N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺化合物、 其制备方 法和治疗用途 技术领域 本发明涉及咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺衍生物、 其制备方法及其治疗或预防 涉及 Nurr-1 核受体 ( 也称为 NR4A2、 NOT、 TINUR、 RNR-1 和 HZF3) 的疾病中的治疗用途。
发明内容
本发明的主题是式 (I) 化合物 ：其中 ：
X 表示苯基， 其任选取代有一个或者多个基团， 所述基团彼此独立地选自下述的原 子或者基团 ： 卤素、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷基、 NRaRb， 所述烷基和烷氧基可取代有一个或 者多个卤素原子 ；
R1 表示氢原子、 卤素原子、 (C1-C6) 烷氧基、 (C1-C6) 烷基、 氨基或者 NRcRd 基团 ； 所 述烷基和烷氧基可取代有一个或者多个卤素原子、 羟基或者氨基， 或者 (C1-C6) 烷氧基 ；
R2 表示下述基团之一 ：
.NRcRd 基团，
.-N ＝ CH-NRaRb 基团，
. 硝基、 羟基亚氨基烷基、 烷氧基亚氨基烷基，
.(C1-C6) 烷基硫基，
.(C1-C6) 烷基亚磺酰基，
.(C1-C6) 烷基磺酰基，
.-SO2-NR5R6 基团，
.(((C1-C6) 烷基 )3) 甲硅烷基乙炔基 ；
R3 表示氢原子、 (C1-C6) 烷基、 (C1-C6) 烷氧基或者卤素原子 ；
R4 表示氢原子、 (C1-C4) 烷基、 (C1-C4) 烷氧基或者氟原子 ；
R5 和 R6 可相同或者不同， 且表示氢原子或者 (C1-C6) 烷基 ；
Ra 和 Rb 彼此独立地表示氢原子或者 (C1-C6) 烷基或者 Ra 和 Rb 与它们所连接的 氮原子形成 4- 至 7- 元环基 ；
Rc 表示氢原子且 Rd 表示氢原子或者 (C1-C6) 烷基， 所述烷基任选取代有 (C1-C6) 烷 氧基 ；
上述化合物为碱形式或者酸加成盐形式。
文件 FR 2638161 披露了源于苯甲酰基 -2- 咪唑并 [1， 2-a] 吡啶的化合物， 其可用 作药物。
式 (I) 化合物可含有一个或者多个不对称碳原子。该化合物因此可以以对映异构 体或者非对映异构体的形式存在。这些对映异构体和非对映异构体和其混合物， 包括外消 旋混合物， 构成本发明的一部分。
式 (I) 化合物可以以碱形式或者酸加成盐形式存在。该加成盐构成了本发明的一 部分。
这些盐可用药用酸来制备， 但有用的其它酸的盐， 例如， 用于纯化或者分离式 (I) 化合物的盐也构成了本发明的一部分。
式 (I) 化合物也可以水合物或者溶剂化物的形式存在， 即与一个或者多个水分子 或者溶剂缔合或结合的形式。该水合物和溶剂化物也构成本发明的一部分。
在本发明的上下文中， 应用以下定义 ：
- 卤素原子 ： 氟、 氯、 溴或者碘 ；
- 烷基 ： 直链的、 支链的或者环状的饱和脂肪族基团， 所述基团任选取代有以下基 团： 直链的、 支链的、 或者环状的饱和烷基。可提及的实例包括甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁 基、 异丁基、 叔丁基、 环丙基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 甲基环丙基等基团 ； - 烯基 ： 直链的或者支链的， 单 - 或者多不饱和的脂肪族基团， 其包括， 例如， 一个 或者两个不饱和烯键 (ethylenic unsaturations) ；
- 烷氧基 ： -O- 烷基， 其中该烷基如前定义 ；
- 炔基 ： 直链的或者支链的， 单 - 或者多不饱和的脂肪族基团， 其包括，
例如， 一个或者两个不饱和炔键 (ethylynic unsaturations)。
在下文定义了各亚组的化合物， 它们也构成本发明的一部分。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第一组化合物由以下化合物构 成： 其中基团 R1 或者 R2 中的至少一个不是氢原子 ； 其它基团如前定义。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第二组化合物由以下化合物构 成： 其中 R1 表示氢原子、 卤素原子、 (C1-C6) 烷基或者 (C1-C6) 烷氧基 ； 其它基团如前定义。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第三组化合物由以下化合物构 成： 其中 X 表示苯基 ； 其它基团如前定义。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第四组化合物由以下化合物构 成： 其中 R3 和 R4 各自表示氢原子 ； 其它基团如前定义。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第五组化合物由以下化合物构 成： 其中 R2 表示以下基团之一 ：
.NRcRd 基团，
.-N ＝ CH-NRaRb 基团，
. 硝基、 羟基亚氨基烷基、 烷氧基亚氨基烷基，
