技术领域
本发明涉及苯并五元氮杂环基哌啶衍生物在制备血管舒张药物中的 用途。
背景技术
目前临床上存在多类可以舒张血管的药物，例如，α1受体阻断剂类药 物，包括哌唑嗪、多沙唑嗪、特拉唑嗪等，这些药物有明显的首剂量效应 或体位性低血压，从而限制了该类药物在临床上的广泛应用；Ca2+通道阻 断剂，现有药物包括氨氯地平、硝苯地平、非洛地平等，这类药物目前在 临床上广泛应用，但其同时也存在抑制心脏的风险。
因此，仍然需要开发新的血管舒张药物，以期提高药效，减少耐药性 或者使其毒副作用更小，以尽量满足临床上不同患者的需要。
发明内容
本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备血管舒张 药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代或多取代的芳香族基团或脂肪族环状基团，其 中
R3为H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；当R3为多取代基团时，R3独立地 选自H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷 基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；
A、B分别独立代表CH或N；
R2代表H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；当R2为多取代基团时，R2独立地 选自H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷 基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；
Y代表任选被1-3个卤素原子取代的饱和或不饱和的含有2-8个碳原 子的直链或支链烃基链，其中一个或多个碳任选被选自氧、硫和氮的杂原 子替代。
附图说明
图1为化合物(II-2)(10-10-10-2mol·L-1)对肾上腺素(10-5mol·L-1)收缩家 兔离体血管舒张作用的累积浓度效应曲线。
图2为化合物(II-2)(10-10-10-2mol·L-1)对去甲肾上腺素(10-5mol·L-1) 收缩家兔离体血管舒张作用的累积浓度效应曲线。
图3为化合物(II-2)(10-10-10-2mol·L-1)对高钾液(60mmol·L-1)收缩的 家兔离体血管舒张作用的累积浓度效应曲线。
图4为化合物(II-2)(10-6mol/L)拮抗苯肾上腺素(10-8-6×10-3mol/L) 收缩家兔离体血管的累积浓度效应曲线。
图5为甲磺酸多沙唑嗪(10-6mol/L)拮抗苯肾上腺素(10-8-3×10-3mol/L) 收缩家兔血管的累积浓度效应曲线。
图6为化合物(II-2)(10-6mol/L)拮抗CaCl2(10-5-10-2mol/L)收缩 家兔离体血管的累积浓度效应曲线。
图7为氨氯地平(10-7mol/L)拮抗CaCl2(10-6-10-2mol/L)收缩家兔离 体血管的累积浓度效应曲线。
图8为化合物(II-2)(10-7mol/L)拮抗5-羟色胺(10-8-10-3mol/L)收 缩家兔离体血管的累积浓度效应曲线。
具体实施方式
本发明提供了如下式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备血管 舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代或多取代的芳香族基团或脂肪族环状基团，其 中
R3为H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；当R3为多取代基团时，R3独立地 选自H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷 基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；
A、B分别独立代表CH或N；
R2代表H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；当R2为多取代基团时，R2独立地 选自H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷 基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代
Y代表任选被1-3个卤素原子取代的饱和或不饱和的含有2-8个碳原 子的直链或支链烃基链，其中一个或多个碳任选被选自氧、硫和氮的杂原 子替代。
优选地，在本发明式(I)中的R2为在所述苯并五元氮杂环上的单 取代或多取代基团，例如R2为单取代、双取代、三取代基团等；R2为苯并五元氮杂环的任意碳原子上连接的基团，例如，当A(或B)为 C原子时，则R2也可以与其相连接。
本文使用的术语“芳香族基团”的含义应理解为其中至少一个环为 芳香环的C5-12单环烃环或双环烃环，其中一个或多个碳任选被选自氧、 硫和氮的杂原子替代。芳香族基团的实例包括芳基和杂芳基，例如苯基、 萘基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯 并咪唑基、苯并吡唑基、苯并呋喃基、苯并嘧啶基、苯并吡啶基、喹 噁啉基、呋喃基、吡啶基或嘧啶基。
本文使用的术语“脂肪族环状基团”的含义应理解为C4-12单环饱和 环烃基或双环饱和环烃基，其中一个或多个碳任选被选自氧、硫和氮 的杂原子替代。脂肪族环状基团的实例包括环丁基、环戊基、环己基、 环庚基、四氢呋喃基、哌啶基或哌嗪基等。
除非另外具体指出，本文所使用的术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。
本文使用的术语“烷基”包括直链或支链烷基。所述“C1-C6烷基” 基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔 丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、正己基、异己基等。
本文使用的术语“烷氧基”指-O-烷基，其中烷基包括直链或支链烷 基。所述“C1-C6烷氧基”基团的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁 氧基、戊氧基和己氧基等。
在一个具体实施方案中，本发明提供了如下式(I)化合物或其药学 上可接受的盐在制备血管舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代或多取代的芳香族基团或脂肪族环状基团，其 中
所述芳香族基团优选为苯基、萘基、杂原子选自N、S、O的苯并 五元杂环或六元杂环，或五元或六元不饱和杂环；更优选为苯基、苯 并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、 苯并吡唑基、苯并呋喃基、苯并嘧啶基、苯并吡啶基、喹噁啉基、呋 喃基、吡啶基或嘧啶基；再更优选为苯基、苯并异噁唑基、苯并异噻 唑基、苯并吡唑基、苯并呋喃基、萘基、呋喃基、吡啶基、嘧啶基或 喹噁啉基；特别优选为苯基、苯并异噁唑基；最优选为苯并异噁唑基；
所述脂肪族环状基团优选为五元或六元饱和环烃基，或杂原子选 自N、S、O的五元或六元饱和杂环基；更优选为环戊基、环己基、四 氢呋喃基、哌啶基或哌嗪基；再更优选为环己基、哌啶基或哌嗪基； 特别优选为环己基；
R3为H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6烷基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；优选地，R3为H、F、Cl、Br、 CN、烷基部分任选被1-3个卤素原子取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧 基、CHO、COCH3或COOCH3；更优选地，R3为H、F、Cl、COCH3、 烷基部分任选被1-3个卤素原子取代的C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；再 更优选地，R3为H、F、Cl、CN、CF3、CH3、OCH3或COCH3；特别 优选地，R3为H、F或CF3；最优选地，R3为F；当R3为多取代基团时， R3独立地选自以上所述基团；
A、B分别独立代表CH或N；优选地，A、B均代表N；
R2代表H、卤素、CN、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、CHO、CO(C1-C6 烷基)、COO(C1-C6烷基)、NO2、NH2、NH(C1-C6烷基)、SH、S(C1-C6烷基)、-SO(C1-C6烷基)或-SO2(C1-C6烷基)，上述基团中烷基部 分任选被一个或多个卤素原子取代；优选地，R2为H、F、Cl、Br、 CN、烷基部分任选被1-3个卤素原子取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧 基、CHO、COCH3或COOCH3；更优选地，R2为H、F、Cl、CN、 CHO、COCH3、COOCH3或者烷基部分任选被1-3个卤素原子取代的 C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；再更优选地，R2为H、F、Cl、CN、CF3、 CH3、OCH3、CHO、COCH3或COOCH3；特别优选地，R2为H或OCH3； 最优选地，R2为H；当R2为多取代基团时，R2独立地选自以上所述基 团；
Y代表任选被1-3个卤素原子取代的饱和或不饱和的含有2-8个碳原 子的直链或支链烃基链，其中一个或多个碳任选被选自氧、硫和氮的杂原 子替代；优选地，Y为未取代的含2-8个碳的饱和烃基，或者，其中1个 碳原子被氧或硫替代的未取代的含2-8个碳的饱和烃基，例如-C1-7亚烷基 -O-；更优选Y为亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、 亚庚基、亚辛基、氧基亚甲基、氧基亚乙基、氧基亚丙基、氧基亚丁基、 氧基亚戊基、氧基亚己基、氧基亚庚基、亚甲基氧基、亚乙基氧基、亚丙 基氧基、亚丁基氧基、亚戊基氧基、亚己基氧基或亚庚基氧基；再更优选 地，Y为亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚庚基、 亚辛基、亚甲基氧基、亚乙基氧基、亚丙基氧基、亚丁基氧基、亚戊基氧 基、亚己基氧基或亚庚基氧基；特别优选地，Y为亚乙基、亚丙基、亚丁 基、亚乙基氧基或亚丙基氧基；再特别优选地，Y为亚丙基或亚丁基；最 优选地，Y为亚丙基。
在另一个具体实施方案中，本发明提供了如下式(I)化合物或其 药学上可接受的盐在制备血管舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代或多取代的苯基、苯并异噁唑、苯并异噻唑、 苯并呋喃或苯并吡唑，其中
R3为H、F、Cl、Br、CN、烷基部分任选被1-3个卤素原子取代 的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基、CHO、COCH3、COOCH3；优选地， R3为H、F、Cl、CN、CF3、未取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基、CHO、 COCH3或COOCH3；更优选地，R3为H、F、Cl、CH3、OCH3、COCH3或CF3；特别优选地，R3为H、F或CF3；最优选地，R3为F；当R3为 多取代基团时，R3独立地选自以上所述基团；
A、B分别独立地代表CH或N；优选地，A、B均代表N；
R2代表H、F、Cl、Br、CN、CHO、COCH3、COOCH3、烷基 部分任选被1-3个卤素原子取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；优选地， R2为H、F、Cl、CN、CF3、CH3、OCH3、COCH3或COOCH3；特别 优选地，R2为H或OCH3；最优选地，R2为H；当R2为多取代基团时， R2独立地选自以上所述基团；
Y代表任选被1-3个卤素原子取代的饱和或不饱和的含有2-8个碳的 直链或支链烃基，其中一个或多个碳任选被选自氧、硫和氮的杂原子替代； 优选Y为未取代的含2-8个碳的饱和烃基，或者，其中1个碳原子被氧或 硫替代的未取代的含2-8个碳的饱和烃基，例如-C1-7亚烷基-O-；更优选 Y为亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚乙基氧基、亚丙基氧 基或亚丁基氧基；特别优选地，Y为亚丙基或亚丁基；最优选地，Y为亚 丙基。
在另一个具体实施方案中，本发明提供了如下式(I)化合物或其药 学上可接受的盐在制备血管舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代的苯基、苯并异噁唑、苯并异噻唑、苯并呋喃 或苯并吡唑，其中R3为H、F、Cl、Br、CN、烷基部分任选被1-3个 卤素原子取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；优选地，R3为H、F、Cl、 CN、CF3、未取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；更优选地，R3为H、F、 Cl、CH3、OCH3或CF3；特别优选地，R3为H、F或CF3；最优选地， R3为F；当R3为多取代基团时，R3独立地选自以上所述基团；
A、B分别独立地代表CH或N；优选地，A、B均代表N；
R2代表H、F、Cl、Br、CN、CHO、COCH3、烷基部分任选被 1-3个卤素原子取代的C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；更优选地，R2为H、 F、Cl、CN、CF3、CH3、OCH3或COCH3；特别优选地，R2为H或OCH3； 最优选地，R2为H；当R2为多取代基团时，R2独立地选自以上所述基 团；
