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1、(10)申请公布号 CN 103336078 A (43)申请公布日 2013.10.02 CN 103336078 A *CN103336078A* (21)申请号 201310291825.9 (22)申请日 2013.07.12 G01N 30/02(2006.01) (71)申请人 天津中新药业集团股份有限公司乐 仁堂制药厂 地址 300112 天津市西青区大明道 2 号 (72)发明人 王磊 金兆祥 张宇 杨瑾 律兆荣 (74)专利代理机构 天津市杰盈专利代理有限公 司 12207 代理人 朱红星 (54) 发明名称 一种止嗽定喘丸的含量测定方法 (57) 摘要 本发明公开了一种止嗽。
2、定喘丸的含量测定方 法， 它是分别精密吸取 5l 对照品溶液、 供试品溶 液， 注入高效液相色谱仪中进行测定， 色谱条件 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂固定相 ； 以乙腈 ： 0.092% 磷酸混合溶液体积比为 2 ： 100 为 流动相 ； 检测波长为 210nm ； 柱温 ： 25 ； 流速 ： 0.5ml/min， 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不 低于 3000， 止嗽定喘丸中每 1g 含盐酸麻黄碱、 盐 酸伪麻黄碱的总量不得少于 2.1mg。本发明增加 了止嗽定喘丸中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含 量测定方法， 提高了止嗽定喘丸的质量控制标准， 从而有效确保了止嗽定喘丸的安全、 。
3、均一、 稳定、 有效、 可控， 保证了工艺的规范化和质量的稳定一 致。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 9 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书9页 附图2页 (10)申请公布号 CN 103336078 A CN 103336078 A *CN103336078A* 1/1 页 2 1. 一种止嗽定喘丸的含量测定方法， 其特征在于按如下的步骤进行 ： （1） 对照品溶液的制备 ： 取盐酸麻黄碱对照品、 盐酸伪麻黄碱对照品适量， 精密称定， 加甲醇制成每 1ml 含盐酸 麻黄碱 50g 和盐酸伪麻黄碱 15g 。
4、的混合溶液备用 ； （2） 供试品溶液的制备 ： 取本品， 除去薄膜衣， 研细， 取 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸 溶液 25ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重 量， 摇匀， 滤过， 取续滤液备用 ； （3） 测定 ： 将步骤 （1） 、 步骤 （2） 提取得到的对照品溶液、 供试品溶液， 分别精密吸取 5l， 注入高 效液相色谱仪中进行测定， 色谱条件 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂固定相 ； 以 乙腈 ： 0.092% 磷酸溶液体积比为 2 ： 100 为流动相 ； 检测波长为。
5、 210nm ； 柱温 ： 25 ； 流速 ： 0.5ml/min， 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000， 止嗽定喘丸中每 1g 含盐酸麻黄 碱、 盐酸伪麻黄碱的总量不得少于 2.1mg。 2. 权利要求 1 所述的含量测定方法， 其中 0.092% 磷酸混合溶液指的是 ： 该混合溶液中 含有 0.092% 的磷酸、 0.04% 的三乙胺和 0.02% 的二正丁胺。 3. 权利要求 1 所述的含量测定方法， 其特征在于所述的含量测定方法可测定相同或相 近含有盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱组成的任何一种剂型。 4. 权利要求 1 所述的含量测定方法， 其特征在于所述的剂型包括水蜜丸、 大蜜丸。
6、、 浓缩 丸、 片剂、 颗粒或胶囊。 5.权利要求1所述的含量测定方法， 其特征在于所述的超声处理指的是 ： 功率600W， 频 率 50kHz， 超声 30min。 权 利 要 求 书 CN 103336078 A 2 1/9 页 3 一种止嗽定喘丸的含量测定方法 技术领域 0001 本发明属于中药制剂鉴别技术领域， 涉及一种止嗽定喘丸的含量测定方法。 背景技术 0002 止嗽定喘丸 （浓缩丸） 源自汉代张仲景 伤寒论 中麻杏石甘汤， 由麻黄、 石膏、 甘 草、 苦杏仁组成， 具有辛凉宣泄、 清肺平喘的功效。收载于卫生部药品标准中药成方制剂第 二十册。方中君药麻黄有清肺平喘的功效， 有效成分。
