一种番木瓜种籽油及其制备方法 技术领域 本发明属于食品工程领域。具体而言， 涉及一种从番木瓜种籽中提取的番木瓜种 籽油及其制备方法， 特别涉及使用压榨法或超临界萃取方法提取获得的番木瓜种籽油及其 制备方法。
背景技术 随着人们生活水平的提高及生活方式的改变， 营养的过分摄入及体力劳动的减 少， 肥胖及高血脂越来越成为威胁人类健康的重大因素， 人们期待着从自然资源中寻找具 有降血脂作用的天然食物及保健产品。 同时， 在伴随人类寿命延长的同时， 如何减缓衰老的 步伐， 有效预防因衰老而产生的各种疾病， 提高生命质量， 也一直是人们长期以来追求的目 标。
番木瓜， 番木瓜科 (Caricaceae) 番木瓜属 (Carica)， 为海南主要农作物之一， 其 果肉可用来提取木瓜酶或做成果干。但长期以来番木瓜籽一直被废弃不用。与该种籽相关 的食品领域开发应用亦未曾见诸报道。
发明内容 本发明提供一种从番木瓜种籽中提取的番木瓜种籽油及其制备方法， 所述种籽油 中富含不饱和脂肪酸、 甾醇类和维生素 E 等物质。
在 本 发明 的一个方 面， 所述 番木瓜种籽 油含 有 35 ％ -60 ％的 不饱 和脂肪 酸、 10 ％ -30 ％的饱和脂肪酸、 0.20 ％ -0.50 ％的总甾醇和 0.005 ％ -0.020 ％的维生素 E。本 发明优选的一个实施方案中， 所述番木瓜种籽油含有 40.0 ％ -60.0 ％的不饱和脂肪酸、 15.0 ％ -25.0 ％的饱和脂肪酸。本发明一个更优选的实施方案中， 所述番木瓜种籽油含 有 45.0 ％ -60.0 ％的不饱和脂肪酸、 20.0 ％ -25.0 ％的饱和脂肪酸、 0.43 ％的总甾醇和 0.010％ -0.015％的维生素 E。
在本发明的又一个方面， 所述番木瓜种籽油中的不饱和脂肪酸占总脂肪酸含量的 65.0-78.0％。
在本发明的另一个方面， 所述番木瓜种籽油中， 油酸在不饱和脂肪酸中的含量百 分比为 85.0-95.0％， 亚油酸在不饱和脂肪酸中的含量百分比为 5.0-15.0％。
本 发 明 番 木 瓜 籽 油 同 时 含 有 饱 和 脂 肪 酸， 在所述饱和脂肪酸中棕榈酸占 70.0-80.0％， 硬脂酸占 20.0-30.0％。
除非特别指明， 本申请中所示含量百分比均以重量百分比表示。
本发明的再一个方面， 所述番木瓜籽油的酸值为 2.0-6.0mg(KOH)/g 油， 皂化值为 160-230mg(KOH)/g 油， 碘值为 60-85gI2/100g 油。
本发明的番木瓜种籽油的制备方法为 ：
(1) 将番木瓜种籽粉碎后过筛， 优选过 10-30 目筛， 制备成番木瓜种籽粉 ；
(2) 采用压榨机， 将番木瓜种籽粉压榨， 得番木瓜种籽油 ； 或，
采用超临界萃取方法， 在温度为 35-55℃、 压力为 20-30Mpa 时， 萃取上述番木瓜种 籽粉获得番木瓜种籽油。
步骤 (1) 中番木瓜种籽可通过将番木瓜去除果肉并脱去种籽表面薄膜后低温烘 干制得。
根据本发明的方法制备番木瓜种籽油的得油率为 15-30％。
还可向本发明的番木瓜种籽油中添加适当辅料或其它植物油制成软胶囊、 口服液 及复方精油等各种剂型的制剂。
因此， 本发明还提供一种含有本发明的番木瓜种籽油的组合物。
本发明的番木瓜种籽油也可单独地或者与其他组分混合作为食用植物油使用。
