m，11H).MS(EI)：计算 值309.1(MH+)，实测值309.3(MH+)。
5-(2-环己基氨基甲酰基-乙烯基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ8.05(d，J＝7.6Hz，1H)，7.64-7.40(m，2H)， 7.33(d，J＝4.2，1H)，6.45(d，J＝15.8Hz，1H)，3.60(brs，1H)，2.05-0.90(m， 10H).MS(EI)：计算值295.1(MH+)，实测值295.2(MH+)。
5-[2-(2，2-二苯基-乙基氨基甲酰基)-乙烯基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。MS(EI)：计算值393.1(MH+)，实测值393.3(MH+)。
5-[2-(3-苄基氧基-苯基氨基甲酰基)-乙烯基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。MS(EI)：计算值395.1(MH+)，实测值395.3(MH+)。
5-(2-苄基氨基甲酰基-乙基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计 算值305.1(MH+)，实测值305.2(MH+)。
5-(2-苯乙基氨基甲酰基-乙基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)： 计算值319.1(MH+)，实测值319.3(MH+)。
5-[2-(3-苯基-丙基氨基甲酰基)-乙基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。 MS(EI)：计算值333.1(MH+)，实测值333.3(MH+)。
5-[2-(2，2-二苯基-乙基氨基甲酰基)-乙基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰 胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.97(t，J＝4.9Hz，1H)，7.50-6.94(m， 11H)，6.71(d，J＝3.6Hz，1H)，4.14(t，J＝7.7Hz，1H)，3.68(dd，J＝7.1， 5.7Hz，2H)，2.92(t，J＝7.2Hz，2H)，2.32(t，J＝7.1Hz，2H).MS(EI)：计 算值395.1(mH+)，实测值395.3(MH+)。
5-(2-环己基氨基甲酰基-乙基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)： 计算值297.1(MH+)，实测值297.3(MH+)。
由5-氨基噻吩制备的化合物
5-苯基乙酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。往5-苯基乙酰基氨 基-噻吩-2-甲酸甲酯(92.7mg、0.34mmol)中加入NH2OH·HCl(110.0 mg、1.58mmol)和5mL无水MeOH。加入NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.75mL，3.28mmol)。将得到的混合物在50℃下搅拌6小时， 在室温下搅拌14小时，再次在50℃下搅拌3天，随后在室温下再搅 拌2天。加入5mL水，将该混合物在室温下搅拌3天。随后加入NaOMe溶液(4.37M的MeOH溶液，0.75mL，3.28mmol)，在室温下将得到的 混合物再搅拌3天。反应完全后，除去MeOH，用2N盐酸水溶液 将水层酸化至pH≈2。用15mL EtOAc萃取两次后，浓缩合并的有 机层，在高真空下干燥。随后将残余物溶解于6mL无水DMF中， 将该混合物冷却至0℃。加入二异丙基乙胺(0.20mL，1.15mmol)和 HBTU(210.7mg、0.56mmol)。在0℃下搅拌1小时后，在室温下再 搅拌1小时，加入1.3mL 50％NH2OH水溶液，将该混合物在室温下 搅拌过夜。在高真空下浓缩后，得到的残余物经快速柱层析(70％ EtOAc/己烷，随后用EtOAc，随后用10％MeOH/EtOAc)纯化，得到 浅色固体形式的5-苯基乙酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200MHz)δ7.55-7.15(m，6H)，6.64(d，J＝4.0Hz，1H)， 3.68(s，2H)。MS(EI)：计算值277.31(MH+)，实测值277.25(MH+)。
5-苯磺酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。采用制备5-苯基乙酰 基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺的相同方法，将5-苯磺酰基氨基-噻吩 -2-甲酸甲酯(110.0mg、0.37mmol)转化为浅绿色固体形式的5-苯磺 酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计算值299.01(MH+)，实 测值299.13(MH+)。
采用制备5-苯基乙酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺的类似方 法，制备下面各种噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。
5-苯甲酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6，200 MHz)δ8.10-7.84(m，2H)，7.74-7.26(m，4H)，6.90(d，J＝4.0Hz，1H). MS(EI)：计算值263.0(MH+)，实测值263.2(MH+)。
