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1、(10)申请公布号 CN 103344717 A (43)申请公布日 2013.10.09 CN 103344717 A *CN103344717A* (21)申请号 201310256658.4 (22)申请日 2013.06.25 G01N 30/02(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (71)申请人 广州中医药大学 地址 510006 广东省广州市大学城广州中医 药大学药科楼 B1 区五楼 (72)发明人 陈蔚文 严萍 张蕾 林文华 张敏 梁小银 李璐 詹若挺 (74)专利代理机构 广州新诺专利商标事务所有 限公司 44100 代理人 曹爱红 (54) 发明名称 。
2、一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法 及其标准指纹图谱 (57) 摘要 本发明提供了一种白及 HPLC 指纹图谱的建 立方法， 以及由此得到的白及标准指纹图谱。本 发明的方案是 ：（1） 供试品溶液的制备，（2） HPLC 色谱分析。白及 HPLC 标准指纹图谱共有色谱峰 13 个， 其保留时间分别为 2.024min、 5.928min、 10.765min、 16.133min、 17.279min、 20.999min、 23.232min、 24.678min、 25.924min、 28.287min、 30.366min、 32.529min、 34.291min。 本发明的方法。
3、 供试品制作简便， 色谱条件容易实现， 方法的稳定 性和重现性好， 能有效控制白及质量， 为白及的质 量控制提供参考。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 9 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书8页 附图9页 (10)申请公布号 CN 103344717 A CN 103344717 A *CN103344717A* 1/1 页 2 1. 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法， 其特征在于， 包括如下步骤 ： （1） 供试品溶液的制备 ： 称定白及粉末， 过四号 60 目筛， 得到白及粉末 1.0g， 置具塞 。
4、锥形瓶中， 加入甲醇 20mL， 称定重量， 静置 0min， 超声提取 30min， 超声功率为 280W， 频率为 40kHz， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补足失去的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 用 0.45m 微孔 滤膜过滤， 取滤液进行色谱测定 ； （2） 高效液相色谱分析条件 ： 色谱柱 ： 大连依利特公司 Hypersil ODS2柱 （4.6mm250mm， 5m） ； 柱温 ： 40 ； 检测波长 ： 277nm ； 流动相 ： 乙腈 - 水， 梯度洗脱 ； 流速 ： 1mL/min ； 梯度洗脱程序如下 ： 2. 根据权利要求 1 所述的方法得到的白及标准指纹图谱， 。
5、其特征在于， 所述标准指 纹图谱共有色谱峰 13 个， 其保留时间分别为 2.024min、 5.928min、 10.765min、 16.133min、 17.279min、 20.999min、 23.232min、 24.678min、 25.924min、 28.287min、 30.366min、 32.529min、 34.291min。 权 利 要 求 书 。 CN 103344717 A 2 1/8 页 3 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹 图谱 技术领域 0001 本发明涉及一种中药材指纹图谱的建立方法， 特别是白及高效液相色谱指纹图谱 的建立方法， 以及。
6、由此方法所得到的白及标准指纹图谱。属于药物分析技术领域。 背景技术 0002 白及 （Bletilla striata(Thunb.)Reichb.F.） 为兰科植物， 块茎干燥， 性微寒， 味 苦、 甘、 涩， 归肺、 胃、 肝经 ； 有收敛止血， 消肿生肌的功效， 用于咯血、 吐血、 外伤出血、 疮疡 肿毒、 皮肤皲裂。 中国药典 2010 年版对白及饮片的质量控制只限于原植物品种、 药材性 状和简单的理化鉴别， 缺乏一套行之有效的内在质量控制方法。虽然陆续有文献对白及中 化学成分进行含量测定， 包括肉桂酸、 2,7- 二羟基 -4- 甲氧基 -9,10- 二氢菲、 2,4- 二甲氧 基 。
