多用途杀菌保洁喷雾剂及其应用.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201610884076.4

申请日:

20161011

公开号:

CN106377763A

公开日:

20170208

当前法律状态:

有效性:

审查中

法律详情:

IPC分类号:

A61K38/40,A61K9/12,A61P31/04,A61P31/12,A61P31/10,A61P17/02,A23B4/20

主分类号:

A61K38/40,A61K9/12,A61P31/04,A61P31/12,A61P31/10,A61P17/02,A23B4/20

申请人:

方雅悯,方存林

发明人:

方雅悯,于胜龙,丁海燕,杨春花,刘松茂,王明丽,方存林

地址:

310012 浙江省杭州市文一西路1500号未来科技城科创中心6号楼5单元7楼701

优先权:

CN201610884076A

专利代理机构:

东营双桥专利代理有限责任公司

代理人:

侯玉山

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内容摘要

一种多用途杀菌保洁喷雾剂,包括基料液,所述基料液为由牛乳铁蛋白与水混合组成的基料液,或者为由牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合与水混合组成的基料液;当基料液选择为前者时,牛乳铁蛋白占基料液重量的0.5~25%;当基料液选择为后者时,牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物重量之和占基料液重量的0.5~25%,牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的重量比为100:5~380;牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B、lactofettampin之一或者二者的混合。本发明中的杀菌保洁喷雾剂,具有广谱杀菌性,可以喷雾于人体没有副作用,不会产生耐药性,治疗效果好,且有较好的口感香味,病人依从性好,同事携带使用方便;可以喷雾于生鲜肉上,保鲜效果好且安全无害。

权利要求书

1.一种多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于:包括基料液,所述基料液为由牛乳铁蛋白与水混合组成的基料液,或者为由牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合与水混合组成的基料液;当基料液选择为前者时,所述牛乳铁蛋白占基料液重量的0.5~25%;当基料液选择为后者时,所述牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物重量之和占基料液重量的0.5~25%,所述牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的重量比为100:5~380;所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B、lactofettampin之一或者二者的混合。 2.根据权利要求1所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于:所述喷雾剂还包括香精、味素以及清凉剂三者之一或者任意几种的混合,且均加入到基料液中混匀。 3.根据权利要求1所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于:所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物分子量在500-8500Da之间。 4.根据权利要求1所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于:所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B,所述牛乳铁蛋白与乳铁素B重量比为6-10:0.5-2;所述牛乳铁蛋白与乳铁素B重量之和与水的质量比为5-12:100。 5.根据权利要求1-4任一所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于:所述牛乳铁蛋白为所述乳铁蛋白为铁饱和度为5~8%的低铁饱和度乳铁蛋白;所述牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合为将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶在恒温37℃进行酶解15-25min的产物。 6.根据权利要求5所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于:所述低铁饱和度乳铁蛋白的制备步骤为:第1步,使用阳离子交换树脂对牛乳中的乳铁蛋白进行吸附、解析;所述解析过程是采用二级解析,第一级解析是采用1~2.5%的盐溶液解析,解析液是乳过氧化物酶蛋白,弃去;第二级解析是采用3.5~7%的盐溶液解析,解析液送入第2步处理;所述的盐溶液是指钠盐、钾盐或者钙盐溶液;第2步,对第1步得到的解析液采用分离膜进行浓缩;所述的分离膜是截留分子量在1000~30K的超滤膜;第3步,第2步得到的浓缩液采用不溶性Fe螯合树脂进行吸附,再采用分离膜对浓缩液进行浓缩;所述吸附操作时需要在浓缩液中加入醋酸、醋酸盐以及枸橼酸盐,配制其吸附环境中枸橼酸盐浓度为0.1mol/L~0.5mol/L,并调节pH至5.0~6.7;所述的分离膜是截留分子量在1000~30K的超滤膜。 7.根据权利要求6所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于,所述的第3步中,所述的不溶性Fe螯合树脂是指D403螯合树脂;树脂的吸附时间20~120分钟,吸附时搅拌桨转速速率为20~150rpm,吸附温度在3~30℃。 8.根据权利要求6所述的多用途杀菌保洁喷雾剂,其特征在于,所述第1步中,阳离子交换树脂的制备步骤为:第1步,取10g氯乙酰化聚苯乙烯-二乙烯基苯微球载体PS-acyl-Cl,加入60ml四氢呋喃溶胀12h,再加入40ml甲醇,然后按照重量比PS-acyl-Cl:乙二胺:碳酸氢钠为1:8:0.7,依次加入乙二胺和碳酸氢钠,在于80℃下搅拌反应24h,反应结束后,将产物倒入砂芯漏斗中,用蒸馏水洗至中性,甲醇洗滤3遍真空干燥至恒重,得到交联EDA微球载体;第2步,称60g取交联EDA微球载体,置于三颈烧瓶中,加入二甲基甲酰胺溶胀12h后,加入2-丙烯酰胺基-2-甲基丙烷磺酸16g、N-丁氧基甲基丙烯酰胺3g、丙烯酸双环戊烯基酯、KCO5g、四丁基溴化铵12g,搅拌下于一定温度的油浴中回流反应,反应结束后将反应产物转移至沙芯漏斗中,用5wt%的HC1清洗4遍后用蒸馏水滤洗至中性,最后用甲醇洗滤后抽干,真空干燥至恒重,得到阳离子交换树脂。 9.权利要求1-8任一所述的多用途杀菌保洁喷雾剂的应用,其特征在于,用于抑制和杀灭细菌和病毒。 10.根据权利要求9所述的多用途杀菌保洁喷雾剂的应用,其特征在于:所述喷雾剂通过手压气阀来喷射为雾状或溶液细粒,用于口腔、咽喉、鼻腔、女性阴道、外阴、乳头、男性外阴、腋下的疮口及伤口的治疗和保养,或者用于生鲜肉的保鲜。

说明书

技术领域

本发明涉及杀菌保洁药剂技术领域,具体是一种以牛乳铁蛋白及其水解物或酶解物乳铁素B(lactoferricin B,LFcin B)和lactofettampin(LFampin)等肽类为主要有效成份的杀菌保洁的喷雾型的药品和清洁剂的配方和方法。

背景技术

人们赖以生存的环境中充斥各种容易对人体造成危害的细菌,病毒,有害粉尘和化学品,它们对人的肌体尤其是口腔,鼻腔,咽喉,阴部,乳头及身体上其它部位的疮口,伤口造成的危害性更大。如何有效地保护治疗这些易受感染的部位是人们十分关注的事。要做好这个事如下几方面的问题不容忽视:治疗方案选用的药物应该是一,对病毒细菌广谱有效的;二,无副作用或很少副作用的;三,不会产生耐药性;四,有较好的口感香味,病人依从性好;五,携带使用方便等等,至今仍未见十分理想的产品。此外生鲜肉类如牛,羊,猪,鸭,鸡等生鲜肉的保鲜也需要一种对健康无危害的安全保鲜剂。