.(C1-C6) 烷基硫基，
.(C1-C6) 烷基亚磺酰基，
.(C1-C6) 烷基磺酰基，
.-SO2-NR5R6 基团， .(((C1-C6) 烷基 )3) 甲硅烷基乙炔基 ； R5 和 R6 可相同或者不同， 且表示氢原子或者 (C1-C6) 烷基 ； Ra 和 Rb 彼此独立地表示氢原子或者 (C1-C6) 烷基 ； Rc 表示氢原子且 Rd 表示氢原子或者 (C1-C6) 烷基， 所述烷基任选取代有 (C1-C6) 烷氧基 ； 其它基团如前定义。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第六组化合物由以下化合物构 成： 其中 R2 表示以下基团之一 ：
NH2、 CH ＝ NOH、 NHiPr、 硝基、 CH ＝ NOMe、 NHMe、 N ＝ CHNMe2、 NHEt、 NHCH2CH2OMe、 SMe、 SOMe、 SO2Me、 SO2NH2、 SO2NHMe、 SO2NMe2、 C ≡ CSiMe3 ；
其它基团如前定义。
在如前定义的作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 第七组化合物由以下化合物构 成： 其中
X 表示苯基 ；
R1 表示氢原子、 氯原子或者甲基或者乙氧基 ； R3 和 R4 表示氢原子 ；
R2 表示以下基团 ： NH2、 CH ＝ NOH、 NHiPr、 硝基、 CH ＝ NOMe、 NHMe、 N ＝ CHNMe2、 NHEt、 NHCH2CH2OMe、 SMe、 SOMe、 SO2Me、 SO2NH2、 SO2NHMe、 SO2NMe2、 C ≡ CSiMe3 ；
所述化合物为碱形式或酸加成盐形式。
在作为本发明主题的式 (I) 化合物中， 可具体提及以下化合物 ：
·6-[(E)-( 羟基亚氨基 ) 甲基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6-( 异丙基氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其盐酸盐 (1 ∶ 1)
·6- 硝基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6- 氨基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6- 氨基 -5- 氯 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6- 氨基 -5- 乙氧基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6-{[(1E)-( 二甲基氨基 ) 亚甲基 ] 氨基 }-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲 酰胺
·6-[(E)-( 甲氧基亚氨基 ) 甲基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6-( 甲基氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6-( 乙基氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6-(2- 甲氧基乙基氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·5- 甲基 -6- 硝基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6- 氨基 -5- 甲基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
·6-( 甲基硫基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其氢溴酸盐 (1 ∶ 1)
·6-[(RS)- 甲基亚磺酰基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其氢溴酸 盐 (1 ∶ 1)
· 6-( 甲基磺酰基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其氢溴酸盐 (1 ∶ 1)
· 6-( 氨基磺酰基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其氢溴酸盐 (1 ∶ 1)
·6-[( 甲基氨基 ) 磺酰基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其氢溴酸 盐 (1 ∶ 1)
·6-[( 二甲基氨基 ) 磺酰基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
· 6-( 三甲基甲硅烷基乙炔基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其氢溴 酸盐 (1 ∶ 1)
这些化合物的酸加成盐也构成了本发明的一部分。
根据本发明， 式 (I) 化合物可根据在方案 1 中所述的方法制备。
方案 1