7、-3,7- 二羟基菲、 总酚、 总多糖， 但是对于白及这样有效成分类型多、 组分复杂的中药材， 仅测定某类成分的含量， 难以客观、 有效地评价或控制药材的质量。 0003 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后， 采用一定的分析手段， 得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的， 可量化的鉴 定手段， 它是建立在中药化学成分系统研究的基础上， 主要用于评价中药材以及中药制剂 半成品质量的真实性、 优良性和稳定性。色谱指纹图谱技术作为一种多组分复杂样品的有 效质量控制方法， 能够反映出待测样品的整体性、 特征性， 目前已被广泛用于中草药及其各 种制剂的质量控制。。
8、 目前， 中药指纹图谱技术已涉及众多方法， 由于高效液相色谱 （HPLC） 具 有分离效能高、 选择性高、 检测灵敏度高、 分析速度快、 应用范围广等特点， 且中药成分绝大 多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测， 因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术 的首选方法。但目前还未见有利用高效液相色谱 （HPLC） 方法对白及指纹图谱进行测试和 分析的报道。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法， 以及由此方法 所得到的白及标准指纹图谱。该方法及图谱提供了一种能有效控制白及质量的方法， 为白 及的质量控制提供参考。 0005 为了实现上述目的， 本发明采取的。
9、技术方案是 ： 0006 （1） 供试品溶液的制备 ： 精密称定白及粉末， 过四号 60 目筛， 得到白及粉末 1.0g， 置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇 20mL， 称定重量， 静置 0min， 超声提取 30min， 超声的功率为 280W， 频率为 40kHz， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补足失去的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 取滤液进行色谱测定。 0007 （2） 高效液相 HPLC 色谱分析条件 ： 0008 色谱柱 ： 大连依利特公司 Hypersil ODS2柱 （4.6mm250mm， 5m） ； 0009 柱温 ： 40 ； 说 明 书。
10、 CN 103344717 A 3 2/8 页 4 0010 检测波长 ： 277nm ； 0011 流动相 ： 乙腈 - 水， 梯度洗脱 ； 0012 流速 ： 1mL/min ； 0013 梯度洗脱程序 ： 时间梯度为 0014 0015 0016 白及 HPLC 指纹图谱的建立方法所得的标准指纹图谱共有色谱峰 13 个， 其保留时 间分别为 2.024min、 5.928min、 10.765min、 16.133min、 17.279min、 20.999min、 23.232min、 24.678min、 25.924min、 28.287min、 30.366min、 32.529。
11、min、 34.291min。 0017 与现有技术相比， 本发明提供的白及 HPLC 指纹图谱的建立方法及其标准指纹图 谱可作为一种能有效控制白及质量的方法， 并为白及的质量控制提供参考。本发明方法供 试品制作简便， 色谱条件容易实现， 方法的稳定性和重现性好。 附图说明 0018 图 1 为不同溶剂提取白及主要成分色谱图比较 ； 0019 图 2 为不同比例溶剂提取白及主要成分色谱图比较 ； 0020 图 3 为加热回流与超声波提取白及主要成分色谱图比较 ； 0021 图 4 为不同超声时间提取白及主要成分色谱图比较 ； 0022 图 5 为不同静置时间对白及主要成分提取效率的影响图 ； 。
12、0023 图 6 为超声提取次数对提取白及主要成分影响色谱图比较 ； 0024 图 7 为不同超声功率对提取白及主要成分影响色谱图比较 ； 0025 图 8 为不同流动相洗脱比较图 ； 0026 图 9 为选用的梯度洗脱程序图谱 ； 0027 图 10 为 PAD 检测器全波长扫描图 ； 0028 图 11 为不同流速色谱图比较 ； 0029 图 12 为不同柱温比较图 ； 0030 图 13 为空白溶剂 （甲醇） 图谱 ； 0031 图 14 为供试品仪器精密度色谱图 ； 0032 图 15 为供试品重复性色谱图 ； 0033 图 16 为供试品稳定性色谱图， 其中， S1 代表 0h、 S。
