一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法技术领域
本发明属于海藻多糖的提取技术领域，具体地，涉及一种生物酶解法提取褐藻糖
胶的方法。
背景技术
海藻是生长在海中的藻类，一般而言，藻类主要可分为绿藻、褐藻、红藻及蓝藻等
四类，是植物界的隐花植物，藻类包括数种不同类以光合作用产生能量的生物。海藻富含营
养成分和功能性成分，从海藻提炼出来的藻胶或海藻多糖具有特殊乳化性、凝胶性和药用
价值、有增强免疫力及抗癌活性，因而逐渐应用于工业和医药产业中。
海藻多糖具有抑制病毒、降低胆固醇、降血糖及降血脂等效果。其中，褐藻糖胶是
一种存在于所有褐藻中的细胞多糖。近年来的研究发现，褐藻糖胶具有抗氧化、抗凝血、抗
肿瘤、抗病毒、抑制补体激活及吸收重金属等功能，为一种重要的机能性保健素材，可将其
用于兽药的制备。因此，如何从海藻中萃取出褐藻糖胶为一重要课题。
褐藻糖胶萃取方法，
一种是为用乙醇、丙酮和氯仿进行预处理，接着将样品经脱脂、脱盐和干燥后得干粉，
再以热水萃取得到粗萃物，最后将粗萃物进一步纯化可得褐藻糖胶。此方法所制备的褐藻
糖胶的萃取率为干粉重量的6.5％。
一种是将藻体切成小片，浸在甲醛中，再以热水萃取得到粗萃物，最后将粗萃物进
一步纯化可得褐藻糖胶。
一种是用甲醇预处理后，以盐酸萃取预处理物，离心后取沉淀物再次萃取，合并上
清液，用氢氧化钠中和，真空蒸发至干后溶于0.5公升水而制备为粗萃物，最后将粗萃物进
一步纯化可得褐藻糖胶。此方法所制备的褐藻糖胶的萃取率为干粉重量的27．2％。
现有的提取方法存在以下不足：
（1）以上方法不能彻底破坏细胞壁结构，而使细胞壁内的褐藻糖胶充分释放出来，提取
率低；
（2）产品外观为浅黄色，不够美观，还留有藻腥味，影响制品的再次利用；
（3）使用大量的乙醇、丙酮、氯仿和甲醇等有机溶液无机溶液进行处理，不够环保。
生物酶解法具有针对性强，提取效率高的优点。目前国内利用生物酶解法提取褐
藻糖胶方法还比较少，但也存在有效物质含量低的缺陷。
因此，如何发展一种可改善上述技术缺陷的褐藻糖胶提取方法，为相关技术领域
急需解决的问题。
发明内容
针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方
法。
本发明提供的褐藻糖胶提取方法，采用生物酶解法，基于海带细胞壁的结构和成
分基础上，分阶段，适量地加相关酶，以使细胞壁彻底地裂解，将其中的褐藻糖胶充分的释
放出来，以此提高褐藻糖胶的提取率；在提取过程中加入改性凹凸棒土进行脱色和去除腥
味，使制品外观更加纯净；另外，简化提取步骤，减少化学原料的使用，达到环保的目的。
根据本发明提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量5-7倍的水，搅拌均匀，浸泡12-36小时后，将浆液转入
酶解容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控制在4.5-6.5
之间，温度控制在45-55℃之间，反应8-12小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.0-10.0之间，温度控制在40-
70℃之间，反应7-12小时，冷却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.0-9.0之间，温度控制在30-60℃之
间，反应3-11小时，冷却，得产品三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量5-7％的氯化钠和重量10-15 倍的水，在50-80℃的温
度条件下，反应120-160分钟，得到褐藻酸钠胶状物；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其0.2-5％的改性凹凸棒土，脱色除腥味20-
40min，得产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；用适量水洗涤残渣，再
次离心，得到产品六；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为90-94％的酒精，脱水15-30min，得到固相褐藻糖
胶，酒精与产品六的体积比为1.5∶1。
优选地，所述步骤（3）中酸性纤维素酶、半纤维素酶加入量分别为步骤（1）中加水
后浆液重量的9-11%。
优选地，所述步骤（4）中碱性果胶酶加入量为步骤（1）中加水后浆液重量的6-10%。
优选地，所述步骤（4）中蛋白酶加入量为步骤（1）中加水后浆液重量的3-7%。
优选地，步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控
制在5.5之间，温度控制在48℃，反应9小时。
优选地，所述步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.5，温度控制
在52℃，反应8小时。
优选地，所述步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.9，温度控制在42
℃，反应7小时。
优选地，向所述步骤（7）得到的产品四中加入700-800U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶
解，加入量为产品四重量的10-15％，搅拌均匀，再加质量浓度为8-9％的NaOH溶液，调pH至
7-9，在20-45℃的温度条件下酶解反应3-4小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解
酶酶解液通过离心机分离获得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖。
优选地，所述加入酒精质量浓度为80-90%，酒精与滤液的体积比为1.4∶1。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
（1）本发明提供的褐藻糖胶提取方法，采用生物酶解法，基于海带细胞壁的结构和成分