7、为麻黄碱、 伪麻黄碱等生物碱类成分， 止嗽定喘丸标准中无这两种成分的定量测定方法。为了提高止嗽定喘丸的质量控制水平， 现将其质量标准进行了提高、 完善， 从而完成了本发明。 发明内容 0003 本发明公开了一种止嗽定喘丸的含量测定方法， 其特征在于按如下的步骤进行 ： （1） 对照品溶液的制备 ： 取盐酸麻黄碱对照品、 盐酸伪麻黄碱对照品适量， 精密称定， 加甲醇分别制成每 1ml 各 含 50g、 15g 的混合溶液备用 ； （2） 供试品溶液的制备 ： 取本品， 除去薄膜衣， 研细， 取 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸 溶液 25ml， 称定重量， 超。
8、声处理 30 分钟 （功率 600W， 频率 50kHz） ， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液备用 ； （3） 测定 ： 将步骤 （1） 、 步骤 （2） 提取得到的对照品溶液、 供试品溶液， 分别精密吸取 5l， 注入高效液相色谱仪中进行测定， 色谱条件 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充 剂固定相 ； 以乙腈 ： 0.092% 磷酸溶液体积比为 2 ： 100 为流动相 ； 检测波长为 210nm ； 柱温 ： 25 ； 流速 ： 0.5ml/min， 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000， 止嗽定喘丸中每 1g 含盐酸麻黄。
9、碱、 盐酸伪麻黄碱的总量不得少于 2.1mg。 0004 本发明所述的含量测定方法， 其中其中 0.092% 磷酸混合溶液指的是 ： 该混合溶液 中含有 0.092% 的磷酸、 0.04% 的三乙胺和 0.02% 的二正丁胺。 0005 本发明所述的含量测定方法， 可测定相同或相近含有盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱 组成的任何一种剂型。包括水蜜丸、 大蜜丸、 片剂、 浓缩丸、 颗粒或胶囊 本发明更加详细的制备方法及测定方法如下 ： 1、 钙盐的鉴别反应 本项为新增项目。方法参照中国药典 2010 年版一部附录一般鉴别试验项下钙盐鉴 别方法 （2） 制定此标准。 0006 取本品0.5g， 除去包衣，。
10、 研细， 加稀盐酸10ml， 加热使溶解， 过滤。 取滤液2ml， 加草 酸铵试液， 即生成白色沉淀， 所得沉淀不溶于醋酸， 但溶于稀盐酸。 0007 含量测定 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量测定 说 明 书 CN 103336078 A 3 2/9 页 4 现行标准无含量测定项目。本药处方中有麻黄、 甘草、 杏仁、 石膏四味药材。麻黄作为 处方中的君药既有粉碎又有提取， 参考 中国药典 2010 年版一部麻黄的含量测定方法， 采 用高效液相色谱法， 以盐酸麻黄碱、 盐酸伪麻黄碱为定量指标， 通过反复的实验摸索制定了 处方中盐酸麻黄碱、 盐酸伪麻黄碱的含量测定方法 ： 2.1 仪器与试药 仪器。
11、 ： 日本 SHIMADZU LC-2010AHT 高效液相色谱仪， UV-VIS 检测器， Class-VP 工作站。 0008 色谱柱 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂固定相的色谱柱， Ultimate Phenyl Ether， 5， 2504.6mm 试剂 ： 甲醇 （色谱纯， 天津市康科德科技有限公司） ， 乙腈 （色谱纯， Merck） ， 磷酸 （分析纯， 天津市化学试剂六厂） ， 盐酸 （优质纯， 天津市试剂五厂） ， 三乙胺 （分析纯， 天津市申泰化学试剂有限公司） ， 二正丁胺 （分析纯， 天津市申泰化学试剂有限公司） ， 水为去离子水。 0009 对照品 ： 盐酸麻。
12、黄碱对照品 （批号 171241-201007 中国药品生物制品检验所购置， 供含量测定用） ， 盐酸伪麻黄碱对照品 （批号171237-200807中国药品生物制品检验所购置， 供含量测定用） 。 0010 样品 ： 天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂生产 （批号 091001 100508） 2.2 色谱条件 2.2.1 检测波长的选择 ： 参考 中国药典 2010 年版一部麻黄含量测定项， 规定其检测 波长为 210nm。 0011 2.2.2 流动相的选择 ： 参考 中国药典 2010 年版一部麻黄药材项下的流动相， 并 根据供试品色谱情况进行流动相的筛选， 结果见表 1。 00。