Y代表未取代的饱和或不饱和的含有2-8个碳的直链或支链烃基，其 中一个或多个碳任选被选自氧、硫和氮的杂原子替代；优选Y为未取代 的含2-8个碳的饱和烃基，或者，其中1个碳原子被氧或硫替代的未取代 的含2-8个碳的饱和烃基，例如-C1-7亚烷基-O-；更优选Y为亚乙基、亚 丙基、亚丁基或亚乙基氧基；特别优选地，Y为亚丙基或亚丁基；最优选 地，Y为亚丙基。
在又一个具体实施方案中，提供了式(I)化合物或其药学上可接受 的盐在制备血管舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代的苯并异噁唑，其中R3为H、F、Cl、Br、 CF3、OCH3或CF3；特别优选地，R3为H、F或CF3；最优选地，R3为F；
A、B分别独立地代表CH或N，优选地，A、B均代表N；
R2代表H、F、Cl、Br、CN、CH3或OCH3；特别优选地，R2为H 或OCH3；最优选地，R2为H；
Y代表含有2-8个碳的直链或支链饱和烃基，其中一个或多个碳任选 被选自氧、硫和氮的杂原子取代，例如-C1-7亚烷基-O-；优选为亚乙基、 亚丙基、亚丁基或亚乙基氧基；更优选为亚丙基或亚丁基；最优选为亚丙 基。
在又一个具体实施方案中，提供了式(I)化合物或其药学上可接受 的盐在制备血管舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代的苯并异噁唑，其中R3为H、F、Cl、Br、 OCH3或CF3；优选地，R3为H、F或CF3；更优选地，R3为F；
A、B分别独立地代表CH或N，优选地，A、B均代表N；
R2代表H、OCH3；优选地，R2为H；
Y代表含有2-8个碳的直链或支链饱和烃基，其中一个或多个碳任选 被选自氧、硫和氮的杂原子取代，例如-C1-7亚烷基-O-；优选为亚乙基、 亚丙基、亚丁基；更优选为亚丙基或亚丁基；最优选为亚丙基。
在又一个具体实施方案中，提供了式(I)化合物或其药学上可接受 的盐在制备血管舒张药物中的用途：
其中：
R1代表被R3单取代的苯并异噁唑，其中R3为H、F、Cl、Br、 OCH3；优选地，R3为H、F；
A代表CH，B代表CH或N；
R2代表H、F、Cl、Br、CN、COOCH3；
Y代表含有2-8个碳的直链或支链饱和烃基，其中一个或多个碳任选 被选自氧、硫和氮的杂原子取代，例如-C1-7亚烷基-O-；优选为亚乙基、 亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚乙基氧基、亚丙氧基或亚丁基氧基；特别优 选为亚丙基或亚丁基；最优选为亚丙基。
在本发明用途的其他具体实施方案中，本发明的化合物优选包括：
I-1 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶、
I-2 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-3 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-甲基苯并异噁唑))哌 啶、
I-4 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑))哌 啶、
I-5 N-(3-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶、
I-6 N-(3-(6-氯-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶、
I-7 N-(3-(6-甲基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑)) 哌啶、
I-8 N-(3-(6-甲氧基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁 唑))哌啶、
I-9 N-(3-(6-甲酰基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁 唑))哌啶、
I-10 N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶、
I-11 N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-12 N-(4-(1-苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-13 N-(4-(6-氰基苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-14 N-(4-(6-氰基苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑)) 哌啶、
I-15 N-(2-(6-甲氧基苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑)) 哌啶、
I-16 N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-17 N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并异噻唑)哌啶、
I-18 N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并吡唑)哌啶、
I-19 N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并呋喃)哌啶、
I-20 N-(3-(1-苯并吡唑基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-21 N-(4-(6-氰基苯并吡唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-22 N-(2-(6-氯苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-23 N-(3-(6-氯苯并三氮唑基)丙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-24 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-氯苯基)哌啶、
I-25 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-氯苯基)哌啶、
I-26 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-27 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-28 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-氟苯基)哌啶、
I-29 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(2-甲氧基苯基)哌啶、
I-30 N-(4-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌 啶、
I-31 N-(4-(6-甲氧基-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基) 哌啶、
I-32 N-(4-(6-氰基-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌 啶、
I-33 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙氧基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-34 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丙氧基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-35 N-(4-(1H-苯并咪唑基-1-基)丁基)-4-(2-呋喃基)哌啶、
I-36 N-(4-(1H-苯并咪唑基-1-基)丁基)-4-(4-吡啶基)哌啶、
I-37 N-(4-(1H-苯并咪唑基-1-基)丁基)-4-(2-嘧啶基)哌啶、
I-38 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(4-环己基)哌啶、
I-39 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(1-萘基)哌啶、
I-40 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(2-喹噁啉基)哌啶。
如上I-1至I-40化合物的化学结构式如下表所示：
在本发明用途的具体实施方案中，更优选如下化合物或其药学上可接 受的盐：
I-1 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶、
I-2 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-3 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-甲基苯并异噁唑))哌 啶、
I-4 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑))哌 啶、
I-5 N-(3-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶、
I-6 N-(3-(6-氯-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶、
I-7 N-(3-(6-甲基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑)) 哌啶、
I-8 N-(3-(6-甲氧基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁 唑))哌啶、
I-9 N-(3-(6-甲酰基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁 唑))哌啶、
I-10 N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶、
I-11 N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-12 N-(4-(1-苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-13 N-(4-(6-氰基苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-14 N-(4-(6-氰基苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑)) 哌啶、
I-20 N-(3-(1-苯并吡唑基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-21 N-(4-(6-氰基苯并吡唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-22 N-(2-(6-氯苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-23 N-(3-(6-氯苯并三氮唑基)丙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-24 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-氯苯基)哌啶、
I-25 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-氯苯基)哌啶、
I-26 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-27 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-30 N-(4-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌 啶、
I-33 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙氧基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-34 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丙氧基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶。
在本发明用途的具体实施方案中，特别优选如下化合物或其药学上可 接受的盐：
I-1 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶、
I-2 N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶、
I-10 N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶、
I-26 N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶、
