邻取代的苯甲酰胍、其制备方法、 其用作药物或诊断剂及含其药物 本发明涉及式I的邻取代的苯甲酰胍其中：R(2)和R(3)相互独立地代表氢、Cl、Br、I、(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基或-OR(5)；R(5)为(C1-C8)烷基或-CdH2d-(C3-C8)环烷基；-d为零、1或2；其中取代基R(2)和R(3)两者中总有一个为氢，但取代基R(2)和R(3)两者不同时为氢，以及其药学上耐受的盐。
优选满足下列条件的式I化合物，其中：R(2)和R(3)相互独立地代表氢、Cl、Br、I、(C1-C8)烷基、(C3-C8)环烷基或-OR(5)；R(5)代表(C1-C8)烷基；以及其药学上耐受的盐。
更优选下列化合物：2-氯-4-甲氧基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-甲氧基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-碘-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-甲基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-异丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-叔丁基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-3-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-4-甲基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-4-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-4-异丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-4-叔丁基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，2-氯-4-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酰胍盐酸盐，
如果取代基R(2)或R(3)之一具有一个或多个非对称中心，则它既可以是S也可以是R构型。该化合物可以以光学异构体、非对映体、外消旋物或以它们的混合物的形式存在。
所称的烷基可以是直链或支链的。
此外，本发明还涉及式I化合物的制备方法，其特征在于，将式II化合物与胍反应，其中R(2)和R(3)具有已给定的含义并且L代表易于被亲核取代的离去基团。
式II的活化了的酸衍生物，其中L是一个烷氧基，尤其是一个甲氧基或苯氧基，苯硫基-，甲硫基-，2-吡啶硫基，或一个氮杂环，优选1-咪唑基，是适合用已知的方法由基础地羧酰氯(式II，L＝Cl)制备的，而这个化合物又可以用已知的方法由基础的羧酸(式II，L＝OH)譬如与亚硫酰(二)氯制备。
除了化学式II(L＝Cl)的羧酰氯外，化学式II的其它活化的酸衍生物也可以用已知的方法直接由基础的苯甲酸衍生物(化学式II，L＝OH)制得，例如L＝OCH3的化学式II的甲酯是通过用气态的HCl在甲醇中处理获得，化学式II的咪唑化物是通过用羰基二咪唑处理[L＝1-咪唑基，Staab，应用化学，英文第1版351-367页(Angew，Chem.Int.Ed..Engl.1，351-367)(1962)]，混合的酐II是用Cl-COOC2H5或者是甲苯磺酰氯在三乙胺存在下在一种惰性溶剂中处理，也可以用二环己基碳化二亚胺(DCC)或者用O-[(氰基(乙氧羰基)亚甲基)氨基]-1，1，3，3，-四甲基-四氟硼酸盐(“TOTU”)活化苯甲酸[Weiss和Krommer，化学工作者周报、(Chemiker Zeitung)98，817(1974)]。一系列制备化学式II的活化羧酸衍生物的适合方法在J.March，高等有机化学，第三版(Advanced Organic Chemistry；Third Edition)(John wiley&Sons，1985)，350页中给出引用文献。
化学式II的活化了的羧酸衍生物与胍的反应是用已知的方法在一种质子传递或质子惰性的、极性的但是惰性的有机溶剂中进行，对于苯甲酸甲酯(II，L＝OMe)与胍反应，甲醇、异丙醇或者THF(四氢呋喃)从20℃至这些溶剂的沸点的温度证明是适用的。化合物II与无盐的胍的大多数反应适合在质子惰性的惰性溶剂如THF，二甲氧基乙烷，二恶烷中进行。但在式II化合物与胍的反应中使用碱如NaOH时，水也可以用作溶剂。
