利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410363650.2

申请日:

2014.07.29

公开号:

CN104087637A

公开日:

2014.10.08

当前法律状态:

驳回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的驳回IPC(主分类):C12P 21/00申请公布日:20141008|||实质审查的生效IPC(主分类):C12P 21/00申请日:20140729|||公开

IPC分类号:

C12P21/00; C12R1/665(2006.01)N; C12R1/10(2006.01)N

主分类号:

C12P21/00

申请人:

哈尔滨伟平科技开发有限公司

发明人:

吕庆茂

地址:

150016 黑龙江省哈尔滨市道里区安化街25号

优先权:

专利代理机构:

代理人:

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内容摘要

利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法涉及的是一种蛋白多肽的制作方法,具体地说是利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法。以食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉或食用脱脂大豆蛋白粉中的任何一种或二种或三种的混合物为原料分别接种地衣芽孢杆菌种子液和泡盛曲霉种子液发酵,发酵结束后经离心、浓缩、喷雾干燥即得成品。本发明的植物蛋白多肽是先后通过地衣芽孢杆菌和泡盛曲霉的发酵作用将植物蛋白降解成植物蛋白多肽,不仅降低了成本,而且通过两种微生物的分别作用对某些苦味肽基团进行修饰和重组,使不同小肽之间、小肽与氨基酸之间发生移接、重排,制得的蛋白多肽口感好、无苦味、无异味。

权利要求书

1.  利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法,其特征是经过如下加工过程制备而成:
⑴称取蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,氯化钠5.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 8-8.5,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基,取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至40℃,接种地衣芽孢杆菌,在120-160rpm、37-40℃的摇床上培养20-24小时即得地衣芽孢杆菌种子液;
⑵称取蔗糖 30.0g,硝酸钠3.0g,七水硫酸镁 0.5g,氯化钾0.5g,四水硫酸亚铁0.01g,磷酸氢二钾1.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 4-4.5,即得泡盛曲霉种子液培养基,取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至25℃,接种泡盛曲霉,在100-150rpm、25-28℃的摇床上培养20-24小时即得泡盛曲霉种子液;
⑶以食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉或食用脱脂大豆蛋白粉中的任何一种或二种或三种的混合物为原料,先加水混匀,使原料浓度控制在10-15%,将PH调整到8-8.5,然后在121℃条件下湿热灭菌30 分钟,降温到37-40℃,按5-8%的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在120-160rpm、37-40℃的摇床上发酵36-40小时,然后将发酵液PH调整到4-4.5,再将发酵液煮沸5-10分钟,降温至25-28℃,按5-8%的接种量接种泡盛曲霉种子液,在100-150rpm、25-28℃的摇床上发酵36-40小时,离心得清液,将清液加热浓缩到35-45Bx,然后喷雾干燥即得成品。

