技术领域
本发明涉及保健品及其制备方法技术领域，特别涉及一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂及其制备方法。
背景技术
南极磷虾的蛋白质含量较高，蛋白总量约占整虾重的50％，肌肉中蛋白质的含量占干重的70％以上。而且对南极磷虾蛋白质的营养成分分析与评价表明，南极磷虾蛋白是一种高营养价值的蛋白食品，其氨基酸组成符合联合国粮食和农业组织以及世界卫生组织推荐的理想模式。它共含有18种常见氨基酸，其中谷氨酸、亮氨酸和天冬氨酸的含量最高，必需氨基酸含量约占总氨基酸的25％。同时，高含量的谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸赋予南极磷虾蛋白特殊的鲜香口味，使得南极磷虾蛋白产品具有很高的吸引力。南极磷虾多肽酶解液，是通过酶工程技术对南极磷虾粉进行水解，把蛋白质分解成多肽，使其更容易被人体消化吸收和利用，而且还具有抗氧化、延缓衰老等功效。
绞股蓝为葫芦科植物，多年生草质藤本。性味苦寒，归肺；脾；肾经。清热解毒、止咳祛痰，有类似人参的强壮补益作用。主含三萜皂苷、甾醇类、黄酮类成分。具有抗肿瘤、延缓衰老和抗氧化、影响脂质代谢等作用。
山茱萸为山茱萸科植物，落叶小灌木，性味酸涩、微温，入肝、肾经补益肝肾、涩精固脱。它含有单萜类，脂肪醛、脂肪烃，酸、酯等芳香族化合物，另含有苷类、鞣质类成分，有增强机体免疫功能、抗炎、抗衰老、抑菌等作用。
牛膝为苋科植物，多年生草本。味苦、酸、平，归肝、肾经。逐瘀通经，补肝肾，强筋骨，利尿通淋，引血下行。含皂苷、蜕皮甾酮、牛膝甾酮及有免疫活性的牛膝肽多糖。有抗炎镇痛、降血糖、降血脂、延缓衰老和抗肿瘤的作用。
枸杞为茄科植物，是落叶的小灌木，经卫生部正式公布，既是食品，又是药品。《本草纲目》记载：枸杞性味甘平，归肝，肾经，滋补肝肾，益精明目。它富含枸杞多糖、胡萝卜素以及多种氨基酸，具有调节免疫、调节血脂、调节血糖、延缓衰老、抗肿瘤等功效。
沙棘为胡颓子科植物，落叶灌木。味酸、涩、温。止咳祛痰，消食化滞，活血散瘀。含多种维生素、脂肪酸、微量元素、亚油素、沙棘黄酮、超氧化物等活性物质和人体所需的各种氨基酸。具有降脂、止痰祛咳、消炎、抗放射损伤、抗肿瘤、抗衰老、抗风湿和抗病毒作用。
大枣为鼠李科植物枣的成熟果实，小落叶灌木。性温，味甘。补中益气、养血安神。含有机酸、喹啉生物碱、三萜类、皂苷类。具有增强体力、抗疲劳、镇静安神、保肝、增加白细胞cAMP、增强免疫和抗变态反应等功能。
发明内容
本发明的目的在于一种以南极磷虾多肽、绞股蓝浓缩液、山茱萸浓缩液、牛膝浓缩液、枸杞浓缩液、沙棘浓缩液、大枣浓缩液为主要成分的具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂及其制备方法。
一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂，按南极磷虾多肽酶解液重量百分比计，含有以下百分比组分：蜂蜜2-8％；绞股蓝浓缩液2-5％，山茱萸浓缩液2-5％，牛膝浓缩液2-5％，枸杞浓缩液1-3％，沙棘浓缩液1-3％，大枣浓缩液1-3％中的3种或几种。
上述的一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，包括如下具体步骤：
步骤一：南极磷虾多肽酶解液的制备
1)脱脂：将冷冻南极磷虾粉加入正己烷--无水乙醇混合溶剂中，提取南极磷虾油，提取后静置分层，去除上层溶剂相，完成脱脂；
2)破壁：将脱脂后的南极磷虾沉淀加入比例为5-20倍量(w/w)0.2％NaOH水溶液，搅拌均匀，经超声波破碎仪超声处理，使组织细胞充分破碎，然后用0.2％HCl调整pH值至6.5；震荡匀浆在4℃以下低温水浴进行；
3)抽提：将上述匀浆液加热到70-95℃，并不断搅拌，保温抽提6-12h，离心过滤，残渣再加入5-10倍体积水溶液，70-95℃保温抽提5-10h，离心过滤，合并两次抽提滤液；
4)酶解：将上述滤液用0.2％NaOH调整pH值至5.0-8.0，加热抽提水解液至60-90℃，保温40-80min，待温度降至40-60℃后，添加南极磷虾粉重量2-8％的氨基肽酶、2-8％的羧基肽酶和1-5％的单宁酶，40-50℃保温酶解4-15h，升温灭酶，冷却至40-50℃，即得南极磷虾多肽酶解液；
步骤二：辅料浓缩液的制备
1)原料预处理：取辅料，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后，打碎过筛，得辅料粗粉；
2)低温浸泡：将上述辅料粗粉，加入水、低温浸泡6-16h；
3)真空浸提：对步骤2)中的低温浸泡辅料，进行真空浸提2-3次，第一次真空浸提6-10h，收集滤液，再向药渣中加入6-12倍量水(w/w)，进行第二次真空浸提3-6h，收集滤液，再向药渣中加入5-6倍量水(w/w)，第三次真空提取2-3h，收集滤液，合并所有真空浸提滤液，其中，真空环境为160mmHg，浸提温度27℃，浸提搅拌转速为120rpm；
4)过滤：将上述真空浸提滤液通过板框压滤，过200目滤布得滤液，滤液静置4-6h无沉淀物；
5)浓缩：在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至相对密度为1.0-1.5；
6)醇沉：浓缩液冷却至室温，再向浓缩液中缓慢加入4-5倍量(v/v)95％乙醇，加入乙醇时要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75％，静置12-15h，离心，收集静置后醇不溶沉淀得辅料提取物；
7)复溶脱醇精制：将上述醇不溶沉淀加等体积55℃热水溶解，搅拌，并在酒精回收装置中蒸馏脱乙醇；