途径 A 包括 ： 根据在本领域的技术人员所知的方法制备式 (II) 的 2- 氨基吡啶以 及形成咪唑并 [1， 2-a] 吡啶环， 后者通过与 2- 氧代 -N- 芳基丙酰胺衍生物 (III) 缩合得 到， 所述衍生物中的 Hal 表示氯、 溴或者碘原子且 X 如前定义， 以上途径类似于以下所述的 方法 ： 例如 J-J.Bourguignon et al.in Aust.J.Chem.， 50， 719(1997) 和 J.G.Lombardino in J.Org.Chem.， 30， 2403(1965)。2- 氧代 -N- 芳基 - 丙酰胺 (III) 的卤代衍生物可根据以 下所述的方法得到 ： R.Kluger et al.in J.Am.Chem.Soc.， 106， 4017(1984)。
第二步合成途径 B-C 包括 ： 将式 (IV) 的咪唑并吡啶 -2- 羧酸或者其衍生物与式 (VI) 的芳胺 X-NH2 进行偶联反应， 所述的式 (IV) 中的 Y 是羟基、 卤素或者 (C1-C6) 烷氧基， 所述的式 (VI) 中的 X 如前定义， 上述反应是根据在本领域的技术人员所知的方法进行。因 此， 酸可预先转化为其反应衍生物， 例如卤代酸、 酐、 混合酐或者活性酯， 然后将衍生物与胺 (VI) 在碱的存在下在惰性溶剂中反应， 所述的碱例如二异丙基乙胺、 三乙胺或者吡啶， 所述 的惰性溶剂例如 THF、 DMF 或者二氯甲烷。偶联反应也可如下进行 ： 在偶联剂的存在下或者 不分离反应中间产物的相同条件下进行， 所述的偶联剂例如 CDI、 EDCI、 HATU 或者 HBTU。可 选择地， 胺 (VI) 可与式 (IV) 的酸酯在催化剂的存在下反应， 所述的催化剂例如三甲基铝 或者叔丁酰基锆， 前者是根据以下的方法进行 ： Weinreb， S.et al.(Tet.Lett.(1977)， 18，
4171)。 式 (IV) 的咪唑并吡啶 -2- 羧酸和其衍生物可如下得到 ： 根据 J.G.Lombardino in J.Org.Chem.， 30(7)， 2403(1965) 所述的方法， 将适当的 2- 氨基吡啶与 3- 卤代 -2- 氧代丙 酸酯缩合， 然后通过脱保护将酯转化为酸， 并且在适当的时候将酸转化为其衍生物。
在需要和必要时， 可对式 (I) 产物及其前体即式 (II) 或者 (IV) 产物按任意顺序 进行一种或多种下述的转化反应， 从而得到式 (I) 的产物或者转化为式 (I) 的其它产物 ：
a) 酸官能团的酯化或者酰胺化反应，
b) 胺官能团的酰胺化反应，
c) 酯官能团水解为酸官能团的反应，
d) 羟基官能团转化为烷氧基官能团的反应，
e) 醇官能团氧化为醛或者酮官能团的反应，
f) 醛或者酮官能团转化为肟衍生物的反应，
g) 腈基 (nitrile radical) 转化为醛官能团的转化反应，
h) 腈基转化为酮官能团的转化反应，
i) 烯基氧化为醛或者酮官能团的反应，
j) 硝基通过还原反应得到伯氨基的反应，
k) 通过还原性氨化或者烷基化反应， 将伯氨或者仲氨基转化为仲氨或叔氨基的转 化反应，
l) 伯氨基转化为脒基的转化反应，
m) 烷基硫醚基官能团氧化为烷基亚砜或者烷基砜官能团的氧化反应，
n) 烷基亚砜官能团氧化为烷基砜官能团的氧化反应，
o) 反应性官能团的保护反应，
p) 脱除受保护的反应官能团上的保护基的反应，
q) 与无机酸或者有机酸或者与碱的成盐反应， 以得到相应的盐，
r) 将外消旋形式拆分为对映异构体的反应，
由此获得的所述式 (I) 产物在适当的时候为任何可能的异构形式， 为外消旋体、 对映异构体、 非对映异构体或者互变异构体。
在方案 1 中， 当未描述起始化合物和试剂的制备方法时， 它们是可商购得到的或 者由文献公知的， 或者也可根据在其中所述的方法或者本领域的技术人员所知的方法来制 备。
下述的实施例描述了根据本发明的某些化合物的制备方法。 这些实施例并非限制 性的， 而仅作为示例说明本发明。示例说明的化合物的编号是指在下文中的表格中提及的 那些， 该表格示例说明了本发明的多个化合物的化学结构和物理性质。
具体实施方式
实施例 1 ： 6-[(E)-( 羟基亚氨基 ) 甲基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
将 123mg 6- 甲酰基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺和 48mg 羟基胺盐酸 盐在 6.5mL 吡啶中的溶液在 20℃搅拌 2 小时并减压浓缩至干燥。 固体先后用水和二乙醚洗 涤并溶解于含有 2mL 吡啶的 75mL 甲醇和 75mL 二氯甲烷的混合溶液中。 溶液在 1.5g 二氧化硅存在下蒸发。在硅胶色谱柱上通过色谱进行纯化 ( 用环己烷和乙酸乙酯的混合液洗脱 ) 后， 将含有所要产物的馏分混合并减压蒸干。 固体用乙酸乙酯研磨， 滤过并先后用乙酸乙酯 和二乙醚洗涤， 并干燥得到 48mg 6-[(E)-( 羟基亚氨基 ) 甲基 ]-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲酰胺， 其形式为白色固体。
实施例 2 ： 6-( 异丙基氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺及其盐酸盐 (1 ∶ 1).
