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用于治疗肺部和心血管病症的取代苯并唑 PDE4 抑制剂
    技术领域 本发明涉及用于治疗中风、 心肌梗塞和心血管炎性病症的取代苯并噻唑、 苯并噁 唑， 及它们的由吡啶和嘧啶环替代苯环的对应物， 涉及包含这些化合物的药物组合物， 还涉 及治疗哺乳动物的中风、 心肌梗塞和心血管炎性病症的方法。
     发明背景
     PDE4 是在炎性细胞和免疫细胞中发现的主要 cAMP- 代谢酶。已证实 PDE4 抑制 剂具有特别是在炎性肺病， 如哮喘、 COPD 和鼻炎中作为抗炎药物的潜力。它们抑制细胞 因子及其他炎性信号的释放， 并抑制活性氧的产生。已开发了大量的 PDE4 抑制剂用于多 种临床适应证 (Torphy and Page.2000.TIPS 21， 157-159 ； Bumouf and Pruniaux.2002. Curr.Pharm.Design 8， 1255-1296 ； Lipworth.2005.Lancet 365， 167-175)。引用 British Journal ofPharmacology 中的一篇近期文章， “自 80 年代起， 已开发 PDE4 抑制剂作为以哮 喘和慢性阻塞性肺病 (COPD) 为主要适应证的新型抗炎疗法。尽管最初是乐观的， 但这些治 疗剂尚无一种上市。在大多数情况下， 包括西洛司特、 非明司特、 利米司特 (lirimilast)、 吡拉米司特、 妥非司特 (tofimilast) 等在内的多种结构类型的 PDE4 抑制剂的开发已由 于缺乏疗效而中断。主要问题是这些化合物的低治疗比， 其严重地限制了可以给予的剂 量。实际上， 对于这些化合物中的许多化合物， 似乎最高耐受剂量或是亚治疗的， 或是处 于有效剂量 - 反应曲线的非常低的位置。因此， 挑战是去克服该限制。 ” [Giembycz， Brit. J.Pharmacol.155， 288-290(2008)]。由于呕吐的不良副作用， 现有技术的许多 PDE4 抑制剂
     尚未上市 (Giembycz 2005.Curr.Opin.Pharm.5， 238-244)。 对所有已知 PDE4 抑制剂的分析 表明， 它们与 cAMP 竞争并在活性位点内结合 (Houslay 等人， 2005.DDT 10， 1503-1519) ； 这 可以解释它们较窄的治疗比。本发明的化合物是 cAMP 的非竞争性抑制剂， 并同时是基因特 异性抑制剂 (PDE4D)， 并且， 根据目标原理 (target rationale) 和体外药效， 本领域技术人 员会期待， 所述化合物用作治疗、 改善或预防炎性疾病及由此引发的并发症的抗炎剂， 以及 用作改善阿尔茨海默病、 帕金森病中的认知衰退， 治疗精神分裂症和抑郁症， 以及亨廷顿病 中的神经保护的 CNS 药剂。
     发明概述
     本发明涉及表现出 PDE4 酶抑制的化合物， 其具有式 Ia、 Ib 或 Ic ：
     在这些化合物中 U 选自 -S- 和 -O- ； V 选自 H、 CH3、 NH2 和 CF3 ； X 选自 CH、 C-F、 C-Cl、 C-Br、 C-I、 C-NH2、 C-OH、 C-OCH3、 N 和 N-O ； Y 选自 N、 CH、 CF 和 C- 低级烷基 ； 1 R 是 H 或低级烷基 ； R2 选自 H、 烷基、 OH、 NH2 和 OCH3 ； B 是任选取代的单环或双环芳基或杂芳基 ； A 是任选取代的杂环或任选取代的碳环 ； 并且 1 A 选自 (a) 选自的残基， 其中 R40 选自 H、 卤素、 OH、 NH2 和 CH3 ；(b) 具有三个或更少个环的取代杂环或者具有三个或更少个环的取代碳环 ； 和
     (c) 本身由具有其它取代基的杂环所取代的杂环 ；
     其中所述杂环或碳环上的取代基选自 ： 羟基、 羧基、 羧基烷基、 羧基烷氧基、 羧基烷 硫基、 烷氧羰基、 羧基烷基羰基氨基、 羧基烷基氨基羰基氨基、 胍基、 氨基酸残基和 N- 甲基
     化氨基酸的残基。
     根据本发明的实施方案， 还提供药物组合物， 其包含如本文所述的化合物， 以及药 学可接受的载体、 赋形剂或稀释剂。 当所述化合物以盐的形式存在时， 所述盐应是药学可接 受的盐。
     在又一方面， 本发明涉及治疗或预防由外周 ( 即在 CNS 之外的 ) 磷酸二酯酶 -4 介 导的疾病或病状的方法。所述方法包括向哺乳动物给药治疗有效量的具有通式 I 的化合 物。所述疾病或病状可能与过敏性、 急性或慢性炎症有关。所述疾病可以是， 例如， 动脉粥 样硬化、 血栓形成、 中风、 急性冠状动脉综合征、 稳定型心绞痛、 外周血管病、 重症下肢缺血 (critical legischemia)、 间歇性跛行、 腹主动脉瘤或心肌梗塞。
     本发明的选择性 PDE4 抑制剂还用于治疗哮喘和慢性阻塞性肺病 (COPD)。还发现 本发明的抑制肿瘤生长和转移的化合物在治疗和预防包括食道癌、 脑癌、 胰腺癌和结肠癌 在内的癌症中的效用。
     结合说明书和所附权利要求， 会清楚本发明的这些及其它实施方案。
     发明详述
     在本说明书全文中， 当引入取代基时进行定义并保持它们的定义。 除非另有说明， 烷基意图包括直链、 支链、 或环状的烃结构及其组合。例如组合会 是环丙基甲基。低级烷基是指具有 1-6 个碳原子的烷基。低级烷基的实例包括甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 仲丁基和叔丁基等。优选的烷基是 C20 或 C20 以下的烷基 ； 更优选 C1-C8 烷基。环烷基是烷基的子类， 并且包括具有 3-8 个碳原子的环状烃基。环烷基的实例包括 环丙基、 环丁基、 环戊基、 降冰片基 (norbornyl) 等。
     C1-C20 烃包括烷基、 环烷基、 多环烷基、 烯基、 炔基、 芳基及其组合。实例包括苄基、 苯乙基、 环己基甲基、 樟脑酰基和萘乙基。 烃是指由作为仅有元素成分的氢和碳组成的任意 取代基。
     除非另有说明， 术语 “碳环” 意图包括其中的环原子均为除任何氧化态的碳的环体 系。 因此 (C3-C10) 碳环既指非芳族体系也指芳族体系， 包括诸如环丙烷、 苯、 环戊烯和环己烯 的体系 ； (C8-C12) 碳多环是指诸如降莰烷、 十氢化萘、 二氢化茚和萘的体系。除非另外限定， 碳环是指单环、 双环和多环。
     烷氧基是指通过氧与母体结构相连的具有 1-8 个碳原子的直链、 支链或环状构型 的基团及其组合。实例包括 ： 甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 环丙氧基、 环己氧基等。低 级烷氧基是指含有 1-4 个碳的基团。对于本申请， 烷氧基和低级烷氧基包括亚甲二氧基和 亚乙二氧基。烷氧基烷基是指通过烷基与母体结构相连的具有 3-8 个原子的直链、 支链、 环 状构型的醚基团及其组合。实例包括 ： 甲氧基甲基、 甲氧基乙基、 乙氧基丙基等。烷氧基芳 基是指与芳基相连的烷氧基取代基， 其中所述芳基与母体结构相连。芳基烷氧基是指与氧 相连的芳基取代基， 其中所述氧与母体结构相连。取代芳基烷氧基是指与氧相连的取代芳 基取代基， 其中所述氧与母体结构相连。
     氧杂烷基是指其中的一个或多个碳 ( 及它们的结合氢 ) 已被氧替代的烷基残基。 实例包括甲氧基丙氧基 ； 3， 6， 9- 三氧杂癸基 ； 2， 6， 7- 三氧杂双环 [2.2.2] 辛烷等。术语氧 杂烷基意图如本领域所理解的 [ 参见 Naming and Indexing ofChemical Substances for Chemical Abstracts， 由 American Chemical Society 出版， 196， 但不包括 127(a) 的限
     定 ]， 即它是指其中的氧通过单键与其相邻原子结合 ( 形成醚键 ) 的化合物 ； 它不是指如在 羰基中发现的双键氧。类似地， 硫代烷基和氮杂烷基是指其中的一个或多个碳已分别被硫 或氮替代的烷基残基。实例包括乙基氨基乙基和甲硫基丙基。
     除非另有说明， 酰基是指甲酰基， 以及通过羰基官能团与母体结构相连的具有 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7 和 8 个碳原子的直链、 支链、 环状构型的， 饱和的、 不饱和的及芳族的基团及其 组合。只要与母体相连的位点仍然保留在所述羰基上， 所述酰基残基中的一个或多个碳可 以被氮、 氧或硫替代。 实例包括乙酰基、 苯甲酰基、 丙酰基、 异丁酰基、 叔丁氧羰基、 苄氧羰基 等。低级酰基是指含有 1-4 个碳的基团。当双键结合的氧本身被称为取代基时， 其被称为 “氧代” 。
     芳基和杂芳基意指 ： (i) 苯基 ( 或苯 ) 或者含有 1-4 个选自 O、 N 或 S 的杂原子的 单环 5- 元或 6- 元杂芳环 ； (ii) 含有 0-4 个选自 O、 N 或 S 的杂原子的双环 9- 元或 10- 元 芳环或杂芳环体系 ； 或者 (iii) 含有 0-5 个选自 O、 N 或 S 的杂原子的三环 13- 元或 14- 元 芳环或杂芳环体系。 本文所理解的芳基包括其中的一个或多个环为芳环但不需均为芳环的 残基。因此芳族 6- 元至 14- 元碳环包括 ： 例如， 苯、 萘、 二氢化茚、 四氢化萘和芴， 并且 5- 元 至 10- 元芳族杂环包括 ： 例如， 咪唑、 吡啶、 吲哚、 噻吩、 苯并吡喃酮、 噻唑、 呋喃、 苯并咪唑、 喹啉、 异喹啉、 喹噁啉、 嘧啶、 吡嗪、 四唑和吡唑。 芳基烷基是指其中的芳基残基通过烷基与母体结构相连的取代基。实例是苄基、 苯乙基等。杂芳基烷基是指其中的杂芳基残基通过烷基与母体结构相连的取代基。在一个 实施方案中， 芳基烷基或杂芳基烷基的烷基是具有 1-6 个碳的烷基。实例包括 ： 例如， 吡啶 基甲基、 嘧啶基乙基等。
     杂环是指其中的 1-3 个碳被选自 N、 O 和 S 的杂原子替代的环烷基或芳基碳环残 基。氮和硫杂原子可以任选地被氧化， 并且氮杂原子可以任选地被季铵化。除非另有说明， 杂环可以是非芳族的或芳族的。应注意， 杂芳基是杂环的子类， 其中所述杂环是芳族的。落 在本发明范围内的杂环残基的实例包括 ： 吡唑、 吡咯、 吲哚、 喹啉、 异喹啉、 四氢异喹啉、 苯并 呋喃、 苯并二噁烷、 苯并间二氧杂环戊烯 (benzodioxole， 当作为取代基出现时， 通常被称为 亚甲二氧基苯基 )、 吗啉、 噻唑、 吡啶 ( 包括 2- 氧代吡啶 )、 吡啶 N- 氧化物、 嘧啶、 噻吩 ( 即 thiene)、 呋喃、 噁唑、 噁唑啉、 噁唑烷、 异噁唑烷、 异噁唑、 二噁烷、 氮杂环丁烷、 哌嗪、 哌啶、 吡咯烷、 哒嗪、 氮杂卓、 吡唑烷、 咪唑、 咪唑啉、 咪唑烷、 咪唑并吡啶、 吡嗪、 噻唑烷、 异噻唑、 1， 2- 噻嗪 -1， 1- 二氧化物、 喹核碱、 异噻唑烷、 苯并咪唑、 噻二唑、 苯并吡喃、 苯并噻唑、 苯并 三唑、 苯并噁唑、 四氢呋喃、 四氢吡喃、 苯并噻吩、 硫吗啉、 硫吗啉亚砜、 硫吗啉砜、 噁二唑、 三 唑、 四唑、 靛红 ( 二氧代吲哚 )、 邻苯二甲酰亚胺 ( 二氧代异吲哚 )、 吡咯并吡啶、 三唑并吡 啶， 以及上述化合物中的全不饱和环体系的二氢和四氢同源物。
     氧杂环是环内含有至少一个氧的杂环 ； 它可以含有额外的氧及其它杂原子。见于 本发明的实施例的氧杂环包括四氢呋喃、 苯并间二氧杂环戊烯、 吗啉、 异噁唑和 2， 6， 7- 三 氧杂双环 [2.2.2] 辛烷。硫杂环是环内含有至少一个硫的杂环 ； 它可以含有额外的硫及其 它杂原子。氮杂环是环内含有至少一个氮的杂环 ； 它可以含有额外的氮及其它杂原子。
     本文中所用的术语 “任选取代的” 可与 “未取代的或取代的” 互换使用。术语 “取 代的” 是指用特定基团替代特定基团中的一个或多个氢原子。例如， 取代烷基、 芳基、 环烷 基、 杂环基等是指这样的烷基、 芳基、 环烷基或杂环基， 其中在各残基中的至多 3 个 H 原子被
     以下基团取代 ： 卤素、 卤代烷基、 烷基、 酰基、 烷氧基烷基、 羟烷基、 羰基 ( 即氧代 )、 苯基、 杂 芳基、 苯磺酰基、 羟基、 烷氧基、 卤代烷氧基、 氧杂烷基、 羧基、 羧基烷基、 羧基烷氧基、 羧基烷 硫基、 烷氧羰基 [-C( ＝ O)O- 烷基 ]、 烷氧羰基氨基 [-NHC( ＝ O)O- 烷基 ]、 烷氧羰基氨基烷 基 [- 烷基 -NHC( ＝ O)O- 烷基 ]、 羧基烷基羰基氨基 [-NHC( ＝ O)- 烷基 -COOH]、 甲酰氨基 [-C( ＝ O)NH2]、 氨基羰氧基 [-OC( ＝ O)NH2]、 烷基氨基羰基 [-C( ＝ O)NH- 烷基 ]、 二烷基氨 基羰基 [-C( ＝ O)N( 烷基 )2]、 氨基羰基烷基 [- 烷基 -C( ＝ O)NH2]、 氰基、 乙酰氧基、 硝基、 氨基、 烷基氨基、 二烷基氨基、 氨基烷基、 ( 烷基 )( 芳基 ) 氨基烷基、 烷基氨基烷基 ( 包括环 烷基氨基烷基 )、 二烷基氨基烷基、 二烷基氨基烷氧基、 烷基 ( 羟烷基 ) 氨基、 杂环基烷氧基、 巯基、 烷硫基、 烷基磺酰基、 烷基磺酰氨基、 烷基亚磺酰基、 烷基磺酰基、 芳硫基、 芳基磺酰 基、 芳基磺酰氨基、 芳基亚磺酰基、 芳基磺酰基、 酰氨基烷基、 酰氨基烷氧基、 酰氨基、 脒基、 芳基、 苄基、 杂环基、 杂环基烷基、 苯氧基、 苄氧基、 杂芳氧基、 杂环基氨基、 羟基亚胺基、 烷氧 基亚胺基、 氧杂烷基、 氨基磺酰基、 三苯甲基、 脒基、 胍基、 脲基、 -NHC( ＝ O)NH 烷基、 -NHC( ＝ O)NH- 杂环基、 - 烷基 -NHC( ＝ O)N( 烷基 )2、 杂环基烷基羰基氨基、 苄氧基苯基和苄氧基。 尽管在被称为以 “任选取代的” 取代基中包括氧代， 本领域的技术人员会理解， 由于氧代是 二价基团， 所以会存在它不适于作为取代基的情况 ( 例如在苯基上 )。被认为是所述术语， 特别是对于 R1 的术语的范围内的其它取代基是氨基酸残基、 氨基酸酰胺、 氨基酸及其酰胺 的受保护的残基， 以及 N- 甲基化的 ( 视适合情况， 单甲基化或二甲基化的 ) 氨基酸和氨基 酸酰胺。
     对于环 A 或 A1， 取代基烷基、 酰基、 烷氧基烷基、 羟基低级烷基、 苯基、 杂芳基、 苯磺酰基、 低级烷氧基、 卤代烷氧基、 氧杂烷基、 烷氧羰基、 烷氧羰基氨基、 甲酰氨基、 烷基 氨基羰基、 氨基、 烷基氨基、 ( 烷基 )( 芳基 ) 氨基烷基、 烷基氨基烷基、 杂环基烷氧基、 烷 硫基、 磺酰氨基、 烷基亚磺酰基、 烷基磺酰基、 酰氨基烷基、 酰氨基烷氧基、 酰氨基、 脒基、 芳基、 苄基、 杂环基、 杂环基烷基、 杂环基烷氧基、 苯氧基、 苄氧基、 杂芳氧基、 杂环基氨基、 氧杂烷基、 氨基磺酰基、 脒基、 胍基、 脲基、 苄氧基苯基和苄氧基可以进一步被一个或两个 以上所列的取代基取代。被认为是所述术语， 特别是对于 A 的术语的范围内的取代基 是氨基酸残基、 氨基酸酰胺和氨基酸及其酰胺的受保护的残基， 以及以下特定残基 ： -CH -CH2CF3、 -CF3、 -CHO、 -COOH、 -CN、 卤素、 -OH、 -OEt、 -C( ＝ O)NH2、 -C( ＝ O)NHEt、 -C( ＝ 3、 O)NMe2、 -COOCH3、 -COOEt、 -CH2NHC( ＝ O)NH2、 -CH(CH3)NHC( ＝ O)NH2、 -CH2NHC( ＝ O) H、 -CH2NHC( ＝ O)CH3、 -CH2C( ＝ O)NH2、 -CH2COOH、 -CH2COOEt、 -CH2NHC( ＝ O)OEt、 -CH2NHC( ＝ O)O-C6H5、 -CH2NHC( ＝ O)C( ＝ O)NH2、 -CH2NHC( ＝ O)NHEt、 -C(CH3)2OH、 -CH2NHC( ＝ O) N(CH3)2、 -CH2NHC( ＝ O)NHCH3、 -CH2NH2、 -CH(CH3)NH2、 -C(CH3)2NH2、 -CH2OH、 -CH2CH2OH、 -CH2 NHSO2CH3、 -CH2OC( ＝ O)NHEt、 -OCH3、 -OC( ＝ O)NH2、 -OCH2CH2N(CH3)2、 -OCH2CH2OCH3、 -OCH(C H3)COOH、 -SCH2COOH、 -NHC( ＝ O)NH2、 -NHC( ＝ O)NHEt、 -NHCH3、 -NHEt、 -NH(tBoc)、 -NHCH2 COOH(“甘氨酸残基” )、 -N(CH3)CH2COOH(“N- 甲基甘氨酸残基” )、 -NHC( ＝ O)NHCH2CH2Cl 、 -NHSO2NH2、 -NHEt、 -N(CH3)2、 -NH2、 -NH(CH3)C( ＝ O)NH2、 -NHSO2CH3、 -N(SO2CH3)2、 -NHC( ＝ O)OCH3、 -NHC( ＝ O)OtBu、 -NHC( ＝ O)CH3、 -SO2NH2、 -NHC( ＝ O)CH2CH2COOH、 -NHC( ＝ O) NHCH2COOH、 -CH2NHCHO、 -NHC( ＝ O)NHCH2COOEt、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)3COOEt、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)2COOEt、 -N(CH3)CH2CH2OH、 -NHC( ＝ O)OEt、 -N(Et)C( ＝ O)OEt、 -NHC( ＝ O) NH(CH2)2COOH、 -NHC( ＝ O)CH2N(CH3)2、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)3COOH、 -NHC( ＝ O)CH2NH2、 -NHC( ＝O)CH2CH2NH2、 -NHC( ＝ O)CH2NH(tBoc)、
     术语 “氨基酸 残基、 氨基酸酰胺” 等是指缺少被认为是母体结构上部分键的官能团的氨基酸等。例如， 在 下示分子 BB-03 中 ：
     在去除将 D- 脯氨酸与苯环相连的氢后， 剩余的 A 的结构是 ：
     因为它缺少环氮上的氢， 这并不是严格意义上的脯氨酸。这种结构以及缺少连接位点上的原子 ( 例如 NH2 的 H) 的类似结构在本文中被称为其各自母 体的 “残基” 。
     术语 “卤代烷基” 和 “卤代烷氧基” 分别意指被一个或多个卤素原子取代的烷基或 烷氧基。术语 “烷基羰基” 和 “烷氧羰基” 分别意指 -C( ＝ O) 烷基或 -C(O) 烷氧基。
     术语 “卤素” 意指氟、 氯、 溴或碘。在一个实施方案中， 卤素可以是氟或氯。 n
     通常当引入时定义取代基 R ， 并在说明书全文和所有独立权利要求中保持该定 义。
     在某些取代基的表征中， 据述某些取代基可以结合以形成环。 除非另有说明， 意图 这样的环可以表现出不同的不饱和度 ( 从完全饱和至完全不饱和 )， 可以包含杂原子， 并且 可以被低级烷基或烷氧基取代。
     应认识到， 本发明的化合物可以以放射标记的形式存在， 即所述化合物可以包含 一个或多个具有不同于自然界常见原子质量或质量数的原子质量或质量数的原子。 氢、 碳、 2 3 13 14 15 35 18 36 磷、 氟和氯的放射性同位素分别包括 H、 H、 C、 C、 N、 S、 F 和 Cl。含有那些放射性同位 素和 / 或其它原子的其它放射性同位素的化合物落在本发明的范围内。特别优选含氚的 13 15 ( 即 3H) 和碳 -14( 即 14C) 放射性同位素， 因为它们易于制备和检测。含有同位素 11C、 N、 O和 18F 的化合物非常适合用于正电子发射断层摄影术。本发明的放射性标记的式 I 化合物 及其前药通常可以通过本领域技术人员公知的方法进行制备。 可以方便地通过实施实施例 和合成路线中所公开的步骤， 用易得的放射性标记的试剂取代非放射性标记的试剂来制备 这样的放射性标记的化合物。
     如本文所用的 ( 特别是在权利要求中 ) 以及如本领域技术人员所理解的， 表述 “化 合物” 意图包括所述化合物的盐、 溶剂合物、 共晶体和包合络合物以及任意立体异构形式， 或者所述化合物的任意这样的形式以任意比例的混合物。因此， 根据本发明的某些实施方 案， 以盐的形式提供在药物组合物、 治疗方法和化合物本身的上下文中包括的如本文所述 1 的化合物。因此， 例如， 其中 R 是咪唑基的上述表述 “式 I 的化合物” 会包括咪唑鎓盐。在 具体实施方案中， 术语 “式 I 的化合物” 是指所述化合物或其药学可接受的盐。
     本文所述的化合物可以包含不对称中心， 并因此可以引起对映体、 非对映体及其 它立体异构形式。就绝对立体化学而言， 可将各手性中心定义为 (R)- 或 (S)-。本发明意图 包括任意比例的、 从外消旋形式至光学纯形式的所有这些可能的异构体。可以使用手性合 成子或手性试剂制备， 或者使用常规技术拆分旋光的 (R)- 和 (S)- 异构体。前缀 “rac” 是 指外消旋体。 除非另有说明， 当本文所述的化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心时， 所述化合物意图包括 E 和 Z 几何异构体。本文中出现的任何碳 - 碳双键的构型表达仅仅是 出于便利而进行选择， 并且除非明确指出， 其并非意图指明特定的构型。因此， 任意描述为 E 的碳 - 碳双键可以是 Z、 E， 或者此二者以任意比例的混合物。同样， 还意图包括所有互变 异构形式。
     术语 “溶剂合物” 是指固态的式 I 化合物， 其中适合的溶剂分子被掺入晶格中。用 于治疗性给药的适合溶剂是在给药剂量下生理学上可耐受的。 用于治疗性给药的适合溶剂 的实例是乙醇和水。当水是溶剂时， 所述溶剂合物被称为水合物。通常， 通过将化合物溶于 适当的溶剂， 并经冷却或使用反溶剂使溶剂合物分离来形成溶剂合物。一般在环境条件下 将溶剂合物干燥或共沸。在 Remington ： The Science and Practice of Pharmacy 第 19 版 (1995) 卷 1， 176-177 页中记载了包合络合物， 将其援引加入本文。最常用的包合络合物是 那些具有环糊精的包合络合物， 并且在权利要求中特别包括了所有天然的和合成的环糊精 络合物。
     术语 “药学可接受的盐” 是指由包括无机酸和碱及有机酸和碱在内的药学可接 受的无毒酸或碱制备的盐。当本发明的化合物是碱性时， 盐可以由包括无机酸和有机 酸在内的药学可接受的无毒酸制备。对于本发明的化合物， 适合的药学可接受的阴离 子包括醋酸根、 苯磺酸根 (besylate)、 苯甲酸根、 碳酸氢根、 硫酸氢根、 碳酸根、 樟脑磺酸 根、 柠檬酸根、 乙磺酸根、 富马酸根、 葡糖酸根、 谷氨酸根、 羟乙酸根、 溴离子 (bromide)、 氯离子 (chloride)、 羟乙基磺酸根、 乳酸根、 马来酸根、 苹果酸根、 扁桃酸根、 甲磺酸根、 粘酸根、 硝酸根、 双羟萘酸根、 泛酸根、 磷酸根、 琥珀酸根、 硫酸根、 酒石酸根、 三氟乙酸根、 对甲苯磺酸根、 乙酰氨基苯甲酸根、 己二酸根、 藻酸根、 氨基水杨酸根、 脱水亚甲基柠檬酸 根 (anhydromethylenecitrate)、 抗坏血酸根、 天冬氨酸根、 依地酸钙、 樟脑酸根、 右旋樟 脑磺酸根、 癸酸根、 己酸根、 辛酸根、 肉桂酸根、 环氨酸根、 二氯乙酸根、 依地酸根 (EDTA)、 乙二磺酸根、 双羟萘酸根、 丙酸酯十二烷基硫酸根、 乙磺酸根、 氟离子 (fluoride)、 甲酸 根、 龙胆酸根、 葡庚糖酸根、 葡糖醛酸根、 甘油磷酸根、 羟乙酸根、 乙醇酰对氨基苯砷酸根(glycollylarsanilate)、 己基间苯二酚离子 (hexylresorcinate)、 马尿酸根、 羟基萘甲酸 根、 碘离子 (iodide)、 乳糖酸根、 丙二酸根、 甲磺酸根 (mesylate)、 萘二磺酸根、 萘磺酸根、 烟酸根、 油酸根、 乳清酸根、 草酸根、 酮戊二酸根、 棕榈酸根、 果胶酸根 (pectinate)、 果胶酸 酯聚合物 (pectinate polymer)、 苯乙基巴比妥酸根、 苦味酸根、 氧脯氨酸根、 丙酸根、 硫氰 酸根 (rhodanide)、 水杨酸根、 癸二酸根、 硬脂酸根、 鞣酸根、 8- 氯茶碱 (theoclate)、 甲苯磺 酸根等。通过在季铵盐 (quat.) 的合成中所得到的任何反荷离子的离子交换可获得所期望 的盐。这些方法为本领域技术人员所公知。尽管会优选药学可接受的反荷离子用于制备药 物制剂， 但是可接受其它阴离子作为合成中间体。 当所述化合物含有酸性侧链时， 本发明的 化合物的适合的药学可接受的碱加成盐包括由铝、 钙、 锂、 镁、 钾、 钠和锌制备的金属盐， 或 者由赖氨酸、 N， N′ - 二苄基乙二胺、 氯普鲁卡因、 胆碱、 二乙醇胺、 乙二胺、 葡甲胺 (N- 甲基 葡糖胺 ) 和普鲁卡因制备的有机盐。
     本文所用的外消旋的、 双非外消旋的 (ambiscalemic) 和非外消旋的 (scalemic) 或对映体纯的化合物的图示采用 Maehr J.Chem.Ed.62， 114-120(1985) 中的表述 ： 实楔形 和虚楔形用于表示手性元素的绝对构型 ； 波浪线和单细线表示它代表的键不能产生任何立 体化学含义 ； 实粗线和虚粗线是除了表示外消旋特征以外， 表示所示相对构型的几何符号 ； 并且楔形轮廓和点线或虚线表示不确定绝对构型的对映体纯的化合物。 在本申请全文中出现与 “保护” 、 “脱保护” 和 “受保护的” 官能团有关的术语。这样 的术语为本领域技术人员很好地理解， 并且用于涉及用一系列试剂连续处理的方法的上下 文中。 在这样的上下文中， 保护基团是指在方法步骤期间用于掩蔽官能团的基团， 否则该官 能团会在方法步骤期间发生反应， 而该反应是不被期望的。 保护基团在该步骤中阻止反应， 但是可以随后被除去以暴露原来的官能团。除去或 “脱保护” 发生在会受到该官能团干扰 的一个或多个反应完成之后。 因此如在本发明的方法中的， 当指定一系列的试剂时， 本领域 技术人员可以容易地预见那些适于作为 “保护基团” 的基团。在化学领域的标准教科书， 如 T.W.Greene 的 ProtectiveGroups in Organic Synthesis [John Wiley&Sons， New York， 1991] 中讨论了适用于该目的的基团， 将其援引加入本文。
