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1、(10)授权公告号 CN 103564104 B (45)授权公告日 2014.12.10 CN 103564104 B (21)申请号 201310482461.2 (22)申请日 2013.10.15 A23F 3/34(2006.01) (73)专利权人 江苏科技大学 地址 212003 江苏省镇江市梦溪路 2 号 (72)发明人 吴琼英 贾俊强 颜辉 桂仲争 (74)专利代理机构 南京经纬专利商标代理有限 公司 32200 代理人 楼高潮 CN 102356911 A,2012.02.22, 权利要求 6. CN 101147516 A,2008.03.26, 全文 . CN 1029。
2、72573 A,2013.03.20, 全文 . CN 102326812 A,2012.01.25, 全文 . 吴琼英等 . 柚皮黄酮的超声辅助提取及其抗 氧化性研究 .食品科学 .2009, 第 30 卷 ( 第 2 期 ), 第 29-33 页 . (54) 发明名称 一种降血压桑叶袋泡茶的制备方法 (57) 摘要 一种降血压桑叶袋泡茶的制备方法， 将新鲜 桑叶去柄后清洗干净， 打浆后加入蛋白酶， 进行超 声波辅助酶解， 酶解结束后离心， 酶解产物的上清 液浓缩后， 冷冻干燥， 得桑叶蛋白降血压肽， 将桑 叶蛋白降血压肽与桑叶茶粉混合调配， 包装， 杀 菌， 即为降血压桑叶袋泡茶。 利用。
3、酶解过程施加超 声波， 克服了桑叶蛋白因果胶存在而不易水解难 题， 使桑叶蛋白酶解产物的 ACE 抑制活性得到提 高， 其 IC50值为 1.12 2.76mg/mL。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 程雷 权利要求书 1 页 说明书 3 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书1页 说明书3页 附图1页 (10)授权公告号 CN 103564104 B CN 103564104 B 1/1 页 2 1. 一种降血压桑叶袋泡茶的制备方法， 其特征在于所述桑叶蛋白降血压肽的具体制备 步骤为 ： 将新鲜桑叶去柄后清洗干净， 打浆后， 用。
4、蒸馏水配成 5 10的悬浮液， 单位 g/ mL， 置于40kHz超声波洗涤槽中， 将水浴温度设定为4050， 等水浴温度达到设定温度 时， 在自然 pH 下， 按照加酶量 2500 3500 U/g 加入蛋白酶， 选用的蛋白酶为枯草芽孢杆菌 来源中性蛋白酶， 搅拌均匀后开启超声波， 超声波功率为 90 120W， 超声波辅助酶解 30 50min 后离心， 酶解产物经浓缩后， 冷冻干燥得桑叶蛋白降血压肽 ； 将新鲜桑叶去柄， 室温 摊凉 5 7h， 切成 1 3cm 宽条状， 煮沸杀青 60 90s， 然后室温阴干 10 12h， 在 50 60烘干， 粉碎得桑叶茶粉 ； 将桑叶蛋白降血压肽。
5、按照 1 5的添加量， 单位 g/g， 与桑 叶茶粉混合， 混合均匀后按照 2g/ 包进行包装， 杀菌， 即为降血压桑叶袋泡茶产品。 权 利 要 求 书 CN 103564104 B 2 1/3 页 3 一种降血压桑叶袋泡茶的制备方法 技术领域 0001 本发明涉及食品工业领域， 具体涉及一种降血压桑叶袋泡茶的制备方法。 背景技术 0002 桑叶在我国有丰富的资源， 主要用于养殖桑蚕。随着人们对于桑叶的研究和不 断认识， 桑叶丰富的营养成分和生物活性成分决定了它的营养保健和药用价值。现代 科学表明， 桑叶是上好的功能食品， 桑叶中的主要活性成分有黄酮及黄酮苷类、 生物碱 类、 多糖类、 甾醇类。