本发明所制备的番木瓜种籽油及其制剂可用于食品、 保健食品、 医药、 化妆品和精 细化工等方面。
实验结果表明， 本发明的番木瓜籽油无毒， 且具有较为显著的抗衰老及降脂作用。 具体实施方式
下文将通过具体实例对本发明番木瓜种籽油的组成特征、 制备及生物活性进一步 说明， 但所述实例并非用于限制本发明。本发明的保护范围由权利要求书限定。 番木瓜种籽油制备实例 ：
番木瓜去除果肉， 将所得种籽的薄膜外衣去除并洗净后， 于烘箱中 60℃烘干， 得番 木瓜种籽 ； 将所得番木瓜种籽用粉碎机粉碎后过 10-30 目筛， 进一步采用压榨机压榨， 或采 用超临界萃取法 ( 温度为 35-55℃、 压力为 20-30Mpa) 萃取， 制得番木瓜种籽油。这两种制 备方法的得油率分别为 18％和 27％。
根据本发明实施方案制得的一种番木瓜种籽油具有如下表所示含量的组分。
其中， 采用气相色谱法对该番木瓜种籽油脂肪酸含量进行检测， 仪器为美国 HP6890/5973 气相色谱仪， 石英毛细管柱 HP-FFAP(30m ？ .25mm， 0.25um)， 载气为 He， 柱流 量 1.0mL/min， 进样口温度 250℃， 分流比 50 ∶ 1， 程序升温 ： 从 160℃开始， 以 6℃ /min 升 到 250℃， 保持 5min ； 利用外标法计算该番木瓜种籽油中各种脂肪酸含量。
采用液相色谱法 ( 仪器为 waters515 高效液相色谱仪 ； 蒸发光检测器 ； C18 色谱 柱； 流动相为甲醇∶水＝ 99 ∶ 1) 对该番木瓜种籽油甾醇含量进行检测， 利用外标法计算出 该番木瓜种籽油中的甾醇含量。
采用液相色谱法 [NY-T 1598-2008 食用植物油中维生素 E 组分和含量测定 ； 仪器 为 LC-6AD 高效液相色谱仪， 色谱柱为 Dimonsil C18 柱 (5μm， 250×4.6mm) ； 流动相为甲 醇∶水＝ 98 ∶ 2 ； 流速 ： 1.0ml/min ； 检测波长 ： 300nm] 对该番木瓜种籽油维生素 E 含量进 行检测， 利用外标法计算出该番木瓜种籽油中的维生素 E 含量。
据 《中华人民共和国药典》 2005 版附录Ⅶ (H 脂肪与脂肪油测定法 )， 对该番木瓜 种籽油的酸值、 皂化值、 碘值、 过氧化值、 水分与挥发物等进行测定
番木瓜种籽油功能及安全性评价实例 ：
1. 实验药物和试剂
番木瓜种籽油， 由上述制备实例制得。
血脂康胶囊， 由北京北大维信生物技术有限公司生产， 规格 ： 0.3g/ 粒， 批号 ： 20080307。
维生素 C 片， 由江苏江山制药有限公司生产， 规格 100mg， 批号 20070507 ；
总超氧化物歧化酶 (T-SOD) 测试盒， 由南京建成生物工程研究所生产， 规格 ( 八 份 )100T， 批号 ： 20080530。
2. 实验动物
KM 小鼠， 17-22g， 雌雄并用， 由湖南长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供， 许可证号 ： SCXK( 湘 )2006-001。
3. 实验内容
3.1 急性毒性实验
因受受试物浓度和给药体积的限制， 一次口服给药无法测出番木瓜种籽油的半数 致死量 (LD50)， 进行了最大给药量的实验。
