作为蛋白质激酶抑制剂的噻唑衍生物 发明领域 本发明涉及新的噻唑衍生物、 包括所述噻唑衍生物的组合物、 以及使用所述噻唑 衍生物来治疗或预防增生性病症、 抗增生性病症、 炎症、 关节炎、 中枢神经系统病症、 心血管 疾病、 脱发、 神经元疾病、 缺血性损伤、 病毒感染、 真菌感染、 或与蛋白激酶活性有关的病症 的方法。
发明背景
蛋白质激酶为一个酶家族， 其催化蛋白质的磷酰化， 特别是催化蛋白质中的特定 酪氨酸、 丝氨酸或苏氨酸残基的羟基的磷酸化。蛋白质激酶在许多种细胞过程的调节方 面起到关键的作用， 所述细胞过程包括新陈代谢、 细胞增殖、 细胞分化及细胞存活。不受 控制的增殖是癌细胞的标志， 且可以以下两种方式之一表现为细胞分裂周期失调 ： 使刺激 性基因活动过度或使抑制性基因失活。蛋白激酶抑制剂、 调制剂或调节剂改变激酶的功 能， 所述激酶诸如细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK)、 分裂素活化的蛋白激酶 (MAPK/ERK) 、 糖 原合酶激酶 3(GSK3β)、 关卡 (Chk)( 例如， CHK-1、 CHK-2 等 ) 激酶、 AKT 激酶、 JNK 等。蛋 白质激酶抑制剂的实例在 WO 02/22610A1 中， 以及由 Y.Mettey 等人在 J.Med.Chem.， 46 ： 222-236(2003) 中描述。
细胞周期蛋白依赖性激酶为丝氨酸 / 苏氨酸蛋白质激酶， 其是细胞周期与细胞增 殖背后的驱动力。CDK 功能的错误调节在许多重要的实体肿瘤中以高频率发生。个别 CDK， 例如 CDK1、 CDK2、 CDK3、 CDK4、 CDK5、 CDK6 及 CDK7、 CDK8 等， 在细胞周期进展中发挥出独特 的作用， 并且可被分类为 G1S 期酶或 G2M 期酶。CDK2 与 CDK4 是特别令人感兴趣的， 因其活 性频繁地在许多种人类癌症中被错误调节。CDK2 活性是进展通过细胞周期的 G1 期至 S 期 所需要的， 并且 CDK2 为 G1 关卡的关键成份之一。关卡用以保持细胞周期事件的正确顺序 并允许细胞对伤害或对增殖信号作出响应， 而癌细胞中正确的关卡控制的丧失有助于肿瘤 发生。CDK2 途径在肿瘤抑制剂功能 ( 例如， p52、 RB 和 p27) 和致癌基因活化 ( 细胞周期蛋 白 E) 的水平影响肿瘤发生。许多报告证明， CDK2 的共活化剂 ( 细胞周期蛋白 E) 和抑制剂 (p27) 二者在乳癌、 结肠癌、 非小细胞肺癌、 胃癌、 前列腺癌、 膀胱癌、 非霍奇金淋巴瘤、 卵巢 癌和其它癌症中分别是超量表达或过低表达。已经证明， 它们的表达改变与 CDK2 活动水平 升高和总体存活差有关。这些观察结果使得 CDK2 及其调制性途径成为开发癌症疗法的引 人注目的靶标。
已经在文献中报告了许多腺苷 5’ - 三磷酸酯 (ATP) 竞争性有机小分子以及肽作为 CDK 抑制剂用于可能的癌症疗法。美国专利 6,413,974 提供了关于各种 CDK 和它们与各种 类型的癌症的相互关系的充分描述。 黄酮吡啶醇 (Flavopiridol， 如下所示 ) 是一种非选择 性 CDK 抑制剂， 其目前正在进行人类临床试验， A.M.Sanderowicz 等人， J.Clin.Oncol.16 ： 2986-2999(1998)。
其它已知的 CDK 抑制剂包括例如奥罗莫星 (J.Vesely 等人， Eur.J.Biochem.， 224 ： 771-786(1994)) 和 洛 斯 可 维 汀 (roscovitine)(l.Meij er 等 人， Eur.J.Biochem.， 243 ： 527-536(1997))。美国专利 6,107,305 描述了作为 CDK 抑制剂的某些吡唑并 [3， 4-b] 吡啶 化合物。得自 ‘305 专利的一个说明性化合物为 ：
K.S.Kim 等人， J.Med.Chem.45 ： 3905-3927(2002) 和 WO 02/10162 公开了作为 CDK 抑制剂的某些氨基噻唑化合物。
另一个系列的蛋白质激酶是作为细胞周期进展中的关卡起重要作用的那些。 关卡 预防在不适当的时间发生细胞周期进展 ( 诸如响应于 DNA 损伤 )， 并在细胞受到抑制时保 持细胞的代谢平衡， 并且在有些情况下在对关卡的需求没有得到满足时可以诱导细胞凋亡 ( 程序性细胞死亡 )。关卡控制可以发生在 G1 期 ( 在 DNA 合成之前 ) 和发生在 G2 期， 在进 入有丝分裂之前。
有一个系列的关卡监控基因组的完整性， 并在感测 DNA 损伤时， 这些 “DNA 损坏关 卡” 在 G1 和 G2 期阻断细胞周期进展， 并延缓通过 S 期的进展。这一行为允许 DNA 修复过 程在发生基因组复制并随后将此遗传物质分离给新的子细胞之前完全其任务。已被证实 CHK1 的失活会转导来自 DNA- 损坏感觉复合物的信号， 以抑制细胞周期蛋白 B/Cdc2 激酶的 活化 ( 所述活化会促进有丝分裂进入 )， 以及消除因抗癌剂诱发的 DNA 损坏或内源性 DNA 损 坏所诱导的 G2 抑制， 以及会造成优先杀死所形成的关卡缺损细胞。参见， 例如， Peng 等人， Science， 277 ： 1501-1505(1997) ； Sanchez 等 人， Science， 277 ： 1497-1501(1997)， Nurse， Cell， 91 ： 865-867(1997) ； Weinert， Science， 277 ： 1450-1451(1997) ； Walworth 等 人， Nature， 363 ： 368-371(1993) ； 和 AI-Khodairy 等人， Molec.Biol.Cell.， 5： 147-160(1994)。
对癌细胞中关卡控制的选择性操纵可以在癌症化疗和放疗方案中提供广泛的 应用， 并且另外可以提供要被用作癌细胞破坏的选择性基础的人癌症 “基因组不稳定性” 的通用标志。有许多因素使 CHK1 成为 DNA- 损坏关卡控制的关键靶标。对于 CHK1 和功 能相关激酶诸如 CDS1/CHK2( 最近发现的一种与 CHK1 协作来调节 S 期进展的激酶 ) 的 抑 制 剂 的 阐 明 ( 参 见 Zeng 等 人， Nature， 395 ： 507-510(1998) ； Matsuoka， Science， 282 ： 1893-1897(1998)) 可以提供用于癌症治疗的有价值的新的治疗用实体。
另一组激酶是酪氨酸激酶。酪氨酸激酶可以是受体型的 ( 具有细胞外、 跨膜和细 胞内结构域 ) 或非受体型的 ( 完全在细胞内 )。受体型酪氨酸激酶包括具有多种生物活性 的许多跨膜受体。事实上， 已经鉴定了大约 20 个不同的受体型酪氨酸激酶亚家族。被命 名为 HER 亚家族的一个酪氨酸激酶亚家族包括 EGFR(HER1)， HER2， HER3 和 HER4。至今为 止， 这个受体亚家族的得到鉴定的配体包括上皮生长因子、 TGF-α、 双调蛋白、 HB-EGF、 β 细胞素和遗传素 (heregulin)。这些受体型酪氨酸激酶的另一个亚家族是胰岛素亚家族， 包括 INS-R， IGF-IR， IR， 和 IR-R。PDGF 亚家族包括 PDGF-α 和 β 受体， CSFIR， c-kit 和 FLK-II。FLK 家族包括激酶插入结构域受体 (KDR)、 胎儿肝脏激酶 -1(FLK-1)、 胎儿肝脏激 酶 -4(FLK-4) 以及 fms 样酪氨酸激酶 -1(flt-1)。 关于受体型酪氨酸激酶的详细讨论， 参见 Plowman 等人， DN&P 7(6) ： 334-339， 1994。
据认为至少一种非受体蛋白酪氨酸激酶， 即 LCK， 介导来自细胞表面蛋白 (Cd4) 与 交联的抗 -Cd4 抗体的相互作用的信号在 T- 细胞中的转导。关于非受体酪氨酸激酶的更详 细讨论提供在 Bolen， Oncogene， 8： 2025-2031(1993) 中。非受体型酪氨酸激酶也包括许多 的亚家族， 包括 Src， Frk， Btk， Csk， Abl， Zap70， Fes/Fps， Fak， Jak， Ack， 和 LIMK。这些亚家 族中的每一个都进一步再分成多种受体。例如， Src 亚家族是最大的一个亚家族， 包括 Src， Yes， Fyn， Lyn， Lck， Blk， Hck， Fgr， 和 Yrk。Src 亚家族的酶已经与肿瘤生成有牵连。关于非 受体类型的酪氨酸激酶的更详细讨论， 参见 Bolen， Oncogene， 8： 2025-2031(1993)。
除了在细胞周期控制方面的作用之外， 蛋白激酶还在血管生成中起到决定性作 用， 血管生成是凭借其由已有血管形成新毛细血管的机制。在需要时， 血管系统能够生成 新的毛细管网以便保持组织和器官的正常功能。然而， 在成年人中， 血管生成被充分抑制， 仅在伤口愈合和月经期间子宫内膜的新血管化时发生。另一方面， 不希望的血管生成是若 干疾病的标志， 诸如视网膜病、 银屑病、 类风湿性关节炎、 年龄相关的黄斑变性、 和癌症 ( 实 体瘤 )。已经被证明涉及血管生成过程的蛋白激酶包括生长因子受体酪氨酸激酶家族的 三个成员 ； VEGF-R2( 血管内皮细胞生长因子受体 2， 也称为 KDR( 激酶插入结构域受体 ) 和 FLK1) ； FGF-R( 成纤维细胞生长因子受体 ) ； 和 TEK( 也称为 Tie-2)。
仅在内皮细胞上表达的 VEGF-R2 结合有效力的血管生成生长因子 VEGF 并通过其 细胞内激酶活性的活化来介导后续的信号转导。因此， 预期对 VEGF-R2 的激酶活性的直接 抑制会导致血管生成的减少， 即使在外源性 VEGF 的存在下也是这样 ( 参见 Strawn 等人， Cancer Res.， 56 ： 3540-3545(1996))， 如使用 VEGF-R2 突变型没能介导信号转导所显示的。 Millauer 等人， Cancer Res.， 56 ： 1615-1620(1996)。此外， 除了介导 VEGF 的血管生成活性 之外， VEGF-R2 似乎在成年人中不起作用。因此， 预期 VEGF-R2 激酶活性的选择性抑制剂几 乎不表现出毒性。
类似地， FGFR 结合血管生成生长因子 aFGF 和 bFGF 并介导后续的细胞内信号转导。最近提出， 诸如 bFGF 的生长因子可以在已经达到某一大小的实体瘤中在诱导血管生 成方面起到关键性作用。Yoshiji 等人， Cancer Research， 57 ： 3924-3928(1997)。然而， 与 VEGF-R2 不同， FGF-R 在全身的多个不同细胞型中表达， 并且可能在成年人的其它正常生 理学过程中起到或不起到重要作用。尽管如此， 已经报告了将 FGF-R 激酶活性的小分子抑 制剂系统给药阻断了小鼠中的由 bFGF 诱导的血管生成， 没有明显的毒性。Mohammad 等人， EMBO Journal， 17 ： 5996-5904(1998)。
TEK( 也称为 Tie-2) 是另一种仅在内皮细胞上表达的受体酪氨酸激酶， 已经表明 其在血管生成中起作用。所述因子血管生成素 -1 的结合引起 TEK 的激酶结构域的自磷酸 化， 并且引起信号转导过程， 所述信号转导过程似乎是介导内皮细胞与内皮周围支持细胞 的相互作用， 从而促进新形成血管的成熟。另一方面， 因子血管生成素 -2 似乎是拮抗血管 生成素 -1 对 TEK 的作用并破坏血管生成。 Maisonpierre 等人， Science， 277 ： 55-60(1997)。
激酶 JNK 属于促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 超家族。JNK 在炎症性反应、 应激反 应、 细胞增殖、 细胞凋亡、 和肿瘤生成中起到决定性作用。JNK 激酶活性可以通过多种刺激 物来活化， 所述刺激物包括促炎细胞因子 (TNF-α 和白细胞介素 -1)、 淋巴细胞共刺激受体 (CD28 和 CD40)、 DNA- 损坏性化学品、 辐射、 和 Fas 信号转导。得自 JNK 剃除小鼠的结果表 明， JNK 涉及细胞凋亡诱导和 T 辅助细胞分化。 Pim-1 是一种小的丝氨酸 / 苏氨酸激酶。已在淋巴和骨髓恶性肿瘤中检测到 Pim-1 的表达水平升高， 并且 Pim-1 在最近被确定为前列腺癌的预后标记物。K.Peltola， “Signaling in Cancer ： Pim-1 Kinase and itsPartners” ， Annales Universitatis Turkuensis， Sarja-Ser.D Osa-Tom.616， (2005 年 8 月 30 日 )， http://kirjasto.utu. fi/julkaisupalvelut/annaalit/2004/D616.html。Pim-1 起 到 细 胞 存 活 因 子 的 作 用， 并且可阻止恶性细胞的凋亡。K.Petersen Shay 等人， Molecular Cancer Research 3 ： 170-181(2005)。
极 光 激 酶 (Aurora kinase)( 极 光 -A(Aurora-A)、极 光 -B(Aurora-B)、极 光 -C(Aurora-C)) 是丝氨酸 / 苏氨酸蛋白质激酶， 其与人类癌症例如结肠癌、 乳癌及其它 实体瘤有牵连。极光 -A( 有时也称为 AIK) 被认为与调制细胞周期的蛋白质磷酸化事件 有关。具体地， 极光 -A 可以在控制有丝分裂过程中的染色体精确分离方面起作用。细 胞周期的错误调节可以导致细胞增殖和其它异常。在人结肠癌组织中发现极光 -A、 极 光 -B、 极 光 -C 都 被 超 量 表 达。( 参 见 Bischoff 等 人， EMBO J.， 17 ： 3052-3065(1998) ； Schumacher 等人， J.Cell Biol.143 ： 1635-1646(1998) ； Kimura 等人， J.Biol.Chem.， 272 ： 13766-13771(1997))。
c-Met 是一种原癌基因， 它们编码肝细胞生长因子 / 分散因子 (HGF/SF) 的酪氨酸 激酶受体。c-Met 蛋白主要在上皮细胞中表达， 并且由于其功能， 其亦称为肝细胞生长因 子受体或 HGFR。在 HGF/SF 活化 c-Met 时， c-Met 又可以活化多种激酶途径， 包括从 Ras 到 Raf 到 Mek 到促分裂原活化蛋白激酶 ERK1 到转录因子 ETS1 的途径。Met 信号已经在人癌 症的病因学和恶性进展中有所牵连 ( 参见 Birchmeier 等人， Nature Reviews Molecular Cell Biology， 4： 915-925(2003) ； Zhang 等人， Journal of Cellular Biochemistry， 88 ： 408-417(2003) ； 和 Paumelle 等人， Oncogene， 21 ： 2309-2319(2002))。
促 分 裂 原 活 化 蛋 白 激 酶 活 化 的 蛋 白 激 酶 2(MAPKAP K2 或 MK2) 介 导 多 种
p38MAPK- 依赖性细胞反应。MK2 是一种重要的细胞内调制剂， 调制在许多急性和慢性炎症 性疾病 ( 例如， 类风湿性关节炎和炎症性肠病 ) 中有牵连的细胞因子的产生， 所述细胞因 子诸如肿瘤坏死因子 α(TNFa)、 白细胞介素 6(IL-6) 和干扰素 γ(IFNg)。MK2 存在于未 受刺激的细胞的细胞核中， 并在刺激时移到细胞质并使马铃薯球蛋白和 HSP27 磷酸化和活 化。MK2 还涉及心衰、 脑缺血性损伤、 应激耐力的调节和 TNF-α 的产生 ( 参见 Deak 等人， EMBO.17 ： 4426-4441(1998) ； Shi 等 人， Biol.Chem.383 ： 1519-1536(2002) ； Staklatvala.， Curr.Opin.Pharmacol.4 ： 372-377(2004) ；和 Shiroto 等 人， J.Mol.Cell Cardiol.38 ： 93-97(2005))。
需要有效的蛋白质激酶抑制剂来治疗或预防与异常的细胞增殖有关的疾病状态。 此外， 期望激酶抑制剂对目标激酶具有高亲合力， 以及具有相对于其它蛋白质激酶的高选 择性。 可以容易地合成并且作为细胞增殖的有效力的抑制剂的小分子化合物是例如以下的 那些 ： 一种或多种蛋白质激酶 ( 诸如 CHK1、 CHK2、 VEGF(VEGF-R2)、 Pim-1、 CDKs 或 CDK/ 细胞 周期蛋白复合物 ) 的抑制剂， 以及受体酪氨酸激酶和非受体酪氨酸激酶二者的抑制剂。 发明内容
在一个方面中， 本发明提供式 (I) 的化合物 ：及其药学上可接受的盐， 溶剂合物， 酯， 前体药物和立体异构体， 其中虚线表示任 选的和另外的键， 且其中 ：
Q为：
M 为 R 1， -C(O)R 1， -C(S)R 1， -S(O)R 1， -S(O) 2R 1， -S(O) 2NHR 1， -C(O)OR 1， -C(O) 1 1 1 1 1 1 1 NHR ， -NHC(O)NH-R ， -NHC(S)NHR ， -NHC(O)OR ， -NHS(O)2R ， -N(R )(-C(O)R ) 或 -N(R1)2 ； R1 的每次出现独立地为 H， 烷基， 烯基， 炔基， -( 亚烷基 )m- 芳基， -( 亚烷基 )m- 环烷基， -( 亚
烷基 )m- 杂芳基， -( 亚烷基 )m- 杂环烷基或 -( 亚烷基 )m- 杂环烯基， 其中任何芳基， 环烷基， 杂芳基， 杂环烷基或杂环烯基基团可以任选地在一个或多个环碳原子上被任何以下取代基 取代， 所述取代基各自独立地选自卤代， 烷基， 烯基， 炔基， 卤代烷基， 羟基烷基， -OR6， -( 亚 6 6 6 6 7 烷基 )m-N(R )2， -C(O)OR ， -NHC(O)R ， -C(O)N(R )2， -S(O)2R ， -CN， -NO2， -( 亚烷基 )m- 芳 基， -( 亚烷基 )m- 环烷基， -( 亚烷基 )m- 杂芳基， -( 亚烷基 )m- 杂环烷基和 -( 亚烷基 ) 其中任何杂环烷基或杂环烯基基团可以任选地在一个或多个环氮原子上 m- 杂环烯基 ； 被任何以下取代基取代， 所述取代基各自独立地选自烷基， 烯基， 炔基， 卤代烷基， 羟基 6 6 6 7 烷 基， -( 亚 烷 基 )m-N(R )2， -C(O)OR ， -C(O)N(R )2， -S(O)2R ， -( 亚 烷 基 )m- 芳 基， -( 亚 烷基 )m- 环烷基， -( 亚烷基 )m- 杂芳基， -( 亚烷基 )m- 杂环烷基和 -( 亚烷基 )m- 杂环烯 基； 和其中任何芳基或杂芳基取代基基团可以任选地被最多 5 个取代基取代， 所述取代 6 6 基可以是相同的或不同的且选自卤代， -OH， 烷基， -C(O)OR ， -N(R )2， -NHC(O)R6， -C(O) 6 7 N(R )2， -S(O)2R ， -CN， -OH， -NO2， 和 -O- 烷基 ； 和其中任何芳基， 环烷基， 杂芳基， 杂环烷基或 杂环烯基基团可以任选地稠合于芳基， 环烷基， 杂芳基， 杂环烷基或杂环烯基基团 ； 2
R 的 每 次 出 现 独 立 地 为 H， 烷 基， 卤 代 烷 基， 羟 基 烷 基， -( 亚 烷 基 )m-C(O) 6 6 6 2 N(R )2， -( 亚烷基 )m-NHC(O)R 或 -( 亚烷基 )m-N(R )2， 或 R 与其所连接的环碳原子合起来 形成羰基基团 ；
R3 为 H， 烷 基， 卤 代 烷 基， 羟 基 烷 基， -( 亚 烷 基 )m-C(O)N(R6)2， -( 亚 烷 基 ) 6 6 3 3a 或 R 和 R 与其各自连接的同一碳原子合起来形成羰 m-NHC(O)-R 或 -( 亚烷基 )m-N(R )2， 基基团或螺环的环烷基或杂环烷基基团 ；
R3a 为 H， 烷 基， 卤 代 烷 基， 羟 基 烷 基， -( 亚 烷 基 )m-C(O)N(R6)2， -( 亚 烷 基 ) 6 6 m-NHC(O)-R 或 -( 亚烷基 )m-N(R )2 ；
R5 的每次出现独立地为 H， 烷基， -( 亚烷基 )m- 芳基， -( 亚烷基 )m- 杂芳基， -( 亚 6 6 烷基 )m- 杂环烷基， -( 亚烷基 )m-N(R )2， -( 亚烷基 )m-OH， -( 亚烷基 )m-NHC(O)R ， 羟基烷基， 6 6 6 6 卤代烷基， -C(O)R ， -C(O)OR ， -C(O)-( 亚烷基 )m-N(R )2， -( 亚烷基 )m-NHC(O)R ， -NHC(O) 6 7 OR 或 -NHS(O)2R ；
R6 的每次出现独立地为 H， 烷基， 卤代烷基， 环烷基， 芳基， 杂环烷基或杂芳基 ； 7
R 的每次出现独立地为 H， 烷基， 芳基， 环烷基或卤代烷基 ； 8
R 为 H， 烷基， -OH， -O- 烷基或卤代烷基 ； 10
R 为 H， 烷基， 卤代烷基， 羟基烷基， -( 亚烷基 )m-C(O)N(R6)2， -( 亚烷基 )m-NHC(O) 6 6 10 10a R 或 -( 亚烷基 )m-N(R )2， 或者 R 和 R 与其各自连接的同一碳原子合起来形成羰基基团 或螺环的环烷基或杂环烷基基团 ；
R10a 为 H， 烷 基， 卤 代 烷 基， 羟 基 烷 基， -( 亚 烷 基 )m-C(O)N(R6)2， -( 亚 烷 基 ) 6 6 m-NHC(O)-R 或 -( 亚烷基 )m-N(R )2 ；
R11 的 每 次 出 现 独 立 地 为 H， 烷 基， 卤 代 烷 基， 羟 基 烷 基， -( 亚 烷 基 )m-C(O) 6 6 6 11 N(R )2， -( 亚烷基 )m-NHC(O)-R 或 -( 亚烷基 )m-N(R )2， 或 R 与其所连接的环碳原子合起来 形成羰基基团 ；
R12 的每次出现独立地为 H， 烷基， -( 亚烷基 )m- 芳基， -( 亚烷基 )m- 杂芳基， -( 亚 7 6 6 烷基 )m- 杂环烷基， -S(O)2R ， 卤代烷基， 羟基烷基， -C(O)R 或 -C(O)OR ；
Ar 为 亚 芳 基 或 亚 杂 芳 基， 其中所述亚芳基或亚杂芳基通过任何两个其相邻的环碳原子进行连接， 并且其中所述亚芳基或亚杂芳基基团可以任选地被最多 4 个取 代基取代， 所述取代基可以是相同的或不同的且独立地选自卤代， 烷基， 烷氧基， 芳基 6 7 7 6 6 氧 基， -NH2， -NH- 烷 基， -N( 烷 基 )2， -SR ， -S(O)R ， -S(O)2R ， -C(O)R ， -C(O)OR ， -C(O) 6 6 2 3 N(R )2， -NHC(O)R ， 卤代烷基， -CN 和 NO2， 使得当 Ar 为四氢亚萘基， R 和 R 各自都不是氢 ； 12 5 5
W 为 -N(R )2-， -S-， -O- 或 -C(R )2-， 其中在 W 为 -C(R )2- 时， 两个 R5 基团和它 们所连接的同一碳原子可以合起来形成螺环的环烷基或杂环烷基基团， 其中这种螺环基 团可以任选地被最多 4 个基团取代， 所述基团可以是相同的或不同的且选自卤代， 烷基， 6 6 6 6 烯基， 炔基， 卤代烷基， 羟基烷基， -OR ， -( 亚烷基 )m-N(R )2， -C(O)OR ， -NHC(O)R ， -C(O) 6 7 N(R )2， -S(O)2R ， -CN， -OH， -NO2， -( 亚烷基 )m- 芳基， -( 亚烷基 )m- 环烷基， -( 亚烷基 )m- 杂 芳基， -( 亚烷基 )m- 杂环烷基和 -( 亚烷基 )m- 杂环烯基 ；
Y 为 H， 卤代， 烷基或 -CN ；
在所述任选的和另外的键不存在时， Z 为 -C(R8)- 或 -N- ； 在所述任选的和另外的 键存在时， Z 为 -C- ；
m 的每次出现独立地为 0 或 1 ；
n 为 0-2 的整数 ； 和
p 为 0 或 1。
在一个方面中， 所述式 (I) 的化合物 (“噻唑衍生物” ) 可用作蛋白激酶抑制剂。
