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一种齐墩果酸哌嗪盐及其制备方法
    【技术领域】
     本发明属于化学合成领域， 特别涉及一种齐墩果酸哌嗪盐及其制备方法。背景技术 临床上， 齐墩果酸用于急、 慢性肝炎的辅助治疗。对肝损伤有一定的保护作用， 可 使升高的血清丙氨酸氨基转移酶下降， 促进肝细胞再生， 加速坏死组织的修复。 现代药理研 究表明， 齐墩果酸尚有降脂、 降糖、 抗肿瘤、 免疫双向调节等作用。目前， 齐墩果酸的除保肝 之外的开发利用尚不多见， 其临床制剂主要有片剂和胶囊两种。
     理化性质方面， 齐墩果酸为烷型五环三萜类化合物， 其粉末白色结晶性， 无臭， 无 味， 不溶于水。按生物药剂分类系统的分类， 该化合物属于低溶解度 - 高渗透性药物， 即 BCS-II 类药物。齐墩果酸的主要问题为水溶性差， 其在水中溶解度大致在 0.002mg/mL， 由 于水溶性差， 口服齐墩果酸几乎不可被吸收 ( 生物利用度不到 1％ )。另外， 通过处方前研 究表明， 齐墩果酸容易生成水化物和甲醇、 乙醇、 异丙醇的溶剂化物。
     提高药物溶解度有很多方法， 如通过结构修饰， 药剂学方法等。 为了改变其生物利 用度， 目前主要采用的是通过制剂手段来提高其溶解度。 在中国专利的检索中， 有将齐墩果 酸制成口腔崩解片 (200410044331.1 ； 200710068005.8)， 磷脂复合物 (200510081273.4)， 滴 丸 (200510013611.0 ； 200510032562.5 ； 03157672.9)， 脂 质 体 (200610106918.X)， 分散 片 (200810302500.5)， 乳糖缀合物 (02135748.X)， 纳米粉针 (200410060955.2)， 脂肪乳剂 (03125480.2) 等等。 然而， 通过制剂学手段提高溶解度往往成本较高。 同时， 由于齐墩果酸 容易生成水化物和甲醇、 乙醇、 异丙醇的溶剂化物， 因此简单的重结晶方法， 制剂学方法无 法避免其在制剂过程中以及长期贮存过程中的晶型转变。
     在不改变结构的基础上， 可替代的提高溶解度的方法还有盐型筛选。所谓的盐型 筛选， 是指将药物和不同的客体分子 ( 酸或碱 ) 反应生成盐， 药物与酸碱分子之间主要以离 子键形式发生作用。 《美国药典》 2006 版收载的产品中游离形式的药物占 44％， 以盐的形式 存在的药物占 56％。盐型不仅可以提高药物的溶解度或溶出度， 还可改善药物其他不理想 的物理化学或生物药剂学性质， 如降低吸湿性、 提高物理化学稳定性、 改变熔点、 改善研磨 性能、 便于制备纯化、 实现缓控释、 改善味觉和配伍性、 延长药物专利保护期等。
     然而， 国内应用盐型筛选提高齐墩果酸的溶解度的专利和报道较少。仅有申请号 为 99113945.3 的中国专利描述了齐墩果酸钠的合成。然而， 经研究证实齐墩果酸钠盐在相 对湿度 5％以上， 迅速生成水化物， 在 5 ～ 95％相对湿度范围内持续吸湿。 因此， 虽然制成齐 墩果酸钠可以很好的解决溶解度问题， 可是无法解决其吸湿性和物理稳定性的问题， 因此， 齐墩果酸钠在生产上是不可接受的。 目前， 在生产上和临床上， 齐墩果酸钠并未用作原料药 使用。
     发明内容
     因此， 本发明要解决的技术问题就是针对现有的齐墩果酸存在水溶性差， 生物利用度低的不足， 或者齐墩果酸盐吸湿性强、 不稳定的缺陷， 提供一种齐墩果酸盐及其制备方 法， 该齐墩果酸盐溶解度大， 吸湿性低、 物理化学稳定性高， 具有优良的临床应用前景。
     本发明解决上述技术问题所采用的技术方案之一是 ： 一种齐墩果酸盐， 其为齐墩 果酸哌嗪盐， 具有以下的化学结构通式 ：
     本发明还提供一种上述齐墩果酸哌嗪盐的晶体， 其特征在于， 该晶体的 X- 射线 粉末衍射图中， 在衍射角度 2θ ＝ 5.950， 7.290， 1.774， 12.019， 13.266， 14.188， 15.157， 15.594， 17.723， 20.151 度处有主峰 ； 而在 2θ ＝ 5.450， 11.034， 17.037， 18.065， 21.707， 26.046， 26.679， 27.256， 29.353 和 31.991 度 处 可 有 较 弱 的 峰 ； 其 中 2θ 值 误 差 范 围 为 ±0.2。
     本发明解决上述技术问题所采用的另一技术方案是 ： 一种齐墩果酸哌嗪盐的制备 方法， 包括以下步骤 ： 在极性溶剂或中等极性溶剂中， 将齐墩果酸与哌嗪进行中和反应， 形 成齐墩果酸哌嗪盐。
     本发明所述的中和反应可采用本领域常规的酸碱中和反应的方法和条件， 本发明 也对反应原料和反应条件进行了优化， 具体如下所述。