     有机化学家所用缩写的综合列表刊登在 Journal of Organic Chemistry 的每卷 的第 1 期中。将一般在标题为 “Standard List of Abbreviations” 的表格中提供的该列 表援引加入本文。
     一般而言， 可以通过例如下述的一般反应路线中所示的方法， 或者通过其变形， 使 用易得的原料、 试剂和常规的合成操作， 来制备本发明的化合物。在这些反应中， 还可能使 用本领域已知但未在本文中提及的不同形式。原料或是可商购的， 或是按照实施例中所述 合成的， 或是可以通过本领域技术人员公知的方法得到的。
     在临床研究中已证明 PDE4 抑制剂是有效的治疗剂。例如， 向患有哮喘和 COPD 的 患者给药西洛司特和罗氟司特 (PDE4 抑制剂 ) 表现出初期的优异结果， 但是西洛司特的效 果在长期试验中消失 [Lipworth， Lancet 365， 167-175(2005)]。遗传学研究已清楚表明 PDE4D 与缺血性中风之间的关系 (Gretarsdottir 等人， 2003.Nature Genetics.35， 1-8)。 选择性 PDE4 抑制剂 ( 例如咯利普兰 ) 还用于治疗骨丢失 [Yao 等人， J.Musculoskelet. Neuronal Interact.7， 119-130(2007)]。
     此外， 证明 PDE4 抑制剂 YM976 改善大鼠中实验诱发的间质性膀胱炎的作用， 其导
     致排尿频率降低和每次排尿时尿量增加 [Kitta 等人， BJU Int.102， 1472-1476(2008)]。在 阻塞性膀胱的啮齿动物模型中， 证明另一种 PDE4 抑制剂 IC485 与市售用于治疗过度活动 膀胱的药物酒石酸托特罗定 (tolteradine tartrate) 具有相同的疗效 [Kaiho 等人， BJU Int.101， 615-20(2008)]。这些发现表明 PDE4 抑制剂会在治疗膀胱过度活动、 发炎和疼痛 的症状方面有用。
     此外， 本发明的化合物、 组合物和方法可用于治疗癌症。已证明磷酸二酯酶活性 与骨髓恶性肿瘤相关 [Lerner 等人， Biochem.J.393， 21-41(2006) ； Ogawa 等人， Blood 99， 3390-3397(2002)]。
     此外， 特别是当如上所述地进行放射性标记， 或者通过本领域公知的方法用荧光 标记物和自旋标记物进行标记时， 本发明的化合物、 组合物和方法可以用作显像剂以及以 其它方式用于诊断和 / 或治疗。另外， 将本发明的化合物固定于固体支撑物上可以用于亲 和纯化， 并且用化学活性基团修饰本发明的化合物可以用于蛋白标记。
     对于上述许多效用， 将通式 I 的化合物与以下药剂联合给药是有利的， 所述药剂 为： 胆碱酯酶抑制剂 ( 例如他克林、 石杉碱、 多奈哌齐 ) ； NMDA 拮抗剂 ( 例如拉尼西明、 瑞马 西胺、 奈拉美生 (neramexane)、 美金刚 ) ； 钙蛋白酶抑制剂 ( 例如 CEP-3122) ； 抗氧化剂 ( 例 如维生素 E、 辅酶 Q10) 和已表现出临床疗效但其机理尚不清楚的药剂 ( 例如 dimebon)。式 I 的化合物还可以与一种或多种以下药剂联合给药以改善认知， 所述药剂为 ： 氨磺必利、 阿 托西汀、 溴隐亭、 丁螺环酮、 咖啡因、 氯丙嗪、 可乐定、 氯氮平、 地西泮、 氟马西尼、 氟西汀、 加 兰他敏、 胍法辛、 哌甲酯、 咪唑克生、 莫达非尼、 奥氮平、 帕罗西汀、 培高利特、 苯羟基丙氨酸 (phenserine)、 喹硫平、 利培酮、 利斯的明、 SGS742 和舒必利。 术语 “治疗或预防的方法” 意指改善、 预防或缓解与病症相关的症状和 / 或作用。 本文使用的术语 “预防” 是指预先将药物给药以预先阻止或缓和急性发作。医学领域 ( 本 方法权利要求所涉及的领域 ) 的技术人员认识到， 术语 “预防” 并不是绝对的术语。在医学 领域中， 该术语被理解为指将药物预防性地给药以基本上降低病状的可能性或严重性， 并 且这也是在申请人的权利要求中意图表达的含义。如本文所用的， 提及对患者的 “治疗” 意 图包括预防。
     术语 “哺乳动物” 以其字典中的含义使用。哺乳动物类中包括人类， 并且人类会是 所述方法的优选对象。
     虽然可以将式 I 的化合物以化学原料形式给药， 但是通常会优选将其作为药物组 合物的部分而提供。根据本发明的实施方案， 提供了药物组合物， 其包含式 I 的化合物或其 药学可接受的盐， 以及一种或多种其药物载体， 和任选的一种或多种其它治疗成分。 在与该 制剂中的其它成分可相容以及对其接受者无害的意义上， 所述一种或多种载体必须是 “可 接受的” 。 此外， 当在独立权利要求中提及化合物或其药学可接受的盐时， 应理解， 引用涉及 这样的化合物的独立权利要求的权利要求也包括所述化合物的药学可接受的盐， 即使在该 从属权利要求中未明确地提及所述盐。
     所述制剂包括适合于口服给药、 肠胃外 ( 包括皮下、 真皮内、 肌肉内、 静脉内和关 节内 ) 给药、 直肠给药和局部 ( 包括皮肤、 含服、 舌下和眼内 ) 给药的那些制剂。最适合的 途径可以取决于接受者的病状和病症。所述制剂可以方便地以单位剂量形式提供， 并可以 通过药学领域公知的任何方法制备。这样的方法包括使式 I 的化合物或其药学可接受的盐
     或其溶剂合物 (“活性成分” ) 与构成一种或多种助剂的载体相结合的步骤。一般而言， 通 过以下方法制备所述制剂 ： 将活性成分与液体载体或细分散的固体载体或其二者均匀且紧 密地结合， 然后视需要将产物定形成期望的剂型。
     适于口服给药的制剂可作为以下形式提供 ： 作为各自包含预定量的活性成分的独 立单位， 如胶囊剂、 扁胶囊剂或片剂 ； 作为散剂或颗粒剂 ； 作为在水性液体或非水性液体中 的溶液剂或混悬剂 ； 或者作为水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。所述活性成分还可以作 为大丸剂 (bolus)、 煎膏剂 (electuary) 或糊剂而提供。
     可以通过任选地与一种或多种助剂压制或模制来制备片剂。可以通过在适合 的机器中压制任选地与粘合剂、 润滑剂 (lubricant)、 惰性稀释剂、 润滑剂 (lubricating agent)、 表面活性剂或分散剂混合的自由流动形式 ( 如粉末或颗粒 ) 的活性成分来制备压 制片剂。 可以通过在适合的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制 备模制片剂。所述片剂可以任选地被包衣或刻痕， 并可以将其配制以提供其中的活性成分 的持续释放、 迟延释放或控制释放。所述药物组合物可以包含 “药学可接受的惰性载体” 并 且此表述意图包括一种或多种惰性赋形剂， 其包括淀粉、 多元醇、 粒化剂、 微晶纤维素、 稀释 剂、 润滑剂、 粘合剂、 崩解剂等。 若需要， 所公开组合物的片剂可以通过标准水性或非水性技 术进行包衣。 “药学可接受的载体” 也包括控释手段。
     药物组合物还可以任选地包含其它治疗成分、 抗结剂、 防腐剂、 甜味剂、 着色剂、 矫 味剂、 干燥剂、 增塑剂、 染料等。任何这样的任选成分必须与式 I 的化合物相容以保证制剂 的稳定性。所述组合物可以视需要包含其它添加剂， 其包括 ： 例如乳糖、 葡萄糖、 果糖、 半乳 糖、 海藻糖、 蔗糖、 麦芽糖、 棉子糖、 麦芽糖醇、 松三糖、 水苏糖、 拉克替醇、 palatinite、 淀粉、 木糖醇、 甘露糖、 肌醇等及其水合物， 以及氨基酸例如丙氨酸、 甘氨酸和甜菜碱， 以及肽和蛋 白质例如胚乳。
     用作药学可接受的载体和药学可接受的惰性载体以及上述其它成分的赋形剂的 实例包括但不限于粘合剂、 填充剂、 崩解剂、 润滑剂、 抗微生物剂和包衣剂。
     成人的剂量范围通常为口服 0.005mg-10g/ 天。片剂或以独立单位提供的其它给 药形式可以方便地包含一定量的式 I 化合物， 其在此剂量下或者在多剂量下有效， 例如， 含 有 5mg-500mg， 通常约 10mg-200mg 的单位。向患者给药的化合物的确切量将由主治医师决 定。但是， 使用的剂量会取决于许多因素， 其包括患者的年龄和性别、 待治疗的确切病症及 其严重性。
     剂 量 单 位 ( 例 如 口 服 剂 量 单 位 ) 可 以 包 括， 例 如， 1-30mg、 1-40mg、 1-100mg、 1-300mg、 1-500mg、 2-500mg、 3-100mg、 5-20mg、 5-100mg( 例 如 1mg、 2mg、 3mg、 4mg、 5mg、 6mg、 7mg、 8mg、 9mg、 10mg、 11mg、 12mg、 13mg、 14mg、 15mg、 16mg、 17mg、 18mg、 19mg、 20mg、 25mg、 30mg、 35mg、 40mg、 45mg、 50mg、 55mg、 60mg、 65mg、 70mg、 75mg、 80mg、 85mg、 90mg、 95mg、 100mg、 150mg、 200mg、 250mg、 300mg、 350mg、 400mg、 450mg、 500mg) 的本文所述的化合物。
     关于药物组合物及其制剂的其它信息参见， 例如， Remington ： TheScience and Practice of Pharmacy， 第 20 版， 2000。所述药剂可以通过例如， 静脉注射、 肌内注射、 皮 下注射、 腹膜内注射、 局部、 舌下、 关节内 ( 在关节内 )、 真皮内、 含服、 眼部 ( 包括眼内 )、 鼻内 ( 包括使用插管 ) 给药， 或者通过其它途径给药。所述药剂可作为以下形式口服给 药： 例如， 作为含有预定量的活性成分的片剂或扁胶囊剂、 凝胶剂、 丸剂、 糊剂、 糖浆剂、大丸剂、 煎膏剂、 膏剂 (slurry)、 胶囊剂、 散剂、 颗粒剂， 作为在水性液体或非水性液体中 的溶液剂或混悬剂， 作为水包油液体乳剂或油包水液体乳剂， 通过胶束剂型 ( 参见， 例如 WO 97/11682)， 通过脂质体剂型 ( 参见， 例如 EP736299、 WO 99/59550 和 WO 97/13500)， 通过 WO 03/094886 中所述的剂型或者以某些其它形式。所述药剂还可以透皮给药 ( 即 通 过 储 库 型 (reservoir-type) 或 骨 架 型 (matrix-type) 贴 剂、 显 微 操 作 针、 热致孔 (thermalporation)、 皮下注射针、 电离子透入疗法、 电致孔、 超声或超声促渗的其它形 式、 快 速 注 射， 或 者 任 何 上 述 方 法 的 组 合 (Prausnitz 等 人， 2004， NatureReviews Drug Discovery 3 ： 115))。所述药剂可以局部给药， 例如在受伤部位向受伤的血管局部给药。可 以将所述药剂涂敷在支架 (stent) 上。可以采用 U.S.20020061336 中所述的水凝胶颗粒制 剂， 通过高速透皮颗粒注射 (high-velocity transdermal particle injection) 技术来 给药所述药剂。在 WO00/45792、 WO 00/53160 和 WO 02/19989 中记载了其它颗粒制剂。可 以在 WO 89/04179 中找到含有膏药和促吸收剂二甲基异山梨醇酯的透皮制剂的实例。WO 96/11705 提供适合于透皮给药的制剂。可以以栓剂的形式或者通过其它阴道或直肠手段 给药所述药剂。可以如 WO 90/07923 中所述， 以跨膜制剂 (transmembrane formulation) 给药所述药剂。可以通过 U.S.6,485,706 中所述的脱水颗粒， 无创地给药所述药剂。可 以如 WO 02/49621 中所述， 以肠溶包衣药物制剂给药所述药剂。可以采用 U.S.5,179,079 中所述的制剂鼻内给药所述药剂。在 WO 00/62759 中记载了适于肠胃外注射的制剂。可 以采用 U.S.20030206939 和 WO 00/06108 中所述的酪蛋白制剂给药所述药剂。可以采用 U.S.20020034536 中所述的颗粒制剂给药所述药剂。
     可以利用若干技术经肺部途径将所述药剂单独给药或者与其它适合的成分联合 给药， 所述技术包括但不限于 ： 气管内滴入 ( 通过注射器将溶液递送至肺 )、 脂质体的气管 内递送、 吹入法 ( 通过注射器或任何其它类似装置将散剂制剂向肺部给药 ) 和喷雾法。气 雾剂 ( 例如喷射雾化器或超声雾化器、 定量吸入器 (MDI) 和干粉吸入器 (DPI)) 也可以用于 鼻内施用。气雾剂制剂是固体材料和液滴在气态介质中的稳定的分散体或混悬剂， 并且可 以置于加压可接受的抛射剂中， 所述抛射剂如氢氟烷类 (HFAs， 即 HFA-134a 和 HFA-227 或其 混合物 )、 二氯二氟甲烷 ( 或其它含氯氟烃抛射剂如抛射剂 11、 12 和 / 或 114 的混合物 )、 丙烷、 氮气等。肺部制剂可以包含促渗剂如脂肪酸和糖、 螯合剂、 酶抑制剂 ( 例如蛋白酶抑 制剂 )、 佐剂 ( 例如甘胆酸盐、 枯草菌表面活素、 span 85 和萘莫司他 )、 防腐剂 ( 例如苯扎 氯铵或氯丁醇 )， 以及乙醇 ( 通常至多 5 重量％， 但是可能高达 20 重量％ )。由于乙醇能 够改善计量阀的功能并且在某些情况下还能够改善分散体的稳定性， 通常将其包含在气雾 剂组合物中。肺部制剂还可以包含表面活性剂， 其包括但不限于胆汁盐和 U.S.6,524,557 及其参考文献中所述的那些表面活性剂。在 U.S.6,524,557 中所述的表面活性剂， 例如 C8-C16 脂肪酸盐、 胆汁盐、 磷脂或烷基糖 (alkylsaccharide) 的优点在于 ： 据报道它们中的 某些还促进制剂中化合物的吸收。适合于本发明的还有干粉制剂， 其包含与适当载体混合 的治疗有效量的活性化合物， 并且适合与干粉吸入器联用。可以加入本发明的干粉制剂 中的促吸收剂包括 U.S.6,632,456 中记载的那些促吸收剂。WO 02/080884 记载了粉末表 面改性的新方法。气雾剂制剂可以包括 U.S.5,230,884、 U.S.5,292,499、 WO 017/8694、 WO 01/78696、 U.S.2003019437、 U.S.20030165436 和 WO 96/40089( 其包含植物油 ) 中所 记 载 的 制 剂。 在 U.S.20010036481A1、 20030232019A1 和 U.S.20040018243A1 以 及 在 WO01/13891、 WO02/067902、 WO 03/072080 和 WO 03/079885 中记载了适于吸入的缓释制剂。 在 WO 03/015750、 U.S.20030008013 和 WO 00/00176 中记载了含有微粒的肺部制剂。在 U.S.20020141945 和 U.S.6,309,671 中记载了含有稳定的玻璃态粉末的肺部制剂。在 EP 1338272A1、 WO 90/09781、 U.S.5,348,730、 U.S.6,436,367、 WO 91/04011 和 U.S.6,294,153 中记载了其它气雾剂制剂， 并且 U.S.6,290,987 中记载了可以通过气雾剂或其它手段给药 的脂质体基制剂。在 U.S.20030053960 和 WO 01/60341 中记载了用于吸入的散剂制剂。如 U.S.20010038824 中所述， 可以将所述药剂鼻内给药。
     通常使用在缓冲盐水和类似载体中的药物溶液在雾化器中产生气雾剂。简单 的雾化器按照 Bernoulli 原理运行， 并使用空气或氧气流以产生喷雾颗粒。更为复杂的 雾化器则利用超声以产生喷雾颗粒。这两种类型均为本领域所公知， 并且在标准药学 教 科 书 如 Sprowls 的 American Pharmacy 和 Remington 的 The Science and Practice of Pharmacy 中有所记载。用于产生气雾剂的其它装置利用压缩气体 ( 通常是氢氟烃 (hydrofluorocarbons) 和含氯氟烃 )， 其与药物和任何需要的赋形剂在加压容器中混合， 这些装置同样在诸如 Sprowls 和 Remington 的标准教科书中有所记载。
     可以将所述药剂掺入脂质体中以改善半衰期。还可以将所述药剂与聚乙二醇 (PEG) 链结合。可以在 Harris 和 Chess， Nature Reviews Drug Discovery2 ： 214-221 及其 参考文献中找到聚乙二醇化方法和含有 PEG- 结合物的其它制剂 ( 即 PEG- 基水凝胶、 PEG 改 性的脂质体 )。可以通过纳米蜗形 (nanocochleate) 或蜗形 (cochleate) 递送载体给药所 述药剂 (BioDeliverySciences International)。可以使用如 U.S.5,204,108 中所记载的 制剂， 经粘膜 ( 即透过粘膜表面， 如阴道、 眼或鼻 ) 给药所述药剂。如 WO 88/01165 中所述， 可以将所述药剂配制成微胶囊。 可以使用 U.S.20020055496、 WO00/47203 和 U.S.6,495,120 中所记载的制剂口腔内给药所述药剂。可以使用 WO 01/91728A2 中所记载的纳米乳液制剂 递送所述制剂。
     一般而言， 可以通过例如下述的一般反应路线所示的方法， 或者通过其变形， 使用 易得的原料、 试剂和常规合成步骤， 来制备式 I 的化合物。在这些反应中， 还可能使用本领 域已知但未在本文中提及的不同形式。
     本发明涉及如上所述的式 Ia、 Ib 或 Ic 的化合物 ：
     根据本发明的某些实施方案， Y 是 CH。根据其它实施方案， Y 是 N。
     根据本发明的某些实施方案， U 是 S。根据其它实施方案， U 是 O。
     根据本发明的某些实施方案， V 选自 H、 CH3 和 NH2。根据某些实施方案， V 是 H。根 据某些实施方案， V 是 CH3。根据某些实施方案， V 是 NH2。
     根据本发明的某些实施方案， B 是在 3- 位、 4- 位具有取代基以及在 3- 位和 4- 位均 具有取代基的苯基。在某些实施方案中， B 选自 3- 氯苯基、 3- 硝基苯基、 3- 氰基苯基、 3- 溴 苯基、 3- 乙酰基苯基、 3- 三氟甲基苯基和 3- 甲硫基苯基。在某些实施方案中， B 是苯并 [c] [1， 2， 5] 噁二唑 -5- 基和苯并 [d][1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基。
     根据本发明的某些实施方案， R1 和 R2 均为 H。在某些实施方案中， R1 是 H 并且 R2 是 OH。
     根据本发明的某些实施方案， A 是任选取代的苯基 ； 在其它实施方案中， A 选自任 选取代的 5- 元和 6- 元氮杂环。根据本发明的某些实施方案， A 选自任选取代的吡啶基、 苯 基、 吗啉 -4- 基、 哌嗪 -1- 基、 哌啶 -1- 基、 咪唑 -1- 基、 吡唑 -1- 基和吡唑 -5- 基。
     根据本发明的某些实施方案， X 选自 CH、 C-F、 C-OH 和 N。
     根据本发明的某些实施方案， 所述化合物为下式的化合物
     其中
     A2 是苯基、 5- 元杂芳基、 6- 元杂芳基、 4-7 元非 - 芳基杂环或稠合双环 ； 7
     R 是H或F；
     R8 选自 ： 卤素、 硝基、 乙酰基、 羟乙基、 氨基、 甲硫基、 三氟甲基、 甲氧基甲基、 甲氧羰 7 8 基、 三氟甲氧基、 氰基和 1， 3， 4- 噻二唑 -2- 基， 或者 R 和 R 共同为亚甲二氧基、 ＝ N-O-N ＝、 -NH-CH ＝ N- 或二氟亚甲二氧基 ；
     R14 选自 ： H、 卤素、 卤代烷基、 烷基、 酰基、 烷氧基烷基、 羟烷基、 羰基、 苯基、 杂芳基、 苯磺酰基、 羟基、 烷氧基、 卤代烷氧基、 氧杂烷基、 羧基、 烷氧羰基、 烷氧羰基烷基、 烷氧羰基 氨基、 羧基烷基、 羧基烷氧基、 羧基烷硫基、 烷氧羰基氨基烷基、 羧基烷基羰基氨基、 甲酰氨 基、 氨基羰氧基、 烷基氨基羰基、 二烷基氨基羰基、 氨基羰基烷基、 氰基、 乙酰氧基、 硝基、 氨 基、 烷基氨基、 二烷基氨基、 氨基烷基、 ( 烷基 )( 芳基 ) 氨基烷基、 烷基氨基烷基、 二烷基氨 基烷基、 二烷基氨基烷氧基、 烷基 ( 羟烷基 ) 氨基、 杂环基烷氧基、 巯基、 烷硫基、 烷基磺酰 基、 烷基磺酰氨基、 烷基亚磺酰基、 烷基磺酰基、 芳硫基、 芳基磺酰基、 芳基磺酰氨基、 芳基亚 磺酰基、 芳基磺酰基、 酰氨基烷基、 酰氨基烷氧基、 酰氨基、 脒基、 芳基、 苄基、 杂环基、 杂环 基烷基、 苯氧基、 苄氧基、 杂芳氧基、 杂环基氨基、 羟基亚胺基、 烷氧基亚胺基、 氧杂烷基、 氨 基磺酰基、 三苯甲基、 脒基、 胍基、 脲基、 -NHC( ＝ O)NH 烷基、 -NHC( ＝ O)NH- 杂环基、 -烷 基 -NHC( ＝ O)N( 烷基 )2、 杂环基烷基羰基氨基、 苄氧基苯基、 苄氧基、 氨基酸残基、 氨基酸酰 胺、 受保护的氨基酸残基、 受保护的氨基酸酰胺残基、 N- 甲基化氨基酸和 N- 甲基化氨基酸 酰胺 ；
     或 者， R 14 可 以 选 自 ： H、 -CH 3、 -CH 2CF 3、 -CF 3、 -CHO 、 -COOH 、 -CN 、 卤
     素、 -OH、 -OEt、 -C( ＝ O)NH2、 -C( ＝ O)NHEt、 -C( ＝ O)NMe2、 -COOCH3、 -COOEt、 -CH2NHC( ＝ O)NH 2、 -CH(CH 3)NHC( ＝ O)NH 2、 -CH 2NHC( ＝ O)H 、 -CH 2NHC( ＝ O)CH 3、 -CH 2C( ＝ O) NH2、 -CH2COOH、 -CH2COOEt、 -CH2NHC( ＝ O)OEt、 -CH2NHC( ＝ O)O-C6H5、 -CH2NHC( ＝ O) C( ＝ O)NH2、 -CH2NHC( ＝ O)NHEt、 -C(CH3)2OH、 -CH2NHC( ＝ O)N(CH3)2、 -CH2NHC( ＝ O) NHCH3、 -CH2NH2、 -CH(CH3)NH2、 -C(CH3)2NH2、 -CH2OH、 -CH2CH2OH、 -CH2NHSO2CH3、 -CH2OC( ＝ O) NHEt、 -OCH3、 -OC( ＝ O)NH2、 -OCH2CH2N(CH3)2、 -OCH2CH2OCH3、 -NHC( ＝ O)NH2、 -NHC( ＝ O) NHEt、 -NHCH3、 -NHEt、 -NH(tBoc)、 -NHCH2COOH、 -N(CH3)CH2COOH、 -NHC( ＝ O)NHCH2CH2Cl、 -NHSO2NH2、 -NHEt、 -N(CH3)2、 -NH2、 -NH(CH3)C( ＝ O)NH2、 -NHSO2CH3、 -N(SO2CH3)2、 -NHC( ＝ O)OCH3、 -NHC( ＝ O)OtBu、 -NHC( ＝ O)CH3、 -SO2NH2、 -NHC( ＝ O)CH2CH2COOH、 -NHC( ＝ O) NHCH2COOH、 -CH2NHCHO、 -OCH(CH3)COOH、 -SCH2COOH、 -NHC( ＝ O)NHCH2COOEt、 -NHC( ＝ O) NH(CH2)3COOEt、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)2COOEt、 -N(CH3)CH2CH2OH、 -NHC( ＝ O)OEt、 -N(Et)C( ＝ O)OEt、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)2COOH、 -NHC( ＝ O)CH2N(CH3)2、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)3COOH、 -NHC( ＝ O)CH2NH2、 -NHC( ＝ O)CH2CH2NH2、 -NHC( ＝ O)CH2NH(tBoc)、
     和被任何上述 基团取代的单环杂环 ；
     R14a 选自羟基、 羧基、 烷氧羰基、 羧基烷基羰基氨基、 羧基烷基氨基羰基氨基、 胍基、 氨基酸残基和 N- 甲基化氨基酸的残基、 5- 四唑基和被任何上述基团取代的单环杂环 ； 14a
     或者， R 可以选自 ： -COOH、 -OH、 -COOCH3、 -COOEt、 -CH2COOH、 -CH2COOEt、 -CH2NH C( ＝ O)OEt、 -CH2NHC( ＝ O)C( ＝ O)NH2、 -NHCH2COOH、 -OCH(CH3)COOH、 -SCH2COOH、 -N(CH3) CH 2COOH 、 -NHSO 2NH 2、 -NHC( ＝ O)CH 2CH 2COOH 、-NHC( ＝ O)NHCH 2COOH 、-NHC( ＝ O) NHCH 2COOEt 、-NHC( ＝ O)NH(CH 2) 3COOEt 、-NHC( ＝ O)NH(CH 2) 2COOEt 、-NHC( ＝ O) NH(CH2)2COOH、 -NHC( ＝ O)NH(CH2)3COOH、 5- 四唑基和被任何上述基团取代的单环杂环 ；
     R15 选自 H、 NO2、 OH、 NH2 和 -NHSO2NH2 ； 或者 15 14
     R 与 R 共同形成亚甲二氧基。
     下文实施例 BB-01 中记载了其中的 A2 是与被羧酸取代的单环杂环相连的单环杂环的实施方案的实例 ：示例性的羧基烷氧基和羧基烷硫基分别是乳酸和巯基乙酸。示例性的氨基酸是甘氨酸、 丙氨酸和脯氨酸。
     在本发明的某些实施方案中， 所述化合物选自以下所示的化合物 ：
     表 1. 化合物号 BB-01 BB-03 BB-04 BB-05 BB-06 BB-07 BB-08 BB-09 X CF CF CF CF CF CF CH CH R1 N- 氮杂环丁烷 (R/S)-2- 羧酸 N-(R) 脯氨酸 N- 氮杂环丁烷 (R)-2- 羧酸 N- 氮杂环丁烷 (S)-2- 羧酸 N-CO-CH2-N(O)Me2 N(CH3)-CH2-COOH N- 氮杂环丁烷 (R)-2- 羧酸 N- 氮杂环丁烷 (S)-2- 羧酸表 2 和 3 中给出并不落在要求保护的种类范围内但表明所述合成的普遍适用性的 其他示例性化合物。
     表 2.
