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1、(10)申请公布号 CN 102864199 A (43)申请公布日 2013.01.09 CN 102864199 A *CN102864199A* (21)申请号 201210336484.8 (22)申请日 2012.09.08 C12P 21/06(2006.01) C07K 2/00(2006.01) C07K 1/34(2006.01) C12R 1/69(2006.01) (71)申请人 长沙帮得生物科技有限公司 地址 410000 湖南省长沙市长沙高新区麓谷 大道 627 号 (72)发明人 杨秀华 隆前进 周江 李珍 (54) 发明名称 一种利用米渣生产抗氧化多肽的方法 (5。
2、7) 摘要 本发明公开的一种利用米渣生产抗氧化多肽 的方法， 涉及食品加工技术领域， 利用经有机酸、 抗生素发酵和淀粉糖生产所得副产物米渣作为 原料， 其主要工艺步骤包括 ： A、 种曲制备 ； B、 前发 酵 ； C、 后发酵 ； D、 透析 ； E、 袋外透析液冷冻干燥 ； F、 层析 ； G、 层析液冷冻干燥。具有工艺简单、 投入 少、 产品无潜在安全隐患、 且能利用非水溶性米渣 蛋白生产等特点， 既可适用米渣作原料， 也可适用 其它的非水溶性蛋白作原料， 进行抗氧化多肽生 产。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发。
3、明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 4 页 1/1 页 2 1. 一种利用米渣生产抗氧化多肽的方法， 其特征在于工艺过程如下 ： A、 种曲制备 ： 将米渣蒸煮后调制成含水量为 45-65的种曲发酵料， 再加入食品级发 酵菌种米曲霉， 其孢子接种量为 2-8106 个 / 克， 拌均后置于湿度 80-95、 温度 25-32 条件下， 发酵培养 3-5 天， 成为种曲料， 备用 ； B、 前发酵 ： 另取米渣蒸煮后调制成含水量为 45-65的发酵预料， 再加入占发酵预料 重量1-10的种曲料， 拌匀， 置于湿度80-95、 温度25-32条件下， 发酵培养3-5天， 成为 前发酵料， 备用。
4、 ； C、 后发酵 ： 将备用的前发酵料投入无菌水中， 其水的用量按照每 10g 前发酵料加水 60-100ml 计算 ； 然后， 在 40-42条件下， 进行后发酵 5-7 天， 成为后发酵料， 备用 ； D、 透析 ： 将备用的后发酵料置于 20KD 截留透析袋中， 在 3-10条件下透析 12-24 小 时， 取袋外透析液， 备用 ； E、 袋外透析液冷冻干燥 ： 将备用的袋外透析液进行冷冻干燥， 条件为 ： -30-45， 真 空度 0.4-200Pa， 得冻干粉， 备用 ； F、 层析 ： 将备用的冻干粉配成10-30mg/ml的溶液， 过Sephadex G-25葡聚糖凝胶， 得自。
5、 动部分收集器收集的层析液， 备用 ； G、 层析液冷冻干燥 ： 将备用的层析液进行冷冻干燥， 条件为 ： -30-45， 真空度 0.4-200Pa， 所得粉末即为抗氧化多肽。 权 利 要 求 书 CN 102864199 A 2 1/4 页 3 一种利用米渣生产抗氧化多肽的方法 技术领域 0001 本发明涉及食品加工技术领域， 特别是一种利用米渣生产抗氧化多肽的方法。 背景技术 0002 多肽是 - 氨基酸以肽链连接在一起而形成的化合物， 它也是蛋白质水解的中间 产物， 通常由 10-100 氨基酸分子脱水缩合而成。多肽化合物易被人体消化吸收， 并具有防 病、 治病、 调节人体生理机能的作。