国内外大量研究表明,牛乳铁蛋白是一种多功能的生物活性蛋白质,它对多种微生物(细菌、病毒、真菌等)具有良好的抗生物活性,是一种天然广谱抗菌素,且对机体具有免疫调节活性,能增强机体免疫功能。牛乳铁蛋白具有高亲和结合铁的能力,可以与细菌竞争机体内环境中的铁离子。而铁对于致病菌来说是其生长必不可少的营养物质。牛乳铁蛋白具有抢夺和阻隔细菌获取铁的作用,使得细菌、病毒、真菌等因不能获得充分的铁离子而失活或无法生长繁殖。牛乳铁蛋白可使细菌细胞表面膜结构发生有害性改变。如牛乳铁蛋白可以与革兰阴性菌胞壁外膜中的脂多糖(LPS)结合而使其从外膜中释放出来导致胞壁损伤。此外,牛乳铁蛋白还可以与大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌的外膜孔蛋白(porin)、流感嗜血杆菌的定植因子(colonization factor)以及牙龈卟啉菌的血红蛋白受体相互作用而导致菌细胞受损伤。据Marieke I.A(2005)报道,牛乳铁蛋白拥含有二个抗微生物的域区,分别称为乳铁素B(lactoferricin B,LFcin B)和lactofettampin(LFampin)。作者研究了这二种典型的抗微生物肽段对白色念珠菌和大肠埃希菌的作用。经共聚焦激光扫描显微镜检查显示,这些肽可在几分钟内发生细胞内化作用,同时经冰冻蚀刻透射电镜指示膜的完整性也遭受破坏。最令人注目的发现是由Lfampin所诱发的白色念珠菌膜上产生的独特的囊泡样结构,和由LFcin B肽所导致的大肠埃希菌的外膜分离和表面隆起[[i]]。国内李铁晶等(2005)报道[[ii]],牛乳铁蛋白的抗菌抗炎等多功能活性与其高度碱性的N端区域有关,能在酸性pH值条件下释放出来,新生成的含有25个氨基酸残基的抗微生物肽称为乳铁素。它很容易与带负电荷的细菌膜结构发生反应,肽的结合可破坏膜 的正常结构。其中与乳铁素活性相关的最重要的氨基酸残基是色氨酸和精氨酸。牛乳铁蛋白对粘膜具有保护修复作用。牛乳铁蛋白具有免疫调节活性,可以促使T淋巴细胞生长和分化。据国外报道,乳铁蛋白能与主要组织相容性(MHC)蛋白质的区域,以及存在于T4(辅助T细胞)和T8(抑制性T细胞)表面的CD4和CD8决定基发生独特性结合,它携带有与MHC-Ⅱ类决定基同源性的序列。乳铁蛋白还具有调节细胞因子和淋巴因子的作用。如国外学者Kuhara(2006)最近报道[[iii]],口服牛乳铁蛋白能够增加外周血和脾脏中NK细胞的数量(呈剂量依赖性),并增加其α-干扰素的产量。实验还表明口服牛乳铁蛋白也可使门静脉循环中IL-18的水平立即增高。此外口服牛乳铁蛋白也能增加派伊尔小结(PP)和肠系膜淋巴结(MLN)中α-干扰素和β-干扰素的表达水平。总之,上述结果证明口服牛乳铁蛋白可以刺激肠道相关性免疫功能,包括产生IL-18和Ⅰ型干扰素,以及增强NK细胞的活性。经大量研究表明,不同铁饱和度的乳铁蛋白的抑菌效果不同,经验证,乳铁蛋白的铁饱和度在6%-20%范围内,乳铁蛋白的抑菌活性随饱和度的增加而增强。此外国内外大量研究还表明,牛乳铁蛋白及其水解物或酶解物乳铁素B(lactoferricin B,LFcin B)和lactofettampin(LFampin)等肽类具有比牛乳铁蛋白高200-400倍的广谱抑菌和杀菌生物活性。

由于牛乳铁蛋白及其水解物或酶解物乳铁素B(lactoferricin B,LFcin B)和lactofettampin(LFampin)等肽类的上述特性,因此如果将其合理应用来实现更好的杀菌保洁功能是现在需要解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足,本发明提供一种多用途杀菌保洁喷雾剂,其一能够对口腔,鼻腔,咽喉,阴部,乳头及身体上其它部位的疮口进行治疗和保养,其二能够实现对牛,羊,猪,鸭,鸡等生鲜肉的保鲜。

多用途杀菌保洁喷雾剂,包括基料液,所述基料液为由牛乳铁蛋白与水混合组成的基料液,或者为由牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合与水混合组成的基料液;当基料液选择为前者时,所述牛乳铁蛋白占基料液重量的0.5~25%;当基料液选择为后者时,所述牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物重量之和占基料液重量的0.5~25%,所述牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的重量比为100:5~380;所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B、lactofettampin之一或者二者的混合。

进一步的,所述喷雾剂还包括香精、味素以及清凉剂三者之一或者任意几种的混合;且均加入到基料液中混匀。

进一步的,所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物分子量在500-8500Da之间。

进一步的,所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B,所述牛乳铁蛋白与乳铁素B重量比为6-10:0.5-2;所述牛乳铁蛋白与乳铁素B重量之和与水的质量比为5-12:100。

进一步的,所述乳铁蛋白为铁饱和度为5~8%的低铁饱和度乳铁蛋白;所述牛乳铁蛋白、牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合为将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶在恒温37℃进行酶解15-25min的产物。

所述低铁饱和度乳铁蛋白的制备步骤为:

第1步,使用阳离子交换树脂对牛乳中的乳铁蛋白进行吸附、解析;所述解析过程是采用二级解析,第一级解析是采用1~2.5%的盐溶液解析,解析液是乳过氧化物酶蛋白,弃去;第二级解析是采用3.5~7%的盐溶液解析,解析液送入第2步处理;所述的盐溶液是指钠盐、钾盐或者钙盐溶液;

第2步,对第1步得到的解析液采用分离膜进行浓缩;所述的分离膜是截留分子量在1000~30K的超滤膜;

第3步,第2步得到的浓缩液采用不溶性Fe3+螯合树脂进行吸附,再采用分离膜对浓缩液进行浓缩;所述吸附操作时需要在浓缩液中加入醋酸、醋酸盐以及枸橼酸盐,配制其吸附环境中枸橼酸盐浓度为0.1mol/L~0.5mol/L,并调节pH至5.0~6.7;所述的分离膜是截留分子量在1000~30K的超滤膜。

