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1、10申请公布号CN104172185A43申请公布日20141203CN104172185A21申请号201410409456322申请日20140819A23L1/30200601A23L1/2820060171申请人天津市泉又今生物科技有限公司地址300713天津市武清区王庆坨工业园庆通道8号72发明人董福生施维李全顺谭盈盈蒋梦影74专利代理机构天津市北洋有限责任专利代理事务所12201代理人陆艺54发明名称生物强化细胞营养素在制备抗胃癌细胞功能食品中的应用57摘要本发明公开了一种生物强化细胞营养素在制备抗胃癌细胞功能食品中的应用。实验证明生物强化细胞营养素能使胃癌细胞存活率下降，促进胃癌。
2、细胞的凋亡。生物强化细胞营养素对人胃癌细胞有一定的抑制作用。并且随着浓度的增大，抑制作用增强。51INTCL权利要求书1页说明书6页附图2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书6页附图2页10申请公布号CN104172185ACN104172185A1/1页21生物强化细胞营养素在制备抗胃癌细胞功能食品中的应用。2根据权利要求1所述的应用，其特征是所述生物强化细胞营养素是用下述方法制成一母液的制备1选取谷类为原料，清洗分离杂质后，置于纸浆蒸煮机中加入原料总重量3050的水，启动纸浆蒸煮机，旋转浸泡3060分钟；2停止旋转，将水放净，打开冷气机，通入冷气，旋转保持。
3、4以下6090分钟，停止旋转；3关闭冷气机，打开空压机，通入室温空气，旋转，升温至室温；4关闭空压机，停止旋转，通入蒸汽，旋转，保持100，3060分钟，关闭蒸汽；5停止旋转，打开空压机，通入室温空气，旋转，降至3050；6停止旋转，加入原料总重量13的营养配料粉，旋转3060分钟；所述营养配料为重量比为1231的灵芝、枸杞、蓝莓果和肉桂；7停止旋转，加入原料总重量0204的复合酶，旋转12小时；8加入原料总重量021食用菌种，旋转使均匀；停止旋转，分装至发酵桶，在2835发酵815天，即得母液备用；二胶料的制备1另取谷类为第二原料，用1830水浸泡816小时；沥水，置于容器内；2向容器内加入。
4、第二原料重量12倍的水，煮13小时；3过滤，去除水，获得胶料备用；三成品的制备1将母液与胶料按重量比为112的比例，混合，分离除渣，得混合液；2加入混合液重量12的低聚异麦芽糖，混合液重量0207的黄原胶，混合液重量01的阿胶，均质；灌装灭菌，得生物强化细胞营养素。3根据权利要求2所述的应用，其特征是所述原料为黑糯米、黄糯米、白糯米、紫米、黍米、粟米、香米、高粱米、大米和薏米中的至少五种。4根据权利要求2所述的应用，其特征是所述第二原料为黑糯米、黄糯米和白糯米至少一种。5根据权利要求2所述的应用，其特征是所述复合酶是质量比为3311的糖化酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶。6根据权利要求2所述的应用。
5、，其特征是所述食用菌种为面包酵母，甜酒曲酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌至少两种。权利要求书CN104172185A1/6页3生物强化细胞营养素在制备抗胃癌细胞功能食品中的应用技术领域0001本发明涉及一种生物强化细胞营养素的用途。背景技术0002我们人类的身体由上万亿个细胞组成,这些细胞是人体结构的基本功能单位，细胞的健康是在核酸的调控下，依靠蛋白质、多种氨基酸、多肽、多糖、多种微量元素、矿物质等带有生物活性的物质以维持细胞的正常代谢。细胞有特定的职责，协同工作，保持着我们的身体健康。身体内的每个组织由细胞构成，而相关细胞组织集群便构成了人体的器官。虽然这些器官由功能不同的细胞构。
6、成，但是，它们需要同样的基本营养成分，这便是支撑细胞代谢的基础物质。细胞是有寿命的，理论上说，如果为细胞提供合适的、足够的基本营养成分，淘汰凋亡的细胞，精确复制已经存在的健康的细胞，提高人体对于疾病的自愈能力，我们人类可延缓衰老，保持健康。0003人体对于疾病的自愈能力，即是人类依靠自身的内在生命力，依靠免疫系统、神经系统和内分泌系统为主的修复机制，修复受损的细胞、摆脱疾病与亚健康状态的一种保持身体健康的能力。当人体的自愈力下降时，是因为某些人体器官组织系统缺少足够的营养因子，细胞不能正常地代谢，不能完全正确地复制健康细胞和液化凋亡的细胞。由于细胞的不正确的复制，使得细胞的正常功能打了折扣，身。
