一种N5脱氢枞基1,3,4噻二唑2基芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用.pdf

摘要
申请专利号：	CN201310007980.3	申请日：	2013.01.09
公开号：	CN103030608A	公开日：	2013.04.10
当前法律状态：	授权	有效性：	有权
法律详情：	授权\|\|\|发明专利申请更正卷=29号=15页码=扉页更正项目=申请人误=中国林业科学研究所林产化学工业研究所正=中国林业科学研究院林产化学工业研究所\|\|\|发明专利公报更正号牌文件类型代码=1608号牌文件序号=101657450778卷=29号=15IPC(主分类)=C07D0285135000更正项目=申请人误=中国林业科学研究所林产化学工业研究所正=中国林业科学研究院林产化学工业研究所\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):C07D 285/135申请日:20130109\|\|\|公开
IPC分类号：	C07D285/135; A01P1/00	主分类号：	C07D285/135
申请人：	中国林业科学研究所林产化学工业研究所
发明人：	商士斌; 崔艳杰; 饶小平; 王丹; 宋杰
地址：	210000 江苏省南京市玄武区锁金5村16号
优先权：
专利代理机构：	南京天翼专利代理有限责任公司 32112	代理人：	蒋家华
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内容摘要

本发明公开一种N-(5-脱氢枞基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用。N-(5-脱氢枞基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物，其分子结构式为：其中，R为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。本发明制备方法具有脱氢枞酸转化率高，制备方法简单等优点；且N-(5-脱氢枞基-[1,3,4]噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物有良好的抑菌效果，且对绿脓假单胞菌都的抑菌效果更佳，最低抑菌浓度分别为4μg/mL，优于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠。

权利要求书

权利要求书一种N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，其特征在于，其分子结构式为：

其中，R为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。
如权利要求1所述的N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，其特征在于：其反应方程式为：

其中，R为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。
权利要求1或2所述的N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
A、将脱氢枞酸与硫代氨基脲反应得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0‑1.5）：1.0；
B、将步骤A所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑与芳酰氯反应得N‑‑(5脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，所述5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑与芳酰氯的摩尔比为1.0:（1.0‑2.0）。
如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤A为：将脱氢枞酸溶于第一有机溶剂，并加入硫代氨基脲和闭环剂，回流反应1‑4h，得5‑脱氢枞基‑2氨基‑1,3,4‑噻二唑；所述第一有机溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇或乙腈，所述闭环剂为POCl3、盐酸、硫酸、磷酸、多聚磷酸或Amberlyst‑15，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0‑1.5）：1.0，所述闭环剂与脱氢枞酸的摩尔比为（1.5‑2.0）:1.0。
如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述闭环剂为POCl3。
如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：将步骤A所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑按如下步骤提纯：
①将步骤A所得反应物料冷却至40‑50℃，除溶剂后溶于乙酸乙酯，并调节pH至7‑9，；
②将步骤①所得溶液倒入分液漏斗分液，所得上层油相蒸除溶剂后，用第二溶剂重结晶，得纯度不小于95%的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑，所述第二有机溶剂为乙酸乙酯、乙醚或丙酮。
如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述步骤B为：
①将步骤A所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶于第三有机溶剂中，并加入缚酸剂，所述缚酸剂与5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的摩尔比为（1.5‑2.0）：1.0；
②在0‑5℃下、20‑40min内将溶解在第三有机溶剂中的芳酰氯溶液滴加到步骤①所得的物料中，滴加完毕后，20‑30℃下，反应5‑20h，得N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物；所述第三有机溶剂为二氯甲烷、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷或甲苯，所述5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑与芳酰氯的摩尔比为1.0:（1.0‑2.0）。
如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述芳酰氯为苯甲酰氯、苯乙酰氯、对甲基苯甲酰氯、对氯苯甲酰氯或对硝基苯甲酰氯；所述缚酸剂为碳酸钠、碳酸氢钠、三乙胺或吡啶。
如权利要求8所述的制备方法，其特征在于：将步骤B所得N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物按如下方法提纯：将步骤B所得物料酸洗、水洗、用第四溶剂重结晶后，真空干燥，得纯度不小于95%的N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2基)‑芳酰胺衍生物；所述真空干燥时真空度为0.1Mpa、温度为40‑60℃，真空干燥时间为10‑24h；所述第四有机溶剂为乙醇、乙酸乙酯、乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂或乙醇与环己烷的混合溶剂。
权利要求1‑9任意一项所述N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2基)‑芳酰胺衍生物作为抑菌剂的应用。

说明书

说明书一种N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用
技术领域
本发明涉及一种N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用。
背景技术
酰胺类化合物具有多种生物活性，目前已被用于杀虫剂、抑菌剂、除草剂、植物生长剂、抗肿瘤试剂等的研究中。酰胺类化合物作为抑菌剂具有广谱，高效，性质稳定，价格低等特点。自Schmeling首次发现酰胺类杀菌剂‑萎锈灵以来，共开发了麦锈灵，氟酰胺，噻氟酰胺等20多种相似结构的杀菌剂；李勤耕等设计并合成了一系列苯乙酰谷氨酰胺类化合物，并对所合成目标化合物做抗肿瘤活性测评，采用MTT法对L1210细胞进行了测试，初步结果显示此类化合物具有一定的抑制肿瘤细胞存活的作用。上述化合物在使用时，易污染环境、威胁人畜健康，随着人们环保意识的进一步提高，对于天然产物中的活性部位进行结构修饰，制造高效低毒的化合物成为新药开发的方向。
噻二唑结构是一种重要的活性结构单元，含有噻二唑结构的化合物具有广泛的生理活性，常作为药物中间体，用来制备抗菌药，驱虫药、除草剂、植物生长调节剂，还可用来防治水稻百叶枯病、柑橘溃疡病、蕃茄青枯病等，长期以来一直受到人们的普遍关注，已成为绿色药物研究的一个热点。l,3,4‑噻二唑含有“碳氮硫”基本结构骨架，能作为活性中心螯合生物体内的某些金属离子，具有较好的组织细胞通透性，从而较好地发挥药效作用，因此其广泛的生物活性己越来越引起人们的兴趣。
松香是用松树分泌出来的粘稠液体加以蒸馏而得到的一种天然树脂，主要成分为三环二萜结构的树脂酸。我国是松香生产大国，年产量居世界第一位。脱氢枞酸也称去氢松香酸，是一种重要的天然二萜类树脂酸，由歧化松香分离提纯得到，它与很多天然活性成分有相近或相似的结构骨架，在医药、农药、表面活性剂及其他精细化学品制备方面有广泛的用途。脱氢枞酸化学结构中存在多个手性中心和共轭双键，可通过改性合成多种具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒、抗溃疡等生物活性的化合物，合成的这些生物活性化合物更加符合绿色、环保的发展要求。
发明内容
本发明的目的是提供一种N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用。
一种N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，其分子结构式为：

