C-6修饰的吲唑基吡咯并三嗪 本申请是以下申请的分案申请：申请日：2003年12月12日；申请号：200380105906.X(其相应PCT国际申请号：PCT/US2003/039542)；发明名称：同上。
【发明领域】
本发明涉及抑制生长因子受体例如HER1、HER2和HER4的酪氨酸激酶活性、从而使它们可用作抗癌剂的化合物。这些化合物还可用于治疗与通过生长因子受体例如HER1、HER2和HER4运行的信号转导途径有关的、除了癌症之外的疾病。
【发明背景】
受体酪氨酸激酶(RTKs)在穿过细胞质膜的生化信号的传递中很重要。这些跨膜分子特有地包括通过质膜中的片段与胞内酪氨酸激酶区域相连接的细胞外配体-结合区域。
人类表皮生长因子受体(HER)家族包括被称作HER1、HER2、HER3和HER4的四个区别的受体酪氨酸激酶。这些激酶也被认为是erbB1，erbB2，等等。HER1还通常被认为是表皮生长因子(EGF)受体。除HER3之外，这些受体具有对磷受体蛋白质的酪氨酸残基特异的内在蛋白激酶活性。HER激酶在大多数上皮细胞以及上皮来源的肿瘤细胞中表达。它们还常常在间质来源的肿瘤细胞例如肉瘤或横纹肌肉瘤中表达。RTKs例如HER1和HER2涉及到细胞增殖，且与疾病例如牛皮癣和癌症有关。通过抑制这些激酶所造成的信号转导的中断将具有抗增殖和治疗的作用。
受体酪氨酸激酶的酶活性可由超量表达、或者由配体-介导的二聚作用的任何一种加以刺激。对于HER受体家族已经表明了同源双体以及异源双体的形成。同源二聚的例子是由EGF家族的配体之一(包括EGF，转化生长因子α，肝素结合的表皮生长因子BTC(Betacellulin)，肝素-结合的EGF，和表皮调节素(epiregulin))的HER1(EGF受体)的二聚。四个HER受体激酶之间的异源二聚可以通过与配体的heregulin(也被称作神经调节蛋白)家族成员结合来促进。这种涉及HER2和HER3的异源二聚，或者HER3/HER4结合，导致了受体二聚物的酪氨酸激酶活性的显著的激励作用，尽管受体(HER3)中的一个是酶催惰性的。已经证明HER2的激酶活性也借助于在各种细胞类型中的单独受体的超量表达而被活化。受体同源双体和异源双体的活化导致了酪氨酸残基在受体上和在其它胞内蛋白质上的磷酸化作用。这种活化后接着出现胞内信号路径的活化，例如涉及微管相关的蛋白激酶(MAP激酶)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3激酶)的路径。现已表明这些路径的活化导致了细胞增殖和抑制了细胞凋亡。现已表明HER激酶信号的抑制，抑制了细胞增殖和细胞存活。
发明概述
本发明的化合物抑制生长因子受体例如HER1、HER2和HER4的酪氨酸激酶活性，并且可用于治疗与通过生长因子受体运行的信号转导途径有关的疾病。例如本发明的化合物可用作抗增殖和抗癌剂。更具体地说，本发明包括式I的化合物：
其中
R选自芳基，取代的芳基，杂环，和取代的杂环；
R1选自烷基和取代的烷基；
R2选自氢，烷基，取代烷基，环烷基，取代环烷基，芳基，取代芳基，芳烷基，杂环，和取代杂环；或者，R2可以不存在；
X选自一根键，O，S，C(R3)2，C(R3)3，NR3；和N(R3)2；
R3独立地选自氢，烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，芳烷基，杂环，和取代杂环，
和其药学可接受的盐，前体药物，对映体，非对映体，和溶剂化物。
还提供了一种治疗增殖疾病的方法，包括给予需要这种治疗的温血物种治疗有效量的式I地化合物。
发明详述
本发明提供了式I的化合物，采用这种化合物的药物组合物和使用这种化合物的方法。
更具体地说，本发明包括式(I)的化合物：
其中R选自芳基，取代的芳基，杂环，和取代的杂环；
R1选自烷基和取代的烷基；
R2选自氢，烷基，取代烷基，环烷基，取代环烷基，芳基，取代芳基，芳烷基，杂环，和取代杂环；或者，R2可以不存在；
X选自一根键，O，S，C(R3)2，C(R3)3，NR3；和N(R3)2；
R3独立地选自氢，烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，芳烷基，杂环，和取代杂环，
和其药学可接受的盐，前体药物，对映体，非对映体，和溶剂化物。
对于R2，优选的烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳烷基、杂环基和取代的杂环基包括但不局限于下列基团：
苄基，咪唑基-乙基，(甲基-咪唑基)-乙基，哌啶基-乙基，吡啶基-丙基，吡啶基-甲基，吗啉基-乙基，(甲基-咪唑基)-甲基，吡啶基-乙基，氨基-哌啶基-甲基，4-氨基-1-甲基-哌啶-3-醇，(甲基-哌嗪基)-乙基，吡啶基-乙基，(甲基-哌啶基)-乙基，(甲基-咪唑基)-丙基，(甲基-哌啶基)-甲基，(甲基-哌嗪基)-丙基，二异丙基氨基-乙基，哌啶基-丙基，二甲基氨基-乙基，二甲基氨基-丙基，[[(三氟-乙酰基)-哌啶基]-丙基，哌啶基-乙基，哌嗪基-乙基，哌嗪基-丙基，吡咯烷基-乙基，三唑基-乙基，三唑基-丙基，(二甲基氨基-乙氧基)-乙基，咪唑基-丙基，[(三氟-乙酰基)-哌啶基]-丙基，(哌嗪基-乙氧基)-乙基，[(三氟-乙酰基)-哌嗪基]-丙基，[(三氟-乙酰基)-哌嗪基]-乙基，哌啶基-甲基，吡唑基-乙基，(氨基-乙氧基)-乙基，(甲氧基-乙氧基)-乙基，吡唑基-丙基，[(甲氧基-乙基)-甲基-氨基]-乙基，吗啉基-丙基，(氰基甲基-哌嗪基)-乙基，[(氰基-乙基)-甲基-氨基]-乙基，[(甲氧基-乙基)-哌啶基]-甲基，[[(甲氧基-乙基)-哌啶基]-乙基，[(氟-乙基)-甲基-氨基]-乙基，[(氟-乙基)-甲基-氨基]-丙基，(甲基-哌啶基)-丙基，[(甲磺酰基-乙基)-哌嗪基]-乙基，[(氰基-乙基)-哌嗪基]-乙基，[[(甲氧基-乙基)-哌嗪基]-乙基，[(甲氧基-乙基)-甲基-氨基]-丙基，(氰基甲基-甲基-氨基)-丙基，(氰基甲基-甲基-氨基)-乙基，[(甲磺酰基-乙基)-甲基-氨基]-丙基，(二氟-哌啶基)-丙基，(二氟-哌啶基-)-乙基，[(氰基-乙基)-甲基-氨基]-丙基，[(甲磺酰基-乙基)-甲基-氨基]-乙基，[(三氟乙基)-哌嗪基]-乙基，[氰基甲基-(甲磺酰基-乙基)-氨基]-丙基，[氰基甲基-(甲磺酰基-乙基)-氨基]-乙基，(氰基甲基-哌嗪基)-丙基，[(甲磺酰基-乙基)-哌嗪基]-丙基，[(氰基-乙基)-哌嗪基]-丙基，[(三氟乙基)-哌嗪基]-丙基，(甲磺酰基-乙基-氨基)-乙基，[(氰基-乙基)-哌啶基]-甲基，(氰基甲基-哌啶基)-甲基，(羟基-哌啶基)-丙基，[(甲磺酰基-乙基)-哌啶基]-甲基，哌啶基-甲基，哌啶基，咪唑基-丙基，1-甲基-[1，4]-二氮杂环庚烷-6-醇，甲磺酰基-丙基，(甲磺酰基-乙基-氨基)-丙基，吡咯烷基-甲基，甲磺酰基-乙基，(氰基甲基-氨基)-乙基，(氰基甲基-氨基)-丙基，(二氧代-硫吗啉基)-丙基，(氧代-哌啶基)-丙基，[(二氟-乙基)-甲基-氨基]-乙基，吗啉基-甲基，(羟基-吡咯烷基)-丙基，(羟基-哌啶基)-丙基，吡咯烷基-甲基，(羟基-吡咯烷基)-丙基，甲基-哌啶基，(甲基-吡咯烷基)-甲基，吗啉基-甲基，吡咯烷基-甲基，(甲基-四氢-吡啶基)-甲基，(氰基-乙基)-哌啶基，氮杂环丁烷基，(甲磺酰基-乙基)-哌啶基，(氰基-甲基)-哌啶基，异丙基-哌啶基，丙基-哌啶基，乙酰基-哌啶基，乙基-哌啶基，烯丙基哌啶基，四氢-吡喃基，(羟基-乙基)-哌啶基，(甲基-吡咯烷基)-甲基，(甲氧基乙基)-哌啶基，哌啶基，(甲氧基-乙基)-氮杂环丁烷基，(甲氧基-甲氧基甲基-乙基)-哌啶基，(甲氧基-乙酰基)-哌啶基，甲氧羰基-哌啶基，(羟基-乙酰基)-哌啶基，哌啶-羧酸-乙酰氧基-乙基，哌啶-羧酸-乙酰氧基-甲基-乙基，羟基-哌啶基，氨基-环己基，哌啶基，哌啶-羧酸-甲基-氧代-dioxolyl甲基，羟甲基-哌啶基，(氨甲基)-环己基，氨基-甲基-环己基，羟基-哌啶基-甲基，吗啉基，氨基-环己基，羟甲基-哌啶基，四氢-吡喃基，甲磺酰基-丙基，氨基-甲基-丙基，氨基-环己基，氨基-甲基-环己基，(羟基-哌啶基)-丙基，哌啶基，氨基-丙基，吗啉基-甲基，哌啶基，(叔丁氧羰基-吗啉基)-甲基，苄基，咪唑基-乙基，哌啶基-乙基，甲氧基乙基，(二乙基氨基)-(甲氧基乙基)，吡咯烷基-乙基，乙酰胺和甲基。
对于R优选的芳基、取代的芳基、杂环和取代的杂环包括但不局限于下列基团：
噁唑基，噻吩基，吡啶基，噻唑基，吡嗪基，和苯基，所有这些基团可以被一个或多个取代基合适地取代。
在一个优选实施方案中，本发明包括式I的化合物，其中R是芳基或取代的芳基，且R1是低级烷基。在更优选的实施方案中，R1是甲基或乙基。
在另一个优选实施方案中，本发明包括式I的化合物，其中X是-O-，且R2是环烷基，取代的环烷基，杂环或取代的杂环。
在又一个优选实施方案中，本发明包括式I的化合物，其中R是苯基或取代的苯基，且R1是甲基或乙基。
本发明优选的化合物包括下列：
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2R)-2-吡咯烷基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2S)-2-吡咯烷基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3R)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，3-[(3S)-3-羟基-1-吡咯烷基]丙基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，3-[(3S)-3-羟基-1-哌啶基]丙基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3R)-3-吡咯烷基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，3-[(3R)-3-羟基-1-吡咯烷基]丙基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，[(2S)-1-甲基-2-吡咯烷基]甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2S)-2-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吡咯烷基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2R)-2-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，[(3R)-1-甲基-3-吡咯烷基]甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，反式-4-氨基环己基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3R)-3-哌啶基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-哌啶基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，顺式-4-氨基环己基，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2R，4R)-2-(羟甲基)-4-哌啶基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2S)-2-(羟甲基)-4-哌啶基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，顺式-4-(氨甲基)环己基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，顺式-4-氨基-4-甲基环己基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，[(2R，4R)-4-(羟基-2-哌啶基]甲基酯，
