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1、(10)申请公布号 CN 102283109 A (43)申请公布日 2011.12.21 CN 102283109 A *CN102283109A* (21)申请号 201010202124.X (22)申请日 2010.06.17 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 上海上房园艺有限公司 地址 201114 上海市闵行区浦江镇浦江村 (72)发明人 陈建华 黄建荣 沈勤 (74)专利代理机构 上海科盛知识产权代理有限 公司 31225 代理人 赵志远 (54) 发明名称 一种香蕉新品种的培育方法 (57) 摘要 本发明涉及一种香蕉新品种的培育方法， 该 方法是包括无菌材料。
2、的获得、 芽份分化和增殖、 不 定芽壮苗培养、 生根培养和炼苗与移栽五步法得 到香蕉种苗。 与现有技术相比， 本发明通过组培技 术， 可大大提高繁殖速度和苗木的整齐度， 更好地 保持原有的母本性状， 并且能够提高成活率， 从而 提高产量， 移栽成活率可达 95。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 5 页 CN 102283117 A1/1 页 2 1. 一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 该方法是包括无菌材料的获得、 芽份分化 和增殖、 不定芽壮苗培养、 生根培养和炼苗与移栽五步法， 具体步骤如下 ： (1) 。
3、无菌材料的获得 ： 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓 度为75wt的乙醇浸泡20-40s， 1wt的升汞溶液浸泡10-20min， 经无菌水冲洗5-6次后用 无菌滤纸吸干表面水份， 取小芽基部切成 1cm 长接种于诱导培养基上 ； (2) 芽的分化和增殖是 ： 小芽接种于诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄 绿色突起， 1 周后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月， 然后切下带芽愈伤组织放入不定芽增 殖培养基进行培养 ； (3) 不定芽壮苗培养 在不定芽增殖培养基中诱导出的丛生芽， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养 基上， 不定芽迅速伸。
4、长， 20 天后可以长成 2-3cm 的小植株 ； (4) 生根培养 取高度为 2-3cm 的小植株， 转接入生根培养基中诱导生根， 10 天后幼苗基部分化出许 多白色的根原基， 30 天后可以长至 4-6cm ； (5) 炼苗与移栽 生根培养 20-30 天， 根系长至 1-2cm 时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开瓶炼 苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即可。 2. 根据权利要求 1 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的小芽 诱 导 培 养 基 的 成 分 为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1m。
5、g/L、 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L 或 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。 3. 根据权利要求 2 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的小芽诱导 培养基的成分优选 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。 4. 根据权利要求 1 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的增殖培养 基的成分为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L 或 MS+6-BA3.0mg/ L+NAA0.3mg/L。 5. 根据权利要求 4 所述的一种香蕉新品种的培育方法。
6、， 其特征在于， 所述的增殖培养 基的成分优选 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。 6. 根据权利要求 1 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的壮苗培养 基的成分为 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 或 MS+6-BA2.0mg/ L+NAA0.2mg/L。 7. 根据权利要求 6 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的壮苗培养 基的成分优选 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。 8. 根据权利要求 1 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述。
7、的生根培养 基的成分为 MS+NAA0.05mg/L、 MS+NAA0.1mg/L 或 MS+NAA0.2mg/L。 9. 根据权利要求 8 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的生根培养 基的成分优选 MS+NAA0.1mg/L。 10. 根据权利要求 1 所述的一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 所述的小芽诱导 培养基、 增殖培养基、 壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖 30g/L、 琼脂 6g/L， 该培养 基的培养温度为 24-26， 光照为 70-90mol/ms， pH 值为 5.5-6.0。 权 利 要 求 书 CN 102283109 A CN 1022。
8、83117 A1/5 页 3 一种香蕉新品种的培育方法 技术领域 0001 本发明涉及一种草本植物的组织培养方法， 尤其是涉及一种香蕉新品种的培育方 法。 背景技术 0002 香蕉 Rowe Red 植株为大型草本， 高 1 米左右， 叶上有红色条纹， 观赏性奇特， 在 香蕉属中属于小型植物， 是以观叶为主的植物材料。 香蕉主要在热带地区栽培， 目前在温带 地区也很受重视。做为国外引进的品种引种数量较少， 其分株慢， 但有固定的市场需求量， 且市场需求量大， 种苗供应受限制。通过组培技术， 极大提高繁殖速度和苗的整齐度， 更好 地保持原有的母本性状。香蕉 Rowe Red 的组培报道尚未见。 。