I-27 N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶。
本发明式(I)化合物的药学上可接受的盐优选为盐酸盐、溴氢酸盐、 硫酸盐、三氟醋酸盐、甲磺酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、琥珀酸盐、马来 酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、乳酸盐、丙酮酸盐、乙酸盐、富马酸盐、草酰 乙酸盐、乙磺酸盐、草酸盐、苯磺酸盐或羟乙磺酸盐。本发明所述的药学 上可接受的盐优选含结晶水，更优选含0.5-3分子的结晶水。
在本发明用途的具体实施方案中，尤其优选化合物I-2或其药学上可 接受的盐，例如其盐酸盐，即化合物(II-2)，其化学结构如下所示。
大鼠整体动物降压试验结果表明：化合物(II-2)具有明显降压作用， 口服吸收较好，急性毒性相对较小，治疗指数较大，骨髓微核试验呈阴性， 具备作为制备血管舒张药物，尤其是作为新型降压药物开发的潜在价值。
本发明人发现，本发明所述的式(I)化合物及其药学上可接受的盐 具有显著的受试者血管平滑肌舒张作用。本发明所述的式(I)化合物及 其药学上可接受的盐可通过例如α受体拮抗作用(特别是α1受体拮抗作 用)实现血管平滑肌舒张作用。除此之外，本发明的式(I)化合物及其 药学上可接受的盐也可能作用于其他靶点或途径实现血管平滑肌舒张作 用，例如Ca2+通道阻断或拮抗5-HT2A受体拮抗作用。特别优选具有多重 靶点作用的本发明化合物，例如式(I-2)或式(II-2)。该多重靶点作用 使本发明化合物特别有效用于血管持续病理性收缩或血管平滑肌痉挛相 关的疾病，其相对于单一的单靶点药物或多种单靶点药物联用用于所述疾 病时，可实现更高药效，或者有效减少耐药性、或者减小不想要的副作用， 使得安全性更高。具体来说，多重靶点的作用使得例如可在不完全阻断血 管平滑肌的α1受体的同时，通过阻断Ca2+通道和/或5-HT2A受体的协同 作用产生良好的降压药效，这使得残存的α1受体仍可参与升压反射，可 防止降低体位性低血压的发生；和/或通过阻断Ca2+通道作用，在协同降 压的同时，产生抗心肌肥厚、保护血管内皮细胞、抗动脉粥样硬化、抑制 血管平滑肌增生、改善脑循环等作用，并通过减慢心率，有效防止心动过 速和心悸的发生，防止首剂效应的发生；和/或通过阻断5-HT2A受体作用， 产生协同降压的同时，可有效改善阻塞性血管病患者的血流供应，使其适 用于伴有动脉粥样硬化、伴有内皮损伤的高血压患者。
由此，本发明式(I)化合物及其药学上可接受的盐可用于预防、缓 解或治疗受试者与血管持续病理性收缩或血管痉挛相关的疾病或病症。所 述式(I)化合物及其药学上可接受的盐可特别用于预防、缓解或治疗高 血压，心力衰竭，心绞痛，冠心病等；用于由血管痉挛引起的脑缺血性疾 病，心肌缺血性疾病、休克等；用于肾缺血、由肾血管痉挛引起的肾功能 低下和外周血管痉挛性疾病。
本文所述受试者优选哺乳动物，特别优选人。
本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐特别优选用于预 防、缓解或治疗例如，高血压、心绞痛、心力衰竭、冠心病、脑缺血以及 外周血管痉挛性疾病如血栓闭塞性脉管炎、雷诺氏病等。
本发明式(I)化合物或其药学上可接受的盐可制备成合适的药物组 合物形式用于口服给药、肠胃外给药、通过吸入喷雾给药、直肠给药、鼻 内给药、舌下给药、颊内给药、透皮给药或经植入给药，所述肠胃外给药 包括皮下、皮内、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶 内和颅内注射给药或滴注技术。本发明式(I)化合物或其药学上可接受 的盐优选口服给药、舌下给药、静脉内、肌内、皮下注射给药。所述的药 物组合物可包含一种或多种常规的可药用载体、助剂或介质，例如：稀释 剂、赋形剂如水等；粘合剂如纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮等； 填充剂如淀粉等；崩裂剂如碳酸钙、碳酸氢钠；润滑剂如硬脂酸钙或硬脂 酸镁等；以及其他辅助剂如香味剂和甜味剂。
包含本发明式(I)化合物或其药学上可接受的盐的所述药物组合物 可以是无菌注射剂的形式，例如作为无菌水性或油脂性悬浮液。该悬浮液 可根据本领域已知的技术使用合适的分散剂或润湿剂(例如Tween 80) 和悬浮剂配制。无菌注射剂也可为在可用于肠胃外给药的无毒稀释剂或溶 剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如作为1，3-丁二醇中的溶液。可使用的 可用介质和溶剂为甘露醇、水、Ringer′s溶液和等渗氯化钠溶液。此外， 无菌的不挥发油常规可用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何温和 的不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。脂肪酸，例如油酸及其甘 油酯衍生物可用于可注射制剂中，天然可药用的油也可用于其中，例如橄 榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化形式。所述油溶液或悬浮液还可包含 长链醇稀释剂或分散剂(例如描述于Ph.Helv中的那些)或类似的醇。
包含本发明式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物可以 任何可口服的剂型口服给药，所述剂型包括但不限于，胶囊剂、片剂、粉 剂、颗粒剂和水性悬浮剂和溶液剂。所述剂型是根据药物制剂领域中所熟 知的技术而制得。对于口服使用的片剂，通常使用的载体包括乳糖和玉米 淀粉。也通常添加润滑剂(例如硬脂酸镁)。对胶囊形式的口服给药，可 用的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当水性悬浮剂被口服给药时，活 性组分可与乳化剂和悬浮剂结合。如果需要，可添加某些甜味剂和/或调 味剂和/或着色剂。
包含本发明式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物可通 过鼻用气溶剂或吸入给药。这类组合物可根据药物制剂领域中所熟知的技 术制备，并且可使用苯甲醇或其他合适的防腐剂、提高生物利用度的吸收 促进剂、碳氟化合物和/或本领域已知的其他增溶剂或分散剂，制备为盐 水中的溶液。
包含本发明式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物还可 以用于直肠给药的栓剂形式给药。所述组合物可通过将本发明化合物与合 适的无刺激的赋形剂混合制得，所述赋形剂在室温下为固体但在直肠温度 下为液体，因此在直肠中将溶化以释放活性组分。这类物质包括但不限于， 可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
根据麻醉大鼠试验结果推断，本发明式(I)化合物的每日给药剂量应 该小于氨氯地平的每日给药剂量。用于舒张血管或高血压的氨氯地平的每 日给药剂量为本领域已知，例如10mg/日。本发明式(I)化合物的具体 剂量可根据临床实验结果及患者的病情、年龄等由医师决定。
包含本发明式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物可以 采用医学领域常规的方法进行制备，其中活性成分的含量为0.1重量％～ 99.5重量％，这取决于待治疗或预防的病症以及给予所述化合物的受试者 的特性。对于所给化合物的剂量方案可由本领域技术人员利用本文公开的 内容容易地确定。
在一个具体实施方案中，本发明的化合物式(I)化合物或其药学上 可接受的盐可与一种或多种其他活性药物组分联用。该联用药物可以是包 含本发明化合物或其药学上可接受的盐和一种或多种其他活性药物组分 的单一组合物的形式，或者，该联用药物可为两种或多种单独的组合物的 联合形式，其中本发明的化合物包含在一种组合物中，一种或多种其他活 性药物组分包含在一种或多种单独的组合物中。可与本发明式(I)化合 物或其药学上可接受的盐联用以预防、缓解或治疗受试者与血管持续病理 性收缩或血管痉挛相关的疾病或病症的其他活性药物组分例如为其他抗 平滑肌痉挛药物，优选自舍曲林、卡托普利、贝那普利、缬沙坦、普萘洛 尔、利尿药。
本申请述及的各实施方案，或者不同优选级别的方案除非另有说明均 可任意组合。
本发明的化合物可采用如下的方法进行合成：
合成路线1：
其中，R1、R2、B、n如上文定义；M代表其可药用的盐，例如HCl、 HBr、H2SO4、CH3SO3H等。
以取代苯并五元氮杂环为原料，在氢氧化钠水溶液中，与氯代烷 基溴进行缩合反应，制备N-氯烷基-苯并五元杂环化合物，再与4-取代 哌啶缩合反应，制备式(I)所示化合物，任选地，最后经酸化成盐制 备相应的盐。采用上述方法可制备化合物I-1-I-4、I-17-I-19及其盐。
合成路线2：
其中，R1、R2、B、n如上文定义；M代表其可药用的盐，例如HCl、 HBr、H2SO4、CH3SO3H等。
以取代的苯并五元氮杂环-1醇为原料，与氢化钠交换活泼氢得相 应的钠盐，再与氯代烷基溴反应得到相应的氯化物，再与4-取代哌啶 缩合反应，制备式(I)所示化合物，最后任选经酸化成盐制备相应的 盐。采用上述方法可制备化合物I-15-I-16及其盐。
合成通法一：N-(3-氯丙基)-取代苯并五元氮杂环化合物的制备
将1H-取代苯并五元氮杂环(0.10mol)溶解于30重量％氢氧化钠 水溶液100ml中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化铵 0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。 冷却至室温，加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相加入二氯甲烷100ml 萃取，合并有机相，经100ml饱和盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油 状物。油状物经中性Al2O3层析或制备型HPLC分离纯化，得N-(3- 氯丙基)-取代苯并五元氮杂环化合物，收率30.0～85.0％。
合成通法二：N-(3-(取代苯并五元氮杂环)丙基)-4-(3-(取代苯并异 噁唑))哌啶的制备
将N-(3-氯丙基)-取代苯并五元氮杂环化合物(0.06mol)溶解于 150ml乙腈中，分别加入4-(3-(取代苯并异噁唑))哌啶(0.05mol)，二 异丙基乙基胺(0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温搅拌10分钟， 然后升温回流反应10～20小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油 状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得 式(I)化合物，收率65.0～72.0％。
合成通法三：N-(2-氯乙氧基)-取代苯并五元氮杂环化合物的制备
将取代N-羟基苯并五元氮杂环化合物(0.01mol)溶于10ml NMP 中，分批加入50重量％钠氢(0.01mol)的固体石蜡混合物，搅拌反应 0.5h。同时，将3-氯溴丙烷(0.015mol)、溶解于5mlNMP中，加入 上述的溶液中，室温下搅拌反应12h。将反应液倒入50ml水中，乙酸 乙酯萃取(3×50mL)，合并有机相，经30ml水洗涤，加入无水硫酸 镁干燥有机相，过滤，蒸干溶剂，油状物经中性Al2O3层析或制备型 HPLC分离纯化，得1-(2-氯乙氧基)-取代苯并五元氮杂环化合物，收 率75.0～85.0％。
也可参照现有技术的已知合成路线制备相关化合物，例如可参照中 国专利申请200810207606.7中所述的方法制备化合物(I-20至I-23)。
以下结合具体实施例对本发明进行举例说明。
实施例1
N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶(I-1)的制备
将苯并三氮唑(11.9g，0.10mol)溶解于100ml 30重量％氢氧化钠水 溶液中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化铵0.8g，混合 搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至室温， 加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相再加入100ml二氯甲烷萃取，合 并有机相，经100ml饱和食盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状物。油状 物经柱层析(中性Al2O3)分离纯化，二氯甲烷洗脱分离，得1-(3-氯丙 基)-1H-苯并三氮唑16.0g，收率82％。
将1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑(11.7g，0.06mol)溶解于150ml乙 腈中，分别加入3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(10.1g，0.05mol)、二异丙基 乙基胺(25.8g，0.2mol)、以及碘化钾(8.3g，0.05mol)，搅拌混合后 升温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经柱层析 (中性Al2O3)层析分离纯化，二氯甲烷洗脱，得化合物(I-1)12.6g， 收率69.7％。ESI-MS[M+H]+：m/z 362.2。
实施例2
N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-2) 的制备
采用实施例1中的方法制备1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑。
