取代的喜树碱衍生物及其制备方法 本发明涉及新的具有抗肿瘤活性的取代的喜树碱衍生物，它们的制备方法，以及含有它们的药物组合物。
【发明背景】
喜树碱及其一些类似物通过抑制拓扑异构酶I表现出显著的抗肿瘤活性，该酶是在一些重要的细胞功能和细胞生长中的酶(例如，见Wani等人，J.Med.Chem.，1987，30，1774；Hsiang等人，Cancer Res.，1989，49，4385；Cancer Res.，1989，49，1465)。
因为封闭的α-羟基内酯环是药物进入癌细胞的被动扩散和成功地药物与药理目标发生作用的重要结构要求，所以喜树碱的内酯在体外和体内的抗癌活性比羧酸酯形式要大得多(例如下面文献所公开的，W.J.Slichenmyer等人，“The Current Status of Camptothecin Analogues asAntitumor Agent”，J.Natl.Cancer Inst.，1993，85，271-291；此处引作参考)。最近有人指出，在生物相关水平的人体白蛋白存在下，喜树碱的生物活性形式只有很短的半衰期(约12分钟)。在人的血浆中加入药物2小时后，大于99％的药物被转变成喜树碱羧酸酯，该药物失去生物活性并且毒性显著(见Burke，G.T.；Mi，Z.“The Structural Basis of CamptothecinInteractions with Human Serum Albumin：Impact on Drug Stability”，J.Med.Chem.，1994，37，40-46)。同一作者还公开了为改进在白蛋白中药物的稳定性在喜树碱核的9和7位进行取代的重要性。
因此，需要找到本身非常有效的同时可以在血清白蛋白中稳定的新型喜树碱衍生物。
发明详述
因此，本发明涉及式I取代的喜树碱衍生物，其中符号代表单键或双键；R1，R2和R3在下面(a)或(b)中定义，(a)R1和R2分别是：
氢；
C1-C4烷基；
C3-C7环烷基；
苯基C1-C6烷基；
任意被取代的苯环；
-NR5R6，其中R5和R6之-是氢，C1-C6烷基或苄基，另一个是氢，C1-C6链烷酰基，任意取代的C1-C6烷氧羰基，任意取代的苯甲酰基，苯基C1-C6链烷酰基，任意取代的苯氧羰基或苯基C1-C6烷氧羰基，或R5和R6与它们连接的氮原子一起形成4-7员饱和的，任意取代的杂单环残基，用(G)基团表示，其中W是-C＝O，R7是氢或C1-C6烷基，n是整数2-5；
COOR8，其中R8是氢，C1-C6烷基，C3-C7环烷基或苯基C1-C6烷基；或
COR9，其中R9是C1-C6烷基，C3-C7环烷基，苯基C1-C6烷基，任意取代的苯环或NR10R11，其中R10和R11分别是氢或C1-C6烷基；及
R3是氢，C1-C6烷基或任意取代的苯环；或(b)R1和R3结合形成5-8员任意被取代的碳单环；及
R2是氢，C1-C4烷基或C3-C7环烷基；
R4是氢，C1-C6烷基，C3-C7环烷基或苯基C1-C6烷基；
X是氢，C1-C6烷基，C3-C7环烷基，C1-C6烷氧基，C3-C7环烷氧基，C1-C6链烷酰氧基，苯甲酰氧基，氨基，羟基，硝基，卤素或为连到该分子10和11位的亚甲基二氧基，及其药物上可接受的盐。在本说明书的结构式中点划线(---)指环平面下面的取代基；楔形线指环平面上方的取代基。
当式(I)化合物中符号代表双键时，Z及E异构体和Z和E异构体混合物都属于本发明范围。
本发明药物上可接受的盐是与药物上可接受的酸，包括无机酸，如盐酸，硫酸，磷酸，焦磷酸，氢溴酸或硝酸；和有机酸，如柠檬酸，富马酸，马来酸，苹果酸，抗坏血酸，琥珀酸，酒石酸，苯甲酸，乙酸，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸或对甲苯磺酸形成的盐。
含酸性基团即羧基的式(I)化合物与药物上可接受的碱的药物上可接受的盐也属于本发明范围。
药物上可接受的碱既可以是无机碱，例如碱金属氢氧化物，如氢氧钠或钾，或碱土金属氢氧化物，如氢氧钙或镁；和有机碱，如烷基胺，如甲胺或三乙胺，芳烷基胺，如苄胺，二苄胺，a-或b-苯基-乙胺，或杂环胺，如哌啶，1-甲基-哌啶，哌嗪或吗啉。
任意取代的苯环可用如下基团表示，其中Q连到苯环的邻、问或对位，代表氢，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6链烷酰氧基，硝基或卤素。
优选的Q是氢，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基或卤素。
特别优选的Q是氢，甲氧基和氯。
任意取代的苯甲酰基可用如下基团表示，其中Q定义如上。
任意取代的苯氧羰基可用如下基团表示，其中Q定义如上。
当符号表示单键时，5-8员任意取代的碳单环是，例如，环戊基或环己基；当符号表示双键时，5-8员任意取代的碳单环是，例如，环戊烯-1-基或环己烯-1-基。
在本说明书中，烷基，链烷氧基，链烷酰基，链烷酰氧基和烷氧羰基的烃链可以是直链或支链。
优选的C1-C6烷基是C1-C4烷基，如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，仲丁基或叔丁基。
优选的C1-C4烷基是甲基，乙基或丙基。
优选的C3-C7环烷基是C4-C6环烷基，如环丁基，环戊基或环己基。优选的C1-C6烷氧基是C1-C4烷氧基，如甲氧基，乙氧基或丙氧基。
优选的C1-C6链烷酰基是C1-C4链烷酰基，如甲酰基，乙酰基或丙酰基。
优选的C1-C6链烷酰氧基是C1-C4链烷酰氧基，如甲酰氧基，乙酰氧基或丙酰氧基。
优选的C1-C6烷氧羰基是C1-C4烷氧羰基，如甲氧羰基，乙氧羰基，正丙氧羰基或异丙氧羰基。
优选的任意取代的C1-C6烷氧羰基是三氯乙氧羰基。
上面定义的(G)基所代表的杂单环残基的优选含意是
本发明化合物的优选类型是其中符号代表单键或双键的上式(I)化合物；R1和R2分别是
氢；
-NR5R6，其中R5和R6之一是氢，另一个是氢，C1-C6链烷酰基，任意取代的苯甲酰基，苯基C1-C6链烷酰基，C1-C6烷氧羰基，苯氧羰基或苯基C1-C6烷氧羰基；
COOR8，其中R8是氢或C1-C6烷基；或
COR9，其中R9是C1-C6烷基，未取代的苯基或NR10R11，其中R10和R11均为氢；
R3是氢；
R4是氢或C1-C6烷基；
X是氢，羟基，氨基，C1-C6烷氧基，或是连到该分子10和11位的亚甲基二氧基，及其药物上可接受的盐。
本发明特别优选的具体化合物如下：9-乙烯基喜树碱(1)；(E)-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(2)；9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(3)；(Z)-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(4)；9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(5)；9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(6)；9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(7)；9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(8)；7-乙基-9-乙烯基喜树碱(9)；7-乙基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(10)；7-乙基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(11)；7-乙基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(12)；7-乙基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(13)；7-乙基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(14)；7-乙基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(15)；7-乙基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(16)；10-乙烯基喜树碱(17)；(E)-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(18)；10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(19)；10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(20)；10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(21)；10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(22)；10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(23)；10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(24)；7-乙基-10-乙烯基喜树碱(25)；7-乙基-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(26)；7-乙基-10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(27)；7-乙基-10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(28)；7-乙基-10