对于抗真菌抗菌素的研究导致发现了普拉定霉素（pradimicin）类化合物。普拉定霉素类化合物是由天然存在的有机体如放线菌得到的，它们保护小鼠免受致命的全身感染如白色念珠菌、新型隐球菌和烟曲霉。 美国专利4，870，165号、4，973，673号、4，990，497号、4，992，425号、5，053，395号和5，091，418号公开了普拉定霉素类化合物，它们分别是抗真菌剂和α-葡糖苷酶抑制剂。
式A包括一类已知的普拉定霉素类化合物：
其中Ra是H、CH3或CH2OH;
Rb是NH2、OH或NHCH3;以及
Rc是H或β-D-木糖。
所有这些化合物在C-11位都具有甲氧基或OCH3基团。
最近发现了含有11-O-木糖基的新的取代的普拉定霉素类化合物，称作普拉定霉素T1、T2和11-O-去木糖基普拉定霉素T1。T1和T2是通过放线菌菌株AA3798（按照布达佩斯条约保藏的培养物，ATCC No.55288）的发酵而生成的。第三个化合物由T1衍生得到。
式B包括了这类木糖基取代的普拉定霉素：
其中Rd是H或β-D-木糖，Re是H或（即β-L-木糖）。在普拉定霉素T1中，Rd是β-D-木糖，Re是β-L-木糖，在普拉定霉素T2中，Rd是H，Re是β-L-木糖。在11-O-去木糖基普拉定霉素T1中，Rd是β-D-木糖，Re是H。
业已发现，可以由木糖基普拉定霉素类化合物制备新的生物活性的普拉定霉素衍生物。本发明化合物在普拉定霉素分子的C-11位上没有甲氧基或木糖基。它们在11-位上没有甲氧基和木糖基部分。在化学上它们不同于其他已知的抗真菌抗菌素。
除非另有说明，所述的全部百分比均为基于组合物的总重量的重量百分比。
本发明涉及新化合物、其制备方法，以及使用这些化合物的方法及组合物。
本文所述的普拉定霉素类化合物具有类似于本文提及的木糖基普拉定霉素类化合物地生物活性。
本发明化合物符合结构式Ⅰ：
其中R1是H、CH3或CH2OH;
R2是OH或NR5R6;
R3是H或（β-D-木糖）
R5和R6是H或CH3;
R4是H、OH、OR7、OCH2R8、OSO2CF3、N（CH3）2、CONH2或CN;
R7是C2-5烷基、C2-5链烯基或C2-5卤代烷基（卤素＝Cl或F）;以及
R8是苯基、COOH或CONH2，条件是当R4是OH时R1不是H。
表Ⅰ中列出了一类优选的化合物以及对R1、R2和R3的适当的定义。在化合物ⅠA-F中R4总为OH。
因此，这些化合物是式Ⅰ-Ⅰ化合物：
其中R1、R2和R3具有表Ⅰ中所给出的定义。
表Ⅰ中化合物的制备是用芳基醚裂解试剂如LiI（I.T.Harrison等人，Chem.Commun.，616，1969）处理11-OMe-普拉定霉素类（即11-甲氧基普拉定霉素类），该反应是在适当的有机溶剂如可力丁、二甲基吡啶或二甲基甲酰胺中，在有或没有酸清除剂如分子筛4A的存在下，在约160-200℃下加热，反应时间维持在约30分钟（1/2小时）至约16小时完成的。产物通过C18反相柱纯化，用10-30%乙腈-磷酸盐缓冲剂（pH 3.5）洗脱。
另一类有用的普拉定霉素衍生物是由式Ⅱ所包括的那些化合物：
其中R9是H或CH3;
R10是OH或NHCH3
R11是H或β-D-木糖;以及
R12是H、OC2H5、OCH2CH2F、OCH2CH＝CH2、OCH2-苯基（OCH2Ph）、OCH2COOH、OCH2CONH2、N（CH3）2、CONH2或CN。
这些衍生物是通过烷基化反应或通过下列步骤由11-羟基普拉定菌素类化合物制得：
（1）三氟甲磺酰化反应;
（2）氢化物还原反应或亲核取代反应，及
（3）除去羧基和/或氨基保护基。
表Ⅱ列出了一类优选的式Ⅱ化合物以及相应的R9、R10、R11和R12的定义。
表Ⅲ示出了用于制备化合物ⅡA至ⅡL的合成（17-COOCH3）中间体化合物A1至D1：
Cbz＝苄氧羰基
Tf＝三氟甲磺酰基
表Ⅱ的C-11改良的衍生物由上面11-羟基衍生物来制备，并包括11-O-（取代的）烷基普拉定霉素T1s，其制备是在有机溶剂如二甲亚砜中，在碱金属盐如K2CO3存在下，用适当的（并任选取代的）烷基-或芳烷基卤如乙基溴、2-氟乙基溴、烯丙基溴、苄基溴、溴乙酸乙酯或碘乙酰胺处理羧基被保护的11-羟基普拉定霉素T1达2至16小时，然后通过碱性水解脱去保护基并通过反相柱色谱法纯化。通过在1H-NMR谱图上观察到的在11-O-烷基-质子与10-和12-质子之间的核极化效应，确定了新引人的烷基的位置在11-OH位置上。
这类C-11改良的衍生物包括普拉定霉素A、B和T1的11-脱氧、11-二甲氨基、11-氰基和11-氨基甲酰基衍生物，它们是通过如下接续反应由羧基和氨基被保护的11-羟基普拉定霉素类化合物制备的：
1）11-羟基的选择性三氟甲磺酰化反应，即在碱性有机溶剂如吡啶中在有机碱如二甲氨基吡啶存在下，在0℃至室温下用三氟甲磺酰化试剂如N-苯基三氟甲磺酰亚胺或三氟甲磺酸酐处理30分钟至16小时，然后通过在反相柱上进行色谱法纯化，得到相应的11-O-三氟甲磺酰基中间体，产率58-85%。其结构通过1H-NMR谱图中10-和12-质子的特征性低场位移而被证实;2）在有机溶剂如含有通过共同加入甲酸和三乙胺产生的氢化物离子的DMF中，在钯（O）催化剂存在下，如四（三苯基膦）钯（O）或由乙酸钯和三苯基膦就地生成的上述催化剂的存在下，在室温或在50-100℃加热下使11-O-三氟甲磺酸酯与亲核碱如二甲胺或与三烷基取代的金属试剂如三丁基氰化锡反应30分钟至16小时，然后通过碱性水解，脱去羧基和氨基的保护基，并任选氢化作用和用C18反相柱色谱法纯化，得到相应的11-改良的衍生物。
体外抗真菌活性
在用0.06M磷酸盐缓冲的（pH 7.0）酵母菌形态学琼脂（YMA，Difco Laboratories，USA）上测定了本发明化合物的体外抗真菌活性（MIC）。在佩特里细菌培养皿中将九份熔融的琼脂与一份抗菌素稀释剂混合。将含有2×106个细胞/ml的5μl悬浮液点在琼脂片的表面上。将琼脂片在28℃下保温，在保温40小时后记录诸MIC值。结果总结于表1中，所有的式Ⅰ-Ⅰ的11-羟基衍生物均具有抗各种真菌的活性。式Ⅱ的C-11改良的衍生物表现出各种抗真菌活性。
表Ⅳ：普拉定霉素的C-11改良的衍生物的体外抗真菌活性：MIC(μg/ml)化合物Ca-4Ct-12Cn-2普拉定霉素A6.312.51.6IA6.3253.1IC6.312.51.6ID6.312.53.1IE6.3256.3IF6.312.512.5ⅡA3.112.51.6ⅡB3.16.31.6ⅡC6.312.53.1ⅡD＞100＞10012.5ⅡG6.312.51.6ⅡI6.312.56.3ⅡJ12.5＞10050ⅡK12.5256.3ⅡL12.5256.3
Ca-4：白色念珠菌A9540
Ct-12：热带假丝酵母菌IF010241
Cn-2：新型隐球菌IAM4514
11-木糖基前体
这部分描述了11-木糖基化合物的制备，由它们可衍生出本发明化合物。讨论了这些化合物，其特性及其生物性质。
A.化合物
称作普拉定霉素T1和T2、11-O-去木糖基普拉定霉素T1的抗菌物质是通过放线菌菌株AA3798（ATCC保藏号55288）的发酵作用制备的。后面将讨论这些化合物在治疗感染性疾病中的用途，所述疾病是由对所述抗菌素敏感的微生物引起的。