7、体的自我修复能力减低，这直接影响了人体对于疾病的抵抗能力，一旦遭遇外界不良因素，人体就会生病。0004癌症现在已经是人类的第一大顽疾，癌细胞的特点是无限制、无止境地增生，使患者体内的营养物质被大量消耗；癌细胞释放出多种毒素，使人体产生一系列症状；癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖，导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等等。找到能治疗或辅助治疗的药物已是科学家的当务之急。目前使用的抗癌药多是化学合成药物，在治疗肿瘤的过程中，往往会出现患者难以忍受的不良反应。发明内容0005本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种生物强化细胞营养素在制备抗胃癌细胞功能食品中的应用。000。
8、6本发明的技术方案概述如下0007生物强化细胞营养素在制备抗胃癌细胞功能食品中的应用。0008生物强化细胞营养素是用下述方法制成0009一母液的制备00101选取谷类为原料，清洗分离杂质后，置于纸浆蒸煮机中加入原料总重量3050的水，启动纸浆蒸煮机，旋转浸泡3060分钟；00112停止旋转，将水放净，打开冷气机，通入冷气，旋转保持4以下6090分钟，停止旋转；00123关闭冷气机，打开空压机，通入室温空气，旋转，升温至室温；说明书CN104172185A2/6页400134关闭空压机，停止旋转，通入蒸汽，旋转，保持100，3060分钟，关闭蒸汽；00145停止旋转，打开空压机，通入室温空气，旋。
9、转，降至3050；00156停止旋转，加入原料总重量13的营养配料粉，旋转3060分钟；所述营养配料为重量比为1231的灵芝、枸杞、蓝莓果和肉桂；00167停止旋转，加入原料总重量0204的复合酶，旋转12小时；00178加入原料总重量021食用菌种，旋转使均匀；停止旋转，分装至发酵桶，在2835发酵815天，即得母液备用；0018二胶料的制备00191另取谷类为第二原料，用1830水浸泡816小时；沥水，置于容器内；00202向容器内加入第二原料重量12倍的水，煮13小时；00213过滤，去除水，获得胶料备用；0022三成品的制备00231将母液与胶料按重量比为112的比例，混合，分离除渣，。
10、得混合液；00242加入混合液重量12的低聚异麦芽糖，混合液重量0207的黄原胶，混合液重量01的阿胶，均质；灌装灭菌，得生物强化细胞营养素。0025原料优选为黑糯米、黄糯米、白糯米、紫米、黍米、粟米、香米、高粱米、大米和薏米中的至少五种。0026述第二原料优选为黑糯米、黄糯米和白糯米至少一种。0027复合酶优选为质量比为3311的糖化酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶。0028食用菌种优选为面包酵母，甜酒曲酵母、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和保加利亚乳杆菌至少两种。0029本发明的优点0030实验证明，生物强化细胞营养素使胃癌细胞存活率下降，促进胃癌细胞的凋亡。证明生物强化细胞营养素对人胃癌细胞有一定的。
11、抑制作用。并且随着浓度的增大，抑制作用增强。附图说明0031图1为生物强化细胞营养素对人胃癌细胞系BGC823存活率的影响。0032图2为生物强化细胞营养素对人胃癌细胞系SGC7901存活率的影响。0033图3为生物强化细胞营养素诱导人胃癌细胞系BGC823细胞凋亡。0034图4为生物强化细胞营养素诱导人胃癌细胞系SGC7901细胞凋亡。具体实施方式0035本发明的实施例是为了使本领域的技术人员能够更好的理解本发明，但并不对本发明作任何限制。0036本发明所采用的各个食用酵母菌均购自安琪酵母股份有限公司但并不对本发明作任何限制，其它公司生产的功能相同的食用酵母菌也可以用于本发明；各个乳杆菌购自。