其中，R为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。为了方便、简易、高效地得到上述N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，其反应方程式为：

其中，R为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。上述的N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物的制备方法，包括如下步骤：
A、将脱氢枞酸与硫代氨基脲反应得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0‑1.5）：1.0；
B、将步骤A所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑与芳酰氯反应得N‑‑(5脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，所述5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑与芳酰氯的摩尔比为1.0:（1.0‑2.0）。
为了提高反应效率，上述步骤A为：将脱氢枞酸溶于第一有机溶剂，并加入硫代氨基脲和闭环剂，回流反应1‑4h，得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑；所述有第一机溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇或乙腈，所述闭环剂为POCl3、盐酸、硫酸、磷酸、多聚磷酸或Amberlyst‑15，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0‑1.5）：1.0，所述闭环剂与脱氢枞酸的摩尔比为（1.5‑2.0）:1.0。
Amberlyst‑15是磺酸树脂中的一种，申请人经研究发现：Amberlyst‑15也具有优异的闭环效果。
经上述步骤所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑为一粗产品，既可将步骤A所得产品直接用于步骤B的合成，也可将步骤A所得产品提纯后再用于步骤B。上述步骤A的反应终点优选通过薄层色谱来分析，薄层色谱显示原料脱氢枞酸反应完全时，即可进入到下一步，申请人经研究发现，将反应物在90‑105℃下，回流反应1‑4h，原料脱氢枞酸反应完全。为了提高反应效率，所述闭环剂为POCl3。POCl3既可作为溶解脱氢枞酸的溶剂，也可作为闭环剂。
为了提高目标产物的纯度及抑菌性等性能，将步骤A所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑按如下步骤提纯：
①将步骤A所得反应物料冷却至40‑50℃，除溶剂后溶于乙酸乙酯，并调节pH至7‑9；
②将步骤①所得溶液倒入分液漏斗分液，所得上层油相蒸除溶剂后，用第二溶剂重结晶，得纯度不小于95%的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑，所述第二有机溶剂为乙酸乙酯、乙醚或丙酮。
上述步骤①中，除溶剂优选旋蒸除溶剂；调节pH时，优选用50%的氢氧化钾水溶液调节。
为了提高反应效率，所述步骤B为：
①将步骤A所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶于第三有机溶剂中，并加入缚酸剂，所述缚酸剂与5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的摩尔比为（1.5‑2.0）：1.0；
②在0‑5℃下、20‑40min内将溶解在第三有机溶剂中的芳酰氯溶液滴加到步骤①所得的物料中，滴加完毕后，20‑30℃下，反应5‑20h，得N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物；所述第三有机溶剂为二氯甲烷、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷或甲苯，所述5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑与芳酰氯的摩尔比为1.0:（1.0‑2.0）。
经上述步骤所得的N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物为一粗产品，申请人经研究发现：上述粗产物有着优异的抑菌等性能，但为了进一步提高目标产物的纯度和抑菌性能性能优选将上述粗产品提纯。上述步骤②的反应终点优选通过薄层色谱来分析，薄层色谱显示5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑反应完全时，即可结束反应，申请人经研究发现，将反应物在20‑30℃下，反应5‑20h，5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑反应完全。
为了提高产物的抑菌性等性能，所述的芳酰氯为苯甲酰氯、苯乙酰氯、对甲基苯甲酰氯、对氯苯甲酰氯或对硝基苯甲酰氯；所述的缚酸剂为碳酸钠、碳酸氢钠、三乙胺或吡啶。
为了提高产物的纯度及抑菌性等性能，将步骤B所得N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物按如下方法提纯：将步骤B所得物料酸洗、水洗、用第四溶剂重结晶后，真空干燥，得纯度不小于95%的N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物；所述真空干燥时真空度为0.1Mpa、温度为40‑60℃，真空干燥时间为10‑24h；所述第四有机溶剂为乙醇、乙酸乙酯、乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂或乙醇与环己烷的混合溶剂。
上述制备方法中，第一溶剂、第二溶剂、第三溶剂和第四溶剂的用量均为将被溶物溶解即可。
上述N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物作为抑菌剂的应用。
本发明以生物质资源松香衍生物—脱氢枞酸为原料，将松香的稠合多脂环结构引入到噻二唑酰胺中，得N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物，不仅增加了此类化合物的脂溶性，而且提高了松香的附加值，且本发明制备方法具有脱氢枞酸转化率高，制备方法简单等优点；N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑芳酰胺衍生物有抑菌效果，且对绿脓假单胞菌都的抑菌效果更佳，最低抑菌浓度为4μg/mL，优于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠。
附图说明
图15‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的红外谱图。
图25‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的质谱图。
图35‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的氢谱图。
图4实施例1所得化合物a的红外谱图。
图5实施例1所得化合物a的质谱图。
图6实施例1所得化合物a的氢谱图。
图7实施例2所得化合物b的红外谱图。
图8实施例2所得化合物b的质谱图。
图9实施例2所得化合物b的氢谱图。
图10实施例3所得化合物c的红外谱图。
图11实施例3所得化合物c的质谱图。
图12实施例3所得化合物c的氢谱图。
图13实施例4所得化合物d的红外谱图。
图14实施例4所得化合物d的质谱图。
图15实施例4所得化合物d的氢谱图。
图16实施例5所得化合物e的红外谱图。
图17实施例5所得化合物e的质谱图。
图18实施例5所得化合物e的氢谱图。
具体实施方式
为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实施例。
实施例1：
化合物a的制备：

