一种治疗眼睛血管增生的蛋白质 【技术领域】
本发明涉及一种蛋白质， 具体涉及一种用于治疗眼睛血管增生的蛋白质。背景技术 致盲的原因有多种， 由于各种原因导致眼睛的血管增生是主要的致盲原因之一。 引起眼睛的血管增生的常见病因有 ： 1、 各种慢性进行性高血压或动脉硬化以及视网膜静脉 炎等疾病并发的视网膜中央静脉总干或分支阻塞和糖尿病视网膜病变等引起的视网膜大 面积慢性毛细血管缺血、 缺氧、 产生血管生成因子， 从而导致新生血管形成。2、 早产儿视网 膜病变， 多见于过量吸氧。早产儿视网膜尚未发育完善， 以周边部最不成熟， 处于高氧环境 下， 视网膜血管收缩、 阻塞， 使局部缺血、 缺氧， 诱发视网膜血管异常增生。3、 渗出性年龄相 关性黄斑变性、 病理性近视等眼底退行性变性。大多位于后极部， 是典型的脉络膜毛细血 管—玻璃膜—视网膜色素上皮复合体病变。玻璃膜连同色素上皮皲裂， 脉络膜血管增生并 由皲裂处向视网膜神经上皮层下生长。4、 各种原因所致的角膜损伤、 溃疡或炎症引起的角 膜或结膜血管增生。 目前对于上述原因所致的眼睛的血管增生主要是采取中医疗法或激光 等物理疗法， 但是疗效不理想， 尚没有特效的抑制眼睛的血管增生的药物。 致使血管增生导 致的盲症还没能得到有效的控制， 而是随着老龄人口的增加等原因， 血管增生所致的盲症 呈增多之趋势。当前， 亟待于开发新的抑制眼睛血管增生的药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗眼睛血管增生的蛋白质。是通过 DNA 序列合成方法 合成一段 DNA 序列， 将这段 DNA 序列重组于毕赤酵母中表达， 表达产物活性分析证明， 所合 成基因编码的蛋白具有抑制血管新生和治疗眼睛血管新生的功能。 其核苷酸序列和它的氨 基酸序列如序列表中所述。
本发明的目的是通过以下技术措施实现 ：
1.DNA 序列的合成
设计如下 DNA 序列， 并用套叠 PCR 方法进行其序列合成。将其序列命名为 scl。A TGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCACCAAGAAGGTTCATGTCATC TTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGAGTTTACACACCTTACACT GATTGTGCGGCCAGACAACCATCATCATCATCATCATTAG
2.DNA 序列编码蛋白功能的证明
(1)DNA 序列重组于酵母中表达
通过 DNA 内切酶和 T4DNA 连接酶的作用， 将以上合成的 DNA 片段插入毕赤酵母 表达载体 pPIC9K 的多克隆位点， 将其表达载体命名为 pPIC9K-scl( 附图 1)。用电转法 将 pPIC9K-scl 转化毕赤酵母 GS115， 获得工程菌 GS115(pPIC9K-scl)。用 BMGY-BMMY 发酵 GS115(pPICP9K-scl) 诱导表达 Scl 蛋白。
(2) 表达产物活性分析发酵液上清过 Ni-Agarose His 标签蛋白纯化柱进行纯化 ( 附图 2)， 收获的含目标 蛋白的液体经过抽滤除盐后， 进行抑制抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成试验， 制成眼药水进 行治疗大鼠视网膜血管增生模型和治疗猴子血管新生模型。结果是 Scl 蛋白抑制鸡胚绒毛 尿囊新生血管生成， 其对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的抑制作用强于 Angiostatin( 附图 3)， 显著地抑制大鼠视网膜血管新生 ( 附图 4)， 能治愈猴子眼睛血管增生模型， 具有治疗眼睛 血管新生的作用。 利用上述蛋白质制备药物， 可用于治疗人眼睛血管增生， 是一种治疗眼睛 血管增生的药物。