12、丹麦汉森公司但并不对本发明作任何限制，其它公司生产的功能相同的乳杆菌也可以用于本发明。说明书CN104172185A3/6页50037下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。0038实施例10039生物强化细胞营养素用下述方法制成0040一母液的制备00411选取重量比例为11122的黑糯米、黄糯米、紫米、黍米和大米五种谷物为原料，清洗分离杂质后，置于纸浆蒸煮机中加入原料总重量30的水，启动纸浆蒸煮机，旋转浸泡30分钟；浸泡的目的是使原料充分吸收水份；00422停止旋转，将水放净，打开冷气机，通入冷气，旋转保持4以下60分钟，停止旋转；放冷的目的是使吸水后的原料膨胀；00433关闭冷气机，打。
13、开空压机，通入室温空气，旋转，升温至室温；提前预热的目的是为了下一步通蒸汽之前的温度升高而节省能源；00444关闭空压机，停止旋转，通入蒸汽，旋转，保持100，60分钟，关闭蒸汽；其目的是熟化并消毒；00455停止旋转，打开空压机，通入室温空气，旋转，降至30；其目的为后续加入营养配料、复合酶及菌种提供合适的温度；00466停止旋转，加入原料总重量2的营养配料粉，旋转30分钟；所述营养配料为重量比为1231的灵芝、枸杞、蓝莓果和肉桂；00477停止旋转，加入原料总重量02的复合酶，旋转1小时；复合酶是质量比为3311的糖化酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶；00488加入原料总重量02食用菌种，旋转。
14、使均匀；停止旋转，分装至发酵桶，在28发酵15天，即得母液备用；食用菌种为重量比为31的面包酵母菌和保加利亚乳杆菌；0049二胶料的制备00501另取重量比为11的黄糯米和白糯米为第二原料，用18水浸泡16小时；沥水，将沥水后的米置于容器内；00512向容器内加入第二原料重量1倍的水，煮1小时；00523过滤，去除水，获得胶料备用；0053三成品的制备00541将母液与胶料按重量比为11的比例，混合，分离除渣，得混合液；00552加入混合液重量1的低聚异麦芽糖，混合液重量02的黄原胶，均质；灌装灭菌，得生物强化细胞营养素。0056本实施例中的旋转转速均为15转/分钟。0057实施例20058生。
15、物强化细胞营养素用下述方法制成0059一母液的制备00601选取重量比为1121121的黑糯米、紫米、黍米、白糯米、粟米、高粱米和大米七种谷物为原料，清洗分离杂质后，置于纸浆蒸煮机中加入原料总重量40的水，启动纸浆蒸煮机，旋转浸泡40分钟；00612停止旋转，将水放净，打开冷气机，通入冷气，旋转保持4以下80分钟，停止说明书CN104172185A4/6页6旋转；00623关闭冷气机，打开空压机，通入室温空气，旋转，升温至室温；00634关闭空压机，停止旋转，通入蒸汽，旋转，保持100，50分钟，关闭蒸汽；00645停止旋转，打开空压机，通入室温空气，旋转，降至40；00656停止旋转，加入原。
16、料总重量1的营养配料粉，旋转60分钟；所述营养配料为重量比为1231的灵芝、枸杞、蓝莓果和肉桂；00667停止旋转，加入原料总重量03的复合酶，旋转15小时，复合酶是质量比为3311的糖化酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶；00678加入原料总重量05食用菌种，旋转使均匀；停止旋转，分装至发酵桶，在32发酵12天，即得母液备用；食用菌种为重量比为211的面包酵母、甜酒曲酵母和植物乳杆菌；0068二胶料的制备00691另取重量比为11的黄糯米和白糯米为第二原料，用30水浸泡8小时；沥水，置于容器内；00702向容器内加入第二原料重量15倍的水，煮2小时；00713过滤，去除水，获得胶料备用；0072三。
17、成品的制备00731将母液与胶料按重量比为115的比例，混合，分离除渣，得混合液；00742加入混合液重量2的低聚异麦芽糖，混合液重量04的黄原胶，混合液重量01的阿胶，均质；灌装灭菌，得生物强化细胞营养素。0075本实施例中的旋转转速均为20转/分钟。0076实施例30077生物强化细胞营养素用下述方法制成0078一母液的制备00791选取重量比为11121051105的黑糯米、白糯米、紫米、黍米、粟米、香米、高粱米、大米和薏米九种谷物为原料，清洗分离杂质后，置于纸浆蒸煮机中加入原料总重量50的水，启动纸浆蒸煮机，旋转浸泡60分钟；00802停止旋转，将水放净，打开冷气机，通入冷气，旋转保持。
