低分子柑橘果胶在排铅排重金属临床中的应用 技术领域 本发明涉及一种低分子柑桔果胶的新用途， 尤其涉及低分子柑桔果胶治疗和预防 铅及重金属中毒在制备的药品、 食品和保健品中的应用。
背景技术 天然柑桔果胶是一种多糖复合物 ( 长链碳水化合物 )， 也是一种膳食纤维。 它由天 然柑桔水果如柠檬、 柚子、 桔子和桔的果皮和果肉中提取获得。 这种多聚糖的长链产物有许 多分枝， 具有粘附功能。天然果胶是可溶性纤维， 食用后不能被肠道吸收。尽管有一些在大 肠内发酵， 但天然柑桔果胶一般对于人体没有非常有效的功用。
低分子柑桔果胶， 其结构式如下 ：
低分子柑桔果胶是从天然果胶产物中提取得到的一种以半乳糖为主要成份的多 糖， 分子量小， 无抗原性， 水溶性好， 容易被胃肠道吸收而进入血液循环。 处理后的果胶分子 量明显小于天然果胶， 分子结构也因甲基减少得到改变。 它具有与恶性表型细胞亲和， 粘附 特性， 特异地杀伤已突变细胞的功能， 使突变 细胞在未形成之前即被清除。这种较小的多 糖基团还能够紧紧地结合在癌细胞膜表面上能与半乳糖结合的特定部位， 形成一种特异的 复合体， 并阻止突变细胞间的聚集及突变细胞粘附到邻近的细胞和组织。
申请人申请了专利名称为 ： 低分子柑桔果胶用于增强免疫功能的应用 ( 专利申请 号为 200610050803.3) 公开了低分子柑桔果胶能明显改善食欲， 增加免疫功能和调节免疫 紊乱 ； 能降低胆固醇预防动脉粥样硬化。
专利名称为 ： 低分子柑桔果胶用于调节血糖血脂和改善脂肪肝中的应用 (200610051667.X) 公开了低分子柑桔果胶可延缓糖和脂肪在消化道内的吸收， 影响胆酸的 代谢， 间接改变了脂质代谢酶的活性， 还能促进糖和脂肪在体内的代谢， 从而降低血糖和血 脂， 在吸收而进入血液循环后， 能在体内促进肝脏及其它器官中的糖和脂肪分解酶的活性， 并降低肝脏及其它器官中的糖和脂肪合成酶的活性， 从而达到降低血糖和血脂、 治疗糖尿 病和脂肪肝的目的。
发明内容
为了进一步开发低分子柑桔果胶的用途， 本发明的目的是提供低分子柑桔果胶的新应用。 具体的说， 本发明的第一个目的是提供低分子柑桔果胶用于制备排重金属元素的 药品中的应用。
尤其涉及的重金属元素为铜、 锌、 铁、 钴、 镍、 锰、 镉、 汞、 钨、 钼、 金、 银、 砷和铅中一 种或多种。
最为有效的重金属元素为铅、 砷、 汞和镉中一种或多种。
具体的说， 本发明的第二个目的是提供低分子柑桔果胶用于制备排重金属的保健 品中的应用。
尤其涉及的重金属元素为铜、 锌、 铁、 钴、 镍、 锰、 镉、 汞、 钨、 钼、 金、 银、 砷和铅中一 种或多种。
最为有效的重金属元素为铅、 砷、 汞和镉中一种或多种。
具体的说， 本发明的第三个目的是提供低分子柑桔果胶用于制备排重金属的食品 中的应用。
尤其涉及的重金属元素为铜、 锌、 铁、 钴、 镍、 锰、 镉、 汞、 钨、 钼、 金、 银、 砷和铅中一 种或多种。
最为有效的重金属元素为铅、 砷、 汞和镉中一种或多种。
低分子柑桔果胶柑橘是一种可溶性膳食纤维半乳糖醛酸组成的复合体， 这种多糖 衍生物作为金属离子吸附剂 ( 鳌合剂 )、 对重金属离子有很好的吸附作用， 可以去除 Zn2+、 Cu2+、 Cd2+、 Ag+、 Cr3+、 Ni2+、 Hg2+、 Pb2+ 等重金属离子。本发明低分子柑桔果胶最大的优势是它 同一般化学螯合剂不一样， 经过动物和临床实验证实是在排毒素时除铅， 汞， 砷， 排出体外， 而不会影响其他如钙， 镁， 锌或矿物质的关键水平。 它的自然螯合功能是目前最理想最成功 的解决重金属在体内污染方案。 因此， 具有预防多种疾病功能， 特别对有害细胞清除和体内 毒素的排除有特殊功能。