     本发明所述的中和反应中， 齐墩果酸的投料量与哌嗪的投料量的摩尔比较佳的为 1 ∶ 0.5 ～ 1 ∶ 1.2。反应溶剂的选择根据齐墩果酸自身的性质， 以及成盐后盐的性质来优 选。根据齐墩果酸自身的溶解度， 所述的极性溶剂或中等极性溶剂较佳的选自含水从零至 饱和的乙酸乙酯， 甲基乙基酮， 异丙醇， 甲醇， 乙醇， 1， 4- 二氧六环， 四氢呋喃， 乙酸异丙酯， 氯仿和二氯甲烷中的任何一种或多种。最佳的选自水饱和乙酸乙酯， 甲基乙基酮， 异丙醇 和 1， 4- 二氧六环中的任何一种或多种。反应溶剂与齐墩果酸的体积质量比较佳的为 10 ～ 100ml/g。 所述的中和反应较佳的在搅拌下进行， 搅拌的速率较佳的为 100 ～ 1000rpm。 所述 的中和反应的反应时间如本领域中常规的一样， 较佳的以检测反应完全为止， 一般为 1 ～ 24 小时 ； 所述的中和反应的反应温度如本领域中常规的一样， 较佳的达到所用反应溶剂沸 点以下 5 ～ 10 摄氏度， 加热回流的方法加热到所用反应溶剂沸点， 本发明较佳的为 35 ～ 75℃， 更佳的为 55 ～ 75℃。
     本发明所述的中和反应结束后， 反应溶液经过结晶即可获得晶体形的齐墩果酸哌 嗪盐。其中结晶的方法可以是本领域常规的结晶方法， 较佳的是溶剂挥发法， 反溶剂法， 冷 却法， 反溶剂 - 冷却法， 反溶剂 - 晶种法， 冷却 - 晶种法或反溶剂 - 冷却 - 晶种法。 溶剂挥发
     法一般只适合于初步筛选。反溶剂法， 冷却法， 反溶剂 - 冷却法， 反溶剂 - 晶种法， 冷却 - 晶 种法和反溶剂 - 冷却 - 晶种法， 适合在工业界广泛使用。
     所述的反溶剂法是指在齐墩果酸盐反应溶液中加入介电常数不一样的反溶剂， 使 药物盐的结晶析出的方法。对于反溶剂法， 溶剂和反溶剂的种类的选择， 加入反溶剂的温 度， 用量， 速率， 母液的浓度等都值得详细考察。 所使用的反溶剂主要根据溶剂的相容性、 极 性、 挥发性、 沸点来选择。本发明中反溶剂较佳的选自水， 乙腈， 含水从零至饱和的丙酮， 环 己烷， 正己烷， 庚烷和戊烷一种或多种， 更佳的选自水， 乙腈和庚烷。 反溶剂的加入量较佳的 是溶剂体积量的 1 ～ 10 倍， 更佳的为 3 ～ 5 倍。
     所述的冷却法是指将齐墩果酸盐的反应溶液加热到一定温度， 再将该反应溶液以 一定速率缓慢冷却， 使药物盐的结晶析出的方法。 冷却法中， 反应溶液温度较佳的可以加热 到所用溶剂沸点以下 5 ～ 10 摄氏度， 也可用加热回流的方法加热到所用溶剂沸点。冷却的 速率较佳的取值为 2 ～ 10℃ /h， 更佳的为 3 ～ 5℃ /h。冷却的速率直接影响晶核形成的速 率。 在一次成核过程中， 若冷却速率太快， 生成的晶体有可能爆发成核或产生次稳定型和无 定形， 后者可带来混晶、 物理稳定性、 化学稳定性发面的问题。 因此控制冷却速率极为重要。
     更佳的， 混合使用反溶剂法和冷却法， 即反溶剂 - 冷却法。所述的反溶剂 - 冷却法 是指在冷却析晶的某个时点以一定的速率加入反溶剂， 以提高或维持一定的过饱和度， 从 而提高结晶的效率和产率的方法。在产率过低的情况下， 冷却析晶的过程中可以加入反溶 剂提高过饱和度， 从而提高结晶的效率和产率。 或者， 更佳的， 混合使用反溶剂法和晶种法， 即反溶剂 - 晶种法。所述的反溶剂 - 晶种法是指在齐墩果酸盐的反应溶液中加入一定量的 一定大小的晶种和介电常数不一样的反溶剂， 使药物盐的结晶析出的方法。或者， 更佳的， 混合使用冷却法和晶种法， 即冷却 - 晶种法。所述的冷却 - 晶种法是指将齐墩果酸盐的反 应溶液加热到一定温度， 再将该溶液以一定速率缓慢冷却， 在一定温度下可加入一定量的 一定大小的晶种， 使药物盐的结晶析出的方法。
     本发明中， 晶种的使用可避免难以控制的一次成核， 已经在化工产品的放大实验 和生产中被广泛使用。晶种指的是用一定工艺小批量生产的具有某晶型的晶体， 经过结晶 工艺本身或进一步加工粉碎成一定尺度， 用于在结晶放大工艺中使用， 以避免一次成核的 晶体粒子。所述晶种可用较小或相同规模的合成和结晶工艺获得一定尺寸的同种晶型的 晶体， 然后用物理或机械的方法粉碎成更小的所需尺寸的晶体， 即为晶种。投入晶种的温 度、 方式、 数量和晶种的大小都应进行详细考察。本发明中， 加入晶种的温度较佳的取值为 30 ～ 60 ℃， 更佳的是 35 ～ 55 ℃ ； 加入晶种的量可以取值为 0.1 ～ 1 ％， 更佳的是 0.3 ～ 0.7％， 所述的百分比是晶种量占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的百分比 ； 加入晶种的粒径较佳 的是 10 ～ 500μm， 更佳的是 20 ～ 400μm。在结晶的所有过程中， 结晶较佳的在搅拌状态 下进行的， 搅拌速率较佳的是 100 ～ 1000rpm， 更佳的是 300 ～ 700rpm。搅拌速率在小试和 放大实验中可以通过数学方法转化。
     更佳的， 混合使用反溶剂法、 冷却法和晶种法， 即反溶剂 - 冷却 - 晶种法。所述的 反溶剂 - 冷却 - 晶种法是指冷却析晶的某个时点投入晶种， 以诱使结晶的发生， 并在冷却析 晶的另一时点以一定的速率加入反溶剂， 以提高或维持一定的过饱和度， 从而提高结晶的 效率和产率的方法。