进一步的,所述的第2步得到的浓缩液在送入第3步之前,可再经过一次弱酸型阳离子树脂的吸附、解附和超滤膜的浓缩处理;所述的弱酸型阳离子树脂是指CM树脂。

进一步的,所述的第3步中,所述的不溶性Fe3+螯合树脂是指D403螯合树脂;树脂的吸附时间20~120分钟,吸附时搅拌桨转速速率为20~150rpm,吸附温度在3~30℃。

进一步的,所述第1步中,阳离子交换树脂的制备步骤为:

第1步,取10g氯乙酰化聚苯乙烯-二乙烯基苯微球载体PS-acyl-Cl,加入60ml四氢呋喃溶胀12 h,再加入40ml甲醇,然后按照重量比PS-acyl-Cl:乙二胺:碳酸氢钠为1:8:0.7,依次加入乙二胺和碳酸氢钠,在于80℃下搅拌反应24h,反应结束后,将产物倒入砂芯漏斗中,用蒸馏水洗至中性,甲醇洗滤3遍真空干燥至恒重,得到交联EDA微球载体;

第2步,称60g取交联EDA微球载体,置于三颈烧瓶中,加入二甲基甲酰胺溶胀12 h后,加入2-丙烯酰胺基-2-甲基丙烷磺酸16g、N-丁氧基甲基丙烯酰胺3g、丙烯酸双环戊烯基酯、K2CO3 5g、四丁基溴化铵12g,搅拌下于一定温度的油浴中回流反应,反应结束后将反应产物转移至沙芯漏斗中,用5wt%的HC1清洗4遍后用蒸馏水滤洗至中性,最后用甲醇洗滤后抽干,真空干燥至恒重,得到阳离子交换树脂

上述多用途杀菌保洁喷雾剂的应用,用于抑制和杀灭细菌和病毒。比如,所述喷雾剂通过手压气阀来喷射为雾状或溶液细粒,用于口腔、咽喉、鼻腔、女性阴道、外阴、乳头、男性外阴、腋下的疮口及伤口的治疗和保养,或者用于生鲜肉的保鲜。

本发明中的杀菌保洁喷雾剂,具有广谱杀菌性,可以喷雾于人体没有副作用,不会产生耐药性,治疗效果好,且有较好的口感香味,病人依从性好,同事携带使用方便;可以喷雾于生鲜肉上,保鲜效果好且安全无害。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明做进一步的描述,其中香精、色素、甜味素用量均是微量,根据实际需要可以稍作调整。

实施例1:

一种多用途杀菌保洁喷雾剂,由以下组分组成:

低铁饱和度乳铁蛋白 7g

冰片 1.5g

薄荷脑 1g

甜味素 适量

橄榄色色素 适量

香精 适量

水 100ml

1、低铁饱和度乳铁蛋白的制备:半脱脂牛奶1890L,pH6.7,总蛋白为3.38g/L,乳铁蛋白浓度为126mg/L,将SPC70树脂加入搅拌罐,吸附80min,搅拌速率为60rpm,收集已吸附后的牛奶并用RO水冲洗树脂,加入第一级100L 2.5%NaCl水溶液解附40min,搅拌转速40rpm,收集解附液后用RO水淋洗收集;加入第二级100L 5.5%NaCl水溶液解附40min,搅拌转速40rpm,收集解附液后用RO水淋洗收集树脂3次。第二级的解吸液以及第二次RO淋洗液合并收集共180L,输送到0.1μm的微滤膜设备中进行除菌、除杂;用30K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,取样检测其铁饱和度为20%;将乳铁蛋白浓液输入到装有CM树脂罐中除去杂蛋白,收集已吸附杂蛋白后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,将其中的少量浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。粉末含水量3.0%,灰分1.1%,总蛋白为96.3%,铁饱和度20%;再将剩余的乳铁蛋白浓液输入到装有放置D403螯合树脂罐中进行脱铁,加入0.1mol/L枸橼酸盐,并醋酸-醋酸钠缓冲液调pH至6.0,加以搅拌吸附铁离子,树脂吸附时间120分钟,搅拌桨转速速率60rpm。收集以吸附铁离子后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,收集浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。粉末含水量3.0%,灰分1.0%,总蛋白为96.3%,铁饱和度7%。

2、将剩余物质加入低铁饱和度乳铁蛋白中。

实施例2

一种多用途杀菌保洁喷雾剂,由以下组分组成:

低铁饱和度乳铁蛋白 7g

冰片 1.5g

薄荷脑 1g

甜味素 适量

橄榄色色素 适量

香精 适量

水 100ml

1、低铁饱和度乳铁蛋白的制备:半脱脂牛奶1890L,pH6.7,总蛋白为3.38g/L,乳铁蛋白浓度为126mg/L,将SPC70树脂加入搅拌罐,吸附80min,搅拌速率为60rpm,收集已吸附后的牛奶并用RO水冲洗树脂,加入第一级100L 2.5%NaCl水溶液解附40min,搅拌转速40rpm,收集解附液后用RO水淋洗收集;加入第二级100L 5.5%NaCl水溶液解附40min,搅拌转速40rpm,收集解附液后用RO水淋洗收集树脂3次。第二级的解吸液以及第二次RO淋洗液合并收集共180L,输送到0.1μm的微滤膜设备中进行除菌、除杂;用30K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,取样检测其铁饱和度为20%;将乳铁蛋白浓液输入到装有CM树脂罐中除去杂蛋白,收集已吸附杂蛋白后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,将其中的少量浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。粉末含水量3.0%,灰分1.1%,总蛋白为96.3%,铁饱和度20%;再将剩余的乳铁蛋白浓液输入到装有放置D403螯合树脂罐中进行脱铁,加入0.1mol/L枸橼酸盐,并醋酸-醋酸钠缓冲液调pH至6.0,加以搅拌吸附铁离子,树脂吸附时间120分钟,搅拌桨转速速率60rpm。收集以吸附铁离子后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,收集浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。粉末含水量3.0%,灰分1.0%,总蛋白为96.3%,铁饱和度7%。

2、将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶,恒温37℃进行酶解15min,此时乳铁蛋白与乳铁素B的比例大约为7:1。

3、将剩余物质加入乳铁蛋白与乳铁素B混合物中。

实施例3

一种多用途杀菌保洁喷雾剂,由以下组分组成:

低铁饱和度乳铁蛋白 9g

冰片 2g

薄荷脑 1.5g

甜味素 适量

橄榄色色素 适量

香精 适量

水 100ml

1、低铁饱和度乳铁蛋白的制备:半脱脂牛奶1890L,pH6.7,总蛋白为3.38g/L,乳铁蛋白浓度为126mg/L,将SPC70树脂加入搅拌罐,吸附80min,搅拌速率为60rpm,收集已吸附后的牛奶并用RO水冲洗树脂,加入第一级100L 2.5%NaCl水溶液解附40min,搅拌转速40rpm,收集解附液后用RO水淋洗收集;加入第二级100L 5.5%NaCl水溶液解附40min,搅拌转速40rpm,收集解附液后用RO水淋洗收集树脂3次。第二级的解吸液以及第二次RO淋洗液合并收集共180L,输送到0.1μm的微滤膜设备中进行除菌、除杂;用30K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,取样检测其铁饱和度为20%;将乳铁蛋白浓液输入到装有CM树脂罐中除去杂蛋白,收集已吸附杂蛋白后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,将其中的少量浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。粉末含水量3.0%,灰分1.1%,总蛋白为96.3%,铁饱和度20%;再将剩余的乳铁蛋白浓液输入到装有放置D403螯合树脂罐中进行脱铁,加入0.1mol/L枸橼酸盐,并醋酸-醋酸钠缓冲液调pH至6.0,加以搅拌吸附铁离子,树脂吸附时间120分钟,搅拌桨转速速率60rpm。收集以吸附铁离子后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩,收集浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。粉末含水量3.0%,灰分1.0%,总蛋白为96.3%,铁饱和度7%。

2、将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶恒温37℃进行酶解20min,此时乳铁蛋白与乳铁素B的比例大约为6:1。

3、将剩余物质加入乳铁蛋白与乳铁素B混合物中。

实施例4

一种多用途杀菌保洁喷雾剂,与实施例3一致,区别仅仅在于,将其中的SPC70树脂替换为通过如下的方法制备得到阳离子交换树脂:

第1步,取10g氯乙酰化聚苯乙烯-二乙烯基苯微球载体(PS-acyl-Cl),加入60ml四氢呋喃溶胀12 h,再加入40ml甲醇,然后按照重量比(PS-acyl-Cl):乙二胺(EDA):碳酸氢钠为1:8:0.7,依次加入乙二胺和碳酸氢钠,在于80℃下搅拌反应24h,反应结束后,将产物倒入砂芯漏斗中,用蒸馏水洗至中性,甲醇洗滤3遍真空干燥至恒重,得到交联EDA微球载体;

第2步,称60g取交联EDA微球载体,置于三颈烧瓶中,加入二甲基甲酰胺溶胀12 h后,加入2-丙烯酰胺基-2-甲基丙烷磺酸(AMPS)16g、N-丁氧基甲基丙烯酰胺(NBMA)3g、丙烯酸双环戊烯基酯(DCPA)、K2CO3 5g、四丁基溴化铵(TBAB) 12g,搅拌下于一定温度的油浴中回流反应,反应结束后将反应产物转移至砂芯漏斗中,用5wt%的HC1清洗4遍后用蒸馏水滤洗至中性,最后用甲醇洗滤后抽干,真空干燥至恒重,得到阳离子交换树脂。

最终得到的低铁饱和度乳铁蛋白的技术指标为:粉末含水量3.0%,灰分1.0%,总蛋白为96.8%,铁饱和度6%。

2、将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶恒温37℃进行酶解25min,此时乳铁蛋白与乳铁素B的比例大约为5:1。

3、将剩余物质加入乳铁蛋白与乳铁素B混合物中。

多用杀菌喷雾剂体外抗菌试验

体外抗菌试验采用实施例2制备的多用途杀菌喷雾剂的浓度为5000mg/l,对照品为成都恩威制药有限公司生产的洁尔阴洗液;试验菌株为:金黄色葡萄球菌ATCC 6538、白色念珠菌ATCC 10231、枯草芽孢杆菌ATCC 6633。试验数据如下表所示:

体外杀菌实验表明:多用途杀菌保洁喷雾剂对金黄色葡萄球菌具有很强的杀菌作用,三种浓度(50mg/l、100mg/l、200mg/l)下作用5分钟,杀菌率可达到99%以上;对枯草芽孢杆菌也有一定的杀伤作用,三种浓度(50mg/l、100mg/l、200mg/l)下,杀菌率可达到90%以上;对白色念珠菌具有较强的杀伤作用,三种浓度(50mg/l、100mg/l、200mg/l)下作用10分钟,杀菌率平均可以达到98.5%以上。

针对实施例一、二、三、四做比较试验,实验结果如下表所示,相比而言实施例4的效果最佳:

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610884076.4 (22)申请日 2016.10.11 (71)申请人 方雅悯 地址 310012 浙江省杭州市文一西路1500 号未来科技城科创中心6号楼5单元7 楼701 申请人 方存林 (72)发明人 方雅悯 于胜龙 丁海燕 杨春花 刘松茂 王明丽 方存林 (74)专利代理机构 东营双桥专利代理有限责任 公司 37107 代理人 侯玉山 (51)Int.Cl. A61K 38/40(2006.01) A61K 9/12(2006.01) A61P 31/04(2。

2、006.01) A61P 31/12(2006.01) A61P 31/10(2006.01) A61P 17/02(2006.01) A23B 4/20(2006.01) (54)发明名称 多用途杀菌保洁喷雾剂及其应用 (57)摘要 一种多用途杀菌保洁喷雾剂, 包括基料液, 所述基料液为由牛乳铁蛋白与水混合组成的基 料液, 或者为由牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解 物或酶解物的组合与水混合组成的基料液; 当基 料液选择为前者时, 牛乳铁蛋白占基料液重量的 0.525%; 当基料液选择为后者时, 牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物重量之和占基料 液重量的0.525%, 牛乳铁蛋白、 牛乳铁。

3、蛋白的水 解物或酶解物的重量比为100: 5380; 牛乳铁蛋 白 的 水 解 物 或 酶 解 物 包 括 乳 铁 素 B 、 lactofettampin之一或者二者的混合。 本发明中 的杀菌保洁喷雾剂, 具有广谱杀菌性, 可以喷雾 于人体没有副作用, 不会产生耐药性, 治疗效果 好, 且有较好的口感香味, 病人依从性好, 同事携 带使用方便; 可以喷雾于生鲜肉上, 保鲜效果好 且安全无害。 权利要求书2页 说明书7页 CN 106377763 A 2017.02.08 CN 106377763 A 1.一种多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于: 包括基料液, 所述基料液为由牛乳铁蛋白 与水混。