用40ml无水二氯甲烷溶解20mmol干燥的脱氢枞酸，滴加30mmol无水POCl3，然后加入20mmol的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应1h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将上述反应物冷却至50℃，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入50%氢氧化钾水溶液中和至pH为7，将溶液倒入分液漏斗中分液，所得上层油相旋转蒸除溶剂，得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑粗品，所得粗品用乙酸乙酯重结晶的到4.86g5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑纯品。
取10mmol5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶解于四氢呋喃中，加入15mmol缚酸剂三乙胺，在0‑5℃内，滴加溶解在四氢呋喃的15mmol苯甲酰氯溶液，在30min内滴加完，滴加完后，在温度为20℃下反应10h，得到含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯甲酰胺的混合物料。并对含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯甲酰胺粗产物。用乙醇对N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为0.1Mpa、温度为55℃下进行真空干燥，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯甲酰胺。收率：85%。IR:=3149，2955,2866,1667,1601,1581，1494,1451，676cm‑1.MS(ESI(+))m/s460(M+H+)，482(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):δ=12.91(s,H,‑CONH‑),7.49‑8.08(m,5H,Ar‑H),6.80‑7.18(m,3H,Ar‑H),2.71～2.80(m，2H,‑CH‑),2.02～2.69(m,10H,‑CH2‑),1.41‑1.98(m,12H,‑CH3).元素分析(计值)/%:C73.30(73.16)，H7.58(7.24)，N9.37(9.14)。
实施例2：
化合物b的制备：

用40ml四氢呋喃溶解20mmol的脱氢枞酸，滴加32mmol盐酸，然后加入22mmol的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应2h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至50℃，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入50%氢氧化钾水溶液中和至pH为8，将溶液倒入分液漏斗中分液，所得上层油相旋转蒸除溶剂，得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑粗品，所得粗品用乙醚重结晶的到4.54g5脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑纯品。
取10mmol5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶解于二氯甲烷中，加入16mmol缚酸剂碳酸钠，在0‑5℃内，滴加溶解在二氯甲烷的16mmol苯乙酰氯溶液，在30min内滴加完，滴加完后，在温度为30℃下反应5h，得到含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2基)苯乙酰胺的混合物料。并对含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯乙酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯乙酰胺粗产物。用乙酸乙酯对N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯乙酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为0.1Mpa、温度为60℃下进行真空干燥，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑苯乙酰胺。收率：80.5%。IR:=3152，2922,2859,1694,1603,1495,1453，653cm‑1.MS(ESI(+))m/s474(M+H+)，496(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):δ=12.63(s,H,‑CONH‑),7.14‑7.30(m,5H,Ar‑H),6.78‑6.96(m,3H,Ar‑H),3.76(s,2H,‑NHCO‑CH2‑),2.69～2.77（m，2H,‑CH‑）,2.30～2.63(m,10H,‑CH2‑),1.37‑1.95(m,12H,‑CH3).元素分析(计值)/%:C73.93(73.53)，H7.83(7.45)，N9.04(8.87)。
实施例3：
化合物c的制备：

用40ml乙腈溶解20mmol干燥的脱氢枞酸，滴加35mmol硫酸，然后加入22mmol的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应3h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至50℃，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入50%氢氧化钾水溶液中和至pH为9，将溶液倒入分液漏斗中分液后，上层油相旋转蒸除溶剂，得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑粗品，所得粗品用丙酮重结晶得到4.97g5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑纯品。
取10mmol5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶解于甲醇中，加入18mmol缚酸剂碳酸氢钠，在0‑5℃内，滴加溶解在甲醇的18mmol对甲基苯甲酰氯溶液，在30min内滴加完，滴加完后，在温度为25℃下反应15h，得到含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2基)‑对甲基苯甲酰胺的混合物料。并对含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对甲基苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对甲基苯甲酰胺粗产物。用乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂对N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对甲基苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为0.1Mpa、温度为45℃下进行真空干燥，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对甲基苯甲酰胺。收率：83.2%。IR:=3150，2928,2869,1660,1609,1508,1463，681cm‑1.MS(ESI(+))m/s474(M+H+)，496(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):δ=12.79(s,H,‑CONH‑),7.16～7.99(m,4H,Ar‑H),6.81‑6.98(m,3H,Ar‑H),2.70‑2.81(m,3H,Ar‑CH3),2.36～2.67（m，2H,‑CH‑）,1.71～2.02(m,10H,‑CH2‑),1.30‑1.52(m,12H,‑CH3).元素分析(计值)/%:C73.76(73.53)，H7.80(7.45)，N8.89(8.87)。
实施例4：
化合物d的制备：

用40ml甲醇溶解20mmol干燥的脱氢枞酸，滴加38mmol多聚磷酸(常州市戚墅堰精细化工有限公司)，然后加入22mmol的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应4h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至50℃，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入50%氢氧化钾水溶液中和至pH为7，将溶液倒入分液漏斗中分液后，上层油相旋转蒸除溶剂，得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑粗品，所得粗品用乙醚重结晶得到4.68g5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑纯品。
取10mmol5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶解于甲苯中，加入19mmol缚酸剂吡啶。在0‑5℃内，滴加溶解在甲苯的14mmol对氯苯甲酰氯溶液，在30min内滴加完，滴加完后，在温度为26℃下反应20h，得到含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对氯苯甲酰胺的混合物料。并对含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对氯苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对氯苯甲酰胺粗产物。用乙醇与环己烷的混合溶剂对N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2基)‑对氯苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为0.1Mpa、温度为58℃下进行真空干燥，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对氯苯甲酰胺产品。收率：85%。IR:=3119，2945,2862,1658,1594,1492,1434，678cm‑1.MS(ESI(+))m/s494(M+H+)，516(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):δ=13.02(s,H,‑CONH‑),7.55～8.09(m,4H,Ar‑H),6.81‑7.19(m,3H,Ar‑H),2.33～2.81（m，2H,‑CH‑）,1.71～2.01(m,10H,‑CH2),1.42‑1.52(m,12H,‑CH3).元素分析(计值)/%:C67.95(68.06)，H6.72(6.53)，N8.58(8.50)。
实施例5：
化合物e的制备：

