甲苯胺磺酰胺及其用途 本发明提供抑制细胞增殖和细胞分裂以及抑制低氧条件下激活缺氧诱导因子 (HIF) 介导的转录和信号转导的新化合物。 一方面， 本发明的化合物用于制备治疗或预防选 自炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变和其特征在于过度血管形成的疾 病的疾病或紊乱的药物。 也提供包含本发明化合物和用于治疗或预防所提及的疾病或紊乱 的第二种治疗药物或放射疗法的药用组合物。
发明背景
细胞对供氧不足的正常应答通过缺氧信号转导通路介导。 该应答对许多生理功能 例如其中包括肿瘤发生和转移、 细胞凋亡抗性、 诱导新生血管形成和代谢是重要的。 对缺氧 信号转导的综述参见例如 Qingdong Ke 和 Max Costa， Molecular Pharmacology(2006)， 第 70 卷， 第 5 期。
由于缺氧， 例如， 在肿瘤中观察到转录因子 ( 低氧诱导因子， HIF)， 最明显是 HIF-1α 和 HIF-1β 的杂二聚体复合物的升高的水平， 以在这种快速生长的组织类型中与 其它辅因子联合补偿减少的氧和营养物的可用性。在厌氧条件下， HIF-1α 的动态平衡因 其减少的降解而失衡， 从而使遍及缺氧反应元件 (HRE) 的信号转导增强， 并导致大量的生 存和生长因子表达增加。
缺氧条件也被发现于非肿瘤组织中。例如， 视网膜病变是指对眼睛视网膜的非炎 性损伤的通用术语。该病症最常由供血不足导致缺氧引起。尤其是患有糖尿病的人处于视 网膜病变的风险下。 糖尿病患者的视网膜中的缺氧导致脆弱的新血管沿着视网膜并在填充 在眼内的透明、 凝胶状玻璃体液中生长。如不及时治疗， 这些新生血管可出血、 模糊视力和 破坏视网膜。纤维血管增生也可引起部分视网膜脱落。新生血管也能生长进入眼前房并引 起新生血管性青光眼。
最近， 已经积累的证据显示， 抑制 HIF-1 活性也可通过其对巨噬细胞和嗜中性白 细胞的激活和浸润进入受到影响的组织的作用来起预防炎症作用 ( 参见例如 Giaccia 等， Drug Discovery， 第 2 卷， 2003 年 10 月 )。
由于上文概述的原因， 抑制 HIF 功能的化合物为治疗或预防选自炎性疾病、 过度 增殖性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变和特征在于过度血管形成的疾病的疾病或紊乱的有 价值的药物。
由于 HIF-1 在肿瘤发生、 发展和转移中的重要性， 大量的努力已经致力于确认用 于癌症疗法的 HIF-1 抑制剂。 已报道许多小分子和 RNA 构件象 siRNA 呈现出对 HIF-1 途径的 抑制作用， 例如 Kung AL 等， Cancer Cell(2004)， 第 6 卷， 第 33 ff ； Rapisarda A 等 .Cancer Res.(2002)， 第 62 卷， 第 4316 ff. ； Tan C. 等， Cancer Res.(2005)， 第 65 卷， 第 605 ff ； Mabjeesh NJ 等， Cancer Cell， (2003)， 第 3 卷， 第 363 ff ； Kong X 等， Mol Cell Biol(2006)， 第 26 卷， 第 2019 ff. ； Kong D 等， Cancer Res.(2005)， 第 65 卷， 第 9047 ff. ； Chau N. 等， Cancer Res.(2005)， 第 65 卷， 第 4918 ff ； Welsh S 等， Mol Cancer Ther(2004)， 第 3 卷， 第 233 ff。然而， 这些化合物通常具有除 HIF-1 抑制作用以外的其它活性， 并且它们中大多数 缺乏有效药物需要的理想的药物代谢动力学性质或毒性分布。另外， 一些化合物具有不能
口服给药的缺点， 例如 HIF-1 抑制剂 EZN-2968， 其为锚定的核酸反义寡核苷酸。
以上引用的科学文献强调了对新治疗药物的高度医学需要以提供对不同的增殖 和炎性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变和特征在于过度血管形成的疾病的更有效的治疗。
发明概述
本发明提供能够预防或治疗疾病或紊乱的新化合物。在此提出的数据证实， 根据 本发明的化合物出人意外地为以下作用的非常有效的抑制剂 ： (i) 在低氧条件下激活 HIF 介导的转录， (ii) 细胞周期和细胞增殖， (iii) 雌激素效应元件介导的转录活性， 以及 (iv) 这些化合物诱导细胞凋亡。
在一个方面， 本发明涉及具有依据式 I 结构的化合物 ：
其中
R1 选自 H、 烷基、 链烯基、 链炔基、 -CN、 卤素、 -OH、 烷氧基、 -SH、 S- 烷基、 -NH2、 NH- 烷 基、 N- 二烷基、 NHOH、 NMeOH、 NMe(OMe)、 -NO2、 -CF3、 -OCF3 和 C1-C4 羟基烷基 ； 2
R 为 H 或 C1-C4 烷基 ；
R3 为 H 或 -CH3 ；
R4 为苯基或单环 5- 或 6- 元杂芳基 ； 任选地被一个或多个选自以下的取代基取 代：
烷基、 链烯基、 链炔基、 烷氧基、 卤素、 -CN、 -CF3、 -OCF3、 C1-C4 羟基烷基、 -OH、 -SH、 S- 烷基、 -CN、 N- 二烷基、 丙炔腈、 -NO2、 -NR7R8、 -C(O)R20、 N-O( 其中氮原子为单环 5- 或 6- 元 杂芳基的必需部分 ) 和一起形成亚甲二氧基桥 (-O-CH2-O-) 的两个取代基 ；
R5 为 H 或 -CH3 ；
R6 选自 H、 卤素、 烷基、 烷氧基、 链烯基、 链炔基、 S- 烷基、 -OH、 -NR7R8、 -CN、 N- 二烷 基、 -SH、 -CF3 和 -OCF3，
或者 R6 与 R1 一起形成亚甲二氧基桥 (-O-CH2-O-) ；
R7 为 H 或烷基 ；
R8 为 H 或 C1-C4 烷基 ； 和
R20 为 C1-C4 烷基 ；
条件是 R4 不为 3- 烷氧基 - 哒嗪 -5- 基 ； 如果 R4 为苯基， 那么苯环的 2- 和 5- 位不 可同时被两个甲氧基取代基取代 ； 和 R3 与 R5 不同时为 H。
在另一个方面， 本发明涉及包含根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐及用 于治疗或预防选自炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变和特征在于病理 生理学过度血管形成的疾病的疾病或紊乱的第二种治疗药物以及任选的药学上可接受的 载体或赋形剂的药用组合物。
在另一个方面， 本发明涉及根据本发明的化合物或本发明组合物在制备治疗或预 防选自炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变和特征在于病理生理学过度 血管形成的疾病的疾病或紊乱的药物中的用途。
在另一个方面， 本发明提供用于治疗过度增殖性疾病或紊乱的方法， 该方法包括 在患者接受放射疗法、 化学疗法、 免疫疗法、 激光 / 微波温热疗法或采用反义 DNA 和 RNA 的 基因疗法之前、 期间和 / 或之后给予患者依据本发明的化合物或组合物。
详细描述
应该理解， 在此采用的术语仅用于描述具体实施方案的目的， 并不打算限制仅由 所附权利要求书限定的本发明范围。除非另外限定， 在此使用的所有技术和科学术语具有 与本领域普通技术人员通常理解的相同含义。
优选地， 在此使用的术语如在 “生物技术术语的多国语言词汇表 ： (IUPAC 推荐 )” ， Leuenberger， H.G.W， Nagel， B. 和 Klbl， H. 编辑 .(1995)， Helvetica Chimica Acta， CH-4010 Basel， 瑞士 ) 中描述的那样定义。
遍及该说明书和随后的权利要求书， 除非上下文另外要求， 单词 “包含” 及变体例 如 “含有” 和 “包括” 应理解为意指包括所指定的整体或步骤或者整体或步骤的组合但是不 排除任何其它的整体或步骤或者整体或步骤的组合。 遍及该说明书的正文引用了几个文件。在此引用的每一个文件 ( 包括所有的专 利、 专利申请、 科学出版物、 制造商的说明书、 用法指南等 )， 无论上文还是下文， 特此通过参 照以其全部结合到本文中。本文完全不可理解为承认 ： 本发明不具有凭借在先发明提前这 类公开的权利。
在术语的以下定义中， 提供烷基、 杂烷基、 杂芳基、 链烯基和链炔基。 这些术语在其 使用的每一种情况中， 在本说明书的其余部分具有各自定义的含义和优选含义。然而在整 个说明书中采用它们的某些实例中， 指出这些术语的优选意义。
术语 “烷基” 指饱和的直链或支链碳链。优选地， 所述链包含 1-10 个碳原子， 即 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10 个碳原子， 例如甲基、 乙基甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊基、 己基、 庚基、 辛基。烷基任选在所示位置被取代。
术语 “C1-C4 羟基烷基” 指单 - 或多 - 羟基化 C1-C4 烷基， 即包含 1、 2、 3 或 4 个碳原 子。优选地， 该术语指单 - 羟基化 C1-C4 烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基、 羟基 - 异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基。
术语 “杂烷基” 指饱和的直链或支链碳链。 优选地， 所述链包含 1-9 个碳原子， 即 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 个碳原子， 例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 仲丁基、 叔丁基、 戊基、 己基、 庚基、 辛基， 其被相同或不同的杂原子间断一次或多次例如 1、 2、 3 次。优选地杂 原子选自 O、 S 和 N， 例如 CH2-O-CH3、 CH2-O-C2H5、 C2H4-O-CH3、 C2H4-O-C2H5 等。杂烷基任选被取 代。
术语 “杂芳基” 优选地指 5 或 6- 元芳族单环， 其中至少一个碳原子优选被选自 O、 N 和 S 的 1、 2、 3 或 4 个 ( 对于 5 元环 ) 或者 1、 2、 3 或 4 个 ( 对于 6 元环 ) 相同或不同的杂
原子替代。实例为呋喃基、 噻吩基、 唑基、 异 唑基、 1， 2， 5-二唑基、 1， 2， 3-二唑基、吡咯基、 咪唑基、 吡唑基、 1， 2， 3- 三唑基、 噻唑基、 异噻唑基、 1， 2， 3- 噻二唑基、 1， 2， 5- 噻二 唑基、 吡啶基、 嘧啶基、 吡嗪基、 1， 2， 3- 三嗪基、 1， 2， 4- 三嗪基和 1， 3， 5- 三嗪基。如在此使用的， “单环” 指仅具有 1 个芳族或杂芳族环， 不包括任何多重稠合的芳族 或杂芳族环的取代基。
术语 “链烯基” 指包含一个或多个双键的烯烃不饱和碳原子。一个实例为丙烯 基。优选地， 链烯基链包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 碳原子， 例如乙烯基、 1- 丙烯 基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基、 辛烯基。
术语 “链炔基” 指具有一个或多个叁键的不饱和碳原子。实例为炔丙基。优选地， 链炔基链包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 碳原子， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔 基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊 炔基或辛炔基。
在本发明化合物的一个优选实施方案中， 在烷基、 芳基、 链烯基或链炔基中的氢原 子可相互独立地被一个或多个卤素原子取代。一个基团为三氟甲基。
如果两个或更多个基团可被相互独立地选择， 那么术语 “独立地” 意指基团可为相 同或可为不同的。
术语 “药学上可接受的盐” 指本发明化合物的盐。合适的本发明化合物的药学上 可接受的盐包括酸加成盐， 其例如可通过混合本发明化合物的溶液与药学上可接受的酸例 如盐酸、 硫酸、 富马酸、 马来酸、 琥珀酸、 乙酸、 苯甲酸、 枸橼酸、 酒石酸、 碳酸或磷酸的溶液形 成。另外， 当本发明化合物具有酸部分时， 其合适的药学上可接受的盐可包括碱金属盐 ( 例 如钠或钾盐 )、 碱土金属盐 ( 例如钙或镁盐 ) 以及与合适的有机配体 ( 例如采用相反离子 例如卤化物、 氢氧化物、 羧化物、 硫酸盐、 磷酸盐、 硝酸盐、 烷基磺酸盐和芳基磺酸盐形成的 铵、 季铵和胺阳离子 ) 形成的盐。药学上可接受盐的例证性实例包括 ( 但不限于 ) ： 乙酸 盐、 己二酸盐、 藻酸盐、 抗坏血酸盐、 天冬氨酸盐、 苯磺酸盐、 苯甲酸盐、 碳酸氢盐、 硫酸氢盐、 酒石酸氢盐、 硼酸盐、 溴化物、 丁酸盐、 乙二胺四乙酸钙、 樟脑酸盐、 樟脑磺酸盐、 樟磺酸盐、 碳酸盐、 氯化物、 枸橼酸盐、 克拉维酸盐、 环戊烷丙酸盐、 二葡糖酸盐、 二盐酸盐、 十二烷基硫 酸盐、 乙二胺四乙酸盐、 乙二磺酸盐、 依托酸盐、 乙磺酸盐 (esylate)、 乙烷磺酸盐、 甲酸盐、 富马酸盐、 葡庚糖酸盐 (gluceptate)、 葡庚糖酸盐 (glucoheptonate)、 葡糖酸盐、 谷氨酸 盐、 甘油磷酸盐、 对 α- 羟乙酰氨基苯胂酸盐 (glycolylarsanilate)、 半硫酸盐、 庚酸盐、 己 酸盐、 己基苯间二酚盐、 海巴明、 氢溴酸盐、 盐酸盐、 氢碘酸盐、 2- 羟基乙磺酸盐、 羟基萘甲酸 盐、 碘化物、 羟乙磺酸盐 (isothionate)、 乳酸盐、 乳糖酸盐、 月桂酸盐、 十二烷基硫酸盐、 苹 果酸盐、 马来酸盐、 丙二酸盐、 扁桃酸盐、 甲磺酸盐、 甲烷磺酸盐、 甲基硫酸盐、 粘酸盐、 2- 萘 磺酸盐、 萘磺酸盐、 烟酸盐、 硝酸盐、 N- 甲基葡糖胺铵盐、 油酸盐、 草酸盐、 扑酸盐 ( 双羟萘酸 盐 )、 棕榈酸盐、 泛酸盐、 果胶酸盐、 过硫酸盐、 3- 苯基丙酸盐、 磷酸盐 / 二磷酸盐、 苦味酸盐、 新戊酸盐、 聚半乳糖醛酸盐、 丙酸盐、 水杨酸盐、 硬脂酸盐、 硫酸盐、 碱式乙酸盐、 琥珀酸盐、 单宁酸盐、 酒石酸盐、 茶氯酸盐、 甲苯磺酸盐、 三乙基碘化物 (triethiodide)、 十一酸盐、 戊 酸盐等 ( 参见例如 Berge， S.M. 等， “Pharmaceutical Salts” Journal of Pharmaceutical Science， 1977， 66， 1-19)。某些特殊的本发明化合物含有使化合物转化为碱加成盐或酸加 成盐的碱性和酸性官能团两者。
