一种含有青刺果油的功效性护肤品及制备方法 技术领域 本发明涉及一种护肤品及其制备方法， 特别是涉及一种含有青刺果油并能辅助治 疗与皮肤屏障受损相关皮肤病的功效性护肤品及其制备方法。
背景技术 近年来以天然成分为主要配方的化妆品、 护肤品逐渐受到关注和喜爱， 不断开发 新的天然成分护肤品， 使其达到更好的美肤、 护肤效果， 已成为本领域当前的重要研究课 题。
此外， 目前对护肤品的使用已不局限于美肤、 护肤领域， 还延伸至一些皮肤病的辅 助治疗领域。以与皮肤屏障受损相关的皮肤病为例来说， 这是皮肤科临床上最常见的一类 皮肤病， 如： 敏感性皮肤、 化妆品皮炎、 激素依赖性皮炎、 痤疮、 黄褐斑、 特应性皮炎等皮肤 病， 严重影响患者的身心健康。现有技术多通过外用糖皮质激素或免疫调节剂治疗该类皮 肤病， 但这些药物都有一定的副作用， 例如， 长时间使用糖皮质激素可导致皮肤萎缩、 色素 沉着等皮肤问题。同时， 由于这些皮肤病都存在皮肤屏障受损的情况， 因此， 目前临床上多 采用药物及具有功效性、 安全性的护肤品联合治疗这类皮肤病， 不仅可降低药物的副作用， 同时还可修复受损的皮肤屏障。
青刺果 (Prinsepi autilis Royle ) 是一种木本油料植物， 盛产于云南丽江海拔 二千米以上无污染地带。青刺果仁经过机械压榨法可得含油率 40% 以上的青刺果油， 其中 不饱和脂肪酸占油脂总量 70% 以上， 如： 油酸、 亚油酸、 棕榈酸、 棕榈烯酸、 硬脂酸、 α- 亚麻 酸、 γ- 亚麻酸等， 并含有 A、 D、 E、 K 等多种维生素， 由于其所含脂肪酸含量及比例与人表皮 脂质含量接近， 因此， 青刺果油具有良好的保湿作用。 如何能创设一种纯天然、 无副作用， 具有多重护肤效果， 并可辅助治疗与皮肤屏障受损 相关皮肤病的含有青刺果油功效性护肤品及其制备方法， 是本领域的重要研究课题之一。
发明内容
本发明的目的是提供一种含有青刺果油的功效性护肤品， 使其具有纯天然、 无副 作用的优点， 同时具有多重护肤效果， 并可辅助治疗与皮肤屏障受损相关的皮肤病。
本发明的含有青刺果油的功效性护肤品的原料重量份组分为 ： 青刺果油 1 ～ 2 份、 马齿苋提取液 10 ～ 25 份、 甘油 5 份、 1， 2- 戊二醇 2 ～ 3 份、 辛酸 / 癸酸甘油三酯 5 ～ 7 份、 合成角鲨烷 2 份、 生育酚乙酸酯 1 ～ 5 份、 鲸蜡硬脂醇 1 ～ 3 份、 尿囊素 0.1 ～ 0.2 份、 椰油 基葡糖苷 0.6 ～ 0.9 份、 椰油醇 0.5 ～ 1 份、 甘油硬脂酸酯 0.5 ～ 2 份、 透明质酸钠 0.1 ～ 1 份， 去离子水加至于 100 份。
制备上述含有青刺果油功效性护肤品的方法， 包括以下步骤 ： 将 A 组组分加入水 锅中， 并加热至 75 ～ 80℃ ； 将 B 组组分加入油锅中， 并加热至 75 ～ 80℃ ； 将 A 组溶液与 B 组溶液在乳化锅中混合， 并均质乳化 10min ； 将上述乳液降温至 40℃， 加入 C 组分， 搅拌 10min 后出料、 静置、 灌装、 包装。其中 ： A 组分为 ： 去离子水、 甘油、 尿囊素 ； B 组分为 ： 青刺果油、 辛酸 / 癸酸甘油三酯、 合成角鲨烷、 生育酚乙酸酯、 鲸蜡硬脂醇、 椰 油基葡糖苷、 椰油醇、 甘油硬脂酸酯 ； C 组分为 ： 马齿苋提取液、 1， 2- 戊二醇、 透明质酸钠。