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，反式-4-(氨甲基)环己基酯，
[5-乙基-4-[[1-(2-噁唑基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(2-噻吩基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(4-噻唑基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(3-噻吩基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(2-吡啶基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(2-噻唑基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(3-吡啶基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[5-乙基-4-[[1-(吡嗪基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，反式-4-氨基环己基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2R，4R)-2-(羟甲基)-4-哌啶基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2S，4S)-2-(羟甲基)-4-哌啶基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，顺式-4-氨基环己基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，顺式-4-氨基-4-甲基-环己基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2R)-2-氨基丙基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(2S)-2-氨基丙基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3R)-3-哌啶基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-哌啶基酯，
3-[[[[[4-[[1-[(3-氟苯基-甲基]-1H-吲唑-5-基]氨基]-5-甲基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]4-吗啉羧酸，(3S)-1，1-二甲基乙基酯，
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，3-吗啉基甲基酯，和
[4-[[1-(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基氨基]-5-甲基-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3R)-3-吗啉基甲基酯。
优选本发明的化合物在一或多个HER1，HER2和HER4试验中显示小于5μM的IC50值。更优选化合物具有小于1μM的测定活性。甚至更优选化合物具有小于0.1μM的测定活性。
由于可能的危及生命的室律不齐的消极副作用，具有低HERG(人类Ether-a-go-go相关基因)斑点-钳试验活性的化合物是合乎需要的。优选化合物中HERG试验中的IC50值大于1μM。
定义
以下为用于描述本发明所使用的各种术语的定义。这些定义可应用于贯穿本说明书的术语中，除非在具体的情况下另外加以限定，或者以单独的形式或者作为较大基团的一部分。
术语“烷基”是指具有1到20个碳原子的直链或支链未取代的烃基，优选具有1到7个碳原子。表述“低级烷基”是指具有1到4个碳原子的未取代的烷基。
术语“取代的烷基”是指由例如，一至四个下列取代基取代的烷基，例如，卤素，羟基，烷氧基，氧代，烷酰基，芳氧基，烷酰氧基，氨基，烷基氨基，芳氨基，芳烷基氨基，其中2个氨基取代基选自烷基、芳基或芳烷基的二取代的氨基；烷酰基氨基，芳酰基氨基，芳烷酰基氨基，取代的烷酰基氨基，取代的芳氨基，取代的芳烷酰基氨基，硫醇，烷硫基，芳硫基，芳烷基硫基，烷基硫羰基，芳基硫羰基，芳烷基硫羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，芳烷基磺酰基，磺酰氨基，例如SO2NH2，取代磺酰氨基，硝基，氰基，羧基，氨基甲酰，例如CONH2，取代的氨基甲酰基例如CONH烷基，CONH芳基，CONH芳烷基，或其中在氮上存在两个选自烷基、芳基或芳烷基的取代基的情况；烷氧羰基，芳基，取代芳基，胍基，杂环，例如，吲哚基，咪唑基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，吡咯烷基，吡啶基，嘧啶基，吡咯烷基，哌啶基，吗啉基，哌嗪基，高哌嗪基等等，和取代的杂环。在上面所指出的基团中，其中取代基可以进一步被烷基、烷氧基、芳基或芳烷基取代。
术语“卤素”或“卤”是指氟，氯，溴和碘。
术语“芳基”是指在环部分具有6至12个碳原子的单环或双环芳香烃基，例如苯基，萘基，联苯基和二苯基，每个可以是被取代的。
术语“芳烷基”是指通过烷基直接键合的芳基或取代的芳基，例如苄基。
术语“取代的芳基”是指被例如下列的一至四个取代基取代的芳基：例如，烷基，取代的烷基，链烯基，取代的链烯基，炔基，取代的炔基，芳基，取代的芳基，芳烷基，卤素，三氟甲氧基，三氟甲基，羟基，烷氧基，烷酰基，烷酰氧基，芳氧基，芳烷氧基，氨基，烷基氨基，芳氨基，芳烷基氨基，二烷基氨基，烷酰基氨基，硫醇，烷硫基，脲基，硝基，氰基，羧基，羧基烷基，氨基甲酰基，烷氧羰基，烷基硫羰基，芳基硫羰基，芳基磺酰基胺，磺酸，乙醇磺酰基，磺酰氨基，芳氧基等等。这些取代基可以进一步被羟基，卤素，烷基，烷氧基，链烯基，炔基，芳基或芳烷基取代。
术语“杂芳基”是指任选被取代的芳香基，例如，是4至7元单环、7至11元双环、或10至15元三环系，其具有包含至少一个杂原子和至少一个碳原子的环，例如，吡啶，四唑，吲唑。
术语“链烯基”是指具有一至四个双键、具有2至20个碳原子、优选2至15个碳原子、最优选2至8个碳原子的直链或支链烃基。
术语“取代的链烯基”是指被例如一至两个下列取代基取代的链烯基：例如，卤素，羟基，烷氧基，烷酰基，烷酰氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，烷酰基氨基，硫醇，烷硫基，烷基硫羰基，烷基磺酰基，磺酰氨基，硝基，氰基，羧基，氨基甲酰基，取代的氨基甲酰基，胍基，吲哚基，咪唑基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，吡咯烷基，吡啶基，嘧啶基等等。
术语“炔基”是指具有一至四个三键的、具有2至20个碳原子、优选2至15个碳原子、最优选2至8个碳原子的直链或支链烃基。
术语“取代的炔基”是指被例如下列的取代基取代的炔基：例如，卤素，羟基，烷氧基，烷酰基，烷酰氧基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，烷酰基氨基，硫醇，烷硫基，烷基硫羰基，烷基磺酰基，磺酰氨基，硝基，氰基，羧基，氨基甲酰基，取代的氨基甲酰基，胍基和杂环，例如咪唑基，呋喃基，噻吩基，噻唑基，吡咯烷基，吡啶基，嘧啶基等等。
术语“环烷基”是指任选取代的饱和环烃环系，优选包含1至3个环、且每个环包含3至7个碳，每个环可以进一步与不饱和的C3-C7碳环稠合。典型的基团包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基，环癸基，环十二烷基，和金刚烷基。典型的取代基包括一个或多个如上所述的烷基、或一个或多个如上所述的作为烷基取代基的基团。
术语“杂环”、“杂环的”和“杂环”是指任选被取代的、完全饱和或不饱和的、芳香或非芳香性的环基团，例如，其是4至7元单环、7至11元双环、或10至15元三环系，其在包含至少一个碳原子的环中具有至少一个杂原子。每个包含杂原子的杂环基团可以具有1，2或3个选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子，其中氮和硫杂原子还可以任选地被氧化，且氮杂原子还可以任选地被季铵化。杂环基团可以连接在任何杂原子或碳原子上。
作例证的单环杂环基团包括吡咯烷基，吡咯基，吲哚基，吡唑基，氧杂环丁烷基，吡唑啉基，咪唑基，咪唑啉基，咪唑烷基，噁唑基，噁唑烷基，异噁唑啉基(isoxazolinyl)，异噁唑基，噻唑基，噻二唑基，噻唑烷基，异噻唑基，异噻唑烷基，呋喃基，四氢呋喃基，噻吩基，恶二唑基，哌啶基，哌嗪基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，高哌嗪基，2-氧代高哌嗪基，2-氧代吡咯烷基，2-氧杂氮杂基，氮杂基，4-哌啶酮基，吡啶基，N-氧代-吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，哒嗪基，四氢吡喃基，吗啉基，硫代吗啉基，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜，1，3-二氧戊环和四氢-1，1-二氧代噻吩基，二噁烷基，异噻唑烷基，硫杂环丁烷基，硫杂丙环基，三嗪基，和三唑基，等等。