     表3
     26CN 101918381 A说M CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CO CO Q CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CO CH2 CH2 L CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2明书G N O N CH CH CH N N N N CH N N N R14 CONH2 COCH3 NH-CO2-Et NCONH2 NH2 H CO2Et CH3 CO-NHEt H H CONH-Et H R8 Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl Cl20/76 页化合物号 BA-31 BA-43 BA-44 BA-45 BA-46 BA-47 BA-48 BA-49 BA-50 BA-52 BA-54 BA-71 BA-72 BA-73
     R7 H H H H H H H H H H H H H H落在上述 Ia、 Ib 和 Ic 类范围内的所有化合物作为 PDE4 抑制剂是有用的。在审查 时可以发现， 由于现有技术， 目前未排除的种类 (species) 和类属 (genera) 对本申请的发 明人而言是不具有可专利性的。在此情况下， 应认为在申请人的权利要求中对种类和类属 的排除是专利申请与审查中的人为结果， 而非反映发明人的构思或者其发明的描述。在组 合物方面， 本发明是除了公有的那些化合物之外的所有式 Ia、 Ib 和 Ic 的活性化合物。
     一般而言， 可以通过例如下述的一般反应路线所示的方法， 或者通过其变形， 使用 易得的原料、 试剂和常规合成步骤， 来制备式 Ia、 Ib 和 Ic 的化合物。在这些反应中， 还可能 使用本领域已知但未在本文中提及的不同形式。
     上表 1 列出代表本发明实施方案的化合物。 以下提供了获得式 I 的化合物的方法。 可以通过与本文例示了其合成的那些化合物类似的合成方式制备式 I 的其它化合物。以下 操作例示了这样的方法。此外， 虽然本文所述的合成可能导致制备具有特定立体化学的对映体， 但是任何立体异构形式的式 I 化合物均包括在本发明范围内， 并且， 基于本文所述的 步骤， 具有与本文所述不同的立体异构形式的式 I 化合物的制备对于化学领域的技术人员 而言是显而易见的。
     合成方法
     通常可以通过在苯并唑的 4 位和 6 位依次引入取代来制备式 I 的化合物。可以 通过有机金属偶联方法 ( 例如 Suzuki 反应、 Stille 反应 ) 或者通过卤素置换来实现 C4 位 取代基的引入以形成 C-C 键， 所述卤素置换使用用环状或杂环 NH 化合物的金属辅助置换， 在苯并唑的 C4 位形成 C-N 键。在 G1( 路线 1) 中显示了本部分提及的原子编号。可以用在 C-2 具有多个官能团 ( 其可包括 V ＝ H、 CH3、 受保护的或衍生化的胺或醚 ) 的苯并唑衍生物 + 来实施这些反应。可以通过重氮基 (-N ＝ N) 的媒介作用转化苯并唑 (V ＝ NH2) 的 2- 氨基 以形成 V ＝ H( 例如 )。可以通过多种途径在 C-6 位引入取代基。所用的这些化学作用取决 于存在于 C-6 的 1- 碳官能团 (CH3、 CHO、 COOR’ 、 CN 等 )。具有易于进行标准官能团相互转 化的不同官能团 ( 例如可以提供醇、 卤代烷的烷基、 酯、 腈 ) 的苯并唑可以通过标准方法进 行处理， 并且这些官能团可以包括能够生成醇的醛、 腈和酯， 所述醇可以转化成碳酸酯或卤 代烷。这些官能团使得能够通过形成 C-C 的化学作用引入芳基、 杂芳基取代基。或者， 卤代 烷、 烷基 OTs、 烷基 OTf 等的亲核置换使得能够通过形成 C-N 键的途径引入取代基， 以引入 环状的、 非环状的、 胺衍生的官能团 (G7)。此策略使得能够在苯并唑核的 C6 位引入非环状 的、 杂环的或杂芳基衍生的取代基。
     路线 A1
     此外， 可以以任一顺序实施 C6 或 C4 取代基的引入， 即先形成 C4 取代基然后形成 C6 取代基 ( 路线 A， G1- ＞ G2) 或者反之 ( 路线 B， G1- ＞ G5)。这些取代基的任一个均可具 有可通过本领域公知的标准官能团转化化学作用进一步衍生化的其它官能团。 这些化学作 用中的一些包括从适当的胺、 羧酸、 醇或苯酚基团形成酰胺、 磺酰胺、 脲、 咪唑酮、 噁唑酮和 氨基甲酸酯。此外， 当 R1 基团含有邻 - 卤代 N- 杂环 ( 例如 2- 卤代吡啶或 2- 卤代嘧啶 )G8 时， 实施卤代 ( 或衍生自吡啶 -2- 酮的 -OTf、 ONf) 基团的亲核置换。这些亲核试剂的实例 包括使得能够引入其它 -O、 -S 或 -N 连接的取代基以得到 G9 的胺 ( 包括伯胺、 仲胺、 叔胺 ； 非环状或环状的胺 ) 或者含有 NH 的杂芳基 ( 例如取代咪唑或吡唑 ) ； 或者醇 / 硫醇。或者，
     可以将适当地官能化的吡啶转化成相应的 2-OTf 或 2-ONf， 其继而可以参与类似的化学作用。
     路线 A2
     为了形成杂环或杂芳环， 还可以从非环状中间体组成 R1 基团 ( 路线 A3)。这些化 学作用的实例包括从酰肼 (G11) 形成 5- 元杂芳基 (G12) 如噁二唑、 噻二唑、 三唑 ； 当 C4 或 C6 取代基是烯或乙酰基时， 从 2- 卤代 - 酮或经偶极环化加成反应形成噻唑 (G10- ＞ G13))。 或者， 可以通过 Diels-Alder 或杂 -Diels-Alder 化学作用， 使用在 C4 或 C6 位具有亲双烯 体或二烯的适当地取代的烷基芳基醚， 来形成 6- 元杂芳基或杂环。
     路线 A3由于在 C6 具有醛、 酮、 腈或酯， 有机金属 ( 格氏试剂或有机锌试剂 ) 的加成使 得能够形成含有杂原子的取代基， 其中 Ra 或 Rb 带有杂原子。或者， 当 C6 是 C-H 时， 经 Friedle-Craft 酰化得到酮 (G17)， 其随后在连接位不同 (G16) 的条件下， 被转化成仲醇 或者仲胺或叔胺 ( 通过亚 ( 通过还原 )、 叔醇 ( 通过使用 RMgX 或 R2Zn 的烷基 / 芳基加成 )， 胺 / 肟的介导 ) ； 或者转化成 -CH2-。
     路线 A4
     上述途径描述修饰苯并唑核的方法。另一方面， 还可以以 1， 3 官能化苯基或杂芳 基 (G20 或 G22) 为原料， 然后将其通过构建稠合 5- 元环进行处理， 以在对应于类 I 的类似 物的合成后期阶段组成苯并唑核。路线 A5 中描述了此途径。在下文部分中的某些非限制 性具体实施例中还提供了此策略的实例。
     路线 A5
     可以通过本领域公知的标准官能团转化来形成存在于 R1 中的取代基的多种选 择。这些标准官能团转化中的一些包括从具有 R2、 R3 或 Ar 环片段的适合的胺、 羧酸、 醇或 苯酚基团形成酰胺、 磺酰胺 (sulfomanide)、 脲、 咪唑酮、 噁唑酮、 氨基甲酸酯。例如当 R1 基 团含有邻 - 卤代吡啶或嘧啶时， 实施卤代 ( 或衍生自吡啶酮的 -OTf、 ONf) 基团的亲核置换。 亲核试剂的实例包括胺 ( 包括伯胺、 仲胺、 叔胺 ； 非环状或环状的胺 )、 醇或含有 HN 的杂环 基团 ( 例如取代咪唑或吡唑 )。这些置换反应可以用碱或叔胺碱进行 ； 或者可以通过使用 有机金属试剂如 Pd 或 Al 试剂来介导。 路线 1 提供了实例 1 的合成概要。30
     CN 101918381 A说明书24/76 页BA-01
     (2， 6- 二溴 -4- 氰基 - 苯基 )- 硫脲 (2)。
     向 4- 氨基 -3， 5- 二溴苄腈 (11g， 40mmol) 在甲苯 (80ml) 中的悬浮液中加入硫光气 (5.06g， 44mmol， 1.1eq.)。将反应混合物在回流下搅拌 16h。冷却至室温后， 真空除去挥发 性物质， 将残余物悬浮于二氧六环 (80mL) 中并在室温搅拌下用铵 (27w/w％， 9.85g) 处理。 30min 后， 真空除去二氧六环。用乙醚 (50mL)、 水 (50mL) 和乙醚 (50mL) 洗涤所得固体， 真 1 空干燥以得到 9.6g( 收率 70％ ) 标题化合物 (2)。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)
     2- 氨基 -4- 溴 - 苯并噻唑 -6- 腈 (3)。
     在 Ar 中， 将化合物 (2)(1.3g， 3.66mmol)、 CuI(70mg， 0.366mmol， 0.1eq.)、 1， 10- 菲 咯啉 (70mg， 0.366mmol) 和 Cs2CO3(1.8g， 5.5mmol， 1.5eq.) 在二氧六环 (20mL) 中的反应混 合物在回流下搅拌 2h。冷却至室温后， 加入水 (100mL) ； 过滤固体， 先后用水 (100mL×3) 和乙醚 (50mL×3) 洗涤。在室温下将固体真空干燥过夜， 以得到 1g( 定量收率 ) 期望产物 1 (3)。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)
     2- 氨基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -6- 腈 (4)。
     在氩气中， 将化合物 (3)(750mg， 3mmol)、 3- 硝基苯基 - 硼酸 (752mg， 4.5mmol)、 三 苯基膦 (470mg， 1.8mmol， 0.6eq.)、 Pd(OAc)2(130mg， 0.6mmol， 0.2eq.) 在二氧六环 (30mL)、 乙醇 (9mL) 和 ( 水溶液 )1N Na2CO3(9mL， 3eq.) 中的混合物在回流下搅拌过夜。 用水 (100mL) 稀释反应混合物并用乙酸乙酯 (3×100mL) 萃取。使合并的有机相通过过滤漏斗。蒸发溶 剂得到残余物， 将其用二氯甲烷 (3×20mL) 处理以得到 530mg( 收率 45％ ) 期望产物 (4)。 1H-NMR-(400MHz， DMSO-d6)。MS(ESI+) ： 301.7(M+1)。LC-MS ： 90％。
     [6- 氰基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (5)。
     将 化 合 物 (4)(230mg， 0.77mmol)、 (Boc)2O(220mg， 1mmol， 1.3eq.) 和 DMAP(15mg， 0.08mmol， 0.1eq.) 在 MeCN(10mL) 中的反应混合物在室温下搅拌 48h。减压除去挥发性物 质以得到 300mg( 收率 98％ ) 作为黄色固体的期望产物 (5)。
     [6- 甲酰基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (6)。
     在 -60℃下， 用注射器向化合物 (5)(150mg， 0.38mmol) 在二氯甲烷 (8mL) 中的溶液 中加入 DIBAL-H(1mL， 1N 己烷溶液 )。添加完成后， 在 2h 内使反应混合物升温至室温。然后 加入 1mL 3N HCl 水溶液， 并将混合物在室温下搅拌 20min， 接着再加入 1mL 3N HCl 水溶液。 将所得混合物搅拌 30min 后， 先后加入二氯甲烷 (20mL) 和水 (20mL)。分离有机层， 然后用 二氯甲烷 (3×15mL) 萃取水层。 用 Na2SO4 干燥合并的有机层。 减压蒸发溶剂得到 120mg( 收 率 79％ ) 粗产物 (6)。将由此获得的产物在未经任何进一步纯化的情况下用于下一步骤。
     [6-[(4- 氟苯基 )- 羟甲基 ]-4-(3- 硝基苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁 酯 (7)。
     在 -78 ℃下， 用注射器向醛 (6)(120mg， 0.3mmol) 在 THF(4mL) 中的溶液中滴加 4- 氟苯基溴化镁 (1ml， 1N THF 溶液 )。 使混合物升温至室温， 并通过 TLC 分析监测反应。 在 原料醛被耗尽后， 通过加入饱和 NH4Cl( 水溶液 ) 终止反应， 然后加入 3N HCl 水溶液将混合 物调节至 pH ＝ 3。用 EtOAc(3×15mL) 萃取混合物。用 Na2SO4 干燥合并的有机相， 并除去 溶剂得到残余物， 将其先后用己烷 / 二氯甲烷 (1 ∶ 2) 和二氯甲烷作为洗脱剂， 经硅胶色谱 纯化以得到 65mg( 收率 44％ ) 产物 (7)。 6-(4- 氟苄基 )-4-(3- 硝基苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 BA-01。
     用 Et3SiH(500μL， 3mmol， 47eq.) 处理化合物 (7)(32.5mg， 0.066mmol) 的溶液。 将 混合物在室温下搅拌 130min， 直至原料 XM-17 被耗尽。 减压除去挥发性物质。 用碳酸氢钠溶 液洗涤残余物， 用 EtOAc(3×15mL) 萃取， 并干燥。蒸发得到残余物， 将其先后用二氯甲烷 / 己烷 (1 ∶ 1、 2 ∶ 1、 3 ∶ 1、 4 ∶ 1 各 20mL) 和二氯甲烷作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以得到 21mg 含杂质的产物。将由此获得的产物用己烷研磨以得到 7.6mg 期望产物 BA-01。1HNMR。 LCMS ： 99％。
     以下路线以类似方式提供应用于实施例的合成概要。
     BA-02
     [6- 羟甲基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (8)。
     在 0℃下， 向醛 (6)(2g， 4.3mmol， 1eq) 在 DCM(20ml) 和 MeOH(10ml) 的混合物中的 溶液中分批加入 NaBH4(760mg， 20mmol， 5eq.)。在 0℃至室温下搅拌混合物直至原料耗尽。 将混合物加入饱和 NH4Cl 水溶液 (200ml) 中， 并用 EtOAc(20ml×3) 萃取。用 MgSO4 干燥合
     并的有机层。减压除去溶剂得到残余物， 将其先后用 DCM 和 DCM/MeOH(100 ∶ 1) 作为洗脱 剂， 经硅胶色谱纯化以 29％的收率得到 500mg 醇 (8)。
     [6- 溴甲基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (9)。
     向 (8)(500mg， 1.25mmol， 1eq.) 在 DCM(12ml) 中 的 溶 液 中 加 入 Ph3P(340mg， 1.25mmol， 1eq.)。将混合物在室温下搅拌 20min 后， 一次性加入 NBS(230mg， 1.25mmol， 1eq.)。在室温下搅拌混合物直至 (8) 耗尽。减压除去挥发性物质以得到残余物， 将其用己 烷 /DCM(1 ∶ 1 其后 1 ∶ 1.5) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以 22％的收率得到 126mg 期望 的溴化物 (9)。
     [6- 咪唑 -1- 基甲基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (10)。
     在 0 ℃下， 向在 DMF(5mL) 中含有 (9)(46mg， 0.13mmol) 的 20mL 小瓶中加入咪唑 (200mg， 过量 )。使反应混合物升温至室温， 并在室温下搅拌 16h。将混合物倾入 30mL 冰水 中， 将其用乙酸乙酯 (3×20mL) 萃取， 用水 (2×20mL)、 盐水 (20mL) 洗涤， 并用 Na2SO4 干燥。 除去溶剂后， 将残余物用乙酸乙酯 / 己烷作为洗脱剂， 经硅胶柱色谱纯化以 60％的收率得 1 到 28mg 产物 (10)。 H-NMR(400MHz， CDCl3) 6- 咪唑 -1- 基甲基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 HCl 盐 BA-02。
     在室温下， 向含有 (10)(28mg， 0.07mmol) 的 20mL 小瓶中加入 HCl(4N 二氧六环溶 液， 1mL)。将混合物在室温下搅拌 16h。加入乙醚 (20mL)， 并过滤出形成的固体， 用乙醚 1 (20mL) 洗涤， 干燥以得到 23mg(70％ ) 标题产物 BA-02。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     BA-03
     (4- 溴 -6- 氰基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (11)。
     将化合物 (3)(25g， 100mmol)、 (Boc)2O(26.8g， 123mmol， 1.23eq.) 和 DMAP(352mg， 2.9mmol， 0.03eq.) 在 THF(260mL) 中 的 反 应 混 合 物 在 室 温 下 搅 拌 过 夜。 另 外 加 入 5g(Boc)2O 和 350mg DMAP， 并将所得混合物搅拌 48h。减压除去挥发性物质， 并将残余物 用 Hex/DCM(2 ∶ 1 其后 1 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶 (300g， 常规 ) 色谱纯化以得到产物 (24g)， 将其用己烷进一步研磨以得到作为浅黄色固体的期望产物 (11)(20g， 收率 56％ )。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3)
     (4- 溴 -6- 甲酰基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (12)。
     在使温度保持在约 0℃的情况下， 用加料漏斗向化合物 (11)(10g， 28mmol) 在二氯
     甲烷 (200mL) 中的溶液中滴加 DIBAL-H(84mL， 1N 己烷溶液， 3eq.)。添加完成后， 将反应混 合物在室温下搅拌过夜。在搅拌下将反应混合物倾入 1.2N HCl(200ml) 中。经过滤收集黄 色沉淀并用水洗涤 ( 得到 3.65g 脱 Boc 产物 )。分离母液并用 Na2SO4 干燥。除去溶剂得到 期望产物 (12) 的粗品 (4.5g， 收率 45％ )。将由此得到的化合物在未经任何进一步纯化的 情况下用于下一步骤。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)MS(ESI+) ： 301.7(M+1)
     {4- 溴 -6-[(4- 氟 - 苯基 )- 羟基 - 甲基 ]- 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (13)。
     在 -50℃下， 向醛 (12)(4.5g， 10mmol) 在无水 THF(200mL) 中的溶液中滴加 4- 氟苯 基溴化镁在 THF(30ml， 1N) 中的溶液。添加完成后， 使所得混合物过夜升温至室温。然后加 入饱和 NH4Cl 水溶液。用 EtOAc(3×20m1) 萃取混合物。用 Na2SO4 干燥合并的有机层。除去 溶剂得到残余物， 将其先后用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 2 至 3 ∶ 1) 和 DCM 作为洗脱剂， 经硅胶 (100g， 常规 ) 色谱纯化以得到回收的原料醛 (12)(1.7g) 和期望产物 (13)(0.82g， 收率 25％ )。
     4- 溴 -6-(4- 氟苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 (14)。
     向 化 合 物 (13)(205mg， 0.45mmol) 在 TFA(3ml) 中 的 溶 液 中 一 次 性 加 入 Et3SiH(1mL， 6.25mmol， 14eq.)。将混合物在室温下搅拌过夜。减压除去挥发性物质。将残 余物用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 5) 研磨。干燥后， 得到作为浅黄色固体的期望产物 (14)(145mg， 收 率 96％ )。
     4- 苯并 [1， 2， 5] 噁二唑 -5- 基 -6-(4- 氟 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 BA-03。
     在 Ar 中， 将化合物 (14)(118mg， 0.35mmol)、 硼酸 (86mg， 0.52mmol， 1.5eq.)、 三苯 基 膦 (70mg， 0.26mmol， 0.6eq.)、 Pd(OAc)2(20mg， 0.09mmol， 0.2eq.) 在 二 氧 六 环 (4mL) 和 ( 水溶液 )1N Na2CO3(1mL， 3eq.) 中的混合物在回流下搅拌过夜。 冷却至室温后， 减压除去挥 发性物质以得到残余物， 将其先后用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 和 DCM 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化 以得到产物 (20mg)， 将其用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 进一步研磨以得到期望产物 BA-03(13.5mg， 收率 10％ )。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)MS(ESI+) ： 301.7(M+1)LC-MS ： 96.8％。
     BA-04
     4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6-(4- 氟 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺BA-04。 用注射器向化合物 (15)(100mg， 0.2mmol) 在 TFA(2ml) 中的混合物中一次性加入 Et3SiH(0.5ml， 15eq.)。将混合物在室温下搅拌过夜。减压除去挥发性物质。用己烷洗涤 残余物， 然后将其先后用二氯甲烷和二氯甲烷 / 甲醇 (200 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯 化以得到期望产物， 将其用己烷 / 二氯甲烷 (10 ∶ 1) 研磨以得到期望产物 BA-04(31mg， 收 率 41％ )。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)MS(ESI+) ： (M+1)LC-MS ： 99％。
     BA-05
     [4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6-[(4- 氟 - 苯基 )- 羟基 - 乙基 ]- 苯并 噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (15)。
     在 Ar 中， 将化合物 (13)(316mg， 0.7mmol)、 硼酸 (175mg， 1.05mmol， 1.5eq.)、 三苯 基膦 (120mg， 0.42mmol， 0.6eq.)、 Pd(OAc)2(40mg， 0.14mmol， 0.2eq.) 在二氧六环 (9mL) 和 ( 水溶液 )1N Na2CO3(3mL， 3eq.) 中的混合物在回流下搅拌过夜。冷却至室温后， 减压除去 挥发性物质以得到残余物， 将其先后用己烷 / 二氯甲烷 (2 ∶ 1 至 1 ∶ 5) 和 DCM 作为洗脱 剂， 经硅胶色谱纯化以得到产物 (15)(236mg， 收率 68％ )。
     (2- 氨基 -4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 - 苯并噻唑 -6- 基 )-(4- 氟 - 苯 基 )- 甲醇 BA-05。
     向在二氯甲烷 (1ml) 中的化合物 (15)(70mg， 0.14mmol) 中加入 TFA(0.6ml)。 将混 合物在室温下搅拌过夜。减压除去挥发性物质。将残余物先后用二氯甲烷和二氯甲烷 / 甲 醇 (100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以得到作为灰色固体的期望产物 BA-05(18.5mg， 收率 34％ )。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)MS(ESI+) ： (M+1)LC-MS ： 95％。
     BA-06{4- 溴 -6-[ 羟基 -(2- 甲基 -2H- 吡唑 -3- 基 )- 甲基 ]- 苯并噻唑 -2- 基 }- 氨基 甲酸叔丁酯 (16)。
     在 -78℃下， 用注射器向 1- 甲基吡唑 (1.13g， 13.8mmol) 在 THF(20ml) 中的溶液中 滴加 n-BuLi(2.5N 己烷溶液， 4ml)。将所得混合物在 -78℃至室温下搅拌 1.5h。将溶液贮 藏于冰箱中用于进一步使用。在 -58℃下， 在搅拌下用注射器向醛 (12)(357mg， 1mmol) 在 THF(10ml) 中的溶液中滴加上述制备的锂试剂 (8ml， 3.2mmol， 1.6eq.)。添加完成后， 在 2h 内使混合物升温至室温。将混合物加入 NH4Cl 水溶液中， 并用乙酸乙酯萃取。分离有机层， 并用 MgSO4 干燥。除去溶剂得到残余物， 将其用 DCM/MeOH(100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色
     谱纯化以得到期望产物 (16)(416mg， 收率 95％ )。
     {4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6-[ 羟基 -(2- 甲基 -2H- 吡唑 -3- 基 )- 甲 基 ]- 苯并噻唑 -2- 基 }- 氨基甲酸叔丁酯 (17)。在 Ar 中， 将 (16)(206mg， 0.47mmol)、 硼 酸 (120mg， 0.705mmol， 1.5eq.)、 Pd(OAc)2(21mg， 0.098mmol， 0.2eq.)、 PPh3(75mg， 0.282mmol， 0.6eq.) 在 1N Na2CO3(2ml) 和 二氧六环 (6ml) 中的混合物在 100℃ ( 油浴 ) 下搅拌过夜。冷却至室温后， 除去挥发性物 质， 并在乙酸乙酯和水之间分配残余物。分离 EA 层， 并通过一段 MgSO4。除去溶剂以得到粗 产物 (17)(260mg， 收率 115％ )。未进行进一步纯化。
     (2- 氨 基 -4- 苯 并 [1， 3] 间 二 氧 杂 环 戊 烯 -5- 基 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 )-(2- 甲 基 -2H- 吡唑 -3- 基 )- 甲醇 BA-06。
     用注射器向化合物 (17)(260mg， 0.47mmol) 在 TFA(1ml) 中的溶液中一次性加入 Et3SiH(1ml， 6mmol， 30eq.)。将混合物在室温下搅拌过夜。减压除去挥发性物质。用己烷洗 涤残余物， 然后将其用二氯甲烷 / 甲醇 (100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以得到期望 产物 BA-06(43mg， 收率 25％ )。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ； MS(ESI+) ： (M+1)， LC-MS ： 97％。
     BA-07
     [6-[(4- 氟 - 苯基 )- 羟基 - 甲基 ]-4-(3- 三氟甲基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨 基甲酸叔丁酯 (18)。
     在 Ar 中， 将化合物 (13)(170mg， 0.375mmol)、 硼酸 (110mg， 0.563mmol， 1.5eq.)、 三 苯基膦 (60mg， 0.225mmol， 0.6eq.)、 Pd(OAc)2(20mg， 0.075mmol， 0.2eq.) 在二氧六环 (6mL) 和 ( 水溶液 )1N Na2CO3(2mL， 3eq.) 中的混合物在回流下搅拌过夜。冷却至室温后， 减压除 去挥发性物质以得到残余物， 将其用二氯甲烷 / 甲醇 (100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯 化以得到产物 (18)(136mg， 收率 70％ )。
     6-(4- 氟 - 苄基 )-4-(3- 三氟甲基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 BA-07。
     向化合物 (18)(91mg， 0.17mmol) 在 TFA(0.5ml) 中的溶液中加入 Et3SiH(0.5ml)。 将混合物在室温下搅拌过夜。减压除去挥发性物质。将残余物用己烷研磨。将固体过滤并 用己烷洗涤。干燥后， 得到 60mg 期望产物。用二氯甲烷 / 甲醇 (100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 使 由此得到的产物通过一段硅胶以得到期望产物 BA-07(50mg， 收率 73％ )。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6) ； MS(ESI+) ： (M+1)， LC-MS ： 100％。
     BA-08
     4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6-(2- 甲基 -2H- 吡唑 -3- 基甲基 )- 苯并 噻唑 -2- 基胺 BA-08。
     在 70 ℃ 下， 用 TFA(ml) 和 Et3SiH(1ml) 的 混 合 物 处 理 化 合 物 BA-06(20mg， 0.05mmol) 并搅拌过夜。冷却至室温后， 减压除去挥发性物质以得到残余物， 将其用二氯甲 烷 / 甲醇 (100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以得到期望产物 BA-08(15mg， 收率 76％ )。 1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)MS(ESI+) ： (M+1)LC-MS ： 93％。
     BA-09，
     BA-10，
     BA-12，
     BA-14，
     合成 2- 氨基 -4- 溴 - 苯并噻唑 -6- 羧酸 (19)。
     向化合物 (3)(2.54g， 10mmol) 在乙酸 (5ml) 中的悬浮液中加入硫酸 (5ml) 和水 (5ml)。将所得混合物在 100℃下搅拌过夜。冷却至室温后， 向混合物加入水至 500ml。经 过滤收集沉淀， 并用水洗涤直至洗出液为中性 (pH ＝ 7)。风干后， 得到 1.93g( 收率 71％ ) 作为灰白色固体的期望产物 (19)。
     2- 氨基 -4- 溴 - 苯并噻唑 -6- 羧酸甲酯 (24)。
