黄芪总皂苷赤芍总苷组合物在全身炎症反应综合征的应用.pdf

本发明属于医药技术领域，具体涉及黄芪总皂苷和赤芍总苷的药物组合物及其在全身性炎症反应综合征的应用。其特征在于从中药黄芪、赤芍中得到的有效部位黄芪总皂苷、赤芍总苷，按一定比例配伍后加入药用辅料组成制备成具有治疗全身炎症反应综合征作用的注射剂、粉针剂、片剂、胶囊剂等制剂；药理实验结果表明，本发明的黄芪总皂苷、赤芍总苷组合，对全身炎症反应综合征具有协同增效的治疗作用。

1.  一种含黄芪总皂苷和赤芍总苷的药物组合物，其特征在于该药物组合物以黄芪总皂苷和赤芍总苷为活性成分，其中黄芪总皂苷和赤芍总苷按1∶1-4重量比例组成。

2.  权利要求1所述的黄芪总皂苷，其特征是指从黄芪中获得的以所有皂苷类化合物的混合物为主的提取物。

3.  权利要求1所述的赤芍总苷，其特征是指从赤芍中获得的以所有苷类化合物的混合物为主的提取物。

4.  根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于有效成分的制备方法是：
取黄芪药材或饮片，热水提取；水提液过滤，上大孔吸附树脂柱；先用水洗脱去杂质，再用乙醇洗脱得乙醇洗脱液；收集乙醇洗脱液，减压浓缩，减压干燥即得。
取赤芍药材或饮片，热水提取；水提液过滤，上大孔吸附树脂柱；先用水洗脱去杂质，再用乙醇洗脱得乙醇洗脱液；收集乙醇洗脱液，减压浓缩，减压干燥即得。

5.  根据权利要求1中所述的药物组合物，其特征在于是该药物组合物按重量比，将黄芪总皂苷10-50％和赤芍总苷50-90％与药学上可接受的载体或辅料混合，常规制成注射剂、粉针剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、缓释片、滴丸或微粒剂。

6.  如权利要求1所述的黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物制备的制剂，其特征在于可应用于全身炎症反应综合征的治疗。