6、用， 特别是其具有较强的抗氧化性， 因而， 被称为抗氧化多 肽， 是极具潜力的一种功能性食品基料， 已逐渐成为 21 世纪的健康食品。目前， 多肽的生产 方法主要有酸解法、 碱解法和酶法， 且大多采用大豆或其副产品作为生产原料。 如日本采用 豆粕作为原料， 用酸解法生产的 “大豆多肽” ， 用作 “食品添加剂” ， 主要用于生产老人和儿童 食品， 其目的是增强这两种人群对食品营养的吸收 ； 由于生产时， 所用的酸性化学物质难以 除尽， 而且有苦味， 需用活性炭吸附、 脱苦， 而活性炭免不了会侵入肽体。酶法生产多肽， 是 国内生产多肽的主流方法 ； 酶法生产是用人体所需要的食品级植物蛋白酶， 将。
7、人体平常所 食的食物蛋白质酶解成小分子活性多肽 ； 如武汉九生堂生产的 “大豆多肽” ， 所用原料是含 量在 90以上的大豆分离蛋白， 水解方法是酶法， 所用的酶属食品级植物蛋白酶 ； 所生产 的 “大豆多肽” 无苦味， 且风味芳香宜人， 对人体无任何毒副作用。 0003 米渣是以早籼米、 碎米、 陈化米等低值米为原料， 经有机酸、 抗生素发酵和淀粉糖 生产所得副产物， 价格低廉， 产量巨大， 淀粉糖生产每消耗7吨大米就要产生1吨的米渣。 在 淀粉糖生产过程中， 大米经高温淀粉酶液化水解， 板框过滤后所剩的残渣， 其蛋白质含量在 40以上， 并含有大量的糊精和多聚糖。同时， 在大米生产淀粉糖的。
8、过程中， 蛋白质经高温 处理后变性严重， 水溶性、 起泡性、 乳化性等蛋白特性基本丧失， 限制了其在食品中的应用。 一直以来， 米渣仅被用作动物饲料， 这是对蛋白质资源的极大浪费。中国专利 ( 专利申请 号为 200810163917.8)“一种利用米渣蛋白制取米蛋白多肽粉方法” ， 是以淀粉糖厂的副产 品米渣蛋白为原料， 经过洗涤、 水解、 脱盐、 干燥等一系列工序制得食品级的米蛋白多肽粉 ； 所制得的米蛋白多肽粉中蛋白含量 77， 其中分子量在 1000 左右的小肽占蛋白总量的 67 ； 米蛋白多肽粉不但保持了米蛋白本身低过敏性， 高生物价等优势， 而且由于其中含有 了大量的小肽， 在消化。
9、吸收和保健功能方面有显著的功能。 发明内容 0004 本发明的目的在于提供一种工艺简单、 投入少、 产品无潜在安全隐患、 且能利用非 水溶性米渣蛋白生产食品级抗氧化多肽的方法。 0005 为实现上述目的， 本发明的解决方案是发明一种利用米渣生产抗氧化多肽的方 法， 其工艺过程如下 ： 0006 A、 种曲制备 ： 将米渣蒸煮后调制成含水量为 45-65的种曲发酵料， 再加入食 品级发酵菌种米曲霉， 其孢子接种量为 2-8106个 / 克， 拌均后置于湿度 80-95、 温度 25-32条件下， 发酵培养 3-5 天， 成为种曲料， 备用 ； 说 明 书 CN 102864199 A 3 2/4。
10、 页 4 0007 B、 前发酵 ： 另取米渣蒸煮后调制成含水量为 45-65的发酵预料， 再加入占发酵 预料重量1-10的种曲料， 拌匀， 置于湿度80-95、 温度25-32条件下， 发酵培养3-5天， 成为前发酵料， 备用 ； 0008 C、 后发酵 ： 将备用的前发酵料投入无菌水中， 其水的用量按照每 10g 前发酵料加 水 60-100ml 计算 ； 然后， 在 40-42条件下， 进行后发酵 5-7 天， 成为后发酵料， 备用 ； 0009 D、 透析 ： 将备用的后发酵料置于 20KD 截留透析袋中， 在 3-10条件下透析 12-24 小时， 取袋外透析液， 备用 ； 0010。