4、合组成的基料液, 或者为由牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合与水 混合组成的基料液; 当基料液选择为前者时, 所述牛乳铁蛋白占基料液重量的0.525%; 当 基料液选择为后者时, 所述牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物重量之和占基料液 重量的0.525%, 所述牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的重量比为100: 5380; 所 述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B、 lactofettampin之一或者二者的混合。 2.根据权利要求1所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于: 所述喷雾剂还包括香 精、 味素以及清凉剂三者之一或者任意几种的混合, 且均加入到基料液中。

5、混匀。 3.根据权利要求1所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于: 所述牛乳铁蛋白的水解 物或酶解物分子量在500-8500Da之间。 4.根据权利要求1所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于: 所述牛乳铁蛋白的水解 物或酶解物包括乳铁素B, 所述牛乳铁蛋白与乳铁素B重量比为6-10: 0.5-2; 所述牛乳铁蛋 白与乳铁素B重量之和与水的质量比为5-12:100。 5.根据权利要求1-4任一所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于: 所述牛乳铁蛋白 为所述乳铁蛋白为铁饱和度为58%的低铁饱和度乳铁蛋白; 所述牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白 的水解物或酶解物的组合为将低铁饱和度的乳铁蛋白加入80。

6、0-1000u/g的胃蛋白酶在恒温 37进行酶解15-25min的产物。 6.根据权利要求5所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于: 所述低铁饱和度乳铁蛋 白的制备步骤为: 第1步, 使用阳离子交换树脂对牛乳中的乳铁蛋白进行吸附、 解析; 所述解析过程是采 用二级解析, 第一级解析是采用12.5%的盐溶液解析, 解析液是乳过氧化物酶蛋白, 弃去; 第二级解析是采用3.57%的盐溶液解析, 解析液送入第2步处理; 所述的盐溶液是指钠盐、 钾盐或者钙盐溶液; 第2步, 对第1步得到的解析液采用分离膜进行浓缩; 所述的分离膜是截留分子量在 100030K的超滤膜; 第3步, 第2步得到的浓缩液采用。

7、不溶性Fe3+螯合树脂进行吸附, 再采用分离膜对浓缩液 进行浓缩; 所述吸附操作时需要在浓缩液中加入醋酸、 醋酸盐以及枸橼酸盐, 配制其吸附环 境中枸橼酸盐浓度为0.1mol/L0.5mol/L,并调节pH至5.06.7; 所述的分离膜是截留分子 量在100030K的超滤膜。 7.根据权利要求6所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于, 所述的第3步中, 所述的 不溶性Fe3+螯合树脂是指D403螯合树脂; 树脂的吸附时间20120分钟, 吸附时搅拌桨转速 速率为20150rpm, 吸附温度在330。 8.根据权利要求6所述的多用途杀菌保洁喷雾剂, 其特征在于, 所述第1步中, 阳离子交 换树。

8、脂的制备步骤为: 第1步, 取10g氯乙酰化聚苯乙烯-二乙烯基苯微球载体PS-acyl-Cl, 加入60ml四氢呋喃 溶胀12 h, 再加入40ml甲醇, 然后按照重量比PS-acyl-Cl: 乙二胺: 碳酸氢钠为1: 8: 0.7, 依 次加入乙二胺和碳酸氢钠, 在于80下搅拌反应24h, 反应结束后, 将产物倒入砂芯漏斗中, 用蒸馏水洗至中性, 甲醇洗滤3遍真空干燥至恒重, 得到交联EDA微球载体; 第2步, 称60g取交联EDA微球载体, 置于三颈烧瓶中, 加入二甲基甲酰胺溶胀12 h后, 加 权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 106377763 A 2 入2-丙烯酰胺基-2-甲。

9、基丙烷磺酸16g、 N-丁氧基甲基丙烯酰胺3g、 丙烯酸双环戊烯基酯、 K2CO3 5g、 四丁基溴化铵12g, 搅拌下于一定温度的油浴中回流反应, 反应结束后将反应产物 转移至沙芯漏斗中, 用5wt%的HC1清洗4遍后用蒸馏水滤洗至中性, 最后用甲醇洗滤后抽干, 真空干燥至恒重, 得到阳离子交换树脂。 9.权利要求1-8任一所述的多用途杀菌保洁喷雾剂的应用, 其特征在于, 用于抑制和杀 灭细菌和病毒。 10.根据权利要求9所述的多用途杀菌保洁喷雾剂的应用, 其特征在于: 所述喷雾剂通 过手压气阀来喷射为雾状或溶液细粒, 用于口腔、 咽喉、 鼻腔、 女性阴道、 外阴、 乳头、 男性外 阴、 腋。

10、下的疮口及伤口的治疗和保养, 或者用于生鲜肉的保鲜。 权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 106377763 A 3 多用途杀菌保洁喷雾剂及其应用 技术领域 0001 本发明涉及杀菌保洁药剂技术领域, 具体是一种以牛乳铁蛋白及其水解物或酶解 物乳铁素B (lactoferricin B, LFcin B) 和lactofettampin (LFampin) 等肽类为主要有效成 份的杀菌保洁的喷雾型的药品和清洁剂的配方和方法。 背景技术 0002 人们赖以生存的环境中充斥各种容易对人体造成危害的细菌, 病毒, 有害粉尘和 化学品, 它们对人的肌体尤其是口腔, 鼻腔, 咽喉, 阴部, 乳头及。

11、身体上其它部位的疮口, 伤 口造成的危害性更大。 如何有效地保护治疗这些易受感染的部位是人们十分关注的事。 要 做好这个事如下几方面的问题不容忽视: 治疗方案选用的药物应该是一, 对病毒细菌广谱 有效的; 二, 无副作用或很少副作用的; 三, 不会产生耐药性; 四, 有较好的口感香味, 病人依 从性好; 五, 携带使用方便等等, 至今仍未见十分理想的产品。 此外生鲜肉类如牛, 羊, 猪, 鸭, 鸡等生鲜肉的保鲜也需要一种对健康无危害的安全保鲜剂。 0003 国内外大量研究表明, 牛乳铁蛋白是一种多功能的生物活性蛋白质, 它对多种微 生物 (细菌、 病毒、 真菌等) 具有良好的抗生物活性, 是一。