18、4以下90分钟，停止旋转；00813关闭冷气机，打开空压机，通入室温空气，旋转，升温至室温；00824关闭空压机，停止旋转，通入蒸汽，旋转，保持100，30分钟，关闭蒸汽；00835停止旋转，打开空压机，通入室温空气，旋转，降至50；00846停止旋转，加入原料总重量3的营养配料粉，旋转30分钟；营养配料为重量比为1231的灵芝、枸杞、蓝莓果和肉桂；00857停止旋转，加入原料总重量04的复合酶，旋转2小时，复合酶是质量比为3311的糖化酶、淀粉酶、纤维素酶和果胶酶；00868加入原料总重量1食用菌种，旋转使均匀；停止旋转，分装至发酵桶，在35发酵8天，即得母液备用；食用菌种为重量比为211的。
19、面包酵母、甜酒曲酵母和嗜酸乳杆菌；说明书CN104172185A5/6页70087二胶料的制备00881另取黑糯米为第二原料，用25水浸泡10小时；沥水，置于容器内；00892向容器内加入第二原料重量2倍的水，煮3小时；00903过滤，去除水，获得胶料备用；0091三成品的制备00921将母液与胶料按重量比为12的比例，混合，分离除渣，得混合液；00932加入混合液重量2的低聚异麦芽糖，混合液重量07的黄原胶，混合液重量1的阿胶，均质；灌装灭菌，得生物强化细胞营养素。0094各实施例中的转速为1520转/分钟，其目的是例物料混匀，但对转速并不限制，达到混匀目的的其它转速也可以使用。0095在实。
20、施例13的基础上再加以微波、气流干燥、喷雾等烘干技术，可将本发明制成粉体状食品，减轻了液体灌装的重量，方便外出携带，食用时即冲即食；0096在实施例13的基础上再在上述成品工序中将黄原胶的加入比例提高，加入天然果胶，也可制成类似果冻状食品，或添加到巧克力、麦乳精、饼干、面包等食品中食用；也可精制成口服液服用。又可制成固体羹状食品，此外，本发明还可制成饼干、糖果、点心等食品，方便各类群体食用。0097实施例40098用MTT实验检测实施例3制备的生物强化细胞营养素对人胃癌细胞系BGC823/SGC7901的存活率的影响细胞毒性实验00991用含有10的胰蛋白酶消化单层细胞，将细胞收集到含10血清。
21、的DMEM培养液中。01002离心1500RPM，10分钟,用培养液重悬细胞，计数。将细胞均匀铺至96孔板，每孔加入200L7000细胞细胞悬液。01013将培养板放至37二氧化碳培养箱中，培养24小时，分别加入用DMEM培养液配制的不同浓度的生物强化细胞营养素，孵育不同时间后检测细胞存活数。结果见图1和图2。0102图1中，30的生物强化细胞营养素作用人胃癌细胞系BGC82312和24小时后，细胞的存活率为7233404和5836085。0103图2中，30的生物强化细胞营养素作用人胃癌细胞系SGC790112和24小时后，细胞的存活率为6049032和5744029。0104实施例5010。
22、5用流式细胞术检测实施例3制备的生物强化细胞营养素对人胃癌细胞系BGC823/SGC7901凋亡情况的影响。01061将细胞以2104分别加入到六孔板中，放于二氧化碳培养箱中37培养24小时，然后分别加入用DMEM培养液配制的不同浓度的生物强化细胞营养素，孵育12、24和36小时；01072取出六孔板，用含有10的胰蛋白酶消化单层细胞，离心得到细胞沉淀，每管分别用50UL缓冲液含05UL的FITCANTIANNEXINV抗体和05UL的PI样品处理，并避光4放置30分钟后，用PBS洗涤，加05MLPBS悬浮细胞。说明书CN104172185A6/6页801083准备好样品后，进行流式细胞检测。。
23、结果见图3和图4。0109图3中，在30生物强化细胞营养素作用24H和36H后，人胃癌细胞BGC823的早期凋亡和晚期凋亡的百分比别为1127和2405。0110图4中，在30生物强化细胞营养素作用24H和36H后，人胃癌细胞SGC7901的早期凋亡和晚期凋亡的百分比分别为1733和2796。0111实验证明，本发明的生物强化细胞营养素使胃癌细胞存活率下降，促进胃癌细胞的凋亡。证明生物强化细胞营养素对人胃癌细胞有一定的抑制作用。并且随作用时间的增强、浓度的增大，抑制作用增强。0112实验证明，实施例1、实施例2制备的生物强化细胞营养素对使胃癌细胞存活率下降，促进胃癌细胞的凋亡的作用与实施例3的作用相似。0113BGC823和SGC7901细胞系为人胃癌细胞系，来源为ATCC细胞库，为现在实验室常用的胃癌实验细胞，本细胞经过检测，不含有细菌、真菌、病毒HIV、HBV、HCV、支原体。说明书CN104172185A1/2页9图1图2说明书附图CN104172185A2/2页10图3图4说明书附图CN104172185A10。