11、 E、 袋外透析液冷冻干燥 ： 将备用的袋外透析液进行冷冻干燥， 条件为 ： -30-45， 真空度 0.4-200Pa， 得冻干粉， 备用 ； 0011 F、 层析 ： 将备用的冻干粉配成10-30mg/ml的溶液， 过Sephadex G-25葡聚糖凝胶， 得自动部分收集器收集的层析液， 备用 ； 0012 G、 层析液冷冻干燥 ： 将备用的层析液进行冷冻干燥， 条件为 ： -30-45， 真空度 0.4-200Pa， 所得粉末即为抗氧化多肽。 0013 本发明的利用米渣生产抗氧化多肽的方法， 并采用种曲制备、 前发酵和后发酵三 步工序， 即可将米渣蛋白水解成抗氧化多肽， 因而， 其工艺比。
12、较简单， 生产条件容易控制， 无 需任何特殊设备， 故投入也比较少 ； 同时， 所选用的发酵菌种 - 米曲霉为传统酿造食品所 用的菌株， 且在发酵过程中， 既不添加酸碱， 也没有添加其它任何养分， 仅利用米渣中富含 的糊精和多聚糖， 为微生物的生长代谢提供碳源和氮源， 系生物水解， 环保低碳 ； 也不需要 后续的脱酸脱碱， 因而， 其产品无潜在的安全隐患。 0014 据检测， 根据本发明方法生产的抗氧化多肽， 其中 ： 蛋白质含量 88， 分子 量在 200Da-2000Da 之间， 分子量低于 1000Da 的比率达 70， DPPH 自由基清除力为 79.1 -83.2。 具体实施方式 0。
13、015 以下结合实施例， 对本发明作进一步的说明。 下面的说明是采用例举的方式， 但本 发明的保护范围不应局限于此。 0016 本发明的利用米渣生产抗氧化多肽的方法， 主要有以下工艺步骤 ： 0017 A、 种曲制备 ： 制成种曲料 ； 0018 B、 前发酵 ： 制成前发酵料 ； 0019 C、 后发酵 ： 制成后发酵料 ； 0020 D、 透析 ： 制得袋外透析液 ； 0021 E、 袋外透析液冷冻干燥 ： 制得冻干粉 ； 0022 F、 层析 ： 制得层析液 ； 0023 G、 层析液冷冻干燥 ： 制成抗氧化多肽。 0024 实施例一 ： 0025 A、 种曲制备 ： 取米渣 ( 经有机。
14、酸、 抗生素发酵和淀粉糖生产所得副产物， 下同 )， 蒸 煮后调制成含水量为 55的种曲发酵料 0.25kg， 再加入食品级发酵菌种米曲霉， 孢子接种 量按 4106个 / 克计算， 为 1109个孢子， 拌均后置于湿度 85、 温度 28条件下， 发酵培 养 4 天， 得 0.25kg 种曲料， 备用 ； 说 明 书 CN 102864199 A 4 3/4 页 5 0026 B、 前发酵 ： 另取米渣蒸煮后调制成含水量为 55的发酵预料 5kg， 再加入 0.25kg 的种曲料， 拌匀， 置于湿度 85、 温度 28条件下， 发酵培养 4 天， 得 5.25kg 前发酵料， 备 用 ； 0。
15、027 C、 后发酵 ： 将备用的 5.25kg 前发酵料投入 42L 水中， 拌均 ； 然后， 在 41条件下， 进行后发酵 6 天， 得 47.25kg 后发酵料， 备用 ； 0028 D、 透析 ： 将备用的 47.25kg 后发酵料置于 20KD 截留透析袋中， 在 7条件下透析 18 小时， 得 150L 袋外透析液， 备用 ； 0029 E、 袋外透析液冷冻干燥 ： 将备用的袋外透析液在 -35， 真空度 100Pa 条件下， 冷 冻干燥， 得冻干粉 2.82kg， 备用。 0030 F、 层析 ： 将备用的冻干粉溶解成 20mg/ml 的溶液， 过 Sephadex G-25 葡。
16、聚糖凝胶， 得自动部分收集器收集的层析液 30L， 备用 ； 此过程中， 可以脱除所含的盐分 ( 下同 ) ； 0031 G、 层析液冷冻干燥 ： 将备用的层析液在 -35、 真空度 100Pa 条件下进行冷冻干 燥， 得 2.6kg 冷冻干燥粉末， 即为抗氧化多肽。 0032 实施例二 ： 0033 A、 种曲制备 ： 取米渣 ( 经有机酸、 抗生素发酵和淀粉糖生产所得副产物， 下同 )， 蒸 煮后调制成含水量为 45的种曲发酵料 0.25kg， 再加入食品级发酵菌种米曲霉， 孢子接种 量按 2106个 / 克计算， 为 5108个孢子， 拌均， 置于湿度 85、 温度 28条件下， 发酵培。