作例证的双环杂环基团包括2，3-二氢-2-氧代-1H-吲哚基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，苯并噻吩基，奎宁环基，喹啉基，喹啉基-N-氧化物，四氢异喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，苯基吡喃基，茚嗪基，苯并呋喃基，色酮基，香豆素基，噌琳基，喹喔啉基，吲唑基，吡咯并吡啶基，呋喃并吡啶基(例如呋喃并[2，3-c]吡啶基，呋喃并[3，1-b]吡啶基]或呋喃并[2，3-b]吡啶基)，二氢异吲哚基，二氢喹唑啉基(例如3，4-二氢-4-氧代-喹唑啉基)，苯并异噻唑基，苯并异噁唑基，苯并二吖嗪基，苯并呋咱基，苯并硫基呋喃基，苯并三唑基，苯基吡唑基，二氢苯并呋喃基，二氢苯并噻吩基，二氢苯并硫基吡喃基，二氢苯并硫基吡喃基砜，二氢苯并吡喃基，二氢吲哚基，吲唑基，异苯并二氢吡喃基，异二氢氮茚基，萘啶基，酞嗪基，胡椒基，嘌呤基，吡啶并吡啶基，喹唑啉基，四氢喹啉基，噻吩并呋喃基，噻吩并吡啶基，噻吩并噻吩基，等等。
作例证的杂环取代基包括一个或多个烷基或芳烷基，如上所述，或一个或多个如上所述的作为烷基取代基的基团，以及烷基磺酰基和卤代乙酰基。也包括较小的杂环，例如，环氧化物和氮丙啶。优选的取代杂环见本说明书的实施例。
术语“碳环”是指稳定的、饱和或部分不饱和的、3至7个碳原子的单环烃环，例如环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。当在本文中指“碳环”时，术语“任选取代的”标明碳环可以在一个或多个可代替的环位置上、被一个或多个独立地选自下列的基团所取代：烷基(优选低级烷基)，烷氧基(优选低级烷氧基)，硝基，单烷基氨基(优选低级烷基氨基)，二烷基氨基(优选二[低级]烷基氨基)，氰基，卤素，卤代烷基(优选三氟甲基)，烷酰基，氨基羰基，单烷基氨基羰基，二烷胺基羰基，烷基酰胺基(优选低级烷基酰胺基)，烷氧基烷基(优选低级烷氧基[低级]烷基)，烷氧羰基(优选低级烷氧羰基)，烷基羰基氧基(优选低级烷基羰基氧基)和芳基(优选苯基)，所述芳基任选被卤素、低级烷基和低级烷氧基取代。
术语“杂原子”包括氧，硫和氮。
式I的化合物可以形成盐，其还在本发明的范围内。尽管其它盐例如，在分离或纯化本发明化合物中也是有用的，但优选药学可接受的(即无毒的，生理学可接受的)盐。
式I的化合物可以与碱金属例如钠、钾和锂形成盐，与碱土金属例如钙和镁形成盐，与有机碱例如二环己基胺、三丁基胺、吡啶和氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等等形成盐。可以按照本领域技术人员已知的方法形成这样的盐。
式I化合物可以与各种有机和无机酸形成盐。这样的盐包括那些与氯化氢，溴化氢，甲磺酸，硫酸，乙酸，三氟乙酸，草酸，马来酸，苯磺酸，甲苯磺酸和各种其它的酸形成的盐(例如，硝酸盐，磷酸盐，硼酸盐，酒石酸盐，柠檬酸盐，琥珀酸盐，苯甲酸盐，抗坏血酸盐，水杨酸盐等等)。可以按照本领域技术人员已知的方法形成这样的盐。
另外，可以形成两性离子(“内盐”)。
本发明化合物的所有立体异构体、不论以混合物还是以纯的或基本上纯的形式均在考虑范围。按照本发明化合物的定义包括所有可能的立体异构体和它们的混合物。特别包括外消旋形式和具有指定活性的分离的旋光异构体。外消旋形式可以通过物理方法例如非对映体衍生物的分级结晶、分离或结晶来拆分，或通过手性柱色谱分离。单一的旋光异构体可由消旋体通过常规方法获得，例如与光学活性的酸形成盐，而后结晶。
式I的化合物还可以具有前体药物的形式。可以在体内转化以提供生理活性试剂(即通式I的化合物)的任何化合物，是在本发明的范围和精神之内的前体药物。
各种形式的前体药物在本领域为大家所熟知。对于这样的前体药物衍生物的例子，参见：
a)Design of Prodrugs.H.Bundgaard编(Elsevier，1985)和Methods in Enzymology.Vol.42，p.309-396，K.Widder等编(Acamedic Press，1985)；
b)A Textbook of Drug Design and Development，KrosgaardLarsen和H.Bundgaard编，第5章，″Design and Application of Prodrugs，″H.Bundgaard，p.113-191(1991)；
c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38(1992)；
应该进一步理解式I化合物的溶剂化物(例如水合物)也属于本发明的范围。溶剂化的方法在本领域通常是已知的。
使用和应用
本发明是基于某些吡咯并三嗪是蛋白质激酶抑制剂的这个发现。更具体地说，例如在本发明所描述的那些吡咯并三嗪可抑制受体HER家族成员的蛋白质酪氨酸激酶的活性。这些抑制剂可用于治疗取决于一个或多个这些受体信号的增殖疾病。这样的疾病包括牛皮癣，类风湿性关节炎，和肺、头和颈、乳房、结肠、卵巢和前列腺的实体肿瘤。本发明涉及治疗哺乳动物高增殖性疾病的式I化合物、或其药学可接受的盐或其水合物，和药学可接受的载体的药物组合物。特别地，所述药物组合物预计可抑制与HER1(EGF受体)和HER2有关的原发和重发性实性肿瘤的生长，特别是那些生长和传播显著地依赖于HER1或HER2的肿瘤，包括例如膀胱癌，鳞状细胞癌，头颅癌，结肠直肠癌，食道癌，妇科(例如卵巢)癌，胰腺癌，乳房癌，前列腺癌，外阴癌，皮肤癌，脑癌，泌尿生殖道癌，淋巴系统(例如甲状腺)癌，胃癌，喉癌和肺癌。在另一个实施方案中，本发明的化合物还可用于治疗非癌病变性疾病，例如牛皮癣和类风湿性关节炎。
由此按照本发明的进一步方面，提供了式I的化合物、或其药学可接受的盐在制备用于温血动物例如人中的、产生抗增殖作用的药物中的用途。
按照本发明的进一步的特点，提供了一种在需要这种治疗的温血动物例如人中产生抗增殖作用的方法，包括给予所述动物前文中所定义的、有效量的式I的化合物，或其药学可接受的盐。
由于它们具有抑制HER1、HER2和HER4激酶的性能，本发明的化合物可用于治疗增殖性疾病，包括牛皮癣和癌症。已经表明HER 1受体激酶在许多实体肿瘤包括头和颈癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌的和乳腺癌中能够被表达和活化。类似地，已经表明HER2受体激酶在乳房癌、卵巢癌、肺癌和胃癌中被过度表达。在临床前和临床研究中，已表明可抑制许多HER2受体对刺激的反应或抑制HER1受体发信号的单克隆抗体具有抗肿瘤效果。因此可料想HER1和HER2激酶的抑制剂将会在治疗依赖两个受体的任何一个发出信号的肿瘤过程中具有效果。另外，这些化合物将在抑制依赖HER受体异源二聚体发信号的肿瘤中具有效果。这些化合物预计不论是以单一试剂、还是以与其它化学治疗试剂例如紫杉酚、阿霉素和顺铂组合联用时(同时或依次)都具有效果。由于已经表明HER1和HER2信号能够调节血管生成因子例如血管内皮生长因子(VEGF)和白介素8(IL8)的表达，这些化合物预计具有抗肿瘤效果，这是由于这些化合物除了抑制肿瘤细胞繁殖和存活之外，还抑制血管生成。已经表明HER2受体包含在类风湿性关节炎中的高繁殖滑膜细胞中，并促成炎性疾病状态的血管生成组份。因此本发明中所描述的抑制剂预计具有治疗类风湿性关节炎的效果。这些化合物抑制HER1的性能进一步增加了其作为抗血管生成试剂的用途。参见下列引用在其中的文献和参考书目：Schlessinger J.，″Cellsignaling by receptor tyrosine kinases″，Cell 103(2)，p.211-225(2000)；Cobleigh，M.A.，Vogel，C.L.，Tripathy，D.，Robert，N.J.，Scholl，S.，Fehrenbacher，L.，Wolter，J.M.，Paton，V.，Shak，S.，Lieberman，G.，和Slamon，D.J.，″Multinational study of the efficacy and safety of humanizedanti-HER2 monoclonal antibody in women who haveHER2-overexpressing metastatic breast cancer that hasprogressed after chemotherapy for metastaticdisease″，J of Clin.Oncol.17(9)，p.2639-2648(1999)；Baselga，J.，Pfister，D.，Cooper，M.R.，Cohen，R.，Burtness，B.，Bos，M.，D′Andrea，G.，Seidman，A.，Norton，L.，Gunnett，K.，Falcey，J.，Anderson，V.，Waksal，H.，和Mendelsohn，J.，″Phase I studies ofanti-epidermal growth factor receptor chimeric antibody C225alone and in combination with cisplatin”J.Clin.Oncol.18(4)，p.904-914(2000)；Satoh，K.，Kikuchi，S.，Sekimata，M.，Kabuyama，Y.，Homma，M.K.，和Homma Y.，″Involvement of ErbB-2 inrheumatoid synovial cell growth″，Arthritis Rheum.44(2)，p.260-265(2001)。
本文中先前所定义的抗增殖治疗，可以将其用作单独治疗，或可以除本发明的化合物之外，还包含一或多种其它物质和/或疗法。这种结合的治疗可以通过同时、顺序或分开给予治疗的单独组分。本发明的化合物还可以用于与已知的抗癌和细胞毒素试剂和疗法、包括放射疗法联用中。如果以固定剂量配制，这种联合产品采用如下所述剂量范围之内的本发明的化合物、和在被认可的范围之内的其它药学活性剂。当一种组合配方不适当时，式I的化合物可以与已知的抗癌剂或细胞毒素试剂和疗法包括放射疗法顺次使用。
在医学肿瘤学领域，使用各种疗法的组合来治疗每个患有癌症的患者是正常的做法。在医学肿瘤学中，除了本文中先前所定义的抗增殖疗法之外，这种联合疗法的其它部分可以是：外科手术，放射疗法或化学疗法。这种化学疗法可以包括三种主要的治疗剂类型：
