技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种白及组培苗的快繁生长技术。
背景技术
白及生于海拔 1300～1800m的半山区，有较高的观赏价值和极高的药用价值，白及为传统止血药，具有止血收敛、消肿生肌的作用。自2000年以来白及遭到了各地农户的肆意采挖，再加上其无法自然繁殖的特殊性，导致野生白及濒临灭绝，需要人工繁殖和栽培，我国白及人工栽培正处于起步的初期阶段，随着野生资源的枯竭，价格也水涨船高，白及种苗的价格也是暴涨。目前繁殖主要采取块茎繁殖、种子直播和组培三种方式，第一种块茎繁殖，由于技术要求低繁殖方法简单、用时短和苗较健壮的特点，是目前主要的种苗来源，但是块茎繁殖直接导致目前市场成品白及少，大量的新鲜白及成本用于块茎繁殖，而不是作为成品进入市场，由此造成白及成品价格不断推高；第二种是直播苗，由于白及的种子非常细小且无胚乳，因此在自然状况下很难萌发和生长，种子直播技术要求极高，虽然已有成功案例，但是对于广大的种植户来说，远远无法实现；因而白及组培繁殖成为发展的重中之重。
对此，有必要发明一种白及组培苗的快繁生长技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种白及组培苗的快繁生长技术。
本发明的目的是这样实现的，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡10-20分钟，再用75%酒精浸泡5-10分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养15~30天，培养条件为温度控制在19-20℃；光照强度为1500lux-2000lux，光照时间为5-6h；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为12~17粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体1.5~2.5cm，反复转移5-6次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为2.5~3.5cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距0.8~1.2cm，每瓶分化培养基中接种10-15丛，培养无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养15-30天；培养条件为温度控制在19-20℃；光照强度为1500lux-2000lux，光照时间为5-6h；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种8-10次，待60-80天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗8-18天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度18-20度，相对湿度60%-70%，土壤湿度在20%-40%，遮荫，遮光率为72~78%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1-1.5cm 植株高度达到10-15cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产。
与现有技术相比，本发明的有益效果：
1、本发明提供了一种白及组培苗的快繁生长技术，通过选种保证了优质种源，然后经过人工组织培养，大大缩短了组培时间和周期，组培苗的成活率高达99%以上，将本发明得到的组培苗进行栽培得到的块茎按照中国药典进行检测，均达到标准。
2、本发明组培苗快繁生长技术可以快速繁殖大量种苗，在不同培养基上进行无菌播种，种子萌发后用组织培养方法进行无性繁殖，实现白及种苗的规模化生产。
3、本发明将现有的白及组培苗的种植周期缩短一半以上，大大提高了组培效率，而且本发明的方法操作简单，易推广，而且有效避免了现有的市场上由于采用块茎繁殖而导致的白及成品少价格高的问题。
4、本发明的初代培养物经过切分和去顶处理，不仅扩大培养提高成活率，而且有利于后期的成长和外观整齐。
5、本发明得到的组培苗100%为优质的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.），所得到的组培苗抗病性强，亩产约800-1200kg，块茎的尺寸大小范围为4-6cm，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数均符合中国药典2015版一部白及中的含量要求。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的白及组培苗的快繁生长技术，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的操作用具消毒为把镊子、手术刀和装有定性滤纸的培养皿和两个空瓶盖上盖子后放到灭菌锅中灭菌两次；所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡10-20分钟，再用75%酒精浸泡5-10分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚用镊子夹出放进培养皿中的定性滤纸上，用镊子夹住果荚，手术刀在果荚的一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后置于培养室或光照培养箱中培养15~30天，培养条件为温度控制在19-20℃；光照强度为1500lux-2000lux，光照时间为5-6h；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为12~17粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体1.5~2.5cm，反复转移5-6次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为2.5~3.5cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距0.8~1.2cm，每瓶分化培养基中接种10-15丛，培养无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基放入培养室中经过15-30天后进行生根诱导；培养条件为温度控制在19-20℃；光照强度为1500lux-2000lux，光照时间为5-6h；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种8-10次，待60-80天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗8-18天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度18-20度，相对湿度60%-70%，土壤湿度在20%-25%，遮荫，遮光率为72~78%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1-1.5cm 植株高度达到10-15cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产。