在另一个方面中， 所述噻唑衍生物可用于治疗或预防增殖性病症、 抗增殖病症、 炎 症、 关节炎、 中枢神经系统病症、 心血管疾病、 脱发、 神经元疾病、 缺血性损伤、 病毒感染、 真 菌感染、 或与蛋白激酶活性有关的病症 ( 各自为 “病况” )。
在另一个方面中， 本发明提供药物组合物， 包括有效量的至少一种噻唑衍生物和 药学上可接受的载体。所述组合物可用于治疗或预防患者的病况。
在又一个方面中， 本发明提供治疗或预防患者的病况的方法， 所述方法包括对患 者给予有效量的至少一种噻唑衍生物。
在另一个方面中， 本发明提供治疗患者的癌症的方法， 所述方法包括对患者给予 有效量的至少一种噻唑衍生物。
在另一个方面中， 本发明提供治疗患者的癌症的方法， 所述方法包括对患者给予 至少一种噻唑衍生物和至少一种非噻唑衍生物的另外的抗癌剂， 其中的给药量在一起时对 于治疗癌症是有效的。
发明详述
在一个实施方案中， 本发明提供式 (I) 的噻唑衍生物和或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯和前体药物。所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的病况。
定义和缩写
如上所用并贯穿本公开， 除非另有陈述， 以下术语应当被理解具有以下的含义 ：
″酰基″是指 H-C(O)-， 烷基 -C(O)- 或环烷基 -C(O)- 基团， 其中各基团如前所述。 对母体部分的结合通过羰基进行的。在一个实施方案中， 酰基包含低级烷基。适合的酰基 基团的非限制性实例包括甲酰基， 乙酰基和丙酰基。
″烷氧基″是指烷基 -O- 基团， 其中的烷基基团如前所述。适合的烷氧基基团的 非限制性实例包括甲氧基， 乙氧基， 正丙氧基， 异丙氧基和正丁氧基。对母体部分的结合通过醚氧进行的。
″烷氧基羰基″是指烷基 -O-CO- 基团。适合的烷氧基羰基基团的非限制性实例 包括甲氧基羰基和乙氧基羰基。对母体部分的结合通过羰基进行的。
″烷基″是指脂肪族烃基团， 其可以是直链的或支链的， 且在链中包含约 1- 约 20 个碳原子。 在一个实施方案中， 烷基基团在链中包含约 1- 约 12 个碳原子。 在另一个实施方 案中， 烷基基团在链中包含约 1- 约 6 个碳原子。支链是指有一个或多个低级烷基基团 ( 诸 如， 甲基， 乙基或丙基 ) 连接于直链的烷基链。低级烷基是指在链中具有约 1- 约 6 个碳原 子的基团， 其可以是直链或支链的。烷基基团可以是未取代的或任选地被一个或多个取代 基取代， 所述取代基可以是相同的或不同的， 每个取代基独立地选自卤代， 烷基， 芳基， 环烷 基， 氰基， 羟基， 烷氧基， -S- 烷基， 氨基， -NH( 烷基 )， -NH( 环烷基 )， -N( 烷基 )2， -O-C(O)- 烷 基， -O-C(O)- 芳基， -O-C(O)- 环烷基， 羧基和 -C(O)O- 烷基。适合的烷基基团的非限制性实 例包括甲基， 乙基， 正丙基， 异丙基， 正丁基， 仲丁基， 异丁基， 叔丁基， 正戊基， 异戊基， 新戊 基， 正己基， 正庚基和正辛基。在一个实施方案中， 烷基基团为 “C1-C6 烷基基团” ， 具有 1-6 个碳原子。
″烷基芳基″是指烷基 - 亚芳基 - 基团， 其中的烷基和亚芳基如前所述。在一个 实施方案中， 烷基芳基包括低级烷基基团。 适合的烷基芳基基团的非限制性实例为甲苯基。 对母体部分的结合通过亚芳基基团进行的。
″烷基磺酰基″是指烷基 -S(O2)- 基团。在一个实施方案中， 烷基磺酰基基团的 所述烷基部分为低级烷基 ( 即， C1-C6 烷基 )。对母体部分的结合通过磺酰基部分进行的。
″烷硫基″是指烷基 -S- 基团， 其中的烷基基团如前所述。适合的烷硫基基团的 非限制性实例包括甲硫基和乙硫基。烷硫基基团通过其硫原子结合于母体部分。
″烯基″是指包含至少一个碳 - 碳双键的脂肪族烃基团， 其可以是直链或支链的 且在链中包括约 2- 约 15 个碳原子。在一个实施方案中， 烯基基团在链中具有约 2- 约 12 个碳原子 ； 在另一个实施方案中， 烯基基团在链中具有约 2- 约 6 个碳原子。支链是指有一 个或多个低级烷基基团 ( 诸如， 甲基， 乙基或丙基 ) 连接于直链的烯基链。低级烯基是指在 链中具有约 2- 约 6 个碳原子， 可以是直链或支链的。烯基基团可以是未取代的或任选地被 一个或多个取代基取代， 所述取代基可以是相同的或不同的， 每个取代基独立地选自卤代， 烷基， 芳基， 环烷基， 氰基， 烷氧基和 -S( 烷基 )。适合的烯基基团的非限制性实例包括乙烯 基， 丙烯基， 正丁烯基， 3- 甲基丁 -2- 烯基， 正戊烯基， 辛烯基和癸烯基。
“亚烷基” 是指上述定义的烷基基团， 其中烷基基团的一个氢原子已经替换为键。 亚烷基基团的非限制性实例包括 -CH2-， -CH2CH2-， -CH2CH2CH2-， -CH2CH2CH2CH2-， -CH(CH3) CH2CH2-， -CH(CH3)- 和 -CH2CH(CH3)CH2-。在一个实施方案中， 亚烷基基团具有 1- 约 6 个碳 原子。在另一个实施方案中， 亚烷基基团是支链的。在另一个实施方案中， 亚烷基基团是直 链的。
“亚烯基” 是指通过从上述定义的烯基基团去掉一个氢所得到的双官能基团。亚烯 基的非限制性实例包括 -CH ＝ CH-， -C(CH3) ＝ CH-， 和 -CH ＝ CHCH2-。
″炔基″是指包含至少一个碳 - 碳三键的脂肪族烃基团， 其可以是直链或支链的 且在链中包括约 2- 约 15 个碳原子。在一个实施方案中， 炔基基团在链中具有约 2- 约 12 个碳原子 ； 而在另一个实施方案中， 炔基基团在链中具有约 2- 约 4 个碳原子。支链是指有一个或多个低级烷基基团 ( 诸如， 甲基， 乙基或丙基 ) 连接于直链的炔基链。低级炔基是指 在链中具有约 2- 约 6 个碳原子， 所述链可以是直链的或支链的。适合的炔基基团的非限制 性实例包括乙炔基， 丙炔基， 2- 丁炔基和 3- 甲基丁炔基。炔基基团可以是未取代的或任选 地被一个或多个取代基取代， 所述取代基可以是相同的或不同的， 每个取代基独立地选自 烷基， 芳基和环烷基。
“炔基烷基” 是指炔基 - 烷基 - 基团， 其中所述炔基和烷基如前所述。在一个实施 方案中， 炔基烷基包含低级炔基和低级烷基基团。对母体部分的结合通过烷基进行的。适 合的炔基烷基基团的非限制性实例包括丙炔基甲基。
″芳烷氧基″是指芳烷基 -O- 基团， 其中所述芳烷基基团如前所述。适合的芳烷 基氧基基团的非限制性实例包括苄基氧基和 1- 或 2- 萘甲氧基。对母体部分的结合是通过 醚氧进行的。
″芳烷氧基羰基″是指芳烷基 -O-C(O)- 基团。适合的芳烷氧基羰基基团的非限 制性实例为苄基氧基羰基。对母体部分的结合通过羰基进行的。
″芳烷基″或 “芳基烷基” 是指芳基 - 亚烷基 - 基团， 其中所述芳基和亚烷基如前 所述。在一个实施方案中， 芳烷基包括低级亚烷基基团。适合的芳烷基基团的非限制性实 例包括苄基， 2- 苯乙基和萘基甲基。对母体部分的结合是通过亚烷基基团进行的。
″芳烷硫基″是指芳烷基 -S- 基团， 其中所述芳烷基基团如前所述。适合的芳烷 硫基基团的非限制性实例为苄硫基。对母体部分的结合是通过硫进行的。
″芳基″是指包括约 6- 约 14 个碳原子、 优选约 6- 约 10 个碳原子的芳香族单环 或多环环系。 所述芳基基团可以任选地被一个或多个″环状系统取代基″取代并且是如本 文中定义的， 所述″环状系统取代基″可以是相同的或不同的。适合的芳基基团的非限制 性实例包括苯基和萘基。
“亚芳基” 是指芳基基团， 其中连接于一个芳基基团的环碳原子的氢原子被替换为 单键。
″芳基氧基″是指芳基 -O- 基团， 其中的芳基基团如前所述。适合的芳基氧基基 团的非限制性实例包括苯氧基和萘氧基。对母体部分的结合是通过醚氧进行的。
″芳基氧基羰基″是指芳基 -O-C(O)- 基团。适合的芳基氧基羰基基团的非限制 性实例包括苯氧基羰基和萘氧基羰基。对母体部分的结合是通过羰基进行的。
″芳基磺酰基″是指芳基 -S(O2)- 基团。 对母体部分的连接是通过磺酰基进行的。
″芳硫基″是指芳基 -S- 基团， 其中的芳基基团如前所述。适合的芳硫基基团的 非限制性实例包括苯硫基和萘硫基。对母体部分的结合是通过硫进行的。
“苯并稠合的环烷基” 是指稠合于苯环的上述定义的环烷基部分。苯并稠合的环烷 基的非限制性实例是 2， 3- 二氢化茚基和四氢亚萘基。
“苯并稠合的环烯基” 是指稠合于苯环的上述定义的环烯基部分。苯并稠合的环烷 基的非限制性实例包括茚基。
“苯并稠合的杂环基” 是指稠合于苯环的上述定义的杂环基部分。苯并稠合的杂环 基的非限制性实例包括二氢吲哚基和 2， 3- 二氢苯并呋喃。
“苯并稠合的杂芳基” 是指稠合于苯环的上述定义的杂芳基部分。苯并稠合的杂芳 基的非限制性实例是吲哚基、 吲唑基、 苯并呋喃基、 喹啉基、 异喹啉基、 苯并噻唑基、 吲哚基、苯并咪唑基和苯并噻吩基。
“组合物” 是指包括指定量的指定成分的产物， 以及从指定量的指定成分的组合直 接或间接得到的任何产物。
″环烷基″是指包括约 3- 约 10 个碳原子、 优选约 5- 约 10 个碳原子的非芳香族 单环或多环环系。在一个实施方案中， 环烷基环包含约 5- 约 7 个环原子。环烷基基团可以 任选地被 “环状系统取代基” 取代并且是如上述定义的， 所述 “环状系统取代基” 可以是相同 的或不同的。环烷基基团可以任选地稠合于芳基、 杂芳基或杂环烷基环。环烷基基团的环 碳原子可以任选地与氧原子以双键结合， 以形成羰基基团并产生环烷酰基基团。适合的单 环环烷基的非限制性实例包括环丙基， 环戊基， 环己基， 环庚基， 环戊酰基， 环己酰基等。适 合的多环的环烷基的非限制性实例包括十氢化萘基、 降冰片基、 金刚烷基等。
“环烷基烷基” 是指通过烷基部分 ( 如上定义 ) 连接于母核的上述定义的环烷基部 分。适合的环烷基烷基的非限制性实例包括环己基甲基， 金刚烷基甲基等。
″环烯基″是指非芳香族的单环或多环环系， 包括 3- 约 10 个碳原子且具有至少 一个环内碳 - 碳双键。在一个实施方案中， 环烯基基团具有约 5- 约 10 个环碳原子。在另 一个实施方案中， 环烯基基团具有约 5- 约 7 个环碳原子。环烯基基团可以任选地被一个或 多个相同或不同的 “环状系统取代基” 取代， 并且如上述定义的。适合的单环的环烯基的非 限制性实例包括环戊烯基， 环己烯基， 环庚 -1， 3- 二烯基等。适合的多环的环烯基的非限制 性实例为降冰片烯基。
“环烯基烷基” 是指通过烷基部分 ( 如上定义 ) 连接于母核的上述定义的环烯基部 分。适合的环烯基烷基的非限制性实例包括环戊烯基甲基， 环己烯基甲基等。
″有效量″或″治疗有效量″是指在对罹患病况的患者给药时有效产生期望的 治疗、 改善、 抑制性或预防效果的噻唑衍生物和 / 或另外的治疗剂、 或其组合物的量。在本 发明的组合治疗中， 有效量可以是指每个单独的试剂的有效量或者是指所述组合作为整体 的有效量， 其中所给药的所有试剂的量在一起时是有效的， 但是其中所述组合中的组分试 剂可能并不是分别地以有效量存在。
“卤代” 是指 -F， -Cl， -Br 或 -I。在一个实施方案中， 卤代是指 -Cl 或 -Br。在另 一个实施方案中， 卤代是指 -F。
“卤代烷基″是指上述定义的烷基基团， 其中烷基基团的一个或多个氢原子 已 经 替 换 为 卤 素。 在 一 个 实 施 方 案 中， 卤 代 烷 基 基 团 具 有 1-6 个 碳 原 子。 在 另 一 个 实 施 方 案 中， 卤 代 烷 基 基 团 被 1-3 个 F 原 子 取 代。 卤 代 烷 基 基 团 的 非 限 制 性 实 例 包 括 -CH2F， -CHF2， -CF3， -CH2Cl 和 -CCl3。
″杂芳基″是指芳香族的单环或多环环系， 包括约 5- 约 14 个环原子， 其中 1-4 个 环原子独立地为 O， N 或 S， 其余的环原子是碳原子。在一个实施方案中， 杂芳基基团具有 5-10 个环原子。在另一个实施方案中， 杂芳基基团是单环的且具有 5 或 6 个环原子。杂芳 基基团可以任选地被一个或多个相同或不同的 “环状系统取代基” 取代， 并且如本文中以下 定义的。杂芳基基团通过环碳原子进行连接， 且杂芳基的任何氮原子可以任选地被氧化为 相应的 N- 氧化物。术语 “杂芳基” 还包括稠合于苯环的上述定义的杂芳基基团。杂芳基的 非限制性实例包括吡啶基、 吡嗪基、 呋喃基、 噻吩基、 嘧啶基、 吡啶酮 ( 包括 N- 取代的吡啶 酮 )、 异噁唑基、 异噻唑基、 噁唑基、 噻唑基、 吡唑基、 呋咱基、 吡咯基、 三唑基、 1， 2， 4- 噻二唑基、 吡嗪基、 哒嗪基、 喹喔啉基、 2， 3- 二氮杂萘基、 羟吲哚基、 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶基、 咪唑并 [2， 1-b] 噻唑基、 苯并呋咱基、 吲哚基、 氮杂吲哚基、 苯并咪唑基、 苯并噻吩基、 喹啉基、 咪唑 基、 噻吩并嘧啶基、 喹唑啉基、 噻吩并嘧啶基、 吡咯并吡啶基、 咪唑并吡啶基、 异喹啉基、 苯并 氮杂吲哚基、 1， 2， 4- 三嗪基、 苯并噻唑基等。术语 “杂芳基” 还指部分饱和的杂芳基部分， 诸 如例如， 四氢异喹啉基、 四氢喹啉基等。在一个实施方案中， 杂芳基基团是未被取代的。在 另一个实施方案中， 杂芳基基团是 5 元的杂芳基。在另一个实施方案中， 杂芳基基团是 6 元 的杂芳基。
如本文中使用的， 术语 “亚杂芳基” 是指杂芳基基团， 其中连接于杂芳基基团的一 个环原子的氢原子被单键代替。
“杂芳基烷基” 是指通过烷基部分 ( 如上定义 ) 连接于母核的上述定义的杂芳基部 分。适合的杂芳基的非限制性实例包括 2- 吡啶基甲基， 喹啉基甲基等。
″杂环基″是指非芳香族的饱和的单环或多环环系包括 3- 约 l0 个环原子， 其中 的 1-4 个环原子独立地是 O、 S 或 N， 其余的环原子是碳原子。在一个实施方案中， 杂环基基 团具有约 5- 约 10 个环原子。在另一个实施方案中， 杂环基基团具有 5 或 6 个环原子。在 环系中不能有相邻的氧和 / 或硫原子。杂环基环中的任何 -NH 可以以被保护形式存在， 诸 如例如， 作为 -N(BOC)， -N(Cbz)， -N(Tos) 基团等 ； 这种被保护的杂环基基团也被认为是本 发明的一部分。术语 “杂环基” 还包括稠合于芳基 ( 例如， 苯 ) 或杂芳基环的上述定义的杂 环基基团。杂环基基团可以任选地被一个或多个相同或不同的 “环状系统取代基” 取代， 并 且如本文中以下定义的。 杂环基的氮或硫原子可以任选地被氧化为相应的 N- 氧化物、 S- 氧 化物或 S， S- 二氧化物。单环的杂环基环的非限制性实例包括哌啶基、 吡咯烷基、 哌嗪基、 吗 啉基、 硫代吗啉基、 噻唑烷基、 1， 4- 二氧杂环己烷基、 四氢呋喃基、 四氢噻吩基、 内酰胺、 内酯 等。杂环基基团的环碳原子可以被官能化为羰基基团。这种杂环基基团的说明性实例为吡 咯烷酮基 ：
在一个实施方案中， 杂环基基团是未被取代的。 在另一个实施方案中， 杂环基基团 是 5 元的杂环基。在另一个实施方案中， 杂环基基团是 6 元的杂环基。
“杂环基烷基” 是指通过烷基部分 ( 如上定义 ) 连接于母核的上述定义的杂环基部 分。适合的杂环基烷基的非限制性实例包括哌啶基甲基， 哌嗪基甲基等。
″杂环烯基″是指上述定义的杂环基基团， 其中杂环基基团包含 3-10 个环原子 和至少一个环内的碳 - 碳双键或碳 - 氮双键。在一个实施方案中， 杂环烯基基团具有 5-10 个环原子。 在另一个实施方案中， 杂环烯基团是单环的且具有 5 或 6 个环原子。 杂环烯基基 团可以任选地被一个或多个环状系统取代基取代， 其中环状系统取代基如上述定义的。杂 环烯基的氮或硫原子可以任选地被氧化为相应的 N- 氧化物、 S- 氧化物或 S， S- 二氧化物。 杂环烯基基团的非限制性实例包括 1， 2， 3， 4- 四氢吡啶基、 1， 2- 二氢吡啶基、 1， 4- 二氢吡啶
基、 1， 2， 3， 6- 四氢吡啶基、 1， 4， 5， 6- 四氢嘧啶基、 2- 吡咯啉基、 3- 吡咯啉基、 2- 咪唑啉基、 2- 吡唑啉基、 二氢咪唑基、 二氢噁唑基、 二氢噁二唑基、 二氢噻唑基、 3， 4- 二氢 -2H- 吡喃基、 二氢呋喃基、 氟取代的二氢呋喃基、 7- 氧杂双环 [2.2.1] 庚烯基、 二氢噻吩基、 二氢噻喃基 等。杂环烯基基团的环碳原子可以被官能化为羰基基团。这种杂环烯基基团的说明性实例 为：
在一个实施方案中， 杂环烯基基团是未被取代的。 在另一个实施方案中， 杂环烯基 基团是 5 元的杂环烯基。
“杂环烯基烷基” 是指通过烷基部分 ( 如上定义 ) 连接于母核的上述定义的杂环烯 基部分。
需要指出的是， 在本发明的包含杂原子的环状系统中， 在与 N、 O 或 S 相邻的碳原子 上不能有羟基基团， 以及在与另一个杂原子相邻的碳上不能有 N 或 S 基团。因此， 例如在以 下环中 ：
不能有 -OH 直接连接于标记为 2 和 5 的碳。 还要指出的是， 互变异构形式， 诸如例如， 以下部分 ：在本发明的某些实施方案中被认为是同等的。
″杂芳烷基″是指杂芳基 - 烷基 - 基团， 其中所述杂芳基和烷基如前所述。在一 个实施方案中， 杂芳烷基包含低级烷基基团。适合的芳烷基基团的非限制性实例包括吡啶 基甲基， 和喹啉 -3- 基甲基。对母体部分的结合通过烷基进行的。
“羟基烷基″是指上述定义的烷基基团， 其中烷基基团的一个或多个氢原子已经 被 -OH 基团代替。在一个实施方案中， 羟基烷基基团具有 1-6 个碳原子。羟基烷基基团的 非限制性实例包括 -CH2OH， -CH2CH2OH， -CH2CH2CH2OH 和 -CH2CH(OH)CH3。
“患者” 是人或非人类的哺乳动物。在一个实施方案中， 患者是人。在另一个实施 方案中， 患者是非人类的哺乳动物， 包括但不限于猴、 狗、 狒狒、 恒河猴、 小鼠、 大鼠、 马、 猫或 兔。在另一个实施方案中， 患者是伴侣动物， 包括但不限于狗、 猫、 兔、 马或雪貂。在一个实
施方案中， 患者是狗。在另一个实施方案中， 患者是猫。
用于化合物的术语 “纯化的” 、 “纯化形式的” 或 “经过分离和纯化的形式” 是指所 述化合物在从合成过程 ( 例如， 从反应混合物分离 )、 或天然来源或其组合分离之后的物理 状态。因此， 用于化合物的术语 “纯化的” 、 “纯化形式的” 或 “经过分离和纯化的形式” 是指 所述化合物在从本文中所述的或本领域技术人员公知的一种或多种纯化过程 ( 例如， 色谱 法、 重结晶等 ) 以可以通过本文中所述的或本领域技术人员公知的标准分析技术来表征的 充分的纯度得到之后物理状态。
“环状系统取代基” 是指连接于芳香族或非芳香族环系的取代基基团， 所述取代 基例如代替环系上的一个可用氢。环状系统取代基可以是相同或不同的， 各自独立地选自 烷基， 烯基， 炔基， 芳基， 杂芳基， - 烷基 - 芳基， - 芳基 - 烷基， - 亚烷基 - 杂芳基， - 亚烯 基 - 杂芳基， - 亚炔基 - 杂芳基， 羟基， 羟基烷基， 卤代烷基， -O- 烷基， -O- 卤代烷基， -亚 烷基 -O- 烷基， -O- 芳基， 芳烷氧基， 酰基， -C(O)- 芳基， 卤代， 硝基， 氰基， 羧基， -C(O)O- 烷 基， -C(O)O- 芳基， -C(O)O- 亚烷基 (alkelene)- 芳基， -S(O)- 烷基， -S(O)2- 烷基， -S(O)- 芳 基， -S(O)2- 芳基， -S(O)- 杂芳基， -S(O)2- 杂芳基， -S- 烷基， -S- 芳基， -S- 杂芳基， -S- 亚烷 基 - 芳基， -S- 亚烷基 - 杂芳基， 环烷基， 杂环基， -O-C(O)- 烷基， -O-C(O)- 芳基， -O-C(O)- 环 烷 基， -C( ＝ N-CN)-NH2， -C( ＝ NH)-NH2， -C( ＝ NH)-NH( 烷 基 )， Y1Y2N-， Y1Y2N- 烷 基 -， Y1Y2NC(O)- 和 Y1Y2NSO2-， 其中 Y1 和 Y2 可以是相同或不同的且各自独立地选自氢， 烷基， 芳 基， 环烷基， 和 - 亚烷基 - 芳基。 “环状系统取代基” 还可以是指同时代替环状系统上两个相 邻碳原子上的两个可用氢 ( 每个碳上的一个 H) 的单个部分。这种部分的实例是亚甲二氧 基、 亚乙二氧基， -C(CH3)2-， -O- 亚烷基 -O- 等， 其形成诸如例如以下的部分 ：
术语 “被取代的” 是指指定原子上的一个或多个氢被来自指定组的选择所代替， 条 件是没有超过所述指定原子在现有情况下的正常化合价， 且所述取代产生稳定的化合物。 取代基和 / 或变量的组合可被允许， 只要这种组合获得稳定的化合物即可。 “稳定的化合物” 或 “稳定的结构” 是指化合物足够稳固， 能够经受住从反应混合物分离为有用的纯度， 并且 配制为有效的治疗剂。
术语 “任选地被取代的” 是指任选地被所述指定的基团、 自由基或部分取代。
还需要指出的是， 在正文、 方案、 实施例和表中的具有未得到满足的化合价的任何 碳原子或杂原子被假定具有足够数目的氢原子以满足所述化合价。
在化合物中的官能团被描述为 “被保护的” 时， 这是指该基团处于被修饰的形式， 以防止在化合物进行反应时在被保护位置发生不期望的副反应。 适合的保护基是本领域技 术人员已知的， 以及参考标准教科书诸如例如， T.W.Greene 等人， Protective Groups in OrganicSynthesis(1991)， Wiley， New York。
在任何变量 ( 例如， 芳基， 杂环， R2 等 ) 在任何构成或本文所述任何化学结构或化 学式中出现超过一次时， 其在每次情况时的定义与其在所有其它情况中的定义是无关的。
本发明化合物的前体药物和溶剂合物也被本文考虑在内。关于前体药物的讨
论 提 供 在 T.Higuchi 和 V.Stella， Pro-drugs as Novel DeliverySystems(1987)14， the A.C.S.Symposium Series， 以及在 BioreversibleCarriers in Drug Design， (1987) Edward B.Roche， 编者， AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press 中。 术语 “前体药物” 是指在体内转化以提供噻唑衍生物或该化合物的药学上可接受的盐、 水 合物或溶剂合物的化合物 ( 例如药物前体 )。所述转化可以通过多种机制发生 ( 例如， 通 过代谢处理或化学加工 )， 诸如例如， 通过在血液中水解。关于前体药物的使用的讨论由 T.Higuchi 和 W.Stella， “Pro-drugs asNovel Delivery Systems， ” the A.C.S.Symposium Series， 卷 14， 以及在 Bioreversible Carriers in Drug Design， 编者 Edward B.Roche， AmericanPharmaceutical Association and Pergamon Press， 1987 中提供。
例如， 如果噻唑衍生物或该化合物的药学上可接受的盐、 水合物或溶剂合物包含 羧酸官能团， 则前体药物可以包括通过用以下的基团代替酸基的氢原子所形成的酯， 所述 基团诸如例如 (C1-C8) 烷基， (C2-C12) 烷酰基氧基甲基， 具有 4 到 9 个碳原子的 1-( 烷酰基氧 基 ) 乙基， 具有 5 到 10 个碳原子的 1- 甲基 -1-( 烷酰基氧基 )- 乙基， 具有 3 到 6 个碳原子 的烷氧基羰基氧基甲基， 具有 4 到 7 个碳原子的 1-( 烷氧基羰基氧基 ) 乙基， 具有 5 到 8 个 碳原子的 1- 甲基 -1-( 烷氧基羰基氧基 ) 乙基， 具有 3 到 9 个碳原子的 N-( 烷氧基羰基 ) 氨 基甲基， 具有 4 到 10 个碳原子的 1-(N-( 烷氧基羰基 ) 氨基 ) 乙基， 3- 酞基， 4- 巴豆酸内酯 基， γ- 丁内酯 -4- 基， 二 -N， N-(C1-C2) 烷基氨基 (C2-C3) 烷基 ( 诸如 β- 二甲氨基乙基 )， 氨基甲酰基 -(C1-C2) 烷基， N， N- 二 (C1-C2) 烷基氨基甲酰基 -(C1-C2) 烷基和哌啶子基、 吡咯 烷基或 4- 吗啉基 (C2-C3) 烷基等。