8)再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为30-35％，得辅料浓缩液；
其中，辅料为绞股蓝、山茱萸、牛膝、枸杞、沙棘、大枣中的三种或几种。
步骤三：南极磷虾多肽复方制剂的配制
将南极磷虾多肽酶解液、辅料浓缩液中的3种或几种，分别过200目筛，按南极磷虾多肽酶解液重量百分比计，添加各自的重量配比与蜂蜜混匀，在30-50℃下搅拌均匀，进行均质、杀菌，即得该多肽复方制剂。
上述的一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，所述步骤一1)脱脂过程中，正己烷-无水乙醇混合溶液的混合比例为2：1(v/v)，南极磷虾粉与正己烷-无水乙醇混合溶液的比例为1:1-10，提取搅拌速度100-200r/min，提取时间1-3h。
上述的一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，所述步骤一2)破壁过程中，超声波细胞破碎仪工作功率为200-600W，工作15s间隔20s，工作60-80次。
上述的一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，所述步骤一4)酶解过程中，灭酶条件为90-100℃、时间为20-30min。
上述的一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，所述步骤二辅料浓缩液的制备过程中，
绞股蓝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡16h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提12h，收集滤液，再向药渣中加入12倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
山茱萸浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0℃浸泡8h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，再向药渣中加入5倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
牛膝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入16倍量(w/w)水、4℃浸泡15h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.0-1.5；步骤6)静止时间为15h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
枸杞浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入12倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提2h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.3；步骤6)静止时间为14h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
沙棘浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡8h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.4；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为33％；
大枣浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入8倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2-1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30-35％。
上述的一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，所述步骤三中均质条件为55-65℃、10-15MPa，杀菌是多肽复方制剂加热至68-70℃，并保持此温度30min以后急速冷却到4-5℃。
本发明的有益效果是：本发明的南极磷虾多肽复方制剂营养价值丰富，能够利用配方本身的各组分来克服南极磷虾多肽的特殊不适气味，具有口感和风味好、营养价值高、绿色安全的优点，方便日常对南极磷虾优质多肽进行补充；采用所述方法制南极磷虾多肽的酶解条件温和，可对南极磷虾进行充分的酶解，酶解过程易于控制，酶解产物安全且有利于人体吸收。用其制备的南极磷虾多肽复方制剂具有抗氧化、延缓衰老的功效。
附图说明
图1为本发明的南极磷虾多肽复方制剂对(·OH)的清除效果；
图2为本发明的南极磷虾多肽复方制剂对(O2-·)的清除效果；
图3为本发明的南极磷虾多肽复方制剂对(DPPH·)的清除效果。
具体实施方式
结合具体实施方式对说明书做进一步说明。
实施例1
一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，具体步骤为：
步骤一：南极磷虾多肽酶解液的制备
1)脱脂：将冷冻南极磷虾粉加入正己烷-无水乙醇混合溶剂(2：1，v/v)中，按料液比1：5，搅拌速率150r/min下提取南极磷虾油1h，提取后静置分层，去除上层溶剂相，完成脱脂；