基础上，分阶段，适量地加酸性纤维素酶、半纤维素酶、碱性果胶酶、蛋白酶，以使细胞壁彻
底地裂解，将其中的褐藻糖胶充分的释放出来，以此提高褐藻糖胶的提取率；
（2）本发明提取过程中使用到多种酶，如酸性纤维素酶、半纤维素酶、碱性果胶酶、蛋白
酶等，由于酶的特性限制，其生物活性受到温度、PH值的因素的影响，本发明在酸性纤维素
酶、半纤维素酶、碱性果胶酶、蛋白酶各自最适温度范围和PH范围条件下进行生物酶解，在
各类酶生物活性最大的条件下提取褐藻糖胶，可最大程度地将褐藻糖胶从海带细胞壁中分
离出来，提高提取率，且提取过程安全环保；
（3）本发明在提取过程中加入改性凹凸棒土进行脱色和去除腥味，使制品外观更加纯
净；
（4）本发明简化提取步骤，减少化学原料的使用，达到环保的目的；
（5）本发明中使用的改性凹凸棒土，凹凸棒土是一种具有特殊层链状结构的天然纳米
无机物，具有较大的比表面积，吸附性强，脱色能力强，吸附能力好，具有脱色率高、不含残
留酸等诸多优点。凹凸棒石本身具有一定的L酸中心和B酸中心，通过改性后，可增强凹凸棒
土的酸性，提高其与游离脂肪酸、蜡质、色素等杂质的结合能力，从而能有效地吸附油脂中
的色素等杂质，是一种性能优异的吸附剂和脱色剂。本发明将其加入进行脱色和除腥，可使
提取的褐藻糖胶外观好，无腥味；
（6）本发明提取的褐藻糖胶具有抗氧化、抗凝血、抗肿瘤、抗病毒、抑制补体激活及吸收
重金属等作用，因此可用于兽药的制备。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明
而不用于限制本发明的范围。
本发明提供的褐藻糖胶提取方法，采用生物酶解法，基于海带细胞壁的结构和成
分基础上，分阶段，适量地加相关酶，以使细胞壁彻底地裂解，将其中的褐藻糖胶充分的释
放出来，以此提高褐藻糖胶的提取率；在提取过程中加入改性凹凸棒土进行脱色和去除腥
味，使制品外观更加纯净；另外，简化提取步骤，减少化学原料的使用，达到环保的目的。
本发明提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量5-7倍的水，搅拌均匀，浸泡12-36小时后，将浆液转入
酶解容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控制在4.5-6.5
之间，温度控制在45-55℃之间，反应8-12小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.0-10.0之间，温度控制在40-
70℃之间，反应7-12小时，冷却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.0-9.0之间，温度控制在30-60℃之
间，反应3-11小时，冷却，得产品三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量5-7％的氯化钠和重量10-15 倍的水，在50-80℃的温
度条件下，反应120-160分钟，得到褐藻酸钠胶状物；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其0.2-5％的改性凹凸棒土，脱色除腥味20-
40min，得产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；用适量水洗涤残渣，再
次离心，得到产品六；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为90-94％的酒精，脱水15-30min，得到固相褐藻糖
胶，酒精与产品六的体积比为1.5∶1。
优选地，所述步骤（3）中酸性纤维素酶、半纤维素酶加入量分别为步骤（1）中加水
后浆液重量的9-11%。
优选地，所述步骤（4）中碱性果胶酶加入量为步骤（1）中加水后浆液重量的6-10%。
优选地，所述步骤（4）中蛋白酶加入量为步骤（1）中加水后浆液重量的3-7%。
优选地，步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控
制在5.5，温度控制在48℃，反应9小时。
优选地，所述步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.5，温度控制
在52℃，反应8小时。
优选地，所述步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.9，温度控制在42
℃，反应7小时。
优选地，向所述步骤（7）得到的产品四中加入700-800U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶
解，加入量为产品四重量的10-15％，搅拌均匀，再加质量浓度为8-9％的NaOH溶液，调pH至
7-9，在20-45℃的温度条件下酶解反应3-4小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解
酶酶解液通过离心机分离获得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖。
优选地，所述加入酒精质量浓度为80-90%，酒精与滤液的体积比为1.4∶1。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
（1）本发明提供的褐藻糖胶提取方法，采用生物酶解法，基于海带细胞壁的结构和成分
基础上，分阶段，适量地加酸性纤维素酶、半纤维素酶、碱性果胶酶、蛋白酶，以使细胞壁彻
底地裂解，将其中的褐藻糖胶充分的释放出来，以此提高褐藻糖胶的提取率；
（2）本发明提取过程中使用到多种酶，如酸性纤维素酶、半纤维素酶、碱性果胶酶、蛋白
酶等，由于酶的特性限制，其生物活性受到温度、PH值的因素的影响，本发明在酸性纤维素
酶、半纤维素酶、碱性果胶酶、蛋白酶各自最适温度范围和PH范围条件下进行生物酶解，在
各类酶生物活性最大的条件下提取褐藻糖胶，可最大程度地将褐藻糖胶从海带细胞壁中分
离出来，提高提取率，且提取过程安全环保；
（3）本发明在提取过程中加入改性凹凸棒土进行脱色和去除腥味，使制品外观更加纯