番木瓜种籽油样品在一天灌胃给药三次， 每次 0.80ml/ 只的情况 ( 最大给药量为 120ml/kg.d.) 下， 小鼠体重增长正常、 二便和饮食等正常， 无一例死亡。
3.2 降血脂作用实验
3.2.1 分组和给药的剂量
番木瓜种籽油组 ( 每天灌服药物一次， 以最大体积 0.80ml/20g 给药， 连续给药 6 天)
血脂康阳性对照组 ( 每天给药剂量为 0.22g/kg)
模型组 ( 给相应体积的蒸馏水 )
空白对照组 ( 给相应体积的蒸馏水 )
3.2.2 试验方法
取 40 只体重 18-20g 的雄性小鼠， 随机分成 3 组， 每天按上述剂量给药， 连续给药 6天， 隔天称重一次， 末次灌胃 1h 后， 对番木瓜种籽油组， 阳性对照组和模型组的小鼠腹腔注 射 75％蛋黄乳液 0.50ml/ 只， 注射后 20 小时眼框取血， 检测血清总胆固醇 ( 乙醇提取后， 通 过高铁 - 硫酸显色， 用紫外分光光度法测定 )。结果进行 t 检验统计学比较。
3.2.3 实验结果 ( 见表 1)
表 1 番木瓜种籽油对 75％蛋黄乳液所致小鼠血清胆固醇升高的作用 (x±s)
组别 空白对照组 模型组 给药组 阳性组
动物数 ( 只 ) 10 10 10 10OD 值 0.23±0.09 0.71±0.19*** 0.53±0.18# 0.65±0.31与空白对照组比较， *P ＜ 0.05， **P ＜ 0.01， ***P ＜ 0.001 ； 与模型组比较， #P＜ 0.05. 模型组与空白对照组比较具有极其显著性差异 (P ＜ 0.001) 表明 75％蛋黄乳液能 明显引起小鼠血清胆固醇的升高， 模型塑造成功 ； 给药组与模型组比较， 血清胆固醇含量具 有显著性差异 (P ＜ 0.05)， 表明番木瓜种籽油能抑制 75％蛋黄乳液引起的小鼠血清中总胆 固醇的升高。
3.3 抗氧化作用
3.3.1 分组和给药剂量
番木瓜种籽油给药组 ： 给予番木瓜种籽油， 每天灌服一次， 0.4ml/20g 维生素 C 对 每天灌服一次， 0.04g/kg 空白对照组 ： 给予相应体 照组 ： 给予维生素 C 溶液 (0.002g/ml)， 积蒸馏水
3.3.2 实验方法
取小鼠 30 只， 体重 17-20g， 每天灌服给药一次， 连续 15 天， 末次给药后禁食 ( 不禁 水 )18 小时之后眼框取血， 放入用肝素抗凝血的试管， 离心， 分出红细胞， 依据试剂盒上的 说明进行 SOD 活力的测定， 结果进行 t 检验比较。
3.3.3 实验结果 ( 见表 2)
表 2 番木瓜种籽油对小鼠红细胞中 SOD 的影响 (x±s)
组别 空白对照组 番木瓜种籽油组 维生素 C 对照组剂量 0.4ml/20g 0.4ml/20g 0.04g/kg动物数 ( 只 ) 10 10 10SOD 活力 (U/ml) 102.78±3.22 134.00±6.28* 90.16±9.16注： 与空白对照组比较， *P ＜ 0.05。
番木瓜种籽油组与空白对照组比较有显著差异 (P ＜ 0.05)， 表明番木瓜种籽油 (0.40ml/20g) 能使小鼠血清总 SOD 活力显著增加， 具有显著的抗氧化及抗衰老作用。
结论
以上实验结果表明， 番木瓜种籽油具有抑制小鼠血清中总胆固醇的升高的作 用 (P ＜ 0.05) ； 能使小鼠血清总 SOD 活力显著增加， 具有显著的抗氧化及抗衰老作用 (P ＜ 0.05)。7