黄芪总皂苷赤芍总苷组合物在全身炎症反应综合征的应用
技术领域
本发明涉及防治全身炎症反应综合征的含中药黄芪和赤芍有效部位的药物组合物，具体为黄芪总皂苷和赤芍总苷组成的药物组合物。
背景技术
尽管目前临床上新的抗生素类药物层出不穷，细菌感染性疾病仍然是造成重症监护病房ICU病人死亡的主要原因。除了抗药性的问题外，主要问题并不在于抗生素对付不了病菌或病毒，而在于由于抗生素的使用，使得细菌在被杀死的同时，在人体内释放出大量的内毒素。大量内毒素会造成全身性的自我破坏的强烈炎症反应过程，进一步导致弥漫性血管凝血，造成严重休克，或发生急性呼吸窘迫症以及多脏器功能失常等并发症，并最终会导致死亡。全身炎症反应综合征(SIRS)是指由感染、烧伤、创伤、手术、胰腺炎以及缺血-再灌注等多种因素引起的一种全身性炎症反应，伴有严重感染时称之为脓毒症，但在没有感染的情况下也可以引起。几十年来，各国科学家没有找到特效药物对抗SIRS，治疗的进展非常缓慢。
近代由于具有强大抗菌作用的抗生素大量应用，使得中医学对SIRS此类疾病治疗的丰富经验相对被大大忽略了。而事实上，几千年的中医学发展史中始终贯穿着对SIRS类临床病症的深刻认识和积极措施，中医学中整体观念、气血并治、扶正祛邪等宝贵思想对于SIRS研究具有重要指导意义。《黄帝内经》云：“正气存内，邪不可干，邪之所凑，其气必虚”。中医学认为，SIRS的基本病机是正虚毒损、络脉瘀滞。与现代医学对SIRS病理方面的认识形成了共识。如各种严重感染、创伤、大手术等时毒邪内蕴，毒为广义之毒，包括细菌、内毒素、炎症介质等；同时耗伤人之气血，导致气损血衰，正气不足；最终结果是络脉瘀滞，气血失运，脏腑、四肢失于濡养。
中医理论中气血关系密切，“气为血之帅”，“气虚则血淤”。气机失常则不能推动血液的运行，治疗策略上强调气血并治。益气活血法是中医临床一条重要治则，活血药常配伍益气药使用，如由黄芪和赤芍、当归、地龙等组成的补阳还五汤，由黄芪和赤芍、防风组成的黄芪赤风汤等(方出自王清任《医林改错》)。现代药理研究表明，益气、解毒的中药黄芪和活血、凉血的中药赤芍均有一定抗炎、调节免疫和心血管活性，临床上黄芪和赤芍也是用于治疗SIRS中较常用的中药。赤芍主要含芍药苷等单萜苷等有效成分。黄芪主要含皂苷、黄酮、多糖等成分。黄芪总皂苷和赤芍总苷是黄芪和赤芍中主要有效部位，黄芪总皂苷和赤芍总苷均有一定抗炎免疫、心血管保护等作用，本发明是以黄芪总皂苷和赤芍总苷组合的作为新的药用形式，应用于全身性炎症反应综合征的防治。
发明内容
本发明要解决的技术问题是研制黄芪总皂苷和赤芍总苷的药物组合物及其制备方法。本发明研制的药物组合物是以大孔吸附树脂提取的黄芪总皂苷和赤芍总苷进行配伍得到“芪芍双苷”，其质量易控，有效成分含量高，临床使用的药量大大减少。本发明要解决的技术问题还涉及研制黄芪总皂苷和赤芍总苷药物组合物的制备工艺，大孔吸附树脂提取方法能够提高活性成分含量，去除大量杂质，同时重复性、稳定性好，并且原料的得率高，成本低，适合工业化生产。为解决上述技术问题，本发明研究制定了如下技术方案。
赤芍总苷可用下述方法得到：取赤芍药材，粉碎后，加6-10倍量水，热提取3次，水提液过滤后上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱杂质，再用60-90％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，滤去杂质，滤液浓缩、浓缩后干燥。赤芍总苷提取物中，赤芍总苷含量至少为50％。
黄芪总皂苷可用下述方法得到：取黄芪药材，粉碎后，加6-10倍量水，热提取3次，水提液过滤后上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱杂质，再用60-90％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，滤去杂质，滤液浓缩、浓缩后干燥。黄芪总皂苷提取物中，黄芪总皂苷含量至少为50％。
芪芍双苷即是以黄芪总皂苷和赤芍总苷按1∶1-4的比例进行配伍组合，其特征在于所述黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物，可以与药学上可接受的剂型制备成治疗全身性炎症反应综合征的制剂。
以下动物试验对本发明有益效果作进一步说明：
方法
健康昆明种小鼠，随机分成5组，每组15只，即假手术组，模型组，芪芍双苷组(400mg/kg)，黄芪总皂苷组(100mg/kg)，赤芍总苷组(300mg/kg)。分别于术前1h、术后1h灌胃给予生理盐水或药物。采用穿刺法建立小鼠实验性SIRS模型。小鼠腹腔注射戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉，沿腹中线剪开腹腔，结扎末端盲肠，用7号头皮针在盲肠上穿3个孔并挤出少量内容物，之后将盲肠还纳腹腔，用4号手术线逐层缝合腹壁切口，术后立即皮下注射生理盐水(0.5ml/10g体重)进行补液。假手术组只开腹、关腹与复苏，不结扎和穿孔盲肠。小鼠造模后每隔12h观察一次，观察96h，记录各组小鼠的存活率。CLP造模后24h，处死小鼠，取出适量肝、肺组织，固定于10％的甲醛溶液中，常规脱水、石蜡包埋、HE染色、封固，光镜下观察组织病理变化。根据组织的充血程度、中性粒细胞浸润和细胞坏死的情况进行判断。
结果
1对SIRS小鼠存活率的影响
如表1所示，各时间点假手术组小鼠均无死亡。术后48h，模型组、芪芍双苷组、黄芪总皂苷组和赤芍总苷组小鼠存活率分别为26.7％、40％、26.7％和28.6％。术后84h，模型组小鼠无存活，而芪芍双苷组、黄芪总皂苷组和赤芍总苷组小鼠存活率分别为26.7％、13.3％和14.1％。统计结果显示芪芍双苷可显著提高SIRS小鼠的存活率，而黄芪总皂苷和赤芍总苷单独应用均无显著提高作用，提示黄芪总皂苷和赤芍总苷具有协同作用。
表1芪芍双苷，黄芪总皂苷和赤芍总苷对SIRS小鼠存活率的影响