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(29)；7-乙基-10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(30)；7-乙基-10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(31)；7-乙基-10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(32)；10-羟基-9-乙烯基喜树碱(33)；10-羟基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(34)；10-羟基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(35)；10-羟基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(36)；10-羟基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(37)；10-羟基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(38)；10-羟基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(39)；10-羟基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(40)；10，11-亚甲基二氧基-9-乙烯基喜树碱(41)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(42)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(43)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(44)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(45)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(46)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(47)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(48)；10-甲氧基-9-乙烯基喜树碱(49)；10-甲氧基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(50)；10-甲氧基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(51)；10-甲氧基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(52)；10-甲氧基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(53)；10-甲氧基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(54)；10-甲氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(55)；10-甲氧基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(56)；11-乙烯基喜树碱(57)；11-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(58)；11-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(59)；11-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(60)；11-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(61)；11-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(62)；11-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(63)；11-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(64)；12-乙烯基喜树碱(65)；(E)-12-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(66)；12-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(67)；(Z)-12-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(68)；12-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(69)；12-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(70)；12-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(71)；12-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(72)；9-氨基-10-乙烯基喜树碱(73)；9-氨基-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(74)；9-氨基-10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(75)；9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(76)；9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(77)；9-氨基-10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(78)；9-氨基-10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(79)；9-氨基-10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(80)；7-乙基-9-氨基-10-乙烯基喜树碱(81)；7-乙基-9-氨基-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(82)；7-乙基-9-氨基-10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(83)；7-乙基-9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(84)；7-乙基-9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(85)；7-乙基-9-氨基-10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(86)；7-乙基-9-氨基-10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(87)；7-乙基-9-氨基-10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(88)；9-乙基喜树碱(1’)；9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(2’)；9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(3’)；9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(4’)；9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(5’)；9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(6’)；9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(7’)；9-(3-氧代-丁基)喜树碱(8’)；9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(9’)；9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(10’)；7-乙基-9-乙基喜树碱(11’)；7-乙基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(12’)；7-乙基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(13’)；7-乙基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(14’)；7-乙基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(15’)；7-乙基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(16’)；7-乙基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(17’)；7-乙基