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1、(10)申请公布号 CN 103145678 A (43)申请公布日 2013.06.12 CN 103145678 A *CN103145678A* (21)申请号 201310060291.9 (22)申请日 2013.02.27 C07D 311/62(2006.01) (71)申请人 何诚慧 地址 730030 甘肃省兰州市城关区伏龙坪前 街 112 号 (72)发明人 何诚慧 (54) 发明名称 一种萃取植物花青素的方法 (57) 摘要 本发明公开一种萃取植物花青素的方法， 涉 及一种花色素的制备方法， 属于分析化学领域。 其特征在于 ： 处理步骤包括 ： 加样、 混合萃取剂和 分散。
2、剂、 振荡形成乳浊体系、 离心分离、 吸取有机 相直接进行 HPLC 分析。本发明的方法富集能力 高， 操作简单， 有机溶剂用量少和萃取时间短， 集 采样、 萃取和浓缩于一体的同时， 避免了固相微 萃取中可能存在的交叉污染的问题， 是一种简单、 快速、 成本低、 高效且环境友好的样品前处理新技 术， 在痕量分析领域具有广泛的应用前景。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 3 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 (10)申请公布号 CN 103145678 A CN 103145678 A *CN103145678A* 1/。
3、1 页 2 1. 一种萃取植物花青素的方法， 其特征在于 ： 用 60 90% 的有机溶剂提取粉碎的葡萄 籽， 然后再在不高于 80 85的条件下， 在真空度 0.06 0.09Mpa 下减压蒸发得粗提取 物。 2. 如权利要求 1 所述一种萃取植物花青素的方法， 其特征在于 ： 在 1OmL 带塞的尖底离 心管中， 加入 5.OmL 粗提取物和 0.375g NaCl， 所述粗提取物的 pH 为 4.0 ； 预先将 50.0uL 萃 取剂三氯甲烷和 1.OmL 分散剂丙酮混匀。 3. 如权利要求 1 所述一种萃取植物花青素的方法， 其特征在于 ： 用 2.OmL 注射器吸取 步骤二的混合液，。
4、 迅速注射入步骤一装有粗提取物和0.375g NaCl的尖底离心管中， 轻轻振 荡， 形成乳浊体系 ； 将离心试管以 4500r min 离心 3min。 4. 如权利要求 1 所述一种萃取植物花青素的方法， 其特征在于 ： 所述有机溶剂为乙醇、 丙酮、 甲醇、 丙醇、 异丙醇、 乙酸乙酯。 权 利 要 求 书 CN 103145678 A 2 1/3 页 3 一种萃取植物花青素的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种花色素的制备方法， 属于分析化学领域， 具体地说是一种萃取植 物花青素的方法。 背景技术 0002 花青素 (Anthocyanidin)， 又称花色素， 是自然界一类广泛存在。
5、于植物中的水溶性 天然色素， 属类黄酮化合物。 也是植物花瓣中的主要呈色物质， 水果、 蔬菜、 花卉等五彩缤纷 的颜色大部分与之有关。花青素存在于植物细胞的液泡中， 可由叶绿素转化而来。在植物 细胞液泡不同的 pH 值条件下， 使花瓣呈现五彩缤纷的颜色。秋天可溶糖增多， 细胞为酸性， 在酸性条件下呈红色或紫色， 所以花瓣呈红、 紫色是花青素作用， 其颜色的深浅与花青素的 含量呈正相关性， 可用分光光度计快速测定， 在碱性条件下呈蓝色。 花青素的颜色受许多因 子的影响， 低温、 缺氧和缺磷等不良环境也会促进花青素的形成和积累。 目前食品工业上所用的色素多为合成色素， 几乎都有不同程度的毒性， 长。
6、期使用会危 害人的健康， 因此天然色素就越来越引起了科研领域的关注 ： 由于至今国内市场上还没有 花青素纯品， 所以提取高纯度的花青素对花色苷类色素的深入研究与开发提供必备的表征 条件和理论依据， 并且有助于它的工业利用。 由于没有市场还没有出现花青素纯品， 因此需 要摄入花青素， 那么目前只能通过食补的方式了， 譬如食用 ： 黑枸杞、 黑土豆、 紫番薯、 紫山 药、 蓝莓、 草莓、 葡萄、 紫玉米等获得。 0003 花色素的现有的制备工艺为 ： 用水、 稀乙醇、 稀丙酮提取， 提取液减压浓缩、 过滤或 离心除去水不溶杂志后得到水溶液， 该水溶液因含有大量的水溶性杂质， 需要精制。 上述制 备。
7、工艺中， 精制用溶剂萃取， 存在下列缺点 ： 花色素在与水不相溶的溶剂中溶解度较低， 所 以得率较低 ； 等。 因此， 发展高效、 稳定、 低成本且环境友好的提取新技术仍是亟待解决的问 题。 0004 分散液液微萃取(Dispersive Liquid-liquid Microextraction， DLLME)于2006 年首次提出， 是一种新型的样品预处理技术。 DLLME结合了LLE和SPME的特点， 所需有机溶 剂少， 操作单快速， 集萃取、 纯化、 浓缩于一体， 回收率高， 富集效果好。目前， DLLME 已能与 多种仪器如气相色谱、 气相色谱一质谱、 液相色谱、 液相色谱一质谱、 。
