一种新型室内杀螨剂的研制 【技术领域】
本发明属于卫生杀虫剂技术领域，具体地说，涉及一种新型室内杀螨剂的研发及其制备技术。
背景技术
随着世界范围内工业化程度的不断提高，过敏性疾病的发病率在全球范围内呈逐年增高的趋势。2005年8月世界变态反应组织(WAO)在首个世界过敏性疾病日，公布了30个国家进行过敏性疾病流行病学调查结果：在这些国家的12亿总人口中，22％(2.5亿人)患有免疫球蛋白E(IgE)介导的过敏性疾病，如过敏性鼻炎、哮喘、结膜炎、湿疹、食物过敏、药物过敏和严重过敏反应等。美国有5000多万人患有过敏性疾病，10％-30％的成年人和40％的儿童患有过敏性鼻炎；此外，每年有180万人次因过敏性哮喘前往急诊科就诊，46.5万人次因哮喘住院接受治疗。 据世界卫生组织估计，全球约有1.5亿人患有哮喘，其中50％以上的成人及至少80％的儿童患者均由过敏因素诱发，而每年有18万多人死于哮喘。
过敏原是引发过敏性疾病的元凶，在己确定的众多过敏原中，尘螨是最重要的吸入性过敏原，也是最重要的室内过敏原，受到全球医疗以及科研工作者的广泛关注。全球性分布的最主要的尘螨有两种，即尘螨亚科的屋尘螨和粉尘螨，占所有螨数量的80％-90％，并且是世界范围内的主要室内过敏原。在我国15个城镇房舍进行的尘螨调查显示：城市房舍内尘螨的检出率均在40％以上，上海达到66.67％。
目前，特异性免疫治疗被认为是过敏性疾病的唯一对因治疗方法。但我国还没有通过SFDA批准的标准化过敏原疫苗和标准品。由于地域的差别，同种过敏原也可能存在一定的差异。另外，进口过敏原疫苗价格昂贵，增加了病人治疗的花费。免疫治疗用药途径目前多局限于皮下注射，其疗程长，长期治疗患者的耐受性较差。
研究发现，减少环境中的尘螨过敏原数量，会降低儿童及青少年患过敏疾病的危险，并且在免疫治疗过敏性疾病的过程中，同时减少患者所在环境中的尘螨数量，会取得更好的治疗效果。因此，这种防治措施对减轻和治疗儿童过敏性疾病有作用。降低室内环境内的尘螨数量通常有三种途径：一是清洗，如打扫环境、清洗衣物；二是升高温度，降低湿度；三是使用有效的杀螨剂。在除螨的各种方法中，杀螨剂具有方便、高效、特异的优点而日益受到人们的重视。
现在的杀螨剂主要是以γ-BHC、DEET、苯甲酸苄酯等化学合成物为主要有效成分，主要用于农业害螨的消杀和防治。尽管这些化学药物能较好控制尘螨，但是需要长期使用才有效果，而且毒性强、残留久、副作用大，对环境有较大的影响，不适合于室内使用。因此，研究快捷、高效、低毒、对环境无污染的新型杀螨剂成为当前过敏性疾病防治研究工作的重点之一。
我国传统中草药具有取材广泛、原料成本低、效果显著、无严重毒副作用等众多优点，在医药、农业、美容、保健等很多方面均有了广泛的应用。中药在新药的研发、临床多种疑难杂症的治疗上都取得了令人瞩目的成就。因此从我国传统中草药中研发高效、低毒、对环境无污染的新型室内杀螨剂是当前杀螨剂研发的突破口之一。
植物精油含有多种天然有效成分，已广泛用于香水、香料的生产，在尘螨的防治应用方面也引起了研究者的注意，并有望研制出取代化学合成杀螨剂的新型杀螨剂。例如丁香油对粉尘螨和屋尘螨都有很好的杀灭效果，作为杀螨剂有很好的应用前景，但还要进行一系列的产业化研究才能将之推向市场。
【发明内容】
本发明旨在克服化学合成杀螨剂毒副作用大、需长时间使用、对环境污染严重等不足而研发一种有效消杀室内屋尘螨、粉尘螨等尘螨的新型杀螨剂，该新型杀螨剂具有方便、快捷、高效、低毒、对环境无污染等特点，是以我国传统中草药为原料结合现代提取、制备工艺精制而成。