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(18’)；7-乙基-9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(19’)；7-乙基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(20’)；10-乙基喜树碱(21’)；10-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(22’)；10-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(23’)；10-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(24’)；10-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(25’)；10-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(26’)；10-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(27’)；10-(3-氧代-丁基)喜树碱(28’)；10-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(29’)；10-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(30’)；7-乙基-10-乙基喜树碱(31’)；7-乙基-10-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(32’)；7-乙基-10-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(33’)；7-乙基-10-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(34’)；7-乙基-10-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(35’)；7-乙基-10-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(36’)；7-乙基-10-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(37’)；7-乙基-10-(3-氧代-丁基)喜树碱(38’)；7-乙基-10-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(39’)；7-乙基-10-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(40’)；11-乙基喜树碱(41’)；11-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(42’)；11-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(43’)；11-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(44’)；11-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(45’)；11-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(46’)；11-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(47’)；11-(3-氧代-丁基)喜树碱(48’)；11-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(49’)；11-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(50’)；9-氨基-12-乙基喜树碱(51’)；9-氨基-12-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(52’)；9-氨基-12-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(53’)；9-氨基-12-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(54’)；9-氨基-12-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(55’)；9-氨基-12-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(56’)；9-氨基-12-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(57’)；9-氨基-12-(3-氧代-丁基)喜树碱(58’)；9-氨基-12-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(59’)；9-氨基-12-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(60’)；10-氨基-9-乙基喜树碱(61’)；10-氨基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(62’)；10-氨基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(63’)；10-氨基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(64’)；10-氨基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(65’)；10-氨基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(66’)；10-氨基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(67’)；10-氨基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(68’)；10-氨基-9-(3-氧代-3-苯基-3-酮-丙基)喜树碱(69’)；10-氨基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(70’)；12-乙基喜树碱(71’)；12-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(72’)；12-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(73’)；12-[(2R，S)(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(74’)；12-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(75’)；12-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(76’)；12-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(77’)；12-(3-氧代-丁基)喜树碱(78’)；12-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(79’)；12-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(80’)；10-羟基-9-乙基喜树碱(81’)；10-羟基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(82’)；10-羟基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(83’)；10-羟基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(84’)；10-羟基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(85’)；10-羟基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(86’)；10-羟基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(87’)；10-羟基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(88’)；10-羟基-9-(3-氧代-3-苯基-3-酮-丙基)喜树碱(89’)；10-羟基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(90’)；10，11-亚甲基二氧基-9-乙基喜树碱(91’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(92’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(93’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(94’)； 