2)破壁：将脱脂后的南极磷虾沉淀加入比例为5倍量(w/w)0.2％NaOH水溶液，搅拌均匀，经超声波破碎仪超声处理，超声波细胞破碎仪工作功率为300W，工作15s间隔20s，工作60次，使组织细胞充分破碎，然后用0.2％HCl调整pH值至6.5；震荡匀浆在4℃以下低温水浴进行；
3)抽提：将上述匀浆液加热到80℃，并不断搅拌，保温抽提6h，离心过滤，残渣再加入9倍体积水溶液，80℃保温抽提6h，离心过滤，合并两次抽提滤液；
4)酶解：将上述滤液用0.2％NaOH调整pH值至6.0，加热抽提水解液至70℃，保温60min，待温度降至55℃后，添加南极磷虾粉重量5％的氨基肽酶、6％的羧基肽酶和3％的单宁酶，50℃保温酶解10h，升温至90℃灭酶，时间为20min，冷却至50℃，即得南极磷虾多肽酶解液；
步骤二：辅料浓缩液的制备
1)原料预处理：取辅料，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后，打碎过筛，得辅料粗粉；
2)低温浸泡：将上述辅料粗粉，加入水、低温浸泡6-16h；
3)真空浸提：对步骤2)中的低温浸泡辅料，进行真空浸提2-3次，第一次真空浸提6-10h，收集滤液，再向药渣中加入6-12倍量水(w/w)，进行第二次真空浸提3-6h，收集滤液，再向药渣中加入5-6倍量水(w/w)，第三次真空提取2-3h，收集滤液，合并所有真空浸提滤液，其中，真空环境为160mmHg，浸提温度27℃，浸提搅拌转速为120rpm；
4)过滤：将上述真空浸提滤液通过板框压滤，过200目滤布得滤液，滤液静置4-6h无沉淀物；
5)浓缩：在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至相对密度为1.0-1.5；
6)醇沉：浓缩液冷却至室温，再向浓缩液中缓慢加入4-5倍量(v/v)95％乙醇，加入乙醇时要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75％，静置12-15h，离心，收集静置后醇不溶沉淀得辅料提取物；
7)复溶脱醇精制：将上述醇不溶沉淀加等体积55℃热水溶解，搅拌，并在酒精回收装置中蒸馏脱乙醇；
8)再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为30-35％，得辅料浓缩液；
其中，辅料为绞股蓝、山茱萸、牛膝、枸杞、沙棘、大枣中的三种或几种。
绞股蓝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡16h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提12h，收集滤液，再向药渣中加入12倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
山茱萸浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0℃浸泡8h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，再向药渣中加入5倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
牛膝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入16倍量(w/w)水、4℃浸泡15h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.0-1.5；步骤6)静止时间为15h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
枸杞浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入12倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提2h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.3；步骤6)静止时间为14h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
沙棘浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡8h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.4；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为33％；
大枣浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入8倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2-1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30-35％。
步骤三：南极磷虾多肽复方制剂的配制
按南极磷虾多肽酶解液重量百分比计，添加蜂蜜5％；绞股蓝浓缩液3％，沙棘浓缩液2％，南极磷虾多肽酶解液90％，在35℃下搅拌均匀，在55℃、10MPa进行均质，将所得多肽复方制剂加热至70℃，并保持此温度30min以后急速冷却到4℃，即得南极磷虾多肽复方制剂。
实施例2
一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，具体步骤为：
步骤一：南极磷虾多肽酶解液的制备