步骤（1）中所述的经过种源筛选的白及为贵州遵义地区的野生的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.）。
所述的种源筛选为首先确定该野生的植株为紫花三叉白及，其次经过鉴定，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数符合中国药典2015版一部白及中的含量要求，经过多地区的种源对比，贵州遵义地区的野生紫花三叉白及的含量参数最优。
步骤（2）中所述的人工培育得到果荚的方法为：
方法一：将紫花三叉白及挖出，清理土壤，使用工具将其从主根切割分离，并在伤口涂抹草木灰，然后移栽进行管护，在花季选择粗壮的花蕾，用毛笔或棉签将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚；或
方法二：将紫花三叉白及的块茎取出，通过块茎繁殖，得到了第一批种苗，将第一批种苗进行种植，然后在紫花三叉白及的花季，在花季选择粗壮的花蕾，用毛笔或棉签将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚。
所述的初代培养基的配制方法为以配制40L为基数：（1）称取白糖850g-920g，琼脂120g-200g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素400ml-600ml，微量元素100ml-200ml，铁盐60ml-70ml，有机成分60ml-70ml，NAA60ml-70ml，氯化钙120ml-200ml，肌醇60ml-70ml，生长素60ml-100ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的初代培养基的PH值在4.6-7.5。
步骤（3）中所述的继代增殖培养基的配制方法为以配制7L为基数：（1）称取白糖15g-20g，称取琼脂25g-40g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素70ml-190ml，微量元素10ml-29ml，铁盐10ml-20ml，有机成分10ml-20ml，NAA10ml-20ml，氯化钙10ml-25ml，肌醇10ml-20ml，生长素10ml-20ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的PH值在4.0-7.0。
步骤（3）中所述的分化培养基的配制方法为以配制20L为基数：称取白糖400g-500g，称取琼脂70g-150g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素450ml-700ml，微量元素70ml-80ml，铁盐40ml-70ml，有机成分40ml-70ml，氯化钙70ml-120ml，肌醇15ml-60ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在3.0-5.0。
步骤（3）中所述的生根培养基的配制方法为以配制25L为基数：（1）称取白糖700g-1400g，称取琼脂100g-200g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素650ml-900ml，微量元素90ml-180ml，铁盐60ml-90ml，有机成分60ml-90ml，NAA 45ml-90ml，氯化钙90ml-190ml，肌醇40ml-80ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在4.0-7.0。
所述的母液中大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1；生长素为6B-A。
所述的母液中大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1。
步骤（3）中所述的基质为先将有机肥与田间原土充分混合均匀，然后浸透水后放置2~4天，避免烧根；之后加入粗砂、多菌灵和百菌清、粉状辛硫磷和毒死蜱混合均匀后理墒，即可；所述的田间原土：有机肥的重量比为100：30~40，所述的粗砂的加入量为加入粗砂使得基质含沙量为35~45%，所述的田间原土为取自所述的移向大田用于生产的大田的田间土壤，所述的有机肥为腐熟的羊粪、猪粪、鸡粪、牛粪中的一种或多种；所述的多菌灵和/或百菌清在基质中的加入量为100~500g/立方米，加入方法为200倍液喷施；所述的辛硫磷和/或毒死蜱在基质中的加入量为80~180g/立方米，加入方法为300倍液喷施。
实施例1
一种白及组培苗的快繁生长技术，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；所述的经过种源筛选的白及为贵州遵义地区的野生的紫花三叉白及；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；所述的人工培育得到果荚的方法为：将白及挖出，清理土壤，将其从主根切割分离，并在伤口涂抹草木灰，然后移栽进行管护，在花季选择粗壮的花蕾，将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚；