将1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑(11.7g，0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，分别加入6-氟-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(11.0g，0.05mol)，二异丙 基乙基胺(25.8g，0.2mol)，以及碘化钾(8.3g，0.05mol)，室温下混 合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓 缩得油状物，经柱层析分离(中性Al2O3)，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱， 得3-(1-(3-(1H-苯并三氮唑)丙基)哌啶-4-基)-6-氟苯并异噁唑(I-2)13.47g， 收率71.0％。ESI-MS[M+H]+：m/z 380.2。
实施例3
N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-甲基苯并异噁唑))哌啶(I-3) 的制备
将1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑(11.7g，0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，加入6-甲基-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(10.8g，0.05mol)、二异丙基 乙基胺(25.8g，0.2mol)、以及碘化钾(8.3g，0.05mol)，室温下混合 搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。按合成通法二进行后处理操作， 得(I-3)12.4g，收率66.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 376.2。
实施例4
N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑))哌啶(I-4) 的制备
将1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑(11.7g，0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，加入6-甲氧基-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(11.6g，0.05mol)、二异丙 基乙基胺(25.8g，0.2mol)、以及碘化钾(8.3g，0.05mol)，室温下混 合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。按合成通法二进行后处理操作， 得(I-4)13.3g，收率67.7％。ESI-MS[M+H]+：m/z 392.2。
实施例5
N-(3-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-5)的制备
1-(3-氯丙基)-6-氟-1H-苯并三氮唑的制备
将6-氟-1H-苯并三氮唑(13.7g，0.10mol)溶解于100ml 30重量％氢 氧化钠水溶液中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化铵0.8g， 混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。按合成通 法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙基)-6-氟 -1H-苯并三氮唑6.9g，收率32.3％。
N-(3-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-5)的制备
将1-(3-氯丙基)-6-氟-1H-苯并三氮唑(6.41g，0.03mol)溶解于150ml 乙腈中，6-氟-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(5.5g，0.025mol)，二异丙基乙 基胺(12.9g，0.1mol)，以及碘化钾(4.15g，0.025mol)，室温下混合 搅拌10分钟，然后升温回流反应16h。按合成通法二进行后处理操作， 得(I-5)8.3g，收率69.6％。ESI-MS[M+H]+：m/z 398.2。
实施例6
N-(3-(6-氯-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-6)的制备
1-(3-氯丙基)-6-氯-1H-苯并三氮唑的制备
将6-氯-1H-苯并三氮唑(15.4g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化钠 水溶液100ml中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化铵0.8g， 混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。按合成通 法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙基)-6-氯 -1H-苯并三氮唑7.3g，收率31.7％。
N-(3-(6-氯-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-6))的制备
将1-(3-氯丙基)-6-氯-1H-苯并三氮唑(6.90g，0.03mol)溶解于150ml 乙腈中，6-氟-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(5.5g，0.025mol)，二异丙基乙 基胺(12.9g，0.1mol)，以及碘化钾(4.15g，0.025mol)，室温下混合 搅拌10分钟，然后升温回流反应16h。按合成通法二进行后处理操作， 得(I-5)8.1g，收率65.2％。ESI-MS[M+H]+：m/z 414.1。
实施例7
N-(3-(6-甲基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-7)的制备
1-(3-氯丙基)-6-甲基-1H-苯并三氮唑的制备
将6-甲基-1H-苯并三氮唑(13.3g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化 钠水溶液100ml中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化铵 0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。按合 成通法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙基)-6- 甲基-1H-苯并三氮唑7.2g，收率34.3％。
N-(3-(6-甲基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-7)的制备
将1-(3-氯丙基)-6-甲基-1H-苯并三氮唑(6.29g，0.03mol)溶解于150ml 乙腈中，6-氟-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(5.5g，0.025mol)、二异丙基乙 基胺(12.9g，0.1mol)、以及碘化钾(4.15g，0.025mol)，室温下混合 搅拌10分钟，然后升温回流反应16h。按合成通法二进行后处理操作， 得(I-7)8.5g，收率71.9％。ESI-MS[M+H]+：m/z 394.2。
实施例8
N-(3-(6-甲氧基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶(I-8)的制备
1-(3-氯丙基)-6-甲氧基-1H-苯并三氮唑的制备
将6-甲氧基-1H-苯并三氮唑(14.9g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧 化钠水溶液100ml中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化 铵0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。 按合成通法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙 基)-6-甲氧基-1H-苯并三氮唑7.7g，收率34.1％。
N-(3-(6-甲氧基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶(I-8)的制备
将1-(3-氯丙基)-6-甲氧基-1H-苯并三氮唑(6.77g，0.03mol)溶解于 150ml乙腈中，6-氟-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(5.5g，0.025mol)、二异 丙基乙基胺(12.9g，0.1mol)、以及碘化钾(4.15g，0.025mol)，室温 下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应16h。按合成通法二进行后处理 操作，得(I-8)8.6g，收率70.0％。ESI-MS[M+H]+：m/z 410.2。
实施例9
N-(3-(6-甲酰基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶(I-9)的制备
1-(3-氯丙基)-6-甲酰基-1H-苯并三氮唑的制备
将6-甲酰基-1H-苯并三氮唑(16.2g，0.10mol)溶解于100ml 30重量％ 氢氧化钠水溶液中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化铵 0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。按合 成通法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙基)-6- 甲酰基-1H-苯并三氮唑7.9g，收率33.2％。
N-(3-(6-甲酰基-1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌 啶(I-9)的制备
将1-(3-氯丙基)-6-甲酰基-1H-苯并三氮唑(7.13g，0.03mol)溶解于 150ml乙腈中，6-氟-3-(哌啶-4-基)苯并异噁唑(5.5g，0.025mol)、二异 丙基乙基胺(12.9g，0.1mol)、以及碘化钾(4.15g，0.025mol)，室温 下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。按合成通法二进行后处理 操作，得(I-9)7.5g，收率73.6％。ESI-MS[M+H]+：m/z 408.2。
实施例10
N-(3-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶盐酸盐 (II-2)的制备
将化合物(I-2)(11.38g，0.03mol)溶解于100ml乙酸乙酯和10ml 无水乙醇中。冰水浴冷却条件下，滴加浓度3mol/L的氯化氢/乙酸乙酯溶 液，至反应溶液pH＝2，搅拌10min，过滤，干燥，得化合物(II-2)固 体11.4g，收率91.2％。
实施例11
N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并异噁唑)哌啶(I-10)的 制备
N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑的制备
将6-甲氧基-1H-苯并三氮唑(14.9g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧 化钠水溶液100ml中，加入3-氯溴丙烷(31.4g，0.10mol)、四丁基溴化 铵0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。 按合成通法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得N-(3-氯丙 基)-6-甲氧基苯并三氮唑7.7g，收率34.1％。
将N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，分别加入4-(3-苯并异噁唑)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3- 苯并异噁唑)哌啶(I-10)13.14g，收率67.2％。ESI-MS[M+H]+：m/z 391.2。
实施例12
N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-11)的制 备
采用实施例1中的方法制备1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑。
将1-(3-氯丙基)-1H-苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中，分 别加入4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙基)-4-(3-(6-氟苯 并异噁唑))哌啶(I-11)12.67g，收率69.4％。ESI-MS[M+H]+：m/z 365.2。
实施例13