6、、 氨基酸类和 D N J(1- 脱氧野尻霉素 ) 等， 长期食用具有降血压、 降 血脂、 降血糖和抗衰老等作用， 然而， 在桑叶中起降血压作用的是黄酮类物质， 其含量和 活性较低。目前关于桑叶开发的研究较多， 如 ： 桑茶 （中国发明专利 “一种桑茶的制备方 法” ， 公开号 CN101147516A） 、 桑叶饮料 （饶佳家， 陈柄灿 . 桑叶米乳饮料的生产工艺研究， 2004(6):100-101） 、 桑叶挂面 （中国发明专利 “一种桑叶挂面的配方及其制备方法” ， 公开号 CN102845680A） 等。然而， 这些开发尚处于初级加工阶段， 因此， 开发桑叶的新用途， 改善传 统的桑。
7、叶加工工艺， 对于提高桑叶的价值具有重要意义。 0003 研究表明， 桑叶中含有丰富的蛋白质， 含量为 21% 27%（w/w， g/g） ， 是蛋白质 含量较高的植物叶片之一 （王芳， 刘华， 董梅红 . 桑叶蛋白的功能特性研究 J. 食品科 学,2010,31(11):81-86） ， 桑叶蛋白尚未有深加工方面的报道。 本发明利用超声波辅助酶法 从桑叶蛋白中制备桑叶源 ACE 抑制肽， 然后将其添加到桑叶茶粉中， 经包装制备成袋泡茶， 而这个发明国内外尚未见报道。 发明内容 0004 解决的技术问题 ： 本发明的目的是提供一种降血压桑叶袋泡茶的制备方法。 0005 技术方案 ： 一种降血压。
8、桑叶袋泡茶的制备方法， 将新鲜桑叶去柄后清洗干净， 打浆 后加入蛋白酶， 进行超声波辅助酶解， 酶解结束后离心， 酶解产物的上清液浓缩后， 冷冻干 燥， 得桑叶蛋白降血压肽， 将桑叶蛋白降血压肽与桑叶茶粉混合调配， 包装， 杀菌， 即为降血 压桑叶袋泡茶。 0006 所述桑叶蛋白降血压肽的具体制备步骤为 ： 将新鲜桑叶去柄后清洗干净， 打浆后， 用蒸馏水配成 5 10（w/v， g/mL） 的悬浮液， 置于 40kHz 超声波洗涤槽中， 将水浴温度 设定为4050， 等水浴温度达到设定温度时， 在自然pH下， 按照加酶量25003500U/ g 加入蛋白酶， 搅拌均匀后开启超声波， 超声波功率。
9、为 90 120W， 超声波辅助酶解 30 50min 后离心， 酶解产物经浓缩后， 冷冻干燥得桑叶蛋白降血压肽。 0007 所述桑叶茶粉的制备步骤为 ： 将新鲜桑叶去柄， 室温摊凉 5 7h， 切成 1 3cm 宽 条状， 煮沸杀青 60 90s， 然后室温阴干 10 12h， 在 50 60烘干， 粉碎。 0008 所述降血压桑叶袋泡茶的混合调配方法为 ： 将桑叶蛋白降血压肽按照 1 5 （w/w， g/g） 的添加量与桑叶茶粉混合， 混合均匀后按照 2g/ 包进行包装， 杀菌， 即为降血压 桑叶袋泡茶产品。 说 明 书 CN 103564104 B 3 2/3 页 4 0009 选用的蛋。
10、白酶为枯草芽孢杆菌来源中性蛋白酶。 0010 有益效果 ： 0011 1） 首次将桑叶蛋白酶解方法用于保健桑叶茶的制备中， 实现了桑叶茶产品的多样 化。 0012 2） 利用酶解过程施加超声波， 克服了桑叶蛋白因果胶存在而不易水解难题， 使桑 叶蛋白酶解产物的 ACE 抑制活性得到提高， 其 IC50值为 1.12 2.76mg/mL。 0013 3） 桑叶为养蚕副产物， 价格低， 且来源广泛。 0014 4） 本产品除了具有降血压活性外， 保留了桑叶绿茶特有的清香及其它活性， 是一 种具有多生物活性的保健茶。 附图说明 0015 图 1 一种降血压桑叶袋泡茶的制备流程图。 具体实施方式 00。
11、16 以下实施例进一步说明本发明的内容， 但不应理解为对本发明的限制。在不背离 本发明精神和实质的情况下， 对本发明方法、 步骤或条件所作的修改和替换， 均属于本发明 的范围。 0017 若未特别指明， 实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。 0018 利用 ACE 抑制活性评价桑叶袋泡茶的降血压活性， 测定方法参考 Muguerza B 等方法 （Muguerza B,Ramos M,Snchez E,et al.Antihypertensive activity of milk fermented by Enterococcus faecalis strains isol。