(i)通过由上文中所定义的不同机理起作用的抗血管形成试剂(例如，三羧氨基喹啉，整联蛋白αvβ3功能抑制剂，血管抑素，丙亚胺)；
(ii)细胞生长抑制剂，例如抗雌激素药(例如，三苯氧胺，枸橼酸托瑞米芬，雷诺昔酚，屈落昔芬，吲哚昔芬(iodoxifene)，孕激素类(例如，甲地孕酮)，芳香酶抑制剂(例如，阿那曲唑，来曲唑，硼嗪，依西美坦)，抗激素药，抗孕激素类，抗雄激素物质(例如，氟他胺，尼鲁米特，比卡鲁胺，乙酸赛普龙)，LHRH激动剂和拮抗剂(例如，乙酸戈舍瑞林，亮丙瑞林)，睾酮5α-二氢还原酶的抑制剂(例如，非那雄胺)，法尼基转移酶抑制剂，抗侵入试剂(例如，金属蛋白酶抑制剂例如马立马司他和尿激酶纤溶酶原激活物受体功能抑制剂)，和生长因子功能抑制剂，(这种生长因子包括例如，EGF，FGF，血小板衍生生长因子和肝细胞生长因子，这种抑制剂包括生长因子抗体，生长因子受体抗体例如(阿瓦斯丁)和(西妥昔单抗)；酪氨酸激酶抑制剂，丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂和胰岛素生长受体抑制剂)；和
(iii)抗增殖/抗肿瘤药与其组合，在医学肿瘤学中使用的，例如代谢拮抗剂(例如，抗叶酸物例如氨甲喋呤，氟嘧啶例如5-氟尿嘧啶，嘌呤和腺苷类似物，阿糖胞苷)；插入的抗肿瘤抗生素(例如，蒽环类抗生素，例如亚德利亚霉素，柔毛霉素，表柔比星和伊达比星，丝裂霉素-C，放线菌素，光神霉素)；铂衍生物(例如，顺铂，卡铂)；烷基化剂(例如，氮芥，米尔法兰，苯丁酸氮芥，马利兰，环磷酰胺，异环磷酰胺亚硝基脲，硫替派；抗有丝分裂剂(例如，长春花生物碱，象长春新碱，长春瑞宾，长春碱和长春氟宁，和紫杉类药物，例如(太平洋紫杉醇)，(多烯紫杉醇)和新的microbtubule试剂例如埃坡霉素类似物，discodermolide类似物，和艾榴塞洛素类似物)；拓扑异构酶抑制剂(例如，表鬼臼脂素，例如依托泊苷和表鬼臼毒噻吩糖苷，安吖啶，拓扑替康，依立替康)；细胞周期抑制剂(例如，flavopyridols)；生物反应调节物和蛋白酶体抑制剂例如(癌症蛋白体抑制剂)。
如上所述，本发明的式I化合物的抗增殖作用是很有意义的。本发明的这样的化合物预计可用于宽范围的疾病状态，包括癌症，牛皮癣和类风湿性关节炎。
更具体地说，式I的化合物可用于治疗各种癌症，包括(但不局限于)下列：
-恶性肿瘤，包括膀胱癌、乳房癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌，包括小细胞肺癌，食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌，包括鳞状细胞癌；
-间质来源的肿瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；
-中枢和周围神经系统肿瘤，包括星形细胞瘤，神经母细胞瘤，神经胶质瘤和神经鞘瘤；和
-其它肿瘤，包括黑素瘤，精原细胞瘤，畸胎癌，和骨肉瘤。
一般说来，由于激酶在调节细胞繁殖中的关键作用，抑制剂可以起到可逆的细胞抑制剂的作用，其可以用于治疗任何以细胞繁殖异常为特点的疾病过程，例如，良性前列腺增生，家族性腺瘤，息肉病，神经纤维瘤病，肺纤维化，关节炎，牛皮癣，肾小球肾炎，血管成形术或血管手术后再狭窄，肥厚性瘢痕形式和炎症性肠病。
式I的化合物可特别用于治疗具有酪氨酸激酶活性的高发生率的肿瘤，例如结肠肿瘤、肺肿瘤和胰腺肿瘤。通过给予本发明化合物的组合物(或联合组合)，降低了肿瘤在哺乳动物宿主中的形成。
式I的化合物还可以用于治疗与通过生长因子受体例如HER1(EGF受体)、HER2或HER4运行的信号转导途径有关的、除了癌症之外的疾病。
包含活性组分的本发明的药物组合物可以以适合于口服的形式使用，例如，以片剂，锭剂，糖锭，水或油状悬浮液，可分散性粉剂或颗粒剂，乳状液，硬或软胶囊，或糖浆或酏剂。为口服使用而设计的组合物，可以按照药物组合物制备领域的任何已知的方法来制备，且为了提供药学上精美的和适口的制品，这种组合物可以包含一或多种选自下列的试剂：甜味剂，调味剂，着色剂和防腐剂。片剂含有在与无毒的、药学可接受的、适合于制备片剂的赋形剂的混合物中的活性组分。这些赋形剂可以是，举例来说，惰性的稀释剂，例如碳酸钙，碳酸钠，乳糖，磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如，微晶纤维素，交联羧甲基纤维素钠(sodium crosscarmellose)，玉米淀粉，或海藻酸；粘结剂，例如淀粉，凝胶，聚乙烯-吡咯烷酮或阿拉伯胶，和润滑剂，例如，硬脂酸镁，硬脂酸或滑石粉。片剂可以是无包衣的，或可以通过已知的技术进行包衣，以屏蔽药物的讨厌的味道或延迟在胃肠道分解和吸收，从而在比较长时间内提供持续作用。例如，可以采用水溶性的味道屏蔽物质，例如羟基丙基-甲基纤维素或羟基丙基-纤维素，或时间延迟物质，例如乙基纤维素，纤维素乙酸酯丁酸酯(buryrate)。
口服使用的制剂还可以以硬胶囊的形式提供，其中将活性组分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或以软胶囊的形式，其中将活性组分与水溶性的载体例如聚乙二醇或油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。
水悬浮液含有在与适合于制备水悬浮液的赋形剂的混合物中的活性物质。这样的赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟基丙基甲基-纤维素，海藻酸钠，聚乙烯-吡咯烷酮，西黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十七碳亚乙基-氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如聚氧化乙烯山梨糖醇一油酸，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。水悬浮液还可以含有一或多种防腐剂，例如，对羟基苯甲酸乙基或正丙基酯，一或多种着色剂，一或多种调味剂和一或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿斯巴甜。
油性的悬浮液可以通过将活性组分悬浮在植物油比如花生油，橄榄油，芝麻油或椰子油，或矿物油比如液体石蜡中加以配制。油性的悬浮液可以含有增稠剂比如蜂蜡，硬石蜡，或鲸蜡醇。可以加入甜味剂，例如上面列出的那些，和调味剂以提供适口的口服制品。组合物可以通过加入抗氧化剂例如叔丁基对羟基茴香醚或α-生育酚来保存。
通过加入水而适合于制备水悬浮液的可分散性粉剂和粒剂，提供了在具有分散剂或润湿剂、悬浮剂和一或多种防腐剂的混合物中的活性组分。适宜的分散或润湿剂和悬浮剂已经通过如上所述的那些例子举例说明。也可以提供另外的赋形剂，例如甜味剂，调味剂和着色剂。这些组合物可以通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸来保存。
本发明的药物组合物还可以以水包油乳化剂的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或花生油，或矿物油，比如液体石蜡，或这些的混合物。适宜的乳化剂可以是天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，和衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的酯或偏酯，例如去水山梨糖醇单油酸酯，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧化乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。乳状液还可以含有甜味剂，调味剂，防腐剂和抗氧化剂。
糖浆和酏剂可以用甜味剂比如，甘油，丙二醇，山梨糖醇或蔗糖配制。这样的制剂还可以含有缓和剂，防腐剂，调味剂和着色剂和抗氧化剂。
药物组合物可以以无菌的可注射的水溶液的形式。可以采用的可接受的赋形剂和溶剂是水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。
无菌可注射制剂还可以是无菌的可注射的水包油微滴乳状液，其中活性组分溶于油相中。例如，可以首先将活性组分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液引入水和甘油的混合物中，并处理形成微乳液(microemulation)。
通过局部快速浓注可以将可注射的溶液或微滴乳状液引入到患者的血液液流中。也可以方便地以保持本化合物的恒定循环浓度的方式给予溶液或微滴乳状液。为了保持这种固定浓度，可以使用连续的静脉内输送装置。这种装置的例子是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。
药物组合物可以以无菌注射水溶液或油脂性的悬浮液的形式进行肌肉内给药和皮下给药。该悬浮液可以按照已知的技术、使用如上所述的适宜的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌注射制剂还可以是在无毒的、胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。另外，通常使用无菌的不挥发油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的不挥发油包括合成的单-或二酸甘油酯。另外，脂肪酸比如油酸在制备注射剂方面得到应用。
式I的化合物还可以以栓剂的形式进行直肠给药。这些组合物可以通过将药物与适宜的无刺激性的的赋形剂混合制备，其中赋形剂在普通的温度下是固体，但在直肠温度下是液体，因此在直肠中融化释放出药物。这样的材料包括可可脂，甘油胶，氢化植物油，各种分子量的聚乙二醇的混合物，和聚乙二醇的脂肪酸酯。
对于局部使用，使用含有式I化合物的乳膏剂、油膏、冻胶、溶液或悬浮液等等。(为了这种应用，局部施用将包括漱口剂和含漱液)。
本发明化合物可以通过局部使用合适的鼻内赋形剂和输送装置、以鼻内形式给予，或使用本领域普通技术人员熟知的透皮皮肤贴剂的形式、通过透皮途径给予。为了以透皮输送系统的形式给予，当然在全部给药方案中剂量给药将是连续的、而不是间歇的。本发明的化合物还可以以采用基料的栓剂形式给予，基料为例如可可脂，甘油胶，氢化植物油，各种分子量的聚乙二醇的混合物，和聚乙二醇的脂肪酸酯。
当对人类患者给予按照本发明的化合物时，每日给药量通常将由处方医师确定，同时剂量通常根据个体患者的年龄、体重、性别和响应值以及患者症状的严重度加以改变。