化合物的中性形式可通过使盐与碱或酸接触并以常规方式分离母体化合物而再 生。化合物的母体形式在某些物理性质例如在极性溶剂中的溶解度方面不同于各种盐形式， 但是对于本发明的目的而言， 盐相当于所述化合物的母体形式。
除了盐形式以外， 本发明提供以前药形式存在的化合物。在此所述化合物的前药 为易于在生理条件下经历化学变化以提供通式 (I)-(III) 化合物的那些化合物。前药为被 化学修饰的， 在给予患者前药之后通过体内生理作用例如水解、 代谢等转化为本发明化合 物的药理学活性或非活性化合物。另外， 前药可在体外环境下通过化学或生化方法转化为 本发明的化合物。 例如， 当被置于含有合适酶的经皮贴剂储库中时， 前药可缓慢转化为本发 明的化合物。在制备和使用前药中涉及的适用性和技术是本领域技术人员熟知的。对于包 含酯的前药一般性讨论参见 Svensson 与 Tunek Drug Metabolism Reviews 16.5(1988) 和 Bundgaard Design of Prodrugs， Elsevier(1985)。被掩蔽的酸性阴离子的实例包括多种 酯例如烷基 ( 如甲基、 乙基 )、 环烷基 ( 如环己基 )、 芳烷基 ( 如苄基、 对 - 甲氧基苄基 ) 和烷 基羰氧基烷基 ( 如新戊酰氧基甲基 )。 胺已经被掩蔽为芳基羰氧基甲基取代的衍生物， 后者 在体内经酯酶裂解释放而游离药物和甲醛 (Bungaard J.Med.Chem.2503(1989))。而且， 包 含酸性 NH 基团的药物， 例如咪唑、 酰亚胺、 吲哚等已经被 N- 酰氧基甲基的药物 (Bundgaard Design of Prodrugs， Elsevier(1985))。 羟基已经被掩蔽为酯和醚。 EP 0039051(Sloan 和 Little， 1981 年 4 月 11 日 ) 公开了曼尼希碱羟肟酸前药、 其制备和用途。
本发明化合物以及用于其制备的依据本发明的起始原料可在本领域技术人员 已知并且适合于所述反应的反应条件下， 如在此显示的那样并且或者通过本领域技术人 员已知的， 即如在文献中 ( 例如在标准作业如 Houben-Weyl， Methoden der organischen Chemie[Methods of Organic Chemistry]， Georg-Thieme-Verlag， Stuttgart 中 ) 描述的 方法和标准流程合成。
如果要求， 起始原料也可通过不自反应混合物分离它们， 但是代之以立即使它们 进一步转化为本发明化合物而就地形成。另一方面， 能够逐步实施反应。应该指出， 所表示 的是通用程序， 因为它涉及具有非特定立体化学的化合物的制备。 然而， 这样的程序通常可 用于具有具体立体化学的那些化合物， 例如当在立体中心的立体化学为 (S) 或 (R) 时。另 外， 具有一个立体化学 ( 例如 (R)) 的化合物通常可用于采用熟知的方法例如通过反转生产 具有相反立体化学 ( 即 (S)) 的那些化合物。
某些本发明化合物可以非溶剂合物形式以及溶剂合物形式， 包括水合形式存在。 一般说来， 溶剂合物形式相当于非溶剂合物形式， 并打算涵盖在本发明范围内。 某些本发明 化合物可以多晶形或无定形形式存在。 一般说来， 对本发明所预期的用途而言， 所有物理形 式都是等价的， 并打算涵盖在本发明的范围内。
某些本发明化合物具有不对称碳原子 ( 光学中心 ) 或双键。外消旋体、 对映体、 非 对映体、 几何异构体及各异构体都打算包含在本发明的范围内。 因此， 发明化合物包括立体 异构体的混合物， 尤其是对映体的混合物， 以及纯的立体异构体， 尤其是纯的对映体， 或者 富含立体异构体的混合物， 尤其是富含对映体的混合物。也包含在本发明范围内的是由下 式 (I)-(III) 表示的化合物的各异构体及其完全或部分平衡的任何混合物。本发明也包括 通过下式表示的作为含有其异构体的混合物存在的化合物的其中一个或多个手性中心被 反转的各异构体。而且， 应该理解， 式 (I)-(III) 化合物的所有互变异构体和互变异构体的 混合物都包含在式 (I)-(III) 化合物的范围内并且优选与其相当的式和子式。
所得到的外消旋体本身可通过已知方法被机械或化学拆分为异构体。 优选通过与光学活性拆分剂反应， 自外消旋混合物形成非对映体。
合适的拆分剂的实例为光学活性酸例如 D 和 L 形式的酒石酸、 二乙酰基酒石酸、 二 苯甲酰基酒石酸、 扁桃酸、 苹果酸、 乳酸或各种光学活性樟脑磺酸例如 - 樟脑磺酸。而且有 利的是借助于填充了光学活性拆分剂 ( 例如二硝基苯甲酰苯基甘氨酸 ) 的柱子进行对映体 拆分 ； 合适洗脱剂的实例为己烷 / 异丙醇 / 乙腈混合物。
非对映体拆分也可通过标准纯化方法， 例如色谱法或分级结晶实施。
也能够通过以上描述的方法经采用已经是光学活性的起始原料得到光学活性的 式 (I)-(III) 化合物。
本发明提供新的组合物、 化合物和这些化合物与组合物用于预防或治疗疾病或紊 乱的用途。
在第一个方面， 本发明涉及具有依据式 I 结构的化合物 ：
其中 ：
R1 选自 H、 烷基， 优选地烷基链包含 1-10 个碳原子， 即 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10 个 碳原子， 例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊基、 己基、 庚基或辛基 ； 链烯 基， 尤其是包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙烯基、 1- 丙 烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯 基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基、 辛烯基 ； 链炔基， 优选地为包含 2-8 个 碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 碳原子的链炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔 基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊炔基或辛 炔基 ； -CN ； 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH ； 烷氧基， 尤其是 C1-C6 烷氧基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6 烷氧基， 优选地为甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基、 叔丁氧基、 戊氧基或己氧基 ； -SH ； S- 烷基， 尤其是 C1-C6S- 烷基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6S- 烷基 ； -NH2 ； NH- 烷基， 尤其是 C1-C6NH- 烷基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6NH- 烷基 ； N- 二烷基， 优选地为 C1-C6N- 二烷基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6N- 二烷基 ； NHOH、 NMeOH、 NMe(OMe)、 -NO2、 -CF3、 -OCF3 和 C1-C4 羟基烷基， 尤其是 C1-C4 羟基烷基， 例如 C1、 C 2、 C3 或 C4 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙 基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基 ； 2
R 为 H 或 C1-C4 烷基， 即包含 1-4 个碳原子即 1、 2、 3 或 4 个碳原子的烷基， 例如甲 基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基 ； 3
R 为 H 或 -CH3 ；
R4 为苯基或单环 5- 或 6- 元杂芳基 ； 任选地被一个或多个选自以下的取代基取 代：
烷基， 优选地烷基链包含 1-10 个碳原子， 即 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10 个碳原子，
例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊基、 己基、 庚基或辛基 ； 链烯基， 尤 其是包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙烯基、 1- 丙烯 基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基或辛烯基 ； 链炔基， 优选地为包含 2-8 个碳 原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 碳原子的链炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊炔基或辛炔 基； 烷氧基， 尤其是 C1-C6 烷氧基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6 烷氧基， 优选地为甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基、 叔丁氧基、 戊氧基或己氧基 ； 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I； -CN、 -CF3、 -OCF3、 C1-C4 羟基烷基， 尤其是 C1-C4 羟基烷基， 例如 C1、 C2、 C3 或 C4 羟基烷基， 例 如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基 ； -OH、 -SH ； S- 烷基， 尤 其是 C1-C6S- 烷基， 例如 C1、 C2、 C 3、 C4、 C5 或 C6S- 烷基 ； -CN、 N- 二烷基， 优选地为 C1-C6N- 二 7 8 烷基， 例如 C1、 C2、 C 3、 C4、 C5 或 C6N- 二烷基 ； 丙炔腈、 -NO2、 -NR R ， 优选地为 -NH2 或 NH- 烷基， 更优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基即 -NH-CH3、 -NH- 乙基、 -NH-C3 烷基或 -NH-C4 烷基并且最 20 优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或 N(CH3)2 ； -C(O)R ， 优选地为乙酰基、 丙酰基、 异丙酰基、 丁酰基或 异丁酰基 ； N-O( 其中氮原子为单环 5- 或 6- 元杂芳基的必需部分 ) 和一起形成亚甲二氧基 桥 (-O-CH2-O-) 的两个取代基 ； R5 为 H 或 -CH3 ；
R6 选自 H、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； 烷基， 优选地烷基链包含 1-10 个碳原子， 即 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10 个碳原子， 例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊基、 己基、 庚基或辛基 ； 烷氧基， 尤其是 C1-C6 烷氧基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6 烷氧基， 优 选地为甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基、 叔丁氧基、 戊氧基或己氧基 ； 链烯基， 尤其是包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙烯 基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基或辛烯基 ； 链炔基， 优选地为包 含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 碳原子的链炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊炔 7 8 基或辛炔基 ； S- 烷基， 尤其是 C1-C6S- 烷基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6S- 烷基 ； -OH、 -NR R ， 优 选地为 -NH2 或 NH-- 烷基， 更优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基即 -NH-CH3、 -NH- 乙基、 -NH-C3 烷基或 -NH-C4 烷基并且最优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或 N(CH3)2 ； -CN、 N- 二烷基， 优选地为 C1-C6N- 二烷基， 例如 C1、 C2、 C3、 C4、 C5 或 C6N- 二烷基 ； -SH、 -CF3 和 -OCF3 ； 6 1