本发明的优点 ：
本发明人工合成 scl 基因， 将 scl 基因重组于毕赤酵母基因组进行表达获得的 Scl 蛋白， 将表达产物纯化后获得的 Scl 蛋白能有效地抑制抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生， 具 有治疗眼睛血管增生的功能。血管生成抑制因子在治疗血管增生性疾病中有着重要的用 途。 虽然已发现的血管生成抑制因子有多种， 但是本发明的血管生成抑制因子基因序列小， 分子量小的药物有利于在机体内的传输， 并且 Scl 蛋白抑制血管生成的作用较强。为生产 特效的治疗眼睛血管增生的药物的研究和开发创造了必要的条件， 具有重要的理论和实践 意义。 附图说明
附图 1. 构建含 scl 基因的毕赤酵母表达载体 附图 2. 纯化重组 Scl 蛋白 M. 蛋白 Marker ； 1. 纯化的重组 Scl 蛋白。 附图 3.Scl 蛋白抑制鸡胚绒毛尿囊膜新血管生成试验 A.PBS ； B.Scl 蛋白 (20μg) ； C.Angiostatin(20μg) 附图 4.Scl 蛋白抑制糖尿病大鼠的视网膜血管增生 a. 右眼 ( 滴 PBS) ； b. 左眼 ( 滴 Scl 蛋白 )具体实施方式
1.DNA 序列的合成
(1) 设计如下 DNA 序列。
ATGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCACCAAGAAGGTT CATGTCATCTTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGAGTTTACACA CCTTACACTGATTGTGCGGCCAGACAACCATCATCATCATCATCATTAG
(2) 合成如下引物 ：
p1.
5’ ATGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCAC3’
p2.
5’ TTCTTGCCCTTGTAGTTGAAGATGACATGAACCTTCTTGGTGCCAGGGCCACAGATGTC3’
p3.
5’ TTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGA3’
p4.5’ TGGTTGTCTGGCCGCACAATCAGTGTAAGGTGTGTAAACTCATCATCCTTGCAACGGAT3’ p5.CTAATGATGATGATGATGATGGTTGTCTGGCCGCACAA3’ (3) 用如下套叠 PCR 法进行以上序列的合成， 其步骤是 ： ①应用 P1 和 p2 引物进行 PCR， 获得产物 1。 ②用 P3 和 p4 引物进行 PCR 扩增， 获得产物 2。 ③以上获得的产物 1 和产物 2 的混合物为底物， 用引物 P1 和 p5 进行扩增， 获得产物 3。 (4) 将以上 PCR 产物 3 连接于 T 载体， 进行 DNA 序列分析证明所获的 DNA 序列与设 计的一致 ：
ATGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCACCAAGAAGGTT CATGTCATCTTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGAGTTTACACA CCTTACACTGATTGTGCGGCCAGACAACCATCATCATCATCATCATTAG
2. 序列编码蛋白功能的证明
(1)DNA 序列重组于酵母中表达及其表达产物的纯化