如果以固定剂量配制，这种联用药组合产品将采用如上所述的剂量范围之内的本发明的化合物、和在认可的剂量范围之内的其它药学活性剂或治疗剂。当联用药制剂是不适当的时，也可以将式I的化合物与已知的抗癌药剂或细胞毒素药剂顺序给予。本发明在给药顺序方面没有限制；式I的化合物可以在给予已知的抗癌药剂或细胞毒素药剂之前、或之后给予。
化合物可以以约0.05至200毫克/千克/天的剂量范围给予，优选小于100毫克/千克/天，以单一剂量或以2至4份的分开剂量给予。
生物学试验
HER1，HER2或HER4激酶试验：
在激酶缓冲液中对感兴趣的化合物加以试验，缓冲液含有20mMTris.HCl，pH值7.5，10mM MnCl2，0.5mM二硫苏糖醇，0.1mg/ml的牛血清白蛋白，0.1mg/ml的聚(glu/tyr，4∶1)，1μM ATP和4μCi/ml的[γ-33P]ATP。聚(glu/tyr，4∶1)是一种合成聚合物，起磷酰基受体的作用，且是从Sigma Chemicals购买的。通过加入酶引发激酶反应，并将反应混合物在26℃下培养1小时。通过加入EDTA至50mM将反应终止，并通过加入三氯乙酸至5％，将蛋白质沉淀出来。通过过滤到Packard Unifilter平皿上而将沉淀的蛋白质回收，在Topcount闪烁计数器上测定结合的放射量。
对于重组体HER1和HER4的制备，受体的胞质序列在昆虫细胞中表达为GST融合蛋白，用亲和色谱法将其纯化。将HER2胞质序列亚克隆到杆状病毒表达载体pBlueBac4(Invitrogen)中，并用昆虫细胞中未加标记的蛋白质来表达。将重组蛋白用离子交换色谱部分纯化。
本发明化合物抑制HER1，HER2和HER4激酶的IC50值在0.001和25μM之间。优选化合物具有0.001-5.0μM之间的IC50值。更优选化合物具有0.001-1.0μM之间的IC50值。最优选化合物具有0.001-0.1μM之间的IC50值。
HERG钾通道试验可用来筛选化合物的HERG活性(参见CaballeroR，等人，Direct Effects of Candesartan and Eprosartan on HumanCloned Potassium Channels Involved in Cardiac Repolarization，Molecular Pharmacology，59卷，No.4，pp.825-36，2001)。相应地，优选的化合物具有低的HERG试验活性。
制备方法
某些式I的化合物通常可以按照下列反应路线和本领域技术人员的知识来制备。补充的制备信息还可以在2000年5月18日申请的共同决定的美国专利申请序列号09/573,829和在专利权合作条约(PCT)下国际申请公开的国际公开号WO 00/71129中找到，将这二者引入到本文中作为参考。
反应路线1
其中E1，E2是酯基且X1是卤素
步骤1
反应路线1的第一步是通过以下步骤实现的：在无水溶剂例如THF或DMF中、用碱例如叔丁醇钾或氢化钠处理3-烷基-1H-吡咯-2，4-二羧酸酯i(T.D.Lash等人，J.Heterocyclic Chem.，1991，28，1671)，随后用胺化试剂例如O-(2，4-二硝基-苯基)-羟胺(T.Sheradsky，J.Heterocyclic Chem.，1967，4，413)或氯胺(I.P.Sword，J.Chem.Soc.C，1971，820)处理，得到吡咯基胺ii。
步骤2
将吡咯基胺ii与过量的甲酰胺加热，得到吡咯并三嗪酮iii。
步骤3
通过与合适的卤氧化磷加热，将化合物iii转变为4-卤代-吡咯并三嗪iv，例如通过将iii与三氯氧磷加热获得4-氯-吡咯并三嗪。可以将4-卤代-吡咯并三嗪iv转变为化合物x，如反应路线2中所列出。
反应路线2
其中E2是酯基且X1是卤素
步骤1
可以将5-硝基吲唑v烷基化得到吲唑vi。该步骤可以在多种条件下完成，例如通过在DMF中加热v、碳酸钾和合适的烷基化剂的混合物。
步骤2
在标准条件下将硝基吲唑vi还原成相应的氨基吲唑vii，例如将vi在5％铂-碳上在乙醇中氢化。
步骤3
在室温下、在碱例如NaHCO3或三乙胺的存在下、在溶剂例如乙腈中，用4-卤代-吡咯并三嗪iv处理5-氨基-吲唑衍生物vii，得到偶合产物viii。在没有碱的情况下，将vi与5-氨基-吲唑衍生物一起加热，也可以得到viii。
步骤4
可以将羧酸酯viii通过用碱例如LiOH水溶液处理进行皂化，然后通过用酸例如HCl处理进行酸化，得到羧酸ix。
步骤5
羧酸ix至最终产物x的转化可以在多种条件下完成。例如，在碱例如三乙胺的存在下，可以将羧酸i x通过用合适的叠氮化物例如二苯基膦叠氮盐(diphenylphosphorazidate)处理而进行Curtius重排，转变为相应的异氰酸酯。然后将中间体异氰酸酯用合适的亲核试剂例如醇或胺俘获，得到相应的脲或尿烷x。
另外，其它的式I化合物可以使用本领域技术人员通常已知的流程来制备。特别地，下列实施例提供了制备本发明化合物的其他的方法。
实施例
现在将进一步通过下列操作实施例来描述本发明，这些实施例是本发明的优选实施方案。除非另有陈述，全部温度是以摄氏温度(℃)表示的。“HPLC保留时间(Rt)”是在下列条件下获得的HPLC保留时间：Hypersil C18 BDS柱，250x4.6mm，5um，检测波长254nm，流速1mL/min.。使用如下的线性梯度：90％的0.1％三氟乙酸/水，10％乙腈(开始)至100％乙腈，15分钟，然后100％乙腈，5分钟。对于YMC柱HPLC，所有的梯度变化开始于100％溶剂A(10％MeOH，90％H2O，0.1％TFA)，并结束于100％溶剂B(90％MeOH，10％H2O，0.1％TFA)]，流速(毫升/分钟)。UV检测总是于220纳米处进行。
除非另有说明，1H NMR谱是在室温下在Bruker300MHz分光计上在CDCl3中记录的，并使用四甲基硅烷作为内标。使用Perkin Elmer旋光计测定旋光性。熔点在Barnstead Thermolyne MelTemp II熔点测定器上测定，且是未校正的。
这些实施例是例证性的而不是限制性的，应当理解可能有其它如这里所附加的权利要求所定义的属于本发明的精神和范围的实施方案。
实施例1
[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯
A.1-苄基-5-硝基吲唑。
向12L的3颈圆底烧瓶中装入DMF(2L)、5-硝基吲唑(200克，1.22摩尔)和碳酸钾(186克，1.35摩尔)。然后将溴化苄(230克，1.35摩尔)以保持温度低于40℃的速度加入到搅拌的悬浮液中。一旦加完后，将混合物加热至75℃，进一步保持8小时，通过TLC(SiO2，1∶1乙酸乙酯∶己烷)监控反应。然后将反应冷却至室温，加入水(2L)，将得到的浆液在室温下搅拌0.5小时。将得到的黄色固体滤出，并在45℃下和5mm Hg柱的真空中干燥48小时。这样得到424克、通过HPLC分析确定1.25∶1的1-和2-苄基-5-硝基吲唑的混合物(Rt 1-苄基＝14.9min，Rt 2-苄基＝14.1min)。然后将该物质分成四份大约100克的批料，并且将每个批料溶于丙酮中(470mL)。然后以稳定的液流慢慢地加入水(156ml)。在室温下搅拌额外的1小时后，将得到的固体滤出并真空干燥。由该步骤得到混合的、总数126克(41％)的1-苄基-5硝基吲唑，通过HPLC分析，其纯度是92.1％，主要的杂质是该2-苄基衍生物。
1H NMR：δ＝8.72(d，J＝2.0Hz，1H)，8.24(s，1H)，8.21(dd，J＝9.2和2.0Hz，1H)，7.19-7.40(m，6H)和5.64ppm(s，2H)。HPLC：Rt＝14.9min。
B.5-氨基-1-苄基吲唑
向500毫升Parr氢化器瓶子中装入1-苄基-5-硝基吲唑(30.4克，120mmol)、无水乙醇(240ml)和5％铂-碳(1.5克，湿度50％)。将瓶子安放在Parr氢化装置上，用氢气将瓶子加压至50psi，并摇动瓶子直至氢的吸收停止。然后将瓶子的内含物转入1L的圆底烧瓶中，在氮气条件下升温至大约60℃，并快速地滤过硅藻土衬垫。用乙醇(100mL)洗涤滤饼。然后向滤液中加入水(250毫升)，并将得到的悬浮液在冰浴中搅拌4小时。通过过滤将得到的固体分离，并在泵上干燥固体1h。在相同条件下进行另外的3个还原反应。然后将四批分开的物质混合，得到87.4g粗品，将其用乙酸乙酯(900毫升)重结晶。减压(1mmHg)过滤并干燥，得到65.0克(59％)的标题化合物浅黄色固体。
Mpt＝148-149℃。1H NMR：δ7.82(d，J＝1.0Hz，1H)，7.12-7.28(m，6H)，6.93(d，J＝2.1Hz，1H)，6.80(dd，J＝8.8，2.1Hz，1H)，5.52(s，2H)和3.56ppm(bs，2H)
HPLC：Rt＝9.1min。m/z＝224(M+H)+。
C.4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸甲基酯
向1L圆底烧瓶中装入5-乙基-4-氧代-3，4-二氢-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸甲基酯(25.0克，113mmol)、甲苯(375ml)和二异丙基乙胺(11.8克，91.6mmol)。然后在室温下滴加入氯氧化磷(20.7g，135mmol)(放热)。一旦加完后，将反应混合物加热至100℃，保持20小时。通过HPLC等分样品的分析表明，原料已经完全耗尽(Rt原料＝10.6分钟，Rt产物＝15.2分钟)。然后冷却反应，并慢慢地倾倒入饱和碳酸氢钠溶液(500mL)、甲苯(500mL)和冰水(350mL)的混合物中。搅拌30分钟之后，分离有机层，并用饱和碳酸氢钠溶液(500mL)洗涤。用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到30.5克(＞100％)粗品4-氯-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸甲基酯。将该物质溶于乙腈中(800ml)，并将溶液装入一个2L的圆底烧瓶中。然后加入碳酸氢钠(15.1克，180mmol)和5-氨基-1-苄基吲唑(27.8克，124mmol)，随后加入另外的乙腈(400毫升)。将得到的悬浮液在室温下搅拌16小时。这个时间之后的HPLC分析表明，剩余大约17％的起始吲唑。然后将混合物加热至回流，保持1小时，这个时间之后只剩余5％的起始吲唑。冷却后，将反应混合物浓缩，并将残余物在二氯甲烷(800mL)和水(300mL)之间分配。分出下部的有机层，并进一步用水(300ml)洗涤。用硫酸钠干燥，减压过滤并浓缩，得到51.3克(100％)4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸甲酯，其不用进一步纯化而使用。