12、ated from raw milkJ. International Dairy Journal,2006,16(1):61-69.） ， 按下式计算 ACE 抑制活性 ： 0019 I （A C） /（A B） 100% 0020 式中， IACE抑制率 ； A空白组的吸光度 ； B反应体系中没有加入ACE时的吸光 度 ； C反应体系中有 ACE 和样品时的吸光度。 0021 实施例 1 0022 将新鲜桑叶去柄后清洗干净， 打浆后， 用蒸馏水配成 5（w/v， g/mL） 的悬浮液， 置 于40kHz超声波洗涤槽中， 将水浴温度设定为40， 等水浴温度达到设定温度时， 在自然pH 下， 按。
13、照加酶量 2500U/g 加入中性蛋白酶 （来源枯草芽孢杆菌） ， 搅拌均匀后开启超声波， 超 声波功率为 90W， 超声波辅助酶解 30min 后离心， 酶解产物经浓缩后， 冷冻干燥， 备用 ； 另取 新鲜桑叶去柄， 室温摊凉 5h， 切成 1cm 宽条状， 煮沸杀青 60s， 然后室温阴干 10h， 在 50烘 干， 粉碎， 即为桑叶茶粉， 在桑叶茶粉中添加 1（w/w， g/g） 的上述冻干的桑叶蛋白酶解产 物， 混合均匀后按照2g/包进行包装， 杀菌， 即为降血压桑叶袋泡茶产品 ； 取10g桑叶袋泡茶 产品， 用 1000mL 沸水浸泡 20min， 冷却后离心， 收集上清液， 冻干，。
14、 利用乙酸乙酯萃取比色 法测定不同浓度下的 ACE 抑制活性， 经线性回归确定其 IC50值为 2.76mg/mL。 0023 实施例 2 0024 将新鲜桑叶去柄后清洗干净， 打浆后， 用蒸馏水配成 7.5（w/v， g/mL） 的悬浮液， 置于 40kHz 超声波洗涤槽中， 将水浴温度设定为 45， 等水浴温度达到设定温度时， 在自然 pH 下， 按照加酶量 3000U/g 加入中性蛋白酶 （来源枯草芽孢杆菌） ， 搅拌均匀后开启超声波， 说 明 书 CN 103564104 B 4 3/3 页 5 超声波功率为 105W， 超声波辅助酶解 40min 后离心， 酶解产物经浓缩后， 冷冻干。
15、燥， 备用 ； 另 取新鲜桑叶去柄， 室温摊凉 6h， 切成 2cm 宽条状， 煮沸杀青 75s， 然后室温阴干 11h， 在 55 烘干， 粉碎， 即为桑叶茶粉， 在桑叶茶粉中添加 3（w/w， g/g） 的上述冻干的桑叶蛋白酶解 产物， 混合均匀后按照2g/包进行包装， 杀菌， 即为降血压桑叶袋泡茶产品 ； 取10g桑叶袋泡 茶产品， 用 1000mL 沸水浸泡 20min， 冷却后离心， 收集上清液， 冻干， 利用乙酸乙酯萃取比 色法测定不同浓度下的 ACE 抑制活性， 经线性回归确定其 IC50值为 2.10mg/mL。 0025 实施例 3 0026 将新鲜桑叶去柄后清洗干净， 打浆。
16、后， 用蒸馏水配成 10（w/v， g/mL） 的悬浮液， 置于 40kHz 超声波洗涤槽中， 将水浴温度设定为 50， 等水浴温度达到设定温度时， 在自然 pH 下， 按照加酶量 3500U/g 加入中性蛋白酶 （来源枯草芽孢杆菌） ， 搅拌均匀后开启超声波， 超声波功率为 120W， 超声波辅助酶解 50min 后离心， 酶解产物经浓缩后， 冷冻干燥， 备用 ； 另 取新鲜桑叶去柄， 室温摊凉 7h， 切成 3cm 宽条状， 煮沸杀青 90s， 然后室温阴干 12h， 在 60 烘干， 粉碎， 即为桑叶茶粉， 在桑叶茶粉中添加 5（w/w， g/g） 的上述冻干的桑叶蛋白酶解 产物， 混合均匀后按照2g/包进行包装， 杀菌， 即为降血压桑叶袋泡茶产品 ； 取10g桑叶袋泡 茶产品， 用 1000mL 沸水浸泡 20min， 冷却后离心， 收集上清液， 冻干， 利用乙酸乙酯萃取比 色法测定不同浓度下的 ACE 抑制活性， 经线性回归确定其 IC50值为 1.12mg/mL。 说 明 书 CN 103564104 B 5 1/1 页 6 图 1 说 明 书 附 图 CN 103564104 B 6 。