说明书

利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法
技术领域
本发明涉及的是一种蛋白多肽的制作方法,具体地说是利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法。
背景技术
多肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它是蛋白质水解的中间产物,由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由十几个到几十个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽,它们的分子量一般都低于10000D。植物蛋白多肽是植物蛋白质不完全水解的产物,植物蛋白多肽除了具有一般蛋白质的营养作用外,对人体还具有非常重要的不可替代的调节作用,这种作用几乎涉及到人的所有生理活动,如:内分泌、神经、消化、吸收、代谢、循环、生长生殖等等。目前,植物蛋白多肽主要应用于保健食品中,植物蛋白多肽对体弱多病者是一种长期营养补充。除了补充营养外,植物蛋白多肽还具有提高免疫力、抗疲劳、延缓衰老等生理功能。利用微生物发酵法将植物蛋白质降解为植物蛋白多肽,可以大大提高植物蛋白的附加值、为保健食品行业提供大量的优质原料,还可以为植物蛋白的深加工开辟一条新的途径。
发明内容
本发明的目的在于提供一种以植物蛋白为原料利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法。
本发明的目的是这样实现的:
以食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉或食用脱脂大豆蛋白粉中的任何一种或二种或三种的混合物为原料,先加水混匀,使原料浓度控制在10-15%,将PH调整到8-8.5,然后在121℃条件下湿热灭菌30 分钟,降温到37-40℃,按5-8%的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在120-160rpm、37-40℃的摇床上发酵36-40小时,然后将发酵液PH调整到4-4.5,再将发酵液煮沸5-10分钟,降温至25-28℃,按5-8%的接种量接种泡盛曲霉种子液,在100-150rpm、25-28℃的摇床上发酵36-40小时,离心得清液,将清液加热浓缩到35-45Bx,然后喷雾干燥即得成品。
本发明还包括如下特征:
所述的地衣芽孢杆菌种子液的制备方法为:称取蛋白胨 5.0g,牛肉膏3.0g,氯化钠5.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 8-8.5,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基。取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至40℃,接种地衣芽孢杆菌,在120-160rpm、37-40℃的摇床上培养20-24小时。
所述的泡盛曲霉种子液的制备方法为:称取蔗糖 30.0g,硝酸钠3.0g,七水硫酸镁 0.5g,氯化钾0.5g,四水硫酸亚铁0.01g,磷酸氢二钾1.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 4-4.5,即得泡盛曲霉种子液培养基。取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至25℃,接种泡盛曲霉,在100-150rpm、25-28℃的摇床上培养20-24小时。 
传统的酶法生产蛋白多肽,由于蛋白酶价格昂贵,所以成本较高。而本发明的植物蛋白多肽是以植物蛋白为原料,先后通过地衣芽孢杆菌和泡盛曲霉的发酵作用将植物蛋白降解成植物蛋白多肽,不仅降低了成本,而且通过两种微生物的分别作用对苦味肽基团进行修饰和重组,使不同小肽之间、小肽与氨基酸之间发生移接、重排,制得的蛋白多肽口感好、无苦味、无异味。
具体实施方案
本发明采用的菌株地衣芽孢杆菌CICC20197、泡盛曲霉CICC40534采购于中国工业微生物菌种保藏管理中心。
方式一:
称取蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,氯化钠5.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 8-8.5,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基。取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至40℃,接种地衣芽孢杆菌,在120-160rpm、37-40℃的摇床上培养20-24小时即得地衣芽孢杆菌种子液。
称取蔗糖 30.0g,硝酸钠3.0g,七水硫酸镁 0.5g,氯化钾0.5g,四水硫酸亚铁0.01g,磷酸氢二钾1.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 4-4.5,即得泡盛曲霉种子液培养基。取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至25℃,接种泡盛曲霉,在100-150rpm、25-28℃的摇床上培养20-24小时即得泡盛曲霉种子液。
称取一定质量的食用大米蛋白粉,先加水混匀,使原料浓度控制在12%,将PH调整到8,然后在121℃条件下湿热灭菌30 分钟,降温到37℃,按8%的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在150rpm、37℃的摇床上发酵36小时,然后将发酵液PH调整到4.5,再将发酵液煮沸10分钟,降温至25℃,按8%的接种量接种泡盛曲霉种子液,在130rpm、25℃的摇床上发酵40小时,离心得清液,将清液加热浓缩到40Bx,然后喷雾干燥即得成品。
方式二:
称取蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,氯化钠5.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 8-8.5,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基。取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至40℃,接种地衣芽孢杆菌,在120-160rpm、37-40℃的摇床上培养20-24小时即得地衣芽孢杆菌种子液。
称取蔗糖 30.0g,硝酸钠3.0g,七水硫酸镁 0.5g,氯化钾0.5g,四水硫酸亚铁0.01g,磷酸氢二钾1.0g,加水定容至 1000ml,调节PH 4-4.5,即得泡盛曲霉种子液培养基。取100ml种子液培养基于500ml三角瓶中,121℃灭菌20分钟,冷却至25℃,接种泡盛曲霉,在100-150rpm、25-28℃的摇床上培养20-24小时即得泡盛曲霉种子液。
按照质量比1:1:2的比例分别称取食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉、食用脱脂大豆蛋白粉,先加水混匀,使混合原料浓度控制在15%,将PH调整到8,然后在121℃条件下湿热灭菌30 分钟,降温到37℃,按5%的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在150rpm、37℃的摇床上发酵40小时,然后将发酵液PH调整到4.5,再将发酵液煮沸10分钟,降温至25℃,按5%的接种量接种泡盛曲霉种子液,在130rpm、25℃的摇床上发酵36小时,离心得清液,将清液加热浓缩到40Bx,然后喷雾干燥即得成品。