     将 化 合 物 (19)(1.48g， 5.4mmol) 悬 浮 于 四 氢 呋 喃 (THF， 160ml) 和 甲 醇 (MeOH， 40ml) 的混合物中。用注射器向混合物中滴加 TMSCHN2(2M 乙醚溶液 )。添加完成后， 将混合 物在室温下搅拌 1 小时。减压除去挥发性物质以得到粗产物 (24)(1.6g， 收率 100％ )。将 由此得到的产物在未经进一步纯化的情况下用于下一步骤。
     (2- 氨基 -4- 溴 - 苯并噻唑 -6- 基 )- 甲醇 (21)。
     向 (20)(1.6g， 5.4mmol) 在 THF(120ml) 中 的 悬 浮 液 中 加 入 氢 化 铝 锂 (0.93g， 24.5mmole， 4.5eq.)。 将 混 合 物 在 室 温 下 搅 拌 30 分 钟， 然 后 依 次 加 入 H2O(0.93ml)、 NaOH(0.93ml， 12.5％ ) 和 H2O(0.93ml×3)。将混合物搅拌 10 分钟后， 过滤不溶物， 并用四 氢呋喃 (20ml×3) 洗涤。蒸发有机层以得到粗产物 (21)(2.24g， 收率 100％ )， 将其在未经 进一步纯化的情况下用于下一步骤。
     (4- 溴 -6- 羟甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (22)。
     向 (21)(2.2g， 8.5mmole) 在 THF(50ml) 中 的 溶 液 中 加 入 (Boc)2O(5.7g， 25.5mmole， 3eq.)。将混合物在室温下搅拌过夜。然后加入 1N NaOH 溶液 (50ml) 和甲醇 (20ml)。将混合物在室温下搅拌过夜。除去挥发性物质， 并通过加入 1N HCl 将水层中和至 pH ＝ 7。 将沉淀过滤并用水洗涤。 风干， 得到 0.394g 期望产物 (22)( 收率 13％ )。 此化合物 还通过用 DCM/MeOH 中的 NaBH4 还原其相应的醛而制备。 按 1.2g 的反应规模得到 1.2g(22)。
     (4- 溴 -6- 溴甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (23)。
     向 (22)(394mg， 1.1mmole， 1eq.) 在二氯甲烷 (DCM， 10ml) 中的悬浮液中先后一次 性地加入三苯基膦 (390mg， 1.1mmole， 1eq.) 和 NBS(200mg， 1.1mmole， 1.0eq.)。 将混合物在 0℃下搅拌 2 小时。除去挥发性物质， 并将残余物用 DCM/ 甲醇 (200 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅 胶色谱纯化以得到 200mg 期望产物 (23)( 收率 43％ ) 以及 100mg 回收的原料 (22)(25％ )。 以 1.2 的反应规模， 在与上述条件相同的条件下， 以 67％的收率分离得到 936mg 期望产物 (23)。MCLS1277-159-1)。
     (4- 溴 -6- 吡唑 -1- 基甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (24)。
     向 (23)(1.5g， 3.6mmole， 1eq.) 在 DMF(8ml) 中的溶液中加入吡唑 (1.5g， 21mmole， 6eq.)。在室温下搅拌所得混合物直至 SM 耗尽。将混合物倾入水中， 将沉淀过滤并用水洗 涤。将产物在 N2 气流下干燥过夜， 将固体用 DCM 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以 63％的收 率得到 925mg 产物 (24)。
     一般步骤 A ： (24) 与硼酸的 Suzuki 偶联 ： 实例 BA-09、 BA-10、 BA-12 和 BA-14。
     在 Ar 中，将 化 合 物 (24)(1eq.)、硼 酸 (1.5eq.)、三 苯 基 膦 (0.6eq.)、 Pd(OAc)2(0.2eq.) 在二氧六环 (6X mL) 和 ( 水溶液 )1N Na2CO3(X mL， 3eq.) 中的混合物在 80℃下搅拌过夜。用水稀释反应混合物， 并用乙酸乙酯萃取。使合并的有机相通过过滤漏 斗。蒸发溶剂得到残余物， 将其用 DCM/MeOH(100 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以得到 期望的偶联产物。通过用 TFA/DCM(1 ∶ 1) 处理 Suzuki 偶联产物来实现 Boc 基团的脱除。 除去挥发性物质， 并用在乙醚中的 2N HCl 处理残余物以得到作为 HCl 盐的目标化合物 ： 实 施例 003、 011、 012 和 014。
     BA-09.4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6- 吡唑 -1- 基甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 胺。
     以 70mg(24) 为原料， 得到 34.7mg BA-09。LC-MS ： 97.6％。
     BA-10.4-(3- 硝基 - 苯基 )-6- 吡唑 -1- 基甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺。
     以 90mg(24) 为原料， 得到 35mg BA-10。LC-MS ： 93％。
     BA-12.1-[3-(2- 氨基 -6- 吡唑 -1- 基甲基 - 苯并噻唑 -4- 基 )- 苯基 ]- 乙酮。
     以 120mg(24) 为原料， 得到 93.7mg BA-12。LC-MS ： 94％。
     BA-14.4-(3- 甲硫烷基 (Methylsulfanyl)- 苯基 )-6- 吡唑 -1- 基甲基 - 苯并噻 唑 -2- 基胺。
     以 120mg(24) 为原料， 得到 60mg BA-14。LC-MS ： 99％。
     BA-112- 氯 -4， 6- 二甲氧基 -5- 硝基 - 嘧啶 (25)
     向悬浮于二氯甲烷 (100mL) 中的硝酸四甲基铵 (11.2g， 39.5mmol) 中加入三氟甲 磺酸酐 (5.4g， 39.5mmol)， 并在室温下搅拌 2 小时。 将生成物冷却至 -78℃后， 在 -78℃下加 入 2- 氯 -4， 6- 二甲氧基嘧啶 (5.0g， 36.0mmol) 在二氯甲烷 (50mL) 中的溶液， 然后在室温 下继续搅拌 24 小时。用盐水稀释反应， 用乙酸乙酯萃取， 用盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 然后 浓缩以得到 2- 氯 -4， 6- 二甲氧基 -5- 硝基 - 嘧啶 (25)(6.0g， 76％ )。1HNMR(DMSO-d6)
     2-(4- 氟 - 苄基 )-4， 6- 二甲氧基 -5- 硝基 - 嘧啶 (26)。
     在氮气中， 将化合物 (25)(1.2g， 5.5mmol)、 4- 氟苄基氯化锌 (13.1mL， 0.5M THF 溶 液， 6.6mmol)、 四 ( 三苯基膦 ) 钯 (0.13g， 0.1mmol) 在 THF(50mL) 中的溶液加热回流 3 小时。 冷却至室温后， 真空除去 THF。用乙酸乙酯稀释残余物， 用水和盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干 燥。浓缩后， 将残余物用 5％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 经硅胶柱色谱纯化以得到 2-(4- 氟 - 苄 基 )-4， 6- 二甲氧基 -5- 硝基 - 嘧啶 (26)(1.1g， 63％ )。1HNMR(CDCl3)
     2-(4- 氟 - 苄基 )-5- 硝基 - 嘧啶 -4， 6- 二醇 (27)
     将化合物 (26)(1.0g， 3.4mmol) 和吡啶盐酸盐 (3.9g， 34mmol) 的混合物加热至 140℃， 持续 1 小时。 冷却至室温后， 用水稀释生成物。 在过滤器上收集产物， 并真空干燥。 以 62％的收率得到 2-(4- 氟 - 苄基 )-5- 硝基 - 嘧啶 -4， 6- 二醇 (27)(1.1g)。 1HNMR(DMSO-d6)
     4， 6- 二氯 -2-(4- 氟 - 苄基 )-5- 硝基 - 嘧啶 (28)。
     向化合物 (27)(0.7g， 2.6mmol) 在三氯氧磷 (3mL) 中的混合物中加入 N， N- 二甲 基苯胺 (0.42g， 3.4mmol)， 并加热回流 2 小时。冷却至室温后， 将反应生成物倾入冰水中并 搅拌 5 分钟。用乙酸乙酯萃取混合物， 用盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 浓缩以得到 (28)(0.5g， 62％ )。1HNMR(CDCl3)
     4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6- 氯 -2-(4- 氟苄基 )-5- 硝基 - 嘧啶 (29)。
     在氮气中， 将化合物 (28)(0.1g， 3.3mmol)、 3， 4- 亚甲二氧基苯基 - 硼酸 (49mg， 0.29mmol)、 碳酸钠 (0.11g， 0.1mmol) 和四 ( 三苯基膦 ) 钯 (0.13g， 0.1mmol) 在甲苯 / 水
     (1 ∶ 1， 4mL) 中的溶液加热回流 3 小时。冷却至室温后， 真空除去 THF。用乙酸乙酯稀释残 余物， 用水和盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥。浓缩后， 将残余物用 5％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 经硅 胶柱色谱纯化以得到 (29)(0.12g， 90％ )。1HNMR(CDCl3)
     4- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -6- 氯 -2-(4- 氟 - 苄基 )- 嘧啶 -5- 基胺 (30)。
     向 化 合 物 (29)(0.12g， 0.31mmol) 在 乙 醇 (5mL) 中 的 混 合 物 中 加 入 Raney 镍 (0.05g)， 并在 50Psi 下氢化 2 小时。滤除催化剂后， 浓缩溶液以得到 (30)(0.1g， 90 ％ )。 1HNMR(CDCl3)
     7- 苯并 [1， 3] 间二氧杂环戊烯 -5- 基 -5-(4- 氟苄基 )- 噻唑并 [5， 4-d] 嘧啶 -2- 基 胺 BA-11。
     向化合物 (30)(0.1g， 0.28mmol) 在乙酸 (1mL) 中的溶液中加入硫氰酸钾 (27mg， 0.29mmol)。将混合物在 60℃下加热 16 小时。冷却至室温后， 用水稀释反应混合物， 用乙 酸乙酯萃取， 用水和盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥。浓缩后， 将残余物用 20％乙酸乙酯 / 己烷洗 脱， 经硅胶柱色谱纯化以得到 BA-11(33mg， 30％ )。1HNMR(DMSO-d6)。LC/MS ： 99％
     BA-13
     (4- 溴 -6- 氰基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (11)。
     参见 BA-03。
     [4-(3- 溴 - 苯基 )-6- 氰基 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (31)。
     在 Ar 中， 将化合物 (11)(1.23g， 3mmole， 3eq.)、 硼酸 (200mg， 1mmol， 1eq.)、 三苯 基 膦 (80mg， 0.3mmol， 0.3eq.)、 Pd(OAc)2(22mg， 0.1mmol， 0.1eq.) 在 二 氧 六 环 (20mL) 和 ( 水溶液 )1N Na2CO3(6mL， 6eq.) 中的反应混合物在回流下搅拌过夜。仅形成极少量的极 性较低的产物。另外加入 0.2eqPd(OAc)2(44mg) 和 0.6eq.Ph3P(160mg)。将所得混合物在 85℃下搅拌 6 小时。冷却至室温后， 减压除去挥发性物质以得到残余物， 将其用 DCM/ 己烷 (3 ∶ 1) 作为洗脱剂， 经硅胶色谱纯化以得到产物 (31)(262mg， 收率 61％ ) 和 (11)(560mg)。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3)。
     [4-(3- 溴 - 苯基 )-6- 甲酰基 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (32)
     在 -78℃下， 用注射器向化合物 (31)(242mg， 0.56mmol， 1eq.) 在二氯甲烷 (10mL) 中的溶液中滴加 DIBAL-H(2mL， 1N 己烷溶液， 3eq.)。添加完成后， 将反应混合物在室温下搅 拌过夜。在 0℃下， 将反应混合物在搅拌下倾入 1N HCl(5ml) 中。用 DCM 萃取混合物。分 离 DCM 层， 并用 MgSO4 干燥。除去溶剂得到残余物， 将其用 DCM/ 己烷作为洗脱剂， 经硅胶色
     谱纯化以得到期望产物 (32)(54.8mg， 收率 23％ )。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)。MS(ESI+) ： 301.7(M+1)
     [4-(3- 溴 - 苯基 )-6-[(4- 氟 - 苯基 )- 羟基 - 甲基 ]- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲 酸叔丁酯 (33)。
     在 -78 ℃下， 向醛 (32)(55mg， 0.13mmol， 1eq.) 在无水 THF(4mL) 中的溶液中滴加 4- 氟苯基溴化镁在 THF 中的溶液 (0.8ml， 1N， 3eq.)。添加完成后， 使所得混合物过夜升温 至室温。然后加入饱和 NH4Cl 水溶液。用 EtOAc(3×5ml) 萃取混合物。用 Na2SO4 干燥合并 的有机层。除去溶剂得到残余物， 将其用 DCM/MeOH(200 ∶ 1) 经硅胶色谱纯化以得到期望 产物 (33)(24mg， 收率 35％ )。
     4-(3- 溴苯基 )-6-(4- 氟苄基 )-1， 3- 苯并噻唑 -2- 胺 BA-13。
     用 在 TFA(0.8ml) 中 的 Et3SiH(0.8mL， 3mmol， 100eq.) 处 理 化 合 物 (33)(24mg， 0.045mmol)。将混合物在室温下搅拌 130min 直至原料 XM-45 耗尽。减压除去挥发性物质。 用碳酸氢钠溶液洗涤残余物， 用 EtOAc(3×15mL) 萃取， 干燥。蒸发得到残余物， 将其用二氯 甲烷 / 己烷 (1 ∶ 1) 作为展开体系， 在制备 TLC 板上经色谱纯化以得到 20mg XM-46， 先后 用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 和二氯甲烷作为洗脱剂， 使其通过一段硅胶以得到 BA-13(12mg， 收率 65％ )。1H NMR。LCMS ： 99％。
     BA-15
     2- 氨基 -5- 甲氧基 - 苯并噻唑 -6- 羧酸甲酯 (35)。
     在室温下， 向 4- 氨基 -2- 甲氧基苯甲酸甲酯 (3g， 16.55mmole)、 硫氰酸钾 (6.45g， 66.23mmole) 在 30ml 乙酸中的悬浮液中加入溴 (2.65g， 16.55mmole)。在添加溴期间， 悬浮 液变成溶液， 然后形成沉淀。将反应混合物在室温下搅拌过夜。取样品 (1ml) 并浓缩， 进行 H NMR。这显示了中间体 (34)。然后将悬浮液在 60℃下加热过夜。浓缩悬浮液， 将固体溶 于 50％ NaHCO3 饱和溶液 / 水 (50ml) 的混合物中并搅拌 30 分钟。过滤悬浮液， 用水洗涤固 1 体， 并干燥以得到 3.2g( 收率 82％ )(35)。 H-NMR-(400MHz， DMSO)
     2- 氨基 -4- 溴 -5- 甲氧基 - 苯并噻唑 -6- 羧酸甲酯 (36)。
     在 70C 下 加 热 (35)(1.1g， 4.62mmole) 在 15ml 乙 酸 中 的 悬 浮 液， 同时加入溴
     (1.3g， 8.08mmole) 在 5ml 乙酸中的溶液。 在添加溴期间， 悬浮液变成溶液， 然后析出固体沉 淀。将反应混合物在 70℃下加热 4 小时。将混合物浓缩至干燥， 将残余物溶于 50ml 饱和 NaHCO3/ 水 (1 ∶ 1) 的混合物中， 搅拌 1 小时， 过滤悬浮液， 用水洗涤固体， 干燥以得到 1.4g 1 产物 (36)。 H-NMR-(400MHz， DMSO)
     4- 溴 -2- 叔丁氧羰基氨基 -5- 甲氧基 - 苯并噻唑 -6- 羧酸甲酯 (37)。
     在室温下， 向 (36)(1.3g， 4.1mmole)、 DMAP(500mg， 4.1mmole) 在 40ml 二氯甲烷中 的悬浮液中加入 (Boc)2O(1.075g， 4.92mmole)。 将反应混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩混合 物， 用 100ml 乙酸乙酯稀释， 并用水、 10％ HCl 溶液、 水和盐水洗涤， 用硫酸钠干燥， 过滤， 浓 1 缩以得到 1.5g 棕色固体。用 5％甲醇 / 乙醚混合物研磨得到 1.3g(37)。 H-NMR-(400MHz， DMSO)
     2- 叔丁氧羰基氨基 -5- 甲氧基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -6- 羧酸甲酯 (38)
     用 氩 气 将 (37)(1.3g， 3.11mmole)、 碳 酸 钠 (990mg， 9.33mmole)、 3- 硝 基 苯 基 硼 酸 (778mg， 4.665mmole) 在 50ml 干燥二氧六环中的悬浮液脱气 10min， 然后加入醋酸钯 (140mg， 0.622mmole) 和三苯基膦 (490mg， 1.86mmole)， 并将混合物在 95℃下加热 24 小时。 使反应混合物冷却至室温， 用 50ml 水稀释， 并用乙酸乙酯 (3×60ml) 萃取。用水、 盐水洗涤 合并的有机层， 用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。将残余物用 10％ -15％乙酸乙酯 / 己烷经柱色 谱纯化以得到 330mg 产物 (38) 和 452mg 未反应原料 (37)。1H-NMR-(400MHz， CDCl3)
     [6- 羟甲基 -5- 甲氧基 -4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (39)。
     在 0 ℃下， 向 (38)(326mg， 0.71mmole) 在 8ml 干燥 THF 中的溶液中加入 1.1ml 硼 氢化锂 (2M THF 溶液 )。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物冷却至 0℃， 并用 0.5％ HCl 溶液终止反应至 pH ＝ 6， 然后用乙酸乙酯 (3×20ml) 萃取。用水、 盐水洗涤合并 的有机层， 用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩以得到粗品， 将其用 20％ -30％乙酸乙酯 / 己烷经柱 1 色谱纯化。得到 180mg(39)。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)
     [6-( 二 乙 氧 基 - 磷 酰 氧 基 甲 基 )-5- 甲 氧 基 -4-(3- 硝 基 - 苯 基 )- 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (40)。
     向 (39)(140mg， 0.325mmole) 在 2ml 干 燥 THF 中 的 溶 液 中 加 入 三 乙 胺 (50mg， 0.48mmole)、 DMAP(4mg， 0.01eq.) 和氯代磷酸二乙酯 (58mg， 0.325mmole)。将所得悬浮液在 室温下搅拌过夜。浓缩混合物， 用 5ml 水稀释， 然后加入 5％ HCl 溶液至 pH ＝ 6， 并用乙酸 乙酯 (3×5ml) 萃取。用盐水洗涤合并的有机层， 用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。将粗品用制 1 备 TLC 和 10％丙酮 / 二氯甲烷纯化以得到 110mg 产物 (40)。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)
     [6-(4- 叔 丁 氧 羰 基 氨 基 - 苄 基 )-5- 甲 氧 基 -4-(3- 硝 基 - 苯 基 )- 苯 并 噻 唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (41)。
     用 氩 气 将 (40)(110mg， 0.194mmole)、 磷 酸 钾 (46mg， 0.194mmole)、 硼 酸 (51mg， 0.213mmole) 在 1.5ml 干燥甲苯中的悬浮液脱气 10min， 然后加入醋酸钯 (4.5mg， 0.1eq.) 和三苯基膦 (20mg， 0.2eq.)， 并将混合物在 90℃下加热 7 小时。将反应混合物冷却至室温， 用 2ml 水稀释并用乙酸乙酯 (3×5ml) 萃取。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用硫酸钠干 燥， 过滤并浓缩。将残余物用 4％ MeOH/ 二氯甲烷经制备 TLC 纯化以得到 55mg 产物 (41)。 1 H-NMR-(400MHz， CDCl3)2- 氨基 -6-(4- 氨基 - 苄基 )-4-(3- 硝基 - 苯基 )- 苯并噻唑 -5- 醇 BA-015。
     在 0℃下， 向 (41)(50mg， 0.082mmole) 在 1ml 干燥二氯甲烷中的溶液中加入 BBr3 在二氯甲烷 (0.2ml， 2eq.) 中的 1M 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。浓缩混合物， 用 5ml MeOH 稀释， 浓缩， 然后将 2ml 水加入残余物中， 用 30 ％氢氧化铵中和， 用乙酸乙酯 (3×5ml) 萃取。用水洗涤合并的有机层， 用硫酸钠干燥， 浓缩以得到 40mg 粗品。将其经制 1 备 TLC 纯化得到 13mg 期望产物 BA-15。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)。LCMS(APCI+) ： 393(M+1)， 85％。
     BA-16
     5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺 (42)。
     在 20min 内， 向搅拌中的 3- 氟 -4- 甲基 - 苯基胺 (10.0g， 79.9mmol) 和硫氰酸 钾 (31.06g， 319.62mmol) 在乙酸 (130mL) 中的溶液中加入溴 (12.77g， 79.9mmol) 在乙酸 (20mL) 中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌 20h， 倾倒在碎冰 - 水 (800mL) 上。加入氢 氧化铵溶液 (28％ ) 至 pH 8， 搅拌 2h。过滤， 用水洗涤， 干燥以得到 14.27g(98％ ) 作为浅 黄色固体的 (42)。
     4- 溴 -5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺 (43)
     在 30min 内， 向加热的 (80 ℃ ) 并处于搅拌中的 (42)(10.0g， 54.88mmol) 在乙酸 (210mL) 中的溶液中加入溴 (17.54g， 109.76mmol) 在乙酸 (40mL) 中的溶液。将反应混合 然后倾倒在碎冰 - 水 (400mL) 上。加入氢氧化铵溶液 物在 80℃下搅拌 20h， 冷却至室温， (28％ ) 至 pH 8， 搅拌 2h。过滤， 用水洗涤， 干燥以得到 12.08g(84％ ) 作为浅橙褐色固体的 (43)。
     (4- 溴 -5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 )- 氨基甲酸叔丁酯 (44)
     向搅拌中的 (43)(3.0g， 11.49mmol) 和二碳酸二叔丁基酯 (2.5g， 11.49mmol) 在二 氯甲烷 (350mL) 中的溶液中加入 DMAP(0.2g， 1.64mmol)。将反应在室温下搅拌 20h， 然后浓 缩。将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 / 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 3.45g(73％ ) 作为灰白色 固体的 (44)。
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (45)向 (44)(3.3g， 9.14mmol)、 3- 氯 苯 基 硼 酸 (2)(2.14g， 13.7mmol)、 PPh3(1.17g， 4.48mmol)、 K2CO3(0.49g， 3.56mmol) 和 Pd(OAc)2(0.25g， 1.1mmol) 的混合物加入二氧六环 (90mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 45mL)。向搅拌中的溶液中通入 Ar 气 15min。在 Ar 中， 将反应 在 80℃下搅拌 20h。使反应冷却至室温， 浓缩， 并加入 H2O(60mL) 和二氯甲烷 (80mL)。分离 各层， 并用二氯甲烷 (2×40mL) 萃取水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。 将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 2.8g(78％ ) 作为灰白色固体 的 (45)。
     [6- 溴甲基 -4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (46)
     向 (45)(1.0g， 2.54mmol) 和 NBS(0.5g， 2.8mmol) 在 CCl4(50mL) 中的混合物中加 入过氧化苯甲酰 (0.1g， 0.41mmol)。在 N2 中， 将反应在 80℃下搅拌 18h。使反应冷却至室 温， 并浓缩。将残余物溶于二氯甲烷和己烷的混合物 (1 ∶ 1， 8mL) 中， 并将其用 1 ∶ 1 二氯 甲烷 / 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.63g(53％ ) 作为浅褐色固体的 (46)。
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁 酯 (47)
     向 (46)(0.3g， 0.64mmol) 和三丁基 -(4- 硝基 - 苯基 )- 锡烷 (3)(0.39g， 0.95mmol) 在二氧六环 (10mL) 中的混合物中加入双 - 三苯基膦二氯化钯 (0.02g， 0.03mmol)。向搅拌 中的反应中通入 Ar 气 2min。在 Ar 中， 将反应在 80℃下搅拌 10h。使反应冷却至室温， 浓 缩。将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.21g(64％ ) 作为浅黄色 固体的 (47)。
     6-(4- 氨基 - 苄基 )-4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -2- 基胺盐酸盐。
     BA-16
     向 (47)(0.19g， 0.36mmol)、 Fe(0.08g， 1.44mmol) 和 氯 化 铵 (0.12g， 2.16mmol) 在乙醇 (10mL) 中的混合物中加入水 (3.3mL)。将反应在 80℃下搅拌 16h。使反应混合物 冷却至室温， 用硅藻土过滤， 浓缩。将残余物用 40％乙酸乙酯 / 己烷经制备 TLC 纯化得到 0.48g(28％ ) 作为灰白色固体的 (48)( 极性较低的化合物， Rf 0.45) 以及 0.085g(62％ ) 作 为灰白色固体的 BA-16( 极性化合物， Rf 0.21)。1H NMR-(400MHz， CDCl3) ； Yes MS(APCI+) ： 384.0(M+1)， LC-MS ： ＞ 99％。向在乙醚 (1.0mL) 中的 BA-16(0.02g， 0.05mmol) 中加入在乙 醚 (0.5mL) 中的 2M HCl。将反应混合物搅拌 1h。倾出乙醚层， 用乙醚 (2×2mL) 研磨， 干燥 1 以得到 0.017g(78％ ) 作为浅黄色固体的 BA-16 的 HCl 盐。 H NMR-(400MHz， CDCl3) ； Yes， MS(APCI+) ： 384.0(M+1)， LC-MS ： 79％。
     BA-18
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6- 甲酰基 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (49)。
     向 硼 酸 (800mg， 5mmol， 1.1eq.)、 钯 催 化 剂 (500mg， 0.43mmol， 0.1eq.)、 K2CO3(4.7g， 35mmol， 8eq.) 和 (12)(1.54g， 4.3mmol， 1eq.) 的 混 合 物 中 加 入 甲 苯 (30ml) 和 EtOH(30ml)。 在 Ar 中， 将 混 合 物 在 95 ℃ 下 搅 拌 过 夜。 冷 却 至 室 温 后， 加 入 水。 用 将其用 EtOAc(25ml×3) 萃取混合物。用 MgSO4 干燥有机层。减压除去溶剂得到残余物， 己烷 /DCM(1.5 ∶ 1 至 1 ∶ 2) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以 57％的收率得到 960mg(49)。 1 H-NMR(400MHz， CDCl3)
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6- 羟甲基 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (50)。
     在 0℃下， 向化合物 (49)(540mg， 1.38mmol) 在二氯甲烷 (8mL) 和 MeOH(6ml) 中的 溶液中一次性加入硼氢化钠 (80mg， 2.1mmol， 1.5eq.)。将混合物在 0℃至室温下搅拌 1hr。 然后加入水， 其后加入 1N HCl 水溶液将混合物调节至 pH ＝ 3。过滤固体并用水洗涤。风干 后， 以 88％的收率得到 475mg 产物 (50)。1H-NMR(400MHz)。
     [6- 溴甲基 -4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (51)。