1H NMR：δ＝8.08(d，J＝1.5Hz，1H)，8.05(d，J＝0.7Hz，1H)，7.99(s，1H)，7.93(s，1H)，7.18-7.43(m，7H)，5.60(s，2H)，3.88，(s，3H)，3.33(q，J＝7.1Hz，2H)和1.39ppm(t，J＝7.1Hz，3H)。HPLC Rt＝15.0min。m/z＝427(M+H)+。
D.4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸
将4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸甲基酯(51.3克，0.12摩尔)溶于THF(750毫升)中，并将溶液加入到一个装有回流冷凝器的2L圆底烧瓶中。然后向烧瓶中加入甲醇(250mL)，随后加入氢氧化锂一水合物(60.8g，1.45mol)的水溶液(300mL)。然后将反应加热至回流，保持20小时。这个时间之后，混合物的HPLC分析表明反应完成。然后冷却反应，并将混合物减压浓缩。然后向残余物中加入水(200ml)，并将得到的溶液用乙酸乙酯(2X100毫升)提取。然后向水溶液中加入盐酸(2N)，直至得到3-4的pH值。这样导致粘稠白色沉淀的形成，将其滤出。然后将滤饼在乙醚(1L)中成浆，重新过滤和干燥，得到29.2克4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸。将滤液与最初的乙酸乙酯提取液混合，减压除去溶剂。通过用2∶1的乙醚与乙酸乙酯的混合物(500mL)研磨来纯化残余物，随后过滤并干燥，进一步得到13.4克目标酸。合并的4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸的总收率是42.6克(86％)，且该物质的HPLC纯度为98.2％。
Mpt＝246-248℃。1H NMR(DMSO-d6)：δ＝12.47(bs，1H)，8.74(s，1H)，8.14(s，1H)，8.04(s，1H)，7.97(d，J＝1.4Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.70(d，J＝9.0Hz，1H)，7.51(dd，J＝9.0和1.8Hz，1H)，7.34-7.21(m，5H)，5.69(s，2H)，3.37(q，J＝7.2Hz，2H)和1.22ppm(t，J＝7.2Hz，3H)，HPLC：Rt＝12.2min。m/z＝413(M+H)+。
E.(S)-(+)-N-苄基丝氨酸
该物质通过在Brown，G.R.；Foubister，A.J.；Wright，B.J Chem.Soc.Perkin Trans.I，1985，2577中报道的方法来制备。
向5L的3颈圆底烧瓶中装入L-丝氨酸(313g，3.0mol)和2N氢氧化钠溶液(1.5L)。开始搅拌并加入苯甲醛(322.4克，3.0mol)。15分钟之后，在室温下，将溶液冷却至5℃，并以很小的份额加入硼氢化钠(35.0g，0.93mol)，以便保持温度低于10℃。一旦加完后，使溶液升温至室温，并搅拌2小时。此时，加入第二部分的苯甲醛(322.4g，3.0mol)，并搅拌溶液15分钟。将溶液冷却至5℃，并加入硼氢化钠(35.0g，0.93mol)，再次保持温度低于10℃。然后将反应混合物升至室温，并搅拌2小时。加入乙醚(1L)，将溶液搅拌5-10分钟，并分离乙醚层。然后用37％的盐酸将水层的pH值调节至6。将得到的固体过滤并将湿滤饼用水重结晶，在45℃下干燥过夜之后，得到230g(40％)(S)-(+)-N-苄基丝氨酸。
[α]25D+4.80(c＝1.0，6M HCl).Mpt＝218-226℃。1H NMR(D2O)：δ＝7.54(s，5H)，4.34(d，J＝5.5Hz，2H)，4.02(q，J＝3.0Hz，2H)，和3.75ppm(t，J＝4.4Hz，1H)。
F.(S)-(+)-4-苄基吗啉-5-酮-3-羧酸的制备
该物质通过在Brown，G.R.；Foubister，A.J.；Wright，B.J Chem.Soc.Perkin Trans.I，1985，2577中报道的方法来制备。
向5L的3颈圆底烧瓶中装入(S)-(+)-N-苄基丝氨酸(229克，1.17摩尔)、氢氧化钠(58.7克，1.47摩尔)和水(1L)。将得到的溶液冷却至0℃，并以保持温度低于4℃的速度滴加入氯乙酰氯(170.4g，1.5mol)。完成加入之后，将反应物在0℃下搅拌30分钟。然后除去低温浴，并加入30％的氢氧化钠溶液(350mL)。观察到放热现象，反应温度达到29℃。将反应混合物进一步加热到33℃并在此温度下维持2小时。冷却至室温，随后用37％盐酸酸化至pH值1，导致稠的白色沉淀的形成，通过过滤将其分离。在乙腈(1L)中将滤饼制成浆液，过滤和浓缩滤液。将得到的固体干燥，得到68.1克(25％)(S)-(+)-4-苄基吗啉-5-酮-3-羧酸晶状白色固体。
[α]25D+52.30(c＝1.2，MeOH).Mpt＝173-177℃。1H NMR(DMSO-d6)：δ＝7.31(s，5H)，5.25(d，J＝15.3Hz，1H)，4.18(m，3H)，和3.88ppm(m，3H)。
G.(R)-(-)-4-苄基-3-羟基甲基吗啉盐酸盐
该物质通过在Brown，G.R.；Foubister，A.J.；Wright，B.JChem.Soc.Pekin Trans.I，1985，2577中报道的方法来制备。
向5L的3颈烧瓶中装入(S)-(+)-4-苄基吗啉-5-酮-3-羧酸(102克，0.43摩尔)、三乙胺(53.3克，0.53摩尔)和THF(1.0L)。将溶液冷却至0℃，并向反应烧瓶中滴加入2M的甲硼烷二甲硫醚配合物的THF溶液(1.6L，3.20mol)。开始时反应放热，达到12℃，并观察到快速冒泡。当加入了大约300毫升的溶液后，温度稳定在6℃并且停止冒泡。用1.5小时加入剩余的溶液，保持温度在5-6℃。然后将溶液升至室温，并产生回流。回流6小时之后，将反应冷却至室温，然后放入冰/盐浴中。以保持温度低于10℃的速度滴加入水(600毫升)。再次观察到快速的冒泡。然后将反应溶液浓缩，并加入2N的氢氧化钠溶液(1L)。用乙酸乙酯提取(3x1L)，用MgSO4干燥，过滤并浓缩得到黄色油。将油吸收在乙醇(2L)中，并慢慢地加入37％的盐酸(200mL)。酸的加入导致放热至45℃，并观察到快速冒泡。搁置大约10分钟之后，白色沉淀开始形成。将混合物在4℃下冷却，保持3小时，并将固体过滤。用乙醇(50mL)洗涤滤饼，然后真空干燥过夜。这样得到78.7克(76％)(R)-(-)-4-苄基-3-羟基甲基吗啉盐酸盐，其不用进一步纯化而使用。
[α]25D-14.00(c＝0.15，MeOH).Mpt＝228-230℃。1H NMR(CD3OD)：δ＝7.52(m，5H)，4.85(d，J＝13.0Hz 1H)，4.21(m，2H)，4.00(m，2H)，3.66-3.88(m，3H)，3.46(m，1H)和3.20ppm(m，2H)。
H.(R)-(-)-3-羟基甲基吗啉-4-羧酸叔丁基酯的制备
将(S)-(-)-4-苄基-3-羟基甲基吗啉盐酸盐(35.0克，0.144摩尔)加入到乙酸乙酯(250毫升)与2N氢氧化钠溶液(200毫升)的混合物中，并将混合物快速搅拌15分钟。然后分离乙酸乙酯层，干燥(MgSO4)并过滤。然后将二碳酸二叔丁基酯和上述滤液装入一个500mL的Parr烧瓶中。然后用氮气吹扫烧瓶，并加入钯/碳(1.50克，湿度50％，5％钯)。然后在45psi的氢气条件下将混合物氢化，直至停止吸收(2-3小时)。通过硅藻土衬垫过滤混合物，并将滤液浓缩，以定量产率得到(R)-(-)-3-羟甲基-吗啉-4-羧酸叔丁酯。该物质的1H NMR分析显示，存在大约5％的二碳酸二叔丁基酯。杂质没有呈现出影响随后的化学过程，并且该物质不用进一步纯化而使用。
[α]25D-56.20(c＝1.0，MeOH).Mpt＝78-80℃和208-240℃(两个吸热现象).1HNMR：δ＝3.71-3.97(m，5H)，3.41-3.58(m，2H)，3.15(m，1H)，2.61(t，J＝5.3Hz，1H)，和1.47ppm(s，9H)。
(S)-(+)-3-羟基甲基吗啉-4-羧酸叔丁基酯是以类似的方式、从D-丝氨酸开始来制备的，并且得到白色固体。
[α]25D58.30(c＝1.0，MeOH).Mpt＝77-79℃。1H NMR：δ＝3.71-3.97(m，5H)，3.41-3.58(m，2H)，3.15(m，1H)，2.61(t，J＝5.3Hz，1H)，和1.47ppm(s，9H)。
I.3-[[[[[5-乙基-4-[[1-(苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基-4-吗啉羧酸，(3S)-1，1-二甲基乙基酯的制备
向500毫升的圆底烧瓶中装入二噁烷(200毫升)、4-(1-苄基-1H-吲唑-5-基氨基)-5-乙基吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸(50克，35.5mmol)、二苯基膦酰基叠氮化物(12.1克，41.8mmol)、三乙胺(4.40克，43.0mmol)和粉末状的分子筛(50g)，并将得到的悬浮液在50℃下加热4小时。然后将温度升至80℃，并加入(R)-(-)-3-羟基-甲基吗啉-4-羧酸叔丁基酯(15.1克，67.7mmol)。继续加热额外的4小时。然后冷却反应混合物，通过硅藻土衬垫过滤并减压浓缩滤液。通过硅胶色谱法纯化残余物，用1∶1的己烷/乙酸乙酯洗脱，得到14.0克(63％)3-[[[[[5-乙基-4-[[1-(苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1f][1，2，4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-吗啉羧酸，(3S)-1，1-二甲基乙基酯白色固体。
HPLC：Rt＝13.8min.1H NMR：δ＝8.05(s，2H)，7.92(s，1H)，7.06-7.47(m，8H)，6.41(bs，1H)，5.60(s，2H)，4.39(m，3H)，3.85(m，3H)，3.60(m，1H)，3.48(m，1H)，3.23(m，1H)，2.84(q，J＝7.7Hz，2H)，1.44(s，9H)，和1.36ppm(t，J＝7.6Hz，3H)。
J.[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯，一盐酸盐的制备