5-[(萘-1-羰基)-氨基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6， 200MHz)δ8.54-8.14(m，3H)，8.10-7.54(m，5H)，7.00(d，J＝4.4Hz，1H). MS(EI)：计算值313.1(MH+)，实测值313.3(MH+)。
5-[(萘-2-羰基)-氨基]-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6， 200MHz)δ8.64(s，1H)，8.24-7.90(m，4H)，7.74-7.40(m，3H)，6.93(d，J＝ 4.0Hz，1H).MS(EI)：计算值313.1(MH+)，实测值313.3(MH+)。
5-苯基甲磺酰基氨基-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。MS(EI)：计算值 313.0(MH+)，实测值313.2(MH+)。
5-(萘-2-磺酰基氨基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6， 200MHz)δ8.41(s，1H)，8.22-7.92(m，3H)，7.84-7.52(m，3H)，7.25(d，J＝ 3.8Hz，1H)，6.47(d，J＝3.6Hz，1H).MS(EI)：计算值349.0(MH+)，实测 值349.2(MH+)。
5-(萘-1-磺酰基氨基)-噻吩-2-(N-羟基)甲酰胺。1H NMR(DMSO-d6， 200MHz)δ8.65(d，J＝8.4Hz，1H)，，1H)，8.32-8.02(m，3H)，7.84-7.52(m， 4H)，6.41(d，J＝4.0Hz，1H).MS(EI)：计算值349.0(MH+)，实测值 349.2(MH+)。
实施例2-新型化合物对HDAC的抑制作用
HDAC1-旗型(Flag)测试：
采用体外脱乙酰化测试测定新型化合物抑制组蛋白脱乙酰酶，亚 型1(HDAC1)的能力。用于该测试的酶源为得自免疫纯化稳定表达哺 乳动物细胞的已附加表位的人HDAC1。底物由包含乙酰化的赖氨酸 侧链的商品组成(BIOMOL Research Laboratories，Inc.，Plymouth Meeting，PA)。通过与纯化的HDAC1复合体一起温育从而将底物脱 乙酰化后，产生与脱乙酰化水平相称的荧光团。在酶制备使用的底 物浓度为Km，增加新型化合物的浓度进行脱乙酰化测试，以半定量 地确定抑制50％的脱乙酰化反应所需要的化合物浓度(IC50)。
结果：
按照上述方法测定了本发明各化合物的IC50值。所有化合物在 低于约5000nm的浓度下均能抑制50％的脱乙酰化反应。数种化合 物能在低于约1000nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化 合物能在低于约500nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化 合物能在低于约100nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化 合物能在低于约20nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化 合物能在约15-20nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化合 物能在约10-15nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化合物 能在约5-10nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。数种化合物能在 低于约5nm的浓度下抑制50％的脱乙酰化反应。
下表1表示所选择的包含本发明指定的苯并噻吩骨架并且按照 本发明的方法合成的新型化合物的化学结构和HDAC酶测试结果。
表1
下表2表示所选择的包含本发明指定的噻吩骨架并且按照本发 明的方法合成的新型化合物的化学结构和HDAC酶测试结果。
表2
实施例3-细胞系中的HDAC抑制作用
MTS测试
测试本发明的新型化合物抑制鼠科动物红白血病细胞系SC9增 殖的能力。
MTS试验，又称为Cell Titer 96Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay(96孔细胞滴定板单水溶液细胞增殖测定法)，为用 于测定增殖中的活细胞数、细胞毒性或化学敏感性分析的比色方法。 MTS试剂含新型四唑化合物[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲 氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑，内盐]和电子偶合试剂(吩嗪硫酸 乙酯；PES)。将鼠科动物红白血病细胞(SC-9)与载体或增加浓度的化 合物温育48小时。通过以下方法来定量细胞增殖：往培养孔中直接 加入少量MTS试剂，温育1-4小时，随后用96孔板阅读器记录490nM 处吸收度。通过490nM处吸收度测量的甲产物量直接与培养基中 的活细胞数目成比例。
结果
对所选一组新型化合物的基于SC9-细胞的MTS测试结果表明 所述化合物能在低于1000nm的浓度下抑制细胞增殖。数种化合物 能在约500-1000nm的浓度下抑制细胞增殖。数种其他化合物能在约 100-500nm的浓度下抑制细胞增殖。数种其他化合物能在低于100nm 的浓度下抑制细胞增殖。数种其他化合物能在约50-100nm的浓度下 抑制细胞增殖。数种其他化合物能在低于50nm的浓度下抑制细胞 增殖。数种其他化合物能在约50-100nm的浓度下抑制细胞增殖。数 种其他化合物能在低于10nm的浓度下抑制细胞增殖。数种其他化 合物能在约1-10nm的浓度下抑制细胞增殖。
对所选一组新型化合物的基于SC9-细胞的MTS测试汇总于下 表3。
表3
尽管本发明用优选的实施方案进行具体表示和描述，本领域技 术人员应当理解的是在不偏离本发明所述含义的情况下可进行各种 形式和细节上的变化。而本发明的范围由以下的权利要求规定。