10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(95’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(96’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(97’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(98’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(99’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(100’)；10-甲氧基-9-乙基喜树碱(101’)；10-甲氧基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(102’)；10-甲氧基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(103’)；10-甲氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(104’)；10-甲氧基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(105’)；10-甲氧基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(106’)；10-甲氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(107’)；10-甲氧基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(108’)；10-甲氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(109’)；10-甲氧基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(110’)；以及在分子骨架上存在成盐取代基时，它们的药物上可接受的盐。
上列化合物(均与式(I)化合物有关)的结构式在下列表1和表2中说明，其中，表1中符号代表双键，表2中符号代表单键。
表1
表1(续)
表1(续)
表1(续)
表2
表2(续)
表2(续)
表2(续)
表2(续)
表2(续)
在表1和2中，符号Et和Ph分别代表乙基和苯基。
本发明还包括上述式(I)化合物的制备方法，所说方法包括：1)使式(II)化合物其中
R11是卤原子，-OSO2R12，其中R12是未取代的或在末端碳原子上被1，2或3个卤原子取代的C1-C5烷基，或是任意被取代的苯环；
R4是氢，C1-C6烷基，C3-C7环烷基，或苯基C1-C6烷基；及
X是氢，C1-C6烷基，C3-C7环烷基，C1-C6烷氧基，C3-C7环烷氧基，C1-C6链烷酰氧基，苯甲酰氧基，氨基，羟基，硝基，卤素或是连到分子的10和11位的亚甲基二氧基，与式(III)化合物反应，其中
R1，R2和R3用下面(a)或(b)定义：(a)R1和R2分别是氢；C1-C4烷基；C3-C7环烷基；苯基C1-C6烷基；任意被取代的苯环；
-NR5R6，其中R5和R6之一是氢，C1-C6烷基或苄基，另一个是氢，C1-C6链烷酰基，任意取代的苯甲酰基，苯基C1-C6链烷酰基，任意取代的C1-C6烷氧羰基，任意取代的苯氧羰基或苯基C1-C6烷氧羰基，或R5和R6与它们连接的氮原子一起形成4-7员饱和的，任意取代的，由(G)基团表示的杂单环，其中W是-C＝O，R7是氢或C1-C6烷基，n是整数2-5；
COOR8，其中R8是C1-C6烷基，C3-C7环烷基或苯基C1-C6烷基；或
COR9，其中R9是C1-C6烷基，C3-C7环烷基，苯基C1-C6烷基，任意取代的苯环或NR10R11，其中R10和R11分别是氢或C1-C6烷基；及
R3是氢，C1-C6烷基或任意取代的苯环；或(b)R1和R3结合形成5-8员任意被取代的碳单环；及
R2是氢，C1-C4烷基或C3-C7环烷基；从而得到式(I)化合物，其中符号代表双键；而且，如果需要，2)将步骤1)得到的式(I)化合物还原成相应的式(I)化合物，其中符号代表单键，和/或如果需要，盐化式(I)化合物。
式(II)起始化合物为20(S)-构型，它在生成式(I)化合物的方法中被保留下来。式(II)化合物通常不含相应的20(R)-异构体。但是，所说方法可用于式(II)化合物和相应20(R)-异构体的外消旋混合物。在这种情况下，得到式(I)化合物与式(I)化合物20(R)-异构体的外消旋混合物。当一个或多个新立体产生(stereogenic)中心在上述步骤之一被产生时，所有可能的异构体，非对映异构体，差向异构体和几何异构体都包括在本公开中。
步骤1)所述反应可以在适当溶剂中，在催化量即0.0001-0.2摩尔当量的化合物MLqL’r存在下进行，其中
M代表钯，镍或铂；
L和L’可以相同或不同，分别代表阴离子，如卤离子或乙酸根，或中性分子，如溶剂分子，膦，亚磷酸盐或二胺；及
q和r为0-4，但q+r至少为1。
反应在约-20℃-约200℃，优选约20℃-约100℃下进行，反应时间从几分钟到几天，例如5分钟到3天，优选约1小时到约1天。反应任意在适当有机或无机碱存在下，任意在卤化锂如LiCl或LiBr存在下进行。
适当溶剂包括如二甲基甲酰胺(DMF)，乙腈，二甲基亚砜(DMSO)，CHCl3，二噁烷，四氢呋喃(THF)和它们的混合物。
适当无机碱包括，例如，与碱金属或碱土金属形成的盐，如NaHCO3，Na2CO3或NaOAc。
适当的有机碱可以是，例如，三烷基胺，如三乙胺或二异丙基乙胺；或杂芳香碱如吡啶，或2，6-C1-C6烷基取代的吡啶，如2，6-卢剔啶。
优选的L和/或L’是卤离子；乙酸根；膦如三苯膦，或螯合二膦如双(二苯基膦基)甲烷，1，2-和1，3-双(二苯基膦基)丙烷，1，4-双(二苯基膦基)丁烷或1，1，-双(二苯基膦基)二茂铁(DPPF)。
过渡金属原子和/或的摩尔比-般为1∶1至1∶4。
步骤2)中所述的还原反应可以在适当催化剂存在下，通过使用适当还原剂，经过步骤1)所得式(I)化合物的还原来实现。
上述还原反应中的适当催化剂是已知实现多键还原反应的金属，如钯，氧化铂，铂，铑，镍或钌。
上述还原反应中的适当还原剂有分子氢或氢源，如甲酸三乙基铵，甲酸，三丁基氢化锡，环己二烯等等。适当的溶剂包括二甲基甲酰胺(DMF)，CH3OH，乙酸，CHCl3，二噁烷及其混合物。反应在约0℃-约100℃和约1-100大气压下进行，反应时间为1小时至3天。
用于本公开的起始原料是已知化合物或可以通过如下已知方法得到。例如，9-卤化喜树碱，10-卤化喜树碱，11-卤化喜树碱和12-卤化喜树碱可根据Sawada，S.等人，Chem.Pharm.Bull.，39，3183-3188(1991)所述制备。
例如，10-羟基-9-卤化喜树碱，10-甲氧基-9-卤化喜树碱和10，11-亚甲基二氧基-9-卤化喜树碱可以从用已知方法(例如，参见Wall等人，J.Med.Chem.，1993，36，2689-2700，或Wani等人，J.Med.Chem.，1986，29，2358-2363)制备的相应的10或10，11取代的9-氨基-衍生物，按照上述文献所述制备。
例如，9-三氟甲磺酰氧基喜树碱，10-三氟甲磺酰氧基喜树碱，11-三氟甲磺酰氧基喜树碱，12-三氟甲磺酰氧基喜树碱，10-羟基-9-三氟甲磺酰氧基喜树碱，10-甲氧基-9-三氟甲磺酰氧基喜树碱，10，11-亚甲基二氧基-9-三氟甲磺酰氧基喜树碱，10-对甲苯磺酰氧基喜树碱，11-对甲苯磺酰氧基喜树碱，12-对甲苯磺酰氧基喜树碱，10-羟基-9-对甲苯磺酰氧基喜树碱，10-甲氧基-9-对甲苯磺酰氧基喜树碱和10，11-亚甲基二氧基-9-对甲苯磺酰氧基喜树碱是从根据上述文献所述方法得到的相应的羟基衍生物，用适当的磺酰化试剂处理制备的。
本发明化合物具有抗肿瘤活性，例如抗白血病和固体肿瘤，如结肠和直肠肿瘤。
本发明化合物的抗肿瘤活性由如下事实表明：根据J.Med.Chem.，1993，36，2689所述方法，用L1210鼠淋巴白血病模型试验时它们具有抗白血病活性。
例如，根据下列方法(a)对(E)-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(内码FCE28681)和9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(内码FCE29559)进行试验。
将发明化合物溶解于二甲基亚砜(DMSO)使最终浓度为0.5％。DMSO溶液的百分比浓度不影响细胞生长。方法(a)：细胞毒性的评价
将L1210鼠白血病细胞体外作为飘浮细胞在RPMI 1640培养基中生长，用10％胎牛血清，1％L-谷氨酰胺200mM，1％B-巯基乙醇1mM，100UI/ml青霉素和100μg链霉素补足。为了测定细胞毒性，以5×104细胞/ml的浓度种下指数增长的细胞，在48小时，在37℃和有5％CO2的潮湿空气中的评价下使其暴露于计量剂量的化合物。细胞存活数用Coulter计数器测定，结果用IC50(处理48小时后，处理过的培养物相对于未处理的对照物，造成细胞生长50％被抑制的用量)表示。测定使用的是化合物(E)-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(内码FCE 28681)和9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(内码FCE 29559)，试验结果列于下面表1。
表1化合物 IC50(ng/ml) FCE 28681 3.3±1.8 FCE 29559 2.7±0.5
人体或动物体的治疗方法包括给治疗对象施用药物有效量的式(I)化合物或其盐，人或动物的病情可能会因此得到改善。
含有本发明新型喜树碱类似物的药物组合物也属于本发明范围。这些药物组合物可以含有在体内可有效表现任何抗肿瘤活性的任何量的喜树碱类似物。哺乳动物如人可用本发明组合物治疗。属于本发明范围的体内典型剂量为每kg体重0.1-60mg喜树碱类似物。特别优选的范围是1-40mg/kg。