附图说明
图 1 为 5-12 岁住院儿童低分子柑桔果胶治疗 (5 克 / 次， 3 次 / 天 ) 前， 后血清铅 浓度测量 ( 微克 / 分升 . 石墨炉原子吸收法 )。
图 2 为 5-12 岁住院儿童低分子柑桔果胶治疗 (5 克 / 次， 3 次 / 天 ) 前， 后 24 小时 尿铅排泄量水平 ( 微克 / 分升 )。
图 3 为 5-12 岁儿童接受 15 克 / 天 MCP 治疗 2-4 周后测量血清中铅和 24 小时尿 中排泄的铅的平均时变化百分比 (n ＝ 7)。
图 4 为 HPAEC-PAD 在甲醇后的 MCP 单糖分析。从分析得到的单糖相对量 的计算 ( 摩尔％ ) 分别为半乳糖 6.6％， 鼠李糖 2.2％， 阿拉伯糖 1.3％， 木糖 0.5％， 葡萄糖 0.3％， 岩藻糖 0.1％， 半乳糖醛酸 88.2％， 和葡萄糖醛酸 0.4％。肌醇是作为一个内部标准。
图 5 为第一天尿中元素排泄结果 ( 从 0 天开始的百分比改变 )。
图 6 为第七天尿中元素排泄结果 ( 从 0 天开始的百分比改变 )。具体实施方式
下面结合附图对本发明的具体实施方式做一个详细的说明。
实施例 1
铅中毒是一项全球持续关注的问题， 儿童最容易受到铅暴露的长期影响， 迫切需 要一个安全和有效的重金属螯合剂来克服重金属和铅接触， 即他们每天所面对的挑战。
目的 1 ： 本临床研究以确定是否用低分子柑桔果胶口服可以有效地降低 5 至 12 岁 的儿童血液中铅毒性。
方法 ： 由石墨炉原子吸收光谱法测定血清铅水平高于 20 微克 / 分升的住院儿童， 前 3 个月内没有给予任何螯合和 / 或解毒药物， 每天 15 克的低分子柑桔果胶， 分 3 次给予。 收集第 0 天， 14 天， 21 天， 与 28 天的血清和 24 小时尿液进行石墨炉原子吸收分析。
结果 ： 本研究显示， 血清铅的水平 (P ＝ 0.0016 急剧下降 ； 平均改变达 161％， 24 小 时收集的尿液中的铅显著增加 (P ＝ 0.0007 ； 平均增加 132％ )。
结论 ： 需要有一个温和， 安全的重金属螯合剂， 特别是对长期环境中高强度接触重 金属的儿童， 十分重要。低分子柑桔果胶应用安全和有效的显著结果， 并没有不良反应， 与 以前用在成人的报告中观察到的无不良反应一起， 表明低分子柑桔果胶可以成为这样的一 个制剂。进一步的研究有待来确认它的好处是 合理的。
材料与方法
这项研究是在中国， 杭州， 浙江大学儿童医院进行。符合研究标准的 7 名患者进入 本研究。所有患者血铅浓度均＞ 20 微克 / 分升， 3 个月内没有事先用过任何螯合剂和 / 或 解毒剂。父 / 母或每个孩子监护人签署知情同意书， 参与这个开放标记临床医院监督的研 究试验。
患者接受每天 15 克的低分子柑桔果胶， 分 3 次服用。观察＝ k- 期 b 间的 3 个月 内没有其他任何螯合或解毒剂同时应用。血铅浓度和 24 小时周期的总尿铅排泄量以石墨 炉原子吸收。
光谱 (GFAAS) 来测定 ； 在低分子柑桔果胶开始应用前为第 0 天， 之后每周一次直到 病人正常后出院。其中两名病人 2 周后出院 ； 3 名病人 3 周后出院 ； 2 名 4 周后出院， 出院病 人的血铅水平＜ 20 微克 / 分升。
患者住院期间， 评价治疗过程， 包括主观症状 ： 表现症状的恶化或改善， 发生任何 新的症状 ；