当L＝Cl时，适合加入一种酸捕捉剂例如以过量的胍的形式来除去氢卤酸。
一部分式II的基础苯甲酸衍生物是已知的并描述于文献中。未知的式II化合物可通过文献已知的方法制取。将得到的苯甲酸按所述方法的方案中的一种转化成本发明的化合物I。
在3-和4-位引入一些取代基可通过文献已知的方法进行，即芳基卤化物或三氟甲磺酸芳基酯与例如有机锡烷、有机硼酸或有机硼烷或有机铜和有机锌化合物的钯-媒介交叉偶合(cross-coupling)。
苯甲酰胍I一般为弱碱，可以结合酸形成盐。作为酸加成盐，所有药理学上适合的酸的盐均在考虑之列，例如卤化物，特别是盐酸化物，乳酸盐，硫酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐，乙酸盐，磷酸盐，甲磺酸盐，对甲苯磺酸盐。
化合物I为被取代的酰基胍。
欧洲公开说明书640588A1公开了类似结构的化合物，它在5位除了大量的其它R(1)取代基外，还可带有CF3基团，并且在2位除了大量的取代基外，还可带有一个Cl原子。但不可预见到，正是带有一个三氟甲基和一个氯原子作为取代基的这些化合物显示出奇的效果。
出乎预料的是，本发明的化合物不仅没有所不希望的和不利的利尿盐作用，除了具有很好的抗心律失常特性外，同时还具有特别有利的低半衰期，而已知的化合物常常具有所不期望的高半衰期。此外，本发明的化合物以其优良的生物利用度而著称，这正如体内值所表明的那样。
类似于已知的化合物，本发明的化合物由于其药理学特性特别适合作为带有心脏保护成分的抗心律失常药用于梗塞预防和梗塞治疗以及心绞痛的治疗，并且它可以预防性地抑制和明显减轻由局部缺血诱发的损伤的形成中的，特别是由局部缺血引起的心律失常的诱发中的病理生理过程。由于它们对于病理性缺氧和局部缺血状态的防护作用，按本发明的化学式I化合物由于对细胞的Na+/H+交换机制的抑制作用可以作为药物用于所有通过局部缺血引起的急性或者慢性损伤或者是由此引起的原发或继发疾病。这涉及到它们作为外科手术药物的应用，例如在器官移植时，这种化合物可用于在供体内摘取器官前和摘取器官过程中对器官的保护，用于已摘取下的器官的保护，例如用于器官在生理溶液中的处理与贮藏，并且也应用在将器官向受体移值的过程。这种化合物在进行血管成形术手术时例如对心脏和在周围血管手术时同样是很有价值的具有保护作用的药物。根据它们对于局部缺血引起的损伤的防护作用，这些化合物也适合用作治疗神经系统，特别是中枢神经系统的局部缺血的药物，例如它们对于中风或者脑水肿的治疗是适合的。此外按本发明的式I的化合物同样也适合用于休克状态的治疗，例如变应的、心原性的、(循环)血容量减少的和细菌性的休克。
此外按照本发明化学式I的化合物对于细胞增殖，例如对于成纤维细胞细胞增殖和对于血管平滑肌细胞的增殖，具有的强大抑制作用。因此化学式I化合物适合作为一些疾病的有价值的治疗剂。这类疾病中细胞增生构成原发或继发原因，所以可以将其用作抗动脉粥样硬化剂，抗糖尿病晚期并发症，抗癌症，抗纤维化疾病如肺纤维化，肝纤维化或肾纤维化，抗器官肥大和器官增生，特别是前列腺增生以及前列腺肥大的药物。
按照本发明的化合物是细胞的钠-质子-反向转移体(Na+/H+交换器)的有效抑制剂，对于许多疾病(自发性高血压，动脉粥样硬化，糖尿病等)，这种Na+/H+交换器在那些很容易进行测定的细胞中也是升高的，例如在红细胞，血小板或白细胞中。因此按照本发明的化合物适合作为卓越的和简单的科学工具，如它作为诊断剂用于确定和区分高血压，动脉粥样硬化症，糖尿病，增生疾病等的特定形式，此外化学式I的化合物适合用于预防性治疗以阻止高血压的发生，例如自发性高血压的预防性治疗。
含有化合物I的药物可以经口、非肠道、静脉内、直肠或者通过吸入法来给药，优选的方法取决于各疾病的症状。在此化合物I可以单独地或者是与盖伦氏制药的辅助材料一起使用，既可用作兽医药也可用作人用药。
至于哪些辅助材料对于所需要的药物制剂是适合的，则对于本领域技术人员来说根据他们的专业知识是很熟悉的。除了溶剂，凝胶形成剂，栓剂基质，片剂辅助材料，和其它的活性物质载体外，还例如可使用抗氧化剂，分散剂，乳化剂，除泡沫剂，矫味剂，保藏剂，增溶剂或者染色剂。
对于一种经口使用形式，则可将活性的化合物与对此适合的添加物，如载体物质、稳定剂或惰性稀释剂混合并且通过常用的方法制成合适的给药形式，如片剂，糖衣丸，胶囊，水质的、醇的或油质的溶液。作为惰性载体可以应用如阿拉伯胶，氧化镁，碳酸镁，磷酸钾，乳糖，葡萄糖，淀粉，特别是玉米淀粉，在此药物配制可以做成干燥的或者是潮湿的粒剂。作为油质的载体物质或者作为溶剂可以考虑例如植物油或动物油，例如葵花油或鱼肝油。
为了皮下或静脉内给药，则将活性化合物任选地与为此常用的物质如增溶剂，乳化剂或其它辅助物质制成溶液、悬浮液或者乳剂，作为溶剂可以考虑如：水，生理盐水或者醇类，例如乙醇、丙醇，丙三醇，此外还有糖溶液如葡萄糖或者甘露醇溶液，或者是由不同的已提到过的溶剂组成的一种混合物。