作为组合物的一部分还可以包含药物上相容的粘合剂，和/或辅助材料。活性物质可与其它活性物质混合使用，这些其它活性物质不削弱需要的活性，和/或补充需要的活性。本发明活性物质可以通过各种途径给药，例如，口服，非肠道，静脉内，真皮内，皮下，或局部，以液体或固体形式给药。本发明化合物的优选给药形式是口服。
口服组合物通常含有惰性稀释剂或可食用载体。它们可被装在明胶胶囊中或压制成片。为了口服给药，上述化合物可与赋形剂混合并以片剂，胶囊剂，酏剂，糖浆等形式使用。这些制剂应该至少含有0.1％活性化合物，但可根据具体形式有所变化。
片剂，丸剂，胶囊剂，锭剂等可以含有以下组分：粘合剂如微晶纤维素，黄蓍树胶或明胶；赋形剂如淀粉或乳糖；崩解剂如藻酸，Primogel，玉米淀粉等；润滑剂如硬脂酸镁或Sterotes；滑流剂(glidant)如胶状二氧化硅；甜味剂如蔗糖或糖精；或调味剂如薄荷，水杨酸甲酯或橙味剂。当剂型为胶囊剂时，除了上述材料外，它还可以含有液体载体，如脂油。其它剂型也可以含有其它能够改善剂量单位的物理形式的各种材料，如包衣。因此片剂和丸剂可以用糖片胶，或其它肠包衣试剂包衣。
除了活性化合物外，糖浆还可以包含作为甜味剂的蔗糖和某些防腐剂，染料，着色剂和调味剂。
用于各种这些化合物制备的材料应该是药物纯净的，而且在所用剂量下是无毒的。
为了肠胃外给药治疗，活性组分可以被制成溶液或悬浮液。所说溶液或悬浮液包含以下成份：无菌稀释剂如注射用水，盐水溶液，固定油，聚乙二醇，甘油，丙二醇或其它合成溶剂；抗菌剂如苄醇或羟苯甲酸甲酯；抗氧化剂如抗坏血酸和亚硫酸氢钠；螯合剂如乙二胺四乙酸；缓冲剂如乙酸盐，柠檬酸盐或磷酸盐，及强度(tonicity)调节剂如氯化钠或葡萄糖。肠胃外用药制剂可以封装在安瓿，一次性注射器，或用玻璃或塑料制成的多剂量小瓶中。
具体的使用剂量要根据需要减轻病症的疾病的严重程度而定。以有效的口服，肠胃外或静脉内给药的剂量给需要治疗的患者施用本发明化合物时取得了良好效果。应该理解，对于任何具体对象，具体的给药剂量应该根据各对象的需要以及给药人员的专业判断或对前述化合物给药情况的了解程度而定。还应该进一步理解，这里所指出的剂量仅仅是为了举例，而并不限制本发明的范围或实际应用。这些剂量可以一次给予，也可以分成数个小剂量单位以各种时间间隔给药。
下列实施例用以说明本发明，而非限制本发明。
根据下列实施例制备的化合物的化学名称前括号内的数字对应于本说明书第6-18页所列优选化合物的数字。起始原料的制备方法A：9-溴喜树碱
将2.15g 40ml H2O中的NaNO2在5℃滴加到9g 9-氨基-喜树碱的850ml 16％HBr溶液中。室温1小时后，在70℃将溶液滴加到装有19gCuBr的200ml 16％HBr溶液的烧瓶中。反应在70℃进行2小时，然后将其倒入冷水中。过滤沉淀，母液用CH2Cl2萃取；干燥有机萃取液并蒸发，然后与沉淀合并，用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝95/5)，得到8.19g标题化合物(HPLC分析：97.3％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.87(s，1H)，8.20(d，J＝8.5，1H)，8.06(d，J＝7.32，1H)，7.81-7.75(m，1H)，7.35(s，1H)，6.53(s，1H)，5.42(s，2H)，5.32(s，2H)，1.89-1.82(m，2H)，0.87(t，J＝7.32，3H)。MS(FD)：M+＝427。
用类似方法，从相应的氨基衍生物开始，制备下列溴衍生物：10-溴喜树碱；11-溴喜树碱；12-溴喜树碱；10-羟基-9-溴喜树碱；10-甲氧基-9-溴喜树碱；和10，11-亚甲基二氧基-9-溴喜树碱。方法B：10-三氟甲磺酰氧基喜树碱
将1.25g 10-羟基喜树碱溶解于35ml DMF和2ml Et3N，并加入1.5gN，N-二(三氟甲磺酰基)苯胺。将溶液在50℃加热1小时，然后倒入水中；过滤沉淀，母液用CH2Cl2萃取。干燥(Na2SO4)有机萃取液并蒸发，然后与沉淀合并，用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝98/2)，得到1g标题化合物(HPLC分析：97％)。1H-NMR 400 MHz(DMSO-d6)：d＝8.81(s，1H)，8.43-8.32(m，2H)，7.99-7.94(m，1H)，7.36(s，1H)，6.54(s，1H)，5.42(s，2H)，5.32(s，2H)，1.90-1.81(m，2H)，0.86(t，J＝7.3Hz.3H).MS(FD)：M+＝496
用类似方法，从相应的硝基和氨基衍生物开始，制备下列磺酰基衍生物：9-三氟甲磺酰氧基喜树碱；11-三氟甲磺酰氧基喜树碱；12-三氟甲磺酰氧基喜树碱；10，11-亚甲基二氧基-9-三氟甲磺酰氧基喜树碱；10-对甲苯磺酰氧基喜树碱；11-对甲苯磺酰氧基喜树碱；12-对甲苯磺酰氧基喜树碱；10-甲氧基-9-对甲苯磺酰氧基喜树碱；及10，11-亚甲基二氧基-9-对甲苯磺酰氧基喜树碱。实施例112-乙烯基喜树碱(65)
将1g 12-Br-喜树碱溶解于20ml DMF；在Ar气中连续加入0.72mlEt3N，ml乙烯基三甲基甲硅烷，0.071g DPPF和0.026g Pd(OAc)2。将反应混合物在100℃加热1小时，然后用CH2Cl2和水处理。水相用CH2Cl2萃取两次，收集有机萃取液，干燥(Na2SO4)并蒸发。将剩余物溶解于20ml CH2Cl2，加入10ml CF3COOH，并将该溶液放置于室温24小时。再将反应物按上述步骤处理，产物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝95/5)，得到0.59g标题化合物(HPLC分析：97％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.67(s，1H)，8.14-8.00(m，3H)，7.69(t，J＝7.9Hz，1H)，7.36(s，1H)，6.54(s，1H)，6.14(dd，J＝1.2，17.9Hz，1H)，5.57(d，J＝12.3Hz，1H)，5.42(s，2H)，5.28(s，2H)，1.94-1.80(m，2H)，0.88(t，J＝7.0Hz，3H).MS(FD)：M+＝374。
用类似方法得到下列化合物(表1)：9-乙烯基喜树碱(1)；7-乙基-9-乙烯基喜树碱(9)；10-乙烯基喜树碱(17)；7-乙基-10-乙烯基喜树碱(25)；10-羟基-9-乙烯基喜树碱(33)；10，11-亚甲基二氧基-9-乙烯基喜树碱(41)；10-甲氧基-9-乙烯基喜树碱(49)；11-乙烯基喜树碱(57)；9-氨基-10-乙烯基喜树碱(73)；及7-乙基-9-氨基-10-乙烯基喜树碱(81)。实施例2(Z)-12-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(68)
将2g 12-Br-喜树碱溶解于40ml DMF；在Ar气中连续加入0.72mlEt3N，3.32g 2-乙酰氨基丙烯酸甲酯，0.14g DPPF和0.052gPd(OAc)2。将反应混合物在100℃加热24小时，然后冷却至室温，用CH2Cl2稀释和用水洗涤。干燥(Na2SO4)有机萃取液，真空除去溶剂。粗产物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝98/2)，得到1.72g标题产物(HPLC分析：97.4％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝9.79(s，1H)，8.78(s，1H)，8.32(s，1H)，8.18(d，J＝7.03Hz，1H)，8.15(d，J＝7.91Hz，1H)，7.75(t，J＝7.62Hz，1H)，7.34(s，1H)，6.56(s，1H)，5.43(s，2H)，5.43(s，2H)，3.78(s，3H)，1.98(s，3H)，1.88(m，2H)，0.88(t，J＝7.3Hz，3H).MS(FD)：M+＝489.
当使(Z)-12-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱溶液在室温放置2周时，将得到E和Z异构体的50/50混合物。
用类似方法得到下列化合物(表1)：10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(20)；10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(21)；7-乙基-10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(28)；7-乙基-10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(29)；10-羟基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(36)；10-羟基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(37)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(44)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(45)；10-甲氧基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(52)；10-甲氧基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(53)；11-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(60)；11-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(61)；12-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(69)；9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(76)；9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(77)；7-乙基-9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(84)；及7-乙基-9-氨基-10-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(85)。实施例3(E)-12-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(66)