类似地， 如果噻唑衍生物包含醇官能团， 则可以通过用以下基团代替醇基团的氢 原子来形成前体药物， 所述基团诸如例如， (C1-C6) 烷酰基氧基甲基， 1-((C1-C6) 烷酰基氧 基 ) 乙基， 1- 甲基 -1-((C1-C6) 烷酰基氧基 ) 乙基， (C1-C6) 烷氧基羰基氧基甲基， N-(C1-C6) 烷氧基羰基氨基甲基， 琥珀酰基 (succinoyl)， (C1-C6) 烷酰基， α- 氨基 (C1-C4) 烷基， 芳基 酰基和 α- 氨基酰基， 或 - 氨基酰基 -α- 氨基酰基， 其中每个 α- 氨基酰基基团独立地选 自天然存在的 L- 氨基酸， P(O)(OH)2， -P(O)(O(C1-C6) 烷基 )2 或糖基 ( 从半缩醛式的碳水化 合物除去一个羟基基团得到的自由基 ) 等。
如果噻唑衍生物包含胺官能团， 则可以通过用以下基团来替换胺基团的氢来形成 前体药物， 所述基团诸如例如， R- 羰基， RO- 羰基， NRR’ - 羰基， 其中 R 和 R’ 各自独立地为 (C1-C10) 烷基， (C3-C7) 环烷基， 苄基， 或 R- 羰基是天然的 α- 氨基酰基或天然的 α- 氨基酰 1 1 基， -C(OH)C(O)OY ( 其中 Y 为 H， (C1-C6) 烷基或苄基 )， -C(OY2)Y3( 其中 Y2 为 (C1-C4) 烷基 和 Y3 为 (C1-C6) 烷基， 羧基 (C1-C6) 烷基， 氨基 (C1-C4) 烷基或单 -N- 或二 -N， N-(C1-C6) 烷基 4 5 4 5 氨基烷基 )， -C(Y )Y ( 其中 Y 为 H 或甲基和 Y 为单 -N- 或二 -N， N-(C1-C6) 烷基氨基吗啉 子基、 哌啶 -1- 基或吡咯烷 -1- 基 ) 等。
本发明的一种或多种化合物可以作为未溶剂化的形式以及作为与药学上可接受 的溶剂例如水、 乙醇等的溶剂化形式存在， 并且意在溶剂化和未溶剂化的形式都被包括在 本发明内。 “溶剂合物” 是指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子的物理结合。这种物理 结合涉及不同程度的离子键和共价键， 包括氢键。在某些情况中， 溶剂合物能够分离， 例如 在一个或多个溶剂分子并入到结晶固体的晶格中的情况中。 “溶剂合物” 包括溶液相溶剂合 物和可分离的溶剂合物。适合的溶剂合物的非限制性实例包括乙醇合物、 甲醇合物等。 “水合物” 是其中溶剂分子是 H2O 的溶剂合物。
本发明的一种或多种化合物可以任选地被转化为溶剂合物。溶剂合物的制备通 常是已知的。因此， 例如， M.Caira 等人， J.PharmaceuticalSci.， 93(3)， 601-611(2004) 描 述了在乙酸乙酯中制备以及从水制备抗真菌药氟康唑的溶剂合物。溶剂合物、 半溶剂合 物、 水合物等的类似制备方法由 E.C.van Tonder 等人， AAPS PharmSciTech.， 5(1)， 文章 12(2004) ； 和 A.L.Bingham 等人， Chem.Commun.， 603-604(2001) 描述。典型的非限制性方 法涉及在高于环境温度的温度用期望量的期望的溶剂 ( 有机溶剂或水或其混合物 ) 溶解本 发明化合物， 并以足以形成晶体的速率冷却溶液， 然后通过标准方法分离晶体。分析技术， 诸如例如， I.R. 光谱学， 显示作为溶剂合物 ( 或水合物 ) 的晶体中溶剂 ( 或水 ) 的存在。
噻唑衍生物可以形成盐， 所述盐也在本发明范围内。 应该理解， 在本文中描述噻唑 衍生物时也包括描述其盐， 除非另有说明。如本文中使用的， 术语 “盐” 表示与无机酸和 / 或有机酸形成的酸性盐， 以及与无机碱和 / 或有机碱形成的碱性盐。另外， 在噻唑衍生物同 时包含碱性部分 ( 诸如但不限于吡啶或咪唑 ) 和酸性部分 ( 诸如但不限于羧酸 ) 时， 可以 形成两性离子 (“内盐” )， 其也在如本文中使用的术语 “盐” 的范围内。优选药学上可接受 的 ( 即， 无毒的、 生理学可接受的 ) 盐， 但是其它盐也是有用的。式 (I) 化合物的盐可以如 下形成 ： 例如使噻唑衍生物与一定量 ( 诸如一当量 ) 的酸或碱在诸如盐在其中沉淀的介质 中反应或者含水介质中反应并随后进行冷冻干燥。
示例性酸加成盐包括醋酸盐、 抗坏血酸盐、 苯甲酸盐、 苯磺酸盐、 硫酸氢盐、 硼酸 盐、 丁酸盐、 柠檬酸盐、 樟脑酸盐、 樟脑磺酸盐、 富马酸盐、 盐酸盐、 氢溴酸盐、 氢碘酸盐、 乳酸 盐、 马来酸盐、 甲磺酸盐、 萘磺酸盐、 硝酸盐、 草酸盐、 磷酸盐、 丙酸盐、 水杨酸盐、 琥珀酸盐、 硫酸盐、 酒石酸盐、 硫氰酸盐、 甲苯磺酸盐 ( 又称为甲苯磺酸盐 ) 等。另外， 通常认为适合于 从碱性药用化合物形成药学有用盐的酸由例如 P.Stahl 等人， Camille G.( 编者 )Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties， Selection and Use.(2002)Zurich ： Wiley-VCH ； S.Berge 等 人， Journal ofPharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19 ； P.Gould ， International J.ofPharmaceutics(1986)33 201-217 ； Anderson 等人， The Practice of MedicinalChemistry(1996)， Academic Press， New York ； 以及在 The OrangeBook(Food & Drug Administration， Washington， D.C. 在其网站上 ) 进行了讨论。这些公开被并入本文 作为参考。
示例性碱性盐包括铵盐 ； 碱金属盐， 诸如钠、 锂、 和钾的盐 ； 碱土金属盐， 诸如钙和 镁的盐 ； 与有机碱 ( 例如， 有机胺 ) 形成的盐， 诸如二环己基胺、 叔丁基胺的盐 ； 以及与氨基 酸形成的盐， 诸如精氨酸、 赖氨酸等的盐。包含碱性氮的基团可以用诸如低级烷基卤化物 ( 例如， 甲基、 乙基、 和丁基的氯化物、 溴化物和碘化物 )、 二烷基硫酸盐 ( 例如， 二甲基、 二乙 基、 和二丁基的硫酸盐 )、 长链卤化物 ( 例如， 癸基、 十二烷基和硬脂基的氯化物、 溴化物和 碘化物 )、 芳烷基卤化物 ( 例如， 苄基溴化物和苯乙基溴化物 )、 和其它的试剂进行季铵化。
意在所有这种酸性盐和碱性盐都是本发明范围内的药学上可接受的盐， 且对于本 发明的目的而言， 所有的酸性盐和碱性盐都被考虑为等价于相应化合物的游离形式。
本发明化合物的药学上可接受的酯包括以下组 ： (1) 通过羟基基团的酯化得到的 羧酸酯， 其中酯基的羧酸部分的非羰基部分选自直链或支链的烷基 ( 例如， 乙酰基、 正丙 基、 叔丁基、 或正丁基 )、 烷氧基烷基 ( 例如， 甲氧基甲基 )、 芳烷基 ( 例如， 苄基 )、 芳基氧基烷基 ( 例如， 苯氧基甲基 )， 芳基 ( 例如， 任选地被例如卤代， C1-4 烷基， 或 C1-4 烷氧基或氨基 取代的苯基 ) ； (2) 磺酸酯， 诸如烷基 - 或芳烷基磺酰基 ( 例如， 甲烷磺酰基 ) ； (3) 氨基酸酯 ( 例如， L- 缬氨酰基或 L- 异亮氨酰基 ) ； (4) 膦酸酯和 (5) 单、 二或三磷酸酯。磷酸酯可以 进一步被酯化， 例如用 C1-20 醇或其反应性衍生物， 或用 2， 3- 二 (C6-24) 酰基甘油。
噻唑衍生物及其盐、 溶剂合物、 酯和前体药物可以以其互变异构形式存在 ( 例如， 作为酰胺或亚氨醚 )。在本文中， 所有这种互变异构形式都被考虑为本发明的一部分。
噻唑衍生物可以包含不对称中心或手性中心， 并由此以不同的立体异构形式存 在。 意在噻唑衍生物的所有立体异构形式及其混合物， 包括外消旋混合物， 形成本发明的一 部分。另外， 本发明包含所有的几何异构体和位置异构体。例如， 如果噻唑衍生物包含双键 或稠环， 则顺式和反式形式以及混合物形式都被包括在本发明范围内。
可以基于其物理化学差异通过本领域技术人员公知的方法将非对映体混合物分 离为单独的非对映体， 诸如例如通过色谱法和 / 或分级结晶。 可以如下分离对映异构体 ： 通 过与适当的光学活性化合物 ( 例如， 手性助剂， 诸如手性的醇或 Mosher′ s 酰氯 ) 反应将 对映异构体混合物转化为非对映体混合物， 分离非对映体并且将单独的非对映体转化 ( 例 如， 水解 ) 为相应的纯的对映异构体。另外， 一些噻唑衍生物可以是阻转异构体 ( 例如， 被 取代的联芳基 ) 并且被认为是本发明的一部分。对映异构体还可以通过使用手性的 HPLC 柱来分离。 还有可能的是， 噻唑衍生物可以以不同的互变异构形式存在， 且所有这种形式都 被包括在本发明范围内。另外， 在本发明中包括该化合物的所有的酮 - 烯醇和亚胺 - 烯胺 形式。
本发明化合物 ( 包括该化合物的盐、 溶剂合物、 酯和前体药物， 以及前体药物的 盐、 溶剂合物和酯 ) 的所有的立体异构体 ( 例如， 几何异构体、 光学异构体等 )， 诸如可以由 于不同取代基上的不对称碳而存在的那些 ( 包括对映体形式 ( 其甚至可以在没有不对称碳 的情况下存在 )、 旋转异构形式、 阻转异构体、 和非对映形式 )， 都被考虑在本发明范围内， 位置异构体也是一样 ( 诸如例如， 4- 吡啶基和 3- 吡啶基 )。( 例如， 如果噻唑衍生物包含双 键或稠环， 则顺式和反式形式以及混合物形式都被包括在本发明范围内。另外， 例如， 在本 发明中包括该化合物的所有的酮 - 烯醇和亚胺 - 烯胺形式。)
本发明化合物的单独的立体异构体可以例如， 基本上不含其它异构体， 或者可以 是混合的， 例如， 作为外消旋物或与所有其它立体异构体或其它选定立体异构体混合。 本发 明的手性中心可以具有如 IUPAC 1974Recommendations 所定义的 S 或 R 构型。对于术语 “盐” 、 “溶剂合物” 、 “酯” 、 “前体药物” 等的使用意在同样地适用于本发明化合物的对映异构 体、 立体异构体、 旋转异构体、 互变异构体、 位置异构体、 外消旋物或前体药物的盐、 溶剂合 物、 酯和前体药物。
本发明还包含同位素标记的本发明化合物， 其与本文中列举的化合物相同， 不同 之处在于一个或多个原子被具有原子质量或质量数与通常在自然界中发现的原子质量或 质量数不同的原子所代替。可以被并入到本发明化合物中的同位素的实例包括氢、 碳、 氮、 2 3 13 14 15 18 17 31 32 35 18 36 氧、 磷、 氟和氯的同位素， 例如分别为诸如 H， H， C， C， N， O， O， P， p， S， F， 和 Cl。 3 14
某些同位素标记的噻唑衍生物 ( 例如， 用 H 和 C 标记的那些 ) 可用于化合物和 / 3 14 或底物组织分布试验。氚化 ( 即， H) 和碳 -14( 即， C) 同位素由于容易制备和可检测性是
2 特别优选的。另外， 用较重同位素诸如氘 ( 即， H) 置换可以实现由更大代谢稳定性所带来 的某些治疗利益 ( 例如， 延长体内半衰期或降低剂量需要 ) 并因此在一些情况中可能是优 选的。同位素标记的噻唑衍生物通常可以通过与以下方案和 / 或实施例中公开的那些相类 似的方法来制备， 用适当的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂。
所述噻唑衍生物以及噻唑衍生物的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物和立体异构体的多 晶型物意在被包括在本发明范围内。
以下使用的下述的缩写， 并具有下述的含义 ：
Boc 为叔丁氧基羰基， dba 为二苄叉基丙酮， DMF 为 N， N- 二甲基甲酰胺， DMSO 为二 甲基亚砜， EtOAc 为乙酸乙酯， LCMS 为液相色谱 - 质谱， MeOH 为甲醇， NMR 为核磁共振， PBS 为磷酸盐缓冲盐水， SPA 为闪烁亲近测定法， Tf 为三氟甲磺酸盐 / 酯， TFA 为三氟乙酸， 和 Xantphos 为 9， 9- 二甲基 -4， 5- 双 ( 二苯膦 ) 呫吨。
式 (I) 的噻唑衍生物
本发明提供式 (I) 的噻唑衍生物 ：
及其药学上可接受的盐， 溶剂合物， 酯， 前体药物和立体异构体， 其中虚线表示任 2 3 3a 10 10a 11 选的和另外的键， 并且其中 R ， R， R ， R ， R ， R ， Ar， Q， W， Z， n 和 p 如上述对于式 (I) 所 定义的。
在一个实施方案中， Q为：
在另一个实施方案中， Q为：
在一个实施方案中， M 为 R1。 在另一个实施方案中， M 为 -C(O)R1。 在又一个实施方案中， M 为 -C(S)R1。 在另一个实施方案中， M 为 -S(O)R1。 在再一个实施方案中， M 为 -S(O)2R1。 在另一个实施方案中， M 为 -S(O)2NHR1。 在另一个实施方案中， M 为 -C(O)OR1。 在一个实施方案中， M 为 -C(O)NHR1。 在另一个实施方案中， M 为 -NHC(O)NHR1。 在另一个实施方案中， M 为 -NHC(S)NHR1。 在又一个实施方案中， M 为 -NHC(O)OR1。 在另一个实施方案中， M 为 -NHS(O)2R1。 在再一个实施方案中， M 为 -N(R1)(-C(O)R1)。 在另一个实施方案中， M 为 -N(R1)2。 在一个实施方案中， M 为 R1， -C(O)OR1， -C(O)NHR1， -NHC(O)R1， -C(O)R1 或 -NHC(O) 在另一个实施方案中， M 为 H， 烷基， 芳基， 杂芳基， 苯基， - 亚烷基 - 芳基或杂环烷NHR1。
基。 在另一个实施方案中， M 为 R1， -C(O)OR1， -C(O)NHR1， -NHC(O)R1， -C(O)R1 或 -NHC(O) NHR1， 其中 R1 为 H， 烷基， 芳基， 杂芳基， 苯基， - 亚烷基 - 芳基或杂环烷基。 1
在一个实施方案中， R 为 H。
在另一个实施方案中， R1 为 - 芳基， - 芳基烷基， - 苯并稠合的环烷基， - 杂芳基， -苯 并稠合的杂芳基或 - 苯并稠合的杂环烯基。
在一个实施方案中， R1 为 - 烷基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 甲基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 烯基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 炔基。
在一个实施方案中， R1 为 - 芳基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 亚烷基 - 芳基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 苯基。
在一个实施方案中， R1 为 - 杂芳基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 亚烷基 - 杂芳基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 吡嗪基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 吡唑基。 在一个实施方案中， R1 为 ：
在又一个实施方案中， R1 为 ：
其中 G 为 H， - 卤代或烷氧基。 在一个实施方案中， R1 为 - 杂环基。 在一个实施方案中， R1 为 - 杂环烯基。 在一个实施方案中， R1 为 - 亚烷基 - 杂环基。 在一个实施方案中， R1 为 - 亚烷基 - 杂环烯基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 吡唑啉基。 在一个实施方案中， R1 为 - 芳基烷基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 苄基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 苯乙基。 在一个实施方案中， R1 为 - 环烷基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 亚烷基 - 环烷基。 在一个实施方案中， R1 为 - 苯并稠合的环烷基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 茚满基。 在一个实施方案中， R1 为 - 苯并稠合的杂芳基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 苯并稠合的杂环基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 苯并稠合的杂环烯基。 在另一个实施方案中， R1 为 - 吲唑基。 在另一个实施方案中， R1 为 ：
其中 J 为 H 或 - 卤代。 在另一个实施方案中， R1 为 ：
在另一个实施方案中， R1 为 ：
在一个实施方案中， R2 为 H。 在另一个实施方案中， R2 为烷基。在一个实施方案中， R2 为 -CH3。 在另一个实施方案中， R2 为 -α-CH3。 在另一个实施方案中， R2 为 -β-CH3。 在另一个实施方案中， R2 为 - 亚烷基 -NH2。 在一个实施方案中， R2 为 -NH2。 在另一个实施方案中， R2 为 -α-NH2。 在另一个实施方案中， R2 为 -β-NH2。 在另一个实施方案中， R2 为 - 亚烷基 -NH2。 在再一个实施方案中， R2 为 -CH2NH2。 在一个实施方案中， R2 与其所连接的碳原子形成羰基基团。 在一个实施方案中， R3 为 -H。 在另一个实施方案中， R3a 为 -H。 在另一个实施方案中， R3 和 R3a 都是 -H。 在又一个实施方案中， R3 为烷基。 在另一个实施方案中， R3 为卤代烷基。 在再一个实施方案中， R3 为羟基烷基。 在一个实施方案中， R3 为 -( 亚烷基 )m-C(O)N(R8)2。 在另一个实施方案中， R3 为 -( 亚烷基 )m-NHC(O)-R9。 在另一个实施方案中， R3 为 -( 亚烷基 )m-N(R9)2。 在一个实施方案中， R3 为 -CH3。 在另一个实施方案中， R3 为 -α-CH3。 在另一个实施方案中， R3 为 -β-CH3。 在一个实施方案中， R3 为 -NH2。 在另一个实施方案中， R3 为 -α-NH2。 在另一个实施方案中， R3 为 -β-NH2。 在另一个实施方案中， R3 为 - 亚烷基 -NH2。 在再一个实施方案中， R3 为 -CH2NH2。 在一个实施方案中， R3 和 R3a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成羰基基团。 在另一个实施方案中， R3 和 R3a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成环烷基基 在另一个实施方案中， R3 和 R3a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成杂环烷基 在另一个实施方案中， R3 和 R3a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成以下基团团。
基团。
之一 ：
在一个实施方案中， R2 和 R2a 都是 H。 在另一个实施方案中， R2 为烷基和 R2a 为 H。 在另一个实施方案中， R2 为 H 和 R2 为烷基。 在一个实施方案中， R10 为 H。 在另一个实施方案中， R10a 为 H。 在另一个实施方案中， R10 和 R10a 都是 H。 在又一个实施方案中， R10 为烷基。 在另一个实施方案中， R10 为卤代烷基。 在再一个实施方案中， R10 为羟基烷基。 在一个实施方案中， R10 为 -( 亚烷基 )m-C(O)N(R8)2。 在另一个实施方案中， R10 为 -( 亚烷基 )m-NHC(O)-R9。 在另一个实施方案中， R10 为 -( 亚烷基 )m-N(R9)2。 在一个实施方案中， R10 为 -CH3。 在另一个实施方案中， R10 为 -α-CH3。 在另一个实施方案中， R10 为 -β-CH3。 在一个实施方案中， R10 为 -NH2。 在另一个实施方案中， R10 为 -α-NH2。 在另一个实施方案中， R10 为 -β-NH2。 在另一个实施方案中， R10 为 - 亚烷基 -NH2。 在再一个实施方案中， R10 为 -CH2NH2。 在一个实施方案中， R10 和 R10a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成羰基基团。 在另一个实施方案中， R10 和 R10a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成环烷基基 在另一个实施方案中， R10 和 R10a 与它们所连接的同一碳原子合起来形成杂环烷基 在一个实施方案中， R11 为 H。 在另一个实施方案中， R11 为烷基。 在一个实施方案中， R11 为 -CH3。 在另一个实施方案中， R11 为 -α-CH3。 在另一个实施方案中， R11 为 -β-CH3。 在另一个实施方案中， R11 为 - 亚烷基 -NH2。34团。
基团。
101910165 A CN 101910171
说明书24/86 页在一个实施方案中， R11 为 -NH2。 在另一个实施方案中， R11 为 -α-NH2。 在另一个实施方案中， R11 为 -β-NH2。 在另一个实施方案中， R11 为 - 亚烷基 -NH2。 在再一个实施方案中， R11 为 -CH2NH2。 在另一个实施方案中， R11 与其所连接的碳原子形成羰基基团。 在一个实施方案中， R2、 R3、 R3a、 R10、 R10a 和 R11 都是 H。 在另一个实施方案中， R2、 R3、 R10、 R10a 和 R11 都是 H。 在另一个实施方案中， R2、 R10、 R10a 和 R11 都是 H。 在又一个实施方案中， R3、 R3a、 R10、 R10a 和 R11 都是 H。 在一个实施方案中， Ar 为 - 亚芳基 -。 在另一个实施方案中， Ar 为 - 亚杂芳基 -。 在另一个实施方案中， Ar 为 ：
在再一个实施方案中， Ar 为 ：
在一个实施方案中， W 为 -C(NH2)(C(O)NH2)-。 在另一个实施方案中， W 为 -C(NH2)( 烷基 )-。 在另一个实施方案中， W 为 -C(NH2)(CH3)-。 在又一个实施方案中， W 为 -C(NH2)(-C(O)NHOH)-。 在一个实施方案中， W 为 -CH(-NC(O)CF3)-。 在另一个实施方案中， W 为 -CH(-NS(O)2 烷基 )-。 在又一个实施方案中， W 为 -C(NH2)(-C(O)NHOH)-。 在一个实施方案中， W 为 -CH(-CH2NH2)-。 在另一个实施方案中， W 为 -C(-C(O)NH2)(-NH 烷基 )-。 在另一个实施方案中， W 为 -CH(-C(O)NH2)-。 在又一个实施方案中， W 为 -CH2-。 在再一个实施方案中， W 为 -NH-。 在再一个实施方案中， W 为 -C(R5)2-。 在又一个实施方案中， W 为 -CH(OH)-。在另一个实施方案中， W 为 -CH(NH2)-。