9、发明内容 0003 本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种可极大提高繁 殖速度和苗的整齐度， 更好地保持原有的母本性状的一种香蕉新品种的培育方法。 0004 本发明的目的可以通过以下技术方案来实现 ： 0005 一种香蕉新品种的培育方法， 其特征在于， 该方法是包括无菌材料的获得、 芽份分 化和增殖、 不定芽壮苗培养、 生根培养和炼苗与移栽五步法， 具体步骤如下 ： 0006 (1) 无菌材料的获得 ： 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓度为75wt的乙醇浸泡20-40s， 1wt的升汞溶液浸泡10-20min， 经无菌水冲洗5-6次 后用无菌。
10、滤纸吸干表面水份， 取小芽基部切成 1cm 长接种于诱导培养基上 ； 0007 (2) 芽的分化和增殖是 ： 小芽接种于诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出 现黄绿色突起， 1 周后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月， 然后切下带芽愈伤组织放入不定 芽增殖培养基进行培养 ； 0008 (3) 不定芽壮苗培养 0009 在不定芽增殖培养基中诱导出的丛生芽， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗 培养基上， 不定芽迅速伸长， 20 天后可以长成 2-3cm 的小植株 ； 0010 (4) 生根培养 0011 取高度为 2-3cm 的小植株， 转接入生根培养基中诱导生根， 10 天后幼。
11、苗基部分化 出许多白色的根原基， 30 天后可以长至 4-6cm ； 0012 (5) 炼苗与移栽 0013 生根培养 20-30 天， 根系长至 1-2cm 时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开 瓶炼苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即 可。 0014 所述的小芽诱导培养基的成分为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA2.0mg/ L+NAA0.2mg/L 或 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。 0015 所述的小芽诱导培养基的成分优选 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.。
12、2mg/L。 说 明 书 CN 102283109 A CN 102283117 A2/5 页 4 0016 所 述 的 增 殖 培 养 基 的 成 分 为 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA2.0mg/ L+NAA0.2mg/L 或 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。 0017 所述的增殖培养基的成分优选 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。 0018 所 述 的 壮 苗 培 养 基 的 成 分 为 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、 MS+6-BA1.0mg/ L+NAA0.1mg/L 或 MS+6-BA。
13、2.0mg/L+NAA0.2mg/L。 0019 所述的壮苗培养基的成分优选 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。 0020 所述的生根培养基的成分为 MS+NAA0.05mg/L、 MS+NAA0.1mg/L 或 MS+NAA0.2mg/L。 0021 所述的生根培养基的成分优选 MS+NAA0.1mg/L。 0022 所述的小芽诱导培养基、 增殖培养基、 壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗 糖 30g/L、 琼脂 6g/L， 该培养基的培养温度为 24-26， 光照为 70-90mol/ms， pH 值为 5.5-6.0。 0023 与现有技术相比， 本发明通过组培技术， 。
14、可大大提高繁殖速度和苗木的整齐度， 更 好地保持原有的母本性状， 并且能够提高成活率， 从而提高产量。 具体实施方式 0024 下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。 0025 实施例 1 0026 一种香蕉新品种的培育方法， 该方法包括以下步骤 ： 0027 (1) 无菌化处理 0028 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓度为 75wt的乙 醇浸泡 30s， 1wt的升汞溶液浸泡 15min， 经无菌水冲洗 5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水 份， 取小芽基部切成 1cm 长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L 上 ； 00。
15、29 (2) 芽的分化和增殖 0030 小芽接种于小芽诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄绿色突起， 1 周 后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月后， 切下带芽愈伤组织放入增殖培养基 MS+6-BA1.0mg/ L+NAA0.1mg/L 进行培养， 基部愈伤组织比较多， 但不影响不定芽的增殖， 不定芽生长迅速并 无玻璃化等不良现象， 在该培养中生长发育良好 ； 0031 (3) 不定芽壮苗培养 0032 在增殖培养基上诱导出丛生芽， 丛生芽每丛只有 2-3 株可以伸长， 其余处于矮化 状态， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养基 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.。