将5g 12-Br-喜树碱溶解于50ml DMF；在Ar气中连续加1.5mlEt3N，4.6ml丙烯酸甲酯，0.28g DPPF和0.11g Pd(OAc)2。将反应混合物在100℃加热18小时，然后用CH2Cl2稀释和用水洗涤两次。干燥(Na2SO4)有机相并蒸发，剩余物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝98/2)，得到4.1g标题产物(HPLC分析：92.34％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.94(d，J＝16.2Hz，1H)，8.73(s，1H)，8.39(d，J＝6.7Hz，1H)，8.21(d，J＝8.2Hz，1H)，7.75(t，J＝7.6，1H)，7.36(s，1H)，7.00(d，J＝16.2Hz，1H)，6.59(s，1H)，5.43(s，2H)，5.30(s，2H)，3.80(s，3H)，1.88(m，2H)，0.89(t，3H).MS(FD)：M+＝432。
用类似方法得到下列化合物(表1)：11-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(58)；11-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(59)；11-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(62)；11-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(63)；11-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(64)；12-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(67)；12-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(70)；12-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(71)；12-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(72)；9-氨基-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(74)；9-氨基-10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(75)；9-氨基-10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(78)；9-氨基-10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(79)；9-氨基-10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(80)；7-乙基-9-氨基-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(82)；7-乙基-9-氨基-10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(83)；7-乙基-9-氨基-10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(86)；7-乙基-9-氨基-10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(87)；及7-乙基-9-氨基-10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(88)。实施例412-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(52’)
将1g 12-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱溶解于20ml DMF，并在1大气压H2中，在室温和0.1g Pd/C存在下进行氢化。用硅藻土垫过滤反应混合物，并用DMF彻底洗涤硅藻土。蒸发溶剂，剩余物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝98/2)，得到0.82g标题产物。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.6 0(s，1H)，7.92(dd，J＝1.5，8.2Hz，1H)，7.66(dd，J＝1.5，7Hz，1H)，7.54(dd，J＝7，8.2Hz，1H)，7.31(s，1H)，6.54(s，1H)，5.41(s，2H)，5.20(m，2H)，3.57(s，3H)，3.52-3.49(m，2H)，2.84-2.81(m，2H)，1.88-1.84(m，2H)，0.88(t，J＝7.3Hz，3H).MS(FD)：M+＝434。
用类似方法得到下列化合物(表2)：11-乙基喜树碱(41’)；11-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(42’)；11-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(43’)；11-(3-氧代-丁基)喜树碱(48’)；11-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(49’)；11-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(50’)；9-氨基-12-乙基喜树碱(51’)；9-氨基-12-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(52’)；9-氨基-12-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(53’)；9-氨基-12-(3-氧代-丁基)喜树碱(58’)；9-氨基-12-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(59’)；9-氨基-12-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(60’)；10-氨基-9-乙基喜树碱(61’)；10-氨基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(62’)；10-氨基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(63’)；10-氨基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(68’)；10-氨基-9-(3-氧代-3-苯基-3-酮-丙基)喜树碱(69’)；10-氨基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(70’)；12-乙基喜树碱(71’)；12-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(73’)； 12-(3-氧代-丁基)喜树碱(78’)；12-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(79’)；12-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(80’)；10-羟基-9-乙基喜树碱(81’)；10-羟基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(82’)；10-羟基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(83’)；10-羟基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(88’)；10-羟基-9-(3-氧代-3-苯基-3-酮-丙基)喜树碱(89’)；10-羟基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(90’)；10-甲氧基-9-乙基喜树碱(101’)；10-甲氧基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(102’)；10-甲氧基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(103’)；10-甲氧基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(108’)；10-甲氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(109’)；和10-甲氧基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(110’)；实施例512-[(2R，S)(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(74’)