净；
（4）本发明另外，简化提取步骤，减少化学原料的使用，达到环保的目的；
（5）本发明中使用的改性凹凸棒土，凹凸棒土是一种具有特殊层链状结构的天然纳米
无机物，具有较大的比表面积，吸附性强，脱色能力强，吸附能力好，具有脱色率高、不含残
留酸等诸多优点。凹凸棒石本身具有一定的L酸中心和B酸中心，通过改性后，可增强凹凸棒
土的酸性，提高其与游离脂肪酸、蜡质、色素等杂质的结合能力，从而能有效地吸附油脂中
的色素等杂质，是一种性能优异的吸附剂和脱色剂。本发明将其加入进行脱色和除腥，可使
提取的褐藻糖胶外观好，无腥味；
（6）本发明提取的褐藻糖胶具有抗氧化、抗凝血、抗肿瘤、抗病毒、抑制补体激活及吸收
重金属等作用，因此可用于兽药的制备。
实施例1
本实施例提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量7倍的水，搅拌均匀，浸泡12小时后，将浆液转入酶解
容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，酸性纤维素酶、半纤维素酶加
入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的11%，搅拌均匀，PH控制在4.5之间，温度控制在55
℃之间，反应8小时，冷却，得产品一，由于PH控制在6.5，温度控制在45℃的时候，酸性纤维
素酶、半纤维素酶的活性最高，因此酶解效果也是最好的，可将细胞壁中含有的纤维素酶
解，从而破坏细胞壁，而使其中的褐藻糖胶释放出来；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，碱性果胶酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重
量的10%，搅拌均匀，PH控制在8.0，温度控制在70℃，反应7小时，冷却，得产品二。细胞壁的
化学组成是胞间层基本上是由果胶质组成，果胶质是细胞壁主要的成分，如果植物组织中
的果胶质用果胶酶分解掉，细胞就会离散，因此本发明用果胶酶来酶解果胶质，使细胞壁离
散，同时果胶酶的最高活性条件是PH在10.0，温度控制在40℃，在此条件下，酶解反应较为
彻底，从而破坏细胞壁，而使其中的褐藻糖胶释放出来；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，蛋白酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的7%，搅
拌均匀，PH控制在6.0，温度控制在60℃，反应3，冷却，得产品三。蛋白质也是细胞壁成分的
重要组成部分，在PH为在9.0，温度控制在30℃条件下，蛋白酶的活性也是最高的，可以充分
分解细胞壁中蛋白质，从而促进细胞壁的离散，而使其中的褐藻糖胶释放出来；
步骤（6）：向产品三中加入其重量6％的氯化钠和重量11 倍的水，在60℃的温度条件
下，反应135分钟，得到褐藻酸钠胶状物。褐藻酸在一般情况下是不稳定的，将其与盐结合成
盐可稳定存在；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其1.5％的改性凹凸棒土，脱色除腥味25min，
得产品四。一般工艺提取出来的褐藻糖胶是淡黄色的，外观不好，且具有海藻腥味，加入改
性凹凸棒进行脱色和除腥，由于改性凹凸棒具有加大的比表面积，使其具有较强的吸附性，
因此对褐藻糖胶的颜色和气味上具有很好的调节效果；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；用适量水洗涤残渣，再
次离心，得到产品六。由于前面提取步骤中有各种酶残余，以及细胞壁离散后产生的杂质，
因此需要进行离心除杂，以保留褐藻糖胶，保证其纯度；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为92％的酒精，脱水28min，得到固相褐藻糖胶，酒精
与产品六的体积比为1.5∶1，通过酒精脱水，可提取纯度较高的褐藻糖胶。
向所述步骤（7）得到的产品四中加入750U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶解，加入量为
产品四重量的12％，搅拌均匀，再加质量浓度为8％的NaOH溶液，调pH至7，在28℃的温度条
件下酶解反应3小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解酶酶解液通过离心机分离获
得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖，所述加入酒精质量浓度为83%，酒精与
滤液的体积比为1.4∶1。褐藻糖胶在褐藻糖胶裂解酶的作用下分解，可得到聚合度较低的低
聚糖。
实施例2
本实施例提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量5倍的水，搅拌均匀，浸泡12小时后，将浆液转入酶解
容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，酸性纤维素酶、半纤维素酶加
入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的9%，搅拌均匀，PH控制在6.5，温度控制在45℃，反
应12小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，碱性果胶酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重
量的6%，搅拌均匀，PH控制在10.0，温度控制在40℃，反应12小时，冷却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，蛋白酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的7%，搅
