N-吡唑基糖苷衍生物、其制备方法和用途 【技术领域】
本发明涉及与糖尿病相关的药物领域。具体而言，本发明涉及对糖尿病有治疗作用的含N-吡唑基糖苷结构的2型钠葡萄糖共转运子(SGLT2)抑制剂及其制备方法，以及含有它们的药物组合物。
背景技术
全球糖尿病患者目前大约有1.7亿左右，其中约绝大多数为II型(即非胰岛素依赖型)糖尿病患者。目前在临床使用的抗糖尿病药物主要有二甲双胍类、磺酰脲类、胰岛素类、噻唑烷二酮类、α-葡糖苷酶抑制剂类和二肽基肽酶-IV抑制剂类药物，这些药物具有良好的治疗效果，但长期治疗存在安全性问题，如：肝毒性，部分药物尚有体重增加等诸多问题。
2型钠葡萄糖共转运子(SGLT2)是近年来发现的治疗糖尿病的新靶点。SGLT2主要分布在肾脏近端小管，其作用是吸收尿中的葡萄糖，并将其返回到血液中，因此抑制SGLT2的就能够降低血液中葡萄糖浓度，这个方法从以往不同的途径降低了血糖水平。当SGLT2功能受阻时，尿液中将分泌更多的葡萄糖，这将有助于糖尿病患者保持正确的血糖水平。由于SGLT2抑制剂不介入葡萄糖代谢，它可以作为血糖控制主流方法的补充手段。
本发明包含了N-吡唑基糖苷类衍生物作为新型的SGLT2抑制剂，这些抑制剂为进一步可以用于治疗糖尿病，特别是非胰岛素依赖型糖尿病的药物打下了基础。
【发明内容】
本发明的一个目的是克服现有技术的缺点和不足，提供一种具有良好活性，具有通式I的化合物。
本发明的另一个目的是提供制备具有通式I的化合物的方法。
本发明的再一个目的是提供含有通式I的化合物作为有效成分，以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的药用组合物，及其在治疗糖尿病方面的应用。
现结合本发明的目的对本发明内容进行具体描述。
本发明具有通式I的化合物具有下述结构式：
其中，
n选自1和2，
R1和R2独立选自H，C1-C5的烷基，
R3选自H，F，Cl，Br，I，OR4，CN，NO2，C1-C5的烷基，五元和六元芳环及芳杂环，被F、Cl、Br、I、C1-C3的烷基、NO2、CN、MeS取代的五元和六元芳环及芳杂环，其中R4选自C1-C5的烷基。
优选以下通式I化合物，
其中，
n＝1和2，
R1和R2独立选自H，C1-C4的烷基，
R3选自H，F，Cl，OR4，CN，NO2，C1-C3的烷基，苯基，噻吩，呋喃，吡唑，1，3，4-噻二唑，1，3，4-噁二唑，被F、Cl、C1-C3的烷基、NO2、CN、甲硫基取代苯基、噻吩、呋喃、吡唑、1，3，4-噻二唑、1，3，4-噁二唑，其中R4选自C1-C3的烷基。
更优选的本发明具有通式I的化合物如下表所示：
化合物 编号 化合物名称 I-1 1-(3-苄基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-2 1-{3-[(4-乙氧基苯基)甲基]-4，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃 葡萄糖 I-3 1-{3-[(4-氟苯基)甲基]-4-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-4 1-{3-[(3-甲基苯基)甲基]-5-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄 糖 I-5 1-{3-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-4-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧 -β-D-吡喃葡萄糖 I-6 1-(4-苄基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-7 1-{4-[(2-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡 萄糖
化合物 编号 化合物名称 I-8 1-{4-[(4-氰基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡 萄糖 I-9 1-{4-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧 -β-D-吡喃葡萄糖 I-10 1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-3，5-二甲基吡唑-1- 基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-11 1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1- 基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-12 1-{4-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D- 吡喃葡萄糖 I-13 1-{4-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D- 吡喃葡萄糖 I-14 1-(5-苄基-3-叔丁基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-15 1-{5-{[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]甲基}-3-叔丁基-4-甲基吡唑-1- 基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖 I-16 1-[3-(2-苯基乙基)吡唑-1-基]-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖
本发明所述通式I化合物通过以下步骤合成：
化合物II和化合物III反应，得到化合物IV，化合物IV在甲醇钠作用下得到I。其中，化合物II按照文献方法制备(贾永林，李斌，邴柏春，2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-巯基吡喃葡萄糖的合成，化学与黏合，2007，29(3)：189-192)。
在本发明中，化合物III又分为下列IIIa和IIIb两种情况。
其中，对于IIIa，由于NH未取代的吡唑具有互变异构现象，因此在实际中存在IIIa和IIIa′的平衡。
由于同样的原因，IIIb也和其互变异构体IIIb′存在平衡。
化合物IIIa按照下列方法合成：
其中，化合物V可以购买或使用常规方法合成。
化合物IIIb按照下列方法合成：
其中，化合物VI可以购买或使用常规方法合成。