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡10分钟，再用75%酒精浸泡5分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养15天，培养条件为温度控制在19℃；光照强度为1500lux，光照时间为5h，诱导其去分化形成愈伤组织；所述的初代培养基的配制方法为以配制40L为基数：（1）称取白糖850g，琼脂120g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素400ml，微量元素100ml，铁盐60ml，有机成分60ml，NAA60ml，氯化钙120ml，肌醇60ml，生长素60ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的初代培养基的PH值在4.6；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为12粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体1.5cm，反复转移5次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为2.5cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距0.8cm，每瓶分化培养基中接种10丛，诱导其再分化形成无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养15天；培养条件为温度控制在19℃；光照强度为1500lux，光照时间为5h；
所述的继代增殖培养基的配制方法为以配制7L为基数：（1）称取白糖15g，称取琼脂25g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素70ml，微量元素10ml，铁盐10ml，有机成分10ml，NAA10ml，氯化钙10ml，肌醇10ml，生长素10ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的PH值在4.0；
所述的分化培养基的配制方法为以配制20L为基数：称取白糖400g，称取琼脂70g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素450ml，微量元素70ml，铁盐40ml，有机成分40ml，氯化钙70ml，肌醇15ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在3.0；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种8次，待60-80天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；
所述的生根培养基的配制方法为以配制25L为基数：（1）称取白糖700g，称取琼脂100g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素650ml，微量元素90ml，铁盐60ml，有机成分60ml，NAA 45ml，氯化钙90ml，肌醇40ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在4.0；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗8天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度18度，相对湿度60%，土壤湿度在20%，遮荫，遮光率为72%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1cm 植株高度达到10cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产。
所述的大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1；生长素为6B-A。
本发明实施例1得到的白及组培苗移栽至大田的成活率达到99.25%，得到的组培苗100%为优质的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.），不存在杂苗，且抗病性强，移栽至大田后亩产约800kg，块茎的尺寸大小范围为4-6cm，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数均符合中国药典2015版一部白及中的含量要求。
本发明的白及组培苗的培养周期相对于现有技术下，初代培养缩短了10-15天，继代增殖缩短了45-50天，生根诱导缩短了45-60天。
实施例2
一种白及组培苗的快繁生长技术，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；所述的经过种源筛选的白及为贵州遵义地区的野生的紫花三叉白及；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；所述的人工培育得到果荚的方法为：将白及的块茎取出，通过块茎繁殖，得到了第一批种苗，将第一批种苗进行种植，然后在紫花三叉白及的花季，在花季选择粗壮的花蕾，将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚；
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡20分钟，再用75%酒精浸泡10分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养30天，培养条件为温度控制在20℃；光照强度为2000lux，光照时间为6h，诱导其去分化形成愈伤组织；所述的初代培养基的配制方法为以配制40L为基数：（1）称取白糖920g，琼脂200g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素600ml，微量元素200ml，铁盐70ml，有机成分70ml，NAA70ml，氯化钙200ml，肌醇70ml，生长素100ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的初代培养基的PH值在7.5；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为17粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体2.5cm，反复转移6次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为3.5cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距1.2cm，每瓶分化培养基中接种15丛，诱导其再分化形成无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养30天；培养条件为温度控制在20℃；光照强度为2000lux，光照时间为6h；
所述的继代增殖培养基的配制方法为以配制7L为基数：（1）称取白糖20g，称取琼脂40g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素190ml，微量元素29ml，铁盐20ml，有机成分20ml，NAA20ml，氯化钙25ml，肌醇20ml，生长素20ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的PH值在7.0；
