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1、10申请公布号CN104106450A43申请公布日20141022CN104106450A21申请号201410252939722申请日20140610A01G31/0020060171申请人湖北省农业科学院果树茶叶研究所地址430209湖北省武汉市江夏区金水闸湖北省农业科学院果树茶叶研究所72发明人胡红菊杨晓平陈启亮田瑞张靖国范净王春燕54发明名称一种离体培养梨树枝条获得花粉的方法57摘要本发明提供一种离体培养梨枝条获得花粉的方法，包括步骤采集梨树花枝在12月下旬梨树休眠后，采集带有饱满花芽的梨树枝条，并使枝条基部剪口对齐，控制枝条长度为40CM；枝条冷藏枝条基部用厚度为塑料薄膜包扎紧密后。
2、放入冰箱中4冷藏，冷藏时间为60天；枝条培养在梨主栽品种开花期前1315天，将冷藏的枝条插入装有培养液的水桶中，水桶底部放入10CM厚的河沙，培养液的深度为淹没河沙10CM；温度控制为26；花粉获取培养15天后，在梨树大蕾期，采集气球状的梨花苞制备花粉。使用上述方法可以获得优质的梨花粉，且梨花粉的发芽率在65以上，可满足梨科研、生产中人工授粉时花粉活力的需要。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104106450ACN104106450A1/1页21一种离体培养梨枝条获得花粉的方法，包括步骤A、采集梨树。
3、花枝在12月下旬梨树休眠后，采集带有饱满花芽的梨树枝条，并使枝条基部剪口对齐，控制枝条长度为40CM；B、枝条冷藏枝条基部用厚度为塑料薄膜包扎紧密后放入冰箱中4冷藏，冷藏时间为60天；C、枝条培养在梨主栽品种开花期前1315天，将冷藏的枝条插入装有培养液的水桶中，水桶底部放入10CM厚的河沙，培养液的深度为淹没河沙10CM；然后将水桶放入空调室中，温度控制为26；D、花粉获取培养15天后，在梨树大蕾期，采集气球状的梨花苞制备花粉。2如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的培养液5天、10天时换一次，同时换培养液时将枝条基部用剪刀剪掉1CM。3如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的培养。
4、液的浓度配方为KNO325G/L，NH4NO32G/L，MGSO47H2O05G/L，CACL208G/L，H3BO3002G/L，MNSO44H2O005G/L。4一种用于如权利要求1所述的离体培养梨枝条的培养液，其特征在于，所述的培养液的浓度配方为KNO325G/L，NH4NO32G/L，MGSO47H2O05G/L，CACL208G/L，H3BO3002G/L，MNSO44H2O005G/L。权利要求书CN104106450A1/3页3一种离体培养梨树枝条获得花粉的方法技术领域0001发明属于果树技术领域，更具体涉及一种离体培养梨树枝条获得花粉的方法，经该方法处理可以有效解决梨科研、育种。
5、及生产中优良梨品种花期不遇时互为授粉品种的问题。该方法适用于从事梨科研、育种及生产的科研单位、公司和个人。背景技术0002梨属于蔷薇科ROSACEAE苹果亚科MALOIDEAE梨属PYRUS植物，为乔本落叶果树，是我国三大栽培果树之一，在世界上亦占有举足轻重的地位。据联合国粮农组织（FAO）统计，2011年我国梨种植面积1132千公顷，产量15955万吨，居世界首位。梨果生产一直是我国农民增收致富的重要支柱产业，也是我国出口创汇的主要农产品之一。0003花粉直感是父本花粉对种子和果实的直感效应。不同品种表现出的父本效应不同，如果实的形状、成熟期、大小、颜色、风味及内在成分含量，种子的形状、大小。
6、、颜色等。国内外梨研究学者在研究梨授粉品种选配中发现梨是花粉直感现象较为明显的果树，授粉品种不仅影响坐果率，而且还影响梨果实的大小、形状、果面性状以及内在品质。因此在梨科研育种和生产过程中选用品质优良梨品种做为授粉品种直接影响到梨生产品种的座果率、产量和品质。0004目前推广的优良砂梨品种如翠冠、丰水等品种，肉质细嫩且脆，汁多味甜，果实品质优异且花粉量、花粉活力高适宜做主栽和授粉品种，但是由于其开花期较晚，无法在给开花期早、品质优良的砂梨品种如鄂梨2号、玉水等互为授粉品种。目前解决翠冠、丰水和鄂梨2号、玉水等花期不遇的主要方法是引入花期介于两者之间的授粉品种如湘南和黄花等品种进行混合栽植。但是。