用40ml二氯甲烷溶解20mmol干燥的脱氢枞酸，加入40mmolAmbelyst‑15，然后加入22mmol的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应3h（用波层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至40℃，过滤，滤液旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入50%氢氧化钾水溶液中和至pH为8，将溶液倒入分液漏斗中分液后，上层油相旋转蒸除溶剂，得5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑粗品，所得粗品用丙酮重结晶得到5.00g5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑纯品。
取10mmol5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑溶解于四氢呋喃中，加入20mmol缚酸剂三乙胺。在0‑5℃内，滴加溶解在四氢呋喃的20mmol对硝基苯甲酰氯溶液，在30min内滴加完，滴加完后，在温度为28℃下反应15h，得到含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对硝基苯甲酰胺的混合物料。并对含有N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对硝基苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对硝基苯甲酰胺粗产物。用乙醇对N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对硝基苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为0.1Mpa、温度为52℃下进行真空干燥，得到N‑(5‑脱氢枞基‑[1,3,4]噻二唑‑2‑基)‑对硝基苯甲酰胺。收率：81.4%。IR:=3138，2930,2859,1668,1604,1494,1436，665cm‑1.MS(ESI(+))m/s505(M+H+)，527(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):δ=13.41(s,H,‑CONH‑),8.25～8.35(m,4H,Ar‑H),6.81‑7.19(m,3H,Ar‑H),2.70‑2.81(m,3H,Ar‑CH3),2.33～2.79（m，2H,‑CH‑）,1.71～2.01(m,10H,‑CH2‑),1.26‑1.51(m,12H,‑CH3).元素分析(计值)/%:C66.58(66.64),H6.66(6.39),N11.21(11.10)。
实施例6：
采用平板二倍稀释法，测定化合物的最低抑菌浓度（MIC）。MH培养基，杭州天和微生物试剂有限公司，按配方配制高压灭菌后，56℃水浴恒温。对照药物选择新洁尔灭和氨苄青霉素钠。
试验菌株选取致病菌6株，菌株如下：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、产气杆菌、肺炎克雷伯杆菌。
分别称取样品适量，置于无菌试管，加入二甲亚砜溶解，得2560μg/mL溶液，取2mL加入2mL无菌水，得1280μg/mL溶液；同法依次取2mL样品加入2mL无菌水系列倍比稀释，得浓度分别为2560、1280、640、320、160、80、40、20μg/mL的系列样品溶液。分别取上述样品溶液1mL、MH琼脂培养基9mL加入到9cm无菌平板上，立即混匀，置于水平台待凝后得到浓度依次为256、128、64、32、16、8、4、2μg/mL的含药平板。样品指上述实施例得到的a、b、c、d、e及洁尔灭和氨苄青霉素钠。
将培养好的6种菌种用无菌水配制成菌悬液，与0.5号麦氏比浊管比浊，适当稀释至浓度约108CFU/mL。用移液管向每个含药平板中各加入2μL菌悬液，倒置放人培养箱内，在30℃下培养30h后，观察细菌生长情况。
表1：化合物a‑e的抑菌活性(μg/mL)

A:大肠杆菌(CMCC‑44102),B:金黄色葡萄球菌(CMCC‑26003),C:肺炎克雷伯细菌(GIM‑1.279),D:绿脓假单胞菌(CMCC‑10104),E:产气肠杆菌(GIM‑1.234),F:表皮葡萄球菌(CMCC‑26069),
实验结果表明化合物a、b、c、d和e对绿脓假单胞菌都有抑菌效果，而且对绿脓假单胞菌的抑菌效果高于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠，它们的最低抑菌浓度分别为4μg/mL，8μg/mL，8μg/mL，8μg/mL，8μg/mL。化合物b对于产气肠杆菌的抑菌效果高于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠，它的最低抑菌浓度为64μg/mL。
说明：实施例1‑5所得的5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的各种谱图无差异，因此只提供了5‑脱氢枞基‑2‑氨基‑1,3,4‑噻二唑的一套图谱。

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1、(10)申请公布号 CN 103030608 A (43)申请公布日 2013.04.10 CN 103030608 A *CN103030608A* (21)申请号 201310007980.3 (22)申请日 2013.01.09 C07D 285/135(2006.01) A01P 1/00(2006.01) (71)申请人中国林业科学研究所林产化学工业研究所地址 210000 江苏省南京市玄武区锁金 5 村 16 号 (72)发明人商士斌崔艳杰饶小平王丹宋杰 (74)专利代理机构南京天翼专利代理有限责任公司 32112 代理人蒋家华 (54) 发明名称一种 N。

2、-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用 (57) 摘要本发明公开一种 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用。N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，其分子结构式为：其中， R 为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。本发明制备方法具有脱氢枞酸转化率高，制备方法简单等优点；且 N-(5-脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物有良好的抑菌效果，且对绿脓假单胞菌都的抑菌效。

3、果更佳，最低抑菌浓度分别为 4g/mL，优于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页说明书 9 页附图 11 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书 2 页说明书 9 页附图 11 页 1/2 页 2 1.一种N-(5-脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物，其特征在于，其分子结构式为：其中， R 为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。 2. 如权利要求 1 所述的 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，其特征在于：其反应方程。

4、式为：其中， R 为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。 3. 权利要求 1 或 2 所述的 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤： A、将脱氢枞酸与硫代氨基脲反应得 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0-1.5）： 1.0 ； B、将步骤 A 所得的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑与芳酰氯反应得 N-(5 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，所述 5- 脱氢枞基 -。

5、2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑与芳酰氯的摩尔比为 1.0:（1.0-2.0）。 4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤A为：将脱氢枞酸溶于第一有机溶剂，并加入硫代氨基脲和闭环剂，回流反应 1-4h，得 5- 脱氢枞基 -2 氨基 -1,3,4- 噻二唑；所述第一有机溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇或乙腈，所述闭环剂为 POCl3、盐酸、硫酸、磷酸、多聚磷酸或 Amberlyst-15，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0-1.5）： 1.0，所述闭环剂与脱氢枞酸的摩尔比为（1.5-2.0） :1.0。 5. 如权利要求 4。