     本发明中， 所述的晶体析出后按常规的方法过滤， 洗涤， 干燥即得晶体形齐墩果酸哌嗪盐。 本发明所用的原料或试剂除特别说明之外， 均市售可得。
     相比于现有技术， 本发明的有益效果如下 ： 本发明的齐墩果酸哌嗪盐不但溶解度 和溶出速率好， 而且吸湿性低， 稳定性高， 具有较高的生物利用度， 因此本发明提供了一种 具有优良临床应用前景的齐墩果酸药用盐的形式。
     附图说明 以下结合附图说明本发明的特征和有益效果。
     图 1 是齐墩果酸哌嗪盐的偏光显微镜图。
     图 2 是齐墩果酸哌嗪盐的 DSC/TGA 图。
     图 3 是齐墩果酸哌嗪盐的 X- 射线粉末衍射图。
     图 4 是齐墩果酸哌嗪盐的动态吸湿等温线曲线图。
     图 5 是齐墩果酸哌嗪盐的溶解度。 OA 为齐墩果酸。 SGF 是指人工模拟胃液， FaSSIF 是指空腹下人工模拟肠液， FeSSIF 是指进食后的人工模拟肠液 ( 见中国药典或美国药典 )。
     具体实施方式 下面用实施例来进一步说明本发明， 但本发明并不受其限制。下列实施例中未注 明具体条件的实验方法， 通常按照常规条件， 或按照制造厂商所建议的条件。 实施例中所述 的 “室温” 是指进行试验的操作间的温度， 一般为 5 ～ 30℃。
     实施例 1
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 4L 异 丙醇， 75℃加热至溶解， 加入哌嗪的甲醇溶液 ( 哌嗪 9.43g， 即 0.1095mol， 甲醇 0.438L)， 恒 温， 100rpm 搅拌 2h， 以 5℃ /h 的冷却速率降至室温， 析出晶体， 过滤， 用异丙醇洗涤， 45℃真 空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 80％。
     实施例 2
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 4L 水饱 和乙酸乙酯， 75℃加热至溶解， 加入哌嗪的乙酸乙酯溶液 ( 哌嗪 9.43g， 即 0.1095mol， 乙酸 乙酯 0.438L)， 恒温， 300rpm 搅拌 15min， 以 2℃ /h 的冷却速率降至室温， 析出晶体， 过滤， 用 水饱和乙酸乙酯洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。 齐墩果酸哌嗪盐 产率为 93％。所得晶体粒径为 500μm， 用球磨机、 万能粉碎机、 气流粉碎机、 锤击式粉碎机 或冲击式粉碎机等粉碎成 10μm、 30μm、 50μm、 100μm、 300μm 等不同粒径晶种， 供以下实 施例使用。
     实施例 3
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 4L 异丙 醇， 75℃加热至溶解， 加入哌嗪的异丙醇溶液 ( 哌嗪 9.43g， 即 0.1095mol， 异丙醇 0.438L)， 恒 温， 200rpm 搅 拌 15min， 以 5 ℃ /h 的 冷 却 速 率 降 至 45 ℃， 加 入 粒 径 在 10μm 的 晶 种 (0.1094g， 均匀混悬在 100mL 水中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 0.1％ )， 以 5℃ / h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用异丙醇洗涤 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐 墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 92％。
     实施例 4
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 20L 乙 酸乙酯， 70℃加热至溶解， 加入哌嗪的乙酸乙酯溶液 ( 哌嗪 9.43g， 即 0.1095mol， 乙酸乙酯 0.438L)， 恒温， 400rpm 搅拌 15min， 以 3 ℃ /h 的冷却速率降至室温， 析出晶体， 过滤， 用乙 酸乙酯洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 90％。
     实施例 5