对于以气溶胶或喷雾的形式给药的药物制剂，适合使用化学式I的活性物质在一种制药上适宜的溶剂如特别是乙醇或水或者这些溶剂的混合物中的溶液、悬浮液或者乳剂。
制剂根据需要还可以含有其它的制药的辅助材料如表面活性剂、乳化剂和稳定剂以及一种推进气体。这种制剂一般含有活性物质的浓度约为0.1至10，特别是约0.3至3重量％。
化学式I的活性物质的给药剂量和给药频率是与所应用的化合物的作用强度和作用持续时间长短有关，此外与所治疗疾病的种类和严重程度，以及所治疗哺乳动物的性别、年龄、体重、个体敏感性有关。
对于约75公斤重的病人，式I化合物的平均日剂量为至少0.001mg/kg(体重)，优选至少0.01mg/kg(体重)，至多10mg/kg(体重)，优选至多1mg/kg(体重)。在疾病急性发作期，如心肌梗塞刚发作之后，则需要较高剂量和尤其是较高给药频率，如每天直至4次给药。例如对于在监护期的心肌梗塞病人，有可能需要每天直至200mg的剂量，尤其通过静脉给药。
缩略表
MeOH 甲醇
NMP N-甲基-2-吡咯烷酮
RT 室温
EE 乙酸乙酯(EtOAc)
Smp 熔点
THF 四氢呋喃实验部分由苯甲酸烷基酯(II，L＝O-烷基)制备式(I)苯甲酰胍的共同准则
将1.0eq.式II的苯甲酸烷基酯以及5.0eq.胍(游离碱)溶于异丙醇中或悬浮于THF中并且加热至沸腾直至完全反应(薄层色谱监控)(一般2-5小时)。于减压下(旋转蒸发器)蒸去溶剂，残余物吸收于EE中并用NaHCO3溶液洗涤三次。经Na2SO4干燥，于真空下蒸去溶剂，在硅胶上用合适的展开剂如EE/MeOH5∶1色谱纯化。实施例1：2-氯-4-甲氧基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体，Smp.232℃合成途径：a)2-氯-5-碘-4-甲氧基-苯甲酸甲酯，由2-氯-4-甲氧基-苯甲酸甲酯与1.1当量N-氯-琥珀酰亚胺在2当量碘化钾存在下于乙酸中室温下反应1小时制得，黄色晶体，Smp.120℃。b)2-氯-4-甲氧基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯通过将a)与三氟乙酸钾在NMP中于碘化铜(I)存在下加热至90℃制得，无色晶体，Smp.112℃。c)2-氯-4-甲氧基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由b)按共同准则制得。实施例2：2-氯-3-碘-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体，Smp，268℃合成途径：a)2-氯-3-碘-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，由2-氯-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯与1当量N-碘-琥珀酰亚胺在5当量三氟甲磺酸中于室温下反应24小时制得，无色油， (M+H)+＝365b)2-氯-3-碘-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由a)按共同准则制得。实施例3：2-氯-3-甲基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体，Smp.236℃合成途径：a)2-氯-3-甲基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，由2a)与1.5当量甲基锌氯化物(由甲基镁氯化物通过与氯化锌(II)醚合物于THF中的金属转移作用制得)在搅拌、室温、于催化剂氯化钯(II)[1，1’-二-(二苯基膦基)-二茂铁]和碘化铜(I)存在下交叉偶合，水处理，用乙酸乙酯萃取并接着于硅胶上用乙酸乙酯/正庚烷(3∶7)柱色谱纯化无色油， (M+H)+＝253b)2-氯-3-甲基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由a)按共同准则制得。实施例4：2-氯-3-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体，Smp.208℃合成途径a)2-氯-3-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，由2a)与1.5当量正丙基锌氯化物如3a)所述交叉偶合制得，无色油， (M+H)+＝281b)2-氯-3-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由a)按共同准则制得实施例52-氯-3-异丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐。无色晶体，Smp.183℃合成途径：a)2-氯-3-异丙基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，由2a)与1.5当量异丙基锌氯化物如3a)所述条件交叉偶合制得，无色油， (M+H)+＝281。b)2-氯-3-异丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由a)按共同准则制得。实施例6：2-氯-3-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体，Smp.160℃合成途径：a)2-氯-3-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，由2a)与1.5当量环戊基锌氯化物如3a)所述条件交叉偶合制得，无色油 (M+H)+＝307。b)2-氯-3-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由a)按共同准则制得。实施例7：2-氯-4-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体Smp.245℃。合成途径：a)2-氯-4-环戊基-苯甲酸甲酯，由2-氯-4-溴-苯甲酸甲酯与1.5当量环戊基锌氯化物如3a)所述条件交叉偶合，无色油， (M+H)+＝238。b)2-氯-4-环戊基-5-碘-苯甲酸甲酯，由7a)与1当量N-碘-琥珀酰亚胺于5当量三氟甲磺酸中室温下反应24小时制得，无色油， (M+H)+＝364。c)2-氯-4-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，由7b)与三氟乙酸钾于NMP中、碘化铜(I)存在下类似于1b)于90℃加热制得，无色油， (M+H)+＝306。d)2-氯-4-环戊基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由7c)按共同准则制得。实施例8：2-氯-4-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐：无色晶体，Smp.213℃。合成途轻：a)2-氯-4-正丙基-苯甲酸甲酯，由2-氯-4-溴-苯甲酸甲酯与1.5当量的正丙基锌氯化物如3a)所述条件交叉偶合制得。无色油， (M+H)+＝212。b)2-氯-4-正丙基-5-碘-苯甲酸甲酯，
由8a)通过与1当量N-碘-琥珀酰亚胺于5当量三氟甲磺酸中室温下反应24小时制得，无色油， (M+H)+＝338。c)2-氯-4-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯由8b)与三氟乙酸钾于NMP中在碘化铜(I)的存在下类似于1b)于90℃下加热制得；无色油， (M+H)+＝280。d)2-氯-4-正丙基-5-三氟甲基-苯甲酰胍-盐酸盐，由8c)按共同准则制得
药理学数据：
家兔红细胞Na+/H+交换器的抑制：
白色新西兰家兔(Ivanovas)配给一种含有2％胆固醇的标准饮食六周时间，以激活Na+/H+交换并且这样可以用火焰光谱分析法来测定通过Na+/H+交换Na+进入红细胞的流入量。血液由耳动脉采取并通过25IE钾-肝素来抗凝。每个样品的一部分用来通过离心进行血细胞比容的双重测定。各为100ul的等分试样用于测量红细胞Na+的起始含量。
为了测定氨氯-敏感的钠流入量，将100ul各血样在各5ml的高渗透压的盐-蔗糖介质中(mmol/升：140NaCl，3KCl，150蔗糖，0.1硅巴因，20三羟甲基氨基甲烷)在pH为7.4和37℃下孵育。然后将红细胞用冰冷的MgCl2-哇巴因-溶液(mmol/升：112MgCl2，0.1哇巴因)洗涤三次并在2.0ml的蒸馏水中使之溶血。细胞内的钠含量用火焰光谱分析来测定。
Na+净流入量是由红细胞的钠起始含量和孵育后红细胞的钠含量之差来计算，氨氯可以抑制的钠流入量是由红细胞在加入和不加入氨氯3×10-4mol/升孵育后的红细胞钠含量之差得出。将同样方法用于本发明的化合物。结果
Na+/H+-交换器的抑制
实施例 IC50(mol/l)
1： 0.02×10-6
2： 0.05×10-6
4： 0.07×10-6
5： 0.02×10-6
6： 0.06×10-6
7： 0.03×10-6
8： 0.01×10-6实施例十二指肠内生物利用度血浆清除半衰期5好大鼠静脉内注射，0.7小时1好犬静脉内注射，1.1小时大鼠静脉内注射，0.32小时