结构B的特性为所有三种化合物所共有。如下所示的Rd和Re的变更产生出各种结构。
在努力筛选普拉定霉素的水溶性类似物时，申请人也发现一种稀有的放线菌类（actinomycete）No.AA3798产生了普拉定霉素族抗菌素的新成员。菌株AA3798是在1989年1月29日由在日本东京Nerima采集的土样中分离出来的。
根据国际承认用于专利程序的微生物保藏的布达佩斯条约，菌株AA3798的培养物由American Type Culture Collection保藏，当本申请被授予专利权时，对于公众获得被保藏的微生物的所有限制都将不可改变地被取消。已指定保藏的培养物的保藏号为ATCC55288。
菌株AA3798的分类学
用于研究菌株的培养和生理学特性的培养基是根据下列文献中建议的方法制备的：Shirling和Gottlieb，“Methods for Characterization of Streptomyces Species”，Intern.J.Syst.Bact.，1966，16∶313-340;Waksman，The Actinomycetes，Vol.Ⅱ,“Classification，Identification and Description of Genera and Species”，pp.328-334，由The Williams and Wilkins Company，Baltimore，1961年出版;Arai，Culture Media for Actinomycetes，由The Society for Actinomycetes Japan，1975年出版。在32℃保温两至四周后观察培养物。根据Manual of Color Names（Japan Color Enterprise Company，Ltd.，1987）给出颜色名称和色调号（见表1）。
形态学
在19至40℃的任何温度下，菌株AA3798很好地生长在酵母提取物-麦芽提取物琼脂（ISP-2）、无机盐-淀粉琼脂（ISP-4）、酵母淀粉琼脂和贝内特琼脂上。菌落被粉状至丝绒状空气菌丝体厚厚地覆盖着。底物菌丝体很好地生长并不规则地分支。在某些琼脂培养基如水琼脂上，这种底物菌丝体已经分裂且不规则地呈锯齿状分裂成短柱成分。这种空气菌丝体是大量的，并且是长的、适度分支的、直的或不规则弯曲的。空气菌丝体是如此细（直径0.3μm）以致于在光学显微镜下观察不到其孢子形成，但扫描电子显微镜却显示它们完全分裂成孢子。孢子是杆状的且测得其大小为0.3×1.0-2.0μm，具有光滑的表面。这些孢子是不能动的。
B.特性
菌株AA3798具有白色的空气菌丝体;当延时保温时，空气菌丝体有时变成略呈粉红色的白色。在有机培养基上的营养性和可扩散性色素的颜色从柔和的粉红色变为暗红色。通过加入0.1N HCl使颜色从浅的略呈红色的黄色变到深的略呈黄色的橙色。菌株AA3798在各种培养基上的培养特性列于表Ⅴ中。
生理学特性
表Ⅵ和Ⅶ分别列出了菌株AA3798的生理学特性及碳源的使用。维生素对于菌株的生长不是必需的。
+：中等程度生长，++：大量生长
用抗菌盘（Tridisk，Eiken Chemical Co.，Ltd）检验菌株AA3798的抗菌敏感性。将抗菌盘放在已接种了菌株AA3798（4%接种物）的酵母-葡萄糖-麦芽琼脂（酵母提取物0.1%、葡萄糖1%、麦芽提取物0.1%、CaCl2∶2H2O 0.05%和琼脂1.5%）的表面上，然后将盘在37℃保温4天。
菌株AA 3798对下列抗菌素具有抵抗性：20μg氨苄青霉素、10μg头孢菌素Ⅳ、50μg磷霉素、15μg林可霉素、5μg庆大霉素、10μg妥布霉素、15μg萘啶酮酸、300U多粘菌素B、10μg红霉素和15μg交沙霉素。菌株AA 3798对下列抗菌素是敏感的：1μg克拉维酸、2μg羧噻吩青霉素、30μg四环素、10μg氯霉素、30μg卡那霉素、2μg氟哌酸和50U粘菌素。
细胞壁的化学类型
全细胞的组成是通过下列文献中所述方法来分析的：Becker和Lechevalier，“Rapid Differentiation between Nocardia and Streptomgces by paper Chromatography of whole Cell Hydrolysate”，Appl Microbiol.，1964，12：421-423和“Chemical Compositions of Cell-Wall preparations from Strains of Various Form-Genera of Aerobic Actinomycetes”，Appl Microbiol.，1965，13：236-243。菌株AA 3798含有内消旋-二氨基庚二酸、葡萄糖、葡糖胺、半乳糖和少量核糖、甘露糖和木糖，但未检测到madurose和阿拉伯糖，这表明该菌株的细胞壁是IIIC型。用Minnikin等人在“Differentiation of Mycobacterium，Nocardia，and Related Taxa by Thin-Layer Chromatographic Analysis of Whole-Organism Methanolysates”，J.Gen.Microbiol.，1975，88：200-204中的方法未检测到霉菌酸。用Collins等人在“A Note on the Separation of Natural Mixtures of Bacterial Menaquinones Using Reverse-Phase Thin-Layer Chromatography”，J.Appl.Bacteriol.，1980，48：277-282中的方法，对于甲基萘醌类组合物的分析表明其组成为：60% MK-9（H8）、18% MK-9（H6）、6% MK-9（H4）和6% MK-9（H10）。用Suzuki等人在“Taxonomic Significance of Cellular Fatty Acid Composition in some Coryneform Bacteria”，Int.J.Syst.Bacteriol.，1983，33：188-200中的方法测定的全细胞脂肪酸的组成为：34% 14-甲基十五烷酸（异16∶0）、21% 14-甲基十六烷酸（反异17∶0）、14% 15-甲基十六烷酸（异17∶0）和10% 10-甲基十八烷酸（10Me 18∶0）。
根据H.A. Lechevalier所述的放线菌类的属鉴定指南（在Bergey′s Manual of Systematic Bacteriology，Vol.4，Eds.S.T.Williams等人，pp.2344-2347，1989，Williams & Wilkins中）内消旋-二氨基庚二酸以及无诊断性的糖和在空气菌丝体上形成的长链孢子的存在表明，菌株AA3798属于诺卡氏菌属（Nocardiosis），这是唯一可能的属。然而，根据Grund和Kroppenstedt所述的定义（“Fermentation，Chemotaxonomy and Numerical Taxonomy of the Genus Nocardiosis Meyer”，1976，Int.J.Syst.Bacteriol.40：5-11，1990），由菌株AA 3798得到的甲基萘醌类和脂肪酸的主要成分完全不同于诺卡氏菌属的主要成分。由于以前未曾报道过具有如上所述细胞壁化学类型的放线菌类有机体，所以目前不可能确定菌株AA 3798的属，尽管关于新属的建议可能是合理的。因此，菌株AA 3798被确认为未鉴定的放线菌类。