2.1 ： 5- 异丙基氨基吡啶 -2- 胺
在缓慢地将 1g 氯化亚锡加入到 362mg 5- 异丙基氨基 -6- 硝基吡啶 (WO 2006/040 520) 在 10mL 乙醇的混悬液中后， 将反应混合物回流 30 分钟并浓缩至干燥。将残余物吸收 在氨化甲醇 (ammoniacal methanol) 中， 将混合物滤过并将滤液浓缩至干燥。将残余物在 硅胶柱 (silica cartridge) 上通过色谱进行纯化 ( 先后用二氯甲烷和乙酸乙酯 (0/100 至 100/0) 的梯度和 90/10 的二氯甲烷和 7N 氨化甲醇的混合液洗脱 )。将含有所要产物的馏 分混合并浓缩至干燥得到 143mg 5- 异丙基氨基吡啶 -2- 胺， 其形式为紫色油。 1
H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 1.08(d， J ＝ 6.5Hz， 6H)， 3.38(m， 1H)， 4.58( 宽多重峰， 1H)， 5.18( 宽多重峰， 2H)， 6.38(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 6.89(dd， J ＝ 3.0 和 8.5Hz， 1H)， 7.33(d， J ＝ 3.0Hz， 1H).
质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 152[M+H]+. 2.2 ： 6-( 异 丙 基 氨 基 )-N- 苯 基 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲 酰 胺 及 其 盐 酸 盐(1 ∶ 1) 向 143mg 5- 异丙基氨基吡啶 -2- 胺在 10mL 1， 2- 二甲氧基乙烷和 1mL 乙醇的溶 液中加入 172mg 3- 溴 -2- 氧代 -N- 苯基丙酰胺。将反应混合物在 25℃搅拌 90 小时然后回 流 2 小时并减压浓缩至干燥。将残余物吸收在二氯甲烷和碳酸氢钠溶液的混合液中。将有 机相在硫酸镁上干燥并减压浓缩至干燥。将残余物在硅胶柱上通过色谱进行纯化 ( 用二氯 甲烷和乙酸乙酯 (80/20) 的混合液洗脱 )。将含有所要产物的馏分混合并浓缩至干燥得到 136mg 6-( 异丙基氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 其形式为棕色固体。
将产物吸收在含有少量甲醇的二噁烷中并用 116μL 4N 氯化氢在二噁烷中的溶 液处理。 在 20℃搅拌 1 小时后， 抽吸滤出沉淀， 用二噁烷洗涤并干燥得到 136mg 6-( 异丙基 氨基 )-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺盐酸盐 (1 ∶ 1)， 其形式为淡粉色固体。
实施例 3 ： 6- 硝基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
向冷却至 0℃的 638μL 苯胺在 78mL 甲苯中的溶液中逐滴加入 4.68mL2M 三甲基 铝在甲苯中的溶液， 然后在 20 ℃加入 800mg 6- 硝基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 羧酸乙酯 (Heterocycles 38(7)， 1527(1994))。将反应混合物在室温搅拌 2 小时然后冷却至 4℃并 缓慢地用 40mL 饱和的氯化铵溶液处理， 减压浓缩并再用 150mL 水和 400mL 乙酸乙酯稀释。 将有机相在硫酸镁上干燥， 用硅藻土滤过并减压蒸干。 将残余物用二氯甲烷研磨， 抽吸过滤 并干燥得到 247mg 6- 硝基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺 )， 其形式为灰绿色固 体。
实施例 4 ： 6- 氨基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
向 190mg 6- 硝基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺在 3mL 乙醇的混悬液 中加入 562mg 氯化亚锡并将混合物回流 30 分钟。将反应混合物浓缩至干燥并将残余物吸
收在氨在甲醇 (7N) 中的溶液中。将混悬液滤过并将滤液减压蒸干。将残余物在硅胶柱上 通过色谱进行纯化 ( 用 50/50 二氯甲烷和乙酸乙酯的混合液洗脱 )。将含有所要产物的馏 分混合并减压蒸干得到 30mg 6- 氨基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 其形式为 绿色固体。
色谱法使实施例 5 和 6 的产物分离。
实施例 5 ： 6- 氨基 -5- 氯 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
10mg 6- 氨基 -5- 氯 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺作为制备实施例 4 的化合物的副产物得到。将产物经过在二氧化硅上的色谱分离， 其形式为绿色固体。
实施例 6 ： 6- 氨基 -5- 乙氧基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺
16mg 6- 氨基 -5- 乙氧基 -N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺作为制备实施 例 4 的化合物的副产物得到。将产物经过在二氧化硅上的色谱分离， 其形式为绿色固体。
实施例 7 ： 6-{[(1E)-( 二甲基氨基 ) 亚甲基 ] 氨基 }-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 甲酰胺