本发明所述式I化合物，可以与一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂共同制成药物组合物。该药物组合物可以制成固体口服制剂、液体口服制剂、注射剂等剂型。所述固体及液体口服制剂包括：片剂、分散片、糖衣剂、颗粒剂、干粉剂、胶囊剂和溶液剂。所述的注射剂包括：小针、大输液、冻干粉针等。
本发明的组合物，所述的药学或食品学上可接受辅料选自：填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、矫味剂、防腐剂、包衣材料、或其它赋形剂。
本发明的组合物，所述的药学或食品学上可接受辅料。填充剂为填充剂包括乳糖、蔗糖、糊精、淀粉、预胶化淀粉、甘露醇、山梨醇、磷酸氢钙、硫酸钙、碳酸钙、微晶纤维素的一种或几种的组合物；所述的粘合剂包括蔗糖、淀粉、聚维酮、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素、羟丙纤维素、甲基纤维素、聚乙二醇、药用乙醇、水的一种或几种的组合物；所述的崩解剂包括淀粉、交联聚微酮、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、羧甲纤维素钠、泡腾崩解剂的一种或几种的组合物。
本发明所述通式I化合物具有SGLT2酶的抑制作用，可作为有效成分用于制备糖尿病方面的治疗药物。本发明所述通式I化合物的活性是通过体内降糖模型验证的。
本发明的通式I化合物在相当宽的剂量范围内是有效地。例如每天服用的剂量约在1mg-1000mg/人范围内，分为一次或数次给药。实际服用本发明通式I化合物的剂量可由医生根据有关的情况来决定。这些情况包括：被治疗者的身体状态、给药途径、年龄、体重、对药物的个体反应，症状的严重程度等。
【具体实施方式】
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。需要说明的是，下述实施例仅是用于说明，而并非用于限制本发明。本领域技术人员根据本发明的教导所做出的各种变化均应在本申请权利要求所要求的保护范围之内。
实施例1
1-(3-苄基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-1)
一只100mL的圆底烧瓶中加入4-苯基-3-羰基丁醛(3.24g，20mmol)，以无水乙醇(15mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品3-苄基吡唑。该粗品以氯仿(20mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(5.3g，50mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和3滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-(3-苄基吡唑-1-基)-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-(3-苄基吡唑-1-基)-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(15mL)中，室温下搅拌3小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-(3-苄基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，5.18g，总产率81％)，ESI-MS，m/z＝321([M+H]+)。
实施例2
1-{3-[(4-乙氧基苯基)甲基]-4，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-2)
一只100mL的圆底烧瓶中加入1-(4-乙氧基苯基)-3-甲基-2，4-戊二酮(4.68g，20mmol)，以无水乙醇(15mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4，5-二甲基-3-[(4-乙氧基苯基)甲基]吡唑。该粗品以氯仿(20mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(5.3g，50mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{3-[(4-乙氧基苯基)甲基]-4，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{3-[(4-乙氧基苯基)甲基]-4，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(15mL)中，室温下搅拌3小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{3-[(4-乙氧基苯基)甲基]-4，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，6.51g，总产率83％)，ESI-MS，m/z＝393([M+H]+)。
实施例3
1-{3-[(4-氟苯基)甲基]-4-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-3)
一只100mL的圆底烧瓶中加入4-(4-氟苯基)-2-异丙基-3-羰基丁醛(4.44g，20mmol)，以无水乙醇(15mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-异丙基-3-[(4-氟苯基)甲基]吡唑。该粗品以氯仿(20mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(5.3g，50mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{3-[(4-氟苯基)甲基]-4-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{3-[(4-氟苯基)甲基]-4-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.054g，1mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌3小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空50℃干燥，得到最终产物1-{3-[(4-氟苯基)甲基]-4-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，5.25g，总产率69％)，ESI-MS，m/z＝381([M+H]+)。
实施例4
1-{3-[(3-甲基苯基)甲基]-5-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-4)