将3-[[[[[5-乙基-4-[[1-(苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f[1，2，4]三嗪-6-基]氨基]羰基]氧基]甲基]-4-吗啉羧酸，(3S)-1，1-二甲基乙基酯(14.0克，22.3mmol)溶于二氯甲烷(250毫升)中，并用三氟乙酸(40毫升)处理。将得到的溶液搅拌18小时，然后通过加入饱和碳酸钠水溶液将其中和。将有机相分离混合并用硫酸镁干燥。过滤并浓缩滤液，得到11.4克[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯黄色油。将该物质是重新溶于二氯甲烷(100毫升)中，并用1M盐酸/乙醚(21.7毫升，21.7mmol)处理。将溶液搅拌30分钟，然后减压浓缩。在高真空(0.5mmHg柱)下干燥残余物过夜，得到11.6克(92％)[5-乙基-4-[[(1-苯基甲基)-1H-吲唑-5-基]氨基]吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-基]-氨基甲酸，(3S)-3-吗啉基甲基酯盐酸盐类白色固体。
[α]25D+6.70(c＝0.1，MeOH).Mpt＝＞300℃。HPLC：Rt＝9.95min.1H NMR(DMSO-d6)：δ＝9.9(bs，2H)，9.47(bs，1H)，8.84(bs，1H)，8.15(s，1H)，7.49-7.98(m，4H)，7.34(d，J＝2.1Hz，1H)，7.23-7.31(m，5H)，5.69(s，2H)，4.33(d，J＝5.2Hz，2H)，3.60-4.03(m，5H)，3.10-3.29(m，4H)，和1.16ppm(t，J＝7.3Hz，3H)。m/z＝527(M+H)+
表1中显示的化合物是使用实施例1中列出的一般方法来合成的。
表1
除非另有陈述，HPLC保留时间是使用具有15分钟梯度时间的Hypersil BDS C18柱来确定的。1YMC TurboPack Pro柱具有2分钟梯度。2YMC S5 ODS柱具有4分钟梯度。3YMC Xterra ODS柱具有2分钟梯度。4YMC ODS-A C18柱具有2分钟梯度。5YMC C18 S5柱具有2分钟梯度。标明“*”的MS数据是[M+2H]。
下列化合物，其中R如表中所定义，是利用实施例1中所描述的方法制备的。
表2
除非另有陈述，HPLC保留时间是使用具有15分钟梯度时间的Hypersil BDS C18柱来确定的。1YMC TurboPack Pro柱具有2分钟梯度。2YMC S5 ODS柱具有4分钟梯度。3YMC Xterra ODS柱具有2分钟梯度。4YMC ODS-A C18柱具有2分钟梯度。5YMC C18 S5柱具有2分钟梯度。
下列化合物，其中R2如表3中所定义，是利用实施例1中所描述的方法、使用5-甲基-4-氧代-3，4-二氢-吡咯并[2，1，f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙基酯来制备的。
表3
除非另有陈述，HPLC保留时间是使用具有15分钟梯度时间的Hypersil BDS C18柱来确定的。1YMC TurboPack Pro柱具有2分钟梯度。2YMC S5 ODS柱具有4分钟梯度。3YMC Xterra ODS柱具有2分钟梯度。4YMC ODS-A C18柱具有2分钟梯度。5YMC C18 S5柱具有2分钟梯度。
下列化合物是使用实施例1中所描述的方法制备的。
表4
除非另有陈述，HPLC保留时间是使用具有15分钟梯度时间的Hypersil BDS C18柱来确定的。1YMC TurboPack Pro柱具有2分钟梯度。2YMC S5 ODS柱具有4分钟梯度。3YMC Xterra ODS柱具有2分钟梯度。4YMC ODS-A C18柱具有2分钟梯度。5YMC C18 S5柱具有2分钟梯度。
下面列出了用于制备一些中间体的一般方法。
实施例174
方法A：(R)-(+)-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备。
向100毫升的圆底烧瓶中装入(R)-(+)-3-哌啶醇盐酸盐(0.52克，3.77mmol)、二碳酸二叔丁基酯(0.99克，4.53mmol)和CH2Cl2(15毫升)。加入三乙胺(1.09克，10.8mmol)并将溶液搅拌过夜。将反应混合物浓缩并用硅胶色谱分离法纯化，得到0.76克(100％)(R)-(+)-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁基酯浅棕色油。
[α]25D-21.60(c＝0.1，MeOH).1H NMR：δ＝3.75(m，2H)，3.53(m，1H)，3.08(m，2H)，2.17(bs，1H)，1.85(m，1H)，1.74(m，1H)，1.53(m，2H)，和1.45ppm(s，9H)。m/z＝102(M-C5H8O2+H)+。
下列衍生物是使用上述方法、由相应的可商业购买的氨基醇合成的：(2-羟基-1，1-二甲基乙基)氨基甲酸叔丁基酯
方法B：反式-4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯的制备。
向1L的圆底烧瓶中装入反式-4-氨基环己醇盐酸盐(25.0克，0.17摩尔)、二碳酸二叔丁基酯(40.8克，0.19摩尔)和氢氧化钠(20.1克，0.05摩尔)。加入水(250毫升)和1，4-二噁烷(250毫升)并开始搅拌。搅拌4小时之后，减压除去二噁烷，并用水稀释(750mL)残余物。用乙酸乙酯(2X 600毫升)提取得到的溶液，然后将有机相合并，并用硫酸镁干燥。过滤并浓缩，得到30.6克(74％)4-羟基环己基氨基甲酸叔丁基酯白色固体。
1H NMR：δ＝4.38(bs，1H)，3.60(m，1H)，3.40(bs，1H)，1.95(m，4H)，1.64(m，1H)，1.43(s，9H)，1.35(m，2H)，和1.16ppm(m，2H)。m/z＝116(M-C5H8O2+H)+。
下列衍生物是使用上述方法、由相应的可商业购买的氨基醇合成的：4-(2-羟乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯
4-[2-(2-羟乙氧基)乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁基酯。
方法C：2-羟甲基-哌啶-1-羧酸叔丁基酯的制备。
向一个50毫升的圆底烧瓶中加入2-羟基甲基哌啶(1.0克，8.7mmol)、碳酸氢钠(1.24克，14.8mmol)和15毫升1∶1的二噁烷与水的溶液。加入二碳酸二叔丁基酯(2.84g，13mmol，1.5eq.)，同时快速搅拌。在室温下搅拌反应5小时，并减压除去溶剂。将50毫升水与50毫升乙酸乙酯的混合物加入到残余物中，分离各层。用乙酸乙酯(2X50毫升)提取水层，将合并的有机层用硫酸钠干燥。过滤并浓缩悬浮液，得到澄清油，然后将其用硅胶色谱法纯化。这样得到1.56克(84％)2-羟甲基-哌啶-1-羧酸叔丁基酯白色固体。
Mpt.＝72-73℃。1H NMR δ＝4.28(m，1H)，3.93(m，1H)，3.77(m，1H)，3.60(m，1H)，2.96(m，1H)，2.39(s，1H)和1.76-1.30ppm(m，15H)。m/z＝116(M-C5H8O2+H)+。
下列衍生物是使用上述方法、由相应的可商业购买的氨基醇合成的：
4-(2-羟乙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯
3-羟基甲基哌啶-1-羧酸叔丁基酯
4-羟基甲基哌啶-1-羧酸叔丁基酯
下列醇类是通过所给的文献方法合成的(将所有的文献方法引入本文中作为参考)。
1-咪唑乙醇和1-吡唑乙醇：Banfi，A.；Sala，A.；Soresinetti，P.A.；Russo，G.J.Heferocyclic Chem.1990，27，215。
4-甲基-1-哌嗪乙醇：Cymerman-Craig，J.；Harrison，R.J.；Tate，M.E.；Thorp，R.H.；Ladd，R.Aust.J.Chem.1956，989。
4-吗啉丙醇：Chini，M.；Crotti，P.；Favero，L.；Macchia，F.Tetrahedron Lett.1994，35，761.
2-(2-羟乙基)咪唑：Lawson，J.Keith，J.R.J.Am.Chem.Soc.1953，75，3398.
[[2-(2-羟乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯：Greenwald，R.B.；Choe，Y.H.；Conover，C.D.；Shum，K.；Wu，D.；Royzen，M.J.Med.Chem.2000，43，475。
(S)-2-羟基甲基吗啉和(R)-2-羟基甲基吗啉：Berg，S.；Larsson，L.；Renyi，L.；Ross，S.B.；Thorberg，S.；Thorell-Svantesson，G.J.Med.Chem.1998，41，1934。通过上面的方法A，将这些氨基醇转变为(S)-2-羟甲基-吗啉-4-羧酸叔丁基酯(R)-2-羟甲基-吗啉-4-羧酸叔丁基酯。
顺式-4-氨基-4-甲基环己醇：Gelotte，K.O.；Surrey，A.R.美国专利US 3,895,036，1975。通过上面的方法A，将该氨基醇转变为4-羟基-1-甲基环己基氨基甲酸叔丁基酯。
4-(3-羟基丙基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯：Egbertson，M.S.；Chang，C.T.-C.，Duggan，M.E.；Gould，R.J.；Halczenko，W.；Hartman，G.D.；Laswell，W.L.；Jynch，J.J.；Lynch，R.J.；Manno，P.D.；Naylor，A.M.；Prugh，J.D.；Ramkit，D.R.；Sitko，G.R.；Smith，R.S.；Turchi，L.M.；Zhang，G.J.Med.Chem.1994，37，2537。
1-(2-羟乙基)-1，2，4-三唑：Aisworth，C.；Jones，R.G.J.Am.Chem.Soc.1955，77，621。
2-羟甲基-1-甲基咪唑：Hay，M.P.；Wilson，W.R.；Denny，W.A.Tetrahedron 2000，56，645。