6、所述的制备方法，其特征在于：所述闭环剂为 POCl3。 6. 如权利要求 5 所述的制备方法，其特征在于：将步骤 A 所得的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑按如下步骤提纯：将步骤 A 所得反应物料冷却至 40-50，除溶剂后溶于乙酸乙酯，并调节 pH 至 7-9，；将步骤所得溶液倒入分液漏斗分液，所得上层油相蒸除溶剂后，用第二溶剂重结晶，得纯度不小于 95% 的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑，所述第二有机溶剂为乙酸权利要求书 CN 103030608 A 2 2/2 页 3 乙酯、乙醚或丙酮。 7.。

7、如权利要求 3 所述的制备方法，其特征在于：所述步骤 B 为：将步骤 A 所得的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑溶于第三有机溶剂中，并加入缚酸剂，所述缚酸剂与 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的摩尔比为（1.5-2.0）： 1.0 ；在 0-5下、 20-40min 内将溶解在第三有机溶剂中的芳酰氯溶液滴加到步骤所得的物料中，滴加完毕后， 20-30下，反应 5-20h，得 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物；所述第三有机溶剂为二氯甲烷、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷或甲苯。

8、，所述 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑与芳酰氯的摩尔比为 1.0:（1.0-2.0）。 8. 如权利要求 7 所述的制备方法，其特征在于：所述芳酰氯为苯甲酰氯、苯乙酰氯、对甲基苯甲酰氯、对氯苯甲酰氯或对硝基苯甲酰氯；所述缚酸剂为碳酸钠、碳酸氢钠、三乙胺或吡啶。 9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于：将步骤B所得N-(5-脱氢枞基-1,3,4 噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物按如下方法提纯：将步骤B所得物料酸洗、水洗、用第四溶剂重结晶后，真空干燥，得纯度不小于95%的N-(5-脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2基)-芳酰胺衍。

9、生物；所述真空干燥时真空度为 0.1Mpa、温度为 40-60，真空干燥时间为 10-24h ；所述第四有机溶剂为乙醇、乙酸乙酯、乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂或乙醇与环己烷的混合溶剂。 10. 权利要求 1-9 任意一项所述 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2 基 )- 芳酰胺衍生物作为抑菌剂的应用。权利要求书 CN 103030608 A 3 1/9 页 4 一种 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用技术领域 0001 本发明涉及一种 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基。

10、)- 芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用。背景技术 0002 酰胺类化合物具有多种生物活性，目前已被用于杀虫剂、抑菌剂、除草剂、植物生长剂、抗肿瘤试剂等的研究中。酰胺类化合物作为抑菌剂具有广谱，高效，性质稳定，价格低等特点。自 Schmeling 首次发现酰胺类杀菌剂 - 萎锈灵以来，共开发了麦锈灵，氟酰胺，噻氟酰胺等 20 多种相似结构的杀菌剂；李勤耕等设计并合成了一系列苯乙酰谷氨酰胺类化合物，并对所合成目标化合物做抗肿瘤活性测评，采用 MTT 法对 L1210 细胞进行了测试，初步结果显示此类化合物具有一定的抑制肿瘤细胞存活的作用。上述化合物。

11、在使用时，易污染环境、威胁人畜健康，随着人们环保意识的进一步提高，对于天然产物中的活性部位进行结构修饰，制造高效低毒的化合物成为新药开发的方向。 0003 噻二唑结构是一种重要的活性结构单元，含有噻二唑结构的化合物具有广泛的生理活性，常作为药物中间体，用来制备抗菌药，驱虫药、除草剂、植物生长调节剂，还可用来防治水稻百叶枯病、柑橘溃疡病、蕃茄青枯病等，长期以来一直受到人们的普遍关注，已成为绿色药物研究的一个热点。l,3,4- 噻二唑含有 “碳氮硫” 基本结构骨架，能作为活性中心螯合生物体内的某些金属离子，具有较好的组织细胞通透性，从而较好地发挥药。

12、效作用，因此其广泛的生物活性己越来越引起人们的兴趣。 0004 松香是用松树分泌出来的粘稠液体加以蒸馏而得到的一种天然树脂，主要成分为三环二萜结构的树脂酸。我国是松香生产大国，年产量居世界第一位。脱氢枞酸也称去氢松香酸，是一种重要的天然二萜类树脂酸，由歧化松香分离提纯得到，它与很多天然活性成分有相近或相似的结构骨架，在医药、农药、表面活性剂及其他精细化学品制备方面有广泛的用途。脱氢枞酸化学结构中存在多个手性中心和共轭双键，可通过改性合成多种具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒、抗溃疡等生物活性的化合物，合成的这些生物活性化合物更加符合绿色、环保的发展要求。发明。

13、内容 0005 本发明的目的是提供一种 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物、其制备方法及其应用。 0006 一种 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，其分子结构式为： 0007 说明书 CN 103030608 A 4 2/9 页 5 0008 其中， R 为苯基、苄基、对甲基苯基、对氯苯基或对硝基苯基。为了方便、简易、高效地得到上述 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，其反应方程式为： 0009 0010 其中， R 为苯基、苄基、对甲基苯基。

14、、对氯苯基或对硝基苯基。上述的 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物的制备方法，包括如下步骤： 0011 A、将脱氢枞酸与硫代氨基脲反应得 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0-1.5）： 1.0 ； 0012 B、将步骤 A 所得的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑与芳酰氯反应得 N-(5 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，所述 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑与芳酰氯的摩尔比为 1.0:（1.0-2.。

15、0）。 0013 为了提高反应效率，上述步骤 A 为：将脱氢枞酸溶于第一有机溶剂，并加入硫代氨基脲和闭环剂，回流反应 1-4h，得 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑；所述有第一机溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、甲醇或乙腈，所述闭环剂为 POCl3、盐酸、硫酸、磷酸、多聚磷酸或 Amberlyst-15，所述硫代氨基脲与脱氢枞酸的摩尔比为（1.0-1.5）： 1.0，所述闭环剂与脱氢枞酸的摩尔比为（1.5-2.0） :1.0。 0014 Amberlyst-15 是磺酸树脂中的一种，申请人经研究发现： Amberlyst-15 也。