一只100mL的圆底烧瓶中加入1-(3-甲基苯基)-5-甲基-2，4-己二酮(4.36g，20mmol)，以无水乙醇(15mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品5-异丙基-3-[(3-甲基苯基)甲基]吡唑。该粗品以氯仿(20mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(5.3g，50mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{3-[(3-甲基苯基)甲基]-5-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{3-[(3-甲基苯基)甲基]-5-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.054g，1mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空55℃干燥，得到最终产物1-{3-[(3-甲基苯基)甲基]-5-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，5.65g，总产率75％)，ESI-MS，m/z＝377([M+H]+)。
实施例5
1-{3-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-4-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-5)
一只100mL的圆底烧瓶中加入4-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-2-异丙基-3-羰基丁醛(5.69g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品3-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-4-异丙基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(5.3g，50mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{3-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-4-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{3-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-4-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.054g，1mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{3-{[4-(1-甲基吡唑-3-基)苯基]甲基}-4-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，6.28g，总产率71％)，ESI-MS，m/z＝443([M+H]+)。
实施例6
1-(4-苄基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-6)
一只100mL的圆底烧瓶中加入2-苄基丙二醛(3.24g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-苄基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-(4-苄基吡唑-1-基)-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-(4-苄基吡唑-1-基)-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.054g，1mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-(4-苄基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，4.74g，总产率74％)，ESI-MS，m/z＝321([M+H]+)。
实施例7
1-{4-[(2-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-7)
一只100mL的圆底烧瓶中加入3-(2-硝基苯基)-2，4-戊二酮(4.70g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-[(2-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-[(2-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-[(2-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-[(2-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，6.29g，总产率80％)，ESI-MS，m/z＝394([M+H]+)。
实施例8
1-{4-[(4-氰基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-8)
一只100mL的圆底烧瓶中加入3-(4-氰基苯基)-2，4-戊二酮(4.30g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-[(4-氰基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-[(4-氰基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-[(4-氰基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-[(4-氰基苯基)甲基]-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，6.35g，总产率85％)，ESI-MS，m/z＝374([M+H]+)。
实施例9
1-{4-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-9)