     向醇 (50)(360mg， 0.92mmol， 1eq.) 在 DCM(12mL) 中的悬浮液中加入 Ph3P(340mg， 1.3mmol， 1.4eq.)。将混合物在室温下搅拌 5min， 然后冷却至 0℃。一次性加入 NBS(230mg， 1.3mmol， 1.4eq.)。将所得混合物在室温下搅拌 1hr。减压除去挥发性物质， 并将残余物用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 2) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以 73％的收率得到 305mg 产物 (51)。
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (52)。
     向 化 合 物 (51)(200mg， 0.44mmol)、 三 丁 基 -(4- 硝 基 - 苯 基 )- 锡 烷 (363mg， 0.88mmol， 2eq.) 和钯催化剂 (Pd(Ph3P)2Cl2， 70mg， 0.1mmol， 0.2eq.) 的混合物中加入二氧 六环 (8ml)。在 Ar 中将所得混合物回流 4hr。冷却至室温后， 减压除去挥发性物质以得到 残余物， 将其用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1.5) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以 38％的收率得到 82mg 化合物 (52)。
     [6-(4- 氨基 - 苄基 )-4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (53)。
     在 1 大气压的 H2 中， 将化合物 (52)(82mg， 0.165mmol)、 Pd/C(105mg) 在 EtOAc(5ml) 中的混合物搅拌 1hr。使反应混合物通过一段硅藻土， 用 EtOAc 洗涤。减压蒸发有机物以定 量收率得到 76mg 化合物 (53)。
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(4- 甲磺酰氨基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁 酯 (54)。
     在 0℃下， 用注射器向化合物 (53)(76mg， 0.163mmol， 1eq.) 在吡啶 (1ml) 中的溶液 中加入 MeSO2Cl(0.014ml， 0.17mmol， 1.05eq.)。将所得混合物在 0℃至室温下搅拌 1hr。然 后将混合物倾入水中并用 EtOAc 萃取。用 1N HCl 水溶液洗涤 EtOAc 层， 并用 MgSO4 干燥。 除去溶剂得到残余物， 将其用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以 94％的收率 得到 83mg(54)。
     N-{4-[2- 氨 基 -4-(3- 氯 - 苯 基 )- 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 苯 基 }- 甲 磺 酰 胺 BA-18。
     向 (54)(84mg， 0.153mmol) 在 DCM(1ml) 中的溶液中加入 TFA(1ml)。将混合物在 室温下搅拌 1hr 后， 减压除去挥发性物质得到残余物， 将其先后用比例为 1 ∶ 1.5 和 1 ∶ 1 的 EtOAc/ 己烷作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以得到 62mg 期望产物， 将其用 DCM(1ml) 和己烷 (7ml) 的混合物进一步研磨， 以 87％的收率得到 59mg 产物 BA-18。LCMS ： 100％。1HNMR。
     N-{4-[2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基 }- 甲磺酰 胺盐酸盐 BA-19。
     向 在 吡 啶 (1.5mL) 中 的 (48)(0.044g， 0.09mmol) 中 加 入 甲 磺 酰 氯 (0.31g， 0.27mmol)。将反应混合物搅拌 1h， 浓缩。加入水 (20mL) 和乙醚 (20mL)。分离有机层， 用乙 醚 (2×20mL) 萃取水层。 用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩以得到 0.05g(98％ ) 作为灰白色固体的 (55)。向 (55)(0.05g， 0.09mmol) 在二氯甲烷 (1mL) 中的溶液中加入三 氟乙酸 (1mL)。将反应混合物搅拌 1.5h， 浓缩。加入水 (2mL) 和饱和 Na2HCO3(3mL)， 用乙 醚 (2×20mL) 萃取。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物悬浮于乙醚 (1mL) 和二氧六环 (1mL) 中， 加入在乙醚 (0.5mL) 中的 2M HCl。将反应混合物搅拌 1h。倾 出乙醚层， 用乙醚 (2×2mL) 研磨， 干燥以得到 0.03g(70％ ) 作为灰白色固体的 BA-19。1H NMR-(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ： (M+1)LC-MS ： ＞ 98％。
     BA-20
     4- 氨基 -3- 甲氧基 - 苯甲酸甲酯 (56)。
     将 4- 氨基 -3- 甲氧基苯甲酸 (1.5g， 8.97mmole) 在 15ml 甲醇和 4.8ml95-98％硫 酸中的溶液在 70 ℃下加热 24hr。结束时， 浓缩混合物， 并用 2NNaOH 溶液碱化至 pH ＝ 8。 析出固体。过滤悬浮液， 用水洗涤固体， 干燥以得到 1.62g 黄褐色固体 (56)， 收率 100％。 1 H-NMR(400MHz， DMSO)
     4- 氨基 -3- 溴 -5- 甲氧基 - 苯甲酸甲酯 (57)
     在 室 温 下， 向 (56)(1.6g， 8.83mmole) 在 15ml 甲 醇 中 的 溶 液 中 缓 慢 加 入 溴 (0.45ml， 8.83mmole) 在 4mL 乙酸中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌 7hr。将反应混合 物浓缩至固体残余物。 将残余物溶于 50mL 饱和 NaHCO3 溶液， 并用 3×100mL 乙酸乙酯萃取。 用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 2.1g 褐色固体 (57)， 收率 1 95.1％。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     6- 氨基 -3′ - 氯 -5- 甲氧基 - 联苯基 -3- 羧酸甲酯 (58)。
     将 (57)(2.14g， 8.26mmole)、 3- 氯苯基硼酸 (1.95g， 12.39mmole)、 碳酸钠 (2.63g， 24.78mmole) 在溶剂 (70mL 甲苯、 12mL 乙醇和 30mL 水 ) 的混合物中的悬浮液脱气 10min， 然 后加入催化剂 Pd(PPh3)4(960mg， 0.826mmole)。将反应混合物回流 7hr。浓缩反应混合物， 用水稀释并用乙酸乙酯萃取。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以 得到 3.8g 粗品。将其用二氯甲烷 / 己烷＝ 1 ∶ 1 的混合物经柱色谱纯化以得到 2.12g 产 物 (58)， 收率 88.3％。1H-NMR(400MHz， DMSO)
     6- 氨基 -3′ - 氯 -5- 羟基 - 联苯基 -3- 羧酸甲酯 (59)。
     在 -70℃下， 向 (58)(2.12g， 7.27mmole) 在 75mL 无水二氯甲烷中的溶液中加入纯 BBr3(2.22mL， 21.81mmole)。 使反应混合物缓慢升至室温并搅拌 5hr。 将混合物冷却至 0℃， 并通过缓慢加入 100mL 甲醇进行稀释。将混合物在室温下搅拌过夜， 然后浓缩， 用 50ml 水 稀释， 并通过加入 30％氢氧化铵而中和至 pH ＝ 6。用乙酸乙酯萃取混合物。用水、 盐水洗 涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 2.1g 粗产物 (59)， 定量收率， 纯度足以 1 用于下步使用。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噁唑 -6- 羧酸甲酯 (60)。
     向溴化氰 (920mg， 8.7mmole) 在甲醇 / 水＝ 7 ∶ 3(12mL) 的混合物中的溶液中加 入 (59)(2.1g， 7.56mmole) 在 12mL 甲醇中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。另外 加入溴化氰 (100mg)， 并将混合物再搅拌 1 天。浓缩混合物， 用 15mL 2N NaOH 溶液稀释， 搅 拌 20 分钟， 并过滤。用水洗涤固体， 用 5％ MeOH/ 乙醚研磨得到 1.45g 浅粉色固体 (60)， 收 1 率 57％。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     [2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噁唑 -6- 基 ]- 甲醇 (61)。
     在 0 ℃下向 (60)(260mg， 0.86mmole) 在 10mL 无水 THF 中的溶液中加入 LiBH4(2M THF 溶液， 1.75ml， 4eq.)。将反应混合物在室温下搅拌 3 天。用 5ml NH4Cl 饱和溶液终止 反应， 用 5mL 水稀释， 并用 2×20mL 乙酸乙酯萃取。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 200mg 粗品。用乙醚 / 己烷＝ 1 ∶ 1 研磨得到 140mg 灰白色固体 (61)， 收率 59％。1H-NMR(400MHz， DMSO)
     碳酸 -2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噁唑 -6- 基甲酯 (62)
     在 0℃下向 (61)(140mg， 0.51mmole)、 吡啶 (0.103ml， 2.5eq.) 在 2mL 无水 THF 中的 溶液中加入氯甲酸甲酯 (102mg， 1.071mmole)。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。用 1.5mL 水稀释反应， 并用二氯甲烷萃取 3 次。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并 1 浓缩以得到 196mg 粗品 (62)。其纯度足以用于下一步骤。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     N-{4-[2- 氨 基 -4-(3- 氯 - 苯 基 )- 苯 并 噁 唑 -6- 基 甲 基 ]- 苯 基 }- 甲 磺 酰 胺 BA-20。
     将 (62)(190mg， 0.48mmole)、 3- 氯 苯 基 硼 酸 (157mg， 0.73mmole)、 K2CO3(153mg， 3 1.1mmole)、 [Pd(n -C3H5)Cl]2(9mg， 0.024mmole)、 1， 5- 双 ( 二 苯 基 膦 基 ) 戊 烷 (22mg， 0.048mmole) 在 1.5mL 无水 DMF 中的溶液在 80℃下加热 24hr。用 5mL 水稀释反应， 并用乙 酸乙酯萃取 3 次。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 200mg 1 粗品。经硅胶制备板纯化得到 10mg 白色固体 BA-20。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     [6-(4- 氨基 - 苄基 )-4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁 酯 (47)。
     向在乙酸乙酯 (3.0mL) 中的 (47)(0.11g， 0.21mmol) 中加入 Pd-C(0.16g， 10 ％， 50％湿 )。在 H2 气氛下将反应混合物搅拌 5h， 用硅藻土过滤， 浓缩以得到 0.09g(95％ ) 作 为浅褐色固体的 (48)。
     {4-[2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基 }- 脲盐酸盐 BA-21。
     向在乙酸 - 水 (1 ∶ 2， 1mL) 中的 (48)(0.1g， 0.19mmol) 中加入氰酸钠 (0.05g， 0.77mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 72h。加入水 (4mL)， 用 28％ NH4OH 溶液碱化至 pH 8， 用乙酸乙酯 (3×6mL) 萃取。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物用
     1 ∶ 1 二氯甲烷 - 己烷 (2×2mL) 研磨， 然后在 80℃下用在二氧六环中的 4M 盐酸处理 40min。 浓缩反应， 用乙醚 (2×2mL) 研磨， 干燥以得到 0.03g(33 ％ ) 作为浅灰褐色固体的 BA-21。 1 HNMR-(400MHz， CDCl3)。MS(APCI+) ： 427.0(M+1)， LC-MS ： 84％。
     BA-22 和
     BA-24
     4-(3- 氯苯基 )-2- 甲基 -1， 3- 苯并噁唑 -6- 羧酸甲酯 (63)。
     将 (59)(150mg， 0.54mmole) 在 1mL 原甲酸三乙酯中的溶液在 100 ℃下加热 4 小 时。将反应混合物冷却至室温， 用水稀释并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机 层， 用 Na2SO4 干燥， 浓缩以得到 160mg 粗品。用 50 ％乙醚 / 己烷研磨后得到 130mg(63)。 1 H-NMR(400MHz， DMSO)
     [4-(3- 氯苯基 )-2- 甲基 -1， 3- 苯并噁唑 -6- 基 ] 甲醇 (64)。
     在 0 ℃下向 (63)(125mg， 0.414mmole) 在 5mL 无水 THF 中的溶液中加入 LiBH4(2M THF 溶液， 0.62ml， 3eq.)。将反应混合物在室温下搅拌 3 天。用 5N HCl 终止反应， 用水稀释 并用 3×10mL 乙酸乙酯萃取。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以 1 得到 130mg 粗品。经硅胶制备 TLC 纯化得到 98mg(64)。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     6-( 溴甲基 )-4-(3- 氯苯基 )-2- 甲基 -1， 3- 苯并噁唑 (65)。
     在 0 ℃下向 (64)(90mg， 0.33mmole)、 三苯基膦 (87mg， 0.33mmole) 的溶液中加入 NBS(59mg， 0.33mmole)。 将反应混合物在室温下搅拌过夜。 浓缩混合物， 并用 50％二氯甲烷 1 / 己烷经柱色谱纯化以得到 55mg(65)。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     4-(3- 氯苯基 )-2- 甲基 -6-(4- 硝基苄基 )-1， 3- 苯并噁唑 (66)。
     将 (65)(50mg， 0.148mmole)、 3- 硝 基 苯 基 三 丁 基 锡 烷 (91mg， 0.22mmole)、 二氯 化双 -( 三苯基膦 )(11mg， 10 ％ ) 在 2mL 无水二氧六环中的溶液在 90 ℃下加热 24hr。将 反应冷却至室温， 用 2mL 二氯甲烷稀释并经硅胶制备板纯化得到 40mg 黄色固体 (66)。 1 H-NMR(400MHz， DMSO)
     4-{[4-(3- 氯苯基 )-2- 甲基 -1， 3- 苯并噁唑 -6- 基 ] 甲基 } 苯胺 BA-22。
     将 (66)(40mg， 0.102mmole)、 10％ Pd/C(12mg， 10％ ) 在 3mL 乙酸乙酯中的悬浮液 在 H2(1atm) 中搅拌 5 小时。用乙酸乙酯稀释混合物并过滤。蒸发溶剂后得到 40mg 粗品。 经硅胶制备 TLC 纯化得到 30mg 产物 BA-22。1H-NMR(400MHz， DMSO)。HPLC 97％
     N-(4-{[4-(3- 氯苯基 )-2- 甲基 -1， 3- 苯并噁唑 -6- 基 ] 甲基 } 苯基 ) 脲 BA-24。
     在室温下， 将 BA-22(20mg， 0.057mmole)、 氰酸钠 (15mg， 0.23mmole) 在乙酸 / 水＝ 1 ∶ 2(2mL) 的混合物中的悬浮液搅拌 3 天。浓缩混合物， 用水稀释， 并用乙酸乙酯萃取数 次。用盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将粗品经硅胶制备 TLC 纯化以 1 得到 11mg BA-24。H-NMR(400MHz， DMSO) ： 2.63(s， 3H)， 4.028(s， 2H)， 5.78(s， 2H)， 7.155(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.29(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.44-7.47(m， 1H)， 7.51-7.55(m， 3H)， 7.93(d， J＝ 8Hz， 1H)， 8.08(dd， J ＝ 4Hz， 2Hz， 8.41(s， 1H)。
     BA-23
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 (67)。
     向 (47)(0.05g， 0.09mmol) 在二氯甲烷 (1mL) 中的溶液中加入三氟乙酸 (1mL)。 将反应混合物搅拌 1.5h， 浓缩。加入水 (2mL)， 用 28％ NH4OH 溶液碱化至 pH 8， 用二氯甲烷 (2×3mL) 萃取。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩以得到 0.035g(97％ ) 作为 黄色固体的 (67)。
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 (68)。
     在 5min 内， 向冷却的 (-8 ℃ )(67)(0.035g， 0.08mmol) 在磷酸 (0.8mL， 85wt ％溶 液 ) 中的溶液中加入亚硝酸钠 (0.035g， 0.51mmol) 在水 (0.1mL) 中的溶液。将反应混合物 在 -4℃下搅拌 5min， 然后加入次磷酸 (0.6mL)， 升温至室温。加入水 (5mL)， 用 Na2CO3 溶液 碱化至 pH 8， 用二氯甲烷 (2×20mL) 萃取。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。 将残余物用二氯甲烷经制备 TLC 纯化以得到 0.018g(53％ ) 作为浅黄褐色固体的 (68)。
     4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基胺盐酸盐 BA-23。
     向在乙酸乙酯 (2.5mL) 中的 (68)(0.018g， 0.045mmol) 中加入 Pd-C(0.08g， 10％， 用硅藻土过滤， 浓缩。将残余物溶于乙醚 50 ％湿 )。将反应混合物在 H2 气氛下搅拌 5h， (0.5mL)， 然后加入乙醚 (0.5mL) 中的 2M HCl。将反应混合物搅拌 1h。倾出乙醚层， 用乙 1 醚 (2×1mL) 研磨， 干燥以得到 0.007g(38％ ) 作为灰白色固体的 BA-23。 H NMR-(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ： 369.0(M+1)， LC-MS ： 92％。
     BA-26
     BA-27
     4-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯基胺 (69)。
     将 4- 硝基氯化苄 (2.44g， 20mmole， 1eq.)、 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -[1， 3， 2] 二氧杂 环戊硼烷 -2- 基 )- 苯基胺 (5g， 22.8mmol， 1.14eq.)、 Pd(PPh3)4(2.31g， 2.2mmol， 0.1eq.) 和 K3PO4(8.5g， 45mmol， 2eq.) 在 DME(100mL)、 EtOH(30ml) 和水 (30ml) 中的反应混合物在 65℃ 下搅拌 3 小时。冷却至室温后， 减压除去挥发性物质以得到残余物， 将其在 EtOAc 和水之间 分配。分离有机层并干燥。除去溶剂， 并将粗产物用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 作为洗脱剂经硅胶 色谱纯化以得到产物 (69)(1.4g， 收率 30％ )。
     6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 (70)。
     在 0 ℃ 下， 在 搅 拌 下 用 注 射 器 向 化 合 物 (69)(0.7g， 3.1mmole)、 KSCN(600mg， 6.2mmol， 2eq.) 在乙酸 (10ml) 中的反应混合物中滴加溴。添加完成后， 将所得混合物在室 温下搅拌直至原料耗尽 ( 经 TLC 监测 )。用水稀释混合物。通过过滤收集固体并用水洗涤， 并在 N2 气流下干燥以得到期望产物 (70)(526mg， 收率 60％ )。1H-NMR(400MHz， CDCl3)
     4- 溴 -6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 (71)。
     将化合物 (70)(906mg， 3mmol) 悬浮于乙酸 (10mL) 中， 并在室温下用注射器滴加 溴。添加完成后， 将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倾入水中， 然后经过滤收 集固体并干燥。以 79％的收率得到 870mg(71)。
     4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 (72)。
     在 Ar 中， 将 化 合 物 (71)(435mg， 1.2mmole)、 硼 酸 (230mg， 1.44mmol， 1.2eq.)、 Pd(PPh3)4(140mg， 0.71mmol， 0.1eq.) 在二氧六环 (4mL) 和 2NNa2CO3 水溶液 (2.5mL， 6eq.) 中的反应混合物在回流下搅拌过夜。 冷却至室温后， 减压除去挥发性物质以得到残余物， 将 其在水 (15mL) 和乙酸乙酯 (15mL) 之间分配。分离有机层。用乙酸乙酯 (10ml×3) 萃取水 层。干燥合并的有机层， 并蒸发溶剂得到残余物， 将其用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 作为洗脱剂经
     硅胶色谱纯化以得到产物 (72)(488mg， 收率 73％ )。
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (73)。
     将 化 合 物 (72)(379mg， 0.95mmol) 溶 于 THF(5mL)。 先 后 加 入 (Boc)2O(230mg， 1.1mmol， l.1eq.) 和 DMAP(12mg， 0.1mmol， 0.1eq.)。将混合物在室温下搅拌过夜。然后另 外加入 0.5eq.(Boc)2O。将所得混合物搅拌 4 小时后， 减压除去挥发性物质。将残余物用二 氯甲烷 / 己烷 (1 ∶ 1) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以得到 281mg(73)， 其含有双 -Boc 产物。
     [6-(4- 氨基 - 苄基 )-4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (74)。
     将含有双 -Boc 保护的对应物 (211mg， 0.95mmol) 的化合物 (73) 溶于乙酸乙酯 (10mL)。加入 Pd/C(300mg， 10％， 湿 )， 并将混合物在 H2(1atm) 中搅拌 3h。过滤催化剂， 并 用乙酸乙酯 (10mL×3) 洗涤。减压除去溶剂， 以定量收率得到 200mg 期望的 (74)。
     6-(4- 氨基 - 苄基 )-4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -2- 基胺 BA-26。
     将化合物 (74)(30mg， 0.06mmol) 溶于二氯甲烷 (1mL)。加入三氟乙酸 (1mL)。将 混合物在室温下搅拌 1hr。除去挥发性物质， 并将残余物在乙酸乙酯 (EA) 和碳酸氢钠之间 分配。分离 EA 层， 并用 MgSO4 干燥。除去溶剂得到残余物， 将其用在乙醚中的 2N HCl 处 理。通过过滤收集沉淀。以 HCl 盐的形式得到 20mg 期望产物 BA-26， 其为白色固体 ( 收率 83％ )。LCMS ： 97.8％。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(4- 脲基 - 苄基 )- 苯并噻唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸叔丁酯 (75)。
     在 室 温 下， 将 化 合 物 (74)(33mg， 0.06mmol)、 NaOCN(36mg， 0.13mmol， 2eq.) 在 HOAc(0.2mL) 和水 (0.2mL) 中的混合物搅拌过夜。然后通过加入水稀释混合物。经过滤收 集固体， 并用 DCM/MeOH(30 ∶ 1) 作为展开体系经制备 TLC 板纯化， 以 59％的收率得到 18mg 产物 (75)。
     {4-[2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基 }- 脲 BA-27。
     将化合物 (75)(18mg， 0.036mmol) 溶于二氯甲烷 (1mL)。加入三氟乙酸 (1mL)。将 混合物在室温下搅拌 1hr。除去挥发性物质， 并将残余物在乙酸乙酯 (EA) 和碳酸氢钠之 间分配。分离 EA 层并用 MgSO4 干燥。除去溶剂得到残余物， 将其用在乙醚中的 2N HCl 处 理。通过过滤收集沉淀。以 HCl 盐的形式得到 20mg 期望产物 BA-27， 其为白色固体 ( 收率 100％ )。LCMS ： 97.6％。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)
     BA-25
     BA-28
     4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(4- 硝基 - 苄基 )- 苯并噻唑 (76)。
     将化合物 (72)(109mg， 0.27mmol) 溶于二氧六环 (1mL)。 向此溶液中加入亚硝酸叔 丁酯 (60mg， 0.55mmol， 2eq.)。将混合物在 60℃下搅拌 30min。冷却至室温后， 减压除去挥 发性物质。将残余物用二氯甲烷 / 己烷 (1 ∶ 1 其后 1.5 ∶ 1) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化 以 39％的收率得到 40mg(76)。
     4-[4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基胺 BA-25。
     将化合物 (76)(40mg， 0.1mmol) 溶于乙酸乙酯 (5mL)。 加入 Pd/C(100mg， 10％， 湿 )， 并将混合物在 H2(1atm) 中搅拌 2h( 未完全反应 )。过滤催化剂并用乙酸乙酯 (5mL×3) 洗 涤。减压除去溶剂得到残余物， 将其用 DCM/ 己烷 (1 ∶ 1) 作为洗脱剂经硅胶色谱纯化以得 到 10mg 期望的 BA-25( 收率 31％ )。 通过用乙醚中的 2N HCl 处理， 将产物转化成其 HCl 盐。 1 LCMS ： 98％。 H NMR
     {4-[4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基 }- 脲 BA-28。
     将 化 合 物 BA-25(8mg， 0.02mmol， HCl 盐 )、 NaOCN(10mg， 0.15mmol， 7eq.) 在 HOAc(0.1mL) 和水 (0.1mL) 中的混合物在室温下搅拌过夜。 然后通过加入水来稀释混合物。 经过滤收集固体， 并用 DCM/MeOH(30 ∶ 1) 作为展开体系经制备 TLC 板纯化， 以 40％的收率 得到 3.6mg 产物 BA-28。1H-NMR(400MHz， DMSO-d6)。
     BA-29
     BA-30
     4-(3- 氯 - 苯基 )-6-[4-(3- 乙基 - 脲基 )- 苄基 ]-5- 氟 - 苯并噻唑 -2- 基 }- 氨 基甲酸叔丁酯 (77)。
     向在吡啶 (1.5mL) 中的 (48)(0.06g， 0.13mmol) 中加入异氰酸乙酯 (0.1mL)。 将反 应混合物在室温下搅拌 72h， 然后浓缩。加入水 (20mL)， 搅拌 0.5h， 过滤， 用水洗涤， 干燥。 将粗品白色固体用 1 ∶ 1 乙酸乙酯 / 己烷经制备 TLC 纯化以得到 0.057g(80％ ) 作为灰白 色固体的 (77)。
     1-{4-[2- 氨基 -4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基 }-3- 乙 基 - 脲 BA-29。
     向在二氯甲烷 (0.5mL) 中的 (77)(0.055g， 0.1mmol) 中加入三氟乙酸 (0.5mL)。 将 反应混合物搅拌 1.5h， 浓缩。加入水 (2mL)， 用 28％ NH4OH 溶液碱化至 pH 8， 搅拌 1h， 过滤， 1 用水洗涤， 干燥以得到 0.038g(85％ ) 作为灰白色固体的 BA-29。 H NMR-(400MHz， CDCl3) ； YesMS(APCI+) ： 455.1(M+1)， LC-MS ： ＞ 99％。
     1-{4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 苯基 }-3- 乙基 - 脲 BA-30。
     向 在 二 氧 六 环 (1.5mL) 中 的 BA-29(0.016g， 0.035mmol) 中 加 入 亚 硝 酸 叔 丁 酯 (0.007g.0.07mmol)。将反应混合物搅拌并在 60℃下加热 1.0h， 浓缩。将残余物用二氯甲 烷经制备 TLC 纯化以得到 0.0082g(53 ％ ) 作为浅黄色固体的 BA-30。1H NMR--(400MHz， MS(ESI+) ： 441.1(M+1)LC-MS ： ＞ 99％。 CDCl3) ；