在一个实施方案中， W 为 -CH(CH3)-。
在另一个实施方案中， W 为 -CH(-C(O)CH3)-。
在另一个实施方案中， W 为 -C(OH)( 烷基 )-。
在另一个实施方案中， W 为 -C(OH)(- 亚烷基 -OH)-。
在另一个实施方案中， W 为 -N(R12)-。
在另一个实施方案中， W 为 -O-。
在又一个实施方案中， W 为 -S-。
在一个实施方案中， W 为 -C(R5)2- 且两个 R5 基团与它们所连接的同一碳原子合起 来形成环烷基基团。
在另一个实施方案中， W 为 -C(R5)2- 且两个 R5 基团与它们所连接的同一碳原子合 起来形成杂环基基团。
在另一个实施方案中， W 为 -C(R5)2- 且两个 R5 基团与它们所连接的同一碳原子合 起来形成下式的基团 ：
在 一 个 实 施 方 案 中， W 为 -C(R5)2- 且 每 个 R5 基 团 独 立 地 选 自 H， -( 亚 烷 基 ) -NH- 烷基， -N( 烷基 )2， -C(O)NH2， -OH， -C(O)O- 烷基， 5 或 6 元杂芳基或羟基烷基。 m-NH2， 5 5
在另一个实施方案中， W 为 -C(R )2- 和每个 R 基团独立地选自 H， -( 亚烷基 ) -NH- 烷基， -N( 烷基 )2 或 -C(O)NH2。 m-NH2，
在一个实施方案中， Y 为 H。
在另一个实施方案中， Y 为 - 卤代， - 烷基或 -CN。
在另一个实施方案中， Y 为甲基。 在一个实施方案中， Z 为 -CR7-。 在另一个实施方案中， Z 为 -CH-。 在又一个实施方案中， Z 为 -C( 烷基 )-。 在再一个实施方案中， Z 为 -C(OH)-。 在另一个实施方案中， Z 为 -C( 烷氧基 )-。 在又一个实施方案中， Z 为 -C(-CF3)-。 在另一个实施方案中， Z 为 -N-。 在一个实施方案中， n 为 0。 在另一个实施方案中， n 为 1。在另一个实施方案中， n 为 2。 在一个实施方案中， p 为 0。 在另一个实施方案中， p 为 1。 在一个实施方案中， n 和 p 都是 1。 在另一个实施方案中， n 为 0 和 p 为 1。 在另一个实施方案中， n 为 2 和 p 为 1。 在一个实施方案中， n 为 0， W 为 -CH2- 和 Z 为 -N-。 在另一个实施方案中， n 为 1， W 为 -CH2- 和 Z 为 -N-。 在另一个实施方案中， n 为 1， W 为 -NH- 和 Z 为 -N-。 在另一个实施方案中， n 为 0， W 为 -CH2-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 H。 在又一个实施方案中， n 为 1， W 为 -C(NH2)(C(O)NH2)-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为H。 在再一个实施方案中， n 为 1， W 为 -CH2-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 -NH2。
在另一个实施方案中， n 为 1， W 为 -CH2-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 -β-NH2。
在另一个实施方案中， n 为 0， W 为 -CH2-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 -NH2。
在另一个实施方案中， n 为 0， W 为 -CH2-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 -α-NH2。
在另一个实施方案中， n 为 1， W 为 -CH(NH2)-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 H。
在另一个实施方案中， n 为 1， W 为 -CH(OH)-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 H。
在又一个实施方案中， n 为 1， W 为 -CH(NH2)( 烷基 )-， Z 为 -N-， R3 为 H 和 R3a 为 H。
在一个实施方案中， Y 为 H。
在另一个实施方案中， Y 为 - 卤代， - 烷基或 -CN。
在另一个实施方案中， Y 为甲基。 3
在一个实施方案中， R 为 H 和 Z 为 -N-。
在一个实施方案中， R1 为 - 芳基， - 芳基烷基， 苯并稠合的环烷基， 杂芳基， 苯并稠 合的杂芳基或苯并稠合的杂环烯基。
在另一个实施方案中， R1 为 - 苯基， - 苄基， - 苯乙基， - 茚满基， 哌嗪基或吡唑基。 1
在一个实施方案中， R 为 - 芳基， - 芳基烷基， 苯并稠合的环烷基， 杂芳基， 苯并稠 2 合的杂芳基或苯并稠合的杂环烯基 ； 和 R 为 H 或烷基。 1
在另一个实施方案中， R 为 - 芳基， - 芳基烷基， 苯并稠合的环烷基， 杂芳基， 苯并 2 3 3a 稠合的杂芳基或苯并稠合的杂环烯基 ； R 为 H 或烷基 ； R 和 R 都是 H ； 和 Z 为 -N-。 1
在另一个实施方案中， R 为 - 芳基， - 芳基烷基， 苯并稠合的环烷基， 杂芳基， 苯并 2 3 3a 稠合的杂芳基或苯并稠合的杂环烯基 ； R 为 H 或烷基 ； R 和 R 都是 H ； Z 为 -N- ； 和 W 为 NH。 1
在又一个实施方案中， R 为 - 芳基， - 芳基烷基， 苯并稠合的环烷基， 杂芳基， 苯 2 3 3a 并稠合的杂芳基或苯并稠合的杂环烯基 ； R 为 H 或烷基 ； R 和 R 都是 H ； Z 为 -N- ； 和W 为 -CH(NH2)-， -C(R4)(NH2)- 或 -CH(OH)-。
在一个实施方案中， Ar 为苯基， R3 为 H 和 Z 为 -CH-。
在一个实施方案中， 以下基团
是：
在特定的实施方案中， 以下基团
是：
在一个实施方案中， R1 为 ：
且以下基团
是：
在一个实施方案中， R1 为 ：
且以下基团
是：
在一个实施方案中， 本发明提供式 (I) 的化合物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 2 3 3a 10 10a 11 物、 酯、 前体药物或立体异构体， 其中 R ， R， R ， R ， R ， R ， Ar， Q， W， Z， n 和 p 是彼此独立 地加以选择的。
在另一个实施方案中， 式 (I) 的化合物为经过纯化的形式。
在一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IA) ：
及其药学上可接受的盐， 溶剂合物， 酯， 前体药物和立体异构体， 其中 1 1 1 1 1
M为R， -C(O)OR ， -C(O)NHR ， -NHC(O)R ， -C(O)R 或 -NHC(O)NHR1 ； 和
X 为 -CH- 或 -N-。
在一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IA)， 其中 M 为 H， 烷基， 芳基， 杂芳基， 苯基， - 亚烷基 - 芳基或杂环烷基。
在另一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IA)， 其中 M 为 R1， -C(O)OR1， -C(O) 1 1 1 1 1 NHR ， -NHC(O)R ， -C(O)R 或 -NHC(O)NHR ， 其中 R 为 H， 烷基， 芳基， 杂芳基， 苯基， - 亚烷 基 - 芳基或杂环烷基。
在另一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IA)， 其中 M 为 R1， -C(O)OR1， -C(O) 1 1 1 1 1 NHR ， -NHC(O)R ， -C(O)R 或 -NHC(O)NHR ， 其中 R 为 ：
在另一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IA)， 其中 X 为 -CH-。
在又一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IA)， 其中 X 为 -N-。
在一个实施方案中， 本发明提供式 (IA) 的化合物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 物、 酯、 前体药物或立体异构体， 其中 M 和 X 是彼此独立地加以选择的。
在另一个实施方案中， 式 (IA) 的化合物为经过纯化的形式。
在一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IB) ：
及其药学上可接受的盐， 溶剂合物， 酯， 前体药物和立体异构体， 其中 1 1 1 1 1
M为R， -C(O)OR ， -C(O)NHR ， -NHC(O)R ， -C(O)R 或 -NHC(O)NHR1 ； 和
X 为 -CH- 或 -N-。
在一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IB)， 其中 M 为 H， 烷基， 芳基， 杂芳基， 苯基， - 亚烷基 - 芳基或杂环烷基。
在另一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IB)， 其中 M 为 R1， -C(O)OR1， -C(O) 1 1 1 1 1 NHR ， -NHC(O)R ， -C(O)R 或 -NHC(O)NHR ， 其中 R 为 H， 烷基， 芳基， 杂芳基， 苯基， - 亚烷 基 - 芳基或杂环烷基。
在另一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IB)， 其中 M 为 R1， -C(O)OR1， -C(O) 1 1 1 1 1 NHR ， -NHC(O)R ， -C(O)R 或 -NHC(O)NHR ， 其中 R 为 ：
在另一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IB)， 其中 X 为 -CH-。
在又一个实施方案中， 所述噻唑衍生物具有式 (IB)， 其中 X 为 -N-。
在一个实施方案中， 本发明提供式 (IB) 的化合物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 物、 酯、 前体药物或立体异构体， 其中 M 和 X 是彼此独立地加以选择的。
在另一个实施方案中， 式的化合物 (IB) 是经过纯化的形式。
式 (I) 的噻唑衍生物的非限制性说明性实例包括以下列举的化合物 1-12。
及其药学上可接受的盐， 溶剂合物， 酯， 前体药物和立体异构体。
式 (I) 的噻唑衍生物的另外的非限制性说明性实例包括在本文的实施例部分中 描述的化合物 13-74， 及其药学上可接受的盐， 溶剂合物， 酯， 前体药物和立体异构体。
制备噻唑衍生物的方法
可用于制备式 (I) 的噻唑衍生物的方法如以下方案 1-9 中所述。可供选择的机械 途径和类似结构对于有机合成领域技术人员来说是显而易见的。
方案 1 举例说明制备式 iv 的化合物的方法， 所述式 iv 的化合物可用作中间体用 12 于制备其中 Z 为 -N- 和 W 为 -N(R )- 的式 (I) 的化合物。
方案 1
其中 Xa 为 F 或 Cl， 和 R2， R3， Ar 和 n 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
式 i 的硝基取代的芳基或杂芳基衍生物可以在二异丙基乙基胺 (DIEA) 的存在下 与式 ii 的哌嗪化合物借助微波辅助的过程进行偶联， 得到经过偶联的化合物 iii。然后可 以使用适当的方法将式 iii 的化合物的硝基基团还原， 得到式 iv 的中间体胺化合物。
方案 2 举例说明制备式 vii 的化合物的方法， 所述式 vii 的化合物可用作中间体 12 用于制备其中 Z 为 -N- 和 W 为不是 -N(R )- 的式 (I) 的化合物。
方案 2
其中 Xa 为 F 或 Cl， 和 R2， R3， W， Ar 和 n 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
式 i 的硝基取代的芳基或杂芳基衍生物可以借助方案 1 中所述的 DIEA 偶联方法 与式 v 的环胺偶联， 得到经过偶联的化合物 vi。 然后可以使用适当的方法将式 vi 的化合物 的硝基基团还原， 得到式 vii 的中间体胺化合物。
方案 3 举例说明制备式 x 的化合物的方法， 所述 x 的化合物可用作中间体用于制 12 备其中 Z 为碳和 W 为 -N(R )- 的式 (I) 的化合物。
方案 3
其中 X 为 Cl， Br 或 -OTf ； M 为 B(OH)2， ZnX 或 SnBu3 ； 和 R2， R3， Ar 和 n 如上述对于 式 (I) 的化合物所定义的。
式 i 的硝基取代的芳基或杂芳基衍生物可以使用 Pd 催化的偶联方法 ( 例如， Suzuki 偶联、 Negishi 偶联或 Stille 偶联 ) 与式 viii 的哌啶化合物偶联， 得到经过偶联的 化合物 ix。 然后可以使用适当的还原法将式 ix 的化合物的硝基基团还原， 得到式 x 的中间 体胺化合物。
方案 4 举例说明制备式 xiv 的化合物的方法， 所述式 xiv 的化合物可用作中间体 12 用于制备其中 Z 为碳和 W 不是 -N(R )- 的式 (I) 的化合物。
方案 4
其中 X 为 -Cl， -Br 或 -OTf ； M 为 B(OH)2， ZnX 或 SnBu3 ； 和 R2， R3， W， Ar 和 n 如上述 对于式 (I) 的化合物所定义的。
式 i 的硝基取代的芳基或杂芳基衍生物可以借助方案 3 中所述的 Pd 偶联方法与 式 xii 的化合物偶联， 得到式 xiii 的化合物。然后可以使用适当的方法将式 xiii 的化合 物的硝基基团还原， 得到式 xiv 的中间体胺化合物。
方案 5 举例说明制备其中 W 为 -NH- 和 Z 为 N 的式 (I) 的化合物的方法。 方案 5其中 R1， R2， R3， Ar， M， n 和 Y 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
式 xv 的 2- 溴 - 噻唑 -4- 甲酸化合物可以在 N， N- 二异丙基乙基胺的存在下借助 2-(1H-7- 氮杂苯并三唑 -1- 基 )-1， 1， 3， 3- 四甲基脲鎓六氟磷酸盐 (HATU) 与式 iv 的胺化 合物偶联， 得到式 xvi 的酰氨基中间体。然后可以使式 xvi 的化合物在任选的非亲核性碱 的存在下与式 xvii 的化合物偶联， 得到式 xviii 的化合物。使用酸诸如 TFA 或甲酸从式 xviii 的化合物脱除 Boc 保护基， 得到其中 W 为 -NH- 和 Z 为 N 的式 (I) 的化合物。
方案 6 举例说明制备其中 W 为 -C(R5)2- 和 Z 为 N 的式 (I) 的化合物的方法。
方案 6
其中 R1， R2， R3， Ar， M， W， Y 和 n 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
使用方案 5 中描述的方法并用中间体胺化合物 vii 代替中间体胺化合物 iv， 可以 5 制备其中 W 为 -C(R )2- 和 Z 为 N 的式 (I) 的化合物。
方案 7 举例说明制备其中 W 为 -NH- 和 Z 为碳的式 (I) 的化合物的方法。
方案 7
其中 R1， R2， R3， Ar， M， Y 和 n 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
使用方案 5 中描述的方法并用中间体胺化合物 x 代替中间体胺化合物 iv， 可以制 备其中 W 为 -NH- 和 Z 为碳的式 (I) 的化合物。
方案 8 举例说明制备其中 W 为 -C(R5)2- 和 Z 为碳的式 (I) 的化合物的方法。
方案 8
其中 R1， R2， R3， Ar， M， Y 和 n 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
使用方案 5 中描述的方法并用中间体胺化合物 xiv 代替中间体胺化合物 vii， 可以 制备其中 W 为 -C(R5)2- 和 Z 为碳的式 (I) 的化合物。
方案 9 举例说明用于制备 2- 取代的 - 噻唑 -5- 甲酸化合物的方法， 所述 2- 取代 1 的 - 噻唑 -5- 甲酸化合物可用作中间体用于制备其中 M 为 R 的式 (I) 的化合物。
方案 9
其中 R1 如上述对于式 (I) 的化合物所定义的。
2- 溴噻唑 -5- 甲酸乙酯 (xxv) 可以使用适当的钯偶联条件与 (i) 式 xxvi 的硼酸 化合物， (ii) 式 xxix 的硼酸频哪醇酯化合物， 或 (iii) 式 xxxii 的溴化锌化合物进行反应， 制备式 xxvii 的 2- 取代的噻唑酯中间体。然后可以使用例如 LiOH 将得到的式 xxvii， xxx 或 xxxiii 的化合物水解， 得到式 xxviii， xxxi 或 xxxiv 的 2- 取代的噻唑 -5- 甲酸化合物。 然后可以使用上述实施例 5-8 中所述的方法将式 xxviii， xxxi 或 xxxiv 的化合物转化为其 1 中 M 为 R 的式 (I) 的化合物。
实施例 一般方法
可商购的溶剂、 试剂和中间体是以收货状态使用的。不可商购的试剂和中间体以 1 下文所述方式制备。 H NMR 光谱是在 Varian AS-400(400MHz) 上获得， 并以距 Me4Si 低磁 场的 ppm 作报告， 其中质子数、 多重性及偶合常数 ( 以 Hz 表示 ) 是在括号中被指示。在 提供 LC/MS 数据的情况下， 使用以下进行分析 ： Applied Biosystems API-100 质谱仪和 Shimadzu SCL-10A LC 柱 ： Altech 铂 C18， 3 微 米， 33mmx7mm ID ； 梯度液流量 ： 0min-10 ％ CH3CN， 5min-95 ％ CH3CN， 7min-95 ％ CH3CN， 7.5min-10 ％ CH3CN， 9min- 终 止。 使 用 Agilent Technologies LC/MSD SL 或者 1100 系列 LC/MSD 质谱仪获得 MS 数据。通过制备型 LC 纯 化最终化合物， 使用 Varian Pursuit XRs C1810μm 250x 21.2mm 柱， 以及流动相 A 和 B 的洗脱液混合物。流动相 A 组成为 (is composed of) 含 0.1％ TFA 的 H2O， 流动相 B 组成 为 CH3CN(95％ )/H2O(5％ )/TFA(0.1％ )。流动相 A 和 B 的混合物在室温下以 20mL/min 的 流速通过柱子洗脱。所有最终分离的化合物的纯度是通过 LCMS 使用 Higgins Haisil HL C18 5μm 150x4.6mm 柱以及流动相 A 和 B 的洗脱液混合物来检测的， 其中流动相 A 组成为
含 0.1 ％ TFA 的 H2O， 流动相 B 组成为 CH3CN(95 ％ )/H2O(5 ％ )/TFA(0.1 ％ )。在 60 ℃的温 度下以 3mL/min 的流速洗脱柱子。中间体化合物通过 LCMS 表征， 使用 Higgins Haisil HL C185μm 50x4.6mm 柱子以及流动相 A 和 B 的洗脱液混合物， 其中流动相 A 组成为含 0.1％ TFA 的 H2O， 流动相 B 组成为 CH3CN(95 ％ )/H2O(5 ％ )/TFA(0.1 ％ )。在 60 ℃的柱温度下以 3mL/min 的流速洗脱柱子。
实施例 1
制备化合物 1A
化合物 1A 如 J.Fluorine Chemistry， 55 ： 173-177(1991) 中所述制备。 使用上述方法， 制备以下中间体化合物 ：
实施例 2 制备化合物 13向 4- 苯 基 - 噻 唑 -2- 甲 酸 的 钾 盐 (50mg， 0.19mmol) 在 DMF(4mL) 中 的 溶 液 加 入 4-(3- 氨 基 - 吡 啶 -4- 基 )- 哌 嗪 -1- 甲 酸 叔 丁 基 酯 (64mg， 0.23mmol)， HATU(87mg， 0.23mmol) 和二异丙基乙基胺 (0.57mmol)。将得到的反应室温搅拌约 15 小时， 然后真空浓 缩。将得到的残余物纯化， 使用 Prep-HPLC(Varian Persue XRS 10 微米， 21.2X250 柱， 用 + 水 - 乙腈， 0.1％三氟乙酸， 0-95％作为洗脱剂且运行时间为 40 分钟 )， 得到化合物 13(MH m/ z 466.20MS Rt ： 3.72， 计算的 MW ： 465.18)
实施例 3
制备化合物 14
向化合物 1A(80mg， 0.17mmol) 的二氧杂环己烷 (3mL) 溶液中加入 6- 甲氧基 -2， 3- 二氢 - 异吲哚 -1- 酮 (42mg， 0.26mmol)， 磷酸钾 (109mg， 0.513mmol)， 三 ( 二苄叉基丙酮 ) 二钯 (0)(15.7mg， 0.02mmol) 和 xantphos(19.8mg， 0.03mmol)。将得到的反应加热到 85℃ 并将其在该温度搅拌 16 小时。使得到的悬浮液通过过滤器以除去不溶性固体并将滤液真 空浓缩。将得到的残余物纯化， 使用 Prep-HPLC(Varian Persue XRS10 微米， 21.2X250 柱， 用水 - 乙腈， 0.1％三氟乙酸， 0-95％作为洗脱剂且运行时间为 40 分钟 )， 得到化合物 3A， + MH m/z 为 551.30， 保留时间为 3.47min
使用这一方法和适当的反应物， 制备以下的本发明化合物 ：
实施例 4 制备化合物 25向化合物 13(5mg) 的二氯甲烷溶液加入 4N HCl 和二氧杂环己烷 (1mL) 的溶液并将 得到的反应室温搅拌 20 分钟。将反应混合物真空浓缩并将得到的残余物再溶解于水 - 乙 腈 (1 ∶ 1， 2mL)， 冻干， 得到化合物 25， 为灰白色粉末， MH+m/z 366.05， 保留时间为 1.55 分 钟。
使用这一方法和适当的反应物， 制备以下的本发明化合物 ：
实施例 5 制备化合物 5A将 2， 3- 二硝基 - 苯酚 (384mg， 2.0mmol) 溶解于 THF(15mL) 并向得到的溶液加 入 固 体 基 三 苯 膦 (600g， 6.0mmol)， S-( 四 氢 - 呋 喃 -2- 基 )- 甲 醇 (286mg， 2.8mmol) 和 DIAD(0.79ml， 4.0mmol)。将得到的反应室温搅拌 12 小时， 然后过滤。滤液用 EtOAc 稀释， 依次用水和盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩。 得到的残余物使用硅胶上的快 速柱色谱法进行纯化 (20％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到化合物 5A。
实施例 6
制备化合物 6A