一只100mL的圆底烧瓶中加入4-甲基-2-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-羰基戊醛(6.42g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-{[4-(3-氯噻吩-2-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，7.66g，总产率80％)，ESI-MS，m/z＝479([M+H]+)。
实施例10
1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-10)
一只100mL的圆底烧瓶中加入3-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-2，4-戊二酮(6.41g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-3，5-二甲基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-3，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-3，5-二甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噻二唑-5-基)苯基]甲基}-3，5-二甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，7.08g，总产率74％)，ESI-MS，m/z＝479([M+H]+)。
实施例11
1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-11)
一只100mL的圆底烧瓶中加入2-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-4-甲基-3-羰基戊醛(6.37g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入2克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-{[4-(2-甲硫基-1，3，4-噁二唑-5-基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，6.77g，总产率71％)，ESI-MS，m/z＝477([M+H]+)。
实施例12
1-{4-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-12)
一只100mL的圆底烧瓶中加入2-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-4-甲基-3-羰基戊醛(6.51g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-{[4-(2-硝基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，7.06g，总产率73％)，ESI-MS，m/z＝484([M+H]+)。
实施例13
1-{4-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-13)
一只100mL的圆底烧瓶中加入2-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-4-甲基-3-羰基戊醛(6.11g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品4-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{4-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{4-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{4-{[4-(4-氰基苯基)苯基]甲基}-3-异丙基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，7.60g，总产率82％)，ESI-MS，m/z＝464([M+H]+)。
实施例14
1-(5-苄基-3-叔丁基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-14)
一只100mL的圆底烧瓶中加入1-苯基-5，5-二甲基-2，4-己二酮(4.37g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品5-苄基-3-叔丁基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-(5-苄基-3-叔丁基吡唑-1-基)-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-(5-苄基-3-叔丁基吡唑-1-基)-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-(5-苄基-3-叔丁基吡唑-1-基)-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，6.02g，总产率80％)，ESI-MS，m/z＝377([M+H]+)。
实施例15
1-{5-{[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]甲基}-3-叔丁基-4-甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-15)
一只100mL的圆底烧瓶中加入1-[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]-5，5-二甲基-2，4-己二酮(5.97g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品5-{[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]甲基}-3-叔丁基-4-甲基吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-{5-{[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]甲基}-3-叔丁基-4-甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-{5-{[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]甲基}-3-叔丁基-4-甲基吡唑-1-基}-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-{5-{[4-(5-甲基呋喃-2-基)苯基]甲基}-3-叔丁基-4-甲基吡唑-1-基}-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，7.67g，总产率84％)，ESI-MS，m/z＝457([M+H]+)。