本发明的新抗菌素是在适当的液体营养培养基的有氧发酵过程中产生的，该发酵作用是在控制条件下通过用上面菌株或其变异体或突变体的接种来进行的。液体营养培养基如用于生产一般抗菌素的液体营养培养基均适于生产普拉霉素T1和T2。合乎需要的碳源为葡萄糖、甘油、果糖、蔗糖、木糖、淀粉及其他碳水化合物，优选的氮源是大豆粉、棉籽粉、胨、肉提取物、鱼粉、玉米浸渍液等等。
合乎需要的无机盐是氯化钴、碳酸钙和磷酸钾，如果需要便将其加入。优选的液体培养基是实施例2中所述的培养基。另一更适宜的培养基是FR-22，其组成为大豆粉（1-3%）、葡萄糖（1-3%）、D-天冬氨酸（0.1-0.2%）和CaCO3（0.05-0.3%）.Adekanol、硅氧烷等被用作消泡剂。作为熟练于发酵作用的每一位微生物学家都会认识到、普拉定霉素T1和T2的产率和比例随着发酵条件和所用的菌株和/或培养基的不同而变化。较好的发酵条件为在pH5-8、20-37℃下有氧培养5-14天，优选在pH6-7、28-34℃下有氧培养6-12天。
普拉定霉素T1和T2的产率可以在发酵过程中用常规技术很容易地监测，如薄层色谱法、HPLC，可见光吸收和抗念珠菌属活性。
分离和纯化
为了从发酵液体培养基中分离出普拉定霉素T1和T2，可以适当地使用通常用于将微生物产生的代谢产物从其培养过的液体培养基中分离出来的分离方法。由于普拉定霉素T1和T2是水溶性的酸性物质并主要产生在发酵液体培养基中，所以它们适宜通过用于亲水性酸性物质的常规方法来回收，如有机浴剂萃取，离子交换树脂、酸性沉淀、分配色谱法等;这些方法可以单独使用或结合使用。例如，在发酵完成后，将全部发酵液体培养基离心或过滤。将得到的上清液或滤液吸附在高度多孔的聚合物树脂如Diaion HP-20（Mitsubishi Kasei Co.）上，用与水混溶的有机溶剂如甲醇、乙腈或丙酮洗脱。将洗脱液真空浓缩。在丙酮中沉淀或冷冻干燥，得到粗的普拉定霉素T1和T2。为了纯化，可将此粗产物加到反相硅胶柱如YMC-ODS A60（Yamamura Chemical Lab）上，用乙腈：0.15%磷酸盐缓冲剂（pH3.5）14.5∶85.5，v/v）洗脱，得到纯的普拉定霉素T1和T2。
可将普拉定霉素T1转化为其11-O-去木糖基衍生物。在碱性介质中加热普拉定霉素T1足够长的时间以使11-O-位的木糖基解离，便得到相应的11-O-去木糖基衍生物。所用溶剂可以是例如二噁烷、四氢呋喃、水、低级链烷醇或其混合物，可以使用碱性氢氧化物，例如氢氧化钠、氢氧化锂;碳酸钾。温度可以从约60℃至约100℃，或溶剂的回流温度。反应时间可以为约1至10小时，这取决于所用的反应条件。
接种培养
使放线菌类菌株AA 3798在YSM琼脂斜面上于32℃下繁殖20天，所述琼脂的组成为：可溶性淀粉1%、酵母提取物（Difco Laboratories）0.1%、大豆胨（Difco Laboratories）0.1%、CaCl2·2H2O 0.05%和琼脂1.6%。将一部分成熟的琼脂斜面接种进入含100ml培养基V15-1的500ml埃伦美厄烧瓶内（所述培养基的组成为：葡萄糖1.5%、胨（Daigo Eiyo Co.）0.2%、NZ-case（Scheffield products）0.2%、肉提取物（Mikuni Kogyo Co.）1.0%、NaNO30.2%、K2HPO40.1%、MgSO4·7H2O 0.05%和CaCl2·2H2O 0.05%），然后将其在以200rpm速度旋转的旋转摇动器上在32℃下保温5天。将所得到的营养菌丝体洗涤并用一半体积的20%甘油水溶液再悬浮，然后贮存在-80℃下。用于玻瓶发酵的接种培养物是通过在500ml埃伦美厄烧瓶中将1ml冷冻的营养菌丝体接种在100ml培养基V15-1中并在32℃下震荡4天来制备的。
玻瓶发酵
将在上述接种培养实施例中所述的每份5ml的接种培养物转移到含有100ml生产培养基84B的500ml埃伦美厄烧瓶中，所述培养基的组成为：大豆粉（Nikko Seiyu Co.）3%、Pharmamedia（Trader′s protein）0.5%、葡萄糖3%、酵母提取物（Oriental Yeast Co.）0.1%和CaCO30.3%。在高压灭菌前将pH值调节到7.0。在以200rpm速度操作的旋转摇动器上于28℃下进行发酵12天。通过测定在0.02N NaOH∶MeOH（1∶1）溶液中在500nm的可见光吸收来监测抗菌素的产率。为定量分析普拉定霉素T1和T2，将上清液用二甲亚砜稀释10倍，过滤（Ekicrodisc 13CR，孔径：0.45μm，Gelman Science Japan，Ltd.），滤液（10μl）的分析用HPLC法，在Excel pak SIL-C185R（Yokogawa Electronic Co.，Ltd.）上，用流速为1ml/min的乙腈：0.15%磷酸盐缓冲剂（pH3.5）（19∶81）作流动相，在460nm检测。在发酵12天后，普拉定霉素T1和T2的总滴度达到约900μg/ml（普拉定霉素T1∶680μg/ml，普拉定霉素T2∶230μg/ml）。
玻瓶发酵的另一方法
将在上述接种培养实施例中所述的每份5ml的接种培养物转移到含有100ml称作FR-22的生产培养基的500ml埃伦美厄烧瓶中，所述培养基的组成为：脱脂大豆粉3%、葡萄糖3%、D-天冬氨酸0.2%和CaCO30.3%（在高压灭菌前将pH值调节到7.0）。在旋转摇动器上于28℃下进行发酵8天，在此期间抗菌素的产率达到约1400μg/ml（普拉定霉素T1∶820μg/ml，普拉定霉素T2：520μg/ml）。
普拉霉素T1和T2的分离
将“玻瓶发酵”中所述的发酵液体培养基以3，000rpm速度离心20分钟。将上清液（3.5L）吸附在Diaion HP-20柱（2.2L）上。将该树脂用水（7L）和20%甲醇水溶液（5L）洗涤后，用40%甲醇水溶液（5.3L）洗脱。将洗脱液真空浓缩并冻干，得到粗固体（5.9g）。将该固体（4.9g）溶于水（2L）中，用1NHCl调节pH值至2.0，产物用正丁醇（2L）萃取。有机相用碱水（pH8.5，0.6L）反萃取，调节水层pH值至7.0后将其浓缩。将含水残余物（0.2L）滴加到丙酮（1.8L）中，过滤收集所得到的暗红色粉末（2.5g）。将该粉末（2.4g）溶于乙腈：0.15%磷酸盐缓冲剂（pH3.5）（14.5：85.5，240ml）的混合物中，然后在YMC-gel，ODS-A60（10L）柱上经过色谱法分离，所述色谱柱已用同样的溶剂平衡。含有同样溶剂的洗脱液用HPLC监测（柱：YMC A30，4.5mmID×100mm，3μm，Yamamura Chemical Lab.，流动相：乙腈：0.15%磷酸盐缓冲剂（pH3.5）（19∶81））。合并收集含有普拉定霉素T1或普拉定霉素T2的级份，浓缩，然后脱盐，得到纯的普拉定霉素T1（293mg）和普拉定霉素T2（79mg）。