将化合物 5A(488mg， 1.82mmol) 溶解于甲基胺的 THF 溶液 (2M， 10.0mL)。 将得到的 反应在密封的烧瓶中加热到 60℃并将其在该温度搅拌 12 小时， 然后真空浓缩。 将得到的残 余物溶解于 EtOAc 并将得到的溶液依次用水和盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓 缩， 得到化合物 6A， 其不经进一步纯化用于随后步骤。
实施例 7
制备化合物 7A
将化合物 6A(428mg， 1.70mmol) 溶解于 MeOH(10mL) 并向得到的溶液加入 10％ Pd/ C。将得到的溶液在 Parr 摇动器上在 40atm 氢化 1 小时， 然后过滤。将滤液真空浓缩， 得到 化合物 7A， ， 其不经进一步纯化用于随后步骤。HPLC-MS tR ＝ 1.14min(UV254nm) ； 式 C12H18N2O2 的质量计算值 ： 222.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 223.1(M+H)。实施例 8 制备化合物 8A将 化 合 物 7A(352mg， 1.58mmol) 溶 解 于 DMF(10mL) 并 向 得 到 的 溶 液 加 入 CDI(307mg， 1.90mmol)。将得到的反应加热到 120℃并将其在该温度搅拌 1 小时。将反应 混合物冷却到室温， 用 EtOAc 稀释， 依次用水和盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓 缩。得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (20％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到化合 物 8A， 为棕色固体。HPLC-MS tR ＝ 1.45min(UV254nm) ； 式 C13H16N2O3 的质量计算值 ： 248.1 ； 实 测值 ： LCMS m/z 249.1(M+H)。
实施例 9
制备化合物 36
向 添 加 有 化 合 物 8A(353mg， 1.42mmol)，苯 并 咪 唑 酮 (798mg， 1.70mmol)， CuI(14mg， 0.07mmol)，反 式 -1， 2- 二 甲 基 氨 基 环 己 烷 (20mg， 0.14) 和 K2CO3(294mg， 2.13mmol) 的 25mL 圆底烧瓶加入二氧杂环己烷 (50mL)。 通过将烧瓶交替地置于真空下然后 置于氩气气氛下重复数次将混合物充分脱气。 然后将反应加热到 80℃并将其在该温度搅拌 约 15 小时。在冷却到室温之后， 将反应混合物真空浓缩并将得到的残余物用 H2O(25mL) 稀释。将得到的溶液过滤并将收集的固体产物 ( 化合物 36) 不经进一步纯化使用直接地于随 后步骤。HPLC-MS tR ＝ 1.60min(UV254nm) ； 式 C31H37N7O6S 的质量计算值 ： 635.3 ； 实测值 ： LCMS m/z 636.2(M+H)。
实施例 10
制备化合物 37
使 用 上 述 实 施 例 4 的 方 法 从 化 合 物 36 制 备 化 合 物 37。HPLC-MS tR ＝ 1.23min(UV254nm) ； 式 C26H29N7O4S 的质量计算值 ： 535.2 ； 实测值 ： LCMS m/z 536.2(M+H)。
使用这一方法并替换适当的反应物， 制备以下的本发明化合物 ：
实施例 11 制备化合物 11C
步骤 A- 合成化合物 11A ： 将 3- 氟二硝基苯 (500mg， 2.5mmol) 溶解于密封管中的 EtOH(15mL) 并向得到的溶液加入甲基胺 (40 ％， 在水中， 2mL)。将反应加热到 160 ℃并在该温度搅拌约 15 小时。 在冷却到室温之后， 将混合物真空浓缩并将得到的残余物过柱纯化 ( 硅胶 )， 得到化合物 11A(411mg)。HPLC-MS tR ＝ 1.60min(UV254nm) ； 式 C8H10N2O3 的质量计算值 ： 182.1 ； 实测值 ： LCMSm/z 183.1(M+H)。
步骤 B- 合成化合物 11B
将化合物 11A(411mg， 2.26mmol) 溶解于 THF(50mL)， 加入 Pd/C(10％， 1g)。然后将 反应在 40psi 氢化 2 小时， 然后过滤通过硅藻土并将滤液真空浓缩， 得到化合物 11B， 其不经 经一步纯化使用。HPLC-MS tR ＝ 0.66min(UV254nm) ； 式 C8H12N2O 的质量计算值 ： 152.1 ； 实测 值： LCMS m/z 153.1(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 11C
将化合物 11B(350mg， 粗品 ) 溶解于 DMF(2mL) 并向得到的溶液加入羰基二咪唑 (370mg， 2.26mmol)。将反应加热到 110℃并在该温度搅拌 2 小时。在冷却到室温之后， 将 反应混合物真空浓缩并将得到的残余物使用快速柱色谱法纯化 ( 硅胶， 二氯甲烷 /MeOH ＝ 98 ∶ 2 到二氯甲烷 /MeOH ＝ 96 ∶ 4)， 得到化合物 11C(311mg)， 为白色固体。HPLC-MS tR ＝ 1.12min(UV254nm) ； 式 C9H10N2O2 的质量计算值 ： 178.1 ； 实测值 ： LCMSm/z 179.1(M+H)。
使用上述方法并替换适当的起始原料制备以下中间体化合物 ：
实施例 12 制备化合物 12D步骤 A- 合成化合物 12A
将 1- 溴 -2- 氟 -3- 硝 基 - 苯 (440mg， 2.0mmol) 溶 解 于 甲 基 胺 的 THF 溶 液 中 (2M， 10.0mL)。将混合物在密封的烧瓶中加热到 60 ℃并将其在该温度搅拌 12 小时。然 后将反应混合物真空浓缩并将得到的残余物溶解于 EtOAc 并依次用水和盐水洗涤， 然后 用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩， 得到化合物 12A， 其不经经一步纯化使用。HPLC-MS tR ＝ 1.80min(UV254nm) ； 式 C6H7N3O2 的质量计算值 ： 230.0 ； 实测值 ： LCMS m/z231.1(M+H)。
步骤 B- 合成化合物 12B
将化合物 12A(410mg， 1.8mmol) 和铁粉 (101mg， 18mmol) 溶解于 AcOH(10mL)。 将混 合物在 25℃搅拌 12 小时， 然后过滤并将滤液真空浓缩。将得到的残余物溶解于 EtOAc 并 用 NaHCO3 饱和水溶液洗涤， 随后用盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩， 得到化 合物 12B， 其不经经一步纯化使用。HPLC-MS tR ＝ 0.82min(UV254nm) ； 式 C6H7N3O2 的质量计算 值： 200.0 ； 实测值 ： LCMS m/z 201.1(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 12C
使用实施例 7， 步骤 C 中所述的方法从化合物 12B 制备化合物 12C。HPLC-MS tR ＝ 1.52min(UV254nm) ； 式 C7H7N3O 的质量计算值 ： 226.0 ； 实测值 ： LCMS m/z 227.1(M+H)。
步骤 D- 合成化合物 12D
将化合物 12C(363mg， 1.6mmol)， K3PO4(1.02g， 4.8mmol) 和 Pd(dppf)Cl2(5％ mmol) 溶解于 1， 4- 二氧杂环己烷 (5mL) 并将得到的溶液置于氩气气氛下。向这个溶液中加入环 丙烷硼酸 (250mg， 2.9mmol)， 将反应加热到 90℃并将其在该温度搅拌 12 小时。将反应混合 物用 EtOAc 稀释， 依次用去离子水和盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩。得到 的残余物使用快速柱色谱法纯化 ( 硅胶， 乙酸乙酯作为洗脱剂 )， 得到化合物 12D， 为白色固 体。HPLC-MS tR ＝ 1.34min(UV254nm) ； 式 C11H12N2O 的质量计算值 ： 188.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 189.1(M+H)。
实施例 13
制备化合物 13C
步骤 A- 合成化合物 13A
将化合物 12C(454mg， 2.0mmol) 溶解于 DMF(10mL) 并将得到的溶液冷却到 0℃。 小 心地加入 NaH(88mg， 2.2mmol) 并将得到的反应在 0℃搅拌 10 分钟， 然后滴加 SEMCl(367mg， 2.2mmol) 并使混合物自然回温到室温并搅拌约 15 小时。然后加入 NH4Cl 饱和水溶液以猝 灭反应， 并将混合物用 EtOAc 提取 (40mLx 3)。合并的有机层用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空
浓缩， 并将得到的残余物使用快速柱色谱法纯化 ( 硅胶， 30 ％ EtOAc/ 己烷 )， 得到化合物 13A(688mg)， 为油状物。HPLC-MS tR ＝ 2.32min(UV254nm) ； 式 C14H21BrN2O2Si 的质量计算值 ： 356.1 ； 实测值 ： LCMSm/z 329.1(M+H- 二甲基 )。
步骤 B- 合成化合物 13B
在氩气气氛下， 将化合物 13A(122mg， 0.34mmol) 与 Pd2(dba)3(18mg， 0.02mmol)， BINAP(25mg， 0.04mmol)， 叔丁醇钠 (45mg， 0.45mmol)， 吗啉 (35mg， 0.4mmol) 和甲苯 (2mL) 混合。将得到的反应加热到 100℃并在该温度搅拌 1 小时。在冷却到室温之后， 混合物用 EtOAc(50mL) 稀释并用 NH4Cl(aq.)， 盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩。得 到的残余物使用快速柱色谱法纯化 ( 硅胶， 50 ％ EtOAc/ 己烷 )， 得到化合物 13B(99mg)。 HPLC-MS tR ＝ 2.11min(UV254nm) ； 式 C18H29N3O3Si 的质量计算值 ： 363.2 ； 实测值 ： LCMS m/z 364.1(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 13C
将化合物 13B(99mg， 0.27mmol) 溶解于含 4N HCl 的二氧杂环己烷 (4mL) 中。将混 合物加热到 60℃并在该温度搅拌 2 小时。在浓缩之后， 将 MeOH(5mL) 和 Et3N(1mL) 加入并 在微波中将反应加热到 80℃并将其在该温度搅拌 10 分钟。 在冷却到室温之后， 将混合物真 空浓缩并将得到的残余物使用快速柱色谱法纯化 ( 硅胶， 二氯甲烷 /MeOH ＝ 95 ∶ 5)， 得到 化合物 13C， 为黄色固体 (52mg)。HPLC-MS tR ＝ 1.28min(UV254nm) ； 式 C12H15N3O2 的质量计算 值： 233.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 234.2(M+H)。
实施例 14
制备化合物 14B
步骤 A- 合成化合物 14A
将 2- 氯 -3- 硝基噻吩 (1g， 6.1mmol) 溶解于 THF(20mL) 并用甲基胺 (2M， 在 THF 中， 6mL) 处理。将得到的反应室温搅拌 2 小时， 然后真空浓缩， 得到化合物 14A， ， 其不经进 一步纯化用于随后步骤。 HPLC-MStR ＝ 1.23min(UV254nm) ； 式 C5H6N2O2S 的质量计算值 ： 233.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 159.1(M+H)。
步骤 B- 合成化合物 14B
将化合物 14A 聚集在 DMF(5mL) 中并向得到的溶液加入 CDI(988mg， 6.1mmol)。将 反应加热到 110℃并将其在该温度搅拌 1 小时， 然后冷却到室温并真空浓缩。 将得到的残余 物溶解于甲醇 (20mL) 并在氩气下加入 10％ Pd/C。 将反应在氢气 (20psi) 下搅拌 4 小时， 然 后过滤并将滤液真空浓缩。得到的残余物使用快速柱色谱法纯化 ( 硅胶， 二氯甲烷∶ MeOH ＝ 95 ∶ 5)， 得到化合物 14B， 为固体 (280mg)。HPLC-MS tR ＝ 0.98min(UV254nm) ； 式 C6H6N2OS 质量计算值 ： 154.0 ； 实测值 ： LCMS m/z155.1(M+H)。
实施例 15
制备化合物 15F
步骤 A- 合成化合物 15A
将 4- 氨基噻吩 -3- 甲酸甲酯 (6.57g， 33.9mmol) 聚集在 1， 4- 二氧杂环己烷 (25mL) 中并将得到的溶液冷却到 0℃。向经过冷却的溶液加入 5％ Na2CO3 水溶液， 随后加入二碳酸 二叔丁酯 (18.6g， 85.2mmol) 的二氧杂环己烷溶液 (25mL)。去掉冷却浴并使反应混合物自 然回温到室温并在该温度搅拌 16 小时。然后加入另一部分的含二碳酸二叔丁酯 (3.86g， 17.7mmol) 的 1， 4- 二氧杂环己烷 (10mL) 并将反应混合物室温搅拌另外的 24 小时， 然后用 水和 EtOAc 稀释。水层用 EtOAc 提取并将合并的有机层用水和盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥，
过滤并真空浓缩。得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (20％乙酸乙酯 / 己 烷 )， 得到化合物 15A， 为无色液体。
步骤 B- 合成化合物 15B
向 0 ℃ 的 化 合 物 15A(7.72g， 30mmol) 的 DMF(15mL) 溶 液 中 加 入 NaH(1.44g， 36mmol)。将反应搅拌 10 分钟， 然后加入碘甲烷 (2.32mL， 36mmol)。将反应混合物在室 温搅拌 16 小时， 然后向反应混合物加入 NH4Cl 饱和水溶液并将混合物用二氯甲烷提取 (3x15mL)。 合并的有机层用水洗涤， 然后用盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩。 得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (10％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 15B。HPLC-MS tR ＝ 1.84min(UV254nm) ； 式 C12H17NO4S 的质量计算值 ： 271.1 ； 实测值 ： LCMS m/ z 294.1(M+Na)。
步骤 C- 合成化合物 15C
将化合物 15B(6.78g， 25mmol) 聚集在 LiOH 水溶液 (1.0M， 30mL) 中并将得到的反 应室温搅拌 12 小时。然后用 HCl(1.0N) 中和反应混合物到 pH 5.0-7.0。得到的水溶液用 二氯甲烷提取 (3x50mL) 并将合并的有机层依次用水和盐水洗涤， 然后用 Na2SO4 干燥， 过滤 并真空浓缩。得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (50％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 15C。HPLC-MS tR ＝ 1.48min(UV254nm) ； 式 C11H15NO4S 的质量计算值 ： 257.1 ； 实测 值： LCMS m/z 280.1(M+Na)。
步骤 D- 合成化合物 15D
将 化 合 物 15C(6.02g， 23.4mmol)， DPPA(7.08g， 25.7mmol) 和 Et3N(3.59mL， 25.7mmol) 在 t-BuOH(30mL) 中的混合物加热到回流并将其在该温度搅拌 12 小时。 将反应混 合物冷却到室温， 真空浓缩并将得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (20％ 乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 15D。HPLC-MS tR ＝ 1.20min(UV254nm) ； 式 C15H24N2O4S 的质量 计算值 ： 328.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 329.0(M+H)。步骤 E- 合成化合物 15E
将化合物 15D(6.63g， 20.2mmol) 溶解于含 HCl 的二氧杂环己烷 (20mL) 并将得到 的反应搅拌 20 分钟。将反应混合物真空浓缩并将得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱 法进行纯化 (50％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 15E。
步骤 F- 合成化合物 15F
将 化 合 物 15E(1.88g， 14.7mmol) 溶 解 于 DMF(10mL) 并 加 入 CDI(2.86mg， 17.6mmol)。将反应加热到 120℃并将其在该温度搅拌 1 小时。将反应混合物冷却到室温， 用 EtOAc 稀释并用水、 盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥。在真空浓缩之后， 粗产物使用硅胶上的快 速柱色谱法进行纯化 (100％乙酸乙酯 )， 得到化合物 15F。HPLC-MS tR ＝ 0.97min(UV254nm) ； 式 C6H6N2OS 的质量计算值 ： 154.0 ； 实测值 ： LCMS m/z155.0(M+H)。
实施例 16
制备化合物 41 和 42
步骤 A- 合成化合物 16A
将儿茶酚 (2.2g， 20.0mmol) 溶解于乙醚 (100mL) 并向得到的溶液滴加发烟硝酸 (1.0mL)。将反应室温搅拌 20 分钟， 倾倒在冰水中并将得到的溶液用乙醚提取 (3x50mL)。 合并的有机提取物用 10％碳酸钠溶液中和， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩。得到的残余 物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (40％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 16A。
步骤 B- 合成化合物 16B
将化合物 16A(1.10g， 7.1mol)， 1， 2- 二溴乙烷 (9.33g， 49.7mmol) 和无水碳酸钾 (2.94g， 21.3mmol) 在异戊醇 (100mL) 中的混合物加热到回流并将其在该温度搅拌 7 小 时。向反应混合物加入另外的 1， 2- 二溴乙烷 (6.57g， 35.0mmol) 和无水碳酸钾 (4.84g， 35.0mmol) 并将反应回流搅拌另外的 8 小时， 然后冷却到室温。将异戊醇真空除去并将得 到的液体残余物倾倒在水中， 用二氯甲烷提取并将二氯甲烷溶液真空浓缩。得到的残余物 使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (20％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 16B， 为浅黄色 固体。HPLC-MS tR ＝ 1.57min(UV254nm) ； 式 C8H7NO4 的质量计算值 ： 181.0 ； 实测值 ： LCMS m/z 182.1(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 16C
向化合物 16B(964mg， 5.3mmol) 的乙酸 (2.5mL) 溶液中加入发烟硝酸 (6.0mL)。 将 反应搅拌 1 小时， 然后倾倒在冰水中并用二氯甲烷提取 (2x10mL)。合并的提取液用 10％碳 酸钠溶液洗涤， 用 Na2SO4 干燥并真空浓缩。得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行
纯化 (20％乙酸乙酯 - 己烷 )， 得到化合物 16C。HPLC-MS tR ＝ 1.53min(UV254nm) ； 式 C8H6N2O6 的质量计算值 ： 226.0 ； 实测值 ： LCMS m/z 227.1(M+H)。
步骤 D- 合成化合物 16D
将化合物 16C(588mg， 2.6mmol) 溶解于甲基胺的 THF 溶液 (2M， 10.0mL)。 将反应在 密封的烧瓶中加热到 60℃并使其在该温度静置 12 小时， 然后真空浓缩。得到的残余物溶 解于 EtOAc 并用水、 盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥。在真空浓缩之后， 得到化合物 16D， 为粗制残 余物， 其不经进一步纯化使用。HPLC-MS tR ＝ 1.72min(UV254nm) ； 式 C9H10N2O4 的质量计算值 ： 210.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 211.1(M+H)。
步骤 E- 合成化合物 16E
将化合物 16D(462mg， 2.2mmol) 溶解于 MeOH(10mL) 并向得到的溶液加入 10％ Pd/ C。将反应在 Paar 摇动器中在 40atm 氢化 1 小时， 然后过滤。将滤液浓缩， 得到化合物 16E 不经经一步纯化使用。HPLC-MStR ＝ 0.62min(UV254nm) ； 式 C12H18N2O2 的质量计算值 ： 180.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 181.2(M+H)。
步骤 F- 合成化合物 16F
将化合物 16E(342mg， 1.9mmol) 溶解于 DMF(10mL) 并加入 CDI(373mg， 2.3mmol)。 将混合物加热到 120℃并将其在该温度搅拌 1 小时。 将混合物冷却到室温， 用 EtOAc 稀释并 用水、 盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥。在浓缩之后， 得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进 行纯化 (100％乙酸乙酯 )， 得到化合物 16F， 为棕色固体。HPLC-MS tR ＝ 1.20min(UV254nm) ； 式 C10H10N2O3 的质量计算值 ： 206.1 ； 实测值 ： LCMS m/z207.1(M+H)。
步骤 G- 合成化合物 41
向 化 合 物 16F(293mg， 1.42mmol)，化 合 物 1A(798mg， 1.70mmol)， CuI(14mg， 0.07mmol)， 反式 -1， 2- 二甲基氨基环己烷 (20mg， 0.14) 和 K2CO3(294mg， 2.13mmol) 的混合 物加入二氧杂环己烷 (50mL)。通过将烧瓶交替地连接于真空和氩气将得到的溶液充分脱 气。然后将这个得到的混合物加热到 80℃并将其在该温度搅拌约 15 小时。在冷却到室温 之后， 真空除去溶剂。 得到的残余物用 H2O(25mL) 稀释并将得到的溶液过滤。 所收集的固体 ( 化合物 41) 不经进一步纯化用于随后步骤。HPLC-MStR ＝ 1.63min(UV254nm) ； 式 C28H31N7O6S 的质量计算值 ： 593.2 ； 实测值 ： LCMS m/z 594.2(M+H)。