或者 R 与 R 一起形成任选地在亚甲基上取代的亚甲二氧基桥 (-O-CH2-O-) ；
R7 为 H 或烷基， 优选地烷基链包含 1-10 个碳原子， 即 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10 个 碳原子， 例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基、 戊基、 己基、 庚基或辛基 ； 8
R 为 H 或 C1-C4 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基 ； 和 20
R 为 C1-C4 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基 ； 4 4
条件是 R 不为 3- 烷氧基 - 哒嗪 -5- 基 ； 如果 R 为苯基， 那么苯环的 2- 和 5- 位不 3 5 可同时被两个甲氧基取代基取代 ； 和 R 与 R 不同时为 H。 1
而且优选的是其中 R 选自 -CH3、 -OCH3、 -CF3、 F 和 -NH2 的化合物。 6 2
在化合物的另一个优选实施方案中， R、 R 和 R5 为 H 并且 R1 选自 -CH3、 -OCH3、 -CF3、
F 和 -NH2。
在优选实施方案中， 本发明化合物的 R4 取代基可仅具有单一杂原子和 / 或可被少 于 2 个或少于 3 个取代基取代。
本发明化合物的另一个优选实施方案具有以下取代基 ： R6、 R2 和 R5 为 H 并且 R1 选 自 -CH3、 -OCH3、 -CF3、 F 和 -NH2 并且 R4 基团被少于 2 个或少于 3 个取代基取代和 / 或如果 R4 为单环 5- 或 6- 元杂芳基， 那么在该上下文中优选的是其仅包含单一杂原子。
在优选实施方案中， 本发明化合物具有依据式 II 的结构 ：
也优选具有依据式 III 结构的本发明化合物 ：在式 (II) 和 (III) 的情况下， R1、 R2、 R4 和 R6 具有上述指定的含义和优选含义。尤 其优选的是其中 R1 选自 -CH3、 -OCH3、 -CF3、 F 和 -NH2 的式 (II) 或 (III) 化合物。在依据式 (II) 或 (III) 化合物的另一个优选实施方案中， R2 为 H。在一个甚至更优选的实施方案中， R6 和 R2 为 H 并且 R1 选自 -CH3、 -OCH3、 -CF3、 F 和 -NH2。
在本发明化合物的优选实施方案中， 优选依据式 (II) 或 (III) 化合物， R4 具有依 据式 IV 的结构 ：
其中 ：
R9 和 R10 各自独立选自 H、 C1-C4 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁 基； C1-C4 链烯基例如乙烯基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯 基、 异丁烯基或仲丁烯基 ； C1-C4 链炔基例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁
炔基或 3- 丁炔基 ； -CN、 -C(O)R20， 优选地为乙酰基、 丙酰基、 异丙酰基、 丁酰基或异丁酰基 ； 丙炔腈、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH、 C1-C4 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙 氧基、 丁氧基、 异丁氧基或叔丁氧基 ； -SH、 C1-C4S- 烷基， 例如 C1、 C2、 C3 或 C4S- 烷基 ； -NH2、 C1-C4NH- 烷基， 例如 C1、 C2、 C3 或 C4NH- 烷基 ； C1-C4N- 二烷基， 例如 C1、 C2、 C3 或 C4N- 二烷 基； -NO2、 -CF3、 -OCF3 和 C1-C4 羟基烷基例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基 9 10 丁基或 2- 羟基丁基 ； 或者 R 与 R 一起形成亚甲二氧基桥 (-O-CH2-O-) ； 11 12
R 与 R 各自独立选自 H、 C1-C4 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁 基； C1-C4 链烯基例如乙烯基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯 基、 异丁烯基或仲丁烯基 ； C1-C4 链炔基例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁 炔基或 3- 丁炔基 ； -CN、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH、 C1-C4 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基或叔丁氧基 ； -SH、 C1-C4S- 烷基， 例如 C1、 C2、 C3 或 C4S- 烷 基； -CF3、 -OCF3、 -NH2、 -N(CH3)2 和 C1-C4 羟基烷基例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基 ；
条件是 R9 与 R12 不可同时为甲氧基 ；
R20 具有上述指定的含义例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基 ； 并且 * 4
表示 R 与依据任一式 (I) 至 (III) 化合物之间的键。
在其中 R4 具有式 (IV) 结构的优选实施方案中， 尤其优选的是 (a)R9 为 CN， R10、 R11 和 R12 为 H ； (b)R10 为 CN 和 R9、 R11 与 R12 为 H ； (c)R9、 R10 和 R11 为 H 并且 R12 为 CN ； (d)R9 为乙 炔基， R10、 R11 和 R12 为 H ； (e)R10 为乙炔基， R9、 R11 和 R12 为 H ； (f)R9、 R10 和 R11 为 H 并且 R12 为 乙炔基 ； (g)R9 为 CN 并且 R10、 R11 和 R12 中的一个为 OH 或 C1-C4 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 10 9 11 12 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基或叔丁氧基 ； (h)R 为 CN 并且 R 、 R 和 R 中的一个优 9 选地是 R 为卤素， 尤其是 F、 OH 或 C1-C4 烷氧基例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧 9 10 11 基、 异丁氧基或叔丁氧基， 或者 (i)R 、 R 和 R 中的一个为 OH 或 C1-C4 烷氧基例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基、 异丙氧基、 丁氧基、 异丁氧基或叔丁氧基并且 R12 为 CN ； 优选地 R10 为 CN 和 R9 为 OH 或 C1-C4 烷氧基， 优选地为甲氧基。
进一步优选的是其中 R11 与 R12 为 H 的本发明化合物。
在本发明化合物的另一个优选实施方案中， R3 为甲基 ； R2 为 H、 甲基或乙基， 优选地 5 6 为H； 并且 R 和 R 为 H。
在本发明化合物的优选实施方案中， R4 具有以下式 V 的结构 ：
其中 ： A、 B、 D 和 E 各自独立选自氮原子、 CR13 和 N-O ； G 选自氧原子、 硫原子和 NR14 ； R13 选自 H、 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧基 ； -OH、 -SH、 S- 烷基， 例如 C1、 C2 或 C3S- 烷基 ； -CF3、 -OCF3、 卤 15 16 素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -NR R ， 优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基， 即 -NH-CH3、 -NH- 乙 基、 -NH-C3 烷基或 -NH-C4 烷基并且最优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或者 N(CH3)2、 -NO2、 -CN、 -C(O) 20 R 、 乙炔、 丙炔腈、 C1-C4 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基 4 或 2- 羟基丁基以及连接 R 与依据任一式 (I) 至 (III) 化合物的 σ(sigma) 键 ； 和 14
R 选自 H、 C1-C4 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基并且更 4 优选地为甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； 以及连接 R 与依据任一式 (I) 至 (III) 化合物的 σ(sigma) 键 ； 和 15
R 与 R16 各自独立为 H 或 C1-C4 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁 基；
R20 具有上述指定的含义， 例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基 ； 和 * 4
表示 R 与依据任一式 (I) 至 (III) 化合物之间的键。
在本发明化合物的另一个优选实施方案中， R4 具有依据式 VI 的结构 ：
其中 ：
L 与 T 各自独立为 CH 基团或氮原子或 N-O ；
M、 N 和 Q 各自独立选自氮原子、 CR17 基团和 N-O ；
R17 选自 H、 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 例如甲氧 基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧基 ； -CF3、 -OCF3、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH、 -NO2、 -SH、 15 16 C1-C3S- 烷 基，例 如 C1、 C2 或 C3S- 烷 基 ； -NR R ，优 选 地 为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷 基， 即 -NH-CH3、 -NH- 乙 基、 -NH-C3 烷 基 或 -NH-C4 烷 基 并 且 最 优 选 地 为 -NH2、 NH(CH3) 或 者 N(CH3)2 ； C1-C4 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟 20 基丁基 ； -C(O)R ， 优选地为乙酰基、 丙酰基、 异丙酰基、 丁酰基或异丁酰基 ； 乙炔、 丙炔腈 和 -CN ；
R15 与 R16 各自独立为 H 或 C1-C4 烷基 ； R20 具有上述指定的含义例如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基或异丁基 ； 和 * 4 表示 R 与依据任一式 (I) 至 (III) 化合物之间的键。 还优选其中 R4 选自以下基团的本发明化合物 ：
其中 R18 和 R19 各自独立选自 H、 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧基 ； -CF3、 -OCF3、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 15 16 I； -OH、 -NO2、 -SH、 C1-C3S- 烷基， 例如 C1、 C2 或 C3S- 烷基 ； -NR R ， 优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基， 即 -NH-CH3、 -NH- 乙基、 -NH-C3 烷基或 -NH-C4 烷基并且最优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或 N(CH3)2 ； C1-C4 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基 丁基 ； 链烯基， 尤其是包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙 烯基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯 基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基或辛烯基 ； 链炔基， 优选地为 包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙 炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 6 戊炔基或辛炔基 ； -C(O)R ， 优选地为乙酰基、 丙酰基、 异丙酰基、 丁酰基或异丁酰基 ； 丙炔腈 和 -CN ；