N-(4-(1-苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-12)的制 备
将苯并三氮唑(11.9g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化钠水溶 液100ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵0.8g， 混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至 室温，加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相再加入二氯甲烷100ml 萃取，合并有机相，经100ml饱和食盐水洗涤，分液，蒸干有机相得 油状物。油状物经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷洗脱得1-(4-氯 丁基)-1H-苯并三氮唑17.0g，收率81.0％。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中， 分别加入4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺 (0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升 温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1-苯并三氮唑基) 丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-12)13.96g，收率71.0％。 ESI-MS[M+H]+：m/z 393.2。
实施例14
N-(4-(6-氰基苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-13) 的制备
1-(3氯丁基)-6-氰基-1H-苯并三氮唑的制备
将6-氰基-1H-苯并三氮唑(15.9g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化 钠水溶液100ml中，加入3-氯溴丁烷(32.6g，0.10mol)、四丁基溴化铵 0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。按合 成通法一进行后处理操作，经制备型HPLC分离纯化，得1-(3氯丁基)-6- 氰基-1H-苯并三氮唑9.1g，收率32.6％。
将N-(3-氯丁基)-6-氰基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中， 分别加入4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺 (0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升 温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(6-氰基苯并三氮唑 基)丁基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-13)15.07g，收率72.1％。 ESI-MS[M+H]+：m/z 418.2。
实施例15
N-(4-(6-氰基苯并三氮唑基)丁基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑))哌啶 (I-14)的制备
采用实施例14中的方法制备N-(3-氯丁基)-6-氰基苯并三氮唑。
将N-(3-氯丁基)-6-氰基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中， 分别加入4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺 (0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升 温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(6-氰基苯并三氮唑 基)丁基)-4-(3-(6-甲氧基苯并异噁唑))哌啶(I-14)15.01g，收率69.8％。 ESI-MS[M+H]+：m/z 430.2。
实施例16
N-(2-(6-甲氧基苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶 (I-15)的制备
采用通法三中的方法制备N-羟基-6-甲氧基苯并三氮唑。
将N-羟基-6-甲氧基苯并三氮唑为原料，按通法一中的合成及后处理 方法制备N-(2-氯乙氧基-6-甲氧基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml 乙腈中，分别加入4-(3-(6-氟苯并异噁唑基))哌啶(0.05mol)，二异丙基 乙基胺(0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟， 然后升温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中 性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(2-(6-甲氧基 苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-15)14.21g，收率 69.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 411.2。
实施例17
N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(I-16)的 制备
采用通法三中的方法制备N-羟基苯并三氮唑。
将N-羟基苯并三氮唑为原料，按通法一中的合成及后处理方法制备 N-(2-氯乙氧基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中，分别加入 4-(3-(6-氟苯并异噁唑))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)，以 及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(2-(1-苯并三氮唑基)乙氧基)-4-(3-(6- 氟苯并异噁唑))哌啶(I-16)12.88g，收率67.6％。ESI-MS[M+H]+：m/z 381.2。
实施例18
N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并异噻唑)哌啶(I-17)的 制备
采用实施例11中的方法制备N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑。
将N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，分别加入4-(3-苯并异噻唑)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3- 苯并异噻唑)哌啶(I-17)13.17g，收率69.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 426.2。
实施例19
N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并吡唑)哌啶(I-18)的制 备
采用实施例11中的方法制备N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑。
将N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，分别加入4-(3-苯并吡唑)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3- 苯并吡唑)哌啶(I-18)12.11g，收率66.5％。ESI-MS[M+H]+：m/z 409.2。
实施例20
N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3-苯并呋喃)哌啶(I-19)的制 备
采用实施例11中的方法制备N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑。
将N-(3-氯丙基)-6-甲氧基苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，分别加入4-(3-苯并呋喃)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(3-(6-甲氧基苯并三氮唑基)丙基)-4-(3- 苯并呋喃)哌啶(I-19)12.40g，收率68.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 409.2。 也可参照现有技术的已知合成路线制备相关化合物，例如可参照中国专利 申请200810207606.7中所述的方法制备化合物(I-20至I-23)。
实施例21
N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-氯苯基)哌啶(I-24)的制备
将1H-苯并咪唑(11.8g，0.10mol)溶解于20重量％氢氧化钠水溶液 200ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵1.0g，混 合搅拌5分钟，升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至室温，加入100ml 二氯甲烷萃取，分液，水相加入二氯甲烷100ml萃取，合并有机相，经 100ml饱和盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状物。油状物经中性Al2O3层析分离纯化，得1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑12.5g，收率60.0％。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(7.51g，0.036mol)溶解于100ml乙腈 中，分别加入3-三氯苯基哌啶(5.9g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，室温搅拌10分钟，然后升温 回流反应15小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得化合物(I-24)7.3g，收 率66.4％。ESI-MS[M+H]+：m/z 368.2。
实施例22
N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-氯苯基)哌啶(I-25)的制备
将苯并三氮唑(11.9g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化钠水溶液 100ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵0.8g，混 合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至室温， 加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相再加入二氯甲烷100ml萃取，合 并有机相，经100ml饱和食盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状物。油状 物经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷洗脱得1-(4-氯丁基)-1H-苯并三 氮唑17.0g，收率81.0％。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(7.55g，0.036mol)溶解于100ml乙 腈中，分别加入3-氯苯基哌啶(5.9g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，搅拌混合后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷洗脱，得化合物(I-2)7.8g，收率70.3％。ESI-MS[M+H]+：m/z 369.2。
将化合物(I-25)(5.55g，0.015mol)溶解于50ml乙酸乙酯中。冰 水浴冷却条件下，滴加浓度3mol/L的氯化氢/乙酸乙酯溶液，至反应溶液 pH＝2，搅拌10min，过滤，干燥，得化合物(II-25)固体5.4g，收率88.0％。
实施例23
N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-26)的制备
采用实施例1中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中，分别 加入4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟 甲基苯基)哌啶(I-3)11.0g，收率64.9％。ESI-MS[M+H]+：m/z 402.2。
将化合物(I-26)(6.02g，0.015mol)溶解于50ml乙酸乙酯中。冰 水浴冷却条件下，滴加浓度3mol/L的氯化氢/乙酸乙酯溶液，至反应溶液 pH＝2，搅拌10min，过滤，干燥，得化合物(II-26)固体5.4g，收率89.0％。
实施例24
N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-27)的制 备