1)脱脂：将冷冻南极磷虾粉加入正己烷-无水乙醇混合溶剂(2：1，v/v)中，按料液比1：8，搅拌速率150r/min下提取南极磷虾油2h，提取后静置分层，去除上层溶剂相，完成脱脂；
2)破壁：将脱脂后的南极磷虾沉淀加入比例为7倍量(w/w)0.2％NaOH水溶液，搅拌均匀，经超声波破碎仪超声处理，超声波细胞破碎仪工作功率为500W，工作15s间隔20s，工作60次，使组织细胞充分破碎，然后用0.2％HCl调整pH值至6.5；震荡匀浆在4℃以下低温水浴进行；
3)抽提：将上述匀浆液加热到80℃，并不断搅拌，保温抽提10h，离心过滤，残渣再加入6倍体积水溶液，80℃保温抽提8h，离心过滤，合并两次抽提滤液；
4)酶解：将上述滤液用0.2％NaOH调整pH值至7.0，加热抽提水解液至80℃，保温70min，待温度降至50℃后，添加南极磷虾粉重量3％的氨基肽酶、5％的羧基肽酶和3％的单宁酶，50℃保温酶解12h，升温至90℃灭酶，时间为25min，冷却至50℃，即得南极磷虾多肽酶解液；
步骤二：辅料浓缩液的制备
1)原料预处理：取辅料，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后，打碎过筛，得辅料粗粉；
2)低温浸泡：将上述辅料粗粉，加入水、低温浸泡6-16h；
3)真空浸提：对步骤2)中的低温浸泡辅料，进行真空浸提2-3次，第一次真空浸提6-10h，收集滤液，再向药渣中加入6-12倍量水(w/w)，进行第二次真空浸提3-6h，收集滤液，再向药渣中加入5-6倍量水(w/w)，第三次真空提取2-3h，收集滤液，合并所有真空浸提滤液，其中，真空环境为160mmHg，浸提温度27℃，浸提搅拌转速为120rpm；
4)过滤：将上述三次真空浸提滤液通过板框压滤，过200目滤布得滤液，滤液静置4-6h无沉淀物；
5)浓缩：在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至相对密度为1.0-1.5；
6)醇沉：浓缩液冷却至室温，再向浓缩液中缓慢加入4-5倍量(v/v)95％乙醇，加入乙醇时要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75％，静置12-15h，离心，收集静置后醇不溶沉淀得辅料提取物；
7)复溶脱醇精制：将上述醇不溶沉淀加等体积55℃热水溶解，搅拌，并在酒精回收装置中蒸馏脱乙醇；
8)再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为30-35％，得辅料浓缩液；
其中，辅料为绞股蓝、山茱萸、牛膝、枸杞、沙棘、大枣中的三种或几种。
绞股蓝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡16h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提12h，收集滤液，再向药渣中加入12倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
山茱萸浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0℃浸泡8h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，再向药渣中加入5倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
牛膝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入16倍量(w/w)水、4℃浸泡15h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.0-1.5；步骤6)静止时间为15h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
枸杞浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入12倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提2h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.3；步骤6)静止时间为14h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
沙棘浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡8h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.4；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为33％；
大枣浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入8倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2-1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30-35％。
步骤三：南极磷虾多肽复方制剂的配制
按南极磷虾多肽酶解液重量百分比计，添加蜂蜜5％；绞股蓝浓缩液3％，山茱萸浓缩液3％，枸杞浓缩液2％，大枣浓缩液2％，南极磷虾多肽酶解液85％，在40℃下搅拌均匀，在55℃、10MPa进行均质，将所得多肽复方制剂加热至70℃，并保持此温度30min以后急速冷却到4℃，即得南极磷虾多肽复方制剂。
实施例3