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 10L 甲基乙基酮， 70 ℃加热至溶解， 加入哌嗪的甲基乙基酮溶液 ( 哌嗪 9.43g， 即 0.1095mol， 甲基乙基酮 0.438L)， 恒温， 500rpm 搅拌 15min， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 55℃， 加入粒径 在 50μm 的晶种 (0.4g， 均匀混悬在 100mL 庚烷中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 0.3655％ )， 缓慢加入 55℃的 20L 庚烷， 以 7℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用 甲基乙基酮洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。 齐墩果酸哌嗪盐产率 为 99％。
     实施例 6 齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 20L 甲 醇， 60℃加热至溶解， 加入哌嗪的甲醇溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 甲醇 0.438L)， 恒温， 600rpm 搅拌 15min， 以 4℃ /h 的冷却速率降至 45℃， 加入粒径在 100μm 的晶种 (1.0g， 均匀 混悬在 100mL 甲醇中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 0.9138％ )， 缓慢加入 45℃的 60L 乙腈， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用甲醇洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 94％。
     实施例 7
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 20L 乙 醇， 70℃加热至溶解， 加入哌嗪的乙醇溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 乙醇 0.438L)， 恒温， 700rpm 搅拌 15min， 以 6℃ /h 的冷却速率降至 55℃， 加入粒径在 300μm 的晶种 (0.6g， 均 匀混悬在 50mL 乙醇中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 0.5483％ )， 缓慢加入 55℃的 60L 水， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用水洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白 色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 97％。
     实施例 8
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 3L 1， 4- 二氧六环， 75℃加热至溶解， 加入哌嗪的 1， 4- 二氧六环溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 1， 4- 二氧六环 0.438L)， 恒温， 800rpm 搅拌 15min， 以 7℃ /h 的冷却速率降至 45℃， 加入 30L 正己烷， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用正己烷洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 92％。
     实施例 9
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 3L 1， 4- 二氧六环， 75℃加热至溶解， 加入哌嗪的 1， 4- 二氧六环溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 1， 4- 二氧六环 0.438L)， 恒温， 800rpm 搅拌 15min， 以 7℃ /h 的冷却速率降至 45℃， 加入 30L 环己烷， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用环己烷洗涤， 45℃真空干燥 24h，
     得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 92％。
     实施例 10
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 1L 四 氢呋喃， 60℃加热至溶解， 加入哌嗪的四氢呋喃溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 四氢呋喃 0.438L)， 恒温， 900rpm 搅拌 15min， 缓慢加入 60 ℃的 20L 庚烷， 以 8 ℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 用庚烷洗涤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。 齐墩 果酸哌嗪盐产率为 91％。