12、种天然广谱抗菌素, 且对机体具有 免疫调节活性, 能增强机体免疫功能。 牛乳铁蛋白具有高亲和结合铁的能力, 可以与细菌竞 争机体内环境中的铁离子。 而铁对于致病菌来说是其生长必不可少的营养物质。 牛乳铁蛋 白具有抢夺和阻隔细菌获取铁的作用, 使得细菌、 病毒、 真菌等因不能获得充分的铁离子而 失活或无法生长繁殖。 牛乳铁蛋白可使细菌细胞表面膜结构发生有害性改变。 如牛乳铁蛋 白可以与革兰阴性菌胞壁外膜中的脂多糖 (LPS) 结合而使其从外膜中释放出来导致胞壁损 伤。 此外, 牛乳铁蛋白还可以与大肠杆菌、 鼠伤寒沙门菌的外膜孔蛋白 (porin) 、 流感嗜血杆 菌的定植因子 (coloniza。

13、tion factor) 以及牙龈卟啉菌的血红蛋白受体相互作用而导致菌 细胞受损伤。 据Marieke I.A (2005) 报道, 牛乳铁蛋白拥含有二个抗微生物的域区, 分别称 为乳铁素B (lactoferricin B, LFcin B) 和lactofettampin (LFampin) 。 作者研究了这二种 典型的抗微生物肽段对白色念珠菌和大肠埃希菌的作用。 经共聚焦激光扫描显微镜检查显 示, 这些肽可在几分钟内发生细胞内化作用, 同时经冰冻蚀刻透射电镜指示膜的完整性也 遭受破坏。 最令人注目的发现是由Lfampin所诱发的白色念珠菌膜上产生的独特的囊泡样 结构, 和由LFcin B。

14、肽所导致的大肠埃希菌的外膜分离和表面隆起i。 国内李铁晶等 (2005) 报道ii, 牛乳铁蛋白的抗菌抗炎等多功能活性与其高度碱性的N端区域有关, 能 在酸性pH值条件下释放出来, 新生成的含有25个氨基酸残基的抗微生物肽称为乳铁素。 它 很容易与带负电荷的细菌膜结构发生反应, 肽的结合可破坏膜 的正常结构。 其中与乳铁素 活性相关的最重要的氨基酸残基是色氨酸和精氨酸。 牛乳铁蛋白对粘膜具有保护修复作 用。 牛乳铁蛋白具有免疫调节活性, 可以促使T淋巴细胞生长和分化。 据国外报道, 乳铁蛋白 能与主要组织相容性 (MHC) 蛋白质的区域, 以及存在于T4 (辅助T细胞) 和T8 (抑制性T细胞。

15、) 表面的CD4和CD8决定基发生独特性结合, 它携带有与MHC-类决定基同源性的序列。 乳铁 蛋白还具有调节细胞因子和淋巴因子的作用。 如国外学者Kuhara (2006) 最近报道iii, 说 明 书 1/7 页 4 CN 106377763 A 4 口服牛乳铁蛋白能够增加外周血和脾脏中NK细胞的数量 (呈剂量依赖性) , 并增加其 -干扰 素的产量。 实验还表明口服牛乳铁蛋白也可使门静脉循环中IL-18的水平立即增高。 此外口 服牛乳铁蛋白也能增加派伊尔小结 (PP) 和肠系膜淋巴结 (MLN) 中 -干扰素和 -干扰素的表 达水平。 总之, 上述结果证明口服牛乳铁蛋白可以刺激肠道相关性。

16、免疫功能, 包括产生IL- 18和 型干扰素, 以及增强NK细胞的活性。 经大量研究表明, 不同铁饱和度的乳铁蛋白的抑 菌效果不同, 经验证, 乳铁蛋白的铁饱和度在6%-20%范围内, 乳铁蛋白的抑菌活性随饱和度 的增加而增强。 此外国内外大量研究还表明, 牛乳铁蛋白及其水解物或酶解物乳铁素B (lactoferricin B, LFcin B) 和lactofettampin (LFampin) 等肽类具有比牛乳铁蛋白高 200-400倍的广谱抑菌和杀菌生物活性。 0004 由于牛乳铁蛋白及其水解物或酶解物乳铁素B (lactoferricin B, LFcin B) 和 lactofett。

17、ampin (LFampin) 等肽类的上述特性, 因此如果将其合理应用来实现更好的杀菌 保洁功能是现在需要解决的问题。 发明内容 0005 针对现有技术的不足, 本发明提供一种多用途杀菌保洁喷雾剂, 其一能够对口腔, 鼻腔, 咽喉, 阴部, 乳头及身体上其它部位的疮口进行治疗和保养, 其二能够实现对牛, 羊, 猪, 鸭, 鸡等生鲜肉的保鲜。 0006 多用途杀菌保洁喷雾剂, 包括基料液, 所述基料液为由牛乳铁蛋白与水混合组成 的基料液, 或者为由牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合与水混合组成的基 料液; 当基料液选择为前者时, 所述牛乳铁蛋白占基料液重量的0.525%; 当基料液。

18、选择为 后者时, 所述牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物重量之和占基料液重量的0.5 25%, 所述牛乳铁蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的重量比为100: 5380; 所述牛乳铁蛋 白的水解物或酶解物包括乳铁素B、 lactofettampin之一或者二者的混合。 0007 进一步的, 所述喷雾剂还包括香精、 味素以及清凉剂三者之一或者任意几种的混 合; 且均加入到基料液中混匀。 0008 进一步的, 所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物分子量在500-8500Da之间。 0009 进一步的, 所述牛乳铁蛋白的水解物或酶解物包括乳铁素B, 所述牛乳铁蛋白与乳 铁素B重量比为6-10: 0.。

19、5-2; 所述牛乳铁蛋白与乳铁素B重量之和与水的质量比为5-12: 100。 0010 进一步的, 所述乳铁蛋白为铁饱和度为58%的低铁饱和度乳铁蛋白; 所述牛乳铁 蛋白、 牛乳铁蛋白的水解物或酶解物的组合为将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g 的胃蛋白酶在恒温37进行酶解15-25min的产物。 0011 所述低铁饱和度乳铁蛋白的制备步骤为: 第1步, 使用阳离子交换树脂对牛乳中的乳铁蛋白进行吸附、 解析; 所述解析过程是采 用二级解析, 第一级解析是采用12.5%的盐溶液解析, 解析液是乳过氧化物酶蛋白, 弃去; 第二级解析是采用3.57%的盐溶液解析, 解析液送入第2步处理;。

20、 所述的盐溶液是指钠盐、 钾盐或者钙盐溶液; 第2步, 对第1步得到的解析液采用分离膜进行浓缩; 所述的分离膜是截留分子量在 100030K的超滤膜; 说 明 书 2/7 页 5 CN 106377763 A 5 第3步, 第2步得到的浓缩液采用不溶性Fe3+螯合树脂进行吸附, 再采用分离膜对浓缩 液进行浓缩; 所述吸附操作时需要在浓缩液中加入醋酸、 醋酸盐以及枸橼酸盐, 配制其吸附 环境中枸橼酸盐浓度为0.1mol/L0.5mol/L,并调节pH至5.06.7; 所述的分离膜是截留分 子量在100030K的超滤膜。 0012 进一步的, 所述的第2步得到的浓缩液在送入第3步之前, 可再经过一。

