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蛋白酪氨酸激酶活性的抑制剂
    发明背景
     相关申请
     本申请要求美国临时申请序列号 61/034，005(2008 年 3 月 5 日提交 ) 的优先权。 将上述参考申请的整个教导引入本文中作为参考。
     发明领域
     本发明涉及抑制蛋白酪氨酸激酶活性的化合物。 尤其是，本发明涉及抑制生长 因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性的化合物，导致受体信号的抑制，例如，VEGF 受体信号 传导和 HGF 受体信号传导的抑制。 更尤其是，本发明涉及抑制 VEGF 受体信号传导和 HGF 受体信号传导的化合物、组合物和方法。
     相关技术的概述
     可以将酪氨酸激酶归类为生长因子受体 ( 例如 EGFR，PDGFR，FGFR 和 erbB2) 或非受体 ( 例如 c-src 和 bcr-abl) 激酶。 受体类型酪氨酸激酶构成大约 20 个不同的亚家 族。 非受体类型酪氨酸激酶构成很多亚家族。 这些酪氨酸激酶具有不同的生物活性。 受 体酪氨酸激酶是大的跨细胞膜的酶，并且具有对于生长因子的胞外结合区域、跨膜结构 域和胞内部分，该胞内部分具有使蛋白中特异性酪氨酸残基磷酸化的激酶的作用，并由 此影响细胞增殖。 异常或不合适的蛋白激酶活性可以促进与这种异常激酶活性有关的疾 病状态的产生。
     血管生成是某些正常生理学过程 ( 例如胚胎形成和创伤愈合 ) 的重要组成部分， 但异常的血管生成会有助于一些病理性的病症，尤其是肿瘤生长。 VEGF-A( 血管内皮生 长因子 A) 是促进肿瘤的新生血管形成 ( 血管生成 ) 的主要因素。 VEGF 通过两种高度亲 合性受体 (fms 类酪氨酸激酶受体 Flt-1 和包含激酶嵌入区域的受体 KDR) 传导信号而引起 内皮细胞增殖和迁移。 这些信号响应决定性地依赖于内部受体酪氨酸激酶 (RTK) 活性的 二聚作用和激活作用。 以二硫化物连接的同源二聚体形式结合的 VEGF 刺激 RTK 区域的 受体二聚作用和激活作用。 激酶活性使胞浆受体酪氨酸残基自动磷酸化，然后其充当参 与信号级联反应传播的分子的结合位点。 对于两种受体而言，虽然可能解释许多途径， 但最广泛研究的是 KDR 信号，同时促有丝分裂反应表明与 ERK-1 和 ERK-2 促分裂原活 化蛋白激酶有关。
     VEGF 受体信号的中断在癌症中是具有高度吸引力的治疗靶点，这是因为血管生 成是所有实体瘤生长的前提，而且成熟内皮保持相对的静态 ( 除雌性生殖体系和创伤愈 合之外 )。 人们已经检验了许多抑制 VEGF 信号的实验方法，包括使用中和抗体、受体 拮抗剂、可溶性受体、反义结构和显性负性的策略。
     虽然利用单独 VEGF 抑制来抗血管生成的治疗是有吸引力的，但一些问题可能 限制了这种方法。 VEGF 表达水平本身可以通过很多不同的刺激而升高，或许最重要的 是，由于 VEGFr 抑制而引起的肿瘤的低氧状态，可以诱导本身促进肿瘤侵入和转移的因 素，由此潜在地破坏 VEGF 抑制