采用实施例2中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中，分 别加入4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3- 三氟甲基苯基)哌啶(I-27)13.6g，收率67.8％。ESI-MS[M+H]+：m/z 403.2。
实施例25
N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(3-氟苯基)哌啶(I-28)的制备
采用实施例1中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(7.51g，0.036mol)溶解于100ml乙腈 中，分别加入3-三氟苯基哌啶(5.9g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，室温搅拌10分钟，然后升温 回流反应15小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得化合物(I-28)7.1g，收 率67.2％。ESI-MS[M+H]+：m/z 352.2。
实施例26
N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丁基)-4-(2-甲氧基苯基)哌啶(I-29)的制备
采用实施例1中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(7.51g，0.036mol)溶解于100ml乙腈 中，分别加入2-甲氧基苯基哌啶(5.7g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，室温搅拌10分钟，然后升温 回流反应15小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得化合物(I-29)6.7g，收 率61.3％。ESI-MS[M+H]+：m/z 364.2。
实施例27
N-(4-(6-氟-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-30) 的制备
将6-氟-苯并三氮唑(15.3g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化钠水 溶液100ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵0.8g， 混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至室 温，加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相再加入二氯甲烷100ml萃取， 合并有机相，经100ml饱和食盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状物。油 状物经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷洗脱得6-氟-1-(4-氯丁基)-1H- 苯并三氮唑17.0g，收率77.0％。
将6-氟-1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中， 分别加入4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3- 三氟甲基苯基)哌啶(I-30)13.5g，收率64.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 421.2。
实施例28
N-(4-(6-甲氧基-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶 (I-31)的制备
将6-甲氧基-苯并三氮唑(14.9g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化 钠水溶液100ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵 0.8g，混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却 至室温，加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相再加入二氯甲烷100ml 萃取，合并有机相，经100ml饱和食盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状 物。油状物经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷洗脱得6-甲氧基-1-(4- 氯丁基)-1H-苯并三氮唑17.9g，收率75.0％。
将6-甲氧基-1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙 腈中，分别加入4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺 (0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升 温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1H-苯并三氮唑-1- 基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-31)14.0g，收率64.6％。 ESI-MS[M+H]+：m/z 433.2。
实施例29
N-(4-(6-氰基-1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶 (I-32)的制备
将6-氰基-苯并三氮唑(14.4g，0.10mol)溶解于30重量％氢氧化钠 水溶液100ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵0.8g， 混合搅拌5分钟。反应液缓慢升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至室 温，加入100ml二氯甲烷萃取，分液，水相再加入二氯甲烷100ml萃取， 合并有机相，经100ml饱和食盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状物。油 状物经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷洗脱得6-氰基-1-(4-氯丁 基)-1H-苯并三氮唑17.3g，收率74.0％。
将6-氰基-1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈 中，分别加入4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺 (0.2mol)，以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升 温回流反应15h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1H-苯并三氮唑-1- 基)丁基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-32)13.5g，收率63.1％。ESI-MS [M+H]+：m/z 427.2。
实施例30
N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙氧基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-33)的 制备
N-(2-氯丙氧基)-苯并三氮唑的制备
将1-羟基苯并三氮唑(0.01mol)溶于10ml NMP中，分批加入50％ 重量比的钠氢(0.01mol)的固体石蜡混合物，搅拌反应0.5h。同时，将 3-氯溴丙烷(0.015mol)、溶解于5mlNMP中，加入上述的溶液中，室温 下搅拌反应12h。将反应液倒入50ml水中，乙酸乙酯萃取(3×50mL)， 合并有机相，经30ml水洗涤，加入无水硫酸镁干燥有机相，过滤，蒸干 溶剂，油状物经中性Al2O3层析或制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙 氧基)苯并三氮唑，收率75.0～85.0％。
将1-(3-氯丙氧基)苯并三氮唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中，分别 加入4-(3-(6-氟-苯并异噁唑基))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丙氧基)-4-(3- 三氟甲基苯基)哌啶(I-33)13.2g，收率65.3％。ESI-MS[M+H]+：m/z 405.2。
实施例31
N-(4-(1H-苯并咪唑-1-基)丙氧基)-4-(3-三氟甲基苯基)哌啶(I-34)的制 备
N-(2-氯丙氧基)-苯并咪唑的制备
将1-羟基苯并咪唑(0.01mol)溶于10ml NMP中，分批加入50％重 量比的钠氢(0.01mol)的固体石蜡混合物，搅拌反应0.5h。同时，将3- 氯溴丙烷(0.015mol)、溶解于5mlNMP中，加入上述的溶液中，室温 下搅拌反应12h。将反应液倒入50ml水中，乙酸乙酯萃取(3×50mL)， 合并有机相，经30ml水洗涤，加入无水硫酸镁干燥有机相，过滤，蒸干 溶剂，油状物经中性Al2O3层析或制备型HPLC分离纯化，得1-(3-氯丙 氧基)苯并咪唑，收率75.0％。
将1-(3-氯丙氧基)苯并咪唑(0.06mol)溶解于150ml乙腈中，分别加 入4-(3-(6-氟苯并异噁唑基))哌啶(0.05mol)，二异丙基乙基胺(0.2mol)， 以及碘化钾(0.05mol)，室温下混合搅拌10分钟，然后升温回流反应15h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得1-(4-(4-(3-(6-氟苯并异噁唑基))哌啶-1- 基)丁基)-1H-苯并咪唑(I-34)13.6g，收率67.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 404.2。
实施例32
N-(4-(1H-苯并咪唑基-1-基)丁基)-4-(2-呋喃基)哌啶(I-35)的制备
将1H-苯并咪唑(11.8g，0.10mol)溶解于20重量％氢氧化钠水溶 液200ml中，加入4-氯溴丁烷(34.3g，0.20mol)、四丁基溴化铵1.0g， 混合搅拌5分钟，升温至60℃，搅拌反应2小时。冷却至室温，加入 100ml二氯甲烷萃取，分液，水相加入二氯甲烷100ml萃取，合并有 机相，经100ml饱和盐水洗涤，分液，蒸干有机相得油状物。油状物 经中性Al2O3层析分离纯化，得1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑12.5g，收 率60.0％。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(7.51g，0.036mol)溶解于100ml乙腈 中，分别加入4-(2-呋喃基)哌啶(4.6g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，室温搅拌10分钟，然后升温 回流反应20小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得化合物(I-35)6.0g，收 率61.6％。ESI-MS[M+H]+：m/z 324.2。
实施例33
N-(4-(1H-苯并咪唑基-1-基)丁基)-4-(4-吡啶基)哌啶(I-36)的制备
采用实施例32中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(7.51g，0.036mol)溶解于100ml乙腈 中，分别加入4-(4-吡啶基)哌啶(4.9g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，室温搅拌10分钟，然后升温 回流反应20小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得化合物(I-36)6.3g，收 率62.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 335.2。
实施例34
N-(4-(1H-苯并咪唑基-1-基)丁基)-4-(2-嘧啶基)哌啶(I-37)的制备
采用实施例32中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并咪唑(7.51g，0.036mol)溶解于100ml乙腈 中，分别加入4-(2-嘧啶基)哌啶(4.9g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，室温搅拌10分钟，然后升温 回流反应20小时。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化，二氯甲烷/甲醇混合溶剂洗脱，得化合物(I-37)6.1g，收 率60.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 336.2。
实施例35
N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(4-环己基)哌啶(I-38)的制备