13、2 代表 6h、 S3 代表 12h、 S4 代表 24h、 S5 代表 32h、 S6 代表 48h ； 0034 图 17 为 白 及 饮 片 主 要 成 分 指 纹 图 谱， 其 中， S1-S12 分 别 为 白 及 饮 片 20090101-20120302， R 为白及主要成分指纹图谱的共有模式 ； 0035 图 18 为白及饮片主要成分指纹图谱共有模式图谱。 具体实施方式 说 明 书 。 CN 103344717 A 4 3/8 页 5 0036 为使本发明更加容易理解， 下面结合具体实施例， 进一步阐述本发明。应理解， 这 些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围， 下。
14、列实施例中未提及的具体实验 方法， 通常按照常规实验方法进行。 0037 本发明所用实验材料为经广州中医药大学中药鉴定学教研室鉴定为兰科植物白 及 Bletilla striata（Thunb.） Reichb.f. 的块茎。 0038 本发明所用仪器包括 ： 高效液相色谱仪 ： Waters e2695 系列 （型号 ： Waters e2695， 厂家 ： 美国 Waters 公司） ， 包括 PDA 二极管阵列检测器 （型号 ： Waters2998， 厂家 ： 美国 Waters 公司） 和 Empower 工作站 （美国 Waters 公司） ； 色谱柱 ： 大连依利特 Hypers。
15、il ODS2 色谱柱 （4.6mm250mm， 5m)， 天平 ： 千分之一天平 （上海恒平 JA2003） ， 万分之一天平 （Sartorius BS224S） ， 十万分之一天平 （Precisa XR205SM DR） ； 超声波发生器 ：（昆山超声 KQ-700DE40KHz280W） ； 超纯水系统 ： 美国 Millipore( 密理博 ) 公司。 0039 本发明所用试剂与试药包括 ： 甲醇、 乙醇、 磷酸、 醋酸等均为国产分析纯 ； HPLC 用甲醇、 乙腈均为色谱纯 （德国 Merck 公司， Darmstadt， Gemany） ； 水为超纯水 （电阻率 18.2m.c。
16、m） 。 0040 实施例 1 ： 供试品溶液的制备 0041 （1） 提取溶剂的选择 0042 经文献检索， 指纹图谱的研究常用溶剂为乙醇、 甲醇。 因此分别采用甲醇和乙醇作 为提取溶剂对白及饮片粉末进行提取， 比较两种溶剂对白及中主要成分的提取效率。 0043 样品处理 ： 精密称定 2 份白及粉末 （批号 ： 20110702） （过四号筛 60 目） 各 1.0g， 分 别精密加入 20mL 甲醇或乙醇， 称定重量， 超声提取 30min （280W， 40kHz） ， 放冷后用溶剂补足 重量， 滤过， 弃去初滤液， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 作为供试品溶液。 004。
17、4 通过此两种溶剂提取比较， 乙醇提取物色谱图主要成分色谱峰信息小于甲醇提取 物， 而且相应值较低， 因此采用甲醇作提取溶剂， 以期得到较好试验结果。甲醇和乙醇不同 溶剂提取白及主要成分色谱图比较结果见图 1。 0045 （2） 提取溶剂浓度的选择 0046 考察甲醇和水不同配比 （体积比） 提取白及的提取效率， 比较 50%、 60%、 70%、 80%、 90% 和 100% 甲醇提取结果。 0047 样品处理 ： 精密称定 6 份白及粉末 （过四号筛） 各约 1.0g， 批号 ： 20110702， 分别精 密加入 20mL 不同浓度的甲醇 ： 60%、 70%、 80%、 90%、 1。
18、00%， 称定重量， 超声提取 30min（功率 280W， 频率 40kHz） ， 放冷后用相应溶剂补足重量， 滤过， 弃去初滤液， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 作为供品溶液。 0048 通过六种浓度甲醇提取试验比较， 各种浓度甲醇所提取的样品图谱中色谱峰的信 息量接近， 但 100% 甲醇提取样品中干扰峰相对较少， 故采用 100% 甲醇作提取溶剂， 以期得 到较好试验结果。不同比例溶剂提取白及主要成分色谱图比较见图 2。 0049 （3） 提取方法比较 0050 精密称定 2 份白及粉末 （过四号筛） 各约 1.0g， 批号 ： 20110702， 精密加入 20mL 甲。