16、1mg/L 上， 不定 芽迅速伸长， 20 天后可以长到 2-3cm ； 0033 (4) 生根培养 0034 取高度为2-3cm的小植株， 转接入生根培养基MS+NAA0.1mg/L中诱导生根， 10天后 幼苗基部分化出许多白色的根原基， 30 天后可以长至 4-6cm， 根系粗壮， 须根众多， 生根率 为 100 ； 0035 (5) 炼苗与移栽 0036 生根培养25天， 根系长至1-2cm时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开瓶炼 苗3天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化40天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即可， 移 栽成活率为 95。 说 明 书 CN 10228310。
17、9 A CN 102283117 A3/5 页 5 0037 实施例 2 0038 一种香蕉新品种的培育方法， 该方法包括以下步骤 ： 0039 (1) 无菌化处理 0040 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓度为 75wt的乙 醇浸泡 20s， 1wt的升汞溶液浸泡 10min， 经无菌水冲洗 5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水 份， 取小芽基部切成 1cm 长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 上 ； 0041 (2) 芽的分化和增殖 0042 小芽接种于小芽诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄绿色突起， 。
18、1 周 后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月后， 切下带芽愈伤组织放入增殖培养基 MS+6-BA2.0mg/ L+NAA0.2mg/L 进行培养， 基部愈伤组织比较多， 但不影响不定芽的增殖， 不定芽生长迅速并 无玻璃化等不良现象， 在该培养中生长发育良好 ； 0043 (3) 不定芽壮苗培养 0044 在增殖培养基上诱导出丛生芽， 丛生芽每丛只有 2-3 株可以伸长， 其余处于矮化 状态， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 上， 不定 芽迅速伸长， 20 天后可以长到 2-3cm ； 0045 (4) 生根培养 0046 取高度。
19、为 2-3cm 的小植株， 转接入生根培养基 MS+NAA0.05mg/L 中诱导生根， 10 天 后幼苗基部分化出许多白色的根原基， 30 天后可以长至 2-3cm ； 0047 (5) 炼苗与移栽 0048 继续生根培养20天， 根系长至1-2cm时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开 瓶炼苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即 可， 移栽成活率为 95。 0049 实施例 3 0050 一种香蕉新品种的培育方法， 该方法包括以下步骤 ： 0051 (1) 无菌化处理 0052 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净。
20、工作台上， 用浓度为 75wt的乙 醇浸泡 40s， 1wt的升汞溶液浸泡 20min， 经无菌水冲洗 5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水 份， 取小芽基部切成 1cm 长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L 上 ； 0053 (2) 芽的分化和增殖 0054 小芽接种于小芽诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄绿色突起， 1 周 后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月后， 切下带芽愈伤组织放入增殖培养基 MS+6-BA3.0mg/ L+NAA0.3mg/L 进行培养， 基部愈伤组织比较多， 但不影响不定芽的增殖， 不定芽生长迅速并 无玻璃化等不。
21、良现象， 在该培养中生长发育良好 ； 0055 (3) 不定芽壮苗培养 0056 在增殖培养基上诱导出丛生芽， 丛生芽每丛只有 2-3 株可以伸长， 其余处于矮化 状态， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养基 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L 上， 不定 芽迅速伸长， 20 天后可以长到 2-3cm ； 0057 (4) 生根培养 0058 取高度为2-3cm的小植株， 转接入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根， 10天后 说 明 书 CN 102283109 A CN 102283117 A4/5 页 6 幼苗基部分化出许多白色的根原基， 30 天后可以长。
22、至 2-3cm ； 0059 (5) 炼苗与移栽 0060 继续生根培养30天， 根系长至1-2cm时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开 瓶炼苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即 可， 移栽成活率为 95。 0061 实施例 4 0062 一种香蕉新品种的培育方法， 该方法包括以下步骤 ： 0063 (1) 无菌化处理 0064 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓度为 75wt的乙 醇浸泡 30s， 1wt的升汞溶液浸泡 15min， 经无菌水冲洗 5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水 份， 取小芽基。
23、部切成 1cm 长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L 上 ； 0065 (2) 芽的分化和增殖 0066 小芽接种于小芽诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄绿色突起， 1 周 后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月后， 切下带芽愈伤组织放入增殖培养基 MS+6-BA1.0mg/ L+NAA0.1mg/L 进行培养， 基部愈伤组织比较多， 但不影响不定芽的增殖， 不定芽生长迅速并 无玻璃化等不良现象， 在该培养中生长发育良好 ； 0067 (3) 不定芽壮苗培养 0068 在增殖培养基上诱导出丛生芽， 丛生芽每丛只有 2-3 株可以伸长， 其。