     实施例 11
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 20L 乙 酸异丙酯， 75 ℃加热至溶解， 加入哌嗪的甲醇溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 乙酸异丙 酯 0.438L)， 恒温， 1000rpm 搅拌 15min， 加入以 9 ℃ /h 的冷却速率降至 55 ℃， 加入粒径在 300μm 的晶种 (0.9g， 均匀混悬在 100mL 乙酸异丙酯中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量 的 0.8224％ )， 以 9℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固 体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 90％。
     实施例 12 齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 15L 氯 仿， 55℃加热至溶解， 加入哌嗪的氯仿溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 氯仿 0.438L)， 恒温， 500rpm 搅拌 15min， 以 10℃ /h 的冷却速率降至 45℃， 加入粒径在 300μm 的晶种 (1.0g， 均 匀混悬在 100mL 甲醇中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 0.9138％ )， 加入 45℃的 45L 丙酮， 以 10℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐 墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 89％。
     实施例 13
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 20L 二 氯甲烷， 35℃加热至溶解， 加入哌嗪的甲醇溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 甲醇 0.438L)， 恒温， 500rpm 搅拌 15min， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 30℃， 加入粒径在 500μm 的晶种 (0.5g， 均匀混悬在 100mL 甲醇中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 0.4569％ )， 加入 30℃的 60L 戊烷， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 90％。
     实施例 14
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 4L 异丙醇， 75 ℃加热至溶解， 加入哌嗪的异丙醇醇溶液 ( 哌嗪 22.63g， 即 0.263mol， 异丙醇 0.438L)， 恒温， 500rpm 搅拌 15min， 以 5 ℃ /h 的冷却速率降至 30 ℃， 加入粒径在 30μm 的 晶种 (1.094g， 均匀混悬在 100mL 甲醇中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 1％ )， 加入 30℃的 60L 水饱和的丙酮， 以 5℃ /h 的冷却速率降至 4℃， 析出晶体， 过滤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 90％。
     实施例 15
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 10L 异丙醇， 室温搅拌至溶解， 加入哌嗪的异丙醇溶液 ( 哌嗪 14.15g， 即 0.164mol， 异丙醇 0.438L)， 恒温， 500rpm 搅拌 15min， 加入粒径在 30μm 的晶种 (1.094g， 均匀混悬在 100mL
     异丙醇中， 该晶种占齐墩果酸哌嗪盐理论产量的 1％ )， 加入 30℃的 30L 水饱和的丙酮， 析 出晶体， 过滤， 45℃真空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 80％。
     实施例 16