19、 醇， 称定重量， 其中一份置电热套中加热保持微沸回流提取 30min， 另一份超声提取 30min （功率 280W， 频率 40kHz） ， 放冷后用甲醇补足重量， 滤过， 弃去初滤液， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 作为供品溶液。 说 明 书 CN 103344717 A 5 4/8 页 6 0051 比较两种不同方法提取所得白及供试液的 HPLC 色谱图， 回流提取所得样品色谱 图中色谱峰面积稍大于超声提取样品， 但鉴于超声提取操作易于进行， 实验选择超声提取 作为白及的提取方法。加热回流与超声波提取白及主要成分色谱图比较见图 3。 0052 （4） 提取时间的考察 00。
20、53 考察提取时间对白及提取效率的影响， 比较提取 15min、 30min、 45min 提取液的色 谱图。 0054 样品处理 ： 精密称定 3 份白及粉末 （过四号筛） 各约 1.0g， 批号 ： 20090101， 精密加 入 50mL 甲醇， 称定重量， 分别超声提取 30min、 45min 和 60min（功率 280W， 频率 40kHz） ， 放 冷后用甲醇补足重量， 滤过， 弃去初滤液， 精密移取续滤液 25mL， 置蒸发皿中蒸干， 残渣用甲 醇溶解并定容至 5mL， 摇匀， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 作为供品溶液。 0055 比较三份提取样品的色谱图， 超声提取 1。
21、5min、 30min 和 45min 样品色谱图中主要 色谱峰面积相近， 超声 30min 的主要色谱峰面积及峰形优于 15min， 因此选择提取时间为 30min。不同超声时间提取白及主要成分色谱图比较见图 4。 0056 （5） 静置时间的考察 0057 考察加入溶剂后样品的静置时间对白及中成分提取效率的影响。 0058 精密称取 3 份白及粉末 （过四号筛） 各约 1.0g， 批号 ： 20110702， 精密加入 20mL 甲 醇， 称定重量， 分别静置 0min、 30min 和静置过夜， 超声提取 30min （功率 280W， 频率 40kHz） ， 放冷后用甲醇补足重量， 滤。
22、过， 弃去初滤液， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 作为供品 溶液。 0059 比较静置不同时间后提取所得供试液的 HPLC 色谱图， 静置 0min、 静置 30min 和静 置过夜样品色谱图中主要色谱峰面积相近， 因此选择静置 0min 后超声提取。不同静置时间 对白及主要成分提取效率的影响见图 5。 0060 （6） 提取次数的考察 0061 考察提取次数对白及主要成分提取的影响。参照本文前述方法提取一次提取液， 将过滤残渣进行二次重提得到二次提取液。比较一次和二次提取液的色谱图， 主要成分的 一次提取效率远远大于二次提取， 故而二次提取可忽略。试验选取只进行一次甲醇超声提 。
23、取的方法。超声提取次数对提取白及主要成分影响色谱图比较见图 6。 0062 （7） 不同超声功率的比较 0063 精密称取 3 份白及粉末 （过四号筛） 各约 1.0g， 精密加入 20mL 甲醇， 称定重量， 分 别以 280W、 420W、 560W 的功率超声提取 30min， 放冷后用甲醇补足重量， 滤过， 弃去初滤液， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 作为供品溶液。 0064 比较3份提取液的HPLC色谱图， 280W、 420W和560W提取样品图谱中主要色谱峰面 积相近， 因此最终选择 280W 作为样品超声提取的功率。不同超声功率对提取白及主要成分 影响色谱图比较见。
24、图 7。 0065 （8） 最终提取方案 0066 取本品粉末 （过四号筛） 1.0g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入甲醇 20mL， 称 定重量， 静置 0min， 超声提取 30min（功率 280W， 频率 40kHz） ， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补 足失去的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过滤， 即得。 0067 实施例 2 ： 色谱分析条件的确定 说 明 书 CN 103344717 A 6 5/8 页 7 0068 （1） 流动相的选择 0069 白及所含成分复杂， 且极性范围跨度比较大， 等度洗脱很难分离， 故采用梯度洗脱 方式。比较甲。