13、12 表 1 流动相的选择 结果显示 ： 考虑目标峰分离， 最终选择流动相 7 为最佳比例。 0013 2.2.3 色谱条件 ： 根据以上试验并参照 中国药典 2010 年版一部麻黄含量测定方 法制定本方法色谱条件。 0014 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂固定相 ； 以乙腈 -0.092% 磷酸溶液 （含 0.04% 三乙胺和 0.02% 二正丁胺） （2 ： 100） 为流动相 ； 检测波长为 210nm ； 柱温 ： 25； 流速 ： 说 明 书 CN 103336078 A 4 3/9 页 5 0.5ml/min。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000。参考中国药典 2010。
14、 年版中麻黄 的含量测定方法， 结合麻黄所含成分的特性， 进行以下试验。 0015 2.3 供试品的制备 2.3.1 提取溶剂的选择 ： 参考中国药典 2010 年版一部麻黄药材项下含量测定方法中的供试品溶液提取溶剂， 选取 1.44% 磷酸溶液为溶剂。 0016 2.3.2 提取溶剂用量及取样量的选择 ： 取同一批号 （批号 ： 091002） 样品， 研细， 分别取样。 0017 方法 1 ： 取约 1.0g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸溶液 25ml， 称 定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 称定重量， 用1.44%磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过，。
15、 取续滤液， 即得。 0018 方法 2 ： 取约 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸溶液 50ml， 称 定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 称定重量， 用1.44%磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得。 0019 方法 3 ： 取约 1.0g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸溶液 50ml， 称 定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 称定重量， 用1.44%磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得。 0020 方法 4 ： 取约 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44。
16、% 磷酸溶液 25ml， 称 定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 称定重量， 用1.44%磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得。上述几种方法提取得样品分别精密吸取 5l， 注入高效液相色谱仪中， 按 “2.2.3” 色谱条件分析。 0021 测定上述四样品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量， 结果见表 2。 0022 表 2 取样量的筛选 结果显示采用方法 4 制备样品， 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量较高， 提取充分， 且 色谱峰分离较好， 且理论塔板数符合要求， 因此确定方法 4 为样品取样量及溶剂容量。 0023 2.3.3 提取方法的选择 ： 取同一批号 （批号 。