11-O-去木糖基普拉定霉素T1的制备
将普拉定霉素T1（500mg）的80ml 1N氢氧化钠溶液在65℃加热7小时。将反应混合物冷却，用6N HCl调节pH值为3.0，离心（3，000rpm）收集所形成的固体。将固体装在YMC gel ODS-A60柱（1，350ml）上，用CH3CN∶0.15%磷酸盐缓冲剂（pH7.0）（7∶93，15L）洗脱。合并收集含有11-O-去木糖基普拉定霉素T1的级份、真空浓缩，使其通过Diaion HP-20短柱。将该柱用水洗涤过并用60%丙酮水溶液（500ml）洗脱。真空浓缩洗脱液并冻干脱水，得到暗红色粉末（294mg，68%）。
物理化学性质
普拉定霉素T1和T2及11-O-去木糖基普拉定霉素T1的物理化学性质总结于表4中。
生物学性质
普拉定霉素T1和T2及11-O-去木糖基普拉定霉素T1的体外抗真菌活性是用琼脂稀释法在含有1/15M磷酸盐缓冲剂（pH 7.0）的酵母形态学琼脂上测定的。表Ⅸ中列出了对各分离菌的MIC。
培养基：酵母形态学琼脂+1/15M磷酸盐缓冲剂（pH 7.0）
接种物：106个细胞/ml（只有须疮毛癣菌为：107个细胞/ml）
保温条件：28℃，40小时（须疮毛癣菌为60小时）
按照Oki等人在“Water-Sotuble pradimicin derivatives，Synthesis and antifungal evaluation of N，N-dimethyl pradimicins”，J.Antibiotics 43：1230-1235，1990中所述的方法，评定普拉定霉素T1和T2抗雄性ICR小鼠（20-24g体重）的白色念珠菌A9540全身性感染的体内效能。在每一剂量水平下给五只小鼠静脉内注射10倍于50%致死量的悬浮于盐水中的病原菌使其激发。在真菌激发后立即静脉给药（一次）抗菌素。感染对照动物（n＝10）在7到12天死亡。由真菌感染20天后的存活率计算50%保护剂量（PD50）。在对小鼠单次量静脉内给药后测定普拉定霉素T1和T2的急性毒性。表X中列出了普拉定霉素T1和T2的PD50和LD50。
表X.抗小鼠的白色念珠菌A9540全身性感染的体内活性化合物PD50(mg/kg)LD50(mg/kg)普拉定霉素T1普拉定霉素T227＞50300＞600两性霉素B0.24.5酮哌噁咪唑＞50NT
NT：未试验
组合物
使用一种或多种本发明化合物和/或其酸或碱加成盐的组合物可以含有适当量的可药用赋形剂。
申请人所谓的“酸或碱加成盐”是指当本发明化合物与酸性或碱性试剂接触时形成的化合物或复合物，所述试剂常用于生产治疗剂的生物可利用形式。适宜的试剂包括盐酸、草酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠等。
在制剂中本发明化合物通常与约0.001至约99.99%的一种或多种赋形剂共同存在，以使其可通过口服、颊、鼻、局部或肠胃外剂型给药。优选肠胃外剂型。有用的赋形剂包括载体、着色剂、香料、流动控制剂、稳定剂等。制剂中的药物含量通常为50至约90%（重量）有效量的治疗剂，治疗剂用量范围为约5mg至约100mg每千克患者体重或宿主重量。适宜的“患者”或“宿主”包括哺乳动物优选人，以及其他各种有机体。
实施例
下列实施例用于说明本发明。
实施例1：11-O-去甲基普拉定霉素A（ⅠA）和11-O-去甲基普拉定霉素B（ⅠB）
搅拌下将普拉定霉素A（420mg，0.5mmol）和无水碘化锂（1，34g，10mmol）在可力丁（50ml）中的混合物回流2小时，然后冷却。混合物用乙醚（200ml）稀释并过滤。将固体溶于水（100ml）中，溶液用1N HCl酸化，将其装在HP-20（1000ml）柱上，用pH 3.5的磷酸盐缓冲剂洗涤，然后用50%乙腈水溶液洗脱。合并含有所需产物的级份并浓缩，除去大部分乙腈。将浓缩物装在反相柱上（Prep C18，55-105μm，Waters，400ml），将柱用10%乙腈的pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗涤，然后用25%和30%乙腈的pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。用C18柱色谱法使含有ⅠA和ⅠB混合物的粗级份脱盐并冷冻干燥，得到100mg混合物，将其通过制备性-HPLC柱（Nihon Seimitsu NC-20250，ODS5μ，20×250mm）纯化，用27.5%乙腈的pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。将保留时间为4.1分钟的第一级份[25%乙腈-缓冲剂（pH 3.5）]合并，浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到29mg 11-O-去甲基普拉定霉素A（ⅠA）。第二级份给出40mg ⅠA和ⅠB的混合物。第三级份（保留时间4.5分钟）用类似的方法纯化，得到12mg 11-O-去甲基普拉定霉素B（ⅠB）。用相同的柱和溶剂通过制备性-HPLC将第二级份（40mg）再纯化，得到另外10mg ⅠA和5mg ⅠB。ⅠA和ⅠB的总产量分别是39mg（9.4%）和17mg（5%）。
化合物 ⅠA：Mp＞200℃;IRνmax（KBr）cm-11720，1610;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）502（15500）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.27（3H，d，J＝6.8 Hz，5′-Me），1.34（3H，d，J＝7.3Hz，17-Me），2.30（3H，s，3-Me），2.65（3H，s，N-Me），3.12（1H，t，J＝11.1 Hz，5″-Hax），3.14（1H，dd，J＝8.1 & 6.8 Hz，2″-H），3.16（1H，dd，J＝9.0 & 8.1 Hz，3″-H），3.32（1H，m，4″-H），3.43（1H，m，4′-H），3.75（1H，dd，J＝11.1 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.90（1H，q，J＝6.8 Hz，5′-H），3.95（1H，dd，J＝9.4 & 5.1 Hz，3′-H），4.40（1H，q，J＝7.3 Hz，17-H），4.46（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.53（2H，s，5 & 6-H），4.79（1H，d，J＝8.1 Hz，1′-H），6.55（1H，br s，10-H），6.95（1H，s，4-H），7.14（1H，宽 s，12-H），7.79（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 827（M+H）.