     BA-322-[( 叔丁氧羰基 ) 氨基 ]-4-(3- 氯苯基 )-1， 3- 苯并噁唑 -6- 羧酸甲酯 (78)。
     向 (60)(1.43g， 4.72mmole) 在 35mL 二 氯 甲 烷 中 的 悬 浮 液 中 加 入 DMAP(60mg， 10％ ) 和 BOC 酸酐 (1.08g， 4.956mmole)。将反应混合物在室温下搅拌 24 小时。TLC 显示 40％转化。另外加入 DMAP(500mg) 和 BOC 酸酐 (250mg)， 并再将反应混合物搅拌 1 天。过滤 悬浮液， 用二氯甲烷洗涤固体。回收 695mg 原料。浓缩滤液， 并用 20％ -50％乙酸乙酯 / 己 1 烷经硅胶柱色谱纯化以得到 755mg 产物 (78)。 H-NMR(400MHz， DMSO)
     4-(3- 氯苯基 )-6-( 羟甲基 )-1， 3- 苯并噁唑 -2- 基氨基甲酸叔丁酯 (79)。
     在 0℃下， 向 (78)(560mg， 1.39mmole) 在 15mL 无水 THF 中的溶液中加入 LiBH4(2M THF 溶液， 2mL， 3eq.)。将反应混合物在室温下搅拌 3 天。TLC 显示 40 ％转化。另外加入 LiBH4(2mL)， 并将反应混合物在室温下再搅拌 1 天。用 NH4Cl 饱和溶液终止反应， 用 5mL 水 稀释， 并用乙酸乙酯萃取。 用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 790mg 粗品。经硅胶柱色谱纯化得到 400mg 产物 (79) 和 110mg 原料 (78)。1H-NMR(400MHz， DMSO)
     [4-(3- 氯 - 苯基 )-6-( 二乙氧基 - 磷酰氧基甲基 )- 苯并噁唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸 叔丁酯 (80)。
     在 0℃下， 向 (79)(100mg， 0.266mmole)、 TEA(0.055ml， 1.5eq.) 和 DMAP(4mg， l0％ ) 在 1mL 无水 THF 中的溶液中加入氯代磷酸二乙酯 (46mg， 0.266mmole)。 将反应混合物在室温 下搅拌 3 天。用 5％ HCl 稀释反应并用乙酸乙酯萃取 3 次。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 200mg 粗品 (80)。将其用于下一步骤。1H-NMR(400MHz， DMSO)
     [6-(4- 叔丁氧羰基氨基 - 苄基 )-4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噁唑 -2- 基 ]- 氨基甲酸 叔丁酯 (81)。
     用 氩 气 将 (80)(200mg， 0.39mmole)、 磷 酸 钾 (91mg， 0.429mmole)、 硼 酸 (102mg， 0.429mmole) 在 4mL 干燥甲苯中的悬浮液脱气 10min， 然后加入醋酸钯 (5mg， 5％ eq.) 和三 苯基膦 (21mg， 20％ eq.)， 并将混合物在 90℃下加热 5 小时。使反应混合物冷却至室温， 用 水稀释并用乙酸乙酯萃取。用水、 盐水洗涤合并的有机层， 用硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。将 残余物用 5 ％ MeOH/ 二氯甲烷经制备 TLC 纯化以得到 120mg 产物 (81)。1H-NMR(400MHz，
     CDCl3) 6-(4- 氨基苄基 )-4-(3- 氯苯基 )-1， 3- 苯并噁唑 -2- 胺 BA-32。
     向 (81)(100mg， 0.22mmole) 在 1.5mL 二氯甲烷中的溶液中加入 0.55mL 在二氧六 环中的 4N HCl。溶液变成悬浮液， 并将其在室温下搅拌过夜。用乙醚稀释混合物并过滤。 将固体用乙醚研磨并过滤后， 以 HCl 盐的形式得到 35mg BA-32。1H-NMR(400MHz， DMSO)。 LCMS(APCI+) ： 350(M+1)， 87％。
     BA-33
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺 (82)。
     向 (43)(0.4g， 1.53mmol)、 3- 氯 苯 基 硼 酸 (1)(0.29g， 1.84mmol)、 PPh3(0.2g， 0.79mmol)、 K2CO3(0.08g， 0.6mmol) 和 Pd(OAc)2(0.04g， 0.181mmol) 中加入二氧六环 (8mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 4mL)。 将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。 使用微波炉 (Biotage Intiator II) 将反应在 180℃下搅拌 15 分钟。在类似条件下再进行 3 次操作 (0.5g 规模 MR-49， 共 计 1.9g)。浓缩在所有 4 次操作中得到的反应混合物。加入水 (80mL) 和二氯甲烷 (80mL)。 分离有机层， 并用二氯甲烷 (2×40mL) 萃取水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并 浓缩。将残余物用 30％乙酸乙酯 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 1.18g(55％ ) 作为粘性 液体的 (82)。
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6- 甲基苯并噻唑 (83)。
     向 在 二 氧 六 环 (40mL) 中 的 (82)(0.986g， 3.35mmol) 中 加 入 亚 硝 酸 叔 丁 酯 (0.52g.5.02mmol)。将反应混合物搅拌并在 60℃下加热 1.0h， 浓缩。将残余物用 1 ∶ 1 二 氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.57g(61％ ) 作为浅橙色固体的 (83)。
     6- 溴甲基 -4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 (84)。
     向在 CCl4(30mL) 中的 (83)(0.57g， 2.05mmol) 和 NBS(0.37g， 2.05mmol) 中加入过 氧化苯甲酰 (0.01g， 0.04mmol)。在 N2 中， 将反应在 80℃下搅拌 18h。将反应冷却至室温， 并浓缩。将残余物溶于二氯甲烷和己烷 (1 ∶ 1， 8mL) 的混合物中， 并用 10％乙酸乙酯 - 己 烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.44g(49％ ) 作为浅黄色固体的 (84)。
     1-[5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 基 ]-3- 乙基 - 脲 盐酸盐 BA-33。
     步骤 -1.5- 三丁基锡烷基 - 吡啶 -2- 基 )- 脲 (85)。
     向在吡啶 (2.5mL) 中的 5- 碘 - 吡啶 -2- 基胺 (0.5g， 2.27mmol) 中加入异氰酸 乙酯 (0.24g， 3.4mmol))。将反应混合物在室温下搅拌 72h， 浓缩。加入水 (40mL)， 搅拌
     0.5h， 过滤， 用水洗涤， 干燥以得到 0.61g(92 ％ ) 作为白色固体的 1- 乙基 -3-(5- 碘 - 吡 啶 -2- 基 )- 脲 (MR-66)。向在二氧六环 (25mL) 中的 MR-66(0.5g， 1.72mmol) 和双 - 三丁基 锡 (5.6g， 9.64mmol) 中加入双 - 三苯基膦二氯化钯 (0.28g， 0.4mmol)。将 Ar 气通入搅拌中 的反应 5min。在 Ar 中， 将反应在 90℃下搅拌 20h。使反应冷却至室温， 浓缩。将残余物用 30％乙酸乙酯 / 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.41g(53％ ) 作为粘性液体的 (85)。
     步骤 -2.BA-33。
     向在二甲氧基乙烷 (2mL) 中的 (84)(0.065g， 0.18mmol) 和 (85)(0.08g， 0.22mmol) 中加入双 - 三苯基膦二氯化钯 (0.006g， 0.009mmol)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 2min。使 用微波炉 (Biotage Intiator II) 将反应在 120℃下搅拌 15 分钟。使反应冷却至室温， 浓 缩。将残余物用 30％乙酸乙酯 / 己烷和二氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.042g 浅橙色固体。将固体悬浮于乙醚 (1.5mL) 中， 然后加入在乙醚 (0.7mL) 中的 2M HCl。将反 应混合物搅拌 1h。倾出乙醚层， 用乙醚 (2×1mL) 研磨， 干燥以得到 0.022g(25％ ) 作为黄 1 色固体的 BA-33。 H NMR-(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ： 441.00(M+1)， LC-MS ： 97％。
     BA-38
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(6- 甲氧基 - 吡啶 -3- 基甲基 )- 苯并噻唑盐酸盐 (BA-38)。
     向 (84)(0.06g， 0.17mmol)、 2- 甲 氧 基 -5- 吡 啶 硼 酸 (1)(0.04g， 0.25mmol)、 (PPh3)4Pd(0.02g， 0.017mmol) 和 K2PO4(0.07g， 0.034mmol) 中 加 入 DME(1.5mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 0.5mL)。 将 Ar 气通入搅拌中的反应 5min。 使用微波炉 (Biotage Initiator II) 将反应在 150℃下搅拌 15 分钟。使反应冷却至室温， 浓缩。将残余物用二氯甲烷经硅 胶柱色谱纯化以得到 0.036g(56％ ) 作为粘性液体的目标化合物 (BA-38， 游离碱 )。 向在乙 醚 (2.0mL) 中的游离碱 (0.034g， 0.088mmol) 中加入在乙醚 (0.5mL) 中的 2M HCl。将反应 混合物搅拌 1h。倾出乙醚层， 用乙醚 (2×2mL) 研磨， 干燥以得到 0.035g(94％ ) 作为灰白 1 色固体的 BA-38 的 HCl 盐。 H NMR-(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ： 385.0(M+1)， LC-MS ： 96％。
     3-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 酚 BA-39。向 (84)(0.08g， 0.22mmol)、 3- 羟 基 苯 基 硼 酸 (1)(0.046g， 0.34mmol)、 (PPh3)4Pd(0.026g， 0.02mmol) 和 K2PO4(0.095g， 0.045mmol) 中 加 入 DME(3mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 1.0mL)。 将 Ar 气通入搅拌中的反应 5min。 使用微波炉 (Biotage Initiator II) 将反应在 160 ℃下搅拌 20 分钟。使反应冷却至室温， 浓缩。将残余物用二氯甲烷经 硅胶柱色谱纯化以得到 0.056g(68％ ) 作为粘性液体的 BA-39。1H NMR-(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ： 371.1(M+1)， LC-MS ： ＞ 99％。
     BA-40
     {5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 基 }- 氨基甲酸乙 酯 BA-40。
     步骤 -1(86)。
     向 在 吡 啶 (2.5mL) 中 的 5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -[1， 3， 2] 二 氧 杂 环 戊 硼 烷 -2- 基 )- 吡啶 -2- 基胺 (0.2g， 0.91mmol) 中加入氯甲酸乙酯 (0.15g， 1.36mmol))。将反 应混合物在室温下搅拌 18h， 浓缩。 加入水 (1.0mL) 和饱和 NaHCO3 溶液 (1.0mL)， 搅拌 1.0h， 过滤， 用水洗涤， 干燥以得到 0.16g(60％ ) 作为白色固体的 (86)。
     BA-40 ：向 (84)(0.08g， 0.22mmol)、 MR-75(0.1g， 0.34mmol)、 (PPh3)4Pd(0.026g， 0.02mmol) 和 K2PO4(0.095g， 0.45mmol) 中加入 DME(3.0mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 1.0mL)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 5min。使用微波炉 (Biotage Initiator II) 将反应在 160℃下搅 拌 20 分钟。使反应冷却至室温， 浓缩。将残余物用二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化， 其后用甲 1 醇研磨以得到 0.03g(30％ ) 作为灰白色固体的 BA-40。 HNMR-(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ：
     442.0(M+1)， LC-MS ： 86％。
     按照与使用 (84) 的 BA-40 相同的步骤。
     路线 . 哌嗪类似物
     57BA-31 BA-43 BA-44 BA-45 BA-46 BA-47 BA-48 BA-49 BA-BA-48
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6- 哌嗪 -1- 基甲基 - 苯并噻唑 BA-48。
     在室温下， 向哌嗪 (821mg， 9.53mmol， 10eq.) 在 15mL 无水 THF 中的溶液中加入 (84)(340mg， 0.953mmol) 在 5mL 无水 THF 中的溶液。 将反应混合物在室温下搅拌 2 小时。 浓 缩混合物， 用水稀释， 并过滤以得到固体粗品。将其用 5mL 乙醚研磨， 经过滤并干燥后得到 1 280mg(81.4％ ) 作为白色固体的 BA-48。 H-NMR-(400MHz， DMSO)。LCMS(APCI+) ： 362(M+1)， 99％。
     BA-49
     4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌嗪 -1- 羧酸乙酯 BA-49。
     在室温下向 BA-48(980mg， 0.22mmole) 在 1.5mL 无水 THF 中的溶液中加入吡啶 (35mg， 36μL， 2eq.)。将混合物冷却至 0℃， 并加入氯甲酸乙酯 (48mg， 0.44mmole)。将反应 混合物在室温下搅拌 24hr。浓缩混合物， 用水稀释， 并用二氯甲烷萃取 3 次。用盐水洗涤 合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到约 100mg 粗品。经硅胶制备板纯化得到 80mg(84.21％ ) 作为白色泡沫的 BA-49。1H-NMR-(400MHz， DMSO)。LCMS(APCI+) ： 434(M+1)， 100％。
     BA-31
     4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌嗪 -1- 羧酰胺 BA-31。
     在 0 ℃下， 向 BA-48(70mg， 0.2mmole) 在 1.5mL 二氯甲烷中的溶液中加入三甲基 甲硅烷基异氰酸酯 (46mg， 0.4mmole)。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。通过缓慢加入
     NaHCO3 饱和溶液来终止混合物的反应， 并用二氯甲烷萃取 3 次。用盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到约 100mg 粗品。 经硅胶制备板纯化得到 20mg(25.6％ ) 作 1 为白色固体的 BA-31， 25。 H-NMR-(400MHz， DMSO)。LCMS(APCI+) ： 405(M+1)， 92％。
     BA-43
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6- 吗啉 -4- 基甲基 - 苯并噻唑 BA-43。
     向 BA-48(45mg， 0.126mmol) 在 1.5mL 二 氯 甲 烷 中 的 溶 液 中 加 入 二 异 丙 基 乙 胺 (25mg， 0.19mmol) 和吗啉 (12mg， 0.138mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。浓缩混合 物， 再溶于乙酸乙酯， 并用水洗涤。用水、 盐水洗涤有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得 1 到约 50mg 固体 BA-43。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)。LCMS(APCI+) ： 363(M+1)， 97％。
     BA-44
     1-{4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌嗪 -1- 基 }- 乙酮 BA-44。
     在 0℃下， 向 BA-48(80mg， 0.22mmole) 在 1.5mL 二氯甲烷中的溶液中先后加入吡啶 (26mg， 0.33mmole) 和乙酰氯 (26mg， 0.33mmole)。将反应混合物在室温下搅拌 3hr。用水稀 释混合物， 并用二氯甲烷萃取 3 次。用盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩 以得到约 80mg 粗品。用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶制备板纯化得到 40mg(45％ ) 的 BA-44。 1 H-NMR-(400MHz， DMSO)。LCMS(APCI+) ： 405(M+1)， 100％。
     BA-50
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(4- 甲基 - 哌嗪 -1- 基甲基 )- 苯并噻唑 BA-50。
     将含有 BA-48(60mg， 0.165mmole)、 0.1mL 甲酸和 0.1mL 甲醛的小瓶密封， 并用微波 Biotage Initiator 在 160℃下加热 40 分钟。用 NaHCO3 饱和溶液将反应混合物碱化至 pH ＝ 8， 并用二氯甲烷萃取 3 次。用盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得 到约 60mg 粗品。用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶制备板纯化以得到 50mg(79％ ) 的 BA-50。 1 H-NMR-(400MHz， CDCl3)。LCMS(APCI+) ： 376(M+1)， 92.5％。
     BA-47
     步骤 -1 ： [1-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌啶 -4- 基 ]- 氨 基甲酸叔丁酯 (87)。
     向 (84)(114mg， 0.32mmole) 在 3ml 二氯甲烷中的溶液中加入二异丙基乙胺 (62mg， 0.48mmole) 和 4(N-BOC 氨基 ) 哌啶 (68mg， 0.32mmole)。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。 浓缩混合物以得到 200mg 泡沫状粗品 (87)。1H-NMR-(400MHz， CDCl3)
     步骤 -2 ： [1-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌啶 -4- 基 ]- 氨 基甲酸叔丁酯 BA-47。
     在 0℃下， 向 (87)(195mg， 0.41mmole) 在 2mL 二氯甲烷中的溶液中加入 1.1mL 在二 氧六环中的 4N HCl。将反应混合物在室温下搅拌 8hr。浓缩混合物， 并将固体残余物用 5mL 乙醚研磨， 以 HCl 盐的形式得到 190mg 期望产物 BA-47。用饱和 NaHCO3 将其少量转化成游 1 离碱。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)。LCMS(APCI+) ： 376(M+1)， 100％。
     BA-45
     {1-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌啶 -4- 基 }- 氨基甲酸乙 酯 BA-45。
     向 BA-47(100mg， 0.25mmol) 在 1.5mL 无 水 THF 中 的 溶 液 中 加 入 吡 啶 (60mg，0.75mmol)， 并在 0 ℃下加入氯甲酸乙酯 (60mg， 0.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 24hr。 浓缩混合物， 用水稀释， 并用乙酸乙酯萃取 3 次。 用盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 1 干燥， 过滤并浓缩。将粗品用乙醚研磨得到 30mg 固体 BA-45。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)。 LCMS(APCI+) ： 448(M+1)， 100％。
     BA-46
     [1-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌啶 -4- 基 ]- 脲 BA-46。
     向 BA-47(60mg， 0.145mmole) 在 1.5mL 二氯甲烷中的溶液中加入三乙胺 (30mg， 0.29mmole)， 并在 0℃下加入三甲基硅烷基异氰酸酯 (50mg， 0.435mmole)。将反应混合物在 室温下搅拌 24hr。通过缓慢加入 NaHCO3 饱和溶液来终止混合物的反应， 并用二氯甲烷萃取 3 次。用盐水洗涤合并的有机层， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。经硅胶制备板纯化得到 15mg 1 作为白色固体的产物 BA-46。 H-NMR-(400MHz， CDCl3)。LCMS(APCI+) ： 419(M+1)， 100％。
     BA-52
     4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6- 哌嗪 -1- 基甲基 - 苯并噻唑 ： BA-48
     在 10min 内， 向在四氢呋喃 (7.0mL) 中的 (84)(0.1g， 0.28mmol) 中加入哌嗪 (1) (0.24g， 2.8mmol) 在四氢呋喃 (1.0mL) 中的溶液。将反应在室温下搅拌 18h。浓缩反应混 合物， 先后用饱和 NaHCO3 溶液 (2mL)、 水 (2×2mL) 和乙醚 ((2×2mL) 洗涤。将残余物溶于 二氯甲烷， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩以得到 0.086g(85％ ) 作为浅黄色固体的 BA-48。1H NMR(400MHz， CDCl3)。
     4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌嗪 -1- 甲酰乙胺盐酸盐 BA-52。
     向在吡啶 (1.5mL) 中的 BA-48(0.08g， 0.22mmol) 中加入异氰酸乙酯 (0.05mL)。 将 反应混合物在室温下搅拌 18h， 浓缩。加入水 (10mL)， 搅拌 0.5h， 过滤， 用水 (5mL) 洗涤。将 残余物溶于二氯甲烷， 干燥 (Na2SO4)， 过滤并浓缩。将黄色固体粗品用 5％甲醇 / 二氯甲烷 经制备 TLC 纯化以得到 0.06g 浅黄色固体。 将浅黄色固体溶于乙醚 (2.0mL)， 并加入在乙醚 (1.0mL) 中的 2M HCl。 将反应混合物在室温下搅拌 2h， 在 N2 气流下浓缩， 然后真空干燥以得 1 到 0.06g(63％ ) 作为灰白色固体的 BA-52。 H NMR(400MHz， CDCl3) ； MS(APCI+) ： 433.1(M+1)， LC-MS ： 88％。
     BA-51
     (MR 77) 合 成 {5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氨基甲酸乙酯 ：
     向 溴 化 苄 (84)(0.08g， 0.22mmol)、 [4-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -[1， 3， 2] 二 氧 杂 环 戊 硼 烷 -2- 基 )- 苯 基 ]- 脲 (1)(0.07g， 0.27mmol)、 (PPh3)4Pd(0.026g， 0.02mmol) 和 K2PO4(0.095g， 0.45mmol) 中加入 DME(3.0mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 1.5mL)。 将 Ar 气通入搅拌 中的反应 5min。 使用微波炉 (Biotage Intiator II) 将反应在 120℃下搅拌 20 分钟。 使反 应冷却至室温， 浓缩。 将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱， 其后用 5％甲醇 / 二氯 甲烷经制备 TLC 进行纯化以得到 0.015g(16％ ) 作为浅褐色固体的 BA-51。 1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.39(s， 1H)， 8.45(s， 1H)， 8.1(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 4H)， 7.32(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 7.14(d， J ＝ 8.5Hz， 2H)， 5.77(s， 2H)， 4.06ppm(s， 2H) ； MS(APCI+) ： 412.0(M+1)， LC-MS ： 97％。
     BA-53
     (MR 91) 合成 5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺 ：
     向 在 二 氧 六 环 (30mL) 中 的 MR 49(1.0g， 3.83mmol) 中 加 入 亚 硝 酸 叔 丁 酯 (0.59g.5.12mmol)。将反应混合物搅拌并在 60℃下加热 1.5h， 浓缩。将残余物用 1 ∶ 1 二 氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.45g(47％ ) 作为橙红色固体的 MR 91。
     (MR 92) 合成 3-(5- 氟 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -4- 基 )- 苄腈 ：
     向 MR 91(0.44g， 1.79mmol)、 3- 氰基苯基硼酸 (1)(0.32g， 2.15mmol)、 PPh3(0.23g， 0.89mmol)、 K2CO3(0.1g， 0.72mmol) 和 Pd(OAc)2(0.05g， 0.21mmol) 中加入二氧六环 (8mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 4mL)。 将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。 使用微波炉 (Biotage Initiator
     II) 将反应在 180℃下搅拌 15 分钟。浓缩反应混合物。加入水 (50mL) 和二氯甲烷 (50mL)。 分离有机层， 并用二氯甲烷 (2×40mL) 萃取水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物先后用 1 ∶ 1 二氯甲烷 - 己烷和 80％二氯甲烷 / 经硅胶柱色谱纯化以得到 0.39g(81％ ) 作为灰白色固体的 MR 92。
     (MR 93) 合成 3-(6- 溴甲基 -5- 氟 - 苯并噻唑 -4- 基 )- 苄腈 ：
     向在 CCl4(20mL) 中的 MR 92(0.39g， 1.45mmol) 和 NBS(0.27g， 1.53mmol) 中加入 过氧化苯甲酰 (0.04g， 0.14mmol)。在 N2 中， 将反应在 80℃下搅拌 5h。使反应冷却至室温 并浓缩。将残余物溶于二氯甲烷和己烷 (1 ∶ 1， 8mL) 的混合物， 并用 20％乙酸乙酯 - 己烷 经硅胶柱色谱纯化以得到 0.21g(41％ ) 作为白色固体的 MR 93。
     (MR 94) 合成 3-[6-(6- 氨基 - 吡啶 -3- 基甲基 )-5- 氟苯并噻唑 -4- 基 ]- 苄腈 ：
     向 MR 93(0.2g， 0.58mmol)、 5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -[1， 3， 2] 二 氧 杂 环 戊 硼 烷 -2- 基 )- 吡 啶 -2- 基 胺 (2)(0.15g， 0.7mmo1)、 (PPh3)4Pd(0.07g， 0.06mmo1) 和 K3PO4(0.24g， 1.15mmo1) 中加入 DME(8.0mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 4.0mL)。将 Ar 气通入搅拌 中的反应 5min。使用微波炉 (Biotage Initiator II) 将反应在 120℃下搅拌 20 分钟。使 反应冷却至室温， 浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱， 其后用 6％甲醇 / 二氯甲烷经制备 TLC 进行纯化以得到 0.08g(39％ ) 作为灰白色固体的 MR 94。
     (MR 95) 合 成 1-{5-[4-(3- 氰 基 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }-3- 乙基 - 脲 ：