将1g(Z)-12-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱溶解于DMF。加入0.15g Pd/C后将产物在室温氢化28小时。用硅藻土垫过滤反应混合物并蒸发；剩余物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH)，得到0.89g标题产物(HPLC分析：96.7％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.66(s，1H)，8.49-8.43(m，1H)，7.99(d，J＝7.33Hz，1H)，7.63-7.60(m，2H)，7.42(s，1/2H)，7.40(s，1/2H)，6.56(s，1/2H)，6.54(s，1/2H)，5.42(s，2H)，5.30(s，2H)，4.75-4.66(m，1H)，3.96-3.88(m，1H)，3.55(s，1.5H)，3.49(s，1.5H)，3.36-3.31(m，1H)，1.81-1.87(m，2H)，1.77(s，1.5H)，1.75(s，1.5H)，0.92-0.94(m，3H)。MS(FD)：M+＝491
用类似方法得到下列化合物(表2)：9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(4’)；9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(5’)；9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(6’)；9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(7’)；7-乙基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(14’)；7-乙基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(15’)；7-乙基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(16’)；7-乙基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(17’)；10-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(24’)；10-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(25’)；10-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(26’)；10-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(27’)；7-乙基-10-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(34’)；7-乙基-10-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(35’)；7-乙基-10-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(36’)；7-乙基-10-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(37’)；11-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(44’)；11-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(45’)；11-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(46’)；11-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(47’)；9-氨基-12-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(54’)；9-氨基-12-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(55’)；9-氨基-12-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(56’)；9-氨基-12-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(57’)；10-氨基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(64’)；10-氨基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(65’)；10-氨基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(66’)；10-氨基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(67’)；12-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(75’)；12-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(76’)；12-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(77’)；10-羟基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(84’)；10-羟基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(85’)；10-羟基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(86’)；10-羟基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(87’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(94’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(95’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(96’)；10，11-亚甲基二氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(97’)；10-甲氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(104’)；10-甲氧基-9-[(2-氨基-2-甲氧羰基)-乙基]喜树碱(105’)；10-甲氧基-9-[(2-氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(106’)；及10-甲氧基-9-[(2-乙酰氨基-2-羟基羰基)-乙基]喜树碱(107’)。实施例7(Z)-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(4)
将5g 9-Br-喜树碱溶解于50ml DMF；在Ar气中连续加入1.8mlEt3N，8.3g 2-乙酰氨基丙烯酸甲酯，0.35g DPPF和0.13g Pd(OAc)2。将反应混合物在100℃加热7小时，然后用CH2Cl2和水溶解。干燥(Na2SO4)有机萃取液并蒸发溶剂，剩余物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝98/2)，得到4.89g标题产物(HPLC分析：98.7％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝9.63(s，1H)，8.73(s，1H)，8.16(d，J＝8.54Hz，1H)，7.89-7.85(m，1H)，7.77(d，J＝7.26，1H)，7.62(s，1H)，7.34(s，1H)，6.52(s，1H)，5.41(s，2H)，5.25(s，2H)，3.76(s，3H)，1.87-1.83(m，5H)，0.86(t，J＝7.26，3H).MS(FD)：M+＝489
当使(Z)-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱溶液在室温放置2周时，将得到E和Z异构体的50/50混合物。(E)-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱的1H-NMR谱是：d＝10.32(s，1H)，8.74(s，1H)，8.09(d，J＝8.79，1H)，7.80-7.76(m，1H)，7.63(s，1H)，7.37-7.34(m，2H)，6.53(s，1H)，5.42(s，2H)，5.28(s，2H)，3.42(s，3H)，2.02(s，3H)，1.89-1.82(m，2H)，0.87(t，J＝7.26，3H).