步骤 H- 合成化合物 42
通过根据实施例 4 中所述的方法将化合物 41 脱保护来制备化合物 42。HPLC-MS tR ＝ 1.06min(UV254nm) ； 式 C23H23N7O4S 的质量计算值 ： 493.2 ； 实测值 ： LCMS m/z 494.2(M+H)。
使用上述方法并替换适当的苯并咪唑酮反应物， 制备以下的本发明化合物 ：
实施例 17 制备化合物 58 和 59 ：步骤 A- 合成化合物 17A
在氩气气氛下， 将用无水 THF(5mL) 覆盖的镁屑 (0.86g， 35mmol) 用几滴 1， 2- 二 溴 乙 烷 活 化。 向 经 过 活 化 的 镁 屑 溶 液 中 滴 加 2- 溴 -1H- 茚 (3.45g， 17.7mmol) 的 无 水 THF(20mL) 溶液。将反应室温搅拌 2 小时， 然后将反应混合物通过注射器加入到 -80℃的 三 - 异丙氧基 - 硼烷 (4.6mL， 20mmol) 的无水 THF(10mL) 溶液中。使得到的反应自然回温 到室温并搅拌 16 小时。将反应混合物用冰猝灭并用 HCl 酸化， 然后用乙醚提取 (3x15mL)。 合并的有机相用盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤并真空浓缩。 得到的残余物使用硅胶上的快
速柱色谱法进行纯化 (40％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到化合物 17A。
步骤 B- 合成化合物 58
在 氩 气 下 将 化 合 物 17A(32mg， 0.2mmol)，化 合 物 1A(46.9mg， 0.1mmol)， Pd2(DBA)3(9.2mg， 0.01mmol)， S-Phos(8.2mg， 0.02mmol) 和 K3PO4(42mg， 0.2mmol) 在 1， 4- 二 氧杂环己烷 (3mL) 中的混合物加热到 100℃并将其在该温度搅拌 15 小时。 然后将反应混合 物冷却到室温， 用乙酸乙酯稀释并过滤通过硅藻土。将滤液真空浓缩并将得到的残余物使 用 HPLC 纯化， 得到化合物 58。HPLC-MS tR ＝ 1.78min(UV254nm) ； 式 C27H29N5O3 的质量计算值 ： 503.2 ； 实测值 ： LCMS m/z 504.1(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 59
通过根据实施例 4 中所述的方法将化合物 58 脱保护来制备化合物 59。HPLC-MS tR ＝ 1.05min(UV254nm) ； 式 C22H21N5OS 的质量计算值 ： 403.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 404.1(M+H)。
实施例 18
制备化合物 18F
步骤 A- 合成化合物 18A
将 2- 氯 -3- 硝基苯甲酸 (1.0g， 5.0mmol) 溶解于二氯甲烷 (10mL) 并向得到的溶 液加入过量的三乙胺， 随后加入一滴 DMF， 然后将溶液冷却到 0℃， 加入草酰氯 (1eq.) 并将 反应室温搅拌 2 小时。将反应混合物真空浓缩并将得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱 法进行纯化 (20％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到化合物 18A(1g)。 HPLC-MS tR ＝ 1.60min(UV254nm) ； 式 C8H6ClNO4 的质量计算值 ： 215.10 ； 实测值 ： LCMS m/z 216.10(M+H)。
步骤 B- 合成化合物 18B
将化合物 18A(1g) 溶解于 EtOH(15mL) 并加入甲基胺 (40％， 在水中， 2mL)。将混 合物置于密封管中并加热到 160℃， 并在该温度搅拌约 15 小时。在冷却到室温之后， 将混 合物真空浓缩并将得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (40％乙酸乙酯 / 己 烷 )， 得到化合物 18B(0.85g)。HPLC-MS tR ＝ 1.20min(UV254nm) ； 式 C9H10N2O4 的质量计算值 ： 210.06 ； 实测值 ： LCMS m/z 211.10(M+H)
步骤 C- 合成化合物 18C
将化合物 18B(0.85g) 溶解于乙醇中并向溶液中加入 10％ Pd/C(50mg)。将反应在 大气压力的氢气气氛下搅拌 4 小时， 然后过滤通过硅藻土并将滤液真空浓缩。得到的残余 物 ( 化合物 18C) 不经进一步纯化用于随后步骤。 HPLC-MS tR ＝ 1.00min(UV254nm) ； 式 C9H12N2O2 的质量计算值 ： 180.09 ； 实测值 ： LCMS m/z 181.10(M+H)
步骤 D- 合成化合物 18D
将化合物 18C(360mg， 粗品 ) 溶解于 DMF(2mL) 并加入 CDI(370mg， 2.26mmol)。 将反 应加热到 110℃并在该温度搅拌 2 小时。 在冷却到室温之后， 将反应混合物真空浓缩并将得 到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 ( 二氯甲烷 /MeOH ＝ 98 ∶ 2 到二氯甲烷 /MeOH ＝ 96 ∶ 4)， 得到化合物 18D(311mg)， 为白色固体。HPLC-MS tR ＝ 1.25min(UV254nm) ；
式 C10H10N2O3 的质量计算值 ： 206.07 ； 实测值 ： LCMS m/z 207.10(M+H)。
步骤 E- 合成化合物 18E
将化合物 18D(310mg， 1.0mmol) 溶解于 THF(10mL) 并加入 LiOH 水溶液 (1N， 2mL)。 将反应室温搅拌约 15 小时， 然后真空浓缩。得到的残余物用 1N HCl 处理， 直到得到的溶液 为 pH 5。 然后将溶液过滤并将收集的固体在空气下干燥， 得到化合物 18E(300mg)。 HPLC-MS tR ＝ 0.90min(UV254nm) ； 式 C9H8N2O3 的质量计算值 ： 192.1 ； 实测值 ： LCMS m/z193.2(M+H)。
步骤 F- 合成化合物 18F
将化合物 18E(192mg， 1mmol) 溶解于 DMF， 并加入 HATU(380mg， 1eq.) 和二异丙基乙基胺 (525μL， 3eq.)。将反应室温搅拌 10 分钟， 然后加入吡咯烷 (1eq.)。将反应混合 物室温搅拌 2 小时， 然后真空浓缩并将得到的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (100％乙酸乙酯 )， 得到化合物 18F(200mg)。HPLC-MS tR ＝ 1.40min(UV254nm) ； 式 C13H15N3O2 的质量计算值 ： 245.12 ； 实测值 ： LCMS m/z 246.10(M+H)
实施例 19
制备化合物 19F
步骤 A- 合成化合物 19A
使用实施例 12 中所述的方法从所示起始原料合成化合物 19A。HPLC-MS tR ＝ 2.23min(UV254nm) ； 式 C16H24N2O4Si 的质量计算值 ： 336.16 ； 实测值 ： LCMS m/z 337.2(M+H)。
步骤 B- 合成化合物 19B
将化合物 19A(350mg， 1.0mmol) 溶解于 THF(10mL) 并加入 LiOH(1N， 2mL)。将混合 物室温搅拌过夜。在浓缩之后， 加入 1N HCl 以调节 pH 到 5。将固体 19B 过滤并在空气下 干燥 (309mg)。HPLC-MS tR ＝ 1.81min(UV254nm) ； 式 C15H22N2O4Si 的质量计算值 ： 322.1 ； 实测 值： LCMS m/z 323.2(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 19C
使用实施例 18， 步骤 E 中所述的方法将化合物 19B(200mg， 0.62mmol) 转化为化合 物 19C(190mg)。HPLC-MS tR ＝ 1.76min(UV254nm) ； 式 C15H24N2O3Si 的质量计算值 ： 308.2 ； 实测 值： LCMS m/z 309.1(M+H)。
步骤 D- 合成化合物 19D
将 化 合 物 19C(190mg， 0.6mmol) 溶 解 于 无 水 二 氯 甲 烷 (10mL) 并 加 入 三 乙 胺 (140μL， 0.6mmol)。 将溶液冷却到 0℃， 加入 MsCl(0.6mmol) 并使得到的反应回温到室温并 在该温度搅拌 2 小时。将反应混合物用二氯甲烷稀释并用水洗涤， 然后用盐水洗涤， 然后用 硫酸钠干燥， 过滤并真空浓缩， 得到化合物 19D， 其不经进一步纯化使用。
步骤 E- 合成化合物 19E
将 化 合 物 19D 溶 解 于 DMF(5mL) 并 加 入 K2CO3(138mg， 1.0mmol)， 随后加入吗啉 (0.5mL)。 在室温搅拌 1 小时之后， 加入 EtOAc(100mL) 并将反应混合物用水、 盐水洗涤， 并用 Na2SO4 干燥。在真空浓缩之后， 得到的残余物 ( 化合物 19E) 不经经一步纯化使用。HPLC-MS tR ＝ 1.36min(UV254nm) ； 式 C19H31N3O3Si 的质量计算值 ： 377.2 ； 实测值 ： LCMS m/z378.3(M+H)。
步骤 F- 合成化合物 19F
使用上述实施例 13， 步骤 C 的方法从化合物 19E 合成化合物 19F。HPLC-MS tR ＝ 0.49min(UV254nm) ； 式 C13H17N3O2 的质量计算值 ： 247.1 ； 实测值 ： LCMS m/z 248.2(M+H)。
使用上述实施例中所述的方法并采用适当的反应物， 制备以下中间体化合物 ：
实施例 20 制备化合物 60 和 61步骤 A- 合成化合物 20B ：
向 4- 溴 - 噻 唑 -2- 甲 酸 (150mg， 0.72mmol) 的 DMF(7mL) 溶 液 中 加 入 化 合 物 20A(292mg， 1.0mmol， 使用上述方案 4 中所述的方法制备 )， HATU(380mg， 1.0mmol) 和二异 丙基乙基胺 (525μL， 3.0mmol)。将得到的反应室温搅拌约 15 小时， 然后真空浓缩。得到 的残余物使用硅胶上的快速柱色谱法进行纯化 (40％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到化合物 20B。 HPLC-MS tR ＝ 1.34min(UV254nm) ； 式 C19H24N5O3SBr 的质量计算值 ： 481.08 ； 实测值 ： LCMS m/z
482.20(M+H)。
步骤 B- 合成化合物 60
根据实施例 3 中所述的方法使化合物 20B 与 6- 甲氧基异二氢吲哚 -1- 酮反应， 得 到化合物 60。HPLC-MS tR ＝ 1.34min(UV254nm) ； 式 C28H32N6O5S 的质量计算值 ： 564.22 ； 实测 值： LCMS m/z 565.20(M+H)。
步骤 C- 合成化合物 61
使用实施例 4 中所述的方法将化合物 60 脱保护， 得到化合物 61。HPLC-MS tR ＝ 1.34min(UV254nm) ； 式 C23H24N6O5S 的质量计算值 ： 464.16 ； 实测值 ： LCMS m/z 465.20(M+H)。
使用上述方法并替换适当的反应物， 制备以下的本发明化合物 ：
实施例 21
CHK1SPA 试验
这个体外试验利用在杆状病毒表达系统中表达的重组 His-CHK1 作为酶来源和基 于 CDC25C 的生物素化的肽作为底物 ( 生物素 -RSGLYRSPSMPENLNRPR)。
材料和试剂 ：
1)CDC25C Ser 216C- 端 生 物 素 化 肽 底 物 (25mg)， 保 存 于 -20 ℃， 由 Research Genetics 委托合成 ： 生物素 -RSGLYRSPSMPENLNRPR2595.4MW
2)His-CHK1 In House lot P976， 235μg/mL， 保存于 -80℃。
3)D-PBS( 不含 CaCl 和 MgCl) ： GIBCO， Cat.#14190-144
4)SPA 珠 ： Amersham， Cat.#SPQ0032 ： 500mg/ 瓶
为 500mg 的 SPA 小珠添加 10mL D-PBS 来制备 50mg/mL 的工作浓度。保存于 4℃。 水合之后在 2 周内使用。
5) 带有结合的 GF/B 过滤器的 96 孔白色微板 ： Packard， Cat.#6005177
6) 顶部密封 -96 孔粘性膜 ： Perkin Elmer， Cat.#6005185
7)96 孔无结合的白色聚苯乙烯板 ： Corning， Cat.#6005177
8)MgCl2 ： Sigma， Cat.#M-8266
9)DTT ： Promega， Cat.#V3155
10)ATP， 保存于 4℃ ： Sigma， Cat.#A-5394 33
11)γ P-ATP， 1000-3000Ci/mMol ： Amersham， Cat.#AH9968
12)NaCl ： Fisher Scientific， Cat.#BP358-212
13)H3PO4 85％ Fisher， Cat.#A242-500
14)Tris-HCL pH 8.0 ： Bio-Whittaker， Cat.#16-015V
15) 十字孢碱， 100μg ： CALBIOCHEM， Cat.#569397
16)Hypure 细胞培养级水， 500mL ： HyClone， Cat.#SH30529.02
反应混合物 ：
1) 激酶缓冲液 ： 50mM Tris pH 8.0 ； 10mM MgCl2 ； 1mM DTT
2)His-CHK1， In House Lot P976， MW ～ 30KDa， 保存于 -80℃。
需要 6nM 以得到～ 5,000CPM 的阳性对照。对于 1 个板 (100 个反应 ) ： 将 8μL 的 235μg/mL(7.83μM) 储备溶液稀释在 2mL 激酶缓冲液中。这样得到 31nM 的混合物。添加 20μL/ 孔。这样得到 6nM 的最终反应浓度。
3)CDC25C 生物素化的肽。
将 CDC25C 稀释为 1mg/mL(385μM) 的储备溶液并保存于 -20℃。对于 1 个板 (100
个反应 ) ： 将 10μL 的 1mg/mL 肽储备溶液稀释在 2mL 激酶缓冲液中。这样得到 1.925μM 的 混合物。加入 20μL/ 反应。这样得到 385nM 的最终反应浓度。
4)ATP 混合物。
对于 1 个板 (100 个反应 ) ： 将 10μL 的 1mM ATP( 冷的 ) 储备溶液和 2μL 的新 鲜的 P33-ATP(20μCi) 稀释在 5mL 激酶缓冲液中。这样得到 2μM ATP( 冷的 ) 溶液 ； 添加 50μL/ 孔以启动反应。最终体积为 100μL/ 反应， 由此最终反应浓度为 1μM ATP( 冷 ) 和 0.2μCi/ 反应。
5) 终止溶液 ：
对于 1 个板的添加 ： 向 10mL 洗涤缓冲液 2(2M NaCl 1％ H3PO4) 中加入 1mLSPA 小 珠浆液 (50mg) ； 添加 100μL/ 孔
6) 洗涤缓冲液 1 ： 2M NaCl
7) 洗涤缓冲液 2 ： 2M NaCl， 1％ H3PO4
试验操作 ：
试验的总反应体积。** 反应终点的最终反应体积 ( 添加终止溶液后 )。
1) 将试验化合物在水 /10％ DMSO 中稀释为需要的浓度， 这样得到在反应中为 1％ 的最终 DMSO 浓度。以 10μL/ 反应分配到适当的孔中。向阳性对照孔 (CHK1+CDC25C+ATP) 和阴性对照孔 ( 仅含 CHK1+ATP) 添加 10μL 的 10％ DMSO。
2) 将酶在冰上解冻 - 将酶在激酶缓冲液中稀释到适当的浓度 ( 参见反应混合物 ) 并为每个孔分配 20μL。
3) 将生物素化的底物在冰上解冻并在激酶缓冲液中稀释 ( 参见反应混合物 )。除 了阴性对照孔之外， 添加 20μL/ 孔。作为替代， 为阴性对照孔添加 20μL 的激酶缓冲液。
4) 将 ATP( 冷的 ) 和 P33-ATP 在激酶缓冲液 ( 参见反应混合物 ) 中稀释。添加 50μL/ 孔以启动反应。
5) 使反应在室温进行 2 小时。
6) 通过添加 100μL 的 SPA 小珠 / 终止溶液 ( 参见反应混合物 ) 终止反应， 保温 15 分钟后进行收集。
7) 将空白 Packard GF/B 滤板置于真空过滤装置 (Packard 板收集器 ) 中， 吸入
83*101910165 A CN 101910171说明书73/86 页200mL 水通过以润湿该系统。
8) 取出该空白板并放入 Packard GF/B 滤板。
9) 抽吸反应通过该滤板。
10) 洗涤 ： 200mL/ 洗涤 ； 用 2M NaCl 洗涤 1 次 ； 用 2M NaCl/1％ H3PO4 洗涤 1 次。
11) 使滤板干燥 15 分钟。
12) 将顶部密封 -A 粘性膜置于滤板顶部。
13) 滤板在 Top Count 中进行计数
设置 ： 数据模式 ： CPM
放射核素 ： 手动 SPA ： P33
闪烁器 ： Liq/plast
能量范围 ： 低
IC50 测定 ： 根据从抑制剂化合物的一式双份的 8- 点系列稀释液生成的抑制数据绘 制剂量响应曲线。将化合物的浓度对％激酶活性绘图， 该％激酶活性是通过用经过处理的 样品的 CPM 除以未经处理样品的 CPM 来计算的。为了生成 IC50 值， 然后将剂量响应曲线拟 合成标准 S 形曲线， 通过非线性回归分析导出 IC50 值。
使用这个试验检验了所选的本发明的噻唑衍生物， 得到约 1nM- 约 10μM 的 IC50 值。
实施例 22
CDK2 试验
杆状病毒构建 ： 通 过 PCR 将 细 胞 周 期 蛋 白 E 克 隆 到 pVL1393(Pharmingen， La Jolla， California) 中， 在氨基末端添加 5 个组氨酸残基， 以允许在镍树脂上纯化。表达的 蛋白大约为 45kDa。通过 PCR 将 CDK2 克隆到 pVL1393 中， 在羧基末端添加凝血素抗原表位 标签 (YDVPDYAS)。表达的蛋白大小大约为 34kDa。
酶产生 ： 以相同的感染复数 (MOI ＝ 5) 将表达细胞周期蛋白 E 和 CDK2 的重组杆 状病毒共感染到 SF9 细胞中， 进行 48 小时。通过以 1000RPM 离心 10 分钟收集细胞， 然后 以 5 倍片状沉淀物体积的溶胞缓冲液使片状沉淀物在冰上溶胞 30 分钟， 该缓冲液含 50mM Tris pH 8.0， 150mMNaCl， 1％ NP40， 1mM DTT 和蛋白酶抑制剂 (Roche Diagnostics GmbH， Mannheim， Germany)。以 15000RPM 使溶胞产物旋转 10 分钟， 保留上清液。将 5mL 镍珠 ( 对 于 1 升的 SF9 细胞 ) 在溶胞缓冲液 (Qiagen GmbH， Germany) 中洗涤 3 次。将咪唑加至杆状 病毒上清液中， 使最终浓度为 20mM， 然后在 4℃下与镍珠保温 45 分钟。用含 250mM 咪唑的 溶胞缓冲液洗脱蛋白质。在 2 升激酶缓冲液中使洗脱液透析约 15 小时， 该激酶缓冲液含有 50mM Tris pH 8.0， 1mM DTT， 10mM MgCl2， 100μM 原钒酸钠和 20％甘油。在 -70℃下使酶分 份保存。
使用这个试验检验了所选的本发明的噻唑衍生物， 得到约 300nM- 约 50μM 的 IC50 值。
实施例 23
体外细胞周期蛋白 E/CDK2 激酶试验
细胞周期蛋白 E/CDK2 激酶试验可以如下所述在低蛋白结合的 96- 孔板 (Corning Inc， Corning， New York) 中进行。在激酶缓冲液中将酶稀释成 50μg/mL 的最终浓度， 该激酶缓冲液含有 50mM Tris pH 8.0， 10mM MgCl2， 1mM DTT， 和 0.1mM 原钒酸钠。 用于这些反应的底物为得自组蛋白 H1 的 生物素化的肽 ( 得自 Amersham， UK)。使底物在冰上解冻， 再在激酶缓冲液中稀释成 2μM。 使试验化合物在 10％ DMSO 中稀释至期望的浓度。 对于每一激酶反应， 使 20μL 的 50μg/mL 酶溶液 (1μg 的酶 ) 和 20μl 的 2μM 底物溶液混合， 然后与 10μL 经稀释的化合物合并在 试验用的每个孔中。通过添加 50μL 的 2μM ATP 和 0.1μCi 的 33P-ATP( 得自 Amersham， UK) 来启动激酶反应。使反应在室温进行 1 小时。通过添加 200μL 终止缓冲液并保持 15 分钟来终止反应， 该缓冲液含有 0.1 ％ Triton X-100， 1mM ATP， 5mM EDTA 和 5mg/mL 链霉 抗生物素蛋白涂覆的 SPA 小珠 ( 得自 Amersham， UK)。然后使用 Filtermate 通用收集器 (Packard/Perkin Elmer Life Sciences.)， 将 SPA 小珠收集到 96- 孔 GF/B 滤板 (Packard/ Perkin Elmer Life Sciences) 中。通过用 2M NaCl 洗涤小珠 2 次， 然后用含有 1％磷酸的 2M NaCl 洗涤小珠 2 次， 以清除非特异性信号。 然后可使用例如 TopCount 96 孔液体闪烁计 数器 ( 来自 Packard/Perkin Elmer Life Sciences) 测定放射信号。
IC50 测定 ： 根据从抑制剂化合物的一式双份的 8- 点系列稀释液生成的抑制数据绘 制剂量响应曲线。将化合物的浓度对％激酶活性绘图， 该％激酶活性是通过用经过处理的 样品的 CPM 除以未经处理样品的 CPM 来计算的。为了生成 IC50 值， 然后将剂量响应曲线拟 合成标准 S 形曲线， 可通过非线性回归分析导出 IC50 值。
实施例 24
MEK1 激酶试验
通过 Hi-Five 细胞的杆状病毒感染使全长活性磷酸化 MEK1 表达为 6X 组氨酸标记 蛋白 (His6-MEK1)， 该 Hi-Five 细胞用表达未标记的组成型活性的 Raf-1 的杆状病毒共感 染。 然后将几毫克的活性 His6-MEK1 用 Ni-NTA 亲和色谱纯化， 接着进行凝胶过滤色谱纯化。 将具有在亚结构域 II 中的赖氨酸突变成精氨酸的全长鼠科催化无活性 ERK2KR 用作底物。 从在 IPTG- 诱导的 BL21D3 大肠杆菌中的载体 pET32aRC 使 ERK2KR 表达为生物素化的 6X 组 氨酸和硫氧还蛋白标记的融合蛋白， 并通过 Ni-NTA 亲和色谱纯化， 接着通过 Mono Q 离子交 换色谱纯化。在 25℃下， 在 96 孔板中一式两份进行激酶反应 15min， 每孔 33μL， 并且该激 33 酶反应的组成为 20nM His6-MEK1、 2μM ERK2KR、 2μM ATP、 10μCi/μL[γ- P]-ATP、 10mM MgCl2、 0.01％ β- 辛基葡糖苷、 1mM DTT、 20mM HEPES pH 7.5、 3％ DMSO 和范围为 20μM 降至 0.08nM 的试验化合物。 通过添加 30μL 的 1.5％ o- 磷酸来终止激酶反应， 转染到 Millipore Multiscreen-PH 板中， 并保温 5 分钟以允许 ERK2KR 结合。根据其中在添加酶之前将 30μL 的 1.5％ o- 磷酸添加到每个孔中的预灭活反应来估计非特异性活性。通过用 0.75％ o- 磷 酸真空过滤将终止的板洗涤 3 次， 接着用 100％乙醇洗涤 2 次， 并空气干燥。为每个孔添加 50μL 的闪烁合剂， 再使用 Wallac Microbeta 1450JET 闪烁计数器检测结合到 ERK2KR 中的 33 P。使用 ActivityBase 软件计算百分抑制率、 IC50 和 Hill 斜率值。