7.1 ： 6-{[(1E)-( 二甲基氨基 ) 亚甲基 ] 氨基 }-5- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 羧 酸乙酯 将 200mg 6- 氨 基 咪 唑 并 [1， 2-a] 吡 啶 -2- 羧 酸 乙 酯 (Heterocycles 38(7)， 1527(1994)) 用 2mL N， N- 二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛处理。将反应混合物回流 2 小时然 后冷却并用戊烷稀释。将沉淀物经抽吸过滤， 洗涤并干燥得到 180mg 6-{[(1E)-( 二甲基氨 基 ) 亚甲基 ] 氨基 }-5- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 羧酸乙酯， 其形式为赭色固体。 1
H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 1.31(t， J ＝ 3H)， 2.91( 宽单峰， 3H)， 3.02( 宽单峰， 3H)， 4.29(q， J ＝ 7.0Hz， 2H)， 7.21(dd， J ＝ 1.5 和 9.5Hz， 1H)， 7.47(d， J＝ 9.5Hz， 1H)， 7.84(s， 1H)， 8.05(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 8.35(s， 1H). +
质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 261[M+H] ， m/z 233[MH-C2H5]+
7.2 ： 6-{[(1E)-( 二甲基氨基 ) 亚甲基 ] 氨基 }-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲 酰胺
与实施例 2( 步骤 2.2) 相似的方式进行， 由 112mg 6-{[(1E)-( 二甲基氨基 ) 亚甲 基 ] 氨基 }-5- 甲基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 羧酸乙酯开始， 得到 79mg6-{[(1E)-( 二甲基 氨基 ) 亚甲基 ] 氨基 }-N- 苯基咪唑并 [1， 2-a] 吡啶 -2- 甲酰胺， 其形式为浅褐色固体。
下述的中间产物用于制备本发明的化合物。
5- 乙基氨基吡啶 -2- 胺
5- 乙基氨基吡啶 -2- 胺的制备方式与 5- 异丙基氨基吡啶 -2- 胺 ( 实施例 2.1) 相 同， 由 5- 乙基氨基 -6- 硝基吡啶开始 (PCT Int.Appl.WO 2006/040520)。
5-(2- 甲氧基乙基氨基 ) 吡啶 -2- 胺
将 370mg 5-(2- 甲氧基乙基氨基 )-2- 硝基吡啶 (WO 2006/040526) 缓慢地加入到 冷却至 -5℃的 597mg 锡在 6mL 48％氢溴酸的混悬液中。将反应混合物在 -5℃搅拌 2 小时。 缓慢地加入 6mL 25％氨水并将混合液用二氯甲烷萃取。将有机相经沉降分离， 在硫酸镁上 干燥并减压浓缩至干燥得到粗产物 5-(2- 甲氧基乙基氨基 ) 吡啶 -2- 胺， 其形式为棕色油， 在无需进一步纯化的残余物合成中使用。
质谱 (LC/MS) ： m/z 168 ： [M+H]+.
下表举例说明了根据本发明的化合物的多个多实施例的化学结构 ( 表 1) 和光谱 特征 ( 表 2)。
在这些表中， “HCl” 表示盐酸盐 ； “HBr” 表示氢溴酸盐 ； “-” 表示化合物为碱的形 式； “Me” 表示甲基， “Et” 表示乙基， “iPr” 表示异丙基且 “OMe” 表示甲氧基。
表1
Ex 1 2 3 4
R1 H H H HR2 CH ＝ NOH NHiPr NO2 NH2R3 H H H HR4 H H H HX Ph Ph Ph Ph盐 (salt) HCl -5 6 7 8 9Cl OEt H H HNH2 NH2 N ＝ CHNMe2 CH ＝ NOMe NHMe NHEt NHCH2CH2OMe NO2 NH2 SMe SOMe SO2MeH H H H H H H H H H H H12H H H H H H H H H H H HPh Ph Ph Ph Ph Ph Ph Ph Ph Ph Ph PhHBr HBr HBr10 H 11 H 12 Me 13 Me 14 H 15 H 16 H101910175 A CN 101910181说SO2NH2 SO2NHMe SO2NMe2 C ≡ CSiMe3 H H H H明书H H H H Ph Ph Ph Ph HBr HBr HBr9/14 页17 H 18 H 19 H 20 H
表2特征1序号 1H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 7.09(t J ＝ 7.5Hz， 1H)，7.34(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.62 至 7.72(m， 2H)， 7.89(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.20(s， 1H)， 8.55(s， 1H)， 8.79( 宽单峰， 1H)， 10.2(s， 1H)， 11.45( 宽单 峰， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 281[M+H]+. 21H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 1.20(d， J ＝ 6.5Hz， 6H)， 3.47(m， 1H)， 7.14(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.35( 部分隐蔽的多重峰，1H)， 7.39(t， J ＝ 8.0Hz， 2H)， 7.58(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.81(d， J ＝ 8.0 10.6( 宽多重峰， 1H). Hz， 2H)， 7.92( 宽单峰， 1H)， 8.59( 宽单峰， 1H)， + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 295[M+H] .