2对SIRS小鼠肝、肺组织病理变化的影响
假手术组小鼠肝、肺组织结构清晰，无明显病理变化。模型组小鼠，肝脏病理检查显示肝细胞肝小叶内有大量中性粒细胞浸润，粒细胞聚集区肝细胞发生点状或小灶性坏死，少数肝细胞内出现小脂滴空泡，呈极轻度脂变；肺脏病理结果显示其肺泡壁明显充血增厚，有大量中性粒细胞浸润。芪芍双苷，黄芪总皂苷和赤芍总苷均能显著改善SIRS小鼠的肝、肺组织病理变化，减少中性粒细胞浸润及细胞坏死，其中芪芍双苷的作用最强。
小鼠的存活率是检测抗全身炎症反应综合征作用的最直观的指标，黄芪总皂苷和赤芍总苷在对SIRS小鼠存活率的保护方面显示出明显的协同作用，表现为芪芍双苷能显著提高SIRS小鼠的存活率，但黄芪总皂苷或赤芍总苷单独应用不能有效提高SIRS小鼠的存活率。在对SIRS小鼠的肝、肺组织保护方面，芪芍双苷的作用亦明显强于黄芪总皂苷或赤芍总苷单独应用，尽管对于个别病理变化指标，芪芍双苷的保护强度与黄芪总皂苷和赤芍总苷相近。因此，可认为黄芪总皂苷和赤芍总苷在抗SIRS方面具有协同增效作用，证实了中医益气活血方法的科学性。芪芍双苷对小鼠全身炎症反应综合征的有效治疗为中医药抗SIRS提供了药理学研究依据。
本发明运用大孔吸附树脂分离技术，采用水提后直接上柱、水洗脱后再用60-90％的乙醇充分洗脱，此方法不但操作简便，降低了成本，而且非常适合工业化生产。中医临床用药讲究方剂配伍，处方中的药味组成对于其功效有较大的影响，但现代制剂中对于有效组分的配伍研究却较少进行。本发明在中医药理论指导下，以中药黄芪、赤芍有效部位进行组方，制备成治疗全身性炎症反应综合征的制剂。两者组合对全身性炎症反应综合征具有协同增效的保护作用，以这种中药有效部位提取后再进行配伍，药物质量稳定可控，符合中药现代化的趋势；另一方面有效部位的组合也符合中医临床复方配伍用药的主要方式，体现了中医药的特色。在抗SIRS机制研究中，黄芪总皂苷和赤芍总苷各自对于不同实验指标的药理作用强弱有所不同，在治疗全身性炎症反应综合征方面，应以赤芍总苷为主进行祛邪，辅以黄芪总皂苷以扶助正气。
具体实施方式
下面给出最佳实施例进一步说明本发明，但并不对本发明限制。
方法一：在GMP净化车间，将上述黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物与适宜辅料混合后，依中国药典制剂胶囊剂标准，制粒，用全自动胶囊分装机分装胶囊，制成胶囊剂，每粒胶囊含药量为0.1-0.3克，患者每次服用1-4粒，每日服用2-3次。
方法二：在GMP净化车间，将上述黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物与适宜辅料混合后，依中国药典制剂片剂标准，制粒，用自动压片机压片，制成片剂，每粒片剂含药量为0.1-0.3克，患者每次服用1-4粒，每日服用2-3次。
方法三：在GMP净化车间，取黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物2g，加适量注射用水溶解后，再加入活性炭0.02g，加热煮沸20分钟，滤过，加甘露醇15g，加水调整至总量1000ml，搅匀，静置，滤过，灌封于5ml安瓶瓶，灭菌，-20℃预冻24小时，于-50-60℃真空干燥72小时，制得芪芍双苷冻干粉针半成品，质量检测合格后贴标签、包装，即得芪芍双苷冻干粉针成品。用法用量为每日1次，每次50-100mg加入生理盐水或5-10％的葡萄糖溶液中静脉滴注。
方法四：在GMP净化车间，取黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物，溶于注射用水，加入葡萄糖溶解，加注射用水适量，混匀，60-70℃加热；加入0.1％活性炭，放置15-20分钟，过滤脱炭；0.45μ滤膜过滤，调整PH在7.0-9.0，加注射用水至全量，测定含量，检查澄明度，均合格后灌封到洗净的安瓶中；100℃热压灭菌30分钟；即得芪芍双苷小针，全检合格后，包装。
方法五：在GMP净化车间，取黄芪总皂苷和赤芍总苷组合物，溶于注射用水，加入甘露醇溶解，加注射用水适量，混匀，60-70℃加热；加入0.1％活性炭，放置15-20分钟，过滤脱炭；0.45μ滤膜过滤，调整PH在7.0-9.0，加注射用水至全量，测定含量，检查澄明度，均合格后灌封到洗净的安瓶中；115℃热压灭菌30分钟；即得芪芍双苷输液，全检合格后，包装。