25、醇 - 水， 乙腈 - 水， 乙腈 -0.1% 磷酸水， 乙腈 -0.1% 醋酸水系统的洗脱效果。 0070 从实验过程中所优化的洗脱程序中选择分离效果较好的洗脱程序， 分别用甲 醇 - 水， 乙腈 -0.1% 磷酸水， 乙腈 - 水， 乙腈 -0.1% 醋酸水作为流动相， 对同一份样品进行测 定， 比较它们的图谱， 结果采用乙腈 - 水系统所测定的图谱基线较平稳， 主要色谱峰信息较 多， 因此最终选择乙腈 - 水作为流动相， 表 1 为洗脱程序， 图 8 为不同流动相洗脱比较图。 0071 表 1 洗脱程序 0072 0073 （2） 流动相梯度 0074 在实验过程中采用了多个不同的洗脱梯。
26、度对同一份白及提取样品进行测定， 通过 比较不同洗脱程序所测定的样品色谱图， 从中优选色谱信息较丰富， 主要色谱峰分离度高， 基线较平稳且分析时间较为合理的梯度3洗脱程序作为最终的色谱分析条件， 表2为梯度1 的洗脱程序， 表 3 为梯度 2 的洗脱程序， 表 4 为梯度 3 的洗脱程序， 图 9 为选用的梯度洗脱 程序图谱。 0075 表 2 0076 0077 表 3 0078 0079 表 4 0080 0081 （3） 检测波长的选择 0082 通过对样品全波长检测发现， 白及甲醇提取液主要的成分最大吸收波长为 276.9nm， 所以确定波长 277nm 为白及图谱的检测波长， 见图 。
27、10， 图 10 为 PAD 检测器全波长 扫描图。 0083 （4） 不同流速考察 0084 采用上述色谱条件， 柱温 25， 考察不同流速条件下 （0.8mL/min、 1.0mL/min、 说 明 书 CN 103344717 A 7 6/8 页 8 1.2mL/min） 同一份样品的色谱图， 结果各主要成分的色谱峰分离度和峰面积差异不大， 其 中以流速 1.0mL/min 的图谱峰形较好， 因此选用流速 1.0mL/min。图 11 为不同流速色谱图 比较图。 0085 （5） 柱温的选择 0086 考察不同柱温 （20、 25、 30、 35、 40） 对色谱峰的影响， 结果柱温 4。
28、0时， 各主要成分的色谱峰分离度、 峰面积和理论塔板数较好， 综合考虑柱温采用 40。图 12 为 不同柱温比较图。 0087 （6） 最终色谱条件 0088 色谱柱 ： 大连依利特公司 Hypersil ODS2柱 （4.6mm250mm， 5m) ； 0089 柱温 ： 40 ； 0090 检测波长 ： 277nm ； 0091 流动相 ： 乙腈 - 水， 梯度洗脱 ； 0092 流速 ： 1mL/min ； 0093 梯度洗脱程序如表 5 所示 ： 0094 表 5 0095 0096 实施例 3 ： 白及饮片主要成分指纹图谱 0097 参照 中药注射剂指纹图谱研究的技术指南 （试行） 。
29、， 利用中国药典委员会推荐的 “中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版” 软件， 通过对所得指纹图谱的进行相似度比较 （以 中位数建立参照指纹图谱） ， 并进行方法学考察。 0098 根据实施例 1 和 2， 确定白及 HPLC 指纹图谱按如下方法建立，（1） 供试品溶液的制 备 ： 精密称定白及粉末， 过四号 60 目筛， 得到白及粉末 1.0g， 置具塞锥形瓶中， 精密加入甲 醇 20mL， 称定重量， 静置 0min， 超声提取 30min， 超声的功率为 280W， 频率为 40kHz， 放冷， 再 称定重量， 用甲醇补足失去的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 用 0.45m 微孔滤膜过。
30、滤， 取滤 液进行色谱测定。 0099 （2） 高效液相 HPLC 色谱分析条件 ： 0100 色谱柱 ： 大连依利特公司 Hypersil ODS2柱 （4.6mm250mm， 5m) ； 0101 柱温 ： 40 ； 0102 检测波长 ： 277nm ； 0103 流动相 ： 乙腈 - 水， 梯度洗脱 ； 0104 流速 ： 1mL/min ； 0105 梯度洗脱程序 ： 时间梯度为 0106 说 明 书 CN 103344717 A 8 7/8 页 9 0107 按上述方法进行专属性考察、 仪器精密度实验、 重复性实验和稳定性实验。 0108 （1） 专属性考察 0109 考察此方法建。
31、立的白及指纹图谱是否能够表达该品种的特征， 即唯一性。考察空 白溶剂 （甲醇） 图谱， 图 13 为空白溶剂 （甲醇） 图谱， 甲醇阴性样品在相应保留时间处无色谱 峰， 无干扰， 符合要求。 0110 （2） 仪器精密度试验 0111 取同一批次供试品溶液 （样品号 ： 20110702） ， 连续进样 6 次， 记录指纹图谱。用 “中药指纹图谱相似度计算软件” 计算， 各图谱的相似系数为 0.994， 0.994， 0.999， 0.992， 0.989， 0.987， 0.969。图 14 为供试品仪器精密度色谱图。 0112 （3） 重复性实验 0113 取同一批次样品 ( 样品号 ： 。