(R)-3-羟基甲基吡咯烷和(S)-3-羟基甲基吡咯烷：Culbertson，T.P.；Domagala，J.M.；Nichols，J.B.；Priebe，S.；Skeean，R.W.J.Med.Chem.1987，30，1715。通过上面的方法A，将这些氨基醇转变为(R)-3-羟基甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯和(S)-3-羟甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯。
(S)-(-)-3-羟基哌啶：Olsen，R.K.；Bhat，K.L.；Wardle，R.B.；Hennen，W.J.；Kini，G.D.J.Org.Chem.1985，50，896。通过上面的方法A，将这些氨基醇转化为(S)-(-)-3-羟基哌啶-1-羧酸叔丁基酯。
可以用下面列出的一般方法来制备在实施例1，92，136-144，157，162和163中公开的化合物。
实施例175
A.N-苄基-丝氨酸的制备
向反应容器中加入固体丝氨酸甲基酯盐酸盐(1eq)。加入甲醇(2.85vol)并开始搅拌。用10分钟加入三乙胺(1eq)，同时保持温度在14-18℃。继续搅拌，直至所有的固体溶解。将混合物冷却至10℃，用15分钟加入苯甲醛(1eq)，同时保持温度在11-15℃之间。在8-12℃下，反应持续30分钟。用2小时加入固体硼氢化钠(4eq)，同时保持温度在10-20℃。在14-16℃下，反应持续30分钟。在一个分开的烧瓶中，加入甲醇(1.15vol)和水(1.72vol)。加入50wt/wt％的氢氧化钠水溶液(3eq)，将得到的溶液冷却至15℃。用1小时将希夫碱转入到这个混合物中，同时保持内部温度在16-22℃之间。加入水(1.72vol)，随后加入12.2M的浓HCl水溶液(2.67eq)，同时保持温度在15-25℃，调节pH值至9.5。将混合物过滤，并将滤饼用两个份额的水(0.58vol)洗涤。用乙酸乙酯(5.75vol)洗涤合并的水溶液两次。将混合物由25℃冷却至15℃，加入12.2M的浓HCl水溶液(0.89eq)，直至混合物的pH值达到6.5，同时保持温度在17-22℃之间。将混合物在5℃下保持15-25小时，然后将固体收集在过滤漏斗上。将滤饼用两个份额的水(1.43vol)和两个份额的庚烷(1.43vol)洗涤。将湿的固体转入到干燥盘中，在45℃下干燥21小时，得到产物。
B.化合物B的制备
向一个反应器中加入N-苄基-丝氨酸(1eq)和THF(6.1vol)。将得到的溶液冷却至0±5℃，加入预冷却(0-5℃)的碳酸钾(3eq)水溶液(6.1vol)。然后通过加入漏斗加入氯乙酰氯(1.4eq)，同时保持内部温度低于5℃。将双相反应混合物在0±5℃下老化大约30分钟。老化之后，将混合物取样进行HPLC分析。如果剩余的N-苄基-丝氨酸所呈现的面积百分比大于6，需要按照下列方案加入额外的氯乙酰氯：每10％的面积百分比的N-苄基-丝氨酸，加入0.12-0.15当量的氯乙酰氯。如果额外加入氯乙酰氯是必要的，则加入之后，使混合物老化额外的30分钟，再取样。一旦已经满足反应完全的标准，加入50wt％氢氧化钠，同时保持内部温度在5和10℃之间，直至pH值保持恒定＞13.5。当HPLC分析显示中间体小于1％的面积百分比(合并的)时，认为反应完全。将混合物升温至25℃，加入庚烷(2vol)。将混合物快速搅拌10分钟，并使各相分离。弃置有机相，并用庚烷(3vol)再次处理富水相。快速搅拌10分钟之后，使各相沉降，并弃置有机相。将富水部分冷却至-5-0℃，加入37wt％盐酸(aq)，同时保持物料温度＜10℃，直至pH值＜2。将得到的浆液保持在-10-0℃下至少4小时。然后将浆液过滤，并用预冷却(3-7℃)的水(2x4.6vol)洗涤。在40-45℃下真空干燥湿滤饼，得到目标产物。
C.(4-苄基-吗啉-3-基)]-甲醇盐酸盐的制备
在氮气下，向化合物B(1eq)/干燥THF(16vol)的搅拌混合物中加入三乙基胺(1.2eq)。以保持反应混合物的温度低于10℃的速度，向该混合物中加入甲硼烷-甲硫醚配合物(7.5eq)。在氮气下，将反应混合物温和回流(65℃)5.5小时。冷却混合物并慢慢地加入MeOH(1.39vol)。在加入期间，使内部温度保持低于25℃。向得到的混合物中加入水(4.2vol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。真空浓缩混合物，并用2N氢氧化钠水溶液(4.6eq)和水(1.8vol)稀释。将混合物用乙酸乙酯(2x7vol)提取。用20％的氯化钠水溶液(4.2vol)洗涤合并的乙酸乙酯提取液。然后将乙酸乙酯提取液真空浓缩，得到粗品油。将油用乙酸乙酯(10.2vol)和甲醇(0.5vol)稀释。向此溶液中滴加入三甲基甲硅烷基氯化物(0.6vol)，直至溶液的pH值是酸性。在加入三甲基甲硅烷基氯化物期间，保持物料温度低于20℃。在加入过程结束后，将混合物在0℃下冷却2小时，并通过过滤收集沉淀，得到目标产物。
D.3-(羟甲基)-吗啉-4-羧酸叔丁基酯的制备
将(4-苄基-吗啉-3-基)]-甲醇盐酸盐(1eq)、K3PO4水溶液(2.5eq)和EtOAc的混合物搅拌，直至均相。将EtOAc层分离，并用新鲜的EtOAc提取水层。将合并的EtOAc层加入到一个含有20wt％Pd(OH)2/C(0.06eq)的烧瓶中。加入二碳酸二叔丁基酯(1eq)。将混合物在15psi下氢化4小时。通过HPLC发现完成之后，通过Celite硅藻土过滤混合物。用环己烷(7-10体积)将产物结晶，得到标题化合物。
E.吲唑的制备
将5-硝基吲唑(1eq)、碳酸铯(1.1eq)和DMF(5vol)加热至70-80℃。用75分钟加入合适的溴化物RCH2Br(1eq)。冷却反应混合物至20℃。将盐过滤，并用DMF(2.7vol)洗涤滤饼。在15-21℃之间加入水(1.35至1.45vol)将产物结晶。将结晶浆液保持4小时，过滤结晶并用2∶1的DMF∶水的混合物(2.1vol)、水(2vol)和最后3∶1的冷的乙腈∶水混合物(1.5vol)洗涤。在45℃下干燥湿滤饼，得到产物E。
F.吲唑胺的制备
将吲唑E(1eq)加入到氢化器中，加入THF(8vol)，并在15psi下、在30-40℃之间进行氢化。将反应混合物保持1小时(s.m.＜3％，HPLC)，冷却至25℃，并将过滤催化剂，用THF(0.9vol)洗涤。将反应混合物转入另一个容器中，再次用THF(0.4vol)冲洗，常压蒸馏至目标体积(5.5vol)，并加入庚烷(15vol)。将反应混合物在47-60℃之间保持1小时。将浆液冷却1.5小时至18-23℃。将浆液保持1小时，过滤，用THF/庚烷(1∶4，10vol)洗涤，在45℃烘箱中干燥。
G.酯的制备
向3颈烧瓶中装入5-烷基-4-氧代-3，4-二氢-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-羧酸乙酯(1eq)和干燥甲苯(15vol)。加入一份POCl3(1.2eq)，随后以保持温度低于30℃的速度缓慢加入二异丙基乙胺(1.1eq)。将得到的悬浮液加热至111℃，保持24小时，在大约80℃时变成均相。用2M MeNH2/THF淬灭反应之后，通过HPLC监控反应(10μl反应混合物，20μl MeNH2/THF的200μl乙腈溶液)。一旦反应完成，将反应冷却至-2℃，并将其加入到K2HPO4(4eq)水溶液(16vol)中，同时保持温度低于10℃。将反应混合物在-22℃下搅拌20分钟。用硅藻土衬垫过滤得到的轻微悬浮液，并将各层分离。将有机层用23.5wt％的K2HPO4水溶液(3vol)洗涤，随后用水(2.5vol)洗涤。将溶液过滤，并通过在22℃至58℃的温度范围加热来浓缩；继续浓缩，直至甲苯对于起始酯的比例是26-36％。将反应混合物从58℃冷却至40-50℃。向得到的悬浮液中加入吲唑F(0.988eq)和二异丙基乙胺(1.1eq)。将反应加热至70-80℃，并保持此温度，直至通过HPLC显示反应完成。然后冷却至55℃，并加入异丙醇(15.5vol)。在1.8-2.2小时内，将反应混合物从55℃冷却至22℃，并过滤。用冷异丙醇(5.5vol)洗涤滤饼，在低于50℃的真空中干燥，得到产物。
H.酸的制备
向装有机械搅拌器的烧瓶中装入酯G(1eq)、THF(4vol)和MeOH(2.5vol)。将悬浮液冷却至5℃，并慢慢地加入50％的NaOH(5.3eq)溶液，同时保持温度低于15℃。将得到的溶液升温至60℃，保持4小时，然后冷却至25℃。向反应混合物中加入THF(7vol)，并慢慢地加入浓HCl(9.95eq)，同时保持温度低于35℃，至pH值3。将得到的浆液在室温下搅拌过夜，然后过滤。用水(3x5vol)洗涤滤饼，并在过滤器上干燥1小时。用庚烷(1vol)洗涤滤饼，在50℃的真空中干燥，得到产物。
I.保护的氨基甲酸酯的制备
向烧瓶中装入羧酸H(1eq)和甲苯(15vol)。通过共沸蒸馏除去残余水，分析上清液中的水含量(KF：＜200ppm水)。然后在77℃下向烧瓶中装入3-羟甲基-吗啉-4-羧酸叔丁基酯(0.96eq)。在77-85℃之间加入三乙基胺(1.2eq)和二苯基膦酰基叠氮化物(1.2eq)。将反应冷却至25℃，用THF(15vol)稀释，并分别用10％的K2CO3(10vol)、饱和NaCl(10vol)和水(10vol)洗涤。将富有机相进行精过滤，并常压蒸馏，直到釜的温度＞100℃。如果需要的话，通过加入甲苯将最终体积调节至15个体积。将混合物冷却到80℃，加入水(1eq)并将产物结晶。用1小时将浆液冷却至25℃，并保持17小时。通过过滤收集固体，用甲苯(2x2vol)冲洗滤饼。将固体空气干燥的过夜，然后在50℃真空中干燥，得到产物。
J.氨基甲酸酯的制备
向烧瓶中装入氨基甲酸酯I(1eq)、水(7vol)、甲醇(1vol)和浓HCl溶液(5eq)。将浆液加热至70℃，并保持此温度，直至通过HPLC显示完成了至目标产物的转化。完成之后，将水(3vol)加入到热反应混合物中，冷却混合物至45-55℃。过滤混合物，并用乙酸乙酯(2x6vol)提取滤液。将乙酸乙酯(10vol)、甲醇(2-3vol)和丁基羟基苯甲醚(2.7wt％)加入到分离的水相中。使用50％NaOH溶液，调节混合物的pH值至pH9-13。使各相分离。收集富含有机层的产物，在55-60℃下，在15-30分钟内，向混合物中加入水(10vol)。加入水之后，将混合物在55-60℃下保持30分钟，然后用1小时将其冷却至19-25℃。将产物过滤，并用乙酸乙酯(2X3vol)洗涤。用乙酸乙酯(15vol)将滤饼重新制成浆液，并加入丁基羟基苯甲醚(2.7wt％)。在常压下蒸馏得到的浆液。将混合物的体积调节至8-10个体积，同时保持温度在74-78℃。用一小时将温度冷却至19-25℃。通过过滤收集固体，用乙酸乙酯(2.2vol)冲洗滤饼。在45℃下真空干燥固体，得到目标化合物。