7、由于花粉直感现象的存在，湘南和黄花梨等品种的引入造成主栽品种的梨果品质下降，而且湘南和黄花梨的销售价格远远低于翠冠、丰水、鄂梨2号和玉水等优良品种的销售价格，影响了梨农的经济效益。0005针对本问题，国内外梨树专家进行了花粉贮藏试验的相关研究，2006年汪玲，张绍铃研究了贮藏温度和湿度对丰水梨花粉生活力的影响，丰水梨花粉在73，196下能较长时期保存生活力。一般梨花粉发芽率55以上属于优质花粉，超低温贮藏540天后的花粉萌发率都在60以上，能够满足生产上授粉的要求。但是通过此方法保存花粉，成本高且对保存人员专业技术要求较高，目前此技术处于科学研究阶段，一般农户和公司很难掌握和使用。多年来，我们。
8、一直围绕本问题进行研究，对怎样提早获得梨花粉的课题开展了大量科学研究与试验，总结发明出提早获得梨花粉的方法。发明内容0006本发明的目的是针对上述问题，提供一种在室内离体培养梨树花枝来获得优良梨品种的花粉方法，能够满足优良品种间花期不遇时相互进行人工授粉的要求，该方法易行，操作简便，使用该方法获得梨花粉。0007本发明的技术方案为说明书CN104106450A2/3页4一种离体培养梨枝条获得花粉的方法，包括步骤A、采集梨树花枝在12月下旬梨树休眠后，采集带有饱满花芽的梨树枝条，并使枝条基部剪口对齐，控制枝条长度为40CM；B、枝条冷藏枝条基部用厚度为塑料薄膜包扎紧密后放入冰箱中4冷藏，冷藏时间。
9、为60天；C、枝条培养在梨主栽品种开花期前1315天，将冷藏的枝条插入装有培养液的水桶中，水桶底部放入10CM厚的河沙，培养液的深度为淹没河沙10CM；然后将水桶放入空调室中，温度控制为26；D、花粉获取其中枝条在培养15天后，在梨树大蕾期，采集气球状的梨花苞制备花粉。0008其中培养液5天、10天时换一次，同时换培养液时将枝条基部用剪刀剪掉1CM。0009其中培养液的浓度配方为KNO325G/L，NH4NO32G/L，MGSO47H2O05G/L，CACL208G/L，H3BO3002G/L，MNSO44H2O005G/L。0010一种用于上述的离体培养梨枝条的培养液，培养液的浓度配方为KN。
10、O325G/L，NH4NO32G/L，MGSO47H2O05G/L，CACL208G/L，H3BO3002G/L，MNSO44H2O005G/L。0011使用上述方法可以获得优质的梨花粉，且梨花粉的发芽率在65以上，可满足梨科研、生产中人工授粉时花粉活力的需要。生产中，一般梨花粉发芽率55以上属于优质花粉，花粉的发芽率在20以上就能够满足丰产的需要。00122011、2012和2013年连续三年采用本方法与自然授粉方法翠冠梨与鄂梨2号梨互为授粉品种坐果率比较。0013表1采用本方法与自然授粉方法翠冠梨与鄂梨2号梨互为授粉品种坐果率比较从表1可以看出，采用本方法可以有效促进翠冠梨和鄂梨2号梨品种。
11、的坐果，连续3年保持坐果率在99以上；显著高于自然授粉情况的坐果率，能够满足优良品种间花期不遇时相互进行人工授粉的要求，减少梨农损失，增加梨农的经济效益。具体实施方式00152013年一种离体培养获得梨花粉的方法，其步骤是（1）采集梨树枝条在12月25日梨树休眠后，采集带有饱满花芽的翠冠梨和鄂梨2号梨树枝条，并使枝条说明书CN104106450A3/3页5基部剪口对齐，控制枝条长度为40CM；（2）枝条冷藏枝条基部用厚度为0027MM塑料薄膜包扎紧密后放入冰箱中4冷藏，冷藏时间为60天，以便打破梨树休眠；（3）枝条培养在鄂梨2号开花期前15天即2月26日，将冷藏的翠冠枝条插入装有培养液的水桶中。
12、，水桶底部放入10CM厚的河沙，培养液的深度为淹没河沙10CM，培养液的配方为KNO325G/L、NH4NO32G/L、MGSO47H2O05G/L、CACL208G/L、H3BO3002G/L、MNSO44H2O005G/L。然后将水桶放入空调室中，温度控制为26。培养过程中，分别在培养5天、10天时换培养液一次，换培养液时将枝条基部用剪刀剪掉1CM；在翠冠梨开花期前1315天（大约在3月8日），将冷藏的鄂梨2号梨枝条按照上述方法进行培养；（4）花粉获得培养15天后，在梨树大蕾期，采集气球状的梨花苞制备花粉，就可以利用“一种快速制作梨花粉的方法”专利号为ZL2013101807297制作花粉的方法进行制作花粉；（5）授粉利用获得翠冠梨花粉对鄂梨2号梨进行人工授粉，利用获得鄂梨2号梨的花粉对翠冠梨进行人工授粉，授粉后座果率调查结果见表1。0016本发明的座果率调查结果是梨树的花序座果率。0017本方法是在室内离体培养梨树花枝来获得优良梨品种的花粉。采用本方法能够提早获得开花期晚的优良梨品种的花粉，或者推迟获得开花期晚的优良品种的花粉，能够满足优良品种间花期不遇时相互进行人工授粉的要求，解决科研、生产中优良梨品种花期不遇时互为授粉品种的问题，效果显著。说明书CN104106450A。