本发明通过体外、 体内实验， 探讨青刺果油保湿机制， 并确定青刺果油添加到护肤 品中的浓度为 1%， 使护肤产品质地温和、 安全性好、 无毒副反应、 无过敏反应、 可提高酸性 神经酰胺酶、 透明质酸酶 -3 的表达， 从而增加角质形成细胞分泌神经酰胺及透明质酸的含 量， 可修复受损的皮肤屏障， 经临床研究发现， 具有恢复皮肤屏障、 抗炎症、 抗皮肤老化的功 效， 可辅助治疗激素依赖性皮炎、 敏感性皮肤病、 特应性皮炎、 痤疮等与皮肤屏障受损相关 的皮肤病具有良好的疗效及安全性。 附图说明
以下结合附图与具体实施方式对本发明作进一步的详细说明。
图 1 是本发明含有青刺果油的护肤品的制备方法的工艺流程示意图。
图 2 是马齿苋提取液提取分离流程图。具体实施方式
实施例 1-4 的配方为下表 （单位为重量份）制备上述含有青刺果油的护肤品的方法 ： 将 A 组组分加入水锅中， 并加热至 75 ～ 80℃；将 B 组组分加入油锅中， 并加热至 75 ～ 80℃； 将 A 组溶液与 B 组溶液在乳化锅中混合， 并均 质乳化 10min ； 将上述乳液降温至 40℃，加入 C 组分，搅拌 10min 后出料、 静置 36 小时、 灌 装、 包装。最后制备出白色到淡黄棕色膏体， 膏体细腻， 均匀一致。检测项目为外观、 气味、 耐热、 耐寒、 PH 值、 微生物检测、 参照标准及方式详见薇诺娜膏霜系列待包装品质量规格标 准 (H-TS-ZL-0357)。
马齿苋提取液提取方法 ： 植物来源 ： 马齿苋， 属于马齿苋科、 马齿苋属 （Portulaca oleracea L） ， 别名 ： 马苋， 五 行草， 长命菜， 五方草， 瓜子菜， 麻绳菜， 马齿菜， 马生菜。
马齿苋药材用 75% 乙醇回流提取， 提取液过滤、 浓缩， 滤液用 ADS-7 大孔树脂过滤， 经水洗， 水洗脱液经浓缩、 结晶、 过滤、 干燥得到马齿苋结晶物， 将马齿苋结晶物按 1% 比例 （w/l） ， 用纯化水溶解， 过滤， 得马齿苋提取液。
用 1% 浓度青刺果油进行体外实验， 探讨青刺果油保湿机制 ： 培养人角质形成细 胞， 设对照组及实验组， 对照组不加青刺果油， 实验组加入 1% 青刺果油， 分别于 0h、 3h、 8h、 24h、 48h 取实验组及对照组的上清液， 用 ELISA 方法测定上清液中 Cer、 HA 含量， 相关数据 进行独立样本 t 检验， P<0.05 有显著性差异。
实验结果 ： 神经酰胺 （Ceramide， Cer） 含量 ： 实验组中 0h、 3h、 8h、 24h 及 48h Cer 含量分别为 ： 0.7630±0.143、 0.9007±0.037、 0.9260±0.003、 1.3817±0.100、 1.3737±0.047， 随时间 增加含量也增加， 24h 及 48h 的含量与 0h 比较， 差异有显著性 （P<0.05） ； 实验组与对照组比 较， Cer 含量高于对照组， 24h、 48h 时有显著性差异 （P<0.05） 。
透明质酸 （HA）含 量 ： 实 验 组 0h、 3h、 8h、 24h 及 48h HA 含 量 分 别 为 ：0.1357±0.009、 0.2120±0.012、 0.3680±0.039、 0.4630±0.043、 0.5530±0.039， 随时间 增加， HA 含量也逐渐增加， 3h、 8h、 24h、 48h 的含量与 0h 比较， 差异有显著性 （P<0.05） ； 实验 组与对照组比较， 3h、 8h、 24h、 48h HA 含量均明显高于对照组， 差异有显著性 （P<0.05） 。 通过体外实验， 证实 1% 青刺果油可促进角质形成细胞分泌神经酰胺、 透明质酸， 增加了表皮神经酰胺、 透明质酸的含量， 达到保湿作用。