序号 3特征1H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 7.11(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.36(t， J ＝ 8.0Hz， 2H)， 7.82(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.89(d， J ＝ 8.0 Hz， 2H)， 8.08(dd， J ＝ 2.0 和 9.5Hz， 1H)， 8.74(s， 1H)， 9.96(d， J ＝ 2.0 Hz， 1H)， 10.4( 宽单峰， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 283[M+H]+.4H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 5.10( 宽单峰， 2H)， 6.99(dd， J ＝ 1.5 和 9.5Hz， 1H)， 7.06(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.31(t， J ＝ 7.5 Hz， 2H)， 7.41(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.71(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.87(d， J＝ 7.5Hz， 2H)， 8.29(s， 1H)， 10.05(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 252[M]+.115H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 5.50(s， 2H)， 7.09(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.20(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.32(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.53(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.88(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.19(s， 1H)， 10.15(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 287[M+H] ， 存在 1Cl.61H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 1.43(t， J ＝ 7.0Hz，3H)， 4.19(q， J ＝ 7.0Hz， 2H)， 4.82( 宽单峰， 2H)， 7.07(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.15(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 7.31(d， J ＝ 9.0Hz， 1H)， 7.33(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.89(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.12(s， 1H)， 10.1(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 297[M+H] . 71H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.93( 宽单峰， 3H)，3.03( 宽单峰， 3H)， 7.09(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.24(dd， J ＝ 1.5 和 9.5Hz， 1H)， 7.33(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.51(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.87(s， 1H)， 7.89 (d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.11( 宽单峰， 1H)， 8.34(s， 1H)， 10.1(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 308[M+H] . 81H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 3.92(s， 3H)， 7.10(t J ＝7.5Hz， 1H)， 7.34(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.62 至 7.72(m， 2H)， 7.89(d， J＝ 7.5Hz， 2H)， 8.30(s， 1H)， 8.59(s， 1H)， 8.83( 宽单峰， 1H)， 10.25( 宽单 峰， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 295[M+H]+.
序号 9特征1H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.68(d， J ＝ 5.5Hz， 3H)， 5.72(q， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 6.99(dd， J ＝ 1.5 和 9.5Hz， 1H)， 7.08(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.32(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.41(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.58(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.87( 宽二重峰， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.29(s， 1H)， 10.0(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 267[M+H]+.101H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 1.22(t， J ＝ 7.5Hz， 3H)， 2.98(m， 2H)， 5.62(t， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 7.00(dd， J ＝ 1.5 和 9.5Hz， 1H)， 7.07( 宽三重峰， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.31(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.42(d， J＝ 9.5Hz， 1H)， 7.61(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.87(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.27(s， 1H)， 10.0(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 281[M+H]+. 111H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 3.12(q， J ＝ 6.0Hz， 2H)， 3.30( 隐蔽的单峰， 3H)， 3.58(t， J ＝ 6.0Hz， 2H)， 5.70(t， J ＝ 6.0Hz， 1H)， 7.07(m， 2H)， 7.31(t， J ＝ 7.5H， 2H)， 7.42(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.69 (d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.88(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.25(s， 1H)， 10.0(s， 1H). + 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 311[M+H] .121H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 3.02(s， 3H)， 7.11(t， J＝ 7.5Hz， 1H)， 7.37(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.73(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.90(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.97(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 8.81(s， 1H)， 10.4(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 295[M-H]-， m/z 297[M+H]+. 131H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.41(s， 3H)， 4.93( 宽单峰， 2H)， 7.08(m， 2H)， 7.32(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.38(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.89(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.13(s， 1H)， 10.1(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 267[M+H]+， m/z ＝ 192[MH-Ph]+， m/z ＝ 174[MH-NHPh]+.