化合物 ⅠB：Mp＞200℃;IRνmax（KBr）cm-11720，1600;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）501（11500）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.27（3H，d，J＝6.8 Hz，5′-Me），1.343H，d，J＝7.3 Hz，17-Me），2.32（3H，s，3-Me），2.70（3H s N-Me），3.75（1H，m，3′-H），3.88（1H，q，J＝6.8 Hz，5′-H），4.40（1H，q，J＝7.3 Hz，17-H），4.55（2H，m，5 & 6-H），4.70（1H，d，J＝6.4 Hz，1′-H），6.68（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），7.14（1H，宽 s，4-H），7.25（1H，d，J＝2.6 Hz，12-H），8.03（1H，宽 s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 695（M+H），717（M+Na）.
实施例2：11-O-去甲基普拉定霉素C（ⅠC）
搅拌下将普拉定霉素C.（168mg，0.2mmol）、无水碘化锂（1.34g，10mmol）和分子筛4A（168mg）在可力丁（20ml）中的混合物回流4小时并冷却。混合物用乙醚（50ml）稀释并过滤。将固体溶于水（50ml）中，溶液用1N HCl酸化并装在HP-20（200ml）柱上，将柱用pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗涤，然后用50%乙腈水溶液洗脱。合并含有所需产物的级份，浓缩除去大部分乙腈。将浓缩物装在反相柱上（Prep C18，55-105μm，Waters，80ml），柱用10%乙腈的pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗涤，然后用25%乙腈的pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。用C18柱色谱法使所需级份脱盐并冷冻干燥，得到50mg粗产物，将其用制备性HPLC柱（Nihon Seimitsu NC-20250，ODS 5μ，20×250mm）纯化，用25%乙腈的pH 3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。将保留时间为3.8分钟的所需级份[25%乙腈-缓冲剂（pH 3.5）]合并，浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到标题化合物（ⅠC）：7mg（4.3%）;
Mp＞200℃;IRνmax（KBr）cm-11620;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）504（12000）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.17（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），1.34（3H，d，J＝7.3 Hz，17-Me），2.32（3H，s，3-Me），4.40（1H，q，J＝7.3 Hz，17-H），4.49（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.58（2H，s，5 & 6-H），4.76（1H，d，J＝8.1 Hz，1′-H），6.69（1H，d，J＝2.1 Hz，10-H），7.20（1H，宽 s，4-H），7.26（1H，d，J＝2.1 Hz，12-H），8.06（1H，宽 s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 813（M+H）.
实施例3：
用实施例2中所述的类似方法，分别由普拉定霉素FA-1、BMS-181182和BMS-181184制备11-O-去甲基衍生物ⅠO-ⅠF，其物理化学数据如下所示。
11-O- 去甲基普拉定霉素 FA-1（ⅠD）：2.6mg（7.2%）;Mp＞200℃;IRνmax（KBr）cm-11610;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）502（13700）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 2.25（3H，s，3-Me），2.42（3H，s，N-Me），4.09（1H，q，J＝7.3 Hz，17-H），4.38（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.39（2H，s，5 & 6-H），4.60（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），6.41（1H，宽 s，10-H），6.91（1H，s，4-H），7.08（1H，宽 s，12-H），7.66（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 843（M+H），865（M+Na）.
11-O-去甲基 -BMS-181182（ⅠE）：9mg（5.0%）;Mp＞200℃;IRνmax（KBr）cm-11610;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）504（13700）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.12（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.24（3H，s，3-Me），2.58（6H，s，N-Me），2.79（1H，m，4′-H）3.03（1H，dd，J＝8.6 & 7.3 Hz，2″-H），3.06（1H，t，J＝10.7 Hz，5″-Hax），3.14（1H，dd，J＝9.0 & 8.6 Hz，3″-H），3.28（1H，m，4″-H），3.70 & 3.75（各1H，dd，J＝10.7 & 5.1 Hz，17-CH2），3.97（1H，m，17-H），4.35（1H，d，J＝11.1 Hz，5-H），4.40（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.41（1H，d，J＝11.1 Hz，6-H），4.60（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），6.49（1H，d，J＝2.1 Hz，10-H），6.90（1H，s，4-H），7.08（1H，d，J＝2.1 Hz，12-H），7.73（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 857（M+H）.
11-O-去甲基 -BMS-181184（ⅠF）：2.9mg（3.0%）;Mp＞200℃;IRνmax（KBr）cm-11610;UV λmax（0.01N-NaOH）mn（ε）504（14200）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.31（3H，s，3-Me），3.07（1H，t，J＝11.1 Hz，5″-Hax），3.12（1H，t，J＝8.6 Hz，2″-H），3.14（1H，t，J＝8.6 Hz，3″-H），3.29（1H，m，4″-H），3.54（1H，dd，J＝9.8 & 2.6 Hz，3′-H），约3.6（2H，m，4′ & 5′-H），3.70（1H，dd，J＝11.1 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.71 & 3.76（各1H，dd，J＝11.1 & 5.1 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.45（1H，t，J＝5.1 Hz，17-H），4.44（1H，d，J＝10.3 Hz，5-H），4.49（1H，J＝10.3 Hz，6-H），4.63（1H，d，J＝7.7 Hz 1′-H），6.55（1H，br s，10-H），7.03（1H，s，4-H），7.13（1H，br s，12-H），7.86（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 837（M+H），852（M+Na）.
实施例4：11-O-去木糖基普拉定霉素T1甲酯（A1）
向11-O-去木糖基普拉定霉素T1（300mg，0.375mmol）在MeOH（30ml）中的悬浮液中加入亚硫酰氯（96μl，1.32mmol），将混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂蒸发后，用甲醇-乙醚使残余物沉淀，得到标题化合物A1
（316mg，定量产率）：1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.10（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.34（3H，s，3-Me），3.06（1H，t，J＝11.5 Hz，5″-Hax），3.11（1H，t，J＝8.6 Hz，2″-H），3.13（1H，t，J＝8.6 Hz，3″-H），3.28（1H，m，4″-H），3.45（1H，m，4′-H），3.53（1H，m，3′-H），3.59（2H，m，2′- & 5′-H），3.68（3H，s，COOMe），3.69（1H，dd，J＝11.5 &5.1 Hz，5″-Heq），3.99（2H，d，J＝6.4 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.48（1H，d，J＝10.2 Hz，5-H），4.56（1H，d，6-H），4.63（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），6.65（1H，d，J＝2.1 Hz，10-H），7.15（1H，s，4-H），7.22（1H，d，12-H），8.01（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 814（M+H）.