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1、10申请公布号CN104087637A43申请公布日20141008CN104087637A21申请号201410363650222申请日20140729C12P21/00200601C12R1/665200601C12R1/1020060171申请人哈尔滨伟平科技开发有限公司地址150016黑龙江省哈尔滨市道里区安化街25号72发明人吕庆茂54发明名称利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法57摘要利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法涉及的是一种蛋白多肽的制作方法,具体地说是利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法。以食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉或食用脱脂大豆蛋白粉中的任何一种或二种或三种的。

2、混合物为原料分别接种地衣芽孢杆菌种子液和泡盛曲霉种子液发酵,发酵结束后经离心、浓缩、喷雾干燥即得成品。本发明的植物蛋白多肽是先后通过地衣芽孢杆菌和泡盛曲霉的发酵作用将植物蛋白降解成植物蛋白多肽,不仅降低了成本,而且通过两种微生物的分别作用对某些苦味肽基团进行修饰和重组,使不同小肽之间、小肽与氨基酸之间发生移接、重排,制得的蛋白多肽口感好、无苦味、无异味。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104087637ACN104087637A1/1页21利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法,其特征是经过如下加工。

3、过程制备而成称取蛋白胨50G,牛肉浸取物30G,氯化钠50G,加水定容至1000ML,调节PH885,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基,取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至40,接种地衣芽孢杆菌,在120160RPM、3740的摇床上培养2024小时即得地衣芽孢杆菌种子液;称取蔗糖300G,硝酸钠30G,七水硫酸镁05G,氯化钾05G,四水硫酸亚铁001G,磷酸氢二钾10G,加水定容至1000ML,调节PH445,即得泡盛曲霉种子液培养基,取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至25,接种泡盛曲霉,在100150RPM、2528的。

4、摇床上培养2024小时即得泡盛曲霉种子液;以食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉或食用脱脂大豆蛋白粉中的任何一种或二种或三种的混合物为原料,先加水混匀,使原料浓度控制在1015,将PH调整到885,然后在121条件下湿热灭菌30分钟,降温到3740,按58的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在120160RPM、3740的摇床上发酵3640小时,然后将发酵液PH调整到445,再将发酵液煮沸510分钟,降温至2528,按58的接种量接种泡盛曲霉种子液,在100150RPM、2528的摇床上发酵3640小时,离心得清液,将清液加热浓缩到3545BX,然后喷雾干燥即得成品。权利要求书CN104087637A1。

5、/2页3利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法技术领域0001本发明涉及的是一种蛋白多肽的制作方法,具体地说是利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法。背景技术0002多肽是氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物,它是蛋白质水解的中间产物,由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由十几个到几十个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽,它们的分子量一般都低于10000D。植物蛋白多肽是植物蛋白质不完全水解的产物,植物蛋白多肽除了具有一般蛋白质的营养作用外,对人体还具有非常重要的不可替代的调节作用,这种作用几乎涉及到人的所有生理活动,如内分泌、神经、消化、吸收、。

6、代谢、循环、生长生殖等等。目前,植物蛋白多肽主要应用于保健食品中,植物蛋白多肽对体弱多病者是一种长期营养补充。除了补充营养外,植物蛋白多肽还具有提高免疫力、抗疲劳、延缓衰老等生理功能。利用微生物发酵法将植物蛋白质降解为植物蛋白多肽,可以大大提高植物蛋白的附加值、为保健食品行业提供大量的优质原料,还可以为植物蛋白的深加工开辟一条新的途径。发明内容0003本发明的目的在于提供一种以植物蛋白为原料利用微生物发酵法制作植物蛋白多肽的方法。0004本发明的目的是这样实现的以食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉或食用脱脂大豆蛋白粉中的任何一种或二种或三种的混合物为原料,先加水混匀,使原料浓度控制在1015,将P。

7、H调整到885,然后在121条件下湿热灭菌30分钟,降温到3740,按58的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在120160RPM、3740的摇床上发酵3640小时,然后将发酵液PH调整到445,再将发酵液煮沸510分钟,降温至2528,按58的接种量接种泡盛曲霉种子液,在100150RPM、2528的摇床上发酵3640小时,离心得清液,将清液加热浓缩到3545BX,然后喷雾干燥即得成品。0005本发明还包括如下特征所述的地衣芽孢杆菌种子液的制备方法为称取蛋白胨50G,牛肉膏30G,氯化钠50G,加水定容至1000ML,调节PH885,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基。取100ML种子液培养基于500。