17、： 091002） 样品， 研细， 分别称取两份样品各 0.5g， 精密称定， 置具塞 锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸溶液 50ml， 称定重量， 分别选择回流提取 30 分钟和超声处 理 30 分钟提取样品， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续 滤液， 作为供试品溶液。 0024 分别精密吸取 5l， 注入高效液相色谱仪中， 按 “2.2.3” 色谱条件分析。测定上述 两种方法样品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量， 结果见表 3。 说 明 书 CN 103336078 A 5 4/9 页 6 0025 表 3 提取方法的选择 序号 方法。
18、含量 （mg/g） 1回流 30min 2.989 2超声 30min 3.108 结果显示采用超声 30min（功率 600W， 频率 50kHz） 制备样品， 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻 黄碱的总量较高， 提取充分。 0026 2.3.4 提取时间的选择 ： 取同一批号 （批号 ： 091002） 样品， 研细， 取约 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加 入 1.44% 磷酸溶液 25ml， 称定重量， 分别超声处理不同时间， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸 溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得。上述处理样品分别精密吸取 5l， 注入 高效液相色谱仪中，。
19、 按 “2.2.3” 色谱条件分析。 0027 测定上述各样品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量， 结果见表 4。 0028 表 4 提取时间的选择 结果显示采用方法 2 制备， 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的总量较高， 提取充分。 0029 2.3.5 确定供试品的制备方法 ： 取本品， 除去薄膜衣， 研细， 取约 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸溶液 25ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟 （功率 600W， 频率 50kHz） ， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得。 0030 2.4 溶液的。
20、制备 2.4.1 对照品溶液的制备 ： 取盐酸麻黄碱对照品、 盐酸伪麻黄碱对照品适量， 精密称定， 加甲醇分别制成每 1ml 各 含 50g、 15g 的混合溶液， 即得。 0031 2.4.2 供试品溶液的制备 ： 取本品， 除去薄膜衣， 研细， 取约 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷 酸溶液25ml， 称定重量， 超声处理30分钟， 放冷， 称定重量， 用1.44%磷酸溶液补足减失的重 量， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 即得。 0032 2.4.3 空白对照品溶液制备 ： 按处方、 工艺， 除去麻黄制备空白对照品， 再将空白对照品粉碎成细粉， 按 “2.4。
21、.2” 项方 法制备空白对照品溶液。 0033 2.4.4 测定 ： 将 “2.4.1 2.4.3” 项下的各种溶液， 分别精密吸取 5l， 注入高效 液相色谱仪中， 按 “2.2.3” 色谱条件分析。得到的色谱图如下， 对照品溶液色谱图见图 （1） ， 供试品溶液色谱图见图 （2） ， 空白对照品溶液色谱图见图 （3） 。如图可见， 空白对照品在与 盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱色谱峰相应的保留时间处无色谱峰。 说 明 书 CN 103336078 A 6 5/9 页 7 0034 2.5 标准曲线的制备 2.5.1 盐酸麻黄碱标准曲线 ： 取盐酸麻黄碱对照品溶液 （浓度 ： 0.05136mg/。
22、ml）分别进样 1l， 2l， 4l， 6l， 8l， 10l， 12l 注入高效液相色谱仪， 以进样体积为横坐标， 以峰面积为纵坐标做线性 回归。结果见表 5， 线性曲线如图 4 所示。 0035 表 5 线性考察结果 进样体积 （l）进样量 （g）峰面积 10.01027223877 20.02054454432 40.04109934022 60.061631395880 80.082181874577 100.102722336896 120.123262765276 由数据得回归方程为 ： Y=A+BX=2.2641107X-2222.344， R=0.9999 结果表明盐酸麻黄碱在。