32、20090101)， 按供试品溶液的制备方法分别制备 6 份供 试品， 记录指纹图谱， 用 “中药指纹图谱相似度计算软件” 计算相似度， 分别为 0.981， 0.994， 0.986， 0.953， 0.957， 0.974。图 15 为供试品重复性色谱图。 0114 （4） 稳定性试验 0115 取同一批次供试品溶液 （样品号 ： 20110702） ， 在室温下放置， 分别于 0、 6、 12、 24、 32、 48h 检测指纹图谱， 考察样品溶液的稳定性。用 “中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A 版” 软件 （中国药典会推荐） 计算相似度， 分别为 0.988， 0.984， 0.98。
33、4， 0.977， 0.981， 0.990。 图 16 为供试品稳定性色谱图， 其中 S1 表示 0h、 S2 表示 6h、 S3 表示 12h、 S4 表示 24h、 S5 表 示 32h、 S6 表示 48h。 0116 （5） 白及饮片主要成分指纹图谱的共有模式的建立 0117 取 12 个批次的白及饮片样品作为供试品溶液， 通过高效液相色谱得到白及 主要成分指纹图谱， 图 17 为白及饮片主要成分指纹图谱 (S1-S12 分别为白及饮片 20110701-20120302 批 )。 0118 利用中国药典委员会推荐的 “中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A 版” 软件， 对 所得指纹图。
34、谱的进行相似度比较 （以中位数建立参照指纹图谱， 时间窗为 0.50） ， 得到十二 批白及的相似度， 并建立白及主要成分指纹图谱的共有模式， 相似度均大于 0.798， 图 17 为白及饮片主要成分指纹图谱 (S1-S12 分别为白及饮片 20090101 20120302， R 为白及 主要成分指纹图谱的共有模式 )、 图 18 为白及饮片主要成分指纹图谱共有模式图谱， 该标 准图谱共有色谱峰 13 个， 其保留时间分别为 2.024min、 5.928min、 10.765min、 16.133min、 17.279min、 20.999min、 23.232min、 24.678min。
35、、 25.924min、 28.287min、 30.366min、 32.529min、 34.291min。表 6 为十二批白及相似度计算结果。 0119 表 6 0120 说 明 书 CN 103344717 A 9 8/8 页 10 0121 最后所应当说明的是， 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保 护范围的限制， 尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明， 本领域的普通技术人员应当 理解， 可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质 和范围。 说 明 书 CN 103344717 A 10 1/9 页 11 图 1 图 2 说 明 书 附。
36、 图 CN 103344717 A 11 2/9 页 12 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 12 3/9 页 13 图 5 图 6 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 13 4/9 页 14 图 7 图 8 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 14 5/9 页 15 图 9 图 10 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 15 6/9 页 16 图 11 图 12 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 16 7/9 页 17 图 13 图 14 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 17 8/9 页 18 图 15 图 16 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 18 9/9 页 19 图 17 图 18 说 明 书 附 图 CN 103344717 A 19 。