8、ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至40,接种地衣芽孢杆菌,在120160RPM、3740的摇床上培养2024小时。0006所述的泡盛曲霉种子液的制备方法为称取蔗糖300G,硝酸钠30G,七水硫酸镁05G,氯化钾05G,四水硫酸亚铁001G,磷酸氢二钾10G,加水定容至1000ML,调节PH445,即得泡盛曲霉种子液培养基。取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至25,接种泡盛曲霉,在100150RPM、2528的摇床上培养2024小时。说明书CN104087637A2/2页40007传统的酶法生产蛋白多肽,由于蛋白酶价格昂贵,所以成本较高。而本发明的植物蛋。

9、白多肽是以植物蛋白为原料,先后通过地衣芽孢杆菌和泡盛曲霉的发酵作用将植物蛋白降解成植物蛋白多肽,不仅降低了成本,而且通过两种微生物的分别作用对苦味肽基团进行修饰和重组,使不同小肽之间、小肽与氨基酸之间发生移接、重排,制得的蛋白多肽口感好、无苦味、无异味。具体实施方案0008本发明采用的菌株地衣芽孢杆菌CICC20197、泡盛曲霉CICC40534采购于中国工业微生物菌种保藏管理中心。0009方式一称取蛋白胨50G,牛肉浸取物30G,氯化钠50G,加水定容至1000ML,调节PH885,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基。取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至40,接。

10、种地衣芽孢杆菌,在120160RPM、3740的摇床上培养2024小时即得地衣芽孢杆菌种子液。0010称取蔗糖300G,硝酸钠30G,七水硫酸镁05G,氯化钾05G,四水硫酸亚铁001G,磷酸氢二钾10G,加水定容至1000ML,调节PH445,即得泡盛曲霉种子液培养基。取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至25,接种泡盛曲霉,在100150RPM、2528的摇床上培养2024小时即得泡盛曲霉种子液。0011称取一定质量的食用大米蛋白粉,先加水混匀,使原料浓度控制在12,将PH调整到8,然后在121条件下湿热灭菌30分钟,降温到37,按8的接种量接种地衣芽孢杆。

11、菌种子液,在150RPM、37的摇床上发酵36小时,然后将发酵液PH调整到45,再将发酵液煮沸10分钟,降温至25,按8的接种量接种泡盛曲霉种子液,在130RPM、25的摇床上发酵40小时,离心得清液,将清液加热浓缩到40BX,然后喷雾干燥即得成品。0012方式二称取蛋白胨50G,牛肉浸取物30G,氯化钠50G,加水定容至1000ML,调节PH885,即得地衣芽孢杆菌种子液培养基。取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至40,接种地衣芽孢杆菌,在120160RPM、3740的摇床上培养2024小时即得地衣芽孢杆菌种子液。0013称取蔗糖300G,硝酸钠30G,七。

12、水硫酸镁05G,氯化钾05G,四水硫酸亚铁001G,磷酸氢二钾10G,加水定容至1000ML,调节PH445,即得泡盛曲霉种子液培养基。取100ML种子液培养基于500ML三角瓶中,121灭菌20分钟,冷却至25,接种泡盛曲霉,在100150RPM、2528的摇床上培养2024小时即得泡盛曲霉种子液。0014按照质量比112的比例分别称取食用大米蛋白粉、食用小麦蛋白粉、食用脱脂大豆蛋白粉,先加水混匀,使混合原料浓度控制在15,将PH调整到8,然后在121条件下湿热灭菌30分钟,降温到37,按5的接种量接种地衣芽孢杆菌种子液,在150RPM、37的摇床上发酵40小时,然后将发酵液PH调整到45,再将发酵液煮沸10分钟,降温至25,按5的接种量接种泡盛曲霉种子液,在130RPM、25的摇床上发酵36小时,离心得清液,将清液加热浓缩到40BX,然后喷雾干燥即得成品。说明书CN104087637A。

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