23、 0.01027 0.12326g 范围内线性关系良好。 0036 2.5.2 盐酸伪麻黄碱标准曲线 ： 取盐酸伪麻黄碱对照品溶液 （浓度 ： 0.01487mg/ml） 分别进样 1l， 2l， 4l， 6l， 8l， 10l注入高效液相色谱仪， 以进样体积为横坐标， 以峰面积为纵坐标做线性回归。 结 果见表 6， 线性曲线如图 5 所示。 0037 表 6 线性考察结果 进样体积 （l）进样量 （g）峰面积 10.00297464136 20.005948128457 40.011896257025 60.017844383796 80.023792514013 100.029740642。
24、259 120.035688768035 由数据得回归方程为 ： Y=A+BX=2.1546107X+336.3244， R=0.9999 结果表明盐酸伪黄碱在 0.002974 0.035688g 范围内线性关系良好。 0038 2.6 方法学验证 2.6.1 进样重复性 （精密度） 试验 取同一批号 （批号 ： 091002） 样品， 研细， 取约 0.5g， 精密称定， 按照 “2.4.2” 供试品溶液 制备操作， 按 “2.2.3” 色谱条件分析， 连续进样 6 次， 测定样品中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄 碱的峰面积， 测得盐酸麻黄碱峰面积平均值 ： 1078634， 峰面积的 RSD 为。
25、 0.28% ； 测得盐酸伪 麻黄碱峰面积平均值 ： 360680， 峰面积的 RSD 为 1.4%， 表明精密度良好， 结果见表 7、 8。 0039 表 7 盐酸麻黄碱进样重复性试验 123456RSD% 峰面积10760591078289107781310821201079538107797410786340.28 表 8 盐酸伪麻黄碱进样重复性试验 说 明 书 CN 103336078 A 7 6/9 页 8 123456RSD% 峰面积3604513611843576623539283689963618613606801.4 2.6.2 重现性试验 取同一批号 （批号 ： 09100。
26、2） 样品， 共 6 份， 研细， 取约 0.5g， 精密称定， 按照 “2.4.2” 供 试品溶液制备操作， 按 “2.2.3” 色谱条件分析， 测定每份样品中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱 的含量。测得盐酸麻黄碱含量平均值为 2.4680mg/g， 含量的 RSD 为 0.4% ； 测得盐酸伪麻黄 碱含量平均值为 0.8487mg/g， 含量的 RSD 为 1.1%。符合要求， 结果见表 9、 表 10。 0040 表 9 盐酸麻黄碱进样重现性试验 123456RSD% 含量 mg/g 2.47532.48402.46792.46362.45952.45782.46800.4 表 10 盐酸伪麻。
27、黄碱进样重现性试验 123456RSD% 含量 mg/g 0.85530.86140.85180.84700.83720.83970.84871.1 2.6.3 稳定性试验 取同一批号 （批号 ： 091002） 样品， 研细， 取约 0.5g， 精密称定， 按照 “2.4.2” 供试品溶 液制备操作， 按 “2.2.3” 色谱条件分析， 分别在 0、 2、 4、 6、 8、 10 小时， 测定样品中盐酸麻黄碱 及盐酸伪麻黄碱的峰面积， 测得盐酸麻黄碱峰平均峰面积值的 RSD 为 0.4% ； 测得盐酸伪麻 黄碱平均峰面积值的RSD为1.3% ； 结果表明， 供试品溶液在10小时内稳定， 结果。
28、见表11、 表 12。 0041 表 11 盐酸麻黄碱稳定性试验 123456RSD% 峰面积10760591077813107953810751671075955106759610753550.4 表 12 盐酸伪麻黄碱稳定性试验 123456RSD% 峰面积3604513576623689963605213574453554573600891.3 2.6.4 回收率试验 取同一批号 （批号 ： 091002） 样品， 研细， 取约 0.25g， 共 6 份， 精密称定， 分别精密加入盐 酸麻黄碱对照品及盐酸伪麻黄碱对照品的 1.44% 磷酸溶液 （0.02549mg/ml） 及盐酸伪麻黄 。