包括潜在的不良反应， 如头痛， 腹泻， 返流或其它肠胃不适， 心悸， 或液体滞留。采 取一般血液分析和监测不良反应 ； 结果不包括在本报告， 因没有发现不正常的结果。 在这孩 子们研究中， 根据他们的条件， 没有给任何特殊饮食。 用甲醇高效阴离子交换色谱法和脉冲 安培检测 (HPAECPAD) 进行 MCP 单糖的分析。用戴安 DX-500 系统 ( 戴安公司， 桑尼维尔， 加 利福尼亚 )， 其中包括 CarboPac 的 PA-20 柱， 以 0.5 毫升 / 分钟进行。中性和酸性单糖分离 通过单次使用流动相运行， 以 14mM 的氢氧化钠平衡 13 分钟， 然后在 0-120mM 的醋酸钠梯度 为 100mM 的氢氧化钠运行 30 分钟。该流动相在下次注射前返回到 14mM 氢氧化钠 40 分钟。 其它条件与以前的报道相同。
结果
表 1 总结了在用低分子柑桔果胶治疗前及后的血液铅浓度。所有 7 个病人血液中的铅显著减少。
图 1 显示了在治疗过程中血液铅浓度在 0 天测量和排泄的高峰期的变化。采用配 对样本用均值进行统计分析发现差异非常显着 (P ＝ .0016)。
表 2 总结病人治疗过程中从第 0 天测量至排泄的高峰期 24 小时总尿铅排泄量及 排泄的高峰。
图 2 显示了在治疗时从第 0 天起 24 小时尿排泄量变化。采用均值配对样本统计 分析 发现具有非常显著意义 (p ＝ .0007)。无不良反应报告。3 个 5 岁以下 (2.5-3.5 岁 ) 用低分子柑桔果胶治疗， 但不包括在这项研究， 因为他们在年龄标准之外。他们有类似 的结果， 也没有不良反应报告。
图 3 显示病人组在血液和 24 小时收集的尿液的铅含量平均百分比变化。
图 4 显示了单糖色谱分析， 表明低分子柑桔果胶组成 88.2％的半乳糖醛酸。其它 低分子柑桔果胶单糖的低分子量， 去分支， 流低脂化度和低鼠季糖 II(10％ ) 与 M 以前报道 的果胶结构相一致。
表 1 血清铅浓度数据
表 2 尿 24 小时铅排泄数据综上所述， 本发明的低分子柑桔果胶是一种可溶性纤维， 采用最现代酶降解技术 获得小分子结构， 直接进入人体血液循环， 排铅效果好、 速度快。 能有效降低血铅， 并驱除骨 骼及组织中的铅， 阻止铅吸收。高度选择性。只排除铅等有害重金属离子， 而不影响人体有 益金属离子的吸收代谢。
实施例 2
本临床研究以确定是否用低分子柑桔果胶口服可以有效地降低成人尿液中的重 金属毒性。
1 低分子柑桔果胶对尿中有毒元素排泄的影响 ：
方法 ：
10 个病人， 每天摄入 15 克低分子柑桔果胶， 为期 7 天， 第 8 天给 20 克
24 小时收集尿液样本测量 ： 第 0 天开始第 1 天， 第 7 天。
用电感耦合等离子体质谱仪 (ICP-MS) 分析下列元素 ： 钙， 镁， 锌， 铝， 砷， 镉， 钙， 汞 和铅。
结果 ；
如图 5 所示， 第一个 24 小时尿砷排泄显着增加 ( 超过平均基线 (0 天 ) 的 35％ ； p ＜ 0.05)， 汞和镉的排泄显著 (55％和 135％ ； p ＜ 0.1)
如图 6 所示， 第 8 天， 镉排泄显着增加 (45％， p ＜ 0.05)。此外， 铅的排泄， 显示非 常显着增加 (426％， P ＝ 0.05)
钙， 镁， 铁， 硒， 锌元素， 无显着变化。
实施例 3 低分子柑橘果胶对长期身体内汞负担的影响
方法 ：
人体临床试验研究 8 例患者
身体总汞量基准测定是使用二巯基 -1- 丙磺酸 ( 二巯丙磺 ) 选择的方法。
低分子柑橘果胶每天口服剂量为 15 克， 经低分子柑橘果胶治疗后用相同的二巯丙磺选择法测定身体总汞量。 结果 ：每天摄入 15 克柑橘果胶表说明 ：低分子柑橘果胶治疗后降低体内汞含量的结果总结
所有受试者表现出汞含量显着下降。 平均跌幅为 72.17％， 范围 38.13％ -84.83％ (P ＝ 0.0313)， 没有任何的副作用。