21、次弱酸型阳 离子树脂的吸附、 解附和超滤膜的浓缩处理; 所述的弱酸型阳离子树脂是指CM树脂。 0013 进一步的, 所述的第3步中, 所述的不溶性Fe3+螯合树脂是指D403螯合树脂; 树脂的 吸附时间20120分钟, 吸附时搅拌桨转速速率为20150rpm, 吸附温度在330。 0014 进一步的, 所述第1步中, 阳离子交换树脂的制备步骤为: 第1步, 取10g氯乙酰化聚苯乙烯-二乙烯基苯微球载体PS-acyl-Cl, 加入60ml四氢呋喃 溶胀12 h, 再加入40ml甲醇, 然后按照重量比PS-acyl-Cl: 乙二胺: 碳酸氢钠为1: 8: 0.7, 依 次加入乙二胺和碳酸氢钠, 在。

22、于80下搅拌反应24h, 反应结束后, 将产物倒入砂芯漏斗中, 用蒸馏水洗至中性, 甲醇洗滤3遍真空干燥至恒重, 得到交联EDA微球载体; 第2步, 称60g取交联EDA微球载体, 置于三颈烧瓶中, 加入二甲基甲酰胺溶胀12 h后, 加 入2-丙烯酰胺基-2-甲基丙烷磺酸16g、 N-丁氧基甲基丙烯酰胺3g、 丙烯酸双环戊烯基酯、 K2CO3 5g、 四丁基溴化铵12g, 搅拌下于一定温度的油浴中回流反应, 反应结束后将反应产物 转移至沙芯漏斗中, 用5wt%的HC1清洗4遍后用蒸馏水滤洗至中性, 最后用甲醇洗滤后抽干, 真空干燥至恒重, 得到阳离子交换树脂 上述多用途杀菌保洁喷雾剂的应用, 。

23、用于抑制和杀灭细菌和病毒。 比如, 所述喷雾剂通 过手压气阀来喷射为雾状或溶液细粒, 用于口腔、 咽喉、 鼻腔、 女性阴道、 外阴、 乳头、 男性外 阴、 腋下的疮口及伤口的治疗和保养, 或者用于生鲜肉的保鲜。 0015 本发明中的杀菌保洁喷雾剂, 具有广谱杀菌性, 可以喷雾于人体没有副作用, 不会 产生耐药性, 治疗效果好, 且有较好的口感香味, 病人依从性好, 同事携带使用方便; 可以喷 雾于生鲜肉上, 保鲜效果好且安全无害。 具体实施方式 0016 以下结合具体实施例对本发明做进一步的描述, 其中香精、 色素、 甜味素用量均是 微量, 根据实际需要可以稍作调整。 0017 实施例1: 一。

24、种多用途杀菌保洁喷雾剂, 由以下组分组成: 低铁饱和度乳铁蛋白 7g 冰片 1.5g 薄荷脑 1g 甜味素 适量 橄榄色色素 适量 香精 适量 水 100ml 1、 低铁饱和度乳铁蛋白的制备: 半脱脂牛奶1890L, pH6.7, 总蛋白为3.38g/L, 乳铁蛋白 浓度为126mg/L, 将SPC70树脂加入搅拌罐, 吸附80min, 搅拌速率为60rpm, 收集已吸附后的 说 明 书 3/7 页 6 CN 106377763 A 6 牛奶并用RO水冲洗树脂, 加入第一级100L 2.5%NaCl水溶液解附40min, 搅拌转速40rpm, 收 集解附液后用RO水淋洗收集; 加入第二级100。

25、L 5.5%NaCl水溶液解附40min, 搅拌转速 40rpm, 收集解附液后用RO水淋洗收集树脂3次。 第二级的解吸液以及第二次RO淋洗液合并 收集共180L, 输送到0.1 m的微滤膜设备中进行除菌、 除杂; 用30K分子截留量的超滤膜设备 进行脱盐浓缩, 取样检测其铁饱和度为20%; 将乳铁蛋白浓液输入到装有CM树脂罐中除去杂 蛋白, 收集已吸附杂蛋白后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐 浓缩, 将其中的少量浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。 粉末含水量3.0%, 灰分1.1%, 总蛋 白为96.3%, 铁饱和度20%; 再将剩余的乳铁蛋白浓液输入到装有放置D403。

26、螯合树脂罐中进 行脱铁, 加入0.1mol/L枸橼酸盐, 并醋酸-醋酸钠缓冲液调pH至6.0, 加以搅拌吸附铁离子, 树脂吸附时间120分钟, 搅拌桨转速速率60rpm。 收集以吸附铁离子后的乳铁蛋白溶液继续 用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩, 收集浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。 粉 末含水量3.0%, 灰分1.0%, 总蛋白为96.3%, 铁饱和度7%。 0018 2、 将剩余物质加入低铁饱和度乳铁蛋白中。 0019 实施例2 一种多用途杀菌保洁喷雾剂, 由以下组分组成: 低铁饱和度乳铁蛋白 7g 冰片 1.5g 薄荷脑 1g 甜味素 适量 橄榄色色素 适量 香精 适量 水 10。

27、0ml 1、 低铁饱和度乳铁蛋白的制备: 半脱脂牛奶1890L, pH6.7, 总蛋白为3.38g/L, 乳铁蛋白 浓度为126mg/L, 将SPC70树脂加入搅拌罐, 吸附80min, 搅拌速率为60rpm, 收集已吸附后的 牛奶并用RO水冲洗树脂, 加入第一级100L 2.5%NaCl水溶液解附40min, 搅拌转速40rpm, 收 集解附液后用RO水淋洗收集; 加入第二级100L 5.5%NaCl水溶液解附40min, 搅拌转速 40rpm, 收集解附液后用RO水淋洗收集树脂3次。 第二级的解吸液以及第二次RO淋洗液合并 收集共180L, 输送到0.1 m的微滤膜设备中进行除菌、 除杂;。

28、 用30K分子截留量的超滤膜设备 进行脱盐浓缩, 取样检测其铁饱和度为20%; 将乳铁蛋白浓液输入到装有CM树脂罐中除去杂 蛋白, 收集已吸附杂蛋白后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐 浓缩, 将其中的少量浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。 粉末含水量3.0%, 灰分1.1%, 总蛋 白为96.3%, 铁饱和度20%; 再将剩余的乳铁蛋白浓液输入到装有放置D403螯合树脂罐中进 行脱铁, 加入0.1mol/L枸橼酸盐, 并醋酸-醋酸钠缓冲液调pH至6.0, 加以搅拌吸附铁离子, 树脂吸附时间120分钟, 搅拌桨转速速率60rpm。 收集以吸附铁离子后的乳铁蛋白溶液继续 用1。