16、具有优异的闭环效果。 0015 经上述步骤所得的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑为一粗产品，既可将步骤 A 所得产品直接用于步骤 B 的合成，也可将步骤 A 所得产品提纯后再用于步骤 B。上述步骤 A 的反应终点优选通过薄层色谱来分析，薄层色谱显示原料脱氢枞酸反应完全时，即可进入到下一步，申请人经研究发现，将反应物在 90-105下，回流反应 1-4h，原料脱氢枞酸反应完全。为了提高反应效率，所述闭环剂为 POCl3。POCl3既可作为溶解脱氢枞酸的溶剂，也可作为闭环剂。 0016 为了提高目标产物的纯度及抑菌性等性能，将步骤 A 所得的 5。

17、- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑按如下步骤提纯：说明书 CN 103030608 A 5 3/9 页 6 0017 将步骤 A 所得反应物料冷却至 40-50，除溶剂后溶于乙酸乙酯，并调节 pH 至 7-9 ； 0018 将步骤所得溶液倒入分液漏斗分液，所得上层油相蒸除溶剂后，用第二溶剂重结晶，得纯度不小于 95% 的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑，所述第二有机溶剂为乙酸乙酯、乙醚或丙酮。 0019 上述步骤中，除溶剂优选旋蒸除溶剂；调节pH时，优选用50%的氢氧化钾水溶液调节。 0020 为了提高反应效率，所述。

18、步骤 B 为： 0021 将步骤 A 所得的 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑溶于第三有机溶剂中，并加入缚酸剂，所述缚酸剂与 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的摩尔比为（1.5-2.0）： 1.0 ； 0022 在 0-5下、 20-40min 内将溶解在第三有机溶剂中的芳酰氯溶液滴加到步骤所得的物料中，滴加完毕后， 20-30下，反应 5-20h，得 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物；所述第三有机溶剂为二氯甲烷、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷或甲苯，所述 5- 脱氢枞基 -2- 氨。

19、基 -1,3,4- 噻二唑与芳酰氯的摩尔比为 1.0:（1.0-2.0）。 0023 经上述步骤所得的 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物为一粗产品，申请人经研究发现：上述粗产物有着优异的抑菌等性能，但为了进一步提高目标产物的纯度和抑菌性能性能优选将上述粗产品提纯。上述步骤的反应终点优选通过薄层色谱来分析，薄层色谱显示 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑反应完全时，即可结束反应，申请人经研究发现，将反应物在20-30下，反应5-20h， 5-脱氢枞基-2-氨基-1,3,4-噻二唑反应完全。 0024 为了提。

20、高产物的抑菌性等性能，所述的芳酰氯为苯甲酰氯、苯乙酰氯、对甲基苯甲酰氯、对氯苯甲酰氯或对硝基苯甲酰氯；所述的缚酸剂为碳酸钠、碳酸氢钠、三乙胺或吡啶。 0025 为了提高产物的纯度及抑菌性等性能，将步骤 B 所得 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物按如下方法提纯：将步骤B所得物料酸洗、水洗、用第四溶剂重结晶后，真空干燥，得纯度不小于 95% 的 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物；所述真空干燥时真空度为 0.1Mpa、温度为 40-60，真空干燥时间为 10-24h ；所述第。

21、四有机溶剂为乙醇、乙酸乙酯、乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂或乙醇与环己烷的混合溶剂。 0026 上述制备方法中，第一溶剂、第二溶剂、第三溶剂和第四溶剂的用量均为将被溶物溶解即可。 0027 上述N-(5-脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2-基)-芳酰胺衍生物作为抑菌剂的应用。 0028 本发明以生物质资源松香衍生物脱氢枞酸为原料，将松香的稠合多脂环结构引入到噻二唑酰胺中，得 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物，不仅增加了此类化合物的脂溶性，而且提高了松香的附加值，且本发明制备方法具有脱氢枞酸转化率高，制备方法简单等优点； N-(5-。

22、脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 芳酰胺衍生物有抑菌效果，且对绿脓假单胞菌都的抑菌效果更佳，最低抑菌浓度为 4g/mL，优于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠。附图说明说明书 CN 103030608 A 6 4/9 页 7 0029 图 15- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的红外谱图。 0030 图 25- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的质谱图。 0031 图 35- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的氢谱图。 0032 图 4 实施例 1 所得化合物 a 的红外谱图。 0033 图 5 实施例 1 所得化合。

23、物 a 的质谱图。 0034 图 6 实施例 1 所得化合物 a 的氢谱图。 0035 图 7 实施例 2 所得化合物 b 的红外谱图。 0036 图 8 实施例 2 所得化合物 b 的质谱图。 0037 图 9 实施例 2 所得化合物 b 的氢谱图。 0038 图 10 实施例 3 所得化合物 c 的红外谱图。 0039 图 11 实施例 3 所得化合物 c 的质谱图。 0040 图 12 实施例 3 所得化合物 c 的氢谱图。 0041 图 13 实施例 4 所得化合物 d 的红外谱图。 0042 图 14 实施例 4 所得化合物 d 的质谱图。 0043 图 15 实施例 4 所得化合物。

24、 d 的氢谱图。 0044 图 16 实施例 5 所得化合物 e 的红外谱图。 0045 图 17 实施例 5 所得化合物 e 的质谱图。 0046 图 18 实施例 5 所得化合物 e 的氢谱图。具体实施方式 0047 为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实施例。 0048 实施例 1 ： 0049 化合物 a 的制备： 0050 0051 用 40ml 无水二氯甲烷溶解 20mmol 干燥的脱氢枞酸，滴加 30mmol 无水 POCl3，然后加入 20mmol 的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应 1h（用薄层色谱（T。

25、LC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将上述反应物冷却至 50，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入 50% 氢氧化钾水溶液中和至 pH 为 7，将溶液倒入分液漏斗中分液，所得上层油相旋转蒸除溶剂，得 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑粗品，所得粗品用乙酸乙酯重结晶的到 4.86g5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑纯品。说明书 CN 103030608 A 7 5/9 页 8 0052 取 10mmol5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑溶解于四氢呋喃中，加入 15mmol 缚酸剂三乙胺，在。

26、 0-5内，滴加溶解在四氢呋喃的 15mmol 苯甲酰氯溶液，在 30min 内滴加完，滴加完后，在温度为 20下反应 10h，得到含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯甲酰胺的混合物料。并对含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯甲酰胺粗产物。用乙醇对 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为 0.1Mpa、温度为 55下进行真空。