并且 R15 和 R16 具有上述指定的含义和优选的含义。
在优选的实施方案中， R18 为 H 并且在以上所给出的结构中 R19 选自 C1-C3 烷基，
尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧 基； -CF3、 -OCF3、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH、 -NO2、 -SH、 C1-C3S- 烷基， 例如 C1、 C2 或 15 16 C3S- 烷基 ； -NR R ， 优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基， 即 -NH-CH3、 -NH- 乙基、 -NH-C3- 烷基 或 -NH-C4- 烷基并且最优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或者 N(CH3)2 ； C1-C4 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基 ； 链烯基， 尤其是包含 2-8 个碳原 子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙烯基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯 基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基或辛烯基 ； 链炔基， 优选地为包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔 6 基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊炔基或辛炔基 ； -C(O)R ， 优选地 19 为乙酰基、 丙酰基、 异丙酰基、 丁酰基或异丁酰基 ； 丙炔腈和 -CN。 在该情况下 R 的最优选含 义为 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 尤其是甲氧基、 乙氧基、 丙 氧基或异丙氧基 ； -CF3、 -OCF3、 -CN、 -NO2 或卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I， 而甲基、 甲氧基、 CF3 或 -CN 为最优选的含义。
在另一个优选的实施方案中， R19 为 H 并且在以上所给出的结构中 R18 选自 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙 氧基 ； -CF3、 -OCF3、 卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH、 -NO2、 -SH、 C1-C3S- 烷基， 例如 C1、 C2 或 15 16 C3 S- 烷基 ； -NR R ， 优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基， 即 -NH-CH3、 -NH- 乙基、 -NH-C3- 烷基 或 -NH-C4- 烷基并且最优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或者 N(CH3)2 ； C1-C4- 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基 ； 链烯基， 尤其是包含 2-8 个碳原 子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙烯基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯 基、 1- 丁烯基、 2- 丁烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基或辛烯基 ； 链炔基， 优选地为包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔 6 基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊炔基或辛炔基 ； -C(O)R ， 优选地 18 为乙酰基、 丙酰基、 异丙酰基、 丁酰基或异丁酰基 ； 丙炔腈和 -CN。 在该情况下 R 的最优选含 义为 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 尤其是甲氧基、 乙氧基、 丙 氧基或异丙氧基 ； -CF3、 -OCF3、 -CN、 -NO2 或卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I， 而甲基、 甲氧基、 CF3 或 -CN 为最优选的含义。
在另一个优选的实施方案中， R18 和 R19 各自独立选自 C1-C3 烷基， 尤其是甲基、 乙 基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 例如甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙氧基 ； -CF3、 -OCF3、 卤 15 16 素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I ； -OH、 -NO2、 -SH、 C1-C3 S- 烷基， 例如 C1、 C2 或 C3S- 烷基 ； -NR R ， 优选地为 -NH2 或 -NH-C1-C4 烷基， 即 -NH-CH3、 -NH- 乙基、 -NH-C3- 烷基或 -NH-C4- 烷基并且 最优选地为 -NH2、 NH(CH3) 或者 N(CH3)2 ； C1-C4- 羟基烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基或羟 基异丙基、 1- 羟基丁基或 2- 羟基丁基 ； 链烯基， 尤其是包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链烯基链， 例如乙烯基、 1- 丙烯基、 2- 丙烯基、 异丙烯基、 1- 丁烯基、 2- 丁 烯基、 3- 丁烯基、 异丁烯基、 仲丁烯基、 1- 戊烯基、 2- 戊烯基、 3- 戊烯基、 4- 戊烯基、 己烯基、 庚烯基或辛烯基 ； 链炔基， 优选地为包含 2-8 个碳原子， 即 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 个碳原子的链 炔基， 例如乙炔基、 1- 丙炔基、 2- 丙炔基、 1- 丁炔基、 2- 丁炔基、 3- 丁炔基、 1- 戊炔基、 2- 戊炔基、 3- 戊炔基、 4- 戊炔基、 己炔基、 戊炔基或辛炔基 ； -C(O)R6， 优选地为乙酰基、 丙酰基、 异 18 19 丙酰基、 丁酰基或异丁酰基 ； 丙炔腈和 -CN。在该情况下 R 和 R 的最优选含义为 C1-C3 烷 基， 尤其是甲基、 乙基、 丙基或异丙基 ； C1-C3 烷氧基， 尤其是甲氧基、 乙氧基、 丙氧基或异丙 氧基 ； -CF3、 -OCF3、 -CN、 NO2 或卤素， 尤其是 F、 Cl、 Br 或 I， 而甲基、 甲氧基、 CF3 或 -CN 为最 优选的含义。
在本发明化合物的另一个优选实施方案中， R2 为 H 并且 R4 选自 ：
其中 * 表示 R4 与依据任一式 (I) 至 (III) 化合物之间的键。 在本发明化合物的另一个优选实施方案中， R2 和 / 或 R6 为 H。 以下表 1 列出了本发明化合物具体取代基的其它优选组合 ： 表1
在本发明化合物的特别优选的实施方案中， 化合物选自在表 2A 或表 7 中列出的化合物。 在又一方面， 本发明提供用于预防或治疗疾病或紊乱的依据本发明的化合物或其 药学上可接受的盐。
如在以下实施例中显示的那样， 本发明化合物的有利性质包括其有效抑制细胞增 殖的能力及其作为 HIF 抑制剂的活性。例如， 本发明化合物显示在低氧条件下抑制 HIF 介 导的转录的激活。因此， 本发明化合物可用于制备用于治疗其特征在于病理生理学 HIF 信 号转导的紊乱的药物。如果紊乱特征在于不合需要的 HIF 信号转导， 医学、 生物和 / 或药理 学领域的技术人员可确定常规方法学。受到这样疾病影响的组织将过量表达通过激活 HIF 反应元件 (HRE) 诱导的基因。HIF-1 通过在通常包含序列 NCGTG 的启动子中结合于 HIF- 反 应元件 (HREs) 起作用。受到由所述启动子调节的 HIF 活性影响的基因是本领域熟知的并 且也在多篇综述中有描述 ( 参见例如 Gregg L.Semenza， Nature Reviews， 2003 年 10 月第
3 卷的图 3)。
在动物研究中， HIF-1 过量表达与肿瘤生长增加、 血管形成增加、 转移和纤维化例 如肾脏纤维化有关 ( 参见 ： Semenza， G， Drug Discovery Today， 第 12 卷， 第 19/20 期， 2007 年 10 月 ； Kimura， Kuniko 等， American Journal of Physiology(2008)， 295(4， Pt.2)， F1023-F1029 和对于综述参见 N.J.Mabjeesh 等， Histol.Histopathol(2007)22 ： 559-572)。 纤维化是过量的纤维性结缔组织在器官或组织中形成或生长。最近， 已经清楚， 抑制 HIF-1 活性也通过其对巨噬细胞和嗜中性白细胞的激活和浸润进入受累组织的重要作用而起预 防炎症的作用 ( 参见例如 Giaccia 等， Drug Discovery， 第 2 卷， 2003 年 10 月 )。
药用组合物
由于以上提及的原因， 本发明化合物可用于治疗炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊 乱、 与缺氧相关的病变和特征在于病理生理学过度血管形成的疾病。因此， 作为另一个方 面， 本发明提供其中本发明化合物与至少一种另外的用于治疗以上所提及疾病或紊乱之一 的药用活性化合物组合的治疗组合物。这样的治疗组合物是有用的， 因为本发明化合物的 疗效可因存在所述至少一种另外的药用活性化合物而得到增强， 并且反之亦然。 例如， 显示 经反义基因疗法抑制 HIF1α 活性增强多柔比星对抗肝细胞癌的疗效 ( 参见 Liu， Fengjun 等， Cancer Science(2008)， 99(10)， 2055-2061)。 因此， 在另一个方面， 本发明涉及包含依据本发明的化合物或其药学上可接受的 盐及用于治疗或预防选自炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变和特征在 于病理生理学过度血管形成的疾病的疾病或紊乱的第二种治疗药物， 以及任选地包含药学 上可接受的载体或赋形剂的药用组合物。 这样的组合物也用于例如获得协同疗效以及预防
肿瘤细胞的抗药性。也是由于这些原因， 目前的化学疗法通常包括给予不同细胞毒和 / 或 抑制细胞生长的化合物的合剂， 以改善治疗有效性并减少肿瘤细胞适应的可能性。
在另一个方面， 本发明涉及与放射疗法联合的包含依据本发明的化合物或其药学 上可接受的盐的药用组合物。
本发明的任何组合物可与药学上可接受的稀释剂、 赋形剂或载体或其混合物混 合。
虽然可单独给予本发明化合物 ( 包括其药学上可接受的盐、 酯和药学上可接受 的溶剂合物 )， 但是通常将它们以与尤其是用于类人疗法的药用载体、 赋形剂或稀释剂 一起的混合物给予。在人和兽的药品方面， 药物组合物可用于人或动物。描述于本文的 不同形式的药物组合物的这类适用赋形剂的实例可见 “药用赋形剂手册 (Handbook of Pharmaceutical Excipients)” ， 第 2 版， (1994)， A Wade 和 PJ Weller 编辑。用于治疗用 途的可接受的载体或赋形剂为制药领域熟知的并且例如在雷明顿氏药剂学 (Remington′ s Pharmaceutical Sciences)， Mack Publishing Co.(A.R Gennaro 编辑 .1985) 中有描述。
为了自本发明化合物制备药用组合物， 药学上可接受的载体可为固体或液体。固 体形式的制剂包括散剂、 片剂、 丸剂、 胶囊剂、 扁囊剂、 栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可为 一种或多种物质， 后者也可起稀释剂、 矫味剂、 粘合剂、 防腐剂、 片剂崩解剂或封装材料的作 用。
在散剂中， 载体可为细分散的固体， 后者以与细分散的活性组分的混合物形式存 在。在片剂中， 活性组分与具有必需的粘合性质的载体按适当比例混合并压制成想要的形 状和大小。
散剂和片剂优选地包含 5％ -80％， 更优选地包含 20％ -70％的一种或多种活性化 合物。 合适的载体为碳酸镁、 硬脂酸镁、 滑石、 糖类、 乳糖、 果胶、 糊精、 淀粉、 凝胶、 黄蓍胶、 甲 基纤维素、 羧甲基纤维素钠、 低熔点蜡、 可可脂等。术语 “制剂” 打算包括活性化合物与作为 载体的包囊化材料的制剂， 以提供其中含或不含其它载体的活性组分被与其缔合的载体围 绕的胶囊。类似地， 包括扁囊剂和锭剂。片剂、 散剂、 胶囊剂、 丸剂、 扁囊剂和锭剂可用作适 合于口服给药的固体剂型。
为了制备栓剂， 首先融化低熔点蜡例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物， 并将活 性组分通过搅拌均匀溶解于其中。然后将所熔化的均匀混合物倾入到合适大小的模具中， 使之冷却并从而固化。
液体形式制剂包括溶液剂、 混悬剂和乳剂， 例如水或水 / 丙二醇溶液剂。液体形式 对于局部用于眼是尤其优选的。为了非肠道注射， 液体制剂可以在含水聚乙二醇溶液中配 制为溶液剂。