     向在吡啶 (1.5mL) 中的 MR 94(0.075g， 0.21mmo1) 中加入异氰酸乙酯 (0.044mL)。 将反应混合物在室温下搅拌 18h， 浓缩。 加入水 (10mL)， 搅拌 0.5h， 过滤， 先后用水 (5mL)、 乙 酸乙酯 (2×5mL) 和乙醚 (10mL) 洗涤， 干燥以得到 0.036g(40％ ) 作为白色固体的 MR 95。
     (MR 96). 合 成 1-{5-[4-(3- 氰 基 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }-3- 乙基 - 脲盐酸盐 (BA-53) ：
     向 在 乙 醚 (1.0mL) 中 的 MR 95(0.032g， 0.07mmo1) 中 加 入 在 乙 醚 (0.2mL， 0.4mmo1) 中的 2M HCl。将反应混合物在室温下搅拌 2h， 在 N2 气流下浓缩， 然后真空干 燥 以 得 到 0.036g(98 ％ ) 作 为 灰 白 色 固 体 的 MR 96。1HNMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.44(s， 1H) ， 8.16-8.2(m ， 2H) ， 8.09(s ， 1H) ， 7.92-7.98(m ， 3H) ， 7.78-7.86(m ， 2H) ， 7.7-7.76(m ， 2H)， 7.32(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 4.15(s， 2H)， 3.14-3.22(m， 2H)， 1.08ppm(t， J ＝ 7.2Hz， 3H) ； MS(APCI+) ： 432.0(M+1)， LC-MS ： 92％。
     BB-01
     (MR 97) 合成 4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(6- 氟 - 吡啶 -3- 基甲基 )- 苯并噻唑 ：
     向 MR 70(0.6g， 1.68mmo1)、 2- 氟 -5- 吡 啶 硼 酸 (2)(0.24g， 1.68mmo1) 和 (PPh3)4Pd(0.1g， 0.08mmol) 中加入甲苯 (20.0mL) 和 EtOH(5.0mL)。 将反应混合物搅拌 5min， 然后加入 Na2CO3(2M 溶液， 1.7mL， 3.36mmol)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。然后将
     反应在 80℃下搅拌 18h。使反应冷却至室温， 浓缩。用水 (40mL) 稀释残余物， 用乙酸乙酯 (2×30mL) 萃取， 用盐水 (30mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将残余物用二氯甲烷经 硅胶柱色谱纯化以得到 0.48g(76％ ) 作为灰白色固体的 MR 97。
     (MR 98). 合 成 1-{5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸 (BB-01) ：
     向 MR 97(0.07g， 0.19mmol) 和 D， L- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸 (2)(0.06g， 0.56mmol) 中加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.14g， 0.94mmol)。将反应混合物搅 拌并在 160℃下加热 20min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (6mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×2mL) 洗 涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.022g(23％ ) 作为浅黄色固体的 BB-01。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.35(s， 1H)， 8.12(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 8.05(s， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.45-7.59(m， 4H)， 6.41(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 4.58(dd， J ＝ 8， 6.8Hz， 1H)， 4.03(s， 2H)， 3.72-3.8(m， 2H)， 2.3-2.41(m， 2H) ； MS(APCI+) ： 454.1(M+1)， LC-MS ： 99％。
     BB-003
     (MR 100). 合成 (S)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 吡咯烷 -2- 羧酸 (BB-03) ：
     向 MR 97(0.15g， 0.4mmol) 和 (S)- 吡咯烷 -2- 羧酸 (2)(0.1g， 0.8mmol) 中加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.31g， 2.01mmol)。将反应混合物搅拌并在 160℃下加热 30min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (10mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩以得到 0.18g(94％ ) 作为浅黄褐色固体的 BB-03。 1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.42(s， 1H)， 8.16(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.0(s， 1H)， 7.72-7.82(br s， 1H)， 7.67(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 4H)， 6.8-6.88(br s， 1H)， 4.64(br s， 1H)， 4.11(s， 2H)， 3.4-3.65(m， 2H)， 1.88-2.3(m， 4H) ； MS(APCI+) ： 468.1(M+1)， LC-MS ： 99％
     BA-54
     (MR 101). 合成 1-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡咯烷 -2- 酮 (BA-54) ：
     向冷却的 (0 ℃ ) 和搅拌中的 NaH(0.034g， 0.84mmol) 在 DMF(2.0mL) 中的悬浮液
     中加入吡咯烷 -2- 酮 (0.07g， 0.84mmol) 在 DMF(0.5ml) 中的溶液。使反应混合物缓慢升 温至室温， 搅拌 0.5h。再度冷却 (0 ℃ )， 然后在 5min 内加入 MR 70(0.15g， 0.42mmol) 在 DMF(0.5mL) 中的溶液。使反应混合物缓慢升温至室温， 搅拌 2h。倾倒在碎冰 - 水上， 用 乙酸乙酯 (2×40mL) 萃取。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物用 1 ％甲醇 / 二氯甲烷经制备薄层色谱纯化以得到 0.087g(58 ％ ) 作为粘性液体的 BA-54。 1HNMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.44(s， 1H)， 8.11(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 7.69(s， 1H)， 7.5-7.62(m， 4H)， 4.6(s， 2H)， 3.37(t， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 2.33(t， J ＝ 7.2Hz， 2H)， 1.95-2.06(m， 2H) ； MS(APCI+) ： 361.0(M+1)， LC-MS ： 100％。
     BA-55
     (MR 102). 合 成 {5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 二甲基 - 胺 (BA-55) ：
     向 MR 97(0.1g， 0.27mmol) 中加入二甲胺在甲醇 (2mL， 4mmol) 中的 2M 溶液。密封 小瓶， 并用 Biotage intiator II 微波炉在 140℃下加热 40min。 浓缩反应混合物， 将残余物 用 5％甲醇 / 二氯甲烷经制备薄层色谱纯化以得到 0.06g(56％ ) 作为灰白色固体的 BA-55。 1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.39(s， 1H)， 8.11(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.05(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.6(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 3H)， 7.41(dd， J ＝ 8.4， 2.4Hz， 1H)， 6.59(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 4.0(s， 2H)， 2.97(s， 6H) ； MS(APCI+) ： 398.1(M+1)， LC-MS ： 100％。
     BA-57
     (MR 103). 合成 4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 -6-(6- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -3- 基甲 基 )- 苯并噻唑盐酸盐 (BA-57) ：
     向 MR 97(0.13g， 0.35mmol) 和吡咯烷 (0.07g， 1.05mmol) 中加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.27g， 1.74mmol)。将反应混合物搅拌并在 100 ℃下加热 1h。 冷却至室温， 用二氯甲烷 (6mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓 缩。将残余物用 3％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.06g(41％ ) 泡沫状固体。 将固体悬浮于乙醚 (2mL) 中， 然后加入 2M HCl- 乙醚 (0.5mL， 1.0mmol)， 搅拌 1h， 然后浓缩， 再用乙醚 (2mL) 研磨， 干燥以得到 0.6g(98％ ) 作为灰白色固体的 BA-57。 1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 13.27(br s ， 1H) ， 9.44(s ， 1H) ， 8.16(d ， J ＝ 6.8Hz ， 1H) ， 7.85-7.95(m ， 2H) ， 7.66(s， 1H)， 7.51-7.58(m， 3H)， 7.07(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 4.14(s， 2H)， 3.48-3.56(m， 4H)，
     1.92-2.7(m， 4H) ； MS(APCI+) ： 424.1(M+1)， LC-MS ： 87.4％。
     BA-58
     (MR 104) 合成 4- 溴 -6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺 ：
     在 30min 内向加热的 (80℃ ) 并处于搅拌中的 6- 甲基 - 苯并噻唑 -2- 基胺 (10.0g， 60.89mmol) 在乙酸 (210mL) 中的溶液中加入溴 (19.46g， 121.78mmol) 在乙酸 (40mL) 中的 溶液。将反应混合物在 80℃下搅拌 20h， 冷却至室温， 然后倾倒在碎冰 - 水 (400mL) 上。加 入氢氧化铵溶液 (28％ ) 至 pH 8， 搅拌 2h。过滤， 用水洗涤， 干燥以得到 13.5g(91％ ) 作为 褐色固体的 MR 104。
     (MR 105) 合成 4- 溴 -6- 甲基 - 苯并噻唑 ：
     向 在 二 氧 六 环 (150mL) 中 的 MR 104(13.4g， 55.11mmol) 中 加 入 亚 硝 酸 叔 丁 酯 (6.25g.60.63mmol)。将反应混合物搅拌并在 60℃下加热 1.0h， 浓缩。将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 4.45g(34％ ) 作为橙色固体的 MR 105。
     (MR 106) 合成 4-(3- 氯 - 苯基 )-6- 甲基 - 苯并噻唑 ：
     向 MR 105(2.03g， 8.77mmol)、 3- 氯 苯 基 硼 酸 (2)(1.51g， 9.64mmol) 和 Pd(Ph3P)4(0.51g， 0.44mmol) 中 加 入 甲 苯 (80mL)、 EtOH(20mL) 和 2MNa2CO3 溶 液 (8.8mL， 17.54mmol)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。在 Ar 中， 将反应在 80℃下搅拌 20h。使 反应冷却至室温， 加入 H2O(60mL) 和乙酸乙酯 (80mL)。分离各层， 并用乙酸乙酯 (2×40mL) 萃取水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物用 20％乙酸乙酯 / 己 烷经硅胶柱色谱纯化以得到 2.23g(98％ ) 作为褐色粘性液体的 MR 106。
     (MR 107) 合成 6- 溴甲基 -4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 ：
     向在 CCl4(50mL) 中的 MR 106(2.2g， 8.47mmol) 和 NBS(1.54g， 8.55mmol) 中加入 过氧化苯甲酰 (0.1g， 0.41mmol)。在 N2 中， 将反应在 80℃下搅拌 18h。使反应冷却至室温， 并浓缩。将残余物用 20％乙酸乙酯 / 己烷研磨以得到 2.9g(99％ ) 作为浅褐色固体的 MR 107。
     (MR 108) 合成 4-(4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(6- 氟 - 吡啶 -3- 基甲基 )- 苯并噻唑 ：
     向 MR 107(2.8g， 8.27mmol)、 2- 氟 -5- 吡 啶 基 硼 酸 (1.28g， 9.09mmol) 和 Pd(Ph3P)4(0.48g， 0.41mmol) 中 加 入 甲 苯 (60mL)、 EtOH(10mL) 和 2MNa2CO3 溶 液 (8.3mL， 16.54mmol)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。在 Ar 中， 将反应在 80℃下搅拌 3h。使反
     应冷却至室温， 加入 H2O(60mL) 和乙酸乙酯 (80mL)。分离各层， 并用乙酸乙酯 (2×40mL) 萃 取水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物用二氯甲烷经硅胶柱色 谱纯化以得到 1.53g(53％ ) 作为浅黄色固体的 MR 108。
     (MR 109). 合成 {5-[4-(3- 氯 - 苯基 )- 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 基 }- 二 甲基 - 胺盐酸盐 (BA-58) ：
     向 MR 108(0.15g， 0.42mmol) 中加入二甲胺在甲醇 (2.2mL， 4.4mmol) 中的 2M 溶 液。密封小瓶， 并在 150℃下加热 1h。浓缩反应混合物， 将残余物用二氯甲烷经硅胶柱色谱 纯化以得到 0.116g(75％ ) 树胶状固体。将固体悬浮于乙醚 (2mL) 中， 然后加入 2M HCl- 乙 醚 (0.8mL， 1.6mmol)， 搅拌 1h， 然后浓缩， 再用乙醚 (2mL) 研磨， 干燥以得到 0.118g(98％ ) 作为白色固体的 BA-58。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 13.4(br s， 1H)， 9.42(s， 1H)， 8.11(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 8.02(s， 1H)， 7.92-8.0(m， 2H)， 7.69(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.48-7.57(m， 21H)， 7.19(d， J ＝ 9.24Hz， 1H)， 4.14(s， 2H)， 3.19(s， 6H) ； MS(APCI+) ： 380.0(M+1)， LC-MS ： 95.7％ ； HPLC 93.61％纯度。
     BA-59
     (MR 110) 合成 4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(6- 吡咯烷 -1- 基 - 吡啶 -3- 基甲基 )- 苯并 噻唑盐酸盐 (BA-59) ：
     向 MR 108(0.15g， 0.42mmol) 和 吡 咯 烷 (0.09g， 1.27mmol) 中 加 入 1， 8- 二 氮 杂 双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.32g， 2.11mmol)。将反应混合物搅拌并在 100 ℃下加 热 1h。冷却至室温， 用二氯甲烷 (6mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将残余物用 2 ％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.103g(60 ％ ) 粘性液体。将粘性液体 (0.09g， 0.23mmol) 悬浮于乙醚 (2mL) 中， 然后加入 2M HCl- 乙醚 (0.5mL， 1.0mmol)， 搅拌 1h， 然后浓缩， 再用乙醚 (2mL) 研磨， 干燥以得到 0.9g(94％ ) 作为 白色固体的 BA-59。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 13.25(br s， 1H)， 9.42(s， 1H)， 8.1(d， J＝ 1.6Hz， 1H)， 8.0(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.9-7.95(m， 2H)， 7.81(dt， J ＝ 7.2， 1.6Hz 1H)， 7.67(d， J ＝ 1.2Hz)， 7.481-7.56(m， 2H)， 7.0(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 4.11(s， 2H)， 3.4-3.56(m， 4H)， 1.95-2.17(m， 4H) ； MS(APCI+) ： 406.1(M+1)， LC-MS ： 98.1％。
     BA-55
     (MR 102). 合 成 {5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡啶 -2- 基 }- 二甲基 - 胺盐酸盐 (BA-55) ：
     向 在 乙 醚 (2mL) 中 的 MR 102(0.1g， 0.26mmol) 中 加 入 2M HCl- 乙 醚 (1.0mL， 2.0mmol)， 搅拌 1h， 然后浓缩， 再用乙醚 (2mL) 研磨， 干燥以得到 0.11g(98％ ) 作为白色固 体的 BA-55。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.39(s， 1H)， 8.11(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.05(d， J＝ 2.0Hz， 1H)， 7.6(s， 1H)， 7.45-7.59(m， 3H)， 7.45(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 6.63(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.01(s， 2H)， 2.99(s， 6H) ； MS(APCI+) ： 398.1(M+1)， LC-MS ： 98.9％ ； HPLC 98.5％纯。
     BA-60
     (MR 112) 合成 5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 腈 (BA-60) ：
     向 MR 70(0.8g， 2.24mmol)、 5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -[1， 3， 2] 二 氧 杂 环 戊 硼 烷 -2- 基 )- 吡 啶 -2- 腈 (2)(0.57g， 2.47mmol) 和 (PPh3)4Pd(0.13g， 0.11mmol) 中 加 入 甲 苯 (30.0mL) 和 EtOH(10.0mL)。将反应混合物搅拌 5min， 然后加入 Na2CO3(2M 溶液， 2.5mL， 5.0mmol)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。然后将反应在 80℃下搅拌 1h。使反应冷却 至室温， 浓缩。用水 (40mL) 稀释残余物， 用乙酸乙酯 (2×30mL) 萃取， 用盐水 (30mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将残余物用二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.62g(73％ ) 作为浅褐色固体的 BA-60。 1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.43(s， 1H)， 8.76(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 8.21(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.92-7.81(m， 2H)， 7.66(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 3H)， 4.32(s， 2H) ； MS(APCI-) ： 378.0(M-1)， LC-MS ： 100％。
     BA-61
     (MR 113) 合 成 6-(6- 氮 杂 环 丁 烷 -1- 基 - 吡 啶 -3- 基 甲 基 )-4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯并噻唑盐酸盐 (BA-61) ：
     向 MR 97(0.15g， 0.45mmol) 和氮杂环丁烷 (0.07g， 1.21mmol) 中加入 1， 8- 二氮杂 双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.31g， 2.01mmol)。将反应混合物搅拌并在 85 ℃下加热 15min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (6mL) 稀释， 用 0.5NHCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过 滤并浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱， 其后用 1 ∶ 1 乙酸乙酯 / 己烷经 制备薄层色谱纯化以得到 0.022g(13％ ) 灰白色固体。将固体悬浮于乙醚 (2mL) 中， 然后
     加入 2MHCl- 乙醚 (0.5mL， 1.0mmol)， 搅拌 1h， 然后浓缩， 再用乙醚 (2mL) 研磨， 干燥以得到 0.023g(98％ ) 作为灰白色固体的 BA-61。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.44(s， 1H)， 8.15(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.95(s， 1H)， 7.8-7.9(m， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.44-7.59(m， 3H)， 6.8(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.18-4.28(m， 4H)， 4.11(s， 2H)， 2.38-2.46(m， 2H) ； MS(APCI+) ： 410.0(M+1)， LC-MS ： 87％。
     BA-63
     (MR114) 合成 5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 基胺 (BA-63) ：
     向 MR 70(0.81g， 2.27mmol)、 2- 氨基 -5- 吡啶硼酸频哪醇酯 (2)(0.56g， 2.5mmol) 和 (PPh3)4Pd(0.13g， 0.11mmol) 以 及 K3PO4(0.96g， 4.54mmol) 中 加 入 DME(20.0mL) 和 EtOH-H2O(1 ∶ 1， 10.0mL)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 5min。将反应搅拌并在 80℃下加热 4h。使反应冷却至室温， 浓缩。用二氯甲烷 (60mL) 稀释， 用水 (2×50mL)、 盐水 (30mL) 洗 涤， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.31g(37％ ) 作为浅褐色固体的 BA-63。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.39(s， 1H)， 8.1(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 7.87(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 3H)， 7.28(dd， J ＝ 8.0， 2.4Hz， 1H)， 6.39(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 5.78(s， 2H)， 3.95(s， 2H) ； MS(APCI+) ： 370.2(M+1)， LC-MS ： 98％。
     BA-64
     (MR 114). 合 成 N-{5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }-2- 二甲氨基 - 乙酰胺盐酸盐 (BA-64) ：
     向在二氯甲烷 (2mL) 中的二甲氨基 - 乙酸 (0.04g， 0.41mmol) 中加入氯化亚砜 (0.1g， 0.81mmol)。将反应混合物搅拌 3h， 浓缩。在氮气气氛下加入 THF(1mL)， 然后先后加 入 MR 114(0.1g， 0.27mmol) 在 THF(1mL) 中的溶液和二异丙基乙胺 (0.14g， 1.08mmol)。搅 拌 3h， 然后加入水 (4mL) 和乙酸乙酯 (10mL)。分离有机层， 并再用乙酸乙酯 (5mL) 洗涤水 层。用盐水 (4mL) 洗涤合并的有机层， 干燥 (Na2SO4)， 过滤， 浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二
     氯甲烷经制备薄层色谱纯化以得到 0.027g(22％ ) 灰白色固体。 将固体 (0.026g， 0.06mmol) 悬浮于乙醚 (2mL) 中， 然后加入 2M HCl- 乙醚 (0.5mL， 1.0mmol)， 搅拌 1h， 然后浓缩， 再用 乙醚 (2mL) 研磨， 干燥以得到 0.029g(98％ ) 作为灰白色固体的 BA-64。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 11.13(s， 1H)， 9.86(br s， 1H)， 9.42(s， 1H)， 8.35(s， 1H)， 8.2(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 7.95-8.05(m， 1H)， 7.77(dd， J ＝ 8， 2.4Hz， 1H)， 7.56(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 3H)， 4.17(s， 2H)， 3.68(s， 2H)， 2.869s， 6H) ； MS(APCI-) ： 411.2(M-1)， LC-MS ： 96％。
     BA-66
     (MR 116) 合成 N-(2， 6- 二溴 -4- 甲基 - 苯基 )- 乙酰胺 ：
     向在乙酸 (20mL) 中的 2， 6- 二溴 -4- 甲基 - 苯基胺 (10.0g， 37.74mmol) 中加入乙 酸酐 (5.0g， 48.98mmol)。 将反应混合物搅拌并在 90℃下加热 30min， 冷却至室温， 然后倾倒 在碎冰 - 水 (300mL) 上。过滤白色固体， 用水洗涤， 干燥以得到 12.0g(99％ ) 作为白色固体 的 MR 116。
     (MR 117) 合成 N-(2， 6- 二溴 -4- 甲基 - 苯基 )- 硫代乙酰胺 ：
     向在甲苯 (20mL) 中的 MR 116(1.0g， 3.26mmol) 中加入劳氏试剂 (Lawesson’ s Reagent， 0.66g， 1.63mmol)。将反应混合物搅拌并加热回流 2.5h， 浓缩。将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 - 己烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.98g(93％ ) 作为白色固体的 MR 117。
     (MR 118) 合成 4- 溴 -2， 6- 二甲基 - 苯并噻唑 ：
     向在 DME(8mL) 中的 MR 117(0.63g， 1.93mmol) 中加入碘化亚铜 (0.02g.0.1mmol)、 1， 10- 菲 咯 啉 (0.04g， 0.2mmol) 和 碳 酸 铯 (0.95g， 2.9mmol)。 将 反 应 混 合 物 搅 拌 并 在 85 ℃下加热 20h， 用硅藻土过滤， 浓缩。将残余物用二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.41g(87％ ) 作为浅黄色粘性液体的 MR118。