通过 DNA 内切酶和 T4DNA 连接酶的作用， 将以上合成的 DNA 片段插入毕赤酵母表 达载体 pPIC9K 的多克隆位点， 将其表达载体命名为 pPPIC9K-scl( 附图 1)。用电转法将 pPIC9K-scl 转化毕赤酵母 GS115， 获得工程菌 GS115(pPIC9K-scl)。 用 BMGY-BMMY 培养基发 酵 GS115(pIPIC9K-scl) 诱导表达 Scl 蛋白。将发酵液上清过 Ni-Agarose His 标签蛋白纯 化柱， 获得符合标准分子量的目标蛋白 ( 附图 2)。
(2)Scl 蛋白活性分析
将以上收获的含目标蛋白的液体经过抽滤除盐后， 抑制人脐带静脉细胞增殖试验 和抑制鸡胚绒毛血管生成试验 ( 附图 3)。 证明纯化的 Scl 蛋白具有抑制新生血管生成的活 性。
(3)Scl 蛋白治疗眼睛血管增生
1) 制备滴眼液
滴眼液 1 ：
取 Scl 蛋白 0.5mg 溶解于 5ml 生理盐水 (0.85％ NaCl)， 用孔径为 0.1μm 的滤膜 过滤除去细菌及病毒， 然后加于 995ml 无菌的生理盐水中制备成滴眼液。
滴眼液 2 ：
取 Scl 蛋白 0.3mg 溶解于 5ml PBS 溶液 ( 每升 PBS 溶液的制备 ： NaCl 8g， KCl 0.2g， Na2HPO4 1.44g， KH2PO4 0.24g 溶解于 800ml 蒸馏水中盐酸调 pH 到 7.4 然后加水补充 到 1000ml， 15 磅 20 分高压灭菌冷却至室温 )， 用孔径为 0.1μm 的滤膜过滤除去细菌及病 毒， 然后加于 995ml 无菌的 PBS 溶液中制备成滴眼液。
2) 滴眼液疗效检测实验一
①大鼠视网膜血管增生模型的制作
取 20 只 180 克 SD 品系雄性大鼠， 注射 70 毫克 / 公斤体重的链脲佐菌素， 制备大 鼠糖尿病模型。当大鼠的患糖尿病达 3 个月时， 进行用药治疗。
②滴眼液治疗视网膜血管增生方法
将以上制备的视网膜血管增生模型鼠分成两组 (A， B)， 每组 10 只。A 组鼠的左眼
(AL) 滴实例 1 制备的滴眼液， 每只眼睛滴 25μl/ 次， 每天 3 次 ； 右眼 (AR) 滴生理盐水， 每 只眼睛滴 25μl/ 次， 用药频率同左眼 ； B 组鼠的左眼 (BL) 滴实例 2 制备的滴眼液， 每只眼 睛滴 25μl/ 次， 每天 3 次 ； 右眼 (BR) 滴生理盐水溶液， 每只眼睛滴 25μl/ 次， 用药频率同 左眼。治疗时间为 10 周。
③滴眼液治疗视网膜血管增生的疗效分析
将以上 20 只试验鼠处死， 眼球摘除后放入多聚甲醛溶液中℃固定 24h， 先镜下观 察视网膜的血管增生情况 ( 图 4)， 从图 4 可见， 滴 Scl 蛋白的左眼的血管数量明显少于滴生 理盐水的右眼的血管的数量。然后， 组织切片计算视网膜的血管内皮细胞核的数量。每只 眼睛观察 20 个视野， 然后计算平均每个视野的内皮细胞核的数量 ( 表 1)。结果分析 ( 表 2) 表明与负对照组 (AR 和 BR 组 ) 比较， 试验组 (AL、 BL 组 ) 的血管内皮细胞核数量呈非常 显著性减少 (P ＜ 0.01)。
表 1. 用 Scl 蛋白治疗眼睛血管增生结果 【血管内皮细胞核数量 ( 个 )/ 平均每个 视野】
表 2 药物疗效分析
3) 滴眼液疗效检测实验二 ①制备猴子眼睛血管增生模型 取 二 十 只 试 验 猴 子， 在每只猴子的左眼和右眼均加入碱性成细胞生长因子(100μg/ml)， 每只眼睛 25μl/ 次， 每天 3 次。用药滴三天， 由于受到碱性成细胞生长因子 的诱发， 猴子眼睛均出现红色血丝。
②治疗猴子眼睛血管增生模型
将以上猴子随机分成 A 和 B 两组， 每组 10 只。将滴眼液 1 用于治疗 A 组猴子的左 眼， 右眼滴等量的生理盐水， 每天用药三次 ； 将滴眼液 2 用于治疗 B 组猴子的左眼， 右眼滴等 量的生理盐水， 每天用药三次。治疗时间为两周。
③结果观察
经治疗后 A 组和 B 组猴子的左眼血丝消失， 而右眼的血丝发展， 血管增生加重。