本发明通过体内实验 （动物实验） ， 明确青刺果油添加到护肤品中的浓度 ： 用丙酮 及乙醚破坏裸鼠表皮屏障， 分为四区 （受试区 1、 受试区 2、 基质区、 空白对照区） ， 受试区 1、 受试区 2 分别用含有 1%、 2% 青刺果油浓度的护肤品涂搽， 基质区涂搽不含青刺果油的乳剂， 并设空白对照区， 分别于 0h、 1 天、 3 天、 7 天测定裸鼠皮肤经表皮水分流失 (TEWL)、 皮脂含 量及水分含量， 同时取裸鼠皮肤组织， 用免疫组化方法观察酸性神经酰胺酶 （ASH1） 表达， RT-PCR 测定组织中透明质酸酶 -3（HAS-3） 表达， 无创性皮肤测试结果采用独立样本 t 检 验进行数据分析， P<0.05 为有统计学差异 ； 免疫组化实验结果进行两独立样本等级资料的 Wann-Whitney 秩和检验， P<0.05 为有统计学差异 ； RT-PCR 实验结果采用相对定量分析法， 界定差异倍数 >2 或 <0.5 为基因转录有差异。
无创性皮肤测定结果显示 ：
TEWL（皮肤水分流失测试仪） ： 随时间增加， 四区 TEWL 值逐渐减少， 受试区 1 及受试 区 2 的 TEWL 值 3d、 7d 时与 0d 比较， 有显著性差异 （P<0.05） 。同一时间四区 TEWL 值比较，7d 时， 受试区 1、 受试区 2 的 TEWL 值较基质区及空白对照区低， 差异有显著性 （P<0.05） ， 但 两受试区之间无明显差异 （P>0.05） 。
水分含量 ： 随时间增加， 四区水分含量均有所增加， 受试区 1、 2 在 1d、 3d、 7d 的水分含量与 0d 比较， 均有显著性差异 （P<0.05） ； 7d 时， 受试区 1、 2 的水分含量较基质区及 空白对照区高， 差异有显著性 （P<0.05） ， 两受试区之间无明显差异 (P>0.05)。
皮脂含量 ： 随时间增加， 四区皮脂含量逐渐增加， 受试区 1 在 3d、 7d 时的皮脂含量与 0d 比较， 有显著性差异 （P<0.05） ； 受试区 2 在 7d 时的皮脂含量与 0d 比较， 也有显著 性差异 （P<0.05） ； 7d 时， 受试区 1、 2 的皮脂含量较基质区及空白对照区高， 差异有显著性 （P<0.05） ， 但两受试区之间无明显差异 (P>0.05)。
免疫组化实验结果显示 ： 受试区 1、 受试区 2、 基质区及空白对照区 ASH1 的表达 7d 较 0d 高， 差异有显著性 （P<0.05） ； 7 天时受试区 1、 2 的表达较基质区及空白对照区高， 差异有显著性 （P<0.05） ， 但 受试区 1 和 2 之间无明显差异 (P>0.05)。
RT-PCR 实验结果显示 ： 受试区 1 ： HAS-3 表达水平明显升高， 与基质区比较， 在 3d、 7d 时， HAS-3 表达明显高于基质区 ； 与空白对照区比较， 在 1d、 3d、 7d 时，HAS-3 表达明显高于空白对照区。
受试区 2 ： HAS-3 表达 1d 明显高于 0d， 然后降低， 与基质组比较， 在 1d、 3d、 7d时， HAS-3 表达均明显低于基质区 ； 与空白对照区比较，HAS-3 表达 3d、 7d 则明显低于空白 对照区。 结果显示， 含 1% 及 2% 青刺果油可上调裸鼠表皮 ASH1、 HAS-3 的表达， 从而增加表 皮神经酰胺、 透明质酸的合成， 具有保湿功效， 两者的保湿功效相当， 但由于青刺果油含有 多量脂肪酸， 不宜保存， 因此， 选择 1% 青刺果油为添加到护肤品中的适宜浓度。
用实施例 1 于对抗皮肤老化， 青刺果油具有保湿和皮肤再生修复作用， 同时具有 皮肤渗透能力， 帮助皮肤胶原纤维的重组和生成， 增加皮肤弹性、 紧致肌肤、 淡化细纹。