实施例5：11-O-去木糖基-11-O-乙基普拉定霉素T1（ⅡA）
将乙基溴（10μl，0.14mmol）加到11-O-去木糖基普拉定霉素T1甲酯A1（25mg，0.030mmol;参见上面实施例4）和K2CO3（8mg，0.058mmol）在DMSO（0.3ml）中的混合物中，将混合物在室温下搅拌过夜。向混合物中加入1N NaOH （3ml），将混合物在室温下搅拌过夜。用稀HCl酸化后，将混合物在反相柱上用色谱法纯化，该柱用水洗涤，然后用10-15%乙腈水溶液洗脱。将含有所需产物的级份合并、真空浓缩并冷冻干燥，得到13mg（52%）产物ⅡA：
Mp 200-210℃（分解）;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）497（14500）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.12（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），1.38（3H，t，J＝7.3 Hz，CH2CH3），2.31（3H，s，3-Me），3.85（2H，d，J＝6.4 Hz，17-CH2），4.22（2H，q，J＝7.3 Hz，11-O-OCH2），4.40（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.42（1H，d，J＝11.7 Hz，5-H），4.49（1H，宽 d，J＝11.7 Hz，6-H），4.63（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），6.75（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），7.00（1H，s，4-H），7.16（1H，d，J＝2.6 Hz，12-H），7.82（1H，s，7-H）;FAB（-）-MS m/z 827（M）.
实施例6：
按照实施例5所述方法，分别用1-溴-2-氟乙烷、烯丙基溴、苄基溴、溴乙酸乙酯或碘乙酰胺处理实施例4的酯（A1），然后去保护并纯化，得到化合物ⅡB-ⅡF。
11-O-去木糖基-11-O-（2-氟乙基）普拉定霉素T1（ⅡB）：10mg
（39%）;Mp200-210℃（分解）;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）497（14700）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.31（3H，s，3-Me），3.90（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝7.7 Hz，1″-H），4.64（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），4.79（2H，dt，J＝47.4 & 3.4 Hz，CH2F），6.76（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），6.95（1H，s，4-H），7.16（1H，d，J＝2.6 Hz 12-H），7.74（1H，s，7-H）;FAB（-）-MS m/z 845（M）.
11-O-烯丙基-11-O-去木糖基普拉定霉素 T1（ⅡC）：7mg（28%）;Mp220-230℃（分解）;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）497（15200）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.33（3H，s，3-Me），3.91（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.45（1H，d，J＝10.7 Hz，5-H），4.54（1H，d，J＝10.7 Hz，6-H），4.63（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），4.79（2H，d，J＝5.1 Hz，11-OCH2），5.33（1H，dd，J＝10.7 & 1.7 Hz，乙烯基质子），5.45（1H，dd，J＝16.1 & 1.7 Hz，乙烯基质子），6.08（1H，m，乙烯基质子，6.83（1H，宽 d，10-H），7.03（1H，s，4-H），7.24（1H，宽 d，12-H），7.87（1H，s，7-H）;FAB（-）-MS m/z 839（M）.
11-O- 苄基 11-O- 去木糖基普拉定霉素 T1（ⅡD）：10mg（37%）;Mp200-210℃（分解）;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）497（15100）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.2 Hz，5′-Me），2.30（3H，s，3-Me），3.90（2H，d，J＝6.4 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.42（1H，d，J＝10.3 Hz，5-H），4.47（1H，d，J＝10.3 Hz，6-H），4.63（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），5.25（2H，s，11-OCH2），6.82（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），6.97（1H，s，4-H），7.23（1H，d，J＝2.6 Hz，12-H），7.3-7.5（5H，m，Ph），7.77（1H，s，7-H），FAB（-）-MS m/z 889（M）.
11-O- 羧甲基 -11-O-去木糖基普拉定霉素 T1（ⅡE）：17mg（66%）;Mp210-220℃（分解）;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）497（14800）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.32（3H，s，3-Me），3.90（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.44（1H，d，J＝11.1 Hz，5-H），4.51，（1H，宽 d，J＝11.1 Hz，6-H），4.64（1H，d，J＝8.1 Hz，1′-H），4.93（2H，s，11-OCH2），6.99（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），7.04（1H，s，4-H），7.19（1H，d，J＝2.6 Hz，12-H），7.88（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 858（M+H）.
11-O- 氨基甲酰基甲基 -11-O-去木糖基普拉定霉素 T1（ⅡF）：11mg（43%）;Mp＞230℃（dec.）;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε），496（15100）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.33（3H，s，3-Me），3.90（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.46（1H，d，J＝10.3 Hz，5-H），4.55（1H，宽 d，J＝10.3 Hz，6-H），4.64（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），4.96（2H，s，11-OCH2），6.87（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），7.11（1H，s，4-H），7.25（1H，d，J＝2.6 Hz，12-H），7.97（1H，s，7-H）;FAB（-）-MS m/z 856（M）.