拌均匀，PH控制在9.0，温度控制在30℃，反应11小时，冷却，得产品三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量5％的氯化钠和重量13 倍的水，在55℃的温度条件
下，反应130分钟，得到褐藻酸钠胶状物。褐藻酸在一般情况下是不稳定的，将其与盐结合成
盐可稳定存在；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其3.5％的改性凹凸棒土，脱色除腥味35min，
得产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为93％的酒精，脱水20min，得到固相褐藻糖胶，酒精
与产品六的体积比为1.5∶1，通过酒精脱水，可提取纯度较高的褐藻糖胶。
向所述步骤（7）得到的产品四中加入700-800U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶解，加入
量为产品四重量的12％，搅拌均匀，再加质量浓度为8％的NaOH溶液，调pH至7-9，在35℃的
温度条件下酶解反应3小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解酶酶解液通过离心机
分离获得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖，所述加入酒精质量浓度为88%，
酒精与滤液的体积比为1.4∶1。褐藻糖胶在褐藻糖胶裂解酶的作用下分解，可得到聚合度较
低的低聚糖。
实施例3
本实施例提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量5-7倍的水，搅拌均匀，浸泡12-36小时后，将浆液转入
酶解容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，酸性纤维素酶、半纤维素酶加
入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的9-11%，搅拌均匀，PH控制在4.5-6.5之间，温度控
制在45-55℃之间，反应8-12小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，碱性果胶酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重
量的6-10%，搅拌均匀，PH控制在8.0-10.0之间，温度控制在40-70℃之间，反应7-12小时，冷
却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，蛋白酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的3-7%，
搅拌均匀，PH控制在6.0-9.0之间，温度控制在30-60℃之间，反应3-11小时，冷却，得产品
三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量5-7％的氯化钠和重量10-15 倍的水，在50-80℃的温
度条件下，反应120-160分钟，得到褐藻酸钠胶状物。褐藻酸在一般情况下是不稳定的，将其
与盐结合成盐可稳定存在；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其0.2-5％的改性凹凸棒土，脱色除腥味20-
40min，得产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为90-94％的酒精，脱水15-30min，得到固相褐藻糖
胶，酒精与产品六的体积比为1.5∶1，通过酒精脱水，可提取纯度较高的褐藻糖胶。
向所述步骤（7）得到的产品四中加入700-800U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶解，加入
量为产品四重量的10-15％，搅拌均匀，再加质量浓度为8-9％的NaOH溶液，调pH至7-9，在
20-45℃的温度条件下酶解反应3-4小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解酶酶解
液通过离心机分离获得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖，所述加入酒精质
量浓度为80-90%，酒精与滤液的体积比为1.4∶1。褐藻糖胶在褐藻糖胶裂解酶的作用下分
解，可得到聚合度较低的低聚糖。
实施例4
本实施例提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量7倍的水，搅拌均匀，浸泡12小时后，将浆液转入酶解
容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控制在5.5之间，
温度控制在48℃，反应9小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.5，温度控制在52℃，反应8小
时，冷却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.9，温度控制在42℃，反应7小时，冷
却，得产品三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量7％的氯化钠和重量10倍的水，在80℃的温度条件下，
反应120分钟，得到褐藻酸钠胶状物；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其5％的改性凹凸棒土，脱色除腥味20min，得
产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；用适量水洗涤残渣，再
次离心，得到产品六；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为94％的酒精，脱水15min，得到固相褐藻糖胶，酒精
与产品六的体积比为1.5∶1。
所述步骤（3）中酸性纤维素酶、半纤维素酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重