用实施例 2 于激素依赖性皮炎、 敏感性皮肤病、 痤疮导致的皮损， 增加透明质酸、 马齿苋提取液配比， 在透明质酸、 马齿苋提取液配合青刺果油下， 舒缓皮肤敏感性、 深层保 湿， 为皮肤补充水份。 （乳剂） 敏感性皮肤病、 痤疮导致的皮损， 增加生育酚乙酸酯比 用实施例 3 于激素依赖性皮炎、 例， 生育酚乙酸酯配合青刺果油， 在舒缓皮肤敏感性的同时， 为皮肤提供较为丰富的脂质成 分， 恢复皮肤屏障、 深层保湿， 为皮肤补充水份。 （霜剂） 用实施例 4 于特应性皮炎， 增加透明质酸成分， 配合青刺果油， 多重保湿滋养精华， 多 效保湿， 共同作用， 帮助恢复皮肤屏障， 持久的滋养和舒缓异常干燥的皮肤。
采用多中心、 随机治疗前后对照的临床试验方法， 以实施例 1 制备的含有青刺果 油的功效性护肤品辅助治疗皮肤老化的临床实验。
抗皮肤老化临床试验 ： 经医师临床诊断筛选出 93 名具有皮肤老化特征的受试者，
以本发明实施例 1 护肤品均匀涂抹于面部， 每日 2 次， 连续使用 3 个月后评估并受试者皮肤 老化程改善程度， 并采用无创性皮肤测试仪在治疗前、 治疗后 30 天、 60 天、 90 天分别对受试 者皮肤进行皮肤生理功能测试进行评估。受试者使用本发明护肤品后， 受试部位的皮肤老 化程度得到改善。用 Moisture Meter-SC 对 40 例受试者进行角质层水分检测， 数据呈正态 分布， 符合方差齐性， 用单因素方差分析， F=6.040， p<0.01（p=0.003） 。以 LSD 法与 90 天 角质层水分组相比， 30 天、 60 天角质层水分均有统计学差异。其中 90 天角质层水分数据最 大。
表： 本发明护肤品对皮肤老化程度改善的评估采用多中心、 随机治疗前后对照的临床试验方法， 以实施例 2 制备的含有青刺果油的 功效性护肤品辅助治疗油性敏感性皮肤， 以实施例 3 制备的含有青刺果油的功效性护肤品 辅助治疗干性敏感性皮肤的临床实验。
敏感性皮肤 ： 选取 110 名敏感性皮肤受试者， 其中， 干、 中性敏感性皮肤受试者 80 例、 油性敏感性皮肤受试者 30 例， 油性敏感性皮肤受试者及干、 中性敏感性皮肤受试者分 别将实施例 2 及实施例 3 护肤品均匀涂抹于面部， 每日 2 次， 连续使用 1 个月， 并采用无创性 皮肤测试仪在治疗前、 治疗后 7 天、 15 天、 30 天分别对受试者皮肤进行皮肤生理功能测试、 同时对乳酸试验、 皮损恢复情况、 受试者对该产品的满意度及安全性进行评价。治疗 30 天 后， 干、 中性敏感性皮肤组水分含量提高 4.14%， 油脂含量提高 21.1%， 油性皮肤组水分含量 平均提高 4.36%， 油脂含量平均下降 9.7%， 治疗前后比较， p<0.001, 具有统计学意义， 而弹 性比较无统计学意义 ； 乳酸试验阳性率从 100% 降至 9%， p<0.001, 具有统计学意义 ； 皮损改 善者 87 人， 占 79.09% ； p ＜ 0.001， 具有统计学意义 ； 患者对该产品的满意度达 68.18%。实 验未出现任何不良反应。 从而证实本发明含有青刺果油的护肤品对敏感性皮肤有辅助治疗 作用， 能恢复皮肤屏障功能， 安全性好， 值得临床推广应用。