所述的分化培养基的配制方法为以配制20L为基数：称取白糖500g，称取琼脂150g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素700ml，微量元素80ml，铁盐70ml，有机成分70ml，氯化钙120ml，肌醇60ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在5.0；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种10次，待60-80天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；
所述的生根培养基的配制方法为以配制25L为基数：（1）称取白糖1400g，称取琼脂200g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素900ml，微量元素180ml，铁盐90ml，有机成分90ml，NAA 90ml，氯化钙190ml，肌醇80ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在7.0；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗18天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度20度，相对湿度70%，土壤湿度在40%，遮荫，遮光率为78%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1.5cm 植株高度达到15cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产。
所述的大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1；生长素为6B-A。
本发明实施例2得到的白及组培苗移栽至大田的成活率达到99.30%，得到的组培苗100%为优质的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.），抗病性强，亩产约1200kg，块茎的尺寸大小范围为4-6cm，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数均符合中国药典2015版一部白及中的含量要求。
本发明的白及组培苗的培养周期相对于现有技术下，初代培养缩短了10-15天，继代增殖缩短了45-50天，生根诱导缩短了45-60天。
实施例3
一种白及组培苗的快繁生长技术，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；所述的经过种源筛选的白及为贵州遵义地区的野生的紫花三叉白及；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；所述的人工培育得到果荚的方法包括：
方法一：将白及挖出，清理土壤，将其从主根切割分离，并在伤口涂抹草木灰，然后移栽进行管护，在花季选择粗壮的花蕾，将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚；或
方法二：将白及的块茎取出，通过块茎繁殖，得到了第一批种苗，将第一批种苗进行种植，然后在紫花三叉白及的花季，在花季选择粗壮的花蕾，将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚；
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡15分钟，再用75%酒精浸泡8分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养20天，培养条件为温度控制在19.5℃；光照强度为1800lux，光照时间为5.5h，诱导其去分化形成愈伤组织；所述的初代培养基的配制方法为以配制40L为基数：（1）称取白糖900g，琼脂160g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素500ml，微量元素150ml，铁盐65ml，有机成分65ml，NAA65ml，氯化钙160ml，肌醇65ml，生长素80ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的初代培养基的PH值在6；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为15粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体2cm，反复转移5次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为2cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距1cm，每瓶分化培养基中接种12丛，诱导其再分化形成无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养20天；培养条件为温度控制在19.5℃；光照强度为1800lux，光照时间为5.5h；
所述的继代增殖培养基的配制方法为以配制7L为基数：（1）称取白糖18g，称取琼脂35g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素120ml，微量元素20ml，铁盐15ml，有机成分15ml，NAA15ml，氯化钙20ml，肌醇15ml，生长素15ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的PH值在5.5；
所述的分化培养基的配制方法为以配制20L为基数：称取白糖450g，称取琼脂120g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素600ml，微量元素75ml，铁盐55ml，有机成分55ml，氯化钙100ml，肌醇40ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在4.0；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种9次，待60-80天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；