一种具有抗氧化能力的南极磷虾多肽复方制剂的制备方法，具体步骤为：
步骤一：南极磷虾多肽酶解液的制备
1)脱脂：将冷冻南极磷虾粉加入正己烷-无水乙醇混合溶剂(2：1，v/v)中，按料液比1：10，搅拌速率150r/min下提取南极磷虾油3h，提取后静置分层，去除上层溶剂相，完成脱脂；
2)破壁：将脱脂后的南极磷虾沉淀加入比例为15倍量(w/w)0.2％NaOH水溶液，搅拌均匀，经超声波破碎仪超声处理，超声波细胞破碎仪工作功率为600W，工作15s间隔20s，工作80次，使组织细胞充分破碎，然后用0.2％HCl调整pH值至6.5；震荡匀浆在4℃以下低温水浴进行；
3)抽提：将上述匀浆液加热到90℃，并不断搅拌，保温抽提10h，离心过滤，残渣再加入8倍体积水溶液，90℃保温抽提8h，离心过滤，合并两次抽提滤液；
4)酶解：将上述滤液用0.2％NaOH调整pH值至8.0，加热抽提水解液至85℃，保温80min，待温度降至55℃后，添加南极磷虾粉重量8％的氨基肽酶、5％的羧基肽酶和3％的单宁酶，50℃保温酶解15h，升温至90℃灭酶，时间为30min，冷却至50℃，即得南极磷虾多肽酶解液；
步骤二：辅料浓缩液的制备
1)原料预处理：取辅料，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后，打碎过筛，得辅料粗粉；
2)低温浸泡：将上述辅料粗粉，加入水、低温浸泡6-16h；
3)真空浸提：对步骤2)中的低温浸泡辅料，进行真空浸提2-3次，第一次真空浸提6-10h，收集滤液，再向药渣中加入6-12倍量水(w/w)，进行第二次真空浸提3-6h，收集滤液，再向药渣中加入5-6倍量水(w/w)，第三次真空提取2-3h，收集滤液，合并所有真空浸提滤液，其中，真空环境为160mmHg，浸提温度27℃，浸提搅拌转速为120rpm；
4)过滤：将上述三次真空浸提滤液通过板框压滤，过200目滤布得滤液，滤液静置4-6h无沉淀物；
5)浓缩：在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至相对密度为1.0-1.5；
6)醇沉：浓缩液冷却至室温，再向浓缩液中缓慢加入4-5倍量(v/v)95％乙醇，加入乙醇时要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75％，静置12-15h，离心，收集静置后醇不溶沉淀得辅料提取物；
7)复溶脱醇精制：将上述醇不溶沉淀加等体积55℃热水溶解，搅拌，并在酒精回收装置中蒸馏脱乙醇；
8)再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70℃以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为30-35％，得辅料浓缩液；
其中，辅料为绞股蓝、山茱萸、牛膝、枸杞、沙棘、大枣中的三种或几种。
绞股蓝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡16h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提12h，收集滤液，再向药渣中加入12倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
山茱萸浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0℃浸泡8h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，再向药渣中加入5倍量水(w/w)，第三次真空浸提3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
牛膝浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入16倍量(w/w)水、4℃浸泡15h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提5h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.0-1.5；步骤6)静止时间为15h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30％；
枸杞浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入12倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提三次，第一次真空浸提10h，收集滤液，再向药渣中加入10倍量(w/w)水，第二次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量水(w/w)，第三次真空浸提2h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.3；步骤6)静止时间为14h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为35％；
沙棘浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为150目；步骤2)低温浸泡中加入20倍量(w/w)水、0-4℃浸泡8h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提6h，收集滤液，再向药渣中加入6倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.4；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为33％；