     齐墩果酸哌嗪盐的合成 ： 将 100g(0.219mol) 齐墩果酸投入反应釜中， 加入 10L 异丙醇， 室温搅拌至溶解， 加入哌嗪的异丙醇溶液 ( 哌嗪 18.86g， 即 0.219mol， 异丙醇 0.438L)， 恒温， 500rpm 搅拌 15min， 加入 30℃的 30L 水饱和的丙酮， 析出晶体， 过滤， 45℃真 空干燥 24h， 得白色固体， 即齐墩果酸哌嗪盐。齐墩果酸哌嗪盐产率为 75％。
     下面通过试验例来检验上述制备的齐墩果酸哌嗪盐的物理化学性质， 进一步说明 本发明的有益效果。
     试验实施例 1 偏光显微镜法
     对实施例 1 制备的结晶， 应用偏光显微镜进行检测， 目镜放大 10 倍， 物镜放大 20 倍， 检测结果见图 1。 从图 1 可见 ： 晶体具有明显双折射现象 ； 其晶癖为棒状 ； 其粒径在 20 ～ 100μm 范围内。
     试验实施例 2 差动热分析法与热重分析
     对 实 施 例 1 制 备 的 结 晶， 进 行 差 示 扫 描 量 热 (differential scanningcalorimeter， DSC) 与热重分析 (thermogravimetric analysis， TGA)， 差示扫描量 热检测条件是 ： 升温速率为 5℃ /min ； 升温范围为 25 ～ 350℃； 氮气流速 50mL/min ； 热重分 析检测条件是 ： 升温速率为 5℃ /min ； 升温范围为 25 ～ 350℃； 天平氮气流速 40mL/min ； 样 本氮气流速 60mL/min ； 检测结果见图 2。从图 2 可见 ： 晶体失去哌嗪温度为 203.78℃， 加热 到 250℃时， 齐墩果酸哌嗪盐失去 10.79％重量 ； 失去哌嗪后， 齐墩果酸于 311.94℃熔融降 解。
     试验实施例 3X- 射线粉末衍射法
     对实施例 1 制备的结晶， 进行 X- 射线粉末衍射检测， 检测条件是 ： X- 射线源 ： CuK( 波长为 )； 工作电压 ： 40KV ； 工作电流强度 ： 40mA ； 检测器 ： LynxEye 检测器 ； 扫描角度 ： 4 ～ 40° (2-theta) ； 步长值 ： 0.05°； 扫描速度 ： 1 秒 / 步长， 检测结果见图 3。 从 图 3 可见 ： 晶体特征 X- 射线粉末衍射花样在 5.450， 5.950， 7.290， 11.034， 1.774， 12.019， 13.266， 14.188， 15.157， 15.594， 17.037， 17.723， 18.065， 20.151， 21.707， 26.046， 26.679， 27.256， 29.353， 31.9912-theta 角处有衍射峰。
     试验实施例 4 吸湿性测定法
     对实施例 1 制备的结晶， 测定吸湿性， 检测步骤和条件如下 ： 动态水份吸湿仪 (DVS Advantage， Surface Measurement System Ltd.) ； 实验温度 ： 25℃； 湿度循环范围 ： 0％的相 对湿度到 95％的相对湿度 ； 步长值 ： 5％的相对湿度 ； 增重平衡标准 ： 5 分钟内重量变化小 于 0.01％ ； 最长平衡时间 ： 120 分钟。检测结果见图 4。从图 4 可见 ： 晶体在 0％的相对湿 度到 95％的相对湿度之间增重 0.2040％， 齐墩果酸哌嗪盐具有低吸湿性的优点。
     试验实施例 5 溶解度测定法
     对实施例 1 制备的结晶， 测定溶解度， 检测步骤或条件具体如下 ： 分别精密称取 10mg 化合物于不同小瓶中， 加入人工模拟胃液， 空腹下人工模拟肠液， 进食后的人工模拟肠 液 ( 见中国药典或美国药典 )， 平衡至溶解度不再发生变化， HPLC 测定药物浓度， 检测结果见图 5。从图 5 可见 ： 齐墩果酸在人工模拟胃液， 空腹下人工模拟肠液， 进食后的人工模拟 肠液中溶解度分别为 0.081， 0.001， 0.038mg/mL ； 齐墩果酸哌嗪盐在人工模拟胃液， 空腹下 人工模拟肠液， 进食后的人工模拟肠液中溶解度分别为 0.551， 0.053 和 0.173mg/mL ； 可知， 齐墩果酸哌嗪盐溶解度相比于齐墩果酸有明显改善。
     试验实施例 6 反离子测定法
     将实施例 1 制备的齐墩果酸哌嗪盐结晶用高效液相方法进行定量， 实验方法为 ： Waters 高效液相仪 (2695-2998)， 检测器为蒸发光散射， 蒸发管温度为 50℃， 雾化气压力为 3.4bar， 液相柱为 YMC 的氰基柱 (5μm， 4.6×250mm)， SN 号 ： 042578321 ； 流动相为 3％ (v/ v) 硝酸的水 ： 乙腈 (5 ∶ 95) ； 进样体积为 5μL， 柱温为 30 ℃ ； 流动相流速 1mL/min ； 单针 时间 ： 10min。用外标法定量得齐墩果酸哌嗪盐中含有哌嗪为 8.626％ (wt) ； 其理论含量为 8.618％ (wt)。该实验证实齐墩果酸哌嗪盐含有 1 分子的齐墩果酸和 0.5 分子的哌嗪。