所述的生根培养基的配制方法为以配制25L为基数：（1）称取白糖1000g，称取琼脂150g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素750ml，微量元素140ml，铁盐75ml，有机成分75ml，NAA 70ml，氯化钙140ml，肌醇60ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在5.5；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗14天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度19度，相对湿度65%，土壤湿度在30%，遮荫，射光率为75%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1.2cm 植株高度达到12cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产。
所述的大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1；生长素为6B-A。
本发明实施例3得到的白及组培苗移栽至大田的成活率达到99.45%，得到的组培苗100%为优质的紫花三叉大白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.），抗病性强，亩产约1000kg，块茎的尺寸大小范围为4-6cm，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数均符合中国药典2015版一部白及中的含量要求。
本发明的白及组培苗的培养周期相对于现有技术下，初代培养缩短了10-15天，继代增殖缩短了45-50天，生根诱导缩短了45-60天。
实施例4
一种白及组培苗的快繁生长技术，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；所述的经过种源筛选的白及为贵州遵义地区的野生的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.）；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；所述的人工培育得到果荚的方法为：将白及挖出，清理土壤，将其从主根切割分离，并在伤口涂抹草木灰，然后移栽进行管护，在花季选择粗壮的花蕾，将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡12分钟，再用75%酒精浸泡6分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养16天，培养条件为温度控制在20℃；光照强度为1600lux，光照时间为5.2h；所述的初代培养基的配制方法为以配制40L为基数：（1）称取白糖880g，琼脂140g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素450ml，微量元素120ml，铁盐62ml，有机成分62ml，NAA62ml，氯化钙140ml，肌醇62ml，生长素62ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的初代培养基的PH值在5；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为14粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体1.8cm，反复转移5次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为2.8cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距0.9cm，每瓶分化培养基中接种11丛，培养无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养16天；培养条件为温度控制在19℃；光照强度为1600lux，光照时间为5h；
所述的继代增殖培养基的配制方法为以配制7L为基数：（1）称取白糖16g，称取琼脂28g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素100ml，微量元素15ml，铁盐12ml，有机成分12ml，NAA12ml，氯化钙18ml，肌醇12ml，生长素12ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的PH值在5.0；
所述的分化培养基的配制方法为以配制20L为基数：称取白糖420g，称取琼脂90g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素500ml，微量元素72ml，铁盐50ml，有机成分50ml，氯化钙80ml，肌醇20ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在3.5；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种8次，待65天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；所述的生根培养基的配制方法为以配制25L为基数：（1）称取白糖900g，称取琼脂120g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素700ml，微量元素100ml，铁盐65ml，有机成分65ml，NAA 55ml，氯化钙110ml，肌醇50ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在5.0；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗10天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度18.5度，相对湿度62%，土壤湿度在25%，遮荫，遮光率为74%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1.2cm 植株高度达到12cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产；
所述的基质为先将有机肥与田间原土充分混合均匀，然后浸透水后放置2天，避免烧根；之后加入粗砂、多菌灵和百菌清、粉状辛硫磷和毒死蜱混合均匀后理墒，即可；所述的田间原土：有机肥的重量比为100：30，所述的粗砂的加入量为加入粗砂使得基质含沙量为35%，所述的田间原土为取自所述的移向大田用于生产的大田的田间土壤，所述的有机肥为腐熟的羊粪；所述的多菌灵或百菌清在基质中的加入量为100g/立方米，加入方法为200倍液喷施；所述的辛硫磷或毒死蜱在基质中的加入量为80g/立方米，加入方法为300倍液喷施。