17、 养 4 天， 得 0.25kg 种曲料， 备用 ； 0034 B、 前发酵 ： 另取米渣蒸煮后调制成含水量为 45的发酵预料 5kg， 再加入 0.25kg 的种曲料， 拌匀， 置于湿度 85、 温度 28条件下， 发酵培养 4 天， 得 5.25kg 前发酵料， 备 用 ； 0035 C、 后发酵 ： 将备用的 5.25kg 前发酵料投入 31.5L 水中， 拌均 ； 然后， 在 41条件 下， 进行后发酵 6 天， 得 36.75kg 后发酵料， 备用 ； 0036 D、 透析 ： 将备用的 36.75kg 后发酵料置于 20KD 截留透析袋中， 在 7条件下透析 18 小时， 得 10。
18、0L 袋外透析液， 备用 ； 0037 E、 袋外透析液冷冻干燥 ： 将备用的袋外透析液在 -30， 真空度 0.4Pa 条件下， 冷 冻干燥， 得冻干粉 2.56kg， 备用 ； 0038 F、 层析 ： 将备用的冻干粉溶解成 10mg/ml 的溶液， 过 Sephadex G-25 葡聚糖凝胶， 得自动部分收集器收集的层析液 20L， 备用 ； 0039 G、 层析液冷冻干燥 ： 将备用的层析液在 -30、 真空度 0.4Pa 条件下进行冷冻干 燥， 得 2.4kg 冷冻干燥粉末， 即为抗氧化多肽。 0040 实施例三 ： 0041 A、 种曲制备 ： 取米渣 ( 经有机酸、 抗生素发酵和。
19、淀粉糖生产所得副产物， 下同 )， 蒸 煮后调制成含水量为 65的种曲发酵料 0.25kg， 再加入食品级发酵菌种米曲霉， 孢子接种 量按 8106个 / 克计算， 为 2109个孢子， 拌均， 置于湿度 85、 温度 28条件下， 发酵培 养 4 天， 得 0.25kg 种曲料， 备用 ； 0042 B、 前发酵 ： 另取米渣蒸煮后调制成含水量为 65的发酵预料 5kg， 再加入 0.25kg 的种曲料， 拌匀， 置于湿度 85、 温度 28条件下， 发酵培养 4 天， 得 5.25kg 前发酵料， 备 用 ； 说 明 书 CN 102864199 A 5 4/4 页 6 0043 C、 后。
20、发酵 ： 将备用的 5.25kg 前发酵料投入 52.5L 水中， 拌均 ； 然后， 在 41条件 下， 进行后发酵 6 天， 得 57.75kg 后发酵料， 备用 ； 0044 D、 透析 ： 将备用的 57.75kg 后发酵料置于 20KD 截留透析袋中， 在 7条件下透析 18 小时， 得 160L 袋外透析液， 备用 ； 0045 E、 袋外透析液冷冻干燥 ： 将备用的袋外透析液在 -45， 真空度 200Pa 条件下， 冷 冻干燥， 得冻干粉 2.66kg， 备用 ； 0046 F、 层析 ： 将备用的冻干粉溶解成 30mg/ml 的溶液， 过 Sephadex G-25 葡聚糖凝胶， 得自动部分收集器收集的层析液 35L， 备用 ； 0047 G、 层析液冷冻干燥 ： 将备用的层析液在 -45、 真空度 200Pa 条件下进行冷冻干 燥， 得 2.5kg 冷冻干燥粉末， 即为抗氧化多肽。 0048 下表是三个实施例生产时的指标值和抗氧化多肽的主要检测指标 ： 0049 0050 本发明的利用米渣生产抗氧化多肽的方法， 既可适用米渣作原料， 也可适用其它 的非水溶性蛋白作原料， 进行抗氧化多肽生产。 说 明 书 CN 102864199 A 6 。