     (MR 119) 合成 4-(3- 氯 - 苯基 )-2， 6- 二甲基 - 苯并噻唑 ：
     向 MR 118(0.65g， 2.68mmol)、 3- 氯 苯 基 硼 酸 (2)(0.46g， 2.954mmol) 和 Pd(Ph3P)4(0.16g， 0.13mmol) 中 加 入 甲 苯 (40mL)、 EtOH(10mL) 和 2MNa2CO3 溶 液 (2.7mL， 5.4mmol)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。在 Ar 中， 将反应在 85℃下搅拌 3h。将反应 冷却至室温， 加入 H2O(60mL) 和乙酸乙酯 (80mL)。分离各层， 并用乙酸乙酯 (2×40mL) 萃取 水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 / 己烷 经硅胶柱色谱纯化以得到 0.7g(98％ ) 作为粘性液体的 MR119。
     (MR 120) 合成 6- 溴甲基 -4-(3- 氯 - 苯基 )-2- 甲基 - 苯并噻唑 ：
     向在 CCl4(30mL) 中的 MR 119(0.3g， 1.1mmol) 和 NBS(0.2g， 1.1mmol) 中加入过氧 化苯甲酰 (0.02g， 0.08mmol)。在 N2 中， 将反应在 80℃下搅拌 1h。将反应冷却至室温并浓 缩。将残余物用 1 ∶ 1 二氯甲烷 / 己烷研磨， 浓缩以得到 0.4g(98％ ) 作为浅褐色固体的 MR 120。
     (MR 121). 合成 5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-2- 甲基 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 基 胺 (BA-66) ：
     向 MR 120(0.4g， 1.1mmol)、 2- 氨基 -5- 吡啶硼酸频哪醇酯 (2)(0.19g， 1.2mmol) 和 (PPh3)4Pd(0.06g， 0.05mmol) 及 Na2CO3 溶液 (2M， 1.1mL， 2.2mmol) 中加入甲苯 (40.0mL) 和 EtOH(10.0mL)。将 Ar 气通入搅拌中的反应 15min。将反应搅拌并在 80℃下加热 3h。将 反应冷却至室温， 加入 H2O(50mL) 和乙酸乙酯 (50mL)。分离各层， 并用乙酸乙酯 (2×40mL) 萃取水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机萃取液， 过滤并浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷 经硅胶柱色谱， 其后用 5％甲醇 / 二氯甲烷经制备薄层色谱纯化以得到 0.26g(63％ ) 作为 浅黄色树胶状液体的 BA-66。1H NMR(CDCl3， 400MHz) ： 8.0(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.78-7.8(m， 1H)， 7.66-7.7(m， 1H)， 7.58(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.25-7.41(m， 4H)， 6.46(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 4.4(s， 2H)， 3.98(s， 2H)， 2.82(s， 3H) ； MS(APCI+) ： 366.1(M+1)， LC-MS ： 96.5％。
     BA-67
     (MR 122). 合成 1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-2- 甲基 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }-3- 乙基 - 脲 (BA-67) ：
     向 在 吡 啶 (2.5mL) 中 的 MR 121(0.25g， 0.68mmol) 中 加 入 异 氰 酸 乙 酯 (0.15g， 2.05mmol)。将反应混合物在室温下搅拌 72h， 浓缩。加入水 (10mL)， 搅拌 0.5h， 过滤， 先后 用水 (5mL) 和乙醚 (10mL) 洗涤， 干燥。再从热乙酸乙酯中重结晶以得到 0.083g(28％ ) 作 为浅黄色结晶固体的 BA-67。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.08(s， 1H)， 8.16(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 8.06-8.12(br s， 1H)， 7.91(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.87(t， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.74-7.78(m， 1H)， 7.62(dd， J ＝ 8.8， 2.4Hz， 1H)， 7.44-7.54(m， 3H)， 7.25(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.04(s， 2H)，
     3.12-3.4(m， 2H)， 2.78(s， 3H)， 1.07(t， J ＝ 7.2Hz， 1H) ； MS(APCI+) ： 437.1(M+1)， LC-MS ： 100％ ； HPLC 98.7％纯。
     (MR 124). 合成 (S)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸 (BB-04) ：
     向 MR 97(0.3g， 0.8mmol) 和 L- 氮 杂 环 丁 烷 -2- 羧 酸 (2)(0.16g， 1.61mmol) 中 加 入 1， 8- 二 氮 杂 双 环 [5.4.0] 十 一 -7- 烯 (DBU)(0.61g， 4.02mmol)。 将 反 应 混 合 物 搅 拌并在 150 ℃下加热 30min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (8mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将残余物用 5 ％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以 得 到 0.057g(16 ％ ) 作 为 浅 黄 色 固 体 的 BB-04。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.4(s， 1H)， 8.13(d， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 8.05(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.5-7.59(m， 4H)， 6.47(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 4.6-4.7(m， 1H)， 4.04(s， 2H)， 3.8-3.96(m， 2H)， 2.3-2.6(m， 2H) ； MS(APCI+) ： 454.0(M+1)， LC-MS ： 100％。
     BB-05
     (MR 125). 合成 (R)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸 (BB-05) ：
     向 MR 97(0.3g， 0.8mmol) 和 D- 氮 杂 环 丁 烷 -2- 羧 酸 (2)(0.16g， 1.61mmol) 中 加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.61g， 4.02mmol)。将反应混合物搅拌 并在 100 ℃下加热 30min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (8mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗 涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。将残余物用 5 ％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得 到 0.074g(20 ％ ) 作 为 灰 白 色 固 体 的 BB-05。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 12.98(s， 1H)， 9.4(s， 1H)， 8.12(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 8.05(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.46-7.58(m， 4H) ， 6.41(d ， J ＝ 8.8Hz ， 1H) ， 4.52-4.63(m ， 1H) ， H) ， 4.03(s ， 2H) ， 3.75-3.85(m ， 2H) ， 2.3-2.58(m， 2H) ； MS(APCI+) ： 454.0(M+1)， LC-MS ： 100％ ； HPLC97.5％纯。
     BA-74
     (MR 126). 合成 (S)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酰胺盐酸盐 (BA-74) ：
     向冷却至 0℃并处于搅拌中的 MR 124(0.28g， 0.62mmol) 在 THF(4mL) 中的溶液中 加入二异丙基乙胺 (0.16g， 1.23mmol)。将反应混合物搅拌 5min， 然后加入氯甲酸异丁酯 (0.1g， 0.74mmol)， 在 0 ℃下搅拌 30min。加入氢氧化铵 (28 ％， 2.0mL)， 升温至室温， 搅拌 18h。 分离有机层， 用乙醚 (6mL) 洗涤水层。 用 Na2SO4 干燥合并的有机层， 过滤并浓缩。 将残 余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱， 其后用 5％甲醇 / 二氯甲烷经制备薄层色谱纯化 以得到 0.059g 白色固体。将固体悬浮于乙醚 (2.0mL) 中， 加入在乙醚中的 2M HCl(0.5mL， 1.0mmol)。 将 反 应 混 合 物 在 室 温 下 搅 拌 2h， 在 N2 气 流 中 浓 缩， 然后真空干燥以得到 0.06g(21％ ) 作为白色固体的 BA-74。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.43(s， 1H)， 8.16(d， J＝ 7.2Hz， 1H)， 8.01(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.85(br s， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.5-7.58(m， 4H)， 7.36(br s， 1H)， 6.7(br s， 1H)， 4.82(br s， 1H)， 4.11(s， 2H)， 3.89-4.05(m， 2H)， 2.3-2.58(m， 2H) ； MS(APCI+) ： 453.0(M+1)， LC-MS ： 99.50％ ； HPLC 98.7％纯。
     BA-75
     (MR 128). 合成 (R)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酰胺盐酸盐 (BA-75) ：
     向冷却至 0℃并处于搅拌中的 MR 125(0.5g， 1.1mmol) 在 THF(10mL) 中的溶液中 加入二异丙基乙胺 (0.28g， 2.2mmol)。将反应混合物搅拌 5min， 然后加入氯甲酸异丁酯 (0.18g， 1.3mmol)， 在 0 ℃下搅拌 45min。加入氢氧化铵 (28 ％， 4.0mL)， 升温至室温， 搅拌 1.5h。用水 (5mL) 稀释反应混合物。分离有机层， 用乙酸乙酯 (2×20mL) 洗涤水层。用 Na2SO4 干燥合并的有机层， 过滤并浓缩。将残余物用 1 ∶ 1 乙酸乙酯 / 己烷至纯乙酸乙酯 经硅胶柱色谱， 其后用 5 ％甲醇 / 二氯甲烷经制备薄层色谱纯化以得到 0.17g 白色固体。 将固体悬浮于乙醚 (3.0mL) 中， 加入在乙醚中的 2M HCl(1.0mL， 2.0mmol)。将反应混合物 在室温下搅拌 1h， 在 N2 气流中浓缩， 然后真空干燥以得到 0.18g(36 ％ ) 作为白色固体的 BA-75。 1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 9.43(s， 1H)， 8.16(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， 8.01(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.85(br s， 1H)， 7.7(s， 1H)， 7.66(s， 1H)， 7.5-7.58(m， 3H)， 7.38(br s， 1H)， 6.7(br s， 1H)， 4.86(br s， 1H)， 4.121(s， 2H)， 4.0-4.25(m， 2H)， 2.6-2.75(m， 1H)， 2.25-2.38(m， 12H) ； MS(APCI+) ： 453.0(M+1)， LC-MS ： 97.8％ ； HPLC 97.4％纯。
     BB-08
     (MR 129) 合成 4-(3- 氯 - 苯基 )-6-(6- 氟 - 吡啶 -3- 基甲基 )-2- 甲基 - 苯并噻唑： 按照路线 17 中所述步骤进行制备。
     (MR 130). 合成 (S)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-2- 甲基 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸盐酸盐 (BB-08) ：
     向 MR 129(0.28g， 0.76mmol) 和 L- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸 (2)(0.15g， 1.52mmol) 中 加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.58g， 3.8mmol)。将反应混合物搅拌并 在 150℃下加热 15min。 冷却至室温， 用二氯甲烷 (8mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 过滤并浓缩。将残余物用 5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.22g Na2SO4 干燥， 白色固体。将固体悬浮于乙醚 (4.0mL) 中， 加入在乙醚中的 2M HCl(1.8mL， 3.6mmol)。将 反应混合物在室温下搅拌 1h， 在 N2 气流中浓缩， 然后真空干燥以得到 0.22g(64％ ) 作为白 色固体的 BB-08。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 8.08(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.94(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.87(t， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.82(br s， 1H)， 7.75-7.79(m， 1H)， 7.46-7.58(m 4H)， 6.76(br s， 1H)， 4.86-5.07(m， 1H)， 4.05(s， 2H)， 3.98-4.2(m， 2H)， 2.79(s， 3H)， 2.65-2.75(m， 1H)， 2.36-2.45(m， 1H) ； MS(APCI+) ： 450.0(M+1)， LC-MS ： 98.3％。
     BB-09
     合 成 (R)-1-{5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-2- 甲 基 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸盐酸盐 (BB-09) ：
     向 MR 129(0.37g， 1.0mmol) 和 D- 氮杂环丁烷 -2- 羧酸 (2)(0.2g， 2.01mmol) 中加 入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.76g， 5.02mmol)。将反应混合物搅拌并在 150℃下加热 15min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (8mL) 稀释， 用 0.5N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并浓缩。 将残余物用 3％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶柱色谱纯化以得到 0.214g 白色固体。将固体悬浮于乙醚 (4.0mL) 中， 加入在乙醚中的 2M HCl(1.8mL， 3.6mmol)。将 反应混合物在室温下搅拌 1h， 在 N2 气流中浓缩， 然后真空干燥以得到 0.21g(47％ ) 作为白
     色固体的 BB-09。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： 8.08(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.94(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 7.87(t， J ＝ 2.0Hz， 1H)， 7.83(br s， 1H)， 7.75-7.79(m， 1H)， 7.46-7.58(m 4H)， 6.77(br s， 1H)， 4.86-5.07(m， 1H)， 4.05(s， 2H)， 3.9-4.25(m， 2H)， 2.79(s， 3H)， 2.65-2.75(m， 1H)， 2.36-2.45(m， 1H) ； MS(APCI+) ： 450.0(M+1)， LC-MS ： 98.3％。
     BB-06
     (JB-159)- 以前由 Munagala Rao 合成 ( 参见实验部分 )。注意 - 我拥有收率更高 的方法， 其包括以硼酸酯形式合成整个右边部分， 然后作为最终步骤进行 Pd 偶联。
     (JB-160). 合 成 N-{5-[4-(3- 氯 - 苯 基 )-5- 氟 - 苯 并 噻 唑 -6- 基 甲 基 ]- 吡 啶 -2- 基 }-2- 二甲氨基 - 乙酰胺 (BB-06) 的 N- 氧化物 ：
     在配有搅拌棒的 8mL 小瓶中加入 JB-159(50mg， 0.110mmol) 和二氯甲烷 (1.1mL)。 将溶液冷却至 0℃， 然后加入 3- 氯过氧苯甲酸 ( 最高 77％ )(12.3mg， 0.0550mmol)， 并使溶 液升温至室温 2 小时。 用 5％碳酸钾水溶液 (3mL) 终止反应， 并分离各层。 用二氯甲烷 (4mL) 萃取水相部分， 并合并有机部分， 用盐水 (4mL) 洗涤， 干燥 (MgSO4) 并浓缩。将粗品物质用 10％甲醇 /DCM 作为洗脱剂经制备 TLC(20×20cm， 1500 微米 ) 纯化以 19％的收率得到 10mg 作为黄色固体的 BB-06。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ3.17(s， 6H)， 4.02(s， 2H)， 4.15(s， 2H)， 7.52-7.58(m， 4H)， 7.67(s， 1H)， 7.70(dd， J ＝ 9， 4Hz， 1H)， 8.01(d， J ＝ 9Hz， 1H)， 8.17(d， J ＝ 7Hz， 1H)， 8.29(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 9.41(s， 1H).MS(APCI+) ： 471.0(M+1)LC/MS ： 95％
     BA-73
     合成 BOC- 保护的中间体 ：
     在 0-5 ℃ 下， 向 氢 化 钠 (1.8mmol， 1.2eq) 在 2mL 四 氢 呋 喃 中 的 悬 浮 液 中 加 入 MO-64(1.57mmol， 1.05eq) 的悬浮液和 MO-71(1.50mmol， 1.0eq)。在 0-5℃下将所得溶液搅 拌 20 分钟， 接着在环境温度下搅拌 4 小时。用 15％氯化铵 10mL 稀释反应， 并用 2 份乙酸乙 酯萃取水相部分。依次用水和盐水洗涤合并的有机层， 用硫酸镁干燥， 过滤并浓缩以 82％ 1 的收率得到 BOC 保护的中间体。 HNMR， CDCl3 ； 400MHz) ： 1.46(s， 9H)， 3.46(dd， J ＝ 5.6，
     5.2Hz， 2H)， 3.66(dd， J ＝ 5.6， 5.2Hz， 2H)， 4.17(s， 2H)， 4.84(s， 2H)， 7.41-7.48(M， 2H)， 7.54-7.57(M， 1H)， 7.66(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 8.01(d， J ＝ 6.4Hz， 1H)合成 1-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌嗪 -2- 酮 (BA-73) ：
     在环境温度下， 将 BOC- 保护的中间体 (1.24mmol) 与过量三氟乙酸在二氯甲烷中 搅拌 2.5 小时。浓缩反应， 将残余物溶于乙酸乙酯中， 并用饱和碳酸氢钠洗涤直至水层的 pH 为 8-9。依此用水和盐水洗涤合并的有机层， 用硫酸镁干燥， 过滤并浓缩以 63％的收率 1 得到油状的标题化合物。 HNMR， DMSO-d6 ； 400MHz) ： 3.11(dd， J ＝ 5.6， 5.2Hz， 2H)， 3.43(dd， J ＝ 5.6， 5.2Hz， 2H)， 3.63(s， 2H)， 4.83(s， 2H)， 7.41-7.48(M， 2H)， 7.56(m， 1H)， 7.66(d， J＝ + 1.6Hz， 1H)， 7.17(d， J ＝ 6.4Hz， 1H)， 9.03(s， 1H)LC/MS(84.4％ )APCI - 实测值 ： 376.0 计算 值： 375.9m/z
     BA-72
     合成 4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]-3- 氧代 - 哌嗪 -1- 甲 酰乙胺 (BA-72) ：
     在环境温度下， 向 BA-73(0.19mmol， 1eq) 在 0.7mL 吡啶中的溶液中加入异氰酸乙 酯 (0.58mmol， 3eq)， 并在环境温度下将所得混合物搅拌 18 小时。将反应倾入水 (10mL) 中， 过滤固体， 并用 2 份水洗涤， 并在乙酸乙酯蒸气中真空干燥以 50 ％的收率得到固体形 1 式的标题化合物 BA-72。 HNMR， DMSO-d6 ； 400MHz) ： 1.01(t， J ＝ 7.2Hz， 3H)， 3.06(dd， J＝ 6.4Hz， 2H)， 3.38(dd， J ＝ 5.6Hz， 2H)， 3.6(t， J ＝ 5.6， 5.2Hz， 2H)， 4.03(s， 2H)， 4.75(s， 2H)， 6.62(dd， J ＝ 5.6， 5.2Hz， 1H)， 7.52-7.60(M， 3H)， 7.69(s， 1H)， 8.12(d， J ＝ 7.2Hz， 1H)， + 9.44(s， 1H).LC/MS(87.8％ ) ： APCI 实测值 ： 447.1 计算值 ： 446.9m/z
     BA-71
     合成 4-[4-(3- 氯 - 苯基 )-5- 氟 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 哌嗪 -2- 酮 (BA-71) ：
     在 环 境 温 度 下， 将 MO-64(0.32mmol， 1.0eq)、 碳 酸 钾 (1.8mmol， 5.6eq) 和 2- 氧 代 - 哌嗪 (0.96mmol， 3eq) 在 2mL 四氢呋喃中的混合物搅拌 4 小时。 用 50mL 水稀释反应混合 物， 并搅拌 20 分钟。经过滤收集固体， 用 2 份水、 2 份己烷洗涤， 并在 35-40℃下真空干燥 18 1 小时以 62％的收率得到固体形式的标题化合物 BA-71。HNMR， DMSO-d6 ； 400MHz) ： 2.80(dd， J
     ＝ 5.6， 5.2Hz， 2H)， 3.40-3.44(M， 2H)， 3.85(d， 0.8Hz， 2H)， 5.95(s， 1H)， 7.41-7.47(M， 2H)， 7.56(dd， J ＝ 7.2， 1.6Hz， 1H)， 7.67(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 8.00(d， J ＝ 6.4Hz， 1H)， 9.04(s， + 1H).LC/MS(92.8％ ) ： APCI 实测 ： 376.0 计算值 ： 375.9m/z
     BB-07
     合成 ({5-[4-(3- 氯 - 苯基 )-2- 甲基 - 苯并噻唑 -6- 基甲基 ]- 吡啶 -2- 基 }- 甲 基 - 氨基 )- 乙酸 (BB-07) ：
     向 MR 129(0.23g， 0.62mmol) 和 甲 氨 基 - 乙 酸 (2)(0.11g， 1.24mmol) 中 加 入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(0.44ml， 5eq.)。将反应混合物搅拌并在 150℃下 加热 20min。冷却至室温， 用二氯甲烷 (8mL) 稀释， 用 0.1N HCl(2×4mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干 燥， 过滤并浓缩。 将残余物用 7.5％甲醇 / 二氯甲烷经硅胶制备板纯化以得到作为粘性固体 的 BB-07(0.16g)。 将其用 25％乙醚 / 庚烷 (4.0mL) 研磨以得到 100mg 产物。 1H NMR(CDCl3， 400MHz) ： 7.99(s， 1H)， 7.78(t， J ＝ 4Hz， 1H)， 7.68(dd， J ＝ 8， 1.6Hz， 1H)， 7.58(s， 1H)， 7.46(dd， J ＝ 8.8， 2Hz， 1H)， 7.42-7.34(m， 2H)， 7.28(s， 1H)， 6.65(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.15(bs， 2H)， 4.02(s， 2H)， 3.125(s， 3H)， 2.82(s， 3H) ； MS(APCI+) ： 438(M+1)， LC-MS ： 98％。
     除所述组合物和制剂之外， 本发明同时提供了方法。所述方法包括向需要治疗的 患者给药治疗有效量的本发明的化合物。本发明还提供抑制磷酸二酯酶 4 的方法。
     PDE4 酶的体外测定。用实时酶偶联分光光度测定法测量 PDE4 酶的体外活性和本 发明所述治疗剂的体外功效。通过使用三种不同的偶联酶， 将 PDE4 反应产物偶联到还原形 式 β- 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH) 的氧化上， 可以在 340nM 经分光光度法监测其消失。
     测定说明。准备含有 50mM Tris(pH 8.0)、 16mM MgCl2 和 80mM KCl 的缓冲液 A， 并 在室温下贮藏。 准备含有 50mM Tris(pH 8.0) 的缓冲液 B 并在室温下贮藏。 在缓冲液 B 中准 备以下试剂的储备溶液并在 -20℃贮藏 ： 5’ - 三磷酸腺苷 (ATP)、 5’ - 环单磷酸腺苷 (cAMP)、 磷酸烯醇丙酮酸 (PEP) 和 NADH。 通过将缓冲液 A、 三氯乙基膦 (trichloroethylphosphine， TCEP)、 ATP、 PEP、 NADH、 肌激酶 (MK)、 丙酮酸激酶 (PK)、 乳酸脱氢酶 (LDH) 和 PDE4 混合至 最终体积为 20mL( 足以用于单个 96- 孔测定板 ) 来准备测定混合物。将在 1 ∶ 1DMSO/ H2O 混合物中的测定混合物 (180μL) 和检品 (10μL) 在室温下预孵育 10min。通过加入 cAMP(10μL) 引发酶反应。在测定 (200μL/ 孔 ) 中所有组分的最终浓度如下 ： 10mM MgCl2、 50mM KCl、 5mM TCEP、 2.5％ DMSO、 0.4mM NADH、 1mM PEP、 0.04mM ATP、 5 单位 MK、 1 单位 PK、 1 单位 LDH 和适量的 PDE4。在能够在 340nM 下测量吸光度的读板器中监测反应进程曲线。在 340nm 的吸光度降低是由于 NADH 的氧化。 在每个测定板上包含不含检品的阳性对照和不含 检品及 cAMP 的阴性对照。从该进程曲线的线性部分的斜率测定反应速率。将所有数据相 对于对照进行百分比归一化， 并以抑制百分比的形式表示。对于人类 PDE4D 和 PDE4B 同工 酶， 化合物 BB-01、 BB-02、 BB-03、 BB-04、 BB-05、 BB-08、 BB-09 给出 IC50 ＜ 5uM。
     还利用离体测定来测量本发明所述的 PDE4 抑制剂的活性， 所述离体测定测量在 Sephadex 刺激后人类全血中的白三烯 E4(LTE4)。本发明的治疗剂的抗炎活性由如通过人 类全血中受葡聚糖凝胶珠 (sephadex beads) 刺激的 LTE4 生成而测量的对嗜酸性粒细胞激 活的抑制来表示。对于每个样品， 将 356μl 的肝素化人类全血 (Vacutainer 真空采血管 #6480) 加入 96 孔板的孔中。然后， 重复三次加入 4μl 的一系列化合物稀释液 ( 在 DMSO 中 )， 混合悬浮液， 并在温和振摇下在 37 ℃下孵育 15min。其后， 通过加入 40μLSephadex G-15 珠 (Sigma-Aldrich， 瑞典 ) 来刺激血样。将所述珠预溶于 PBS(0.16g/mL PBS) 中。混 合后， 将悬浮液在 37℃下孵育 90min。然后， 将 8μL 的 15％ EDTA/PBS 加入各样品中， 混合， 并在 21℃及 115×g 下板式离心 5min， 并取上清液。 在各板中， 使用含有 DMSO 而非化合物溶
     液的 10 个阳性对照和 10 个阴性对照。如在样品部分中所述， 用 Sephadex 刺激阳性对照， 而在阴性对照 ( 未经刺激 ) 中， 则由 PBS 替代 Sephadex 溶液。根据制造商的说明书， 用商 品酶联免疫测定 (Cayman Chemical Company， AnnArbor， MI) 来测定所得血浆样品中的 LTE4 水平。83