所述的大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1；生长素为6B-A。
本发明实施例4得到的白及组培苗移栽至大田的成活率达到99.22%，得到的组培苗100%为优质的紫花三叉大白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.），抗病性强，亩产约1000kg，块茎的尺寸大小范围为4-6cm，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数均符合中国药典2015版一部白及中的含量要求。
本发明的白及组培苗的培养周期相对于现有技术下，初代培养缩短了10-15天，继代增殖缩短了45-50天，生根诱导缩短了45-60天。
实施例5
一种白及组培苗的快繁生长技术，包括以下步骤：
1）选种：选择经过种源筛选的白及作为种源；所述的经过种源筛选的白及为贵州遵义地区的野生的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.）；
2）果荚的获取：将经过步骤（1）选种的白及进行人工培育得到果荚，所述的果荚的采集时间为10月下旬至11月上旬，成熟度为果荚呈灰黑色，保证果荚无破损；所述的人工培育得到果荚的方法为：将白及的块茎取出，通过块茎繁殖，得到了第一批种苗，将第一批种苗进行种植，然后在紫花三叉白及的花季，在花季选择粗壮的花蕾，将花中的花粉轻沾后，点入选用的花蕾当中进行人工相互杂交授粉，从而得到饱满而硕大的果荚；
3）植物组织培养：
A、消毒：将操作用具和果荚分别消毒，所述的果荚消毒为将果荚先用0.2%升汞浸泡18分钟，再用75%酒精浸泡8分钟；
B、初代培养：把消毒后的果荚一端切开口，然后把种子均匀的撒在初代培养基上，然后培养28天，培养条件为温度控制在20℃；光照强度为1900lux，光照时间为5.8h；所述的初代培养基的配制方法为以配制40L为基数：（1）称取白糖910g，琼脂180g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素550ml，微量元素180ml，铁盐68ml，有机成分68ml，NAA68ml，氯化钙180ml，肌醇68ml，生长素68ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的初代培养基的PH值在7.0；
C、继代增殖培养：将初代培养获得的培养物切分为16粒一丛，再做去顶处理，切去苗尖，保留下端茎体2.2cm，反复转移5-6次到新的继代增殖培养基上，进行扩大增殖培养，待芽苗繁殖到苗高为3.2cm后，再将一部分接种到分化培养基，每丛间距1.1cm，每瓶分化培养基中接种13丛，培养无根芽苗；另一部分保存或继续扩繁，称之为母瓶；将接种后的分化培养基培养28天；培养条件为温度控制在20℃；光照强度为1900lux，光照时间为5.8h；
所述的继代增殖培养基的配制方法为以配制7L为基数：（1）称取白糖19g，称取琼脂35g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素160ml，微量元素25ml，铁盐18ml，有机成分18ml，NAA18ml，氯化钙22ml，肌醇18ml，生长素18ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的继代增殖培养基的PH值在6.0；
所述的分化培养基的配制方法为以配制20L为基数：称取白糖480g，称取琼脂130g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入30升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素650ml，微量元素78ml，铁盐60ml，有机成分60ml，氯化钙110ml，肌醇55ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在4.5；
D、生根诱导：将步骤C得到的芽苗接种到生根培养基上，反复接种10次，待78天后植株高于瓶口且壮硕时，方可进行炼苗；所述的步骤B、C、D均在超净工作台上进行；所述的生根培养基的配制方法为以配制25L为基数：（1）称取白糖1300g，称取琼脂180g，备用；（2）将琼脂倒入不锈钢锅中，加入纯净水，煮至琼脂接近透明；将白糖倒入50升不锈钢锅中加入适量热水溶解，把煮好的琼脂倒入白糖水中备用；（3）配制母液：取大量元素850ml，微量元素160ml，铁盐80ml，有机成分80ml，NAA 80ml，氯化钙170ml，肌醇65ml；然后混合所有溶液，将混合后的溶液倒入步骤（2）得到的溶液中搅拌充分混合，灭菌，即可；所述的生根培养基的PH值在6.5；
E、炼苗移栽：将步骤D得到的生根苗在室外进行炼苗16天，待苗适应外部环境，再将苗移栽到疏松透气的基质中，控制空气温度20度，相对湿度68%，土壤湿度在36%，遮荫，遮光率为77%，苗移栽前用多菌灵浸泡根部，并用50%甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒叶片，进行病虫害防治；当组培苗完全成活且植株的块茎达到1.4cm 植株高度达到14cm，有分叉后的新芽破土而出，即可移向大田用于生产；
所述的基质为先将有机肥与田间原土充分混合均匀，然后浸透水后放置4天，避免烧根；之后加入粗砂、多菌灵和百菌清、粉状辛硫磷和毒死蜱混合均匀后理墒，即可；所述的田间原土：有机肥的重量比为100： 40，所述的粗砂的加入量为加入粗砂使得基质含沙量为45%，所述的田间原土为取自所述的移向大田用于生产的大田的田间土壤，所述的有机肥为腐熟的羊粪、猪粪、鸡粪、牛粪混合物；所述的多菌灵和百菌清在基质中的加入量为500g/立方米，加入方法为200倍液喷施；所述的辛硫磷和毒死蜱在基质中的加入量为180g/立方米，加入方法为300倍液喷施。
所述的大量元素包括硝酸钾、硝酸铵、硫酸镁；微量元素包括硫酸锰、氯化钴、硫酸铜、硼酸；铁盐为硫酸亚铁；有机成分包括烟酸、VB6、VB1；生长素为6B-A。
本发明实施例5得到的白及组培苗移栽至大田的成活率达到99.42%，得到的组培苗100%为优质的紫花三叉白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.），抗病性强，亩产约1000kg，块茎的尺寸大小范围为4-6cm，其白及多糖、蒽、菎类和淀粉的含量参数均符合中国药典2015版一部白及中的含量要求。
本发明的白及组培苗的培养周期相对于现有技术下，初代培养缩短了10-15天，继代增殖缩短了45-50天，生根诱导缩短了45-60天。