本发明的第二个目的是确定新型杀螨剂的取材原料，包括丁香、茶叶、香菜、小茴香、薄荷、玫瑰、天竺葵、苦参、花椒、百部、槟榔、蛇床子、大风子、川楝子、藜芦、仙鹤草、黄连、天竺葵、柠檬草、迷迭香、桉树叶、咖啡豆、百里香、藿香、陈皮、黄柏、细辛、使君子、肉桂等我国传统的中草药。
本发明中新型杀螨剂的主要有效成分为所有丁子香酚类化合物及其各种衍生物。
丁子香酚
本发明的另一个目的是提供新型杀螨剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)提取溶剂包括石油醚(I)、石油醚(II)、正己烷、环己烷等同等极性溶剂；
(2)提取的方法包括浸取法、索式提取法、超临界萃取法等类似提取方法；
(3)有效成分地分析主要采用HPLC和MS结合的方法，质量的控制主要采用HPLC指纹图谱技术；
(4)以CH3(CH2)nOH为辅助溶剂(n＝0-5)，CnHn+2为高压气相(n＝2-10)，密封装罐制得成品。
与现有化学合成杀螨剂相比，本发明中的杀螨剂具有高效、低毒、对环境无污染、使用便捷等优点，采用石油醚等低极性、易挥发溶剂提取有效成分大大降低了生产的成本和生产过程对环境的污染，用HPLC指纹图谱技术能更有效的控制产品的质量，以小分子醇类和烷类为辅助原材料也大大降低了产品的成本和生产的难度，且最后生产的气雾剂产品在使用上极为方便，对众多室内环境均适用。
【具体实施方式】
实施例1 丁香油的制备
中药材丁香，45℃烘干，粉碎，安装索氏提取器，以水浴锅加热，石油醚(II)为溶剂，提取丁香有效成分。提取液通过真空抽滤去除杂质，加入无水Na2SO4干燥，用旋转蒸发器去除溶剂得提取物。实施例2直接接触法测试丁香油杀螨活性
设定丁香油某一最高浓度，依次对倍稀释为8个浓度，分别吸取300μl均匀吸附到直径5.6cm的滤纸上，待溶剂挥发完全，将滤纸放入装有一定数量(60±10只)成年螨的培养皿中，放入恒温培养箱，24h后观察杀螨情况。数出螨的死亡个数(在解剖镜下，用针轻戳螨体3次，螨虫四肢不动，可以判断螨虫死亡)，计算死亡率，重复3次，计算LD50。
实施例3熏蒸法测试丁香油的杀螨活性
将直径7cm的滤纸放到直径6cm的培养皿盖内，吸取不同浓度的提取物300μl均匀吸附到滤纸上，待溶剂挥发完全后，将滤纸置于放有一定数量(60±10只)成年螨的培养皿上，放入恒温培养箱。24h后观察杀螨情况，计算LD50。
实施例4测试丁香油杀螨作用时间
吸取300μl不同浓度的丁香油，均匀吸附到直径5.6cm的滤纸上，待溶剂挥发完全，将滤纸放入放有一定数量(60±10只)成年螨的培养皿中，放入恒温培养箱，分别观察在0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h时螨的死亡情况，计算死亡率，重复试验3次。
实施例5测试含丁香油的喷雾剂的杀螨活性
将丁香油溶于乙醇中配成2、3、4、5mg/ml的喷雾剂，一定数量(60±10只)成年螨虫分别置于纸、玻璃、陶瓷、丝织品表面，不同浓度的喷雾剂在距离螨虫30cm左右的上方喷一次，2.5h后观察螨虫的死亡情况。
实施例6丁香油中有效杀螨成分的分离
首先用硅胶-吸附层析初步分离丁香油，TLC检测发现成分主要集中在两段，调整洗脱液石油醚和乙酸乙酯的比例后将两段分开。分别做杀螨活性测试，使螨虫致死量100％的成分进一步用HPLC分离，柱子为μ多孔硅胶柱，用正己烷/乙酸乙酯(8∶2，v/v，2 mL/min)洗脱，286nm检测。分离到的杀螨活性的成分再进行结构鉴定。