大枣浓缩液的具体制备条件为：步骤1)原料预处理中筛子为100目；步骤2)低温浸泡中加入15倍量(w/w)水、0-4℃浸泡6h；步骤3)真空浸提两次，第一次真空浸提8h，收集滤液，再向药渣中加入8倍量(w/w)水，第二次真空浸提3h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液；步骤5)浓缩至相对密度为1.2-1.5；步骤6)静止时间为12h；步骤8)中滤液浓缩至含水量为30-35％。
步骤三：南极磷虾多肽复方制剂的配制
按南极磷虾多肽酶解液重量百分比计，添加蜂蜜3％；绞股蓝浓缩液3％，山茱萸浓缩液3％，牛膝浓缩液3％，枸杞浓缩液1％，沙棘浓缩液1％，大枣浓缩液1％，南极磷虾多肽酶解液85％，在50℃下搅拌均匀，在60℃、15MPa进行均质，将所得多肽复方制剂加热至70℃，并保持此温度30min以后急速冷却到4℃，即得南极磷虾多肽复方制剂。
实施例4
以实施例3获得的南极磷虾多肽复方制剂的抗氧化性进行验证，具体方法为：
(1)对(·OH)清除能力的测定
选用邻二氮菲-Fe2+氧化法来测定：精密量取150mmol/L pH值为7.4磷酸盐缓冲液(PBS)2.0mL，7.5mmol/L邻二氮菲0.2mL，7.5mmol/L硫酸亚铁溶液0.2mL，样液0.4mL，蒸馏水0.8mL，体积分数0.1％双氧水0.4mL于试管中，混匀做试样组，将各试管同时置于37℃恒温1h，测定536nm处吸光值。空白组以蒸馏水代替试样，其余步骤同试样组；空白对照组以蒸馏水分别代替试样和双氧水，其余步骤同试样组。试样对羟基的清除率按下式计算：
E(·OH)＝(A试样-A0)/(A空白对照-A0)×100％
式中：A试样—试样组在波长536nm的吸光度值；
A0—空白组在波长536nm的吸光度值；
A空白对照—空白对照组在波长536nm的吸光度值。
(2)对(O2-·)清除能力的测定
选用邻苯三酚自氧化法来测定：分别取不同浓度样液0.1mL，加入4.5mL 0.05mol/L Tris－HCl缓冲液(pH8.2)，震荡混匀，置于25℃水浴中保温20min，加入0.1mL 3mmol/L的邻苯三酚溶液，混匀后于25℃水浴中反应并开始计时，在325nm处测定吸光度值，每隔30s读数，5min后结束；取0.1mL双蒸水加入2.8mL 0.1mol/L Tris－HCl缓冲液调零；作吸光度随时间变化的回归方程，其斜率为邻苯三酚的自氧化速率。空白对照组以相同体积的双蒸水代替样液，
O2-·清除率的计算公式：
清除率(％)＝(1－Ai/A0)×100％
式中：A0－空白对照组邻苯三酚自氧化速率(ΔA/min)；
Ai－试样组邻苯三酚自氧化速率(ΔA/min)。
(3)对(DPPH·)的清除能力的测定
精确称量0.0025g DPPH，溶解到100mL无水乙醇中，配制成浓度为6.5×10-5mol/L DPPH乙醇溶液。分别吸取2mL不同浓度的样液与2mL DPPH的无水乙醇溶液置于试管中，摇匀，在室温下反应30min后在波长517nm处测定吸光度(Ai)；分别吸取2mL DPPH无水乙醇溶液与无水乙醇于试管中，摇匀，在室温下反应30min后在517nm波长处测定吸光度(Ac)；最后分别吸取2mL样液和无水乙醇于试管中，摇匀，在室温下反应30min后在517nm波长处测定吸光度(Aj)。DPPH自由基清除率计算公式：
式中：Ai－2mL样液与2mL DPPH的无水乙醇溶液混合后在波长517nm的吸光度值；
Aj－2mL样液与无水乙醇溶液混合后在波长517nm的吸光度值；
Ac－2mL DPPH无水乙醇溶液与无水乙醇混合后在波长517nm的吸光度值。
实验结果显示：
(1)对(·OH)清除能力的测定
南极磷虾多肽对羟自由基(·OH)的清除效果如图1所示，不同浓度的南极磷虾多肽对(·OH)均具有一定的清除效果，且随着南极磷虾多肽浓度的升高清除率逐渐上升。当加入的南极磷虾多肽浓度为5mg·mL-1时，对(·OH)的清除率为63.7％；浓度升至10mg·mL-1时，清除率达到79.0％；之后随着浓度的升高，清除率上升较为缓慢，浓度升至30mg·mL-1时，清除率为92.6％。
(2)对(O2-·)清除能力的测定
南极磷虾多肽对超氧阴离子(O2-·)的清除效果也较为显著，如图2所示，不同浓度的南极磷虾多肽均具有清除(O2-·)的能力，且随着浓度的增加，清除率逐渐提升。当加入的南极磷虾多肽浓度为5mg·mL-1时，对(O2-·)的清除率为62.1％；当浓度达10mg·mL-1时，对超氧阴离子的清除率提升了10.6％；当南极磷虾多肽浓度升到30mg·mL-1时，清除率达96.3％。
(3)对(DPPH·)的清除能力的测定
南极磷虾多肽对超氧阴离子(DPPH·)的清除效果也较为显著，如图3所示，不同浓度的南极磷虾多肽均具有清除(DPPH·)的能力，且随着浓度的增加，清除率逐渐提升。当加入的南极磷虾多肽浓度为5mg·mL-1时，对(DPPH·)的清除率为61.7％；当浓度达10mg·mL-1时，对(DPPH·)的清除率为80.3％；当南极磷虾多肽浓度升到30mg·mL-1时，清除率达92.7％。
本发明实施例3所得的南极磷虾多肽复方制剂对羟自由基(·OH)清除率可高达94％，对超氧阴离子自由基(O2-·)清除率可以达到38.7％，对(DPPH·)的清除率可以达到89.3％，蛋白提取率可达到92.59％，因此，本发明中的南极磷虾多肽复方制剂具有较好的抗氧化活性。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。