序号 14特征1H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.58(s， 3H)， 7.12(t， J＝ 8.0Hz， 1H)， 7.38(t， J ＝ 8.0Hz， 2H)， 7.58( 宽二重峰， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.69(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.85(d， J ＝ 8.0Hz， 2H)， 8.59(s， 1H)， 8.69( 宽 单峰， 1H)， 10.5(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 283[M]+. 151H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.90(s， 3H)， 7.11(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.36(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.69( 宽二重峰， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.84(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.89(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.70(s， 1H)， 9.04( 宽单峰， 1H)， 10.35(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 298[M-H]-， m/z 300[M+H]+. 161H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 3.36(s， 3H)， 7.11(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.35(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.78( 宽二重峰， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.89(m， 3H)， 8.75(s， 1H)， 9.39( 宽单峰， 1H)， 10.4(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 314[M-H] ， m/z 316[M+H]+.17H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 7.11(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.35(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.67( 宽单峰， 2H)， 7.69( 宽二重峰， J ＝ 9.5 Hz， 1H)， 7.86(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.89(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.73(s， 1H)， 9.26( 宽单峰， 1H)， 10.35(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 315[M-H]-， m/z 317[M+H]+.1118H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.50( 隐蔽的多重峰， 3H)， 7.11(t， J ＝ 7.5Hz， 1H)， 7.36(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.61( 宽二重峰， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.80( 宽四重峰， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 7.88(m， 3H)， 8.71(s， 1H)， 9.27( 宽单峰， 1H)， 10.4(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 329[M-H]-， m/z 331[M+H]+.191H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 2.74(s， 6H)， 7.11(t， J＝ 7.5Hz， 1H)， 7.36(t， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 7.58(dd， J ＝ 1.5 和 9.5Hz， 1H)， 7.82(d， J ＝ 9.5Hz， 1H)， 7.90(d， J ＝ 7.5Hz， 2H)， 8.69(s， 1H)， 9.30( 宽 单峰， 1H)， 10.35(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 343[M-H]-， m/z 345[M+H]+.
序号 20特征1H 核磁共振光谱 (DMSO-d6， δ， 以 ppm 表示 ) ： 0.27(s， 9H)， 7.12(t，J ＝ 7.7Hz， 1H)， 7.36(t， J ＝ 7.7Hz， 2H)， 7.47(dd， J ＝ 9.3， 1.5Hz， 1H)， 7.68 (d， J ＝ 9.3Hz， 1H)， 7.87( 宽二重峰， J ＝ 7.8Hz， 2H)， 8.54(s， 1H)， 9.02( 宽 单峰， 1H)， 10.41(s， 1H). 质谱 (LC-MS-DAD-ELSD) ： m/z 334[M+H]+.对本发明的化合物进行了药理学试验以测定其对 NOT 的调节作用。