29、碱对照品 1.44% 磷酸溶液 （0.010756mg/ml） 25ml， 再按照 “2.4.2” 供试品溶液制备操作， 制 得供回收率用供试品溶液， 按 “2.2.3” 色谱条件分析， 计算回收率， 结果盐酸麻黄碱平均回 收率为 95.2%， RSD 为 1.5% ； 盐酸伪麻黄碱平均回收率为 101.0%， RSD 为 1.6%。符合规定， 结果见表 13、 表 14。 0042 表 13 盐酸麻黄碱回收率试验 说 明 书 CN 103336078 A 8 7/9 页 9 表 14 盐酸伪麻黄碱回收率试验 2.7 样品测定 取该品 8 个批号的样品， 按照 “2.4.2” 供试品溶液制备操。
30、作， 按 “2.2.3” 色谱条件测定 样品中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量。结果见表 15。 0043 表 15 八批样品含量测定结果 3.07mg/g70%=2.1mg/g 根据以上八批的检测结果， 确定止嗽定喘丸中每 1g 含盐酸麻黄碱、 盐酸伪麻黄碱的总 量不得少于 2.1mg。 0044 本发明公开的止嗽定喘丸含量测定方法与现标准相比， 所具有的积极效果在于 ： （1） 本发明增加了钙盐的理化鉴别， 增加了君药麻黄的含量测定方法， 采用 HPLC 测定 了止嗽定喘丸中的盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量。 本发明所要解决的问题是提供一种 止嗽定喘丸的含量检测方法， 通过此含量测定方法， 。
31、可控制该止嗽定喘丸的质量。 0045 （2） 本发明所述的质量控制方法， 可检测提取方法相同或相近含有盐酸麻黄碱与 盐酸伪麻黄碱组成的任何一种剂型。包括水蜜丸、 大蜜丸、 浓缩丸、 颗粒或胶囊。优选止嗽 说 明 书 CN 103336078 A 9 8/9 页 10 定喘丸的质量控制方法。 0046 （3） 本发明增加了止嗽定喘丸中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量测定方法， 提 高了止嗽定喘丸的质量控制标准， 从而有效确保了止嗽定喘丸的安全、 均一、 稳定、 有效、 可 控， 保证了工艺的规范化和质量的稳定一致。 0047 附图说明 ： 图 1 为盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱对照品的 HPLC 图谱。
32、 ； 图 2 为供试品的 HPLC 图谱 ； 图 3 为空白对照品的 HPLC 图谱 ； 图 4 为盐酸麻黄碱线性曲线图 ； 图 5 为盐酸伪麻黄碱线性曲线图。 0048 具体实施方式 ： 下面结合具体实施例对本发明做进一步说明， 下述各实施例仅用于说明本发明而并非 对本发明的限制。 0049 实施例 1 止嗽定喘丸的制备 （批号 091001100508） 【处方】 麻黄 200g 甘草 200g 苦杏仁 200g 石膏 200g 以上四味共重 800g 【制法】 以上四味， 取出麻黄 80g 与石膏粉碎成细粉， 备用 ； 其余麻黄与苦杏仁、 甘草二 味加水， 煎煮二次， 合并煎液， 滤过，。
33、 浓缩成膏。将麻黄与石膏粉末加入膏内， 搅匀， 干燥， 粉 碎成细粉， 过筛， 用水泛丸， 干燥， 包薄膜衣， 即得。 0050 【性状】 本品为包薄膜衣的浓缩丸， 除去薄膜衣显棕褐色 ； 味甘、 苦。 0051 实施例 2 止嗽定喘丸的含量测定方法 ： （1） 对照品溶液的制备 ： 取盐酸麻黄碱对照品、 盐酸伪麻黄碱对照品适量， 精密称定， 加甲醇制成每 1ml 含盐酸 麻黄碱 50g 和盐酸伪麻黄碱 15g 的混合溶液备用 ； （2） 供试品溶液的制备 ： 取本品， 除去薄膜衣， 研细， 取 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸 溶液 25ml， 称定重量，。
34、 超声处理 30 分钟 （功率 600W， 频率 50kHz） ， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液备用 ； （3） 测定 ： 将步骤 （1） 、 步骤 （2） 提取得到的对照品溶液、 供试品溶液， 分别精密吸取 5l， 注入高 效液相色谱仪中进行测定， 色谱条件 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂固定相 ； 以 乙腈 ： 0.092% 磷酸溶液体积比为 2 ： 100 为流动相 ； 检测波长为 210nm ； 柱温 ： 25 ； 流速 ： 0.5ml/min， 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000， 止嗽定喘丸中每 1g 含盐。