27、干燥，得到 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯甲酰胺。收率： 85%。IR:=3149， 2955,2866,1667,1601,1581， 1494,1451， 676cm-1.MS(ESI(+)m/s460(M+H+)， 482(M+Na+).H NMR(DMSO,300MHz):=12.91(s,H,-CONH-),7.49-8.08(m,5H,Ar-H),6.80-7.18(m,3H,Ar- H),2.712.80(m， 2H,-CH-),2.022.69(m,10H,-CH2-),1.41-1.98(m,12H,-CH3).元素分析 ( 计值 )。

28、/%:C73.30(73.16)， H7.58(7.24)， N9.37(9.14)。 0053 实施例 2 ： 0054 化合物 b 的制备： 0055 0056 用 40ml 四氢呋喃溶解 20mmol 的脱氢枞酸，滴加 32mmol 盐酸，然后加入 22mmol 的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应 2h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至 50，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入 50% 氢氧化钾水溶液中和至pH为8，将溶液倒入分液漏斗中分液，所得上层油相旋转蒸除溶剂，得5-脱氢枞基 -2- 氨基 -1,。

29、3,4- 噻二唑粗品，所得粗品用乙醚重结晶的到 4.54g5 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑纯品。 0057 取10mmol5-脱氢枞基-2-氨基-1,3,4-噻二唑溶解于二氯甲烷中，加入16mmol缚酸剂碳酸钠，在0-5内，滴加溶解在二氯甲烷的16mmol苯乙酰氯溶液，在30min内滴加完，滴加完后，在温度为30下反应5h，得到含有N-(5-脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2基)苯乙酰胺的混合物料。并对含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯乙酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到N-(5-脱氢枞基-1,3,。

30、4噻二唑-2-基)-苯乙酰胺粗产物。用乙酸乙酯对 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯乙酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为0.1Mpa、温度为60下进行真空干燥，得到N-(5-脱氢枞基-1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 苯乙酰胺。收率： 80.5%。IR:=3152， 2922,2859,1694,1603,1495,1453， 653cm-1.MS(ESI(+)m/s474(M+H+)， 496(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):=12.63(s,H,-CO NH-),7.14-7.30(m,5H,Ar-H),6.78-6.96(m。

31、,3H,Ar-H),3.76(s,2H,-NHCO-CH2-),2.69 说明书 CN 103030608 A 8 6/9 页 9 2.77（m， 2H,-CH-） ,2.30 2.63(m,10H,-CH2-),1.37-1.95(m,12H,-CH3). 元素分析 ( 计值 )/%:C73.93(73.53)， H7.83(7.45)， N9.04(8.87)。 0058 实施例 3 ： 0059 化合物 c 的制备： 0060 0061 用 40ml 乙腈溶解 20mmol 干燥的脱氢枞酸，滴加 35mmol 硫酸，然后加入 22mmol 的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应。

32、 3h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至 50，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入 50% 氢氧化钾水溶液中和至pH为9，将溶液倒入分液漏斗中分液后，上层油相旋转蒸除溶剂，得5-脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑粗品，所得粗品用丙酮重结晶得到 4.97g5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑纯品。 0062 取 10mmol5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑溶解于甲醇中，加入 18mmol 缚酸剂碳酸氢钠，在 0-5内，滴加溶解在甲醇的 18mmol 对甲基苯甲。

33、酰氯溶液，在 30min 内滴加完，滴加完后，在温度为 25下反应 15h，得到含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2 基)-对甲基苯甲酰胺的混合物料。并对含有N-(5-脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2-基)-对甲基苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对甲基苯甲酰胺粗产物。用乙醇与乙酸乙酯的混合溶剂对 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对甲基苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为 0.1Mpa、温度为 45下进行真空干燥，得到 N-(5- 脱氢。

34、枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对甲基苯甲酰胺。收率： 83.2%。IR:=3150， 2928,2869,1660,1609,1508,1463， 681cm-1.MS(ESI(+)m/ s474(M+H+)， 496(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):=12.79(s,H,-CONH-),7.16 7.99(m,4H, Ar-H),6.81-6.98(m,3H,Ar-H),2.70-2.81(m,3H,Ar-CH3),2.362.67 （m， 2H,-CH-） ,1.71 2.02(m,10H,-CH2-),1.30-1.52(m,12H,-CH3). 元。

35、素分析 ( 计值 )/%:C73.76(73.53)， H7.80(7.45)， N8.89(8.87)。 0063 实施例 4 ： 0064 化合物 d 的制备： 0065 说明书 CN 103030608 A 9 7/9 页 10 0066 用 40ml 甲醇溶解 20mmol 干燥的脱氢枞酸，滴加 38mmol 多聚磷酸 ( 常州市戚墅堰精细化工有限公司 )，然后加入 22mmol 的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应 4h（用薄层色谱（TLC）检测反应进程，当脱氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至 50，旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入5。

36、0%氢氧化钾水溶液中和至pH为7，将溶液倒入分液漏斗中分液后，上层油相旋转蒸除溶剂，得 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑粗品，所得粗品用乙醚重结晶得到 4.68g5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑纯品。 0067 取 10mmol5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑溶解于甲苯中，加入 19mmol 缚酸剂吡啶。在 0-5内，滴加溶解在甲苯的 14mmol 对氯苯甲酰氯溶液，在 30min 内滴加完，滴加完后，在温度为 26下反应 20h，得到含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对。

37、氯苯甲酰胺的混合物料。并对含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对氯苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑-2-基)-对氯苯甲酰胺粗产物。用乙醇与环己烷的混合溶剂对N-(5-脱氢枞基-1,3,4 噻二唑 -2 基 )- 对氯苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为 0.1Mpa、温度为 58下进行真空干燥，得到 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对氯苯甲酰胺产品。收率： 85%。IR:=3119， 2945,2862,1658,1594,1492,1434。

38、， 678cm-1.MS(ESI(+)m/s494(M+H+)， 516(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):=13.02(s,H,-CONH-),7.55 8.09(m,4H,Ar-H),6.81- 7.19(m,3H,Ar-H),2.33 2.81（m， 2H,-CH-） ,1.71 2.01(m,10H,-CH2),1.42-1.52(m,12 H,-CH3). 元素分析 ( 计值 )/%:C67.95(68.06)， H6.72(6.53)， N8.58(8.50)。 0068 实施例 5 ： 0069 化合物 e 的制备： 0070 0071 用 40ml 二氯甲烷溶。