采用实施例2中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(7.55g，0.036mol)溶解于100ml乙 腈中，分别加入4-(1-环己基)哌啶(5.1g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，搅拌混合后升温回流反应20h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷洗脱，得化合物(I-38)6.5g，收率63.7％。ESI-MS[M+H]+：m/z 341.3。
实施例36
N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(1-萘基)哌啶(I-39)的制备
采用实施例2中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(7.55g，0.036mol)溶解于100ml乙 腈中，分别加入4-(1-萘基)哌啶(6.4g，0.03mol)，二异丙基乙基胺(15.5g， 0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，搅拌混合后升温回流反应20h。 冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层析分离纯化， 二氯甲烷洗脱，得化合物(I-39)6.9g，收率60.1％。ESI-MS[M+H]+：m/z 385.3。
实施例37
N-(4-(1H-苯并三氮唑-1-基)丁基)-4-(2-喹噁啉基)哌啶(I-40)的制备
采用实施例2中的方法制备1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑。
将1-(4-氯丁基)-1H-苯并三氮唑(7.55g，0.036mol)溶解于100ml乙 腈中，分别加入4-(2-喹噁啉基)哌啶(6.4g，0.03mol)，二异丙基乙基胺 (15.5g，0.12mol)，以及碘化钾(5.0g，0.03mol)，搅拌混合后升温回 流反应20h。冷却至室温，过滤，滤液经浓缩得油状物，经中性Al2O3层 析分离纯化，二氯甲烷洗脱，得化合物(I-40)7.3g，收率62.7％。 ESI-MS[M+H]+：m/z 387.2。
实施例38
化合物(II-1至II-40)对家兔离体血管平滑肌的舒张作用
1.试验动物：
家兔，雌雄兼用，体重2.0～3.0kg，由中国医科大学实验动物中心提 供。
2.药品与试剂：
化合物(II-1至II-40)，即为化合物(I-1至I-40)的盐酸盐，采用 实施例方法制备，可依照实施例10的方法制备它们的盐(盐酸盐)用于 如下试验；
氯化钠(NaCl)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20120413；
氯化钾(KCl)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20111123；
无水硫酸镁(MgSO4)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20101029；
无水氯化钙(CaCl2)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20110314；
碳酸氢钠(NaHCO3)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20120507；
葡萄糖(Glucose)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20120512；
磷酸二氢钾(KH2PO4)：购于天津市大茂化学试剂厂产品，批号： 20110928；
氯化钠注射液(NaCl)：购于沈阳志鹰制药厂，批号：12021001；
盐酸肾上腺素注射液(Epinephrine Hydrochloride Injection)规格： 1mg/1ml，购于远大医药(中国)有限公司，批号120105；
重酒石酸去甲肾上腺素(Norepinephrine Bitartrate Injection)规格 2mg/1ml，远大医药(中国)有限公司，批号120304；
3.实验仪器：
HSS-1(B)型恒温浴槽：成都仪器厂；
RM6240B型多道生理信号采集处理系统：成都仪器厂；
JZJ01型肌肉张力换能器：成都仪器厂；
YPJ01型压力换能器：成都仪器厂；
TG-328A电光分析天平：上海天平仪器厂；
T-500型电子天平：常熟双杰测试仪器厂；
微量移液器：上海荣泰生化工程有限公司；
电热恒温水浴锅：天津市泰斯特仪器有限公司。
4.营养液的配制：
Krebs-Henseleit(K-H)生理溶液：NaCl 6.92(浓度单位)、KCl 0.35、 MgSO40.29、KH2PO40.16、CaCl20.28，NaHCO32.1，Glucose 2.0(g/L)， pH 7.2。
高钾溶液：将K-H液中去除等摩尔数的NaCl后加入KCl配制成含 K+60mmol/L的改良K-H液。
无钙K-H液：将K-H液中的CaCl2除去，加入等摩尔数的KCl，并 加入EDTA-2Na+0.1mmol/L，其他成分不变。
无钙高钾液：将高钾液中的CaCl2除去，加入等摩尔数的KCl，并加 入EDTA-2Na+0.1mmol/L，其他成分不变的。
化合物(II-1至II-40)溶液的配制：称取一定质量化合物(II-1至II-40) 的样品，以蒸馏水为溶剂稀释至系列浓度(10-10-10-2mol/L)，备用。
5.家兔离体血管平滑肌标本的制备
家兔，将动物击晕后迅速剖开胸腔，剥离出降主动脉，将结缔组织及 周围脂肪组织去除后(若进行五羟色胺受体拮抗实验，还应使用光滑的不 锈钢钢棒去除内皮细胞)，切成3-5mm血管环，然后钢丝钩穿过血管环， 一端固定在通气钩上，另一端连于张力换能器上，置于盛有20ml营养液 的浴管中，通过记录仪记录张力变化。浴管内保持温度37±0.5℃，并以每 秒1～2个气泡的速度通入混合气体(95％O2+5％CO2)。标本初始负 荷1.5g，每20min换一次营养液，平衡2小时，待基线稳定后开始实验。
6.具体试验操作及试验结果
6.1化合物(II-1至II-40)对肾上腺素(AD)收缩家兔离体血管平滑 肌的舒张作用
标本张力稳定后，记录一段波形，向浴管内加入盐酸肾上腺素(AD) (10-5mol/L)诱导收缩，当达到最大收缩后，充分冲洗标本，每20min 换一次K-H液，平衡60min，待基线恢复平稳后，再次用同浓度致痉剂 诱导收缩。当后一次收缩最大反应与前一次基本一致时，累积加入配制好 的化合物(II-1至II-40)溶液(1×10-10-1×10-2mol/L)，记录波形。以化 合物(II-1至II-40)的舒张百分数为纵坐标，最大舒张反应为100％，化 合物(II-1至II-40)各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值以平均 值±SEM表示n＝5)。
从图1中可看出，化合物(II-2)对AD收缩的血管标本有舒张作用， 它对AD收缩的血管标本的舒张作用呈现一定的剂量依赖性，化合物 (II-2)舒张AD收缩的家兔主动脉的-logEC50值为7.30±0.05。
表1化合物(II-1至II-40)对AD收缩家兔离体血管平滑肌的舒张作用
化合物 -logEC50 化合物 -logEC50 II-1 6.23±0.04 II-21 5.02±0.04 II-2 7.30±0.05 II-22 5.18±0.03 II-3 5.45±0.04 II-23 5.21±0.05 II-4 5.34±0.03 II-24 5.03±0.02 II-5 5.61±0.05 II-25 5.16±0.03 II-6 5.42±0.04 II-26 6.21±0.04 II-7 5.38±0.03 II-27 6.36±0.03 II-8 5.23±0.05 II-28 4.89±0.02 II-9 5.56±0.04 II-29 4.76±0.03 II-10 6.11±0.07 II-30 5.31±0.04 II-11 5.92±0.05 II-31 4.86±0.03 II-12 5.96±0.04 II-32 4.79±0.02 II-13 5.53±0.07 II-33 5.56±0.05 II-14 5.23±0.06 II-34 5.31±0.06 II-15 4.03±0.05 II-35 4.43±0.05 II-16 4.26±0.04 II-36 4.86±0.04 II-17 4.01±0.03 II-37 4.72±0.03 II-18 4.13±0.05 II-38 4.39±0.05 II-19 4.26±0.06 II-39 4.22±0.06 II-20 5.21±0.05 II-40 4.83±0.05
6.2化合物(II-1至II-40)对去甲肾上腺素(NA)收缩家兔离体血管平 滑肌的舒张作用
标本张力稳定后，记录一段波形，向浴管内加入盐酸肾上腺素(AD) (10-5mol/L)诱导收缩，当达到最大收缩后，充分冲洗标本，每20min 换一次K-H液，平衡60min，待基线恢复平稳后，用重酒石酸去甲肾上 腺素(NA)(10-5mol/L)诱导收缩。当后一次收缩最大反应与前一次基本 一致时，累积加入配制好的化合物(II-1至II-40)溶液(1×10-10-1×10-2mol/L)，记录波形。以化合物(II-1至II-40)的舒张百分数为纵坐标， 最大舒张反应为100％，化合物(II-1至II-40)各浓度负对数为横坐标绘 制量效曲线(数值以平均值±SEM表示n＝5)。
从图2中可看出，化合物(II-2)对NA收缩的血管标本有舒张作用， 它对NA收缩的血管标本的舒张作用呈现一定的剂量依赖性，药物化合物 (II-2)舒张NA收缩的家兔主动脉的-logEC50值为7.51±0.05。
表2化合物(II-1至II-40)对NA收缩家兔离体血管平滑肌的舒张作用
化合物 -logEC50 化合物 -logEC50 II-1 6.17±0.03 II-21 5.02±0.04 II-2 7.51±0.05 II-22 5.11±0.03 II-3 5.26±0.04 II-23 5.10±0.05 II-4 5.04±0.03 II-24 5.11±0.02 II-5 5.73±0.05 II-25 5.27±0.03 II-6 5.22±0.04 II-26 6.32±0.04 II-7 5.35±0.03 II-27 6.45±0.03 II-8 5.31±0.05 II-28 4.67±0.02 II-9 5.73±0.04 II-29 4.55±0.03 II-10 6.07±0.04 II-30 5.21±0.04 II-11 5.81±0.03 II-31 4.77±0.03 II-12 5.73±0.04 II-32 4.53±0.02 II-13 5.31±0.06 II-33 5.36±0.05 II-14 5.09±0.04 II-34 5.15±0.06 II-15 4.31±0.05 II-35 4.23±0.03 II-16 4.04±0.07 II-36 4.66±0.02 II-17 4.19±0.03 II-37 4.52±0.04 II-18 4.43±0.04 II-38 4.44±0.05 II-19 4.06±0.06 II-39 4.34±0.04 II-20 5.11±0.05 II-40 4.53±0.05
6.3化合物(II-1至II-40)对高钾溶液收缩家兔离体血管平滑肌的舒 张作用
标本张力稳定后，记录一段波形，向浴管内加入盐酸肾上腺素(AD) (10-5mol/L)诱导收缩，当达到最大收缩后，充分冲洗标本，每20min 换一次K-H液，平衡60min，待基线恢复平稳后，将浴管内K-H液换成 高钾液诱导收缩。当后一次收缩最大反应与前一次基本一致时，累积加入 配制好的化合物(II-1至II-40)溶液(1×10-10-1×10-2mol/L)，记录波形。 以舒张百分数为纵坐标，最大舒张反应为100％，化合物(II-1至II-40) 各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值以平均值±SEM表示n ＝5)。
从图3中可看出，化合物(II-2)对高钾液收缩的血管标本舒张作用 最强，对高钾液收缩血管的舒张作用呈现一定的剂量依赖性，化合物(II-2) 舒张高钾液收缩的家兔主动脉的-logEC50值为6.21±0.03。
表3化合物(II-1至II-40)对高钾溶液收缩家兔离体血管平滑肌的舒张 作用
化合物 -logEC50 化合物 -logEC50 II-1 4.27±0.04 II-21 3.42±0.04 II-2 5.21±0.03 II-22 3.38±0.03 II-3 4.09±0.04 II-23 3.23±0.05 II-4 4.12±0.03 II-24 3.69±0.02 II-5 4.72±0.05 II-25 3.82±0.03 II-6 4.12±0.04 II-26 5.01±0.04 II-7 4.28±0.03 II-27 5.12±0.03 II-8 4.02±0.05 II-28 3.44±0.02 II-9 4.32±0.04 II-29 3.38±0.03 II-10 4.11±0.03 II-30 4.03±0.04 II-11 3.92±0.02 II-31 3.56±0.03 II-12 3.96±0.03 II-32 3.23±0.02 II-13 3.53±0.02 II-33 4.22±0.05 II-14 3.23±0.04 II-34 4.17±0.06 II-15 3.53±0.03 II-35 3.53±0.03 II-16 3.26±0.04 II-36 3.26±0.04 II-17 3.31±0.03 II-37 3.32±0.02 II-18 3.63±0.04 II-38 3.14±0.05 II-19 3.46±0.03 II-39 3.04±0.03 II-20 3.21±0.05 II-40 3.13±0.04