适合于口服使用的水溶液剂可通过将活性组分溶解于水中并在需要时加入合适 的着色剂、 矫味剂、 稳定剂以及增稠剂来制备。 适合于口服使用的水混悬剂可通过将细分散 的活性组分分散于含有粘性材料例如天然或合成树胶、 树脂、 甲基纤维素、 羧甲基纤维素钠 及其它熟知的助悬剂的水中来制备。
也包括在内的是固体形式制剂， 其打算在使用前不久被转化为用于口服给药的液 体形式制剂。这样的液体形式包括溶液剂、 混悬剂和乳剂。这些制剂除了活性组分以外， 还 可包含着色剂、 矫味剂、 稳定剂、 缓冲剂、 人造和天然甜味剂、 分散剂、 增稠剂、 增溶剂等。药物制剂优选呈单位剂型。在这样的形式中， 制剂被细分为含有适当量的活性组 分的单位剂量。单位剂型可为包装的制剂， 所述包装含有离散量的制剂， 例如包装的片剂、 胶囊剂及在小瓶或安瓿中的粉剂。 而且， 单位剂型本身可为胶囊剂、 片剂、 扁囊剂或锭剂， 或 者其可为以包装形式存在的合适数目的任何这些剂型。
有趣地， HIF 抑制剂， 例如本发明化合物可防止肿瘤对化疗药物抗药性的发展并可 使得癌细胞对放射疗法更加敏感 ( 参见例如 Palayoor ST 等， Int J Cancer.2008 年 11 月 15 日 ； 123(10) ： 2430-7 和 Gregg L.Semenza， Nature Reviews， 2003 年 10 月， 第 3 卷 )。因 此， 可与本发明化合物组合产生本发明药用组合物的有用的第二种治疗药物包括 ( 但不限 于 )( 另外的 )HIF-1 抑制剂、 细胞毒性化合物和抑制细胞生长化合物。
HIF-1 抑制剂例如可选自 PX-478(S-2- 氨基 -3-[4’ -N N， - 双 (2- 氯乙基 ) 氨基 ] 苯基丙酸 N- 氧化物二盐酸盐 )、 拓扑异构酶 -1 抑制剂例如 8， 9- 二甲氧基 -5-(2-N， N- 二 甲基氨基乙基 )-2， 3- 亚甲二氧基 -5H- 二苯并 [c， h][1， 6] 萘啶 -6- 酮 ( 也称为 ARC-111 或 topovale) 或 (S)-10-[( 二甲基氨基 ) 甲基 ]-4- 乙基 -4， 9- 二羟基 -1H- 吡喃并 [3’ ， 4’ :6， 7] 吲嗪并 (indolizino)[1， 2-b] 喹啉 -3， 14-(4H， 12H)- 二酮单盐酸盐 ( 也称为托泊 替康 )、 棘霉素、 黑毛霉素 (chetomin)(NSC289491)、 环胞菌素 A、 3-[2-[4-[ 双 (4- 氟苯基 ) 亚甲基 ]-1- 哌啶基 ]-2， 3- 二氢 -2- 硫代 -4(1H)- 喹唑啉酮 (R59949) ； PIK3K/Akt/mTor 信 号转导级联的抑制剂例如 LY294002、 渥曼青霉素或雷帕霉素 ； MAPK 信号转导级联的抑制剂 例如 MEK1 抑制剂 PD98059、 可溶性鸟苷酸环化酶 (guanylcyclase) 刺激剂例如 3-(5’ - 羟甲 基 -2’ - 呋喃基 )-1- 苄基吲唑 (YC-1)、 热休克蛋白 90 抑制剂， 尤其是根赤壳菌素、 根赤壳 菌素类似物 KF58333 或格尔德霉素 ； 微管破裂剂， 尤其是例如紫杉醇、 长春新碱或 2- 甲氧基 雌二醇 ； 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂例如 FK228 ； 硫氧还蛋白抑制剂尤其是 PX-12 或灰侧耳菌 素； UCNO-1、 二亚苯基碘 (diphenylene iodonium)、 吉尼斯旦 (genestein) 和羧胺三唑。
许多细胞毒性或抑制细胞生长的化合物是过度增殖性疾病或紊乱例如肿瘤或癌 症疾病疗法中专业人士已知的。例如， 细胞毒性或抑制细胞生长的化合物包括 ( 但不限 于 ) 纯的或混合抗雌激素， 例如氟维司群、 他莫昔芬或雷洛昔芬 ； 拓扑异构酶 I 或 II 的任 何抑制剂， 例如喜树碱 (topo I) 或依托泊苷 (topo II) ； 通过抑制芳香酶活性起作用的 任何化合物， 例如阿那曲唑或来曲唑 ； 干扰 HER2 信号转导的任何制剂例如赫赛汀 ； 螯合 (interchelates)DNA 的任何化合物例如多柔比星。 尤其优选的可与本发明化合物联合的抑 制细胞生长或细胞毒药物为烷基化物质、 抗代谢物、 抗生素、 埃博霉素、 核受体激动剂和拮 抗剂、 抗雄激素剂、 抗雌激素剂、 铂化合物、 激素和抗激素、 干扰素和细胞周期依赖型蛋白激 酶 (CDKs) 的抑制剂、 环氧合酶和 / 或脂氧合酶的抑制剂、 生物脂肪酸和脂肪酸衍生物包括 前列腺素类和白三烯、 蛋白激酶抑制剂、 蛋白磷酸酶的抑制剂、 脂质激酶的抑制剂、 铂配位 化合物、 乙撑亚胺类、 甲基三聚氰胺类、 三嗪类、 长春花生物碱、 嘧啶类似物、 嘌呤类似物、 烷 基磺酸酯类、 叶酸类似物、 蒽二酮类、 取代脲类、 甲基苄肼衍生物尤其是醋地砜、 阿柔比星、 安巴腙、 氨鲁米特、 L- 天门冬酰胺酶、 硫唑嘌呤、 博来霉素、 白消安、 亚叶酸钙、 卡铂、 卡培他 滨 (carpecitabine)、 卡莫司汀、 塞来考昔、 苯丁酸氮芥、 顺铂、 克拉屈滨、 环磷酰胺、 阿糖胞 苷、 达卡巴嗪、 放线菌素氨苯砜、 柔红霉素、 双溴丙脒、 己烯雌酚、 多西他赛、 多柔比星、 烯二 炔类 (enediynes)、 表柔比星、 埃坡霉素 B、 埃坡霉素 D、 雌莫司汀 (estramucin) 磷酸盐、 雌激 素、 炔雌醇、 依托泊苷、 黄酮类抗肿瘤药、 氟尿苷、 氟达拉滨、 氟尿嘧啶、 氟甲睾酮、 氟他胺、 磷雌酚、 呋喃唑酮、 吉西他滨、 促性腺激素释放激素类似物、 六甲蜜胺、 羟基脲、 羟甲基呋喃妥 因、 己酸羟孕酮、 羟基脲、 伊达比星、 碘苷、 异环磷酰胺、 干扰素 γ、 伊立替康、 亮丙立德、 洛莫 司汀、 勒托替康、 磺胺米隆硫酸酯醇酰胺 (mafenide sulfate olamide)、 氮芥、 醋酸甲羟孕 酮、 醋酸甲地孕酮、 美法仑、 米帕林、 巯嘌呤、 甲氨蝶呤、 甲硝唑、 丝裂霉素 C、 米托肼、 米托坦、 米托蒽醌、 光辉霉素、 萘啶酸、 硝呋太尔、 硝呋齐特、 呋喃拉嗪、 硝呋莫司、 尼莫司汀、 尼莫拉 唑 (ninorazole)、 呋喃妥因、 氮芥、 卵粘蛋白 (oleomucin)、 奥索利酸、 喷他脒、 喷司他丁、 非 那吡啶、 酞磺胺噻唑、 哌泊溴烷、 泼尼莫司汀、 泼尼松、 preussin、 丙卡巴肼、 乙胺嘧啶、 雷替 曲塞、 雷帕霉素、 罗非考昔、 罗格列酮、 柳氮磺吡啶、 scriflavinium chloride、 司莫司汀、 链 佐星、 磺胺脲、 磺胺醋酰、 磺胺氯达嗪、 磺胺嘧啶、 磺胺戊烯、 磺胺地托辛、 磺胺乙二唑、 磺胺 异 唑、 磺胺脒、 磺胺胍诺、 磺胺甲二唑、 磺胺甲 唑、 复方新诺明、 磺胺甲氧二嗪、 磺胺甲氧 嗪、 磺胺 唑、 磺胺、 磺胺培林、 磺胺苯吡唑、 磺胺噻唑、 磺胺索嘧啶、 星形孢菌素、 他莫昔芬、 紫杉醇、 替尼泊苷、 tertiposide、 睾内酯、 丙酸睾酮、 硫鸟嘌呤、 塞替派、 替硝唑、 托泊替康、 三亚胺醌、 曲奥舒凡、 甲氧苄氨嘧啶、 曲磷胺、 UCN-01、 长春碱、 长春新碱、 长春地辛、 长春碱、 长春瑞滨和佐柔比星或其相应的衍生物或其类似物。 针对癌症治疗目前同时给予几种上述 药物， 因此， 也设想可将不止一种抑制细胞生长的和 / 或细胞毒药物包含在本发明组合物 中。
如以上所提及的那样， HIF 抑制剂使得癌细胞能够更易于受到化学疗法和放射疗 法的伤害。 因此， 为了有效地治疗增殖性疾病或紊乱， 本发明化合物可与其它活性药物共同 给予和 / 或与其它抗癌、 抗肿瘤或抗增殖性疾病疗法联合给予。在一个方面， 本发明提供用 于治疗过度增殖性疾病或紊乱的方法， 该方法包括在所述患者接受放射疗法、 化学疗法、 免 疫疗法、 激光 / 微波温热疗法或者采用反义 DNA 和 RNA 的基因疗法之前、 期间和 / 或之后给 予依据本发明的化合物 ( 例如参见 Moeller 等， Cancer Cell 2004 5429-441)。
在又一方面， 本发明提供如以上已经概述的依据本发明的化合物或依据本发明的 组合物在制备治疗或预防选自炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊乱、 与缺氧相关的病变例如 糖尿病性视网膜病变、 缺血性再灌注损伤、 缺血性心肌和肢体疾病、 缺血性中风、 败血病和 败血病性休克 ( 参见例如 Liu FQ 等， Exp Cell Res.2008 年 4 月 1 日 ； 314(6) ： 1327-36) 及 其特征在于病理生理学过度血管形成， 例如骨肉瘤血管生成 ( 参见例如 ： Yang， Qing-cheng 等， Dier Junyi Daxue Xuebao(2008)， 29(5)， 504-508)、 黄斑变性， 尤其是与年龄相关的黄 斑变性和血管增殖性视网膜病变 ( 参见例如 Kim JH 等， J Cell Mol Med.2008 年 1 月 19 日 ) 的疾病的疾病或紊乱的药物中的用途。
如同以上已经提及的那样， HIF 抑制剂， 例如本发明化合物用于治疗炎性疾病 或紊乱。例如， 显示氧依赖型 HIF 同工型在银屑病患者皮肤中被强烈上调 ( 参见例如 Rosenberger C 等， J Invest Dermatol.2007 年 10 月 ； 127(10) ： 2445-52)。此外， 显示 HIF 抑制剂新伐司他抑制哮喘患者的气道炎症 ( 参见例如 Lee SY 等， Vascul Pharmacol.2007 年 11-12 月 ； 47(5-6) ： 313-8)。另外， 最新证据也显示 HIF 参与低氧条件下的关节炎和类 风湿性关节炎的破坏 ( 参见例如 Ahn， J.K. 等， Rheumatology( 牛津， 英国 )(2008)， 47(6)， 834-839)。因此， 在本发明用途的优选实施方案中， 炎性疾病选自动脉粥样硬化、 类风湿 性关节炎、 哮喘、 炎性肠疾病、 银屑病尤其是寻常性银屑病、 头部银屑病、 滴状银屑病、 反常 性银屑病 (psoriasis inversa)、 神经性皮炎、 鱼鳞病、 斑秃、 全秃、 不完全脱发 (alopeciasubtotalis)、 普秃、 扩散性脱发 (alopecia diffusa)、 异位性皮炎、 皮肤红斑狼疮、 皮肤皮 肌炎、 播散性神经性皮炎、 硬斑病、 硬皮病、 匐行性脱发型斑秃 (alopecia areata Ophiasis type)、 雄激素性脱发 (anrogenic alopecia)、 变应性皮炎、 刺激性接触性皮炎、 接触性皮 炎、 寻常性天疱疮、 落叶性天疱疮、 增殖性天疱疮、 瘢痕形成性粘膜类天疱疮 (scarring mucous membrane pemphigoid)、 大疱性类天疱疮、 粘膜类天疱疮、 皮炎、 杜林疱疹样皮炎、 荨麻疹、 脂质渐进性坏死、 结节性红斑、 单纯痒疹、 结节性痒疹、 急性痒疹 (prurigo acuta)、 线状 IgA 皮肤病、 多形性日光疹、 日光性红斑 (erythema solaris)、 皮疹、 药疹、 慢性进行性 紫癜、 出汗不良性湿疹 (dihydrotic eczema)、 湿疹、 固定性药疹、 光变应性皮肤反应和口周 皮炎。因此， 本发明另一个优选实施方案涵盖一种或多种本发明化合物和目前用于治疗这 类炎性疾病或病症的药物的组合物， 它可由药理学领域的技术人员确定。用于组合的这类 治疗剂可选自， 例如抗炎甾族化合物、 抗氧化剂、 隔绝或结合于某些与炎症过程相关的细胞 因子或细胞表位的治疗抗体或融合蛋白或二氢叶酸还原酶抑制剂象甲氨蝶呤。
本发明化合物显示抗增殖作用。另外， HIF 抑制剂， 例如本发明化合物为用于治疗 各种癌症疾病的有效药物 ( 参见例如 Gregg L.Semenza， Nature Reviews， 2003 年 10 月， 第 3 卷的综述文章以及 N.J.Mabjeesh 等， Histol.Histopathol(2007)， 22 ： 559-572 的综述 文章 )。因此， 也优选的是其中过度增殖性疾病选自肿瘤或癌症疾病、 初癌状态、 发育不良、 组织细胞增多症、 血管增殖性疾病和病毒诱导的增殖性疾病的本发明用途。 因此， 在本发明 用途的一个优选实施方案中， 过度增殖性疾病为选自以下的肿瘤或癌症疾病 ： 弥漫性大 B 细胞淋巴瘤 (DLBCL)、 T 细胞淋巴瘤或白血病例如皮肤 T 细胞淋巴瘤 (CTCL)、 非皮肤外周 T 细胞淋巴瘤、 与人 T 细胞淋巴营养病毒 (HTLV) 相关的淋巴瘤、 成人 T 细胞白血病 / 淋巴瘤 (ATLL) 以及急性淋巴细胞白血病、 急性非淋巴细胞白血病、 急性骨髓性白血病、 慢性淋巴细 胞白血病、 慢性骨髓性白血病、 何杰金氏病、 非何杰金氏淋巴瘤、 骨髓癌、 多发性骨髓瘤、 间 皮瘤、 儿童实体瘤、 神经胶质瘤、 骨癌和软组织肉瘤、 成人常见实体瘤例如头与颈癌 ( 如口、 喉和食管 )、 泌尿生殖系统癌 ( 例如前列腺、 膀胱、 肾 ( 尤其是恶性肾细胞癌 (RCC))、 子宫、 卵巢、 睾丸、 直肠和结肠 )、 肺癌 ( 例如小细胞癌和非小细胞肺癌， 包括鳞状细胞癌和腺癌 )、 乳腺癌、 胰腺癌、 黑素瘤和其它皮肤癌、 基底细胞癌、 转移性皮肤癌、 溃疡和乳头状二者的鳞 状细胞癌、 胃癌、 脑癌、 肝癌、 肾上腺癌、 肾癌、 甲状腺癌、 髓样癌、 骨肉瘤、 软组织肉瘤、 尤因 肉瘤、 网状细胞肉瘤和卡波济氏肉瘤、 纤维肉瘤、 粘液肉瘤、 脂肪肉瘤、 软骨肉瘤、 骨原性肉 瘤、 脊索瘤、 血管肉瘤、 内皮肉瘤、 淋巴管肉瘤、 淋巴管内皮肉瘤、 滑膜瘤、 间皮瘤、 平滑肌肉 瘤、 横纹肌肉瘤、 鳞状细胞癌、 基底细胞癌、 腺癌、 汗腺癌、 皮脂腺癌、 乳头状癌、 乳头状腺癌、 囊腺癌、 髓样癌、 支气管肺癌、 精原细胞癌、 胚胎性癌、 维尔姆斯瘤 (Wilms’ tumor)、 小细胞肺 癌、 上皮癌、 星形胶质细胞瘤、 髓母细胞瘤、 颅咽管瘤、 室管膜瘤、 松果体瘤、 成血管细胞瘤、 听神经瘤、 少突神经胶质瘤、 脑膜瘤、 神经母细胞瘤、 视网膜母细胞瘤、 青光眼、 血管瘤、 重链 病和转移的癌症。