实施例7：4′-N-苄氧羰基-11-O-去甲基普拉定霉素A甲酯（B1）和4′-N-苄氧羰基-11-O-去甲基普拉定霉素B甲酯（C1）
向ⅠA和ⅠB的混合物（1∶1，60mg）的无水二氯甲烷悬浮液中加入三甲基甲硅烷基氯（0.1ml），将混合物在室温下搅拌10分钟。然后加入N，O-双三甲基甲硅烷基乙酰胺（0.4ml），并将混合物在室温搅拌2小时。向此澄清溶液中加入苄酯基氯（0.1ml），将混合物在室温下搅拌2小时。蒸发至干后将残余物溶于MeOH（6ml）中，向溶液中加入1NHCl（3ml），将混合物在室温下搅拌1小时，然后在反相柱上纯化，用15%和20%乙腈的pH7.0磷酸盐缓冲剂洗脱。将含有所需产物的级份收集、浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到50mg ⅠA和ⅠB的4′-N-苄氧羰基衍生物的混合物（1∶1）。将上面得到的样品用亚硫酰氯（50μl）的甲醇（6ml）溶液处理，将混合物在室温下搅拌16小时。蒸发至干后，将油状残余物在硅胶柱上（Wako-gel C-200，15g）进行色谱纯化，用氯仿-甲醇（10∶1-4∶1）洗脱。将用氯仿-甲醇（10∶1）洗脱的级份蒸发至干，得到21mg化合物C1：FAB（-）-MS m/z 842（M）。将用氯仿-甲醇（4∶1）洗脱的级份合并、蒸发并在反相柱上纯化，用50%乙腈的pH3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。收集所需级份、浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到19mg化合物B1。FAB-（-）-MS m/z 974（M）。
实施例8：11-去甲氧基普拉定霉素A（ⅡG）
将化合物B1（17mg，0.018mmol）、N-苯基三氟甲磺酰亚胺（9.4mg，0.026mmol）和N，N-二甲氨基吡啶（3.2mg，0.026mmol）在无水吡啶（1.7ml）中的混合物在室温下搅拌1小时。混合物用pH3.5的磷酸盐缓冲剂（20ml）稀释，并在反相柱上纯化，用50%和60%乙腈的pH3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。将所需级份合并、浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到16mg（82.5%）化合物B1的11-O-三氟甲磺酸酯衍生物：FAB（+）-MS m/z 1107（M+H），1129（M+Na）。
向三氟甲磺酸酯（23mg，0.02mmol）的无水DMF（2ml）溶液中依次加入乙酸钯（9mg，0.04mmol）、三苯基膦（21mg，0.08mmol）、三乙胺（28μl，0.2mmol）和98%甲酸（8μl，0.21mmol），将混合物在室温下搅拌4小时，用pH3.5的磷酸盐缓冲剂稀释混合物，将其装在反相柱上，柱用20%和30%乙腈的pH3.5磷酸盐缓冲剂洗涤，然后用40%和50%乙腈的pH3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。在HPLC监测下，将用50%乙腈的pH3.5磷酸盐缓冲剂洗脱的所需级份合并、浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到14mg（73%）化合物B1的11-脱氧衍生物：MP＞200℃;FAB（+）-MS m/z 959（M+H），981（M+Na）。
将化合物B1的11-脱氧衍生物（14mg，0.015mmol）和10%钯/炭（10mg）在MeOH（3ml）、水（1ml）和乙酸（1ml）混合物中的混合物在室温氢气氛下氢化3小时。过滤除去催化剂，将滤液装到反相柱上，将柱用水洗涤并用75%二噁烷水溶液洗脱。将所需级份浓缩，用MeOH（5ml）稀释，然后用1N NaOH（1ml）处理。将混合物在室温下搅拌30分钟，用1N HCl调节pH值至6，并在反相柱上纯化，用30%乙腈的pH3.5磷酸盐缓冲剂洗脱。将所需级份合并、浓缩、脱盐并冷冻干燥，得到4mg（34%）化合物ⅡG：Mp＞200℃;UV λmax
（0.01N-NaOH）nm（ε）500（11800）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.25（3H，d，J＝6.8 Hz，5′-Me），1.35（3H，d，J＝7.3 Hz，17-Me），2.30（3H，s，3-Me），2.60（3H，s，4′-NMe），3.11（1H，t，J＝11.1Hz，5″-Hax），3.12（1H，m，2″-H），3.16（1H，t，J＝9.0 Hz，3″-H），3.3（1H，m，4″-H），3.49（1H，m，4′-H），3.51（1H，t，J＝8.1 Hz，2′-H），3.74（1H，dd，J＝11.1 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.85（1H，m，5′-H），3.89（1H，dd，J＝9.8 & 4.7 Hz，3′-H），4.38（1H，q，J＝7.3Hz，17-H），4.43（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.49（2H，s，5 & 6-H），4.75（1H，d，J＝8.1 Hz，1′-H），6.85（1H，s，4-H），7.21（1H，dd，J＝8.1 & 0.9 Hz，10-H），7.62（1H，dd，J＝7.7 & 0.9 Hz，12-H），7.71（1H，s，7-H），7.73（1H，t，J＝7.7 Hz，11-H）.FAB（+）-MS m/z 811（M+H）.
实施例9：11-去甲氧基普拉定霉素B（ⅡH）
用类似于制备化合物ⅡG的方法，将化合物C1（17mg）转化为标题化合物ⅡH：
1.5 mg（26%）;Mp＞200℃;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）502（10400）;1H NMR（400 MH，DMSO-d6）δ 1.24（3H，d，J＝6.8 Hz，5′-Me），1.34（3H，d，J＝7.3 Hz，17-Me），2.27（3H，s，3-Me），2.59（3H，s，4′-NMe），3.68（1H，m，3′-H），3.79（1H，m，5′-H），4.36（1H，q，J＝7.3 Hz，17-H），4.43（1H，d，J＝10.3 Hz，5-H），4.47（1H，d，J＝10.3 Hz，6-H），4.64（1H，d，J＝8.1 Hz，1′-H），6.88（1H，s，4-H），7.20（1H，dd，J＝8.1 & 0.9 Hz，10-H），7.62（1H，dd，J＝7.7 & 0.9 Hz，12-H），7.71（1H，s，7-H），7.72（1H，dd，J＝8.1 & 7.7 Hz，11-H）;FAB（+）-MS m/z 679 （M+H），701（M+Na）.
实施例10：11-O-去木糖基-11-O-三氟甲磺酰基普拉定霉素T1甲酯（D1）
向11-O-去木糖基普拉定霉素T1甲酯（A1，157mg，0.193mmol）的无水吡啶（8ml）溶液中加入二甲氨基吡啶（35mg，0.290mmol）和N-苯基三氟甲磺酰亚胺（103mg，0.290mmol），将混合物在室温下搅拌1小时。用pH 3.5缓冲剂稀释后，将混合物装到C18柱上，将柱用水洗涤，然后用40%和45%乙腈-缓冲剂（pH 3.5）洗脱。将含有所需产物的级份蒸发、脱盐并冻干，得到化合物D1（155mg，85%）：
1H NMR（400MHz，（DMSO-d6）δ 1.10（3H，d，J＝6.0 Hz，5′-Me），2.34（3H，s，3-Me），3.06（1H，t，J＝10.7 Hz，5″-Hax），3.11（1H，t，J＝8.1 Hz，2″-H），3.13（1H，t，J＝8.1 Hz，3″-H），3.28（1H，m，4″-H），3.46（1H，m，4′-H），3.52（1H，m，3′-H），3.60（2H，m，2′- & 5′-H），3.68（3H，s，COOMe），3.70（1H，dd，J＝11.5 & 5.6 Hz，5″-Heq），3.99（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.49（1H，d，J＝9.8 Hz，5-H），4.58（1H，d，6-H），4.64（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），7.16（1H，s，4-H），7.66（1H，d，J＝2.6 Hz，10-H），7.73（1H，d，12-H），8.03（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 946（M+H）.
实施例11：11-去木糖基氧基普拉定霉素T1（ⅡI）
向化合物D1（43mg，0.046mmol）的DMF（2ml）溶液中依次加入pd（OAc）2、（10.2mg，0.046mmol）、pph3（24mg，0.091mmol）、三乙胺（63.4μl，0.455mmol）和98%甲酸（10.3μl，0.273mmol），并将全部混合物在室温下搅拌2小时。用水稀释后，将混合物装到C18柱（50ml）上，将柱用水洗涤后用30%乙腈-缓冲剂（pH3.5）洗脱。将含有所需产物的级份蒸发、脱盐并冻干，得到标题化合物的甲酯（36mg，定量的）：
1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.10（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.33（3H，s，3-Me），3.09（1H，t，J＝11.1 Hz，5″-Hax），3.11（1H，t，J＝8.6 Hz，2″-H），3.13（1H，t，J＝8.6 Hz，3″-H），3.28（1H，m，4″-H），3.43（1H，m，4′-H），3.53（1H，m，3′-H），3.68（3H，s，COOMe），3.70（1H，dd，J＝11.1 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.99（2H，ABq，J＝16.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.47（1H，d，J＝11.1 Hz，5-H），4.55（1H，d，6-H），4.64（1H，d，J＝7.3 Hz，1′-H），7.10（1H，s，4-H），7.37（1H，brd，J＝7.7 Hz，10-H），7.50（1H，d，J＝7.7 Hz，12-H），7.81（1H，t，J＝7.7 Hz，11-H），7.95（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 798（M+H）.