8、原子吸收光谱等联用， 成功用于水样、 土壤、 尿样和水果中不同物质的测定， 分析对象涉及农药残留、 临床药物、 痕 量金属等。将 DLLME 用于植物激素的前处理， 具有富集能力高， 操作简单， 有机溶剂用量少 和萃取时间短等优点， 是一种简单可靠、 环境友好的样品预处理技术。 发明内容 0005 本发明的目的在于提供一种萃取植物花青素的方法， 用于净化和富集样品， 该方 法富集能力高， 操作简单， 有机溶剂用量少和萃取时间短。 0006 为实现上述目的， 本发明所述一种萃取植物花青素的方法， 其特征在于 ： 处理步骤 包括 ： 说 明 书 CN 103145678 A 3 2/3 页 4 一。
9、、 用 60 90% 的有机溶剂提取粉碎的葡萄籽， 然后再在不高于 80 85的条件下， 在真空度 0.06 0.09Mpa 下减压蒸发得粗提取物 ； 二、 在 1OmL 带塞的尖底离心管中， 加入 5.OmL 粗提取物和 0.375g NaCl， 所述粗提取物 的 pH 为 4.0 ； 预先将 50.0uL 萃取剂三氯甲烷和 1.OmL 分散剂丙酮混匀 ； 三、 用 2.OmL 注射器吸取步骤二的混合液， 迅速注射入步骤一装有粗提取物和 0.375g NaCl 的尖底离心管中， 轻轻振荡， 形成乳浊体系 ； 四、 将离心试管以 4500r min 离心 3min ； 五、 用微量液相进样针吸。
10、取离心管底部的有机相直接进行 HPLC 分析。 0007 所述有机溶剂为乙醇、 丙酮、 甲醇、 丙醇、 异丙醇、 乙酸乙酯。 0008 本发明所述一种萃取植物花青素的方法， 其有益效果在于 ： 本方法能够有效地对 植物样品进行净化、 浓缩， 减少植物基质对检测信号的干扰 ； 本方法富集效果好， 处理后的 样品用高效液相色谱一荧光检测法分离测定， 待测物质的检测限降低了两个数量级 ； 未经 过柱， 减少了样品中待测物的损失 ； 植物样品中的 IAA 不稳定， 易分解， 本方法操作时间短， 有利于减少 IAA 的分解 ； 消耗有机溶剂少， 是一种环境友好的前处理技术 ； 该方法装置简 单， 成本低。
11、 ； 该方法可与气相色谱、 液相色谱和原子吸收分光光谱等仪器联用， 适用范围广。 具体实施方式 0009 以下实施例为本发明作进一步出阐述。 0010 实施例 1 一、 用 75% 的乙醇 3000ml 提取粉碎的葡萄籽 500g， 然后再在 85的条件下， 在真空度 0.06Mpa 下减压蒸发得粗提取物 ； 二、 在 1OmL 带塞的尖底离心管中， 加入 5.OmL 粗提取物和 0.375g NaCl， 所述粗提取物 的 pH 为 4.0 ； 预先将 50.0uL 萃取剂三氯甲烷和 1.OmL 分散剂丙酮混匀 ； 三、 用 2.OmL 注射器吸取步骤二的混合液， 迅速注射入步骤一装有粗提取物。
12、和 0.375g NaCl 的尖底离心管中， 轻轻振荡， 形成乳浊体系 ； 四、 将离心试管以 4500r min 离心 3min ； 五、 用微量液相进样针吸取离心管底部的有机相直接进行 HPLC 分析。 0011 实施例 2 一、 用 78% 的甲醇 6000ml 提取粉碎的葡萄籽 1000g， 然后再在 80的条件下， 在真空度 0.07Mpa 下减压蒸发得粗提取物 ； 二、 在 1OmL 带塞的尖底离心管中， 加入 5.OmL 粗提取物和 0.375g NaCl， 所述粗提取物 的 pH 为 4.0 ； 预先将 50.0uL 萃取剂三氯甲烷和 1.OmL 分散剂丙酮混匀 ； 三、 用 。
13、2.OmL 注射器吸取步骤二的混合液， 迅速注射入步骤一装有粗提取物和 0.375g NaCl 的尖底离心管中， 轻轻振荡， 形成乳浊体系 ； 四、 将离心试管以 4500r min 离心 3min ； 五、 用微量液相进样针吸取离心管底部的有机相直接进行 HPLC 分析。 0012 实施例 3 一、 用 60% 的丙酮 3000ml 提取粉碎的葡萄籽 500g， 然后再在 85的条件下， 在真空度 0.09Mpa 下减压蒸发得粗提取物 ； 说 明 书 CN 103145678 A 4 3/3 页 5 二、 在 1OmL 带塞的尖底离心管中， 加入 5.OmL 粗提取物和 0.375g NaCl， 所述粗提取物 的 pH 为 4.0 ； 预先将 50.0uL 萃取剂三氯甲烷和 1.OmL 分散剂丙酮混匀 ； 三、 用 2.OmL 注射器吸取步骤二的混合液， 迅速注射入步骤一装有粗提取物和 0.375g NaCl 的尖底离心管中， 轻轻振荡， 形成乳浊体系 ； 四、 将离心试管以 4500r min 离心 3min ； 五、 用微量液相进样针吸取离心管底部的有机相直接进行 HPLC 分析。 说 明 书 CN 103145678 A 5 。