35、酸麻黄 碱、 盐酸伪麻黄碱的总量为 2.672mg。其中 0.092% 磷酸混合溶液指的是 ： 该混合溶液中含 有 0.092% 的磷酸、 0.04% 的三乙胺和 0.02% 的二正丁胺。 0052 实施例 3 说 明 书 CN 103336078 A 10 9/9 页 11 止嗽定喘片中盐酸麻黄碱、 盐酸伪麻黄碱的含量测定。 0053 （1） 对照品溶液的制备 ： 取盐酸麻黄碱对照品、 盐酸伪麻黄碱对照品适量， 精密称定， 加甲醇制成每 1ml 含盐酸 麻黄碱 50g 和盐酸伪麻黄碱 15g 的混合溶液备用 ； （2） 供试品溶液的制备 ： 取止嗽定喘片， 除去薄膜衣， 研细， 取 0.5g。
36、， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸溶液 25ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟 （功率 600W， 频率 50kHz） ， 放冷， 称定重 量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重量， 摇匀， 滤过， 取续滤液备用 ； （3） 测定 ： 将步骤 （1） 、 步骤 （2） 提取得到的对照品溶液、 供试品溶液， 分别精密吸取 5l， 注入高 效液相色谱仪中进行测定， 色谱条件 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂固定相 ； 以 乙腈 ： 0.092% 磷酸溶液体积比为 2 ： 100 为流动相 ； 检测波长为 210nm ； 柱温 ： 25 ； 流速 ： 0.5。
37、ml/min， 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000， 止嗽定喘丸中每 1g 含盐酸麻黄 碱、 盐酸伪麻黄碱的总量为 2.732mg。其中 0.092% 磷酸混合溶液指的是 ： 该混合溶液中含 有 0.092% 的磷酸、 0.04% 的三乙胺和 0.02% 的二正丁胺。 0054 实施例 4 对比试验 ： 止嗽定喘丸由于受当时科研水平的限制， 其质量标准中没有理化鉴别及含量测定两项 检测标准。因此不能有效地控制产品质量， 导致止嗽定喘丸中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱 含量不稳定、 质量很难控制。 0055 现在止嗽定喘丸的含量测定方法 （1） 对照品溶液的制备 ： 取盐酸麻黄碱对照品、 盐。
38、酸伪麻黄碱对照品适量， 精密称定， 加甲醇制成每 1ml 含盐酸 麻黄碱 50g 和盐酸伪麻黄碱 15g 的混合溶液备用 ； （2） 供试品溶液的制备 ： 取本品， 除去薄膜衣， 研细， 取 0.5g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入 1.44% 磷酸 溶液 25ml， 称定重量， 超声处理 30 分钟， 放冷， 称定重量， 用 1.44% 磷酸溶液补足减失的重 量， 摇匀， 滤过， 取续滤液备用 ； （3） 测定 ： 将步骤 （1） 、 步骤 （2） 提取得到的对照品溶液、 供试品溶液， 分别精密吸取 5l， 注入高 效液相色谱仪中进行测定， 色谱条件 ： 以极性乙醚连接苯基键合硅胶。
39、为填充剂固定相 ； 以 乙腈 ： 0.092% 磷酸溶液体积比为 2 ： 100 为流动相 ； 检测波长为 210nm ； 柱温 ： 25 ； 流速 ： 0.5ml/min， 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于 3000， 止嗽定喘丸中每 1g 含盐酸麻黄 碱、 盐酸伪麻黄碱的总量为 3.689mg。其中 0.092% 磷酸混合溶液指的是 ： 该混合溶液中含 有 0.092% 的磷酸、 0.04% 的三乙胺和 0.02% 的二正丁胺。 0056 结论 ： 本发明采用 HPLC 测定了止嗽定喘丸中的盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量， 提高了 止嗽定喘丸的质量控制标准， 从而有效确保了止嗽定喘丸的安全、 均一、 稳定、 有效、 可控， 保证了工艺的规范化和质量的稳定一致。 说 明 书 CN 103336078 A 11 1/2 页 12 图 1 图 2 图 3 说 明 书 附 图 CN 103336078 A 12 2/2 页 13 图 4 图 5 说 明 书 附 图 CN 103336078 A 13 。