量的11%。
所述步骤（4）中碱性果胶酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的6%。
所述步骤（4）中蛋白酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的7%。
向所述步骤（7）得到的产品四中加入800U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶解，加入量为
产品四重量的10％，搅拌均匀，再加质量浓度为9％的NaOH溶液，调pH至7，在45℃的温度条
件下酶解反应3小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解酶酶解液通过离心机分离获
得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖。
优选地，所述加入酒精质量浓度为90%，酒精与滤液的体积比为1.4∶1。
实施例5
本实施例提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量5倍的水，搅拌均匀，浸泡36小时后，将浆液转入酶解
容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控制在5.5之间，
温度控制在48℃，反应9小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.5，温度控制在52℃，反应8小
时，冷却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.9，温度控制在42℃，反应7小时，冷
却，得产品三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量5％的氯化钠和重量15 倍的水，在50℃的温度条件
下，反应160分钟，得到褐藻酸钠胶状物；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其0.2％的改性凹凸棒土，脱色除腥味40min，
得产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；用适量水洗涤残渣，再
次离心，得到产品六；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为90％的酒精，脱水30min，得到固相褐藻糖胶，酒精
与产品六的体积比为1.5∶1。
所述步骤（3）中酸性纤维素酶、半纤维素酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重
量的9%。
所述步骤（4）中碱性果胶酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的10%。
所述步骤（4）中蛋白酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的3-7%。
向所述步骤（7）得到的产品四中加入700U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶解，加入量为
产品四重量的15％，搅拌均匀，再加质量浓度为8％的NaOH溶液，调pH至9，在20℃的温度条
件下酶解反应4小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解酶酶解液通过离心机分离获
得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖。
所述加入酒精质量浓度为80%，酒精与滤液的体积比为1.4∶1。
实施例6
本实施例提供的一种生物酶解法提取褐藻糖胶的方法，包括如下步骤：
步骤（1）：海带预处理，清洗海带，切成小段、研磨成浆液；
步骤（2）：向浆液中加入浆液重量6倍的水，搅拌均匀，浸泡30小时后，将浆液转入酶解
容器内；
步骤（3）：向酶解容器内加入酸性纤维素酶、半纤维素酶，搅拌均匀，PH控制在5.5之间，
温度控制在48℃，反应9小时，冷却，得产品一；
步骤（4）：向产品一加碱性果胶酶，搅拌均匀，PH控制在8.5，温度控制在52℃，反应8小
时，冷却，得产品二；
步骤（5）：向产品二加蛋白酶，搅拌均匀，PH控制在6.9，温度控制在42℃，反应7小时，冷
却，得产品三；
步骤（6）：向产品三中加入其重量5-7％的氯化钠和重量13 倍的水，在560℃的温度条
件下，反应140分钟，得到褐藻酸钠胶状物；
步骤（7）：向褐藻酸钠胶状物加入重量为其3％的改性凹凸棒土，脱色除腥味30min，得
产品四；
步骤（8）：将得到的产品四通过离心机分离出残渣，得到产品五；用适量水洗涤残渣，再
次离心，得到产品六；
步骤（9）：向产品六加入质量浓度为93％的酒精，脱水25min，得到固相褐藻糖胶，酒精
与产品六的体积比为1.5∶1。
所述步骤（3）中酸性纤维素酶、半纤维素酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重
量的10%。
所述步骤（4）中碱性果胶酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的7%。
所述步骤（4）中蛋白酶加入量分别为步骤（1）中加水后浆液重量的4%。
向所述步骤（7）得到的产品四中加入750U/g褐藻糖胶裂解酶进行酶解，加入量为
产品四重量的13％，搅拌均匀，再加质量浓度为9％的NaOH溶液，调pH至8，在35℃的温度条
件下酶解反应3小时，得到褐藻胶裂解酶酶解液，将褐藻胶裂解酶酶解液通过离心机分离获
得滤液，将滤液用酒精脱水得到固相褐藻糖胶寡糖。
所述加入酒精质量浓度为85%，酒精与滤液的体积比为1.4∶1。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述
特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影
响本发明的实质内容。