本发明涉及一种蛋白质， 具体涉及一种用于治疗眼睛血管增生的蛋白质。背景技术 致盲的原因有多种， 由于各种原因导致眼睛的血管增生是主要的致盲原因之一。 引起眼睛的血管增生的常见病因有 ： 1、 各种慢性进行性高血压或动脉硬化以及视网膜静脉 炎等疾病并发的视网膜中央静脉总干或分支阻塞和糖尿病视网膜病变等引起的视网膜大 面积慢性毛细血管缺血、 缺氧、 产生血管生成因子， 从而导致新生血管形成。2、 早产儿视网 膜病变， 多见于过量吸氧。早产儿视网膜尚未发育完善， 以周边部最不成熟， 处于高氧环境 下， 视网膜血管收缩、 阻塞， 使局部缺血、 缺氧， 诱发视网膜血管异常增生。3、 渗出性年龄相 关性黄斑变性、 病理性近视等眼底退行性变性。大多位于后极部， 是典型的脉络膜毛细血 管—玻璃膜—视网膜色素上皮复合体病变。玻璃膜连同色素上皮皲裂， 脉络膜血管增生并 由皲裂处向视网膜神经上皮层下生长。4、 各种原因所致的角膜损伤、 溃疡或炎症引起的角 膜或结膜血管增生。 目前对于上述原因所致的眼睛的血管增生主要是采取中医疗法或激光 等物理疗法， 但是疗效不理想， 尚没有特效的抑制眼睛的血管增生的药物。 致使血管增生导 致的盲症还没能得到有效的控制， 而是随着老龄人口的增加等原因， 血管增生所致的盲症 呈增多之趋势。当前， 亟待于开发新的抑制眼睛血管增生的药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗眼睛血管增生的蛋白质。是通过 DNA 序列合成方法 合成一段 DNA 序列， 将这段 DNA 序列重组于毕赤酵母中表达， 表达产物活性分析证明， 所合 成基因编码的蛋白具有抑制血管新生和治疗眼睛血管新生的功能。 其核苷酸序列和它的氨 基酸序列如序列表中所述。
本发明的目的是通过以下技术措施实现 ：
1.DNA 序列的合成
设计如下 DNA 序列， 并用套叠 PCR 方法进行其序列合成。将其序列命名为 scl。A TGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCACCAAGAAGGTTCATGTCATC TTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGAGTTTACACACCTTACACT GATTGTGCGGCCAGACAACCATCATCATCATCATCATTAG
2.DNA 序列编码蛋白功能的证明
(1)DNA 序列重组于酵母中表达
通过 DNA 内切酶和 T4DNA 连接酶的作用， 将以上合成的 DNA 片段插入毕赤酵母 表达载体 pPIC9K 的多克隆位点， 将其表达载体命名为 pPIC9K-scl( 附图 1)。用电转法 将 pPIC9K-scl 转化毕赤酵母 GS115， 获得工程菌 GS115(pPIC9K-scl)。用 BMGY-BMMY 发酵 GS115(pPICP9K-scl) 诱导表达 Scl 蛋白。
(2) 表达产物活性分析发酵液上清过 Ni-Agarose His 标签蛋白纯化柱进行纯化 ( 附图 2)， 收获的含目标 蛋白的液体经过抽滤除盐后， 进行抑制抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成试验， 制成眼药水进 行治疗大鼠视网膜血管增生模型和治疗猴子血管新生模型。结果是 Scl 蛋白抑制鸡胚绒毛 尿囊新生血管生成， 其对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的抑制作用强于 Angiostatin( 附图 3)， 显著地抑制大鼠视网膜血管新生 ( 附图 4)， 能治愈猴子眼睛血管增生模型， 具有治疗眼睛 血管新生的作用。 利用上述蛋白质制备药物， 可用于治疗人眼睛血管增生， 是一种治疗眼睛 血管增生的药物。
本发明的优点 ：