39、解 20mmol 干燥的脱氢枞酸，加入 40mmolAmbelyst-15，然后加入 22mmol 的硫代氨基脲，并在搅拌下回流反应 3h（用波层色谱（TLC）检测反应进程，当脱说明书 CN 103030608 A 10 8/9 页 11 氢枞酸反应完全后，反应结束）；将反应物料冷却至 40，过滤，滤液旋转蒸除溶剂后溶于乙酸乙酯，加入 50% 氢氧化钾水溶液中和至 pH 为 8，将溶液倒入分液漏斗中分液后，上层油相旋转蒸除溶剂，得 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑粗品，所得粗品用丙酮重结晶得到 5.00g5- 脱氢枞基 -2- 氨。

40、基 -1,3,4- 噻二唑纯品。 0072 取 10mmol5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑溶解于四氢呋喃中，加入 20mmol 缚酸剂三乙胺。在 0-5内，滴加溶解在四氢呋喃的 20mmol 对硝基苯甲酰氯溶液，在 30min 内滴加完，滴加完后，在温度为 28下反应 15h，得到含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对硝基苯甲酰胺的混合物料。并对含有 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对硝基苯甲酰胺的混合物料进行经酸洗、水洗，旋转蒸除溶剂，得到 N-(5- 脱氢枞基-1,3,4噻二唑-2-。

41、基)-对硝基苯甲酰胺粗产物。用乙醇对N-(5-脱氢枞基-1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对硝基苯甲酰胺粗产物进行重结晶后，在真空度为 0.1Mpa、温度为 52下进行真空干燥，得到 N-(5- 脱氢枞基 -1,3,4 噻二唑 -2- 基 )- 对硝基苯甲酰胺。收率： 81.4%。IR:=3138， 2930,2859,1668,1604,1494,1436， 665cm-1.MS(ESI(+)m/s505(M+H+)， 527(M+Na+).HNMR(DMSO,300MHz):=13.41(s,H,-CONH-),8.25 8.35(m,4H,Ar-H),6.81 -7.19。

42、(m,3H,Ar-H),2.70-2.81(m,3H,Ar-CH3),2.33 2.79 （m， 2H,-CH-） ,1.71 2.01(m, 10H,-CH2-),1.26-1.51(m,12H,-CH3).元素分析(计值)/%:C66.58(66.64),H6.66(6.39), N11.21(11.10)。 0073 实施例 6 ： 0074 采用平板二倍稀释法，测定化合物的最低抑菌浓度（MIC）。MH 培养基，杭州天和微生物试剂有限公司，按配方配制高压灭菌后， 56水浴恒温。对照药物选择新洁尔灭和氨苄青霉素钠。 0075 试验菌株选取致病菌 6 株，菌株如下：大肠。

43、杆菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、产气杆菌、肺炎克雷伯杆菌。 0076 分别称取样品适量，置于无菌试管，加入二甲亚砜溶解，得 2560g/mL 溶液，取 2mL 加入 2mL 无菌水，得 1280g/mL 溶液；同法依次取 2mL 样品加入 2mL 无菌水系列倍比稀释，得浓度分别为 2560、 1280、 640、 320、 160、 80、 40、 20g/mL 的系列样品溶液。分别取上述样品溶液 1mL、 MH 琼脂培养基 9mL 加入到 9cm 无菌平板上，立即混匀，置于水平台待凝后得到浓度依次为 256、 128、 64、 32、 16、。

44、 8、 4、 2g/mL 的含药平板。样品指上述实施例得到的 a、 b、 c、 d、 e 及洁尔灭和氨苄青霉素钠。 0077 将培养好的6种菌种用无菌水配制成菌悬液，与0.5号麦氏比浊管比浊，适当稀释至浓度约 108CFU/mL。用移液管向每个含药平板中各加入 2L 菌悬液，倒置放人培养箱内，在 30下培养 30h 后，观察细菌生长情况。 0078 表 1 ：化合物 a-e 的抑菌活性 (g/mL) 0079 说明书 CN 103030608 A 11 9/9 页 12 0080 A:大肠杆菌(CMCC-44102),B:金黄色葡萄球菌(CMCC-26003),C:肺炎克雷伯。

45、细菌 (GIM-1.279),D: 绿脓假单胞菌 (CMCC-10104),E: 产气肠杆菌 (GIM-1.234),F: 表皮葡萄球菌 (CMCC-26069), 0081 实验结果表明化合物 a、 b、 c、 d 和 e 对绿脓假单胞菌都有抑菌效果，而且对绿脓假单胞菌的抑菌效果高于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠，它们的最低抑菌浓度分别为 4g/mL， 8g/mL， 8g/mL， 8g/mL， 8g/mL。化合物 b 对于产气肠杆菌的抑菌效果高于市售杀菌剂新洁尔灭和氨苄青霉素钠，它的最低抑菌浓度为 64g/mL。 0082 说明：实施例 1-5 所得的 5- 脱氢枞基 -2。

46、- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的各种谱图无差异，因此只提供了 5- 脱氢枞基 -2- 氨基 -1,3,4- 噻二唑的一套图谱。说明书 CN 103030608 A 12 1/11 页 13 图 1 图 2 说明书附图 CN 103030608 A 13 2/11 页 14 图 3 图 4 说明书附图 CN 103030608 A 14 3/11 页 15 图 5 图 6 说明书附图 CN 103030608 A 15 4/11 页 16 图 7 图 8 说明书附图 CN 103030608 A 16 5/11 页 17 图 9 说明书附图 CN 103030608 A 17 6/11 页 18 图 10 图 11 说明书附图 CN 103030608 A 18 7/11 页 19 图 12 说明书附图 CN 103030608 A 19 8/11 页 20 图 13 图 14 说明书附图 CN 103030608 A 20 9/11 页 21 图 15 说明书附图 CN 103030608 A 21 10/11 页 22 图 16 图 17 说明书附图 CN 103030608 A 22 11/11 页 23 图 18 说明书附图 CN 103030608 A 23 。

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