实施例16
1-[3-(2-苯基乙基)吡唑-1-基]-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(I-16)
一只100mL的圆底烧瓶中加入5-苯基-3-羰基-戊醛(3.52g，20mmol)，以无水乙醇(20mL)溶解，室温下电磁搅拌，慢慢滴加70％水合肼(1.8mL，25mmol)，滴加完毕后室温下搅拌过夜。反应混合物在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，所得到的残余物即为粗品3-(2-苯基乙基)吡唑。该粗品以氯仿(25mL)溶解，而后加入2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-溴代葡萄糖(II，8.22g，20mmol)、碳酸钠固体(4.24g，40mmol)、苄基三乙基溴化铵(1.0g)和5滴水，所得混合物在室温下剧烈搅拌过夜。反应混合物用二氯甲烷(150mL)稀释，用饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上蒸去溶剂，得到的残余物用柱层析纯化，得到纯品1-[3-(2-苯基乙基)吡唑-1-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖，白色固体。把上述纯品1-[3-(2-苯基乙基)吡唑-1-基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖溶解到含有甲醇钠(0.11g，2mmol)的无水甲醇(20mL)中，室温下搅拌5小时，而后加入1克干燥的强酸性阳离子交换树脂，室温下搅拌过夜。过滤除去离子交换树脂，滤液在旋转蒸发仪上蒸干，得到一个白色固体，真空60℃干燥，得到最终产物1-[3-(2-苯基乙基)吡唑-1-基]-1-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖(白色固体，5.35g，总产率80％)，ESI-MS，m/z＝335([M+H]+)。
实施例17
用量/片
实施例1样品(I-1) 100mg
微晶纤维素 80mg
预胶化淀粉 70mg
聚乙烯吡咯烷酮 6mg
羧甲基淀粉钠盐 5mg
硬脂酸镁 2mg
滑石粉 2mg
将活性成分、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50-60℃干燥，将羧甲基淀粉钠盐，硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中压片。
实施例18
用量/片
实施例2样品(I-2) 100mg
微晶纤维素 80mg
预胶化淀粉 70mg
聚乙烯吡咯烷酮 6mg
羧甲基淀粉钠盐 5mg
硬脂酸镁 2mg
滑石粉 2mg
将活性成分、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50-60℃干燥，将羧甲基淀粉钠盐，硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中压片。
实施例19
用量/粒
实施例5样品(I-5) 50mg
微晶纤维素 30mg
预胶化淀粉 20mg
聚乙烯吡咯烷酮 3mg
硬脂酸镁 2mg
滑石粉 1mg
将活性成分、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50-60℃干燥，将硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中，装胶囊，即得。
实施例20
用量/粒
实施例7样品(I-7) 50mg
微晶纤维素 30mg
预胶化淀粉 20mg
聚乙烯吡咯烷酮 3mg
硬脂酸镁 2mg
滑石粉 1mg
将活性成分、预胶化淀粉和微晶纤维素过筛，充分混合，加入聚乙烯吡咯烷酮溶液，混合，制软材，过筛，制湿颗粒，于50-60℃干燥，将硬脂酸镁和滑石粉预先过筛，然后加入到上述的颗粒中，装胶囊，即得。
实施例21
用量/50mL
实施例9样品(I-9) 50mg
柠檬酸 100mg
NaOH 适量(调pH 4.0-5.0)
蒸馏水 50mL
在蒸馏水中，先加入蒸馏水和柠檬酸，搅拌溶解和后，再加入样品，微热使溶解，调pH值为4.0-5.0，加0.2克活性碳，室温下搅拌20分钟，过滤，滤液，中控测定溶液浓度，按每安瓶5毫升分装，高温灭菌30分钟，即得注射液。
实施例22
用量/50mL
实施例11样品(I-11) 50mg
柠檬酸 100mg
NaOH 适量(调pH 4.0-5.0)
蒸馏水 50mL
在蒸馏水中，先加入蒸馏水和柠檬酸，搅拌溶解和后，再加入样品，微热使溶解，调pH值为4.0-5.0，加0.2克活性碳，室温下搅拌20分钟，过滤，滤液，中控测定溶液浓度，按每安瓶5毫升分装，高温灭菌30分钟，即得注射液。
实施例23
实施例14样品(I-14) 3.0g
泊洛沙姆 1.0g
氢氧化钠 0.2g
枸橼酸 QS
甘露醇 26.0g
乳糖 23.0g
注射用水 100ml
制备工艺：取注射用水80ml，加主药、甘露醇、乳糖、泊洛沙姆搅拌使溶解后，加1mol/L的枸橼酸调节PH至7.0-9.0，补加水至100ml。加入0.5g活性炭，在30℃下搅拌20分钟，脱炭，采用微孔滤膜过滤除菌，滤液按每支1ml进行分装，预冻2小时后，冷冻下减压干燥12小时，至样品温度到室温后，再干燥5小时，制得白色疏松块状物，封口即得。
实施例24
颗粒剂 100袋
实施例16样品(I-16) 30.0g
乳糖 55.0g
甘露醇 14.0g
阿司巴甜 0.05g
香精 0.05g
2％羟丙甲纤维素(纯水配制) QS
制备工艺：将主药与辅料分别过100目筛，充分混合，然后称取处方量辅料与主药充分混合。再加入粘合剂制软材，14目筛制粒，55℃干燥，12目筛整粒，测定袋重包装。
实施例25
样品以1％羧甲基纤维素钠配制成5mg/mL浓度的混悬液，给药容量为0.2mL/20g体重，相当于50mg/kg剂量。
健康ICR小鼠，雌雄各半，体重20-24g，符合一级标准。动物禁食16小时，药后2h腹腔注射2g/kg的葡萄糖盐水溶液(Dapagliflozin药后1.5h注射葡萄糖)，于造模后0.5h、1h、2h、3h和4h定时取用毛细管自小鼠球后静脉丛取血，离心分离血清，用葡萄糖氧化酶法测定各时间点血清葡萄糖含量。结果见下表：
以上结果表明，各给药均能显著降低葡萄糖引起的小鼠血糖耐受量。