本发明人工合成 scl 基因， 将 scl 基因重组于毕赤酵母基因组进行表达获得的 Scl 蛋白， 将表达产物纯化后获得的 Scl 蛋白能有效地抑制抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生， 具 有治疗眼睛血管增生的功能。血管生成抑制因子在治疗血管增生性疾病中有着重要的用 途。 虽然已发现的血管生成抑制因子有多种， 但是本发明的血管生成抑制因子基因序列小， 分子量小的药物有利于在机体内的传输， 并且 Scl 蛋白抑制血管生成的作用较强。为生产 特效的治疗眼睛血管增生的药物的研究和开发创造了必要的条件， 具有重要的理论和实践 意义。 附图说明
附图 1. 构建含 scl 基因的毕赤酵母表达载体 附图 2. 纯化重组 Scl 蛋白 M. 蛋白 Marker ； 1. 纯化的重组 Scl 蛋白。 附图 3.Scl 蛋白抑制鸡胚绒毛尿囊膜新血管生成试验 A.PBS ； B.Scl 蛋白 (20μg) ； C.Angiostatin(20μg) 附图 4.Scl 蛋白抑制糖尿病大鼠的视网膜血管增生 a. 右眼 ( 滴 PBS) ； b. 左眼 ( 滴 Scl 蛋白 )具体实施方式
1.DNA 序列的合成
(1) 设计如下 DNA 序列。
ATGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCACCAAGAAGGTT CATGTCATCTTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGAGTTTACACA CCTTACACTGATTGTGCGGCCAGACAACCATCATCATCATCATCATTAG
(2) 合成如下引物 ：
p1.
5’ ATGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCAC3’
p2.
5’ TTCTTGCCCTTGTAGTTGAAGATGACATGAACCTTCTTGGTGCCAGGGCCACAGATGTC3’
p3.
5’ TTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGA3’
p4.5’ TGGTTGTCTGGCCGCACAATCAGTGTAAGGTGTGTAAACTCATCATCCTTGCAACGGAT3’ p5.CTAATGATGATGATGATGATGGTTGTCTGGCCGCACAA3’ (3) 用如下套叠 PCR 法进行以上序列的合成， 其步骤是 ： ①应用 P1 和 p2 引物进行 PCR， 获得产物 1。 ②用 P3 和 p4 引物进行 PCR 扩增， 获得产物 2。 ③以上获得的产物 1 和产物 2 的混合物为底物， 用引物 P1 和 p5 进行扩增， 获得产物 3。 (4) 将以上 PCR 产物 3 连接于 T 载体， 进行 DNA 序列分析证明所获的 DNA 序列与设 计的一致 ：
ATGCACGGAGACTCAGAATACAACATCATGTTTGGTCCCGACATCTGTGGCCCTGGCACCAAGAAGGTT CATGTCATCTTCAACTACAAGGGCAAGAACGTGCTGATCAACAAGGACATCCGTTGCAAGGATGATGAGTTTACACA CCTTACACTGATTGTGCGGCCAGACAACCATCATCATCATCATCATTAG
2. 序列编码蛋白功能的证明
(1)DNA 序列重组于酵母中表达及其表达产物的纯化
通过 DNA 内切酶和 T4DNA 连接酶的作用， 将以上合成的 DNA 片段插入毕赤酵母表 达载体 pPIC9K 的多克隆位点， 将其表达载体命名为 pPPIC9K-scl( 附图 1)。用电转法将 pPIC9K-scl 转化毕赤酵母 GS115， 获得工程菌 GS115(pPIC9K-scl)。 用 BMGY-BMMY 培养基发 酵 GS115(pIPIC9K-scl) 诱导表达 Scl 蛋白。将发酵液上清过 Ni-Agarose His 标签蛋白纯 化柱， 获得符合标准分子量的目标蛋白 ( 附图 2)。