可用本发明化合物治疗的初癌状态优选地选自初癌状态， 尤其是光化性角化病、 皮角、 光化性唇炎、 焦油角化病、 砷角化病、 x- 射线角化病、 鲍恩病 (Bowen’ s disease)、 鲍恩样丘疹病、 恶性小痣、 硬化性苔癣和粘膜红苔癣 (lichen rubber mucosae) ； 消化道 初癌状态， 尤其是粘膜红斑病、 粘膜白斑病、 巴雷特氏食管 (Barrett’ s esophagus)、 普卢 默 - 文森综合征 (Plummer-Vinson syndrome)、 小腿溃疡 (crural ulcer)、 胃粘膜巨肥厚症 (gastropathia hypertrophica gigantea)、 交界癌 (borderline carcinoma)、 瘤性肠 息肉、 直肠息肉、 陶瓷样胆囊 ； 妇科初癌状态， 尤其是原位导管癌 (CDIS)、 宫颈上皮内瘤变 (CIN)、 粘膜白斑病、 子宫内膜增生 (III 级 )、 外阴营养不良、 外阴上皮内瘤样病变 (VIN)、 葡萄胎 ； 泌尿道初癌状态， 尤其是膀胱乳头状瘤病、 Queyrat’ s 增殖性红斑 (Queyrat’ s erythroplasia)、 睾丸上皮内瘤变 (TIN)、 粘膜白斑病 ； 原位癌 (CIS) ； 由慢性炎症引起的初 癌状态， 尤其是脓皮症、 骨髓炎、 聚合性痤疮、 寻常狼疮和瘘管。
发育不良通常为癌症预兆并可发现于例如上皮细胞 ； 其为非肿瘤细胞生长的最无 序形式， 涉及各细胞一致性和细胞构造取向的丧失。发育不良细胞通常具有异常大的深染 色的核并且呈现多形性。发育不良典型地出现于存在慢性刺激或炎症的地方。可用本发明 化合物治疗的发育不良障碍包括 ( 但不限于 ) ： 无汗性外胚层性发育异常、 anterofacial 发育异常、 窒息性胸廓发育不良、 心房 - 手指发育不良、 支气管肺发育不良、 脑发育不良、 宫 颈再生不良、 软骨外胚层发育不良、 颅骨锁骨发育不良、 先天性外胚叶发育不良、 颅骨骨干 发育异常、 颅腕跖骨发育不全、 颅骨干骺端发育异常、 牙本质发育异常、 骨干结构不良、 外胚 层发育不良、 釉质发育异常、 脑性眼球发育不全、 半肢畸形骨骺发育异常、 多发性骨骺发育 不良、 点状骨骺发育异常、 上皮发育异常、 面 - 指 ( 趾 )- 生殖器发育不良、 家族性颌骨纤维 异常增殖、 家族性白色皱襞性发育不良、 纤维肌性发育异常、 骨纤维异常增殖、 病证充分发 展的发育不良 (florid osseous dysplsia)、 遗传性肾视网膜发育不良、 发汗性外胚层发育 不良、 少汗型外胚层发育不良、 淋巴细胞减少性胸腺发育不全、 乳腺发育不良、 下颌面骨发 育不良、 骨骺端发育不良 (metaphysical dysplasia)、 蒙底尼畸形 (Mondini dysplasia)、 单骨纤维性骨发育不良、 粘液上皮 (mucoepithelial) 发育不良、 多发生骨骺发育不良、 眼 耳脊椎发育不良、 眼齿指发育不良、 眼 - 脊柱发育不全、 牙原性发育不良、 眼下颌支发育不 全、 根尖周牙骨质结构不良、 多骨性纤维性结构不良、 假性软骨发育不全性脊椎骨骺发育不 良、 视网膜发育不全、 中隔 - 眼发育不良、 晚发型脊椎骨骺发育异常 (spondyloepiphysial dysplasia) 和心室桡骨形成异常 (ventriculoradial dysplasia)。
雌 激 素 受 体 指 由 激 素 17β- 雌 二 醇 ( 雌 激 素 ) 激 活 的 一 组 受 体。 存 在 两 种 类型的雌激素受体 ： 为细胞内受体的核激素家族成员的 ER 和雌激素 G 蛋白偶联受体 GPR30(GPER)， 后者为 G 蛋白偶联受体。雌激素和雌激素受体已经涉及乳腺癌、 卵巢癌、 结肠 癌、 前列腺癌和子宫内膜癌及其它疾病。因为本发明化合物能够抑制雌激素受体介导的转 录活性， 它们可用于治疗所述疾病。
因此， 在另一个优选的实施方案中， 可按照本发明治疗的过度增殖性紊乱为得益 于雌激素受体信号转导减少的那些紊乱， 即如果与健康组织相比较， 与增加雌激素受体信 号转导有关的那些紊乱。本发明化合物的具体适应性基于这样的事实， 即本发明化合物潜 在地通过抑制细胞复制但是可能也通过本发明化合物的另外活性发挥抑制雌激素受体信 号转导作用。因此， 可治疗的优选疾病、 病症和 / 或紊乱选自乳腺肿瘤、 子宫内膜肿瘤及子 宫瘤。疾病是否与雌激素受体活性增加有关可通过多种领域已知的方法测定， 方法包括 经例如免疫学方法测定患病组织中的 ER 表达水平， 其方法如在以下实验章节中更详细描 述的那样， 通过测定被转录 ER 编码核酸的方法， 例如 RT-PCR、 RNA 印迹、 核连缀 (nuclear run-ons) 等测量所表达蛋白质的量， 并测量包含促进可检测的报道基因例如 CAT、 萤光素 酶、 GPF 等表达的 ER 受体识别元件的核酸构件的活性。优选地， 得益于雌激素受体信号转导减少的紊乱为与健康组织相比较在患病组织中显示增加雌激素受体信号转导至少 10％， 优选地至少 20％、 30％、 40％、 50％、 60％、 70％的那些紊乱。优选地， 该增加基于包含 ER 受 体识别元件的核酸进行测量， 报道基因的表达的增加受该元件促进。
在作为雌激素受体信号拮抗剂通过抑制细胞复制起作用的治疗用途中， 用于本发 明用途的化合物以初始剂量约每天 0.02mg/kg- 约 20mg/kg 给药。优选每天剂量范围为约 0.05mg/kg- 约 2mg/kg， 最优选每天剂量范围为约 0.05mg/kg- 约 1mg/kg。 然而， 剂量可依患 者的需要、 要治疗的疾病的严重性和所采用的化合物而不同。具体场合的适当剂量的确定 在医生技术范围内。一般说来， 以小于最适宜剂量的化合物的更小剂量开始治疗。此后， 以 小的增幅增加剂量， 直到达到状况下的最佳效果。为了方便， 如果需要， 每天总剂量可被分 割并在当天内分次给予。
盐/酯
依据本发明的可使用的组合物中的化合物或者化合物可作为盐或酯， 尤其是药学 上可接受的盐或酯存在。本发明化合物的药学上可接受的盐包括其合适的酸加成盐或碱 盐。合适的药用盐的综述可在 Berge 等， J Pharm Sci， 66， 1-19(1977) 中发现。例如用强 无机酸如矿物酸例如硫酸、 磷酸或氢卤酸 ； 用强有机羧酸如未取代或取代 ( 例如用卤素 ) 的 1-4 个碳原子的链烷羧酸， 例如乙酸 ； 用饱和或不饱和的二羧酸， 如草酸、 丙二酸、 琥珀酸、 马来酸、 富马酸、 邻苯二甲酸或对苯二甲酸 ； 用羟基羧酸， 如抗坏血酸、 乙醇酸、 乳酸、 苹果 酸、 酒石酸或枸橼酸 ； 用氨基酸， 如天冬氨酸或谷氨酸 ； 用苯甲酸 ； 或用有机磺酸， 如未取代 或取代 ( 例如用卤素 ) 的 (C1-C4)- 烷基 - 或芳基 - 磺酸例如甲磺酸 - 或对 - 甲苯磺酸形 成盐。
根据要酯化的官能团， 用有机酸或醇 / 氢氧化物形成酯。有机酸包括羧酸， 例如未 取代或取代 ( 例如用卤素 ) 的 1-12 个碳原子的链烷羧酸例如乙酸 ； 饱和或不饱和的二羧酸 如草酸、 丙二酸、 琥珀酸、 马来酸、 富马酸、 邻苯二甲酸或对苯二甲酸 ； 羟基羧酸如抗坏血酸、 乙醇酸、 乳酸、 苹果酸、 酒石酸或枸橼酸 ； 氨基酸如天冬氨酸或谷氨酸 ； 苯甲酸 ； 或有机磺酸 如未取代或取代 ( 例如用卤素 ) 的 (C1-C4)- 烷基 - 或芳基 - 磺酸例如甲磺酸 - 或对 - 甲 苯磺酸。 合适的氢氧化物包括无机氢氧化物例如氢氧化钠、 氢氧化钾、 氢氧化钙、 氢氧化铝。 醇包括可为未取代或取代 ( 例如用卤素 ) 的 1-12 个碳原子的链烷醇。
同位素
本发明化合物也可在构成这样化合物的一个或多个原子包含非天然比例的原子 同位素。 本发明试剂或其药学上可接受盐的同位素变体被定义为其中至少一个原子由具有 相同原子数但是原子质量不同于通常在自然界发现的原子量的原子替代的同位素。 可被加 入到试剂和其药学上可接受盐的同位素实例包括氢、 碳、 氮、 氧、 磷、 硫、 氟和氯的同位素， 例 2 3 13 14 15 17 18 31 32 35 18 36 如分别为 H、 H、 C、 C、 N、 O、 O、 P、 P、 S、 F 和 Cl。试剂及其药学上可接受盐的某些 同位素变体， 例如其中结合有放射性同位素如 3H 或 14C 的那些同位素变体在药物和 / 或底 物组织分布研究中是有用的。 为制备和检测它们的便利， 特别优选氚化的， 即 3H 和碳 -14 即 14 C 同位素。另外， 用同位素例如氘即 3H 取代可得到由更大代谢稳定性带来的某些治疗优 点， 例如增加体内半衰期或减少剂量需求， 因此在某些情况下可为优选的。 本发明试剂及其 本发明药学上可接受盐的同位素变体通常可通过常规方法， 采用合适试剂的合适同位素变 体来制备。本发明的化合物和组合物的所有同位素变体， 无论有无放射性， 均打算包括在本 发明的范围内。
溶剂合物
本发明还包括可按照本发明使用的组合物中的化合物或依据任一通式 (I) 至 (III) 的化合物的溶剂合物形式。用于权利要求的术语包括这些形式。
多晶型物
本发明还涉及以各种晶型、 多晶型形式和 ( 不 ) 含水形式存在的本发明组合物中 的化合物或可按照本发明使用的式 (I) 化合物。在医药工业已经确立， 可通过稍微改变纯 化方法， 通过略微改变纯化方法和 / 或分离形式、 用于合成制备这类化合物的溶剂， 可将化 合物分离为任何这类形式。
给药
可通过各种熟知的途径包括口服、 直肠、 胃内、 颅内和非肠道给药， 例如静脉内、 肌 内、 鼻内、 皮肤内、 皮下及类似的给药途径给予根据本发明的化合物。优选非肠道给药并且 尤其是静脉内给药， 优选通过贮库型注射剂。 依给药途径而定， 要求不同的药用剂型并且其 中一些可要求将保护性包衣涂布于药物剂型， 以保护本发明化合物在例如消化道中免于降 解。
因此， 本发明化合物优选被配制为糖浆剂、 输注或注射溶液剂、 片剂、 胶囊剂、 囊 片、 锭剂、 脂质体、 栓剂、 硬膏剂、 创可贴、 缓释胶囊、 散剂或缓释剂型。 稀释剂优选为水、 缓冲 剂、 缓冲盐溶液或盐溶液并且载体优选地选自可可脂和 vitebesole。
用于给予本发明化合物的特别优选的药用形式为适合于可注射使用的形式， 并且 包括无菌水溶液剂或分散剂及用于临时制备的无菌可注射溶液剂或分散剂的无菌粉剂。 在 所有情况中， 最终的溶液剂或分散形式必须为无菌的和流动的。通常这样的溶液剂或分散 剂应包含溶剂或分散介质， 包含例如水缓冲的含水溶液， 例如可生物适配的缓冲剂、 乙醇、 多元醇例如甘油、 丙二醇、 聚乙二醇、 其合适的混合物、 表面活性剂或植物油。 本发明化合物 也可被配制为脂质体， 尤其是对于非肠道给药。 如果与游离药物相比较， 脂质体提供在循环 中的增加的半衰期和延长所封闭药物更均匀释放的优点。
输注或注射溶液剂的灭菌可通过任何数目的公认技术实现， 包括 ( 但不限于 ) 加 入防腐剂象抗菌或抗真菌剂， 例如对羟苯甲酸酯、 氯丁醇、 苯酚、 山梨酸或硫柳汞。另外， 等 渗剂例如糖或盐尤其是氯化钠可被加入到输注或注射溶液剂中。
通过按需要量在含有上述各种成分的适当溶剂中按需要结合各种化合物， 随后灭 菌， 完成含有一种或几种本发明化合物的无菌推注液的制备。 为了得到无菌粉剂， 将以上溶 液剂真空干燥并冻干 ( 必要时 )。本发明的优选的稀释剂为水、 生理学上可接受的缓冲溶 液、 生理学上可接受的缓冲盐溶液或盐溶液。优选的载体为可可脂和 vitebesole。除了以 上已经提及的优选赋形剂以外， 还可选择 ( 但不限于 ) 以下赋形剂， 以与各种药用形式的本 发明化合物一起使用 ：
a) 粘合剂例如乳糖、 甘露醇、 结晶山梨醇、 磷酸氢盐、 磷酸钙、 糖、 微晶纤维素、 羧甲 基纤维素、 羟乙基纤维素、 聚乙烯吡咯烷酮等 ；
b) 润滑剂例如硬脂酸镁、 滑石、 硬脂酸钙、 硬脂酸锌、 硬脂酸、 氢化植物油、 亮氨酸、 甘油及硬脂基富马酸钠 ；c) 崩解剂例如淀粉、 交联羧甲基纤维素 (croscaramellose)、 甲基纤维素钠、 琼 脂、 膨润土、 藻酸、 羧甲基纤维素、 聚乙烯吡咯烷酮等。
其它合适的赋形剂可在 the American Pharmaceutical Association 出版的药用 赋形剂手册 (the Handbook of Pharmaceutical Excipients) 中发现， 其在此通过参照结 合到本文中。
应该理解依可用其中一种本发明化合物治疗的紊乱严重性及具体类型， 以及依所 治疗的相应患者例如患者的一般健康状态等， 需要不同剂量的相应化合物以发挥治疗或预 防作用。合适剂量的确定在于主治医师判断力范围内。期待在本发明治疗或预防用途中的 本发明化合物的平均每天剂量应在约 0.1mg- 约 3g 的范围内。然而， 在本发明的优选用途 中， 本发明化合物以 1.0-1000mg 范围内， 优选地在 10-500mg 范围内， 优选地在 50-200mg 范 围内的量给予需要它的受试者。 用本发明化合物的治疗持续时间和给药频率将依所治疗疾 病的严重性和每一个个体患者的病症与特殊反应而变化。
如本领域所知， 给定组合物的药用有效量也将取决于给药途径。 通常， 如果通过胃 肠道给药， 例如用栓剂、 直肠或通过胃内探针， 所需量会更高， 如果给药途径为非肠道例如 静脉内， 那么所要求的量应为更低。通常， 如果采用直肠或胃内给药， 应以 50mg-3g， 优选地 以 50mg-500mg 的范围给予本发明化合物， 如果采用非肠道给药， 剂量应在 10-500mg 范围 内。
如果已知某人处于发生可用本发明化合物治疗的紊乱风险下， 预防性给予本发明 的药用组合物是可能的。在这些情况中， 本发明各化合物优选地以以每天为基准的以述优 选和特别优选的剂量给药。该给药可持续直到发生相应紊乱的风险已经减小。然而， 在大 多数情况中， 一旦疾病 / 紊乱已经得到诊断， 应给予本发明化合物。在这些情况中， 优选的 是按每天给药 1、 2、 3 或 4 次给予首次剂量的本发明化合物。优选地， 中断给药 1 天、 1 周或 1 个月， 然后重复直到相应疾病的症状不再恶化或直到它们正在不断改善中。