将上述甲酯（36mg，0.045mmol）的甲醇（1ml）溶液在室温下用1N NaOH（0.1ml）处理1小时。蒸发溶剂后，将残余物装到C18柱（50ml）上，将柱用水洗涤后用13%乙腈-缓冲剂（pH7.0）洗脱。将含有所需产物的级份蒸发、脱盐并冻干，得到标题化合物ⅡI（5mg，14%，由D1计算）：
Mp＞230℃;IR νmax（KBr）cm-13400，1720，1620;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）499（13000）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.12（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.28（3H，s，3-Me），3.08（1H，t，J＝11.1 Hz，5″-Hax），3.10（1H，t，J＝9.0 Hz，2″-H），3.15（1H，t，J＝9.0 Hz，3″-H），3.29（1H，m，4″-H），3.55（1H，m，3′-H），3.61（1H，q，J＝6.4 Hz，5′-H），3.70（1H，dd，J＝11.1 & 5.5 Hz，5″-Heq），3.71（1H，t，J＝7.7 Hz，2′-H），3.86 & 3.91（2H，ABq，J＝17.1 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝10.7 Hz，5-H），4.41（1H，d，J＝8.1 Hz，1″-H），4.45（1H，d，6-H），4.64（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），6.96（1H，s，4-H），7.21（1H，d，J＝8.1 Hz，10-H），7.61（1H，d，J＝7.7 Hz，12-H），7.71（1H，dd，J＝7.7 & 8.1 Hz，11-H），7.76（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 806（M+Na）.
实施例12：11-去木糖基氧基-11-二甲氨基普拉定霉素T1（ⅡJ）
向化合物D1（19mg，0.020mmol）的DMF（1.0ml）溶液中加入2M二甲胺的EtOAc溶液[0.4ml;通过用过量NaOH水溶液（1ml）处理Me2NH-HCl（164mg，2.0mmol），然后将气态Me2NH收集在上面的EtOAc层中制备的]、将混合物在室温下搅拌过夜。倒入pH3.5的缓冲剂中后，将混合物装到C18柱上，将柱用水洗涤后用40%乙腈-缓冲剂（pH3.5）洗脱。将适当的级份蒸发、脱盐并冻干，得到标题化合物的甲酯（10mg）。将在甲醇（2ml）中的该样品在室温下用1N NaOH（0.5ml）处理1小时。蒸发溶剂后，将残余物装到C18柱上，将柱用水洗涤后用15%乙腈-缓冲剂（pH 7.0）洗脱。将所需级份蒸发、脱盐并冻干，得到标题化合物ⅡJ（6mg，34%，由D1计算）：
Mp＞230℃;IR νmax（KBr）cm-13400，1730，1600;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）522（12600）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.12（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.30（3H，s，3-Me），3.07（1H，t，J＝11.5 Hz，5″-Hax），3.11（6H，s，NMe2），3.12（1H，t，J＝9.0 Hz，2″-H），3.14（1H，t，J＝9.0 Hz，3″-H），3.70（1H，dd，J＝11.5 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.71（1H，q，J＝6.4 Hz，5′-H），3.90（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.38（1H，d，J＝10.7 Hz，5-H），4.41（1H，d，J＝6.8 Hz，1″-H），4.45（1H，d，6-H）;4.63（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），6.27（1H，brd，10-H），6.97（1H，s，4-H），702（1H，brd，12-H），7.76（1H，s，7-H）;FAB（+）-MS m/z 827（M+H）.
实施例13：11-氨基甲酰基（ⅡK）和11-氰基（ⅡL）-11-去木糖基氧基普拉定霉素T1
向化合物D1（60mg，0.063mmol）的DMF（4ml）溶液中依次加入Pd（OAc）2（28mg，0.126mmol）、PPh3（66mg，0.254mmol）和三丁基氰化锡（200mg，0.64mmol），将全部混合物在70℃加热3天。溶液用MeOH（20ml）稀释，用1N NaOH（5ml）在室温下处理1小时。蒸发溶剂后，将残余物装到C18柱（50ml）上，将柱用水洗涤后用5%、10%和15%乙腈水溶液洗脱，蒸发并冻干后得到下面两个级分。
级份 1;5mg（9.5%，由D1计算）ⅡK：保留时间1.9分钟[30% 乙腈-缓冲剂（pH 3.5）];Mp＞230℃;IR νmax（KBr）cm-13400，1720，1620;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）508（11800）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.29（3H，s，3-Me），3.07（1H，t，J＝10.7 Hz，5″-Hax），3.10（1H，t，J＝7.3 Hz，2″-H），3.14（1H，dd，J＝7.3 & 9.0 Hz，3″-H），3.29（1H，m，4″-H），3.54（1H，dd，J＝2.6 & 9.8 Hz，3′-H），3.59（1H，d，J＝2.6 Hz，4′-H），3.70（1H，dd，J＝10.7 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.71（1H，t，J＝7.7 Hz，2′-H），3.89（2H，d，J＝6.0 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝10.3 Hz，5-H），4.40（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.46（1H，d，6-H），4.64（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），6.95（1H，s，4-H），7.20（2H，宽 s，CONH2），7.62（1H，d，J＝1.3 Hz，10-H），7.76（1H，s，7-H），8.09（1H，d，J＝1.3 Hz，12-H）;FAB（+）-MS m/z 826（M）.
级份 2;8mg（5.8%，由D1计算），ⅡL：保留时间5.9分钟[同上];Mp＞230℃;IR νmax（KBr）cm-13400，1720，1620;UV λmax（0.01N-NaOH）nm（ε）506（13200）;1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 1.11（3H，d，J＝6.4 Hz，5′-Me），2.30（3H，s，3-Me），3.07（1H，t，J＝10.7 Hz，5″-Hax），3.10（1H，t，J＝7.3 Hz，2″-H），3.14（1H，dd，J＝7.3 & 8.6 Hz，3″-H），3.29（1H，m，4″-H），3.54（1H，dd，J＝3.4 & 9.8 Hz，3′-H），3.59（1H，d，J＝3.4 Hz，4′-H），3.70（1H，dd，J＝11.1 & 5.1 Hz，5″-Heq），3.70（1H，t，J＝7.7 Hz，2′-H），3.90（2H，d，J＝5.6 Hz，17-CH2），4.40（1H，d，J＝7.3 Hz，1″-H），4.41（1H，d，J＝11.5 Hz，5-H），4.47（1H，d，6-H），4.63（1H，d，J＝7.7 Hz，1′-H），6.95（1H，s，4-H），7.72（1H，d，J＝1.7 Hz，10-H），7.74（1H，s，7-H），7.87（1H，d，J＝1.7 Hz，12-H）;FAB（+）-MS mz 809（M+H）.
在不背离本发明范围的前提下，可以对本发明作出合理的变化实施方案，如技术熟练人员可能会想到的那些变化实施方案。