(2)Scl 蛋白活性分析
将以上收获的含目标蛋白的液体经过抽滤除盐后， 抑制人脐带静脉细胞增殖试验 和抑制鸡胚绒毛血管生成试验 ( 附图 3)。 证明纯化的 Scl 蛋白具有抑制新生血管生成的活 性。
(3)Scl 蛋白治疗眼睛血管增生
1) 制备滴眼液
滴眼液 1 ：
取 Scl 蛋白 0.5mg 溶解于 5ml 生理盐水 (0.85％ NaCl)， 用孔径为 0.1μm 的滤膜 过滤除去细菌及病毒， 然后加于 995ml 无菌的生理盐水中制备成滴眼液。
滴眼液 2 ：
取 Scl 蛋白 0.3mg 溶解于 5ml PBS 溶液 ( 每升 PBS 溶液的制备 ： NaCl 8g， KCl 0.2g， Na2HPO4 1.44g， KH2PO4 0.24g 溶解于 800ml 蒸馏水中盐酸调 pH 到 7.4 然后加水补充 到 1000ml， 15 磅 20 分高压灭菌冷却至室温 )， 用孔径为 0.1μm 的滤膜过滤除去细菌及病 毒， 然后加于 995ml 无菌的 PBS 溶液中制备成滴眼液。
2) 滴眼液疗效检测实验一
①大鼠视网膜血管增生模型的制作
取 20 只 180 克 SD 品系雄性大鼠， 注射 70 毫克 / 公斤体重的链脲佐菌素， 制备大 鼠糖尿病模型。当大鼠的患糖尿病达 3 个月时， 进行用药治疗。
②滴眼液治疗视网膜血管增生方法
将以上制备的视网膜血管增生模型鼠分成两组 (A， B)， 每组 10 只。A 组鼠的左眼
(AL) 滴实例 1 制备的滴眼液， 每只眼睛滴 25μl/ 次， 每天 3 次 ； 右眼 (AR) 滴生理盐水， 每 只眼睛滴 25μl/ 次， 用药频率同左眼 ； B 组鼠的左眼 (BL) 滴实例 2 制备的滴眼液， 每只眼 睛滴 25μl/ 次， 每天 3 次 ； 右眼 (BR) 滴生理盐水溶液， 每只眼睛滴 25μl/ 次， 用药频率同 左眼。治疗时间为 10 周。
③滴眼液治疗视网膜血管增生的疗效分析
将以上 20 只试验鼠处死， 眼球摘除后放入多聚甲醛溶液中℃固定 24h， 先镜下观 察视网膜的血管增生情况 ( 图 4)， 从图 4 可见， 滴 Scl 蛋白的左眼的血管数量明显少于滴生 理盐水的右眼的血管的数量。然后， 组织切片计算视网膜的血管内皮细胞核的数量。每只 眼睛观察 20 个视野， 然后计算平均每个视野的内皮细胞核的数量 ( 表 1)。结果分析 ( 表 2) 表明与负对照组 (AR 和 BR 组 ) 比较， 试验组 (AL、 BL 组 ) 的血管内皮细胞核数量呈非常 显著性减少 (P ＜ 0.01)。
表 1. 用 Scl 蛋白治疗眼睛血管增生结果 【血管内皮细胞核数量 ( 个 )/ 平均每个 视野】
表 2 药物疗效分析
3) 滴眼液疗效检测实验二 ①制备猴子眼睛血管增生模型 取 二 十 只 试 验 猴 子， 在每只猴子的左眼和右眼均加入碱性成细胞生长因子(100μg/ml)， 每只眼睛 25μl/ 次， 每天 3 次。用药滴三天， 由于受到碱性成细胞生长因子 的诱发， 猴子眼睛均出现红色血丝。
②治疗猴子眼睛血管增生模型
将以上猴子随机分成 A 和 B 两组， 每组 10 只。将滴眼液 1 用于治疗 A 组猴子的左 眼， 右眼滴等量的生理盐水， 每天用药三次 ； 将滴眼液 2 用于治疗 B 组猴子的左眼， 右眼滴等 量的生理盐水， 每天用药三次。治疗时间为两周。
③结果观察
经治疗后 A 组和 B 组猴子的左眼血丝消失， 而右眼的血丝发展， 血管增生加重。
结论 ： Scl 蛋白对眼睛血管增生有治疗作用。7102363629 A CN 102363647
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