在本发明的含义内， 仅当取代基或变量的组合导致稳定或化学上可行的化合物 时， 这样的组合是允许的。稳定的化合物或化学上可行的化合物是在缺乏水份或其它化学 反应条件下， 当在 40℃或更低温度下放置至少一周时基本不变的化合物。本发明也设想了 在此所公开化合物的任何碱性含氮基团的季铵化作用。 水或油溶性或可分散产物可通过这 样的季铵化作用得到。
不脱离本发明范围的本发明的各种修饰和变化对本领域技术人员而言是显而易 见的。尽管本发明已经结合具体的优选实施方案得到描述， 仍应理解所要求保护的本发明 不应不适当地受限于这样的具体实施方案。 事实上， 实现本发明的所述方式的各种修饰， 对 相关领域的技术人员而言是显而易见的， 并打算被本发明所涵盖。
以下实施例和图表只举例说明本发明， 不应被理解为以任何方式对如所附权利要 求所指明的本发明范围的限制。
附图简述
图1： 描绘在下述实施例 8 中得到的荧光辅助细胞分选 (FACS) 数据。
实验部分
用于实施例的所有起始原料为市售可得到的或者可由有机化学训练的普通技术 人员按照如例如在实施例 1 中概述的常规实验室操作规范合成而没有不适当的负担。除 了 在实 施例 1 中提供的指导， 可用 于式 I-III 化 合物 合成 和在 式 I-III 化 合物的合成中涉及的中间体合成的另一种可供选择的合成转化是本领域技术人员已 知 或 可 容 易 实 现 的。 合 成 转 化 的 收 集 可 参 见 汇 编 例 如 ： J.March.Advanced Organic Chemistry， 第 4 版 ； John Wiley ： 纽 约 (1992)R.C.Larock.Comprehensive Organic Transformations， 第 2 版 ； Wiley-VCH ： 纽 约 (1999) ； F.A.Carey ； R.J.Sundberg. Advanced Organic Chemistry， 第 2 版 ； Plenum Press ： 纽 约 (1984)T.W.Greene ； P.G.M.Wuts. 有 机 合 成 中 的 保 护 基 (Protective Groups in Organic Synthesis)， 第3版； John Wiley ： 纽 约 (1999).L.S.Hegedus. 复 杂 有 机 分 子 合 成 中 的 过 渡 金 属 (Transition Metals in the Synthesis of Complex Organic Molecules)， 第 2 版 ； University Science Books ： Mill Valley， CA(1994)L.A.Paquette 编 辑 . 有 机 合 成 试 剂 大 全 (The Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis) ； John Wiley ： 纽 约 (1994).A.R.Katritzky ； O.Meth-Cohn ； C.W.Rees 编 辑 . 综 合 有 机 官 能 团 转 化 (Comprehensive Organic Functional Group Transformations) ； Pergamon Press ： 牛 津， 英 国 (1995).G.Wilkinson ； F.GA.Stone ； E.W.Abel 编 辑 . 综 合 有 机 金 属 化 学 (Comprehensive Organometallic Chemistry) ； Pergamon Press ： 牛 津，英 国 (1982). B.M.Trost ； I.Fleming. 综 合 有 机 合 成 (Comprehensive Organic Synthesis) ； Pergamon Press ： 牛津， 英国 (1991)A.R.Katritzky ； C.W.Rees 编辑 . 综合杂环化学 (Comprehensive Heterocylic Chemistry) ； Pergamon Press ： 牛津， 英国 (1984)A.R.Katritzky ； C.W.Rees ； E.F.V.Scriven 编辑 . 综合杂环化学 (Comprehensive Heterocylic Chemistry) ； Pergamon Press ： 牛 津， 英 国 (1996).C.Hansch ； P.G.Sammes ； J.B.Taylor 编 辑 . 综 合 药 物 化 学 (Comprehensive Medicinal Chemistry) ： Pergamon Press ： 牛津， 英国 (1990)。
此外， 合成方法和相关论题的回顾性综述包括 ： 有机反应 (Organic Reactions) 有机合成 ； John Wiley ： 纽约 ； 有机合成 (Organic Syntheses) ； John Wiley ： 纽约 ； 有机 合 成 试 剂 (Reagents for Organic Synthesis ： John Wiley ： 纽约 ； 天然产物的总合成 (The Total Synthesis of Natural Products) ； John Wiley ： 纽约 ； 药物合成的有机化 学 (The Organic Chemistry of Drug Synthesis) ； John Wiley ： 纽约 ； 有机合成年度报告 (Annual Reports in Organic Synthesis) ； Academic Press ： 圣地牙哥， 美国 ； 和 Methoden der Organischen Chemie(Houben-Weyl) ； 蒂姆 ： 斯图加特， 德国。另外， 合成转化的资料 库包括化学文摘， 其可采用 CAS OnLine 或 SciFinder 搜索 ； Handbuch der Organischen Chemie(Beilstein)， 其可采用 SpotFire 和 REACCS 搜索。
在 此 的 化 合 物 按 照 IUPAC 标 准 采 用 软 件 AutoNom Standard For ISIS/Draw Add-In 命名。
实施例 1 ： 本发明化合物的合成
例如可根据以下流程， 制备根据本发明根据通式 (I)-(III) 的化合物 ：
额外步骤 ：其中 R1 至 R6 如在权利要求中那样定义， 或者具有如在此定义的特别优选的含义并 且 Rx 为 H 和 / 或频哪醇基 (pinacolato)。
以上表示的通用反应流程如下 ：
通用程序 A. 在剧烈搅拌下， 用 N2 吹扫装有 1(1.0 当量 )、 Pd(dppf)Cl2· CH2Cl2(0.1 当量 ) 和在 1 ∶ 1( 体积 ) 甲苯 /MeOH 中的相应杂芳族或芳族硼酸或硼酸酯 (1.2 当量 ) 烧 杯， 并缓慢加入 2.0M K2CO3 水溶液 (2.5 当量 )。在 90℃下加热混合物 4 小时。在冷却后，
经快速柱层析法 ( 硅胶， EtOAc/ 庚烷， 1 ∶ 5-1 ∶ 3) 纯化混合物， 得到衍生物 2(43-68％收 率 )。
通用程序 B. 将装有苯胺衍生物 1 或 2(1.0 当量 )、 在 CH2Cl2 中的相应的磺酰氯 (1.1 当量 ) 和吡啶 (10 当量 ) 的烧瓶在室温下搅拌 12 小时。用浓 NH4Cl 水溶液提取混合 物， 用盐水洗涤并经 MgSO4 干燥。 蒸发有机溶剂并经制备型 HPLC 或经快速柱层析法 ( 硅胶， EtOAc/ 庚烷 ) 纯化粗品产物， 得到衍生物 3 或 4(70％ - 定量收率 )。
通用程序 C. 在剧烈搅拌下， 用 N2 吹扫装有 4(1.0 当量 )、 Pd(dppf)Cl2· CH2Cl2(0.1 当量 ) 和在干燥 MeOH 中的相应杂芳族或芳族硼酸或硼酸酯 (1 当量 ) 的 2-5ml 微波反应容 器， 并缓慢加入 2.0M K2CO3 水溶液 (2.5 当量 )。将容器密封并用微波炉在 90℃下加热混合 物 30 分钟 (CEM Discover Microwave system， 设定为 Pmax ＝ 150W)。在冷却之后， 用 CH2Cl2 稀释混合物， 通过 C 盐过滤并用 CH2Cl2 洗脱。蒸发有机溶剂并经制备型 HPLC 或经快速柱层 析法 ( 硅胶， EtOAc/ 庚烷 ) 纯化粗产物， 得到衍生物 3(42-90％收率 )。
通用程序 D. 途径 2 可任选地包括如所显示的附加步骤。 将二硼酸二频哪醇酯 (2.5 当量 )、 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.1 当量 ) 和 KOAc(3.0 当量 ) 加入到包含在脱气 1， 4- 二 烷中的化合物 4(1.0 当量 ) 的烧瓶中。将反应混合物加热至 95℃并搅拌 4 小时。在完成 后， 用 EtOAc(50ml) 稀释反应混合物， 通过短的硅胶柱过滤并用 EtOAc 进一步洗脱。用 H2O 和盐水洗涤合并的有机层， 经无水 MgSO4 干燥并真空浓缩。经快速柱层析法 ( 硅胶， EtOAc/ 庚烷， 1 ∶ 3) 纯化生成的残余物， 得到为膏状物或白色固体的硼酸酯 5(50-88％收率 )。在 随后步骤中， 按照程序 A 或 C， 用杂芳族或芳族溴化物使化合物 5 转化为 3。
当实施依据途径 1 或 2 的合成时可能发生不需要反应的取代基 R1、 R4 和 / 或 R6 可用常规保护基保护， 它们在根据途径 1 或 2 反应期间不被裂解， 但是可在已知条件下裂 解。技术人员意识到各种各样的保护基可用于有机合成。保护基例如在 Wuts， P.G.M. 和 Greene， T.W.， 有机化学中的保护基 (Protective Groups in Organic Chemistry)， 第 3 版， 1999 ； Wily & Sons Inc. 和在 Kocienski， P.J.， Protecting groups ； 第 2 版， 2000， Thieme Medical Publishing 中被评述。 在这些参考书中根据被保护的官能度以及根据选择性除去 相应保护基的条件组编保护基。可被使用的特别优选的保护基为 ：
(i) 在酸性条件下， 优选地在 4-6 之间的 pH 下除去的保护基， 它们选自 Boc 或三苯 甲基保护基的保护基 ；
(ii) 用亲核试剂除去的保护基， 它们选自 Fmoc 或 Dde 保护基 ；
(iii) 通 过 氢 解 作 用 除 去 的 保 护 基， 它 们 由 烯 丙 基 型、 叔 丁 基 型、 苄基型或 Dmab(4-{N-[1-(4， 4- 二甲基 -2， 6- 二氧代亚环己基 )-3- 甲基丁基 ] 氨基 } 苄基酯 ) 组成 ；
(iv) 经辐射除去的保护基， 其选自硝基藜芦基氧基羰基、 硝基苄氧基羰基、 二甲基 二甲氧基苄氧基羰基、 5- 溴 -7- 硝基二氢吲哚基、 邻 - 羟基 -α- 甲基肉桂酰基和 2- 氧基亚 甲基蒽醌。
结构单元的合成
甲苯胺结构单元 (1) 为市售可得到的， 但是也可按照在以上所引用文献中描述并 且通常为有机合成领域普通技术人员已知的标准官能化或转化方法合成。
对于钯催化偶合反应， 用于程序 A 和 C 的许多芳族或杂芳族硼酸或酯为市售可得 到的， 或者它们可按照在以上所引用文献中描述并且通常为有机合成领域普通技术人员已知的标准官能化或转化方法合成。具体地讲， 如在步骤 D 中例证说明的那样， 这样的硼酸 / 酯中间体可例如自其相应的芳族或杂芳族卤化物前体产生。
如在步骤 B 中使用并且对磺酰氯例证说明的许多 5- 和 6- 元杂芳族磺酸及其相 应的活化衍生物为市售可得到的或者它们可按照在以上所引用文献中描述并且通常为 有机合成领域普通技术人员已知的标准官能化或转化方法合成。( 具体方法例如在以下 文献中描述 ： Caldwell， WT 等， J.Med.Chem.(1962)， 第 6 卷， 第 58 ff ； Caldwell， WT 等， JACS(1959)， 第 81 卷， 第 5166 ff ； Roblin， RO 等， JACS(1950)， 第 72 卷， 第 4890 ff ； Hitoshi K 等， 美国专利 (1998)， 5811571 号 ； WO 2006/090244， 第 38 ff ； Janosik T 等， THL(2006)， 第 62 卷， 第 1699 ff ； Allred GD， SERMACS(2007)， Lanny Liebeskind Cope Scholar Award Symposium II， 222.Sulfonyl Fluorides 及其中所引用的参考文献 )。如果要求， 也可能直 接自相应的硫醇产生磺酰胺 3 和 / 或 4(Wright SW 等， JOC(2006)， 第 71 卷， 第 1080ff)。
实施例 2 ： 本发明化合物的 HPLC/MS 分析
如下分析化合物 ：
经 HPLC/MS 测量， 采用 Waters X-bridge C18- 柱， 5μm 粒径， 4.6x150mm( 直径 x 长度 )， 以 1.75ml/ 分钟的流速， 从初始 99 ∶ 1-1 ∶ 99 的线性梯度 ( 水 - 乙腈， 0.2 ％甲 酸作为调节剂 )， 历时 9.10 分钟， 然后保持 1.80 分钟。质量信号采用 Waters 3100 Mass Detector( 质量检测器 ) 测定。
实施例 3 ： 通用细胞培养维持和细胞增殖试验
MCF-7 人 乳 腺 腺 癌 细 胞 和 HL-60 急 性 早 幼 粒 细 胞 白 血 病 细 胞 得 自 ATCC(LGC Promochem)。HG-1 多发性骨髓瘤细胞得自 Dr.D.Hose(DKFZ 海德尔堡 )。CellSensor HRE-bla HCT116 细胞系 ( 结肠直肠癌 ) 得自 Invitrogen。