29、0K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩, 收集浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。 粉 末含水量3.0%, 灰分1.0%, 总蛋白为96.3%, 铁饱和度7%。 0020 2、 将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶, 恒温37进行酶解 15min, 此时乳铁蛋白与乳铁素B的比例大约为7:1。 0021 3、 将剩余物质加入乳铁蛋白与乳铁素B混合物中。 说 明 书 4/7 页 7 CN 106377763 A 7 0022 实施例3 一种多用途杀菌保洁喷雾剂, 由以下组分组成: 低铁饱和度乳铁蛋白 9g 冰片 2g 薄荷脑 1.5g 甜味素 适量 橄榄色色素 适量 香精 适量 。

30、水 100ml 1、 低铁饱和度乳铁蛋白的制备: 半脱脂牛奶1890L, pH6.7, 总蛋白为3.38g/L, 乳铁蛋白 浓度为126mg/L, 将SPC70树脂加入搅拌罐, 吸附80min, 搅拌速率为60rpm, 收集已吸附后的 牛奶并用RO水冲洗树脂, 加入第一级100L 2.5%NaCl水溶液解附40min, 搅拌转速40rpm, 收 集解附液后用RO水淋洗收集; 加入第二级100L 5.5%NaCl水溶液解附40min, 搅拌转速 40rpm, 收集解附液后用RO水淋洗收集树脂3次。 第二级的解吸液以及第二次RO淋洗液合并 收集共180L, 输送到0.1 m的微滤膜设备中进行除菌、。

31、 除杂; 用30K分子截留量的超滤膜设备 进行脱盐浓缩, 取样检测其铁饱和度为20%; 将乳铁蛋白浓液输入到装有CM树脂罐中除去杂 蛋白, 收集已吸附杂蛋白后的乳铁蛋白溶液继续用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐 浓缩, 将其中的少量浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。 粉末含水量3.0%, 灰分1.1%, 总蛋 白为96.3%, 铁饱和度20%; 再将剩余的乳铁蛋白浓液输入到装有放置D403螯合树脂罐中进 行脱铁, 加入0.1mol/L枸橼酸盐, 并醋酸-醋酸钠缓冲液调pH至6.0, 加以搅拌吸附铁离子, 树脂吸附时间120分钟, 搅拌桨转速速率60rpm。 收集以吸附铁离子后的乳铁蛋白溶液继。

32、续 用10K分子截留量的超滤膜设备进行脱盐浓缩, 收集浓液进行冷冻干燥所得淡粉色干粉。 粉 末含水量3.0%, 灰分1.0%, 总蛋白为96.3%, 铁饱和度7%。 0023 2、 将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶恒温37进行酶解 20min, 此时乳铁蛋白与乳铁素B的比例大约为6: 1。 0024 3、 将剩余物质加入乳铁蛋白与乳铁素B混合物中。 0025 实施例4 一种多用途杀菌保洁喷雾剂, 与实施例3一致, 区别仅仅在于, 将其中的SPC70树脂替换 为通过如下的方法制备得到阳离子交换树脂: 第1步, 取10g氯乙酰化聚苯乙烯-二乙烯基苯微球载体(PS-acyl。

33、-Cl), 加入60ml四氢呋 喃溶胀12 h, 再加入40ml甲醇, 然后按照重量比(PS-acyl-Cl): 乙二胺 (EDA) : 碳酸氢钠为1: 8: 0.7, 依次加入乙二胺和碳酸氢钠, 在于80下搅拌反应24h, 反应结束后, 将产物倒入砂 芯漏斗中, 用蒸馏水洗至中性, 甲醇洗滤3遍真空干燥至恒重, 得到交联EDA微球载体; 第2步, 称60g取交联EDA微球载体, 置于三颈烧瓶中, 加入二甲基甲酰胺溶胀12 h后, 加 入2-丙烯酰胺基-2-甲基丙烷磺酸(AMPS)16g、 N-丁氧基甲基丙烯酰胺(NBMA)3g、 丙烯酸双 环戊烯基酯 (DCPA) 、 K2CO3 5g、 四。

34、丁基溴化铵 (TBAB) 12g, 搅拌下于一定温度的油浴中回流 反应, 反应结束后将反应产物转移至砂芯漏斗中, 用5wt%的HC1清洗4遍后用蒸馏水滤洗至 中性, 最后用甲醇洗滤后抽干, 真空干燥至恒重, 得到阳离子交换树脂。 0026 最终得到的低铁饱和度乳铁蛋白的技术指标为: 粉末含水量3.0%, 灰分1.0%, 总蛋 说 明 书 5/7 页 8 CN 106377763 A 8 白为96.8%, 铁饱和度6%。 0027 2、 将低铁饱和度的乳铁蛋白加入800-1000u/g的胃蛋白酶恒温37进行酶解 25min, 此时乳铁蛋白与乳铁素B的比例大约为5: 1。 0028 3、 将剩余物。

35、质加入乳铁蛋白与乳铁素B混合物中。 0029 多用杀菌喷雾剂体外抗菌试验 体外抗菌试验采用实施例2制备的多用途杀菌喷雾剂的浓度为5000mg/l, 对照品为成 都恩威制药有限公司生产的洁尔阴洗液; 试验菌株为: 金黄色葡萄球菌ATCC 6538、 白色念 珠菌ATCC 10231、 枯草芽孢杆菌ATCC 6633。 试验数据如下表所示: 体外杀菌实验表明: 多用途杀菌保洁喷雾剂对金黄色葡萄球菌具有很强的杀菌作用, 三种浓度 (50mg/l、 100mg/l、 200mg/l) 下作用5分钟, 杀菌率可达到99%以上; 对枯草芽孢杆 菌也有一定的杀伤作用, 三种浓度 (50mg/l、 100mg/l、 200mg/l) 下, 杀菌率可达到90%以上; 对白色念珠菌具有较强的杀伤作用, 三种浓度 (50mg/l、 100mg/l、 200mg/l) 下作用10分钟, 杀菌率平均可以达到98.5%以上。 0030 针对实施例一、 二、 三、 四做比较试验, 实验结果如下表所示, 相比而言实施例4的 效果最佳: 说 明 书 6/7 页 9 CN 106377763 A 9 说 明 书 7/7 页 10 CN 106377763 A 10 。

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