对 N2A 细胞的体外活性评价
对本发明的化合物对细胞系 (N2A) 的活性进行了评价， 该细胞系内源性地表达鼠 类 Nurr1 受体并用 NOT 结合响应元件 (NBRE， NOT binding responseelement) 稳定转染， 该 NBRE 与萤光素酶报道基因 (luciferase reporter gene) 偶联。EC50 值在 0.01 和 1000nM 之间。该试验根据下述的方法进行。
Neuro-2A 细胞系来自标准商业来源 (ATCC)。Neuro-2A 克隆系由源自根据 R.J Klebe 等的白化体小鼠 A 系 (a strain of albino mice A) 的自生瘤 (spontaneous tumor) 得到。Neuro-2A 细胞系随后用 8NBRE- 萤光素酶稳定地转染。N2A-8NBRE 细胞在 75cm2 的培 养瓶中培养至融合， 该培养瓶含有补充有 10％胎牛血清、 4.5g/l 葡萄糖和 0.4mg/ml 遗传霉 素的 DMEM。培养一周后， 细胞用 0.25％胰蛋白酶复原 30 秒， 然后重新悬浮在无酚红的且含 有 4.5g/l 葡萄糖和 10％ Hyclone 脱脂血清的 DMEM 中， 并置于白色的、 底部透明的 96 孔板 中。在加入产物前， 75μl 的细胞以比例为每孔 60000 个细胞静置 24 小时。加入 25μl 产 物并再孵育 24 小时。 在测量当天， 向每个孔中加入等体积 (100μl) 的 Steadylite， 等候 30 分钟以得到细胞的完全溶解和信号的最大产生。在用粘性膜密封之后， 将细胞板在微量培 养板发光计数器上进行测量。产物以 10-2M 的储备液形式制备， 然后在 100％ DMSO 中稀释。 在与细胞一起孵育之前， 预先在培养液中稀释每种产物浓度， 因此含有终浓度为 0.625％的 DMSO。
例如， 编号 2、 14 和 16 的化合物分别显示了 1.6nM、 2nM 和 16nM 的 EC50 值。
因此， 根据本发明的化合物对 NOT 具有调节作用。
因此， 本发明的化合物可用于药物的制备， 该药物的治疗性应用是治疗或预防涉 及 NOT 受体的疾病。
因此， 根据另一方面， 本发明的一个主题是含有式 (I) 化合物或者其与药用酸的 加成盐的药物。
这些药物具有治疗性的用途， 特别是治疗和预防以下疾病 ： 神经变性疾病， 例如
帕金森病、 阿尔茨海默病、 tau 病变 ( 例如， 进行性核上性麻痹、 额颞痴呆、 皮质基底变性 (corticobasal degeneration)、 皮克病 ) ； 脑外伤 (cerebraltraumas)， 例如局部缺血和颅 创伤和癫痫 ； 精神病， 例如精神分裂症、 抑郁、 精神活性物质依赖 (substance dependence)、 注意力缺陷伴多动症 ； 中枢神经系统的炎性疾病， 例如多发性硬化症、 脑炎、 脊髓炎和脑脊 髓炎以及其它炎性疾病， 例如血管病状 (vascular pathology)、 动脉粥样硬化、 关节炎症 (jointinflammation)、 关节病、 类风湿性关节炎、 骨关节炎、 克罗恩病、 溃疡性结肠炎 ； 过敏 性炎性疾病， 例如哮喘、 自身免疫性疾病， 例如 I 型糖尿病、 狼疮、 硬皮病 (scleroderma)、 格 林 - 巴利综合征 (Guillain-Barrésyndrome)、 阿狄森 ( 氏 ) 综合征和其它免疫介导的疾病 ； 骨质疏松症 ； 癌症。
因此， 本发明涉及选自如前定义的式 (I) 化合物， 用于治疗或预防上述疾病之一。
根据具体的实施方案， 这些药物的用途是治疗或预防上述疾病之一， 不包括炎性 疾病。
根据另一方面， 本发明涉及选自如前定义的式 (I) 化合物在制备用于治疗或预防 以上提到的疾病之一的药物中的用途。
这些化合物也可用作移植物和 / 或干细胞移植术结合的疗法。
根据另一个方面， 本发明涉及药物组合物， 其含有作为活性成分的本发明的化合 物。这些药物组合物含有有效剂量的至少一种本发明的化合物， 或者所述化合物的其药用 盐， 和至少一种药用赋形剂。
根据药物形式和理想的给药方法， 所述的赋形剂选自本领域的技术人员所知的常 用赋形剂。
在用于口服、 舌下给药、 皮下给药、 肌内给药、 静脉内给药、 表面给药 (topical)、 局 部给药 (local)、 气管内给药、 鼻内给药、 经皮给药或者直肠给药的本发明药物组合物中， 上 述的式 (I) 的活性成分或者其盐， 可作为单位给药的形式给药， 作为与标准药物赋形剂的 混合物的形式给药， 给予人类和动物， 以用于预防或者治疗上述的症状或者疾病。
适当的单位给药形式包括口服给药形式， 例如片剂、 软胶囊剂或者硬胶囊剂、 粉末 剂、 颗粒剂和口服溶液剂或者混悬剂、 舌下给药、 口腔给药、 气管内给药、 眼内给药和鼻内给 药或者吸入给药形式， 表面给药、 经皮给药、 皮下给药、 肌内给药或者静脉内给药形式， 直肠 给药形式和埋植剂 (implant)。 对于表面给药， 根据本发明的化合物可在乳膏剂、 凝胶剂、 软 膏剂或者洗剂 (lotion) 中使用。
作为举例， 片剂形式的本发明化合物的单位给药形式可包括以下组分 ：
本发明的化合物 50.0mg
甘露醇 223.75mg
交联甲羧纤维素钠 6.0mg
玉米淀粉 15.0mg
羟丙基甲基纤维素 2.25mg
硬脂酸镁 3.0mg
对于特殊情况， 高剂量或者低剂量均适用 ； 这些剂量没有超出本发明的内容。 根据 常规实践， 适于每个患者的剂量由医生根据给药方法和所述的患者的体重和反应来确定。
根据另一方面， 本发明也涉及上面指出的用于治疗病状的方法， 该方法包括给予患者有效剂量的本发明化合物或者其药用盐。
可理解的是， 如上定义的本发明的所有主题， 特别是药物、 药物组合物和治疗方 法， 也更具体地适用如前定义的各亚组化合物。18