24、余处于矮化 状态， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养基 MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L 上， 不定 芽迅速伸长， 20 天后可以长到 2-3cm ； 0069 (4) 生根培养 0070 取高度为2-3cm的小植株， 转接入生根培养基MS+NAA0.1mg/L中诱导生根， 10天后 幼苗基部分化出许多白色的根原基， 30 天后可以长至 2-3cm， 根系粗壮， 须根众多， 生根率 为 100 ； 0071 (5) 炼苗与移栽 0072 继续生根培养25天， 根系长至1-2cm时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开 瓶炼苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室。
25、中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即 可， 移栽成活率为 95。 0073 所述的小芽诱导培养基、 增殖培养基、 壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖 30g/L、 琼脂 6g/L， 该培养基的培养温度为 24， 光照为 70mol/ms， pH 值为 5.5。 0074 实施例 5 0075 一种香蕉新品种的培育方法， 该方法包括以下步骤 ： 0076 (1) 无菌化处理 0077 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓度为 75wt的乙 醇浸泡 20s， 1wt的升汞溶液浸泡 10min， 经无菌水冲洗 5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水 份， 取。
26、小芽基部切成 1cm 长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 上 ； 0078 (2) 芽的分化和增殖 0079 小芽接种于小芽诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄绿色突起， 1 周 后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月后， 切下带芽愈伤组织放入增殖培养基 MS+6-BA2.0mg/ 说 明 书 CN 102283109 A CN 102283117 A5/5 页 7 L+NAA0.2mg/L 进行培养， 基部愈伤组织比较多， 但不影响不定芽的增殖， 不定芽生长迅速并 无玻璃化等不良现象， 在该培养中生长发育良好 ； 0080 (3) 不定。
27、芽壮苗培养 0081 在增殖培养基上诱导出丛生芽， 丛生芽每丛只有 2-3 株可以伸长， 其余处于矮化 状态， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养基 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 上， 不定 芽迅速伸长， 20 天后可以长到 2-3cm ； 0082 (4) 生根培养 0083 取高度为 2-3cm 的小植株， 转接入生根培养基 MS+NAA0.05mg/L 中诱导生根， 10 天 后幼苗基部分化出许多白色的根原基， 30 天后可以长至 2-3cm ； 0084 (5) 炼苗与移栽 0085 继续生根培养20天， 根系长至1-2cm时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗。
28、， 室内开 瓶炼苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即 可， 移栽成活率为 95。 0086 所述的小芽诱导培养基、 增殖培养基、 壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖 30g/L、 琼脂 6g/L， 该培养基的培养温度为 25， 光照为 80mol/ms， pH 值为 5.8。 0087 实施例 6 0088 一种香蕉新品种的培育方法， 该方法包括以下步骤 ： 0089 (1) 无菌化处理 0090 挖取香蕉基部的小芽， 用自来水冲洗 2h 后于超净工作台上， 用浓度为 75wt的乙 醇浸泡 40s， 1wt的升汞溶液浸泡 20min，。
29、 经无菌水冲洗 5-6 次后用无菌滤纸吸干表面水 份， 取小芽基部切成 1cm 长接种于小芽诱导培养基 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L 上 ； 0091 (2) 芽的分化和增殖 0092 小芽接种于小芽诱导培养基上 3 周后， 小芽基部开始膨大， 出现黄绿色突起， 1 周 后可见明显的愈伤组织， 培养 1 个月后， 切下带芽愈伤组织放入增殖培养基 MS+6-BA3.0mg/ L+NAA0.3mg/L 进行培养， 基部愈伤组织比较多， 但不影响不定芽的增殖， 不定芽生长迅速并 无玻璃化等不良现象， 在该培养中生长发育良好 ； 0093 (3) 不定芽壮苗培养 0094 在增殖。
30、培养基上诱导出丛生芽， 丛生芽每丛只有 2-3 株可以伸长， 其余处于矮化 状态， 将大丛芽分成小丛或单芽后， 放入壮苗培养基 MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L 上， 不定 芽迅速伸长， 20 天后可以长到 2-3cm ； 0095 (4) 生根培养 0096 取高度为2-3cm的小植株， 转接入生根培养基MS+NAA0.2mg/L中诱导生根， 10天后 幼苗基部分化出许多白色的根原基， 30 天后可以长至 2-3cm ； 0097 (5) 炼苗与移栽 0098 继续生根培养30天， 根系长至1-2cm时， 选择根系发达生长健壮的无菌苗， 室内开 瓶炼苗 3 天， 取出后洗净根部琼脂， 在温室中驯化 40 天后， 即可移栽室外， 给予肥水管理即 可， 移栽成活率为 95。 0099 所述的小芽诱导培养基、 增殖培养基、 壮苗培养基和生根培养基成分还包括蔗糖 30g/L、 琼脂 6g/L， 该培养基的培养温度为 26， 光照为 90mol/ms， pH 值为 6.0。 说 明 书 CN 102283109 A 。