细胞在补充有 10 ％胎牛血清 (FBS)、 100U/ml 青霉素和 100μg/ml 链霉素、 2mM L- 谷 氨 酰 胺 和 2ng/ml IL-6( 仅 对 HG-1 细 胞 系 ) 的 杜 尔 贝 科 氏 改 性 的 伊 格 尔 培 养 基 (Dulbecco’ s modified Eagle’ s medium)(DMEM ： MCF-7) 或 RPMI 1640 培 养 基 (RPMI ： HL-60， HG-1) 中， 于 37℃下， 在加湿的 95％空气， 5％ CO2 下生长。除了杀稻瘟菌素以最终浓 度 5μg/ml 作为选择标记物以外， 在如上补充有 10％ FBS 和青霉素 / 链霉素的 McCoy’ s 5A 培养基中， 于相同的空气条件下使 HCT116 细胞系生长。
用在 100μl 相关培养基中接种 2000 个细胞 / 孔 (MCF-7) 或 1000 个细胞 / 孔 (HL-60， HG-1) 的 96- 孔组织培养皿进行细胞增殖实验。随后在加入化合物之前， 于所提及 的条件下培养细胞 24 小时。
为了测定化合物 EC50 值， 以各种浓度， 将在 5.5％ DMSO 中 11X 浓度的 10μl 化合 物加入到孔中， 得到以所要求的 1X 化合物浓度存在的 0.5％ DMSO 最终固定百分比。 作为阳 性对照， 细胞用 5.5％ DMSO 处理。然后于测量之前培养细胞另外 72 小时。
为 了 测 定 细 胞 增 殖 抑 制 作 用 的 程 度， 按 照 制 造 商 的 用 法 指 南 (PerkinElmer， ATPlite 1- 级荧光 ATP 检测试验系统 (ATPlite 1-step Luminescence ATP Detection Assay System)) 和按照所建立的方法以荧光模式在 Envision HTS 多标记微孔板检测仪 (PerkinElmer) 测量的萤光素酶示值读数， 用 ATPlite 溶液处理细胞。将原始数据输入 ActivityBase 数据库 (IDBS， ID Business Solutions) 并采用 IDBS 程序 ActivityBase XE 计算 EC50 值。表 2A 和 2B 显示对例证性的本发明化合物在以上概述的细胞增殖试验中得到的 IC50 值。细胞增殖试验数据显示， 本发明化合物可抑制癌细胞系的细胞增殖。
参考 ： EC50 ＜ 500nM ： +++
500-1000nM ： ++
1-10μM ： +
用 “*” 标示的保留时间采用在实施例 2 中给出的另一种可供选择的方法测量。如 下测定这些保留时间 ：
经 HPLC/MS 测量， 采用 Waters X-bridge C18- 柱， 5μm 粒径， 4.6x150mm( 直径 x 长 度 )， 以 1.75ml/ 分钟的流速， 从初始 99 ∶ 1-1 ∶ 99 的线性梯度 ( 水 - 甲醇， 0.2％甲酸作为 调节剂 )， 经 9.10 分钟， 然后保持 1.80 分钟。 质量信号采用 Waters 3100 Mass Detector( 质 量检测器 ) 检测。
实施例 4 ： 雌激素受体 (ER) 信号转导的抑制作用
为了测定化合物对雌激素受体 (ER) 介导的转录活性的作用， 采用 MCF-7 细胞系进 行转染实验。萤光素酶偶联的 ERE-tk-luc 构件得自 Dr.G.Reid(EMBL)。
简言之， 如先前描述的那样维持 MCF-7 细胞并在第一个实验日以 3500 细胞 / 孔的 浓度接种于 100μl 培养基中且在标准条件下培养 24 小时。在该初始培养期后， 采用在包 含 150mM NaCl 和 20mM Tris pH 8.4 的最终缓冲溶液中的 5ng ERE-tk-luc 构件 ( 每孔 ) 和 Exgene 500 转染试剂 (Fermentas) 实施转染。将板维持 3-4 小时， 直到在以 11X 浓度加 入化合物之前的孵化器中的细胞培养条件能够产生在 0.5％ DMSO 中的最终所要求的化合 物浓度 ( 以与先前描述的增殖实验相同的方式 )。
在培养另外 24 小时期间之后， 经萤光素酶示值读数测定 ER- 信号转导的抑制程 度。按照制造商的用法指南 (PerkinElmer， britelite 加上超高灵敏度荧光报告基因试验 系统 (Ultra-High Sensitivity Luminescence Reporter Gene Assay System)) 处理细胞 和按照所建立的方法以荧光模式在 Envision HTS 多标记微孔板检测仪 (PerkinElmer) 测 量的萤光素酶水平， 用 briteliteTM 加上溶液处理细胞。将原始数据输入 ActivityBase 数 据库 (IDBS， ID Business Solutions) 并采用 IDBS 程序 ActivityBase XE 计算 IC50 值。
结果描绘在表 3 中。 如同在这些实验中显示的那样， 本发明化合物能够在 ERα- 阳 性细胞系抑制雌激素受体元件介导的转录活性。从文献中已知 ER 调节剂用于治疗乳腺、 子宫或前列腺癌以及转移性骨疾病的用途 ( 参见例如 Park & Jordan(2002)Trends Mol. Med.8(2) ： 82-88 ； Steiner 等 .(2001)Urology 57(4 增刊 1) ： 68-72 和 Campisi 等 .(1993) Eur.J.Gynaecol.Oncol.14(6) ： 479-483))。
参考 ： IC50 ＜ 500nM ： +++
500-1000nM ： ++
1-10μM ： +
实施例 5 ： 体外微管蛋白聚合的抑制作用
为了评价体外微管蛋白聚合的抑制作用程度， 将微管蛋白溶液 ( 采用包括聚合 / 解聚循环的标准方法自猪脑内部 (in-house) 制备， 参见 Castoldi & Popov(2003)Protein
Expr.Purif.32(1) ： 83-88) 用不同浓度的化合物在聚合条件下孵育并实施动力学实验以 测定经 90 分钟所发生的聚合的量 ( 如通过 340nm 下 OD 变化测量的那样 )。
用重蒸馏水 (double distilled) 稀释化合物溶液， 得到包含 5％ DMSO 的最终 10X 溶液。然后将 5μl 溶液加入到 384 孔透明底测定板 (Corning #3711， Corning Inc.) 上的 各孔中准备用于加入微管蛋白。用冰冷的 G-PEM 缓冲液 (80mM PIPES[pH 6.8]， 2mM MgCl2， 0.5mM EGTA， 10％甘油， 1mM GTP) 再次悬浮微管蛋白溶液 (19.6mg/ml， 在 80mMK-PIPES[pH 6.8]， 1mM MgCl2， 1mM EGTA 中 ) 至最终浓度为 4mg/ml 并在冰上保持至少 1 分钟。然后将 50μl 加入到预先分配的化合物溶液中， 使在培养基座上轨道板设定为振动 5 秒并立即开 始第一次测量。
在预先设定为稳定温度 37℃的 Safire2TM 单色仪 (Tecan) 实施测量， 通过测量在 90 分钟周期内于 340nm 下每分钟的溶液吸光度测定聚合度。所报告的抑制值基于 90 分钟时 的最终吸光度并采用对该样品得到的最小和最大信号参照媒介物对照组 (0.5％ DMSO) 计 算。
如通过这些实验证实的那样 ( 参见表 4)， 各实施例的结构特征的变化可导致选择 具有抑制细胞增殖活性并影响 HIF 信号转导， 但是有或没有微管蛋白抑制性能的化合物， 取决于这是否在目标产物特性中是需要的而定。
参考 ： 在 10μM 下的抑制率＞ 50％ ： +
20-50％ ： +/
＜ 20％ -
实施例 6 ： HIF 介导的转录在低氧条件下激活的抑制作用
采用来自 Invitrogen 的 CellSensor HRE-bla HCT-116 稳定转染的受体细胞系， 按照制造商的指南， 测定在化学诱导的低氧条件下 HIF 信号转导应答激活由于化合物治疗 造成的抑制作用。HIF 为由组成性表达的 HIF1β 亚基和 3 个 HIFα 亚基 (HIF1α， HIF2α， HIF3α) 中的一个组成的转录因子。该试验通常应答于 HIFα 活性。在一个实例中， 当由 于缺氧条件稳定时， HIF-1 上调几种基因以提高细胞在低氧条件下的存活率。这些包括使 得 ATP 能够以氧依赖方式合成的糖酵解酶和促进血管生成的血管内皮生长因子 (VEGF)。 HIF-1 通过结合于通常包含序列 NCGTG 的启动子中的 HIF 反应元件 (HREs) 起作用。
如先前描述的那样维持细胞并以在 32μl 试验培养基 (Opti-MEM[Invitrogen]， 0.5％ FBS， 100U/ml 青霉素， 100μg/ml 链霉素， 0.1mM 非必需氨基酸 [NEAA]， 1mM 丙酮酸钠， 5mM HEPES[pH 7.3]) 中的 15000 细胞 / 孔接种到 384 孔透明底测定板 (Corning 3712) 中。 在 2 小时培养期后， 随后以在 5％ DMSO 中的 10X 浓度向细胞加入化合物 (4μl) 并在标准条 件下培养 30 分钟。为了引起缺氧条件， 向细胞加入 4μl 的 2mM 去铁胺 (DFO) 溶液， 随后在 标准实验条件 ( 如所描述的 ) 下孵育 24 小时。对照孔包括仅含培养基 ( 无细胞 ) 的孔和 用 0.5％ DMSO 替代化合物处理的孔。
在 示 值 读 数 之 前， 如 在 制 造 商 的 方 案 中 描 述 的 那 样 制 备 底 物 载 荷 溶 液 (the Substrate Loading Solution) 并向每孔加入 10μl。于室温下和暗处的另外 2 小时培养 期后， 在 PerkinElmer Envision HTS 上以两个波长 ( 蓝色通道 ： ex.409nm， em.460nm ； 绿色 通道 ： ex.409nm， em.530nm) 测量荧光。为了分析， 首先分别自蓝色和绿色通道数据减去无 细胞孔在 460nm 和 530nm 下的平均信号。然后计算每孔的蓝色 / 绿色发射比， 将本底修正 的蓝色发射值除以本底修正的绿色发射值。采用 GraphPad Prism(Prism 5， GraphPad 软件 公司 ) 自这些比值测定 IC50 值。
这些实验结果 ( 参见表 5) 显示， 本发明化合物能够抑制低氧条件下缺氧调节元 件介导的转录活性。本发明化合物具有超过在先前技术中描述的 HIF 抑制剂化合物， 例如 ProlX 化合物 PX-478 的效力水平， 目前报道只有小分子 HIF- 抑制剂经过临床试验。
参考 ： EC50 ＜ 500nM ： +++
500-1000nM ： ++
1-10μM ： +
实施例 7 ： 细胞凋亡的激活 在用测试化合物处理后， 采用半胱天冬酶 (Caspase)-Glo513/7 试剂盒 (Promega)102361853 A CN 102361870说明书43/56 页实施半胱天冬酶 -3/7 信号的激活。简言之， 将 HG-1 细胞在 50μl 培养基中以 1000 细胞 / 孔的浓度接种至 96 孔板中并于先前描述的条件下培养 24 小时。然后将各种浓度下的化合 物加入到孔中 ( 全部最终浓度为 0.5％ DMSO) 并培养另外 24 小时的时间。接着自孵化器移 出各板并平衡至室温， 之后将 50μll 半胱天冬酶 (Caspase)-Glo 试剂加入到全部孔中， 以 300rpm 振动板 30 秒并在培养 30 分钟期间之后用 EnvisionHTS(PerkinElmer) 测量荧光。
在用本发明化合物处理之后， 观察到半胱天冬酶 -3/7 反应的明显激活 ( 参见表 6)， 表明细胞凋亡是观察到的由于化合物作用机理造成细胞增殖减少的一个因素。
参考 ： EC50 ＜ 500nM ： +++
500-1000nM ： ++
1-10μM ： +
实施例 8 ： 细胞周期分析
为了确定在用化合物处理之后对 HL-60 细胞的细胞周期的影响， 采用荧光辅助细 胞分选 (FACS)， 分选细胞经核染色。
采用使用碘化丙啶的标准协议。简言之， 将细胞以在 2ml 培养基中 2x105 个细胞 接种到 6 孔组织培养板中并在标准组织培养条件 ( 加湿的 95％空气， 5％ CO2) 下于 37℃培 养 24 小时。在该初始培养期间后， 加入来自储备液的化合物溶液， 得到在 0.1％ DMSO 中的 20μM 最终浓度并在温和混合后将细胞培养另外 24 小时。
接着收获细胞， 洗涤并再次悬浮于磷酸盐缓冲盐水 (PBS， pH 7.4) 中。用冰冷的 70％乙醇实施固定同时以半速涡旋并于 4℃下储存溶液过夜。 然后将细胞旋转减慢。 用 PBS 洗涤 3 次并用碘化丙啶染色溶液 (20μg/ml 碘化丙啶， 200μg/ml RNase A， 0.1％ Triton TM X-100 在 PBS 中， pH7.4) 染色。最后， 在用 FACScan 流式细胞仪 (Beckton Dickinson) 测 量之前使样品通过 70μm 滤器 (BD Falcon)。
与显示半胱天冬酶 -3/7 激活的数据一起， 代表性化合物显示的 FACS 分析证实， 存 在表明导致细胞凋亡的细胞周期作用的亚 2N 群体 ( 参见在图 1 中描绘的结果 )。本发明化 合物诱导细胞凋亡的能力是可在化疗应用中开发的有用特征。
实施例 9 ： 其它有用的根据本发明的化合物
其它本发明化合物举例于表 7 中， 它们在本发明范围内具有具体用途。这些化合 物可如在实施例 1 中概述的那样并且也可按照如以上描述的有机化学熟知的制造实践来
制备。这些化合物具有如在表 2A 中列出和在实施例 3-8 中试验的化合物显示的类似抑制 活性。
讨论
从以上实施例中显示的数据直接推断本发明化合物具有抑制 HIF 功能和抑制细 胞增殖的共同性质。 因此， 这些化合物用作治疗或预防选自炎性疾病、 过度增殖性疾病或紊 乱、 与缺氧相关的病变和特征在于过度血管形成的疾病的疾病或紊乱的治疗化合物。
除本发明所有化合物共享的上述有用性质外， 这些化合物也呈现不同程度的抑制 微管蛋白组织的效力。这显示了本发明的另外有价值的贡献， 这取决于可根据患者的疾病 情况、 体质和遗传素质选择性地逐个给予他们治疗化合物的前提。 在本上下文中， 还可能决 定患者是否要用具或不具作为微管蛋白抑制剂的其它活性的本发明化合物治疗。