使用这个试验检验了所选的本发明的噻唑衍生物， 得到约 10nM- 约 100μM 的 IC50 值。
实施例 25
用于 MEK1TdF 试验的一般操作
在白色 96- 孔 PCR 板中， 使 1μM 蛋白与在 20μl 试验缓冲液 (25mMHEPES， pH 7.4，300mM NaCl， 1mM DTT， 2％ DMSO， Sypro Orange 5x) 中的微摩尔浓度 ( 通常为 1-50μM) 的 化合物混合。通过透明条带将板密封， 再置于热循环仪 (Chromo4， BioRad) 上。在从 25℃ 至 95℃熔化期间以每 0.5℃增量监测荧光强度。将数据输出到 excel 表， 再经过自定义曲 线拟合算法得到 TdF Kd 值。所有 TdF Kd 值具有的误差限为～ 50％， 原因是结合的热焓变 化所致的不确定性。
使用这个试验检验了所选的本发明的噻唑衍生物， 得到约 1μM- 约 100μM 的 Kd 值。
实施例 26
用于 MEK1 Delfia 酶活性试验的一般操作
使用基于 DELFIA(Perkin-Elmer) 的酶试验测定化合物的抑制作用， 其中测定 了化合物单独的抑制％和剂量反应曲线 (IC50 测定 )。将在缓冲液中的活化的重组人 MEK1(5 纳摩尔最终浓度 ) 预保温 10 分钟， 之后通过添加包含生物素标记的重组 MEK1 底 物 ERK(1 微摩最终浓度 ) 启动反应， 其中所述的缓冲液包含 Hepes、 氯化镁、 二硫苏糖醇 和 ATP(2 微摩尔最终浓度 )。使反应在 20 ℃运行 60 分钟， 之后通过将反应等分样品转 移 到 包 含 DELFIA 试 验 缓 冲 液 (Perkin-Elmer#4002-0010) 的 ROCHE 抗 生 蛋 白 链 菌 素 微 板 (Perkin-Elmer#11734776001) 上中止反应。在搅拌下在室温结合 1 小时之后， 将板用 DELFIA 洗涤缓冲液 (Perkin-Elmer#4010-0010) 洗涤， 随后为板添加包含磷酸酪氨酸特异 性抗体的 DELFIA 试验缓冲液 (Perkin Elmer#AD0040) 并如上所述保温 1 小时。在第二次 洗涤之后， 通过添加 Perkin-Elmer 增强溶液 (#4001-0010) 并随后在搅拌下保温 10 分钟使 板显影。在 Victor 1420 荧光板读板器上读取铕荧光。通过将包含化合物的试验与反应对 照进行对比来测定抑制％和 IC50。
使用这个试验检验了所选的本发明的噻唑衍生物， 得到约 10nM- 约 100μM 的 IC50 值。
实施例 27
体外极光 TdF 试验
极光 A 试验
极光体 A 激酶检测是在低蛋白质结合的 384- 孔板 (Corning 公司 ) 中进行。使全 部试剂在冰上解冻。将试验化合物在 100％ DMSO 中稀释至期望的浓度。每个反应物组成 为 8nM 酶 ( 极光体 A， Upstate 目录 #14-511)、 100nM Tamra-PKAtide(Molecular Devices， 5TAMRA-GRTGRRNSICOOH)、 25μM ATP(Roche)、 1mM DTT(Pierce) 及激酶缓冲液 (10mM Tris， 10mM MgCl2， 0.01％吐温 20)。将含有 TAMRA-PKAtide、 ATP、 DTT 及激酶缓冲液的 14μL 的 每个反应与 1μL 的经稀释的化合物合并。通过添加 5μL 稀释的酶， 使激酶反应开始。使 反应在室温下进行 2 小时。通过添加 60μL IMAP 小珠 (1 ∶ 400 珠粒， 在递增性 (94.7％ 缓冲液 A ： 5.3％缓冲液 B)1X 缓冲液， 24mM NaCl 中 ) 使反应停止。在另外的 2 小时后， 使用 Analyst AD(Molecular devices) 测定荧光极化。
极光 B 试验
极光 A 激酶试验在低蛋白质结合的 384- 孔板 (Corning 公司 ) 中进行。使全部 试剂在冰上解冻。将试验化合物在 100 ％ DMSO 中稀释至期望的浓度。每个反应物包含 26nM 酶 ( 极光体 B， Invitrogen cat#pv3970)、 100nM Tamra-PKAtide(Molecular Devices，5TAMRA-GRTGRRNSICOOH)、 50μM ATP(Roche)、 1mM DTT(Pierce) 及激酶缓冲液 (10mM Tris， 10mMMgCl2， 0.01％吐温 20)。将含有 TAMRA-PKAtide、 ATP、 DTT 及激酶缓冲液的 14μL 的每 个反应与 1μL 的经过稀释的化合物合并。通过添加 5μL 稀释的酶， 使激酶反应开始。使 反应在室温下进行 2 小时。通过添加 60μL IMAP 小珠 (1 ∶ 400 珠粒， 在递增性 (94.7％ 缓冲液 A ： 5.3％缓冲液 B)1X 缓冲液， 24mM NaCl 中 ) 使反应停止。在另外的 2 小时后， 使用 Analyst AD(Molecular devices) 测定荧光极化。
IC50 测定
从一式两份的试验化合物的 8- 点系列稀释生成的抑制数据绘制剂量反应曲线。 将化合物的浓度对激酶活性作图， 该激酶活性是通过荧光极化度数计算得到的。为了生成 IC50 值， 然后将剂量反应曲线拟合成标准 S 状曲线， 并通过非线性回归分析导出 IC50 值。
使用这个试验检验了所选的本发明的噻唑衍生物， 得到约 1nM- 约 100μM 的 Kd 值。
噻唑衍生物的用途
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的病况。
可通过给予有效量的至少一种噻唑衍生物来治疗的其它疾病或病症包括但不限 于在美国专利 6,413,974 中公开的那些， 所述专利被全文并入本文作为参考。
治疗或预防心血管疾病
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的心血管疾病。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的心血管疾病的方法， 包括对患者 给予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
可使用本发明方法治疗或预防的心血管疾病的说明性实例包括但不限于动脉粥 样硬化、 充血性心力衰竭、 心律不齐、 心肌梗塞、 心房纤维性颤动、 心房扑动、 循环性休克、 左 心室肥大、 心室性心搏过速、 室上性心动过速、 冠状动脉病、 心绞痛、 感染性心内膜炎、 非感 染性心内膜炎、 心肌病、 外周动脉疾病、 雷诺氏病、 深静脉血栓形成、 主动脉瓣狭窄、 二尖瓣 狭窄、 肺动脉狭窄和三尖瓣狭窄。
在一个实施方案中， 所述心血管疾病为动脉粥样硬化。
在另一个实施方案中， 所述心血管疾病为充血性心力衰竭。
在另一个实施方案中， 所述心血管疾病为冠状动脉病。
治疗或预防 CNS 病症
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的中枢神经系统 (CNS) 病症。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的 CNS 病症的方法， 包括对患者给 予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
可使用本发明方法治疗或预防的 CNS 病症的说明性实例包括但不限于中枢神经 系统活动不足、 中枢神经系统活动过度、 神经变性疾病、 阿尔茨海默病、 肌萎缩性侧索硬化 (ALS)、 克雅病、 亨廷顿舞蹈病、 多发性硬化、 莱维体病症、 痉挛病症、 图雷综合症、 帕金森病、 皮克病、 朊病毒病或精神分裂症、 癫痫症、 偏头痛、 焦虑症、 双相性精神障碍、 抑郁症、 注意力 不足活动过度病症 (ADHD) 和痴呆。
在一个实施方案中， 所述 CNS 病症为阿尔茨海默病。
在另一个实施方案中， 所述 CNS 病症为帕金森病。
在另一个实施方案中， 所述 CNS 病症为 ALS。治疗或预防病毒感染
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的病毒感染。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的病毒感染的方法， 包括对患者给 予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
可使用本发明方法治疗或预防的病毒感染的说明性实例包括但不限于 HIV、 人乳 头状瘤病毒 (HPV)、 疱疹病毒、 痘病毒、 埃 - 巴二氏病毒、 辛德毕斯病毒和腺病毒。
在一个实施方案中， 所述病毒感染为 HIV。
在另一个实施方案中， 所述病毒感染为 HPV。
治疗或预防真菌感染
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的真菌感染。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的真菌感染的方法， 包括对患者给 予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
可使用本发明方法治疗或预防的真菌感染的说明性实例包括但不限于曲霉病、 芽 生菌病、 念珠菌病、 球孢子菌、 隐球菌病、 组织胞浆菌病、 机会真菌 ( 包括酵母菌和霉菌 )、 毛 霉菌病、 足分支菌病、 巴西芽生菌病和孢子丝菌病。
在一个实施方案中， 所述真菌感染为念珠菌病。
治疗或预防与蛋白激酶活性有关的疾病
所述噻唑衍生物可以是蛋白激酶的抑制剂、 调制剂或调节剂， 并可用于治疗或预 防患者的与蛋白激酶活性有关的疾病。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的与蛋白激酶活性有关的疾病的 方法， 包括对患者给予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
可使用本发明方法治疗或预防的与蛋白激酶活性有关的疾病的说明性实例包括 但不限于细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK)， 诸如 CDK1， CDK2， CDK3， CDK4， CDK5， CDK6 和 CDK7， CDK8 ； 极光激酶， 诸如极光 -A， 极光 -B 和极光 -C ； 分裂素活化的蛋白激酶 (MAPK/ERK) ； 糖 原合酶激酶 3(GSK3β) ； c-Met 激酶， 诸如 c-Met ； Pim-1 激酶 ； 关卡激酶诸如 Chk1 和 Chk2 ； 酪氨酸激酶， 诸如 HER 亚家族 ( 包括例如 EGFR(HER1)， HER2， HER3 和 HER4)， 胰岛素亚家族 ( 包括例如， INS-R， IGF-IR， IR， 和 IR-R)， PDGF 亚家族 ( 包括例如， PDGF-α 和 β 受体， CSFIR， c-kit 和 FLK-II)， FLK 家族 ( 包括例如， 激酶插入结构域受体 (KDR)， 胎儿肝脏激 酶 -1(FLK-1)， 胎儿肝脏激酶 -4(FLK-4) 和 fms- 样酪氨酸激酶 -1(flt-1)) ； 非受体蛋白酪 氨酸激酶， 例如， LCK， Src， Frk， Btk， Csk， Abl， Zap70， Fes/Fps， Fak， Jak， Ack， 和 LIMK ； 和生 长因子受体酪氨酸激酶， 诸如 VEGF-R2， FGF-R， TEK， Akt 激酶等。
在一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中抑制一种或多种关卡激酶的方 法， 包括对患者给予治疗有效量的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在另一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种关卡激酶 有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括对患者给予治疗有效量的至少一种噻唑衍生物或其 药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在另一个实施方案中， 本发明提供治疗一种或多种与关卡激酶有关的疾病的方 法， 包括对需要这种治疗的患者给予至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体， 以及至少一种另外的抗癌剂， 其中所述至少一种噻唑衍生 物和至少一种抗癌剂的量产生治疗作用。
在又一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种关卡激酶 有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括对患者给予治疗有效量的药物组合物， 所述药物组 合物包括与至少一种药学上可接受的载体组合的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受 的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在一个实施方案中， 要加以抑制、 调制或调节的关卡激酶是 Chk1。 在另一个实施方 案中， 要加以抑制、 调制或调节的关卡激酶是 Chk2。
在一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中抑制一种或多种酪氨酸激酶的 方法， 包括对患者给予治疗有效量的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在另一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种酪氨酸激 酶有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括对患者给予治疗有效量的至少一种噻唑衍生物或 其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在另一个实施方案中， 本发明提供治疗一种或多种与酪氨酸激酶有关的疾病的方 法， 包括对需要这种治疗的患者给予至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 物、 酯、 前体药物或立体异构体， 以及至少一种另外的抗癌剂， 其中所述至少一种噻唑衍生 物和至少一种抗癌剂的量产生治疗作用。
在又一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种酪氨酸激 酶有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括对患者给予治疗有效量的药物组合物， 所述药物 组合物包括与至少一种药学上可接受的载体组合的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接 受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在 特 定 的 实 施 方 案 中， 要 加 以 抑 制、 调制或调节的所述酪氨酸激酶是 VEGFR(VEGF-R2)， EGFR， HER2， SRC， JAK 或 TEK， 或其组合。
在一个实施方案中， 本发明提供抑制有需要的患者的一种或多种 Pim-1 激酶的方 法， 包括对患者给予治疗有效量的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在另一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种 Pim-1 激 酶有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括给予治疗有效量的至少一种噻唑衍生物或其药学 上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在另一个实施方案中， 本发明提供治疗一种或多种与 Pim-1 激酶有关的疾病的方 法， 包括对需要这种治疗的患者给予至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 物、 酯、 前体药物或立体异构体， 以及至少一种另外的抗癌剂， 其中所述至少一种噻唑衍生 物和至少一种抗癌剂的量产生治疗作用。
在又一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种 Pim-1 激 酶有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括对患者给予治疗有效量的药物组合物， 所述药物 组合物包括与至少一种药学上可接受的载体组合的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接 受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在一个实施方案中， 本发明提供治疗一种或多种与一极光激酶有关的疾病的方法， 包括对需要这种治疗的患者给予至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合 物、 酯、 前体药物或立体异构体， 以及至少一种另外的抗癌剂， 其中所述至少一种噻唑衍生 物和至少一种抗癌剂的量产生治疗作用。
在另一个实施方案中， 本发明提供在有需要的患者中治疗与一种或多种极光激酶 有关的疾病或延缓其进展的方法， 包括对患者给予治疗有效量的药物组合物， 所述药物组 合物包括与至少一种药学上可接受的载体组合的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受 的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体。
在一个实施方案中， 本发明提供治疗一种或多种与细胞周期蛋白依赖性激酶有关 的疾病的方法， 包括对需要这种治疗的患者给予一定量的第一化合物， 和一定量的至少一 种第二化合物， 其中第一化合物是噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体 药物或立体异构体， 第二化合物是不同于所述噻唑衍生物的抗癌剂， 其中第一化合物和第 二化合物的量产生治疗作用。
所述噻唑衍生物还可以用于抑制编码蛋白质激酶的致癌基因。 这种致癌基因的非 限制性实例包括 C-Met。
治疗或预防增殖性病症
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的增殖性病症。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的增殖性病症的方法， 包括对患者 给予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
可使用本发明方法治疗或预防的增殖性病症的说明性实例包括但不限于癌症、 动 脉粥样硬化、 良性前列腺过度增生、 家族性腺瘤病息肉病、 神经纤维瘤病、 动脉粥样硬化、 肺 纤维化、 关节炎、 银屑病、 肾小球肾炎、 血管成形术或血管外科手术之后的再狭窄、 肥厚性瘢 痕形成、 炎症性肠病、 移植排斥、 内毒素性休克、 特发性肺纤维化、 硬皮病和肝硬化。
诱导或抑制细胞凋亡
所述噻唑衍生物可用于诱导或抑制患者的细胞凋亡。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供诱导或抑制患者的细胞凋亡的方法， 包括对 患者给予有效量的一种或多种噻唑衍生物。
在多种人类疾病中， 细胞凋亡响应是异常的， 作为细胞凋亡调节剂， 所述噻唑衍生 物可用于治疗癌症、 病毒感染、 预防 HIV 感染个体的 AIDS 发展、 自身免疫性疾病 ( 包括但不 限于系统性红斑狼疮、 红斑狼疮、 自身免疫介导的肾小球肾炎、 类风湿性关节炎、 银屑病、 炎 症性肠病、 和自身免疫糖尿病 )、 神经变性病症 ( 包括但不限于阿尔茨海默病、 AIDS 相关痴 呆、 帕金森病、 肌萎缩性侧索硬化、 色素性视网膜炎、 脊髓性肌萎缩和小脑变性 )、 脊髓发育 异常综合征、 再生障碍性贫血、 与心肌梗塞、 中风和再灌注损伤有关的缺血性损伤、 心律不 齐、 动脉粥样硬化、 毒素诱导的或酒精相关的肝脏疾病、 血液学疾病 ( 包括但不限于慢性贫 血症和再生障碍性贫血 )、 肌骨胳系统退行性疾病 ( 包括但不限于骨质疏松症和关节炎 )、 阿司匹林敏感性鼻窦炎、 囊性纤维化、 多发性硬化、 肾脏疾病和癌症疼痛。
治疗或预防癌症
所述噻唑衍生物可用于治疗或预防患者的癌症。
因此， 在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的癌症的方法， 包括对患者给予有 效量的一种或多种噻唑衍生物。可以使用本发明方法治疗或预防的癌症的说明性实例包括但不限于膀胱、 乳房、 结肠、 直肠、 肾脏、 肝脏、 肺 ( 包括小细胞肺癌、 非小细胞肺癌、 间皮瘤和巨细胞癌 )、 头和颈、 食管、 胆囊、 卵巢、 胰腺、 胃、 子宫颈、 甲状腺、 前列腺和皮肤 ( 包括鳞状细胞癌和黑素瘤 ) 的 癌症 ； 淋巴系统的造血性肿瘤 ( 包括但不限于白血病， 诸如急性淋巴细胞白血病、 慢性淋巴 细胞白血病或急性成淋巴细胞白血病 ； 淋巴瘤， 诸如 B 细胞淋巴瘤、 T 细胞淋巴瘤、 霍奇金淋 巴瘤、 非霍奇金淋巴瘤、 毛细胞淋巴瘤、 套细胞淋巴瘤、 骨髓瘤或伯基特淋巴瘤 ) ； 未明原因 的癌症 ； 骨髓系统的造血性肿瘤， 包括但不限于急性和慢性的粒性白血病、 脊髓发育异常综 合征和早幼粒细胞性白血病 ； 间质起源的肿瘤， 包括但不限于纤维肉瘤和横纹肌肉瘤 ； 中 枢和外周神经系统的肿瘤， 包括但不限于脑肿瘤， 诸如星形细胞瘤、 神经母细胞瘤、 神经胶 质瘤 ( 诸如多形性胶质母细胞瘤 ) 或神经鞘瘤 ； 和其它肿瘤， 包括精原细胞瘤、 恶性畸胎瘤、 骨肉瘤、 色素性干皮症、 角化棘细胞瘤、 甲状腺毛囊癌和卡波西肉瘤。所述噻唑衍生物可用 于治疗原发性和 / 或转移性癌症。
所述噻唑衍生物还可以用于癌症的化学预防。 化学预防定义为通过阻断引发致突 变事件或通过阻断已经遭受伤害的恶化前细胞的进展或抑制肿瘤复发而抑制侵袭性癌症 的发展。
所述噻唑衍生物还可以用于抑制肿瘤血管生成和转移。
在一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症选自 ： 乳腺癌、 结肠直肠癌、 肺癌、 前列腺 癌、 卵巢癌、 胰腺癌、 皮肤癌、 白血病和淋巴瘤。
在另一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症选自 ： 乳腺癌， 结肠直肠癌， 肺癌和前 列腺癌。
在一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症为乳腺癌。