用类似方法得到下列化合物(表1)：9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(5)；7-乙基-9-(2-乙酰氨基-2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(12)；及7-乙基-9-(2-乙酰氨基-2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(13)。实施例8(E)-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(2)
将1g 9-Br-喜树碱溶解于11ml DMF；在Ar气中连续加0.3mlEt3N，0.92ml丙烯酸甲酯，0.056g DPPF和0.022g Pd(OAc)2。将反应混合物在100℃加热；3小时后反应结束，出现白黄色沉淀。过滤该沉淀，用DMF和Et2O分别洗涤两次。产物结晶(CHCl3/DMF)得到0.58g标题产物(HPLC分析：95.59％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝9.07(s，1H)，8.45(d，J＝15.5Hz，1H)，8.23(d，J＝8.5Hz，1H)，8.14(d，J＝7.1，1H)，7.88(dd，J＝7.6Hz，J′＝8.2Hz，1H)，7.34(s，1H)，6.80(d，J＝15.8Hz，1H)，6.53(s，1H)，5.42(s，2H)，5.27(s，2H)，3.79(s，3H)，1.86(m，2H)，0.87(t，3H).MS(FD)：M+＝432。
用类似方法制备下列化合物(表1)：9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(3)；9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(8)；9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(6)；9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(7)；7-乙基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(10)；7-乙基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(11)；7-乙基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(14)；7-乙基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(15)；7-乙基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(16)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(42)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(43)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(46)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(47)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(48)；10-甲氧基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(50)；10-甲氧基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(51)；10-甲氧基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(54)；10-甲氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(55)；及10-甲氧基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(56)。实施例99-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(2’)
将1.4g(E)-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱溶解于400mlDMF，然后加入0.3g Pd/C并在室温(1大气压H2)氢化混合物3小时。过滤反应混合物并蒸发溶剂。剩余物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝98/2)，得到1.2g标题产物。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.89(s，1H)，8.03(d，J＝8.49Hz，1H)，7.79-7.73(m，1H)，7.55(d，J＝7.03，1H)，7.33(s，1H)，6.51(s，1H)，5.42(s，2H)，5.28(s，2H)，3.59(s，3H)，3.42-3.36(m，2H)，2.88-2.77(m，2H)，1.91-1.80(m，2H)，0.87(t，J＝7.33，3H).MS(FD)：M+＝434。
用类似方法制备下列化合物(表2)：9-乙基喜树碱(1’)；9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(3’)；9-(3-氧代-丁基)喜树碱(8’)；9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(9’)；9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(10’)；7-乙基-9-乙基喜树碱(11’)； 7-乙基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(12’)；7-乙基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(13’)；7-乙基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(18’)；7-乙基-9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(19’)；7-乙基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(20’)；10-乙基喜树碱(21’)；10-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(22’)；10-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(23’)；10-(3-氧代-丁基)喜树碱(28’)；10-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(29’)；10-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(30’)；7-乙基-10-乙基喜树碱(31’)； 7-乙基-10-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(32’)；7-乙基-10-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(33’)；7-乙基-10-(3-氧代-丁基)喜树碱(38’)；7-乙基-10-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(39’)；7-乙基-10-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(40’)；10，11-亚甲基二氧基-9-乙基喜树碱(91’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-甲氧羰基-乙基)喜树碱(92’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(2-羟基羰基-乙基)喜树碱(93’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-丁基)喜树碱(98’)；10，11-亚甲基二氧基-9-(3-氧代-3-苯基-丙基)喜树碱(99’)；及10，11-亚甲二氧基-9-(2-氨基羰基-乙基)喜树碱(100’)。实施例10(E)-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(18)
将1g 10-三氟甲磺酰氧基喜树碱溶解于10ml DMF；在Ar气中连续加入0.31ml Et3N，0.91ml丙烯酸甲酯，0.062g DPPF和0.023gPd(OAc)2。反应在80℃加热24小时，然后用CH2Cl2稀释和盐水洗涤两次。干燥(Na2SO4)有机相并蒸发，剩余物用快速色谱纯化(洗脱剂：CH2Cl2/CH3OH＝99/1)，得到0.5g标题产物(HPLC分析：97％)。1H-NMR 400MHz(DMSO-d6)：d＝8.65(s，1H)，8.42(s，1H)，8.24(d，J＝9.0Hz，1H)，8.14(d，J＝9.0Hz，1H)，7.86(d，J＝16.1Hz，1H)，7.34(s，1H)，6.87(d，J＝16.1Hz，1H)，6.53(s，1H)，5.41(s，2H)，5.28(s，2H)，3.76(s，3H)，1.88-1.82(m，2H)，0.86(t，J＝7.3Hz，3H)。MS(FD)：M+＝432。
用类似方法得到下列化合物(表1)：10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(19)10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(22)；10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(23)；10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(24)；7-乙基-10-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(26)；7-乙基-10-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(27)；7-乙基-10-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(30)；7-乙基-10-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(31)；7-乙基-10-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(32)；10-羟基-9-(2-甲氧羰基-乙烯基)喜树碱(34)；10-羟基-9-(2-羟基羰基-乙烯基)喜树碱(35)；10-羟基-9-(3-氧代-丁-1-烯基)喜树碱(38)；10-羟基-9-(3-氧代-3-苯基-丙烯基)喜树碱(39)；及10-羟基-9-(2-氨基羰基-乙烯基)喜树碱(40)。