实施例39
化合物(II-2)对家兔离体血管平滑肌的舒张作用机制研究
1.试验动物：
家兔，雌雄兼用，体重2.0～3.0kg，由中国医科大学实验动物中心提 供。
2.药品与试剂：
化合物(II-2)采用实施例10的方法制备；
氯化钠(NaCl)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20120413；
氯化钾(KCl)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20111123；
无水硫酸镁(MgSO4)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20101029；
无水氯化钙(CaCl2)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20110314；
碳酸氢钠(NaHCO3)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20120507；
葡萄糖(Glucose)：购于天津市大茂化学试剂厂，批号：20120512；
磷酸二氢钾(KH2PO4)：购于天津市大茂化学试剂厂产品，批号： 20110928；
氯化钠注射液(NaCL)：购于沈阳志鹰制药厂，批号：12021001；
盐酸肾上腺素注射液(Epinephrine Hydrochloride Injection)规格： 1mg/1ml，购于远大医药(中国)有限公司，批号120105；
重酒石酸去甲肾上腺素(Norepinephrine Bitartrate Injection)规格 2mg/1ml，远大医药(中国)有限公司，批号120304；
甲磺酸多沙唑嗪(Doxazosin Mesylate)：购于随州佳科医药化工有 限公司，批号：20110305；
苯磺酸氨氯地平片(Amlodipine Besylate Tablets)：购于辉瑞制药有 限公司，规格：5mg/片批号：1205018；盐酸肾上腺素注射液(Epinephrine Hydrochloride Injection)规格：1mg/1ml，购于远大医药(中国)有限 公司，批号120105；
(R)-苯肾上腺素盐酸盐((R)-Phenylephrine Hydrochloride)， 梯希爱(上海)化成工业发展有限公司，批号：GJ01-TESP；
5-羟色胺肌酐硫酸盐一水合物(Serotonin Creatinine Sulfate Monohydrate)(5-HT)，东京化成工业株式会社，批号：AZ01-TBKD；
肝素钠注射液(Heparin sodium)：万邦制药规格：2ml/12500单位， 批号：101115；
乌来糖(Urethane)：中国医药(集团)上海化学试剂公司，批号： C30191228；
乙二胺四乙酸(EDTA)，天津市大茂化学试剂厂产品，批号：20050809。
3.实验仪器
HSS-1(B)型恒温浴槽：成都仪器厂；
RM6240B型多道生理信号采集处理系统：成都仪器厂；
JZJ01型肌肉张力换能器：成都仪器厂；
YPJ01型压力换能器：成都仪器厂；
TG-328A电光分析天平：上海天平仪器厂；
T-500型电子天平：常熟双杰测试仪器厂；
微量移液器：上海荣泰生化工程有限公司；
电热恒温水浴锅：天津市泰斯特仪器有限公司。
4.营养液的配制
Krebs-Henseleit(K-H)生理溶液：NaCl 6.92(浓度单位)、KCl 0.35， MgSO40.29、KH2PO40.16、CaCl20.28、NaHCO32.1、葡萄糖2.0(g/L)， pH 7.2。
高钾溶液：将K-H液中去除等摩尔数的NaCl后加入KCl配制成含 K+60mmol/L的改良K-H液。
无钙K-H液：将K-H液中的CaCl2除去，加入等摩尔数的KCl，并 加入EDTA-2Na+0.1mmol/L，其他成分不变。
无钙高钾液：将高钾液中的CaCl2除去，加入等摩尔数的KCl，并加 入EDTA-2Na+0.1mmol/L，其他成分不变的。
化合物(II-2)溶液的配制：称取一定质量化合物(II-2)的样品，以 蒸馏水为溶剂稀释至系列浓度(10-10-10-4mol/L)，备用。
5.家兔离体血管平滑肌标本的制备
家兔，将动物击晕后迅速剖开胸腔，剥离出降主动脉，将结缔组织及 周围脂肪组织去除后(若进行五羟色胺受体拮抗实验，还应使用光滑的不 锈钢钢棒去除内皮细胞)，切成3-5mm血管环，然后钢丝钩穿过血管环， 一端固定在通气钩上，另一端连于张力换能器上，置于盛有20ml营养液 的浴管中，通过记录仪记录张力变化。浴管内保持温度37±0.5℃，并以每 秒1～2个气泡的速度通入混合气体(95％O2+5％CO2)。标本初始负荷 1.5g，每20min换一次营养液，平衡2小时，待基线稳定后开始实验。
6.实验操作及试验结果
6.1化合物(II-2)对家兔血管平滑肌α受体的拮抗作用
6.1.1化合物(II-2)对苯肾上腺素累积收缩量效曲线的影响
标本张力稳定之后，记录一段波形，向浴管内累积加入(R)-苯肾上 腺素盐酸盐(PE)(10-8-6×10-3mol/L)直至达到最大反应，记录波形。然 后用K-H液反复冲洗标本，平衡1h后，加入化合物(II-2)(10-6mol/L)， 20min后再以同法加入PE。以最大反应为100％，PE收缩百分数为纵坐 标，PE各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值以平均值±SEM表示 n＝5)，加入药物化合物(II-2)(10-6mol/L)后，如图4。
从图4中可见：PE量效曲线明显平行右移，最大反应几乎不变，对 各浓度反应百分数进行统计学t检验后，P值＜0.01，存在显著性差异。化 合物(II-2)拮抗PE收缩家兔主动脉的PA2值为8.62±0.11。
6.1.2阳性对照药甲磺酸多沙唑嗪对苯肾上腺素累积收缩量效曲线的 影响
标本张力稳定之后，记录一段波形，向浴管内累积加入(R)-苯肾上 腺素盐酸盐(PE)(10-8-3×10-3mol/L)直至达到最大反应，记录波形。然后 用K-H液反复冲洗标本，平衡1h后，加入甲磺酸多沙唑嗪(10-6mol/L)， 15min后再以同法加入PE。以最大反应为100％，PE收缩百分数为纵坐 标，PE各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值以平均值±SEM表示 ＊P＜0.05，＊＊P＜0.01，n＝7)，加入阳性对照药甲磺酸多沙唑嗪 (10-7mol/L)后，如图5。
从图5中可见：PE量效曲线明显平行右移，最大反应几乎不变，对 各浓度反应百分数进行统计学t检验后，多数P值＜0.01，存在显著性差 异。药物多沙唑嗪拮抗PE收缩家兔主动脉的PA2值为7.43±0.12。
经统计学t检验，化合物(II-2)与阳性对照药多沙唑嗪对PE的PA2 值之间比较，P＜0.01，两者之间存在非常显著的差异，说明化合物(II-2) 对α受体的拮抗作用强于多沙唑嗪。
6.2化合物(II-2)对家兔血管平滑肌钙通道(Ca2+)的拮抗作用
6.2.1化合物(II-2)对CaCl2收缩家兔血管累积浓度效应曲线的影响
标本张力稳定后，用无钙K-H液将标本冲洗3次，并用无钙K-H液 孵育40min，加入无钙高钾液使标本去极化20min，然后向浴管内累积加 入CaCl2(10-5-10-2mol/L)，直到达到最大反应，记录波形。然后用K-H 液反复冲洗标本，每20min换一次K-H液，平衡60min，待基线恢复平 稳后，再次用无钙K-H液将标本冲洗3次，并用无钙K-H液孵育40min， 加入无钙高钾液使标本去极化20min，同时向浴管中加入化合物(II-2) (10-6mol/L)，孵育20min后再以同法累积加入CaCl2(10-5-10-2mol/L)， 直到达到最大反应，记录波形。以最大反应为100％，CaCl2各浓度时的 收缩百分数为纵坐标，CaCl2各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值 以平均值±SEM表示＊P＜0.05，＊＊P＜0.01，n＝7)，加入化合物(II-2) (10-6mol/L)后的结果如图6所示。
从图6中可见：CaCl2量效曲线明显平行右移，最大反应几乎不变， 对各浓度反应百分数进行统计学检验后，多数P值＜0.01，存在显著性差 异。化合物(II-2)拮抗CaCl2收缩家兔主动脉的PA2值为6.10±0.13。
6.2.2氨氯地平对CaCl2收缩家兔血管累积浓度效应曲线的影响
标本张力稳定后，用无钙K-H液将标本冲洗3次，并用无钙K-H液 孵育40min，加入无钙高钾液使标本去极化20min，然后向浴管内累积加 入CaCl2(10-6-10-2mol/L)，直到达到最大反应，记录波形。然后用K-H 液反复冲洗标本，每20min换一次K-H液，平衡60min，待基线恢复平 稳后，再次用无钙K-H液将标本冲洗3次，并用无钙K-H液孵育40min， 加入无钙高钾液使标本去极化20min，同时向浴管中加入氨氯地平 (10-7mol/L)，孵育15min后再以同法累积加入CaCl2(10-6-10-2mol/L)， 直到达到最大反应，记录波形。以最大反应为100％，CaCl2各浓度时的 收缩百分数为纵坐标，CaCl2各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值 以平均值±SEM表示＊P＜0.05，＊＊P＜0.01，n＝5)，如图7。
从图7中可见：CaCl2量效曲线明显平行右移，最大反应几乎不变， 对各浓度反应百分数进行统计学检验后，多数P值＜0.01，存在显著性差 异。氨氯地平拮抗CaCl2收缩家兔主动脉的PA2值为6.99±0.05。
6.3化合物(II-2)对家兔血管平滑肌5-羟色胺(5-HT)受体激动剂 的拮抗作用
标本张力稳定之后，记录一段波形，向浴管内累积加入5-HT (10-8-10-3mol/L)直至达到最大反应，记录波形。然后用K-H液反复冲 洗标本，平衡1.5h后，加入化合物(II-2)(10-7mol/L)，20min后再以 同法加入5-HT。以最大反应为100％，5-HT收缩百分数为纵坐标，5-HT 各浓度负对数为横坐标绘制量效曲线(数值以平均值±SEM表示 ＊P＜0.05，＊＊P＜0.01，n＝7)，加入药物化合物(II-2)(10-7mol/L) 后，如图8。
从图8中可见：5-HT量效曲线明显平行右移，最大反应几乎不变， 对各浓度反应百分数进行统计学检验后，P值＜0.01，存在显著性差异。 化合物(II-2)拮抗5-HT收缩家兔主动脉的PA2值9.06±0.07。
实施例40
化合物(II-2)的急性毒性实验
取昆明种小鼠10只(中国医科大学实验动物中心提供)，雌雄各半， 体重18～22g，进行化合物(II-2)简化几率单位法急性毒性实验，灌胃 给药LD50为221.72mg/kg(95％可信限区间为204.11-239.33mg/kg)，腹腔 注射给药LD50为108.32mg/kg(95％可信限区间为102.41-114.23mg/kg)。
实施例41
化合物(II-2)的小鼠的骨髓微核实验
取昆明种小鼠10只(中国医科大学实验动物中心提供)，雌雄各半， 体重18～22g，按74mg/kg/day体重灌胃给药化合物(II-2)。持续给药4 天，第5天进行小鼠骨髓微核试验。
阳性对照组，给予环磷酰胺60mg/kg/day；阴性对照组，给予生理盐 水0.1ml/10g/day。持续给药4天，第5天进行小鼠骨髓微核试验。
将小鼠断颈处死，迅速剥离出股骨与胸骨，去掉血污和肌肉，减去骨 骺，胸骨用止血钳将骨髓挤于预先滴有小牛血清的清洁载玻片上或用小牛 血清直接将股骨中的骨髓冲至清洁的载玻片上，混合均匀后推片；随后将 推好晾干的骨髓片放进盛有甲醇的染色缸，固定15min，取出晾干，待骨 髓片晾干后，用新鲜配制的Giemsa应用液(Giemsa储备液一份加pH 6.8 的磷酸盐缓冲液9份)，染色10min，细流水冲掉玻片染色液，晾干后在 显微镜下观察。
实验结果表明：化合物(II-2)组1000个嗜多染红细胞中含有微核的 嗜多染红细胞占2.5±0.373‰，空白组1000个嗜多染红细胞中含有微核的 嗜多染红细胞占1‰，环磷酰胺组1000个嗜多染红细胞中含有微核的嗜 多染红细胞占12‰。这表明化合物(II-2)的骨髓微核试验结果为阴性。
实施例42
化合物(II-2)对SD大鼠血压的影响
将5只SD大鼠(中国医科大学实验动物中心提供)经乌拉坦 (1.25mg/kg)麻醉，大鼠生命体征平稳后，采用颈总动脉插管方法测定 血压。待血压平稳后，将化合物(II-2)按1.5mg/kg体重灌胃给药，观察 并记录给药后血压随时间变化情况，实验结果见表4、5和6数据。
表4化合物(II-2)对乌拉坦麻醉大鼠舒张压(DBP，mmHg)的影响(n＝5)
注：＊表示P值＜0.05，＊＊表示P值＜0.01
表5化合物(II-2)对乌拉坦麻醉大鼠的收缩压(SBP，mmHg)的影响(n＝5)
注：＊表示P值＜0.05，＊＊表示P值＜0.01
表6化合物(II-2)对乌拉坦麻醉大鼠的平均动脉压(MAP，mmHg)的影 响(n＝5)
注：＊表示P值＜0.05，＊＊表示P值＜0.01
实验结果表明：化合物(II-2)对乌拉坦(1.25mg/kg)麻醉SD大鼠 具有明显降压作用，给药6小时后可恢复至给药前水平。
综合上述结果表明：离体动物试验中，化合物II-2具有显著的血管平 滑肌舒张作用。化合物(II-2)对肾上腺素α受体的拮抗作用强于多沙唑 嗪，其拮抗PE的PA2值为8.62±0.11。化合物(II-2)拮抗CaCl2的PA2值为6.10±0.13。化合物(II-2)对5-HT2A受体具有较强的拮抗作用，其 拮抗5-HT的PA2值为9.06±0.07。可见，化合物(II-2)可实现显著的α1受体拮抗、Ca2+通道阻断、5-HT2A受体拮抗三重作用，由此可以实现比 单靶点药物单一给药或联合给药，更高的药效或更低的副作用。大鼠体内 整体试验中，化合物(II-2)表现出明显的降压作用，其口服吸收良好， 毒性小，治疗指数大，骨髓微核实验呈阴性。