表： 干性、 中性皮肤各参数值观察 n=80 p<0.05监测项目 水分 治疗前后 p 值 油脂 治疗前后 p 值 弹性 治疗前后 p 值 皮肤程度 治疗前后 p 值 乳酸试验 治疗前后 p 值 治疗前 71.53±3.34 74.30±29.19 0.7686±0.0935 2.38±0.72 3.79±0.83 治疗 7 日 72.21±3.06 0.001 74.19±21.71 0.956 0.7869±0.0955 0.170 2.11±0.71 ＜ 0.001 3.01±0.75 ＜ 0.001 治疗 15 日 72.72±2.74 ＜ 0.001 79.36±17.05 0.025 0.7903±0.0883 0.102 1.54±0.67 ＜ 0.001 2.12±0.9 ＜ 0.001 治疗 30 日 74.49±2.87 ＜ 0.001 90.01±11.45 ＜ 0.001 0.7932±0.0802 0.054 1.31±0.63 ＜ 0.001 1.75±0.75 ＜ 0.0017102406576 A CN 102406578说治疗前 71.95±2.34 247.13±41.90 0.8382±0.0957 2.2±0.89 3.06±0.45明书治疗 15 日 73.28±2.05 ＜ 0.001 232.83±40.96 ＜ 0.001 0.7963±0.0890 0.052 1.67±0.80 ＜ 0.001 2.76±0.43 0.017 治疗 30 日 75.09±1.67 ＜ 0.001 223.23±40.19 ＜ 0.001 0.7949±0.0921 0.051 1.07±0.69 ＜ 0.001 1.60±0.5 ＜ 0.0016/7 页表： 油性皮肤各参数值观察 n=30监测项目 水分 治疗前后 p 值 油脂 治疗前后 p 值 弹性 治疗前后 p 值 皮肤程度 治疗前后 p 值 乳酸试验 治疗前后 p 值p<0.05治疗 7 日 72.59±1.93 0.004 240.36±39.36 ＜ 0.001 0.7970±0.0888 0.056 2.03±0.72 0.134 3.0±0.26 0.161采用多中心、 随机治疗前后对照的临床试验方法， 以实施例 4 制备的含有青刺果油的 功效性护肤品辅助治疗特应性皮炎的临床实验。
特应性皮炎 ： 入选患者 40 例 , 受试者取左右对称部位皮疹作为靶皮损观察， 受试 侧使用本发明实施例 4 护肤品， 对照侧不使用任何治疗药物， 于用药后 3 天， 7 天， 14 天分 别回访， 由研究者和患者对皮损、 干燥度及主观症状评分， 评价该保湿剂的临床疗效和安全 性。结果显示 ： 研究者评价， 用药 3 天后， 两组患者受试侧和对照侧靶皮损总评分无显著性 差异 (P>0.05)， 但干燥度评分有显著性差异 （P<0.05） ； 用药 7 天后， 两组皮损总评分有显著 性差异 (P<0.05) ； 用药 14 天后， 两组皮损评分情况有显著差异 (P<0.01), 其中以红斑和干 燥度的评价下降最为明显 （p<0.01） ， 浸润肥厚的皮损改善不明显 (P<0.05)。患者评价皮肤 干燥度和脱屑的改善最为显著， 用药 3 天后两组比较有显著性差异 (P<0.05)， 用药 14 天后 两组比较有显著性差异 （P<0.01） 。用药 14 天后红斑有明显改善 (P<0.01)。用药 3 天， 7天 后， 瘙痒均无明显改善 (P>0.05)， 用药 14 天后， 瘙痒改善两组比较有显著性差异 (P<0.05)。 用药 7 天、 14 天后， 两组皮损总评分有显著性差异 (P<0.05， P<0.01)。
表： 研究者对受试侧与对照侧靶皮损评分改善评估 （x±s 分）表： 患者对自身体征和自觉症状评分改善的评估 （x±s 分）通过以上动物及临床实验证实， 本发明含有青刺果油的护肤品具有恢复皮肤屏障、 保 湿、 抗老化等功能， 并在辅助治疗皮肤老化、 敏感性皮肤、 面部皮炎、 特应性皮炎等与皮肤屏 障受损相关的皮肤病方面具有良好的疗效。