在另一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症为肺癌。
在另一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症为结肠直肠癌。
在又一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症为前列腺癌。
在又一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症为白血病。
在又一个实施方案中， 所治疗或预防的癌症为淋巴瘤。
在一个实施方案中， 治疗或预防的癌症是实体瘤。
在另一个实施方案中， 治疗或预防的癌症是血液或淋巴的癌症。
在一个实施方案中， 治疗或预防的癌症是原发癌。
在另一个实施方案中， 治疗或预防的癌症是转移性癌症。
在另一个实施方案中， 患者正在由于原发癌和转移性癌症接受治疗。
组合治疗
在一个实施方案中， 本发明提供治疗患者的病况的方法， 所述方法包括对患者给 药一种或多种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯或前体药物， 以及至少一种 非噻唑衍生物的另外的治疗剂， 其中给药量合起来对于治疗或预防病况是有效的。
可用于本发明方法的另外的治疗剂包括但不限于抗癌剂、 可用于治疗心血管疾病 的药物、 可用于治疗 CNS 病症的药物、 抗病毒药、 抗真菌药、 抗增殖药、 抗脱发药、 抗炎药、 可 用于治疗蛋白激酶相关病症的药物、 抗缺血药或这些药物的两种或更多种的任何组合。
在另一个实施方案中， 其它治疗剂是可用于减少噻唑衍生物的任何可能的副作用的药物。这种可能的副作用包括但不限于恶心、 呕吐、 头痛、 发热、 昏睡、 肌肉酸痛、 腹泻、 全 身疼痛、 和注射部位的疼痛。
在对需要这种给药的患者给予组合治疗时， 所述组合治疗的各种治疗剂、 或包括 治疗剂的一种或多种组合物可以以任何顺序给药， 诸如例如， 顺序给药、 并行给药、 共同给 药、 同时给药等。在这种组合治疗中的各种活性剂的量可以是不同的量 ( 不同剂量 ) 或相 同的量 ( 相同剂量 )。
在一个实施方案中， 所示一种或多种噻唑衍生物在另外的治疗剂发挥其预防或治 疗作用时给药， 或者反之亦然。
在另一个实施方案中， 所述一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂以在将这种试 剂作为用于治疗病况的单独疗法时通常使用的剂量给药。
在另一个实施方案中， 所述一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂的给药剂量低 于在将这种试剂作为用于治疗病况的单独疗法时通常使用的剂量。
在又一个实施方案中， 所述一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂协同地起作 用， 并且给药剂量低于在将这种试剂作为用于治疗病况的单独疗法时通常使用的剂量。
在一个实施方案中， 所述一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂存在于同一组合 物中。在一个实施方案中， 这种组合物适合于口服给药。在另一个实施方案中， 这种组合物 适合于静脉内给药。
所述一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂可以相加地或协同地起作用。 协同的 组合可以允许使用较低剂量的一种或多种试剂和 / 或降低组合治疗的一种或多种试剂的 给药频率。 一种或多种试剂的较低剂量或较低给药频率可以降低治疗的毒性而不降低治疗 的效力。
在一个实施方案中， 一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂的给药可以抑制病况 对这些药物中的一种或多种的耐药性。
在一个实施方案中， 所述另外的治疗剂以其已知的治疗有效剂量使用。在另一个 实施方案中， 所述另外的治疗剂以其通常处方的剂量使用。 在另一个实施方案中， 所述另外 的治疗剂的使用剂量低于其通常处方的剂量或其已知的治疗有效剂量。
用于治疗或预防病况的在本发明的组合治疗中使用的其它试剂的剂量和给药方 案可以由在场的临床医师来决定并考虑到包装说明书中批准的剂量和给药方案 ； 患者的年 龄、 性别和一般健康状况 ； 病毒感染或相关疾病或病症的类型和严重度。在组合给药时， 用 于治疗上述疾病或病况的噻唑衍生物和其它试剂可以同时给药或顺序给药。 这在组合的各 组分以不同的剂量给药时间表给予时特别有用例如， 一个组分每天给药一次， 而另一个组 分每六小时给药一次 ； 或者在所述组合物不同的情况中特别有用， 例如一个是片剂， 而另一 个是胶囊。因此包括单独的剂型的药包是有利的。
通常， 所述一种或多种噻唑衍生物和另外的治疗剂在作为组合治疗给药时的总日 剂量可为约 0.1- 约 2000mg/ 天， 但是取决于治疗的目标、 患者和给药途径， 其必然会有所变 化。在一个实施方案中， 所述剂量为约 0.2- 约 100mg/ 天， 作为单个剂量或作为 2-4 个分开 的剂量给药。在另一个实施方案中， 所述剂量为约 1- 约 500mg/ 天， 作为单个剂量或作为 2-4 个分开的剂量给药。在另一个实施方案中， 所述剂量为约 1- 约 200mg/ 天， 作为单个剂 量或作为 2-4 个分开的剂量给药。在又一个实施方案中， 所述剂量为约 1- 约 100mg/ 天，作为单个剂量或作为 2-4 个分开的剂量给药。在再一个实施方案中， 所述剂量为约 1- 约 50mg/ 天， 作为单个剂量或作为 2-4 个分开的剂量给药。在另一个实施方案中， 所述剂量为 约 1- 约 20mg/ 天， 作为单个剂量或作为 2-4 个分开的剂量给药。
用于治疗癌症的组合治疗
本发明的化合物还可以用于与一种或多种单独的抗癌疗法 ( 诸如， 手术、 放射治 疗、 生物学疗法 ( 例如， 抗癌疫苗疗法 )) 和 / 或至少一种不同于噻唑衍生物的另外的抗癌 剂的给药相组合 ( 一起给予或以任何顺序依次给予 )， 用以治疗或预防患者的癌症。 本发明 的化合物可以与另外的抗癌剂存在于同一剂量单元中或者存在于单独的剂量单元中。
适用于与本发明化合物并用的另外的抗癌剂 ( 也称为抗肿瘤剂 ) 的非限制性 实例包括细胞生长抑制剂、 胞毒剂 ( 诸如例如但不限于 DNA 干扰剂 ( 例如顺铂或多柔 比 星 )) ； 紫 杉 烷 类 ( 例 如 泰 索 帝 (taxotere)、 红豆杉醇 ) ； 拓 扑 异 构 酶 II 抑 制 剂 ( 例 如依托泊苷或替尼泊苷 ) ； 拓扑异构酶 I 抑制剂 ( 例如依立替康 ( 或 CPT-11)、 坎斯达 (camptostar)、 或拓扑替康 ) ； 微管蛋白干扰剂 ( 例如紫杉醇、 多西他赛 (docetaxel) 或 埃坡霉素 (epothilones)) ； 激素药 ( 例如他莫西芬 ) ； 胸苷酸 (thymidilate) 合成酶抑 制剂 ( 例如 5- 氟尿嘧啶 ) ； 抗代谢剂 ( 例如甲氨喋呤 (methoxtrexate)) ； 烷化剂 ( 例如 TM 替 莫 唑 胺 (TEMODAR ， 得 自 Schering-Plough Corporation， Kenilworth， New Jersey)、 TM 环磷酰胺 ) ； 法 呢 基 蛋 白 质 转 移 酶 抑 制 剂 ( 例 如， SARASAR (4-[2-[4-[(11R)-3， 10- 二 溴 -8- 氯 -6， 11- 二氢 -5H- 苯并 [5， 6] 环庚 [1， 2-b] 吡啶 -11- 基 ]-1- 哌啶基 ]-2- 氧代 乙基 ]-1- 哌啶甲酰胺， 或者得自 Schering-Plough Corporation， Kenilworth， New Jersey 的 SCH 66336)、 tipifarnib( 或 R115777， 得自 Janssen Pharmaceuticals)、 L778， 123( 法呢基蛋白质转移酶抑制剂， 得自 Merck & Company， Whitehouse Station， New Jersey)、 BMS 214662( 法 呢 基 蛋 白 质 转 移 酶 抑 制 剂， 得 自 Bristol-Myers Squibb Pharmaceuticals， Princeton， NewJersey) ； 信号转导抑制剂 ( 例如， Iressa( 得自 Astra ZenecaPharmaceuticals， England)、 特 罗 凯 (EGFR 激 酶 抑 制 剂 )、 EGFR 的 抗 体 ( 例 如， TM 得自 NovartisPharmaceuticals， East Hanover， New C225)、 格列卫 (C-abl 激酶抑制剂， Jersey) ； 干 扰 素 类， 诸 如 例 如， 因 创 ( 得 自 Schering-Plough Corporation)、 聚乙二醇 化 - 因创 ( 得自 Schering-Plough Corporation) ； 激素治疗组合法 ； 芳香酶组合法 ； ara-C、 阿霉素、 环磷酰胺和吉西他滨。
其它有用的另外的抗癌剂包括但不限于尿嘧啶氮芥、 氮芥、 异磷酰胺、 美法仓、 苯 丁酸氮芥、 双溴丙基哌嗪 (Pipobroman)、 三亚乙基密胺、 ara-C、 阿霉素、 环磷酰胺、 氯苯吩嗪 ( 得自 Genzyme Oncology， Cambridge， Massachusetts)、 克拉屈滨 ( 得自 Pfizer)、 达沙替尼 ( 或 BMS-354825， 得 自 Janssen-Cilag Ltd.)、 巴 菲 敌 柯 林 (aphidicolon)、 利 妥 昔 单 抗 (rituxan)( 得 自 Genentech/BiogenIdec)、 舒尼替尼 ( 得 自 Bristol-Myers Squibb)、 替 扎 他 滨 ( 得 自 Aventis Pharma)、 Sml1、 氟达拉滨 ( 得 自 Trigan Oncology Associates)、 喷司他丁 ( 得自 BC CancerAgency)、 全平 (triapine) ( 得 自 Vion Pharmaceuticals)、 地 度 斯 (didox)( 得 自 Bioseeker Group)、 全米多斯 (trimidox)( 得 自 ALS Therapy DevelopmentFoundation)、 amidox、 3-AP(3- 氨 基 吡 啶 -2- 甲醛硫代半卡巴腙 )、 MDL-101， 731((E)-2’ - 脱氧 -2’ -( 氟亚甲基 ) 胞啶 ) 和吉西 他滨。其它有用的另外的抗癌剂包括但不限于三乙烯硫代磷胺、 白消安、 卡莫司汀、 环己 亚硝脲、 链唑霉素、 氮烯咪胺、 氟尿嘧啶脱氧核苷、 阿糖胞苷、 6- 巯基嘌呤、 6- 硫基鸟嘌呤、 TM 磷酸氟达拉滨、 奥沙利铂、 甲酰四氢叶酸、 奥沙利铂 (ELOXATIN ， 得自 Sanofi-Synthelab oPharmaceuticals， France)、 喷司他丁、 长春碱、 长春新碱、 长春地辛、 博来霉素、 放线菌素 D、 柔红霉素、 多柔比星、 表柔比星、 伊达比星、 普卡霉素、 脱氧柯福霉素、 丝裂霉素 -C、 L- 天 冬酰胺酶、 替尼泊苷、 17α- 炔雌醇、 己烯雌酚、 睾酮、 泼尼松、 氟羟甲睾酮、 丙酸屈他雄酮、 睾内酯、 乙酸甲地孕酮、 甲基氢化泼尼松、 甲基睾酮、 氢化泼尼松、 曲安西龙、 氯烯雌醚、 羟 孕甾酮、 氨鲁米特、 雌莫司汀、 甲孕酮乙酸酯、 亮丙瑞林、 氟他米特、 托瑞米芬、 戈舍瑞林、 顺 铂、 卡铂、 奥沙利铂、 阿洛铂 (Aroplatin)、 羟基脲、 安吖啶、 丙卡巴肼、 米托坦 (Mitotane)、 米托蒽醌、 左旋四咪唑、 诺维本、 阿那曲唑、 来曲唑、 卡培他滨、 雷洛昔芬、 屈洛昔芬、 六甲氰 胺、 阿瓦斯汀 (Avastin)、 赫赛汀 (Herceptin)、 百克沙 (Bexxar)、 万珂 (Velcade)、 泽娃灵 (Zevalin)、 三氧化二砷 (Trisenox)、 希罗达 (Xeloda)、 长春瑞滨、 卟吩姆 (Profimer)、 爱必 妥、 脂质体 (Liposomal)、 噻替哌、 六甲蜜胺、 美法仓、 曲妥珠单抗、 来曲唑、 氟维司群、 依西美 坦、 氟维司群、 异环磷酰胺、 利妥昔单抗、 C225 和坎帕斯 (Campath)。
在一个实施方案中， 其它的抗癌剂选自细胞生长抑制剂、 顺铂、 多柔比星、 泰索 帝 (taxotere)、 红豆杉醇、 依托泊苷、 伊立替康、 坎斯达 (camptostar)、 拓扑替康、 紫杉醇、 替莫唑胺、 环磷酰胺、 SCH 66336、 多西他赛、 埃坡霉素、 他莫昔芬、 5- 氟脲嘧啶、 甲氨蝶呤、 R115777、 L778、 123、 BMS 214662、 易瑞沙 (Iressa)、 特罗凯 (Tarceva)、 EGFR 的抗体、 格列卫 (Gleevec)、 因创 (intron)、 ara-C、 阿霉素、 环磷酰胺、 吉西他滨、 乌拉莫司汀、 氮芥、 异环磷 酰胺、 美法仑、 苯丁酸氮芥、 哌泊溴烷、 曲他胺、 三乙烯硫代磷胺、 白消安、 卡莫司汀、 洛莫司 汀、 链佐星、 达卡巴嗪、 氟尿苷、 阿糖胞苷、 6- 巯基嘌呤、 6- 硫代鸟嘌呤、 磷酸氟达拉滨、 喷司 他丁、 长春碱、 长春新碱、 长春地辛、 博来霉素、 放线菌素 D、 柔红霉素、 多柔比星、 表柔比星、 伊达比星、 普卡霉素、 脱氧柯福霉素、 丝裂霉素 -C、 L- 门冬酰胺酶、 替尼泊苷、 17α- 炔雌醇、 己烯雌酚、 睾酮、 泼尼松、 氟羟甲睾酮、 丙酸屈他雄酮、 睾内酪、 乙酸甲地孕酮、 甲泼尼龙、 甲 睾酮、 氢化泼尼松、 曲安西龙、 氯烯雌醚、 羟孕酮、 氨鲁米特、 雌莫司汀、 醋酸甲羟孕酮酸酯、 亮丙瑞林、 氟他胺、 托瑞米芬、 戈舍瑞林、 卡铂、 羟基脲、 安吖啶、 丙卡巴肼、 米托坦、 米托蒽 醌、 左旋咪唑、 诺维本、 阿那曲唑、 来曲唑、 卡培他滨、 雷洛昔芬、 屈洛昔芬、 六甲氰胺、 阿瓦斯 汀、 赫赛汀、 百克沙、 万珂、 泽娃灵、 三氧化二砷、 希罗达、 长春瑞滨、 卟吩姆 (Profimer)、 爱必 妥、 脂质体、 塞替派、 六甲蜜胺、 美法仑、 曲妥珠单抗、 来曲唑、 氟维司群、 依西美坦、 异环磷酰 胺、 利妥西单抗、 C225、 多西 (Doxil， 脂质体阿霉素 )、 昂塔刻 (Ontak)、 帝波特 (Deposyt)、 麦洛塔格 (Mylotarg)、 坎帕斯、 塞来考昔、 舒坦 (Sutent)、 阿法达贝泊汀 (Aranesp)、 优保津 (Neupogen)、 新司他 (Neulasta)、 凯文斯 (Kepivance)、 SU11248、 和 PTK787。
在一个实施方案中， 其它抗癌剂是基于铂的药物， 例如顺铂、 卡铂或奥沙利铂。
在另一个实施方案中， 其它抗癌剂是烷化剂。
在另一个实施方案中， 其它抗癌剂是长春花生物碱， 诸如长春新碱或长春碱。
在又一个实施方案中， 其它抗癌剂是拓扑异构酶 I 抑制剂。
在另一个实施方案中， 其它抗癌剂是拓扑异构酶 II 抑制剂。
在另一个实施方案中， 其它抗癌剂是抗代谢物。
在另一个实施方案中， 其它抗癌剂是纺锤体毒。在另一个实施方案中， 其它抗癌剂是抗肿瘤抗生素。
如果配制为固定剂量， 这种组合产物在本文中所述的剂量范围内使用本发明的化 合物以及在其批准的剂量范围内使用其它药学活性剂或疗法。例如， 已经发现 CDC2 抑制 剂奥罗莫星 (olomucine) 在诱导细胞凋亡时与已知的胞毒剂协同地起作用 (J.Cell Sci.， (1995)108， 2897。在组合制剂不适当时， 噻唑衍生物也可以与已知的抗癌剂或胞毒剂顺序 给药。本发明在给药顺序方面没有限制， 噻唑衍生物可以在已知的抗癌剂或胞毒剂之前或 之后给药。例如， 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶 flavopiridol 的细胞毒活性受抗癌剂的给 药顺序的影响。Cancer Research， (1997)57， 3375。这种技术在本领域技术人员以及主治 医师的技能范围内。
因此， 在一个方面中， 本发明包括治疗患者的癌症的方法， 包括对患者给予一定量 的至少一种噻唑衍生物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯、 前体药物或立体异构体、 以 及一种或多种其它抗癌治疗模式， 其中噻唑衍生物 / 其它治疗模式的量产生期望的治疗效 果。在一个实施方案中， 所述至少一种噻唑衍生物和一种或多种其它治疗模式协同地起作 用。在另一个实施方案中， 所述至少一种噻唑衍生物和一种或多种其它治疗模式相加地起 作用。
在一个实施方案中， 其它治疗模式是手术。
在另一个实施方案中， 其它治疗模式是放射治疗。
在另一个实施方案中， 其它治疗模式是生物学疗法， 诸如激素治疗或抗癌疫苗疗 法。
本发明化合物的药理学性质可以通过许多药理学试验来证实。 已经对本发明的化 合物和它们的盐、 溶剂合物、 酯或前体药物进行了本文中以下所述的示例性药理学试验。
组合物和给药
本发明还涉及药物组合物， 所述药物组合物包括至少一种噻唑衍生物或所述化合 物的药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯或前体药物、 以及至少一种药学上可接受的载体。
对于从本发明所述的化合物制备药物组合物来说， 惰性的、 药学上可接受的载体 可以是固体或液体。固体形式制备物包括粉末、 片剂、 可分散颗粒、 胶囊、 扁囊剂和栓剂。粉 末和片剂可以包括约 5- 约 95％的活性成分。适合的固体载体是本领域中已知的， 例如， 碳 酸镁、 硬脂酸镁、 滑石、 糖或乳糖。可以将片剂、 粉末、 扁囊剂和胶囊用作适合于口服给药的 固体剂型。药学上可接受的载体的实例以及生产各种组合物的方法可以在 A.Gennaro( 编 者 )， Remington’ s Pharmaceutical Sciences， 第 18 版， (1990)， Mack Publishing Co.， Easton， Pennsylvania 中找到。
液体形式制备物包括溶液、 悬浮液和乳剂。 作为实例， 可以提及用于非肠道注射的 水或水 - 丙二醇溶液， 或为口服溶液、 悬浮液和乳剂添加甜味剂和遮光剂。液体形式制备物 还可以包括用于鼻内给药的溶液。
适合于吸入的气雾剂制备物可以包括溶液和粉末形式的固体， 其可以与药学上可 接受的载体 ( 诸如惰性的压缩气体， 例如氮气 ) 组合。
还包括在即将使用之前意图转化为用于口服或非肠道给药的液体形式制备物的 固体形式制备物。这种液体形式制备物包括溶液、 悬浮液和乳剂。
本发明的化合物还可以是可透皮递送的。 透皮组合物可以为霜剂、 洗液、 气雾剂和/ 或乳剂的形式， 并可以如本领域中对于这种目的惯用的将其包括在基质型或储库型透皮 贴片中。
本发明的化合物还可以皮下递送。
优选地， 将化合物经口给药或静脉内给药或鞘内给药或以某些适当的组合方式给 药。
优选地， 药物制剂为单元剂型。 在这种形式中， 制备物被再分成包含适量的活性组 分的适当大小的单元剂量， 所述适当量例如是用于实现期望的目的有效量。
单元剂量制备物中的活性化合物的量可以从约 0.001mg- 约 500mg 变化或加以调 节。在一个实施方案中， 单元剂量制备物中的活性化合物的量为约 0.01mg- 约 250mg。在另 一个实施方案中， 单元剂量制备物中的活性化合物的量为约 0.1mg- 约 100mg。在另一个实 施方案中， 单元剂量制备物中的活性化合物的量为约 1.0mg- 约 100mg。在另一个实施方案 中， 单元剂量制备物中的活性化合物的量为约 1.0mg- 约 50mg。在又一个实施方案中， 单元 剂量制备物中的活性化合物的量为约 1.0mg- 约 25mg。
所使用的实际剂量可以取决于患者的需要和所治疗的病况的严重程度而变化。 对 于特定情况的适当的给药方案的确定在本领域技术人员的能力范围内。为了方便起见， 可 以根据需要将总的日剂量分开并且在一天中作为多个部分给药。
根据在场的临床医师的判断来调制本发明的化合物和 / 或其药学上可接受的盐 的给药量和给药频率， 并考虑到诸如年龄、 病况和患者大小以及所治疗症状的严重程度等 因素。口服给药的典型的推荐日剂量给药方案可以为约 0.01mg/ 天 - 约 2000mg/ 天的噻唑 衍生物。 在一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 1mg/ 天 -1000mg/ 天。 在另一 个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 1mg/ 天 -500mg/ 天。 在另一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 100mg/ 天 -500mg/ 天。在另一个实施方案中， 口服给药的 日剂量给药方案为约 1mg/ 天 -250mg/ 天。在另一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方 案为约 100mg/ 天 -250mg/ 天。 在又一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 1mg/ 天 -100mg/ 天。在又一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 50mg/ 天 -100mg/ 天。在另一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 1mg/ 天 -50mg/ 天。在另一个 实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 25mg/ 天 -50mg/ 天。在另一个实施方案中， 口服给药的日剂量给药方案为约 1mg/ 天 -25mg/ 天。所述日剂量可以以单独的剂量给药， 或者可以分为 2-4 个分开的剂量。
药包
在一个方面中， 本发明提供药包， 所述药包包括有效量的一种或多种噻唑衍生物 或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯或前体药物， 以及药学上可接受的载体。
在另一个方面中， 本发明提供药包， 所述药包包括一定量的一种或多种噻唑衍生 物或其药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯或前体药物， 以及一定量的至少一种上述列举的另 外的治疗剂， 其中所述组合的量对于治疗或预防患者的病况是有效的。
在组合治疗方案的各组分在不止一个组合物中给药时， 可以将它们提供于包括单 独包装的药包中， 所述单独的包装包含一个或多个容器， 其中一个容器包含在药学上可接 受的载体中的一种或多种噻唑衍生物， 第二个单独的容器包括在药学上可接受的载体中的 另外的治疗剂， 每个组合物的活性组分的量使得所述组合是治疗有效的。在另一个方面中， 本发明提供药包， 所述药包包括一定量的至少一种噻唑衍生物 或所述化合物药学上可接受的盐、 溶剂合物、 酯或前体药物， 以及一定量的至少一种抗癌 疗法和 / 或上述列举的另外的抗癌剂， 其中所述两种或更多种成分的量产生期望的治疗效 果。
本发明的范围不限于实施例中公开的特定的实施方案， 其意在举例说明本发明的 一些方面， 且任何功能等效的实施方案都在本发明的范围内。 实际上， 除了所示出的和本文 中所述的那些之外的本发明的各种改进对于相关领域的技术人员来说是显而易见的， 并且 意在也落入所附权利要求的范围内。
本文引用了许多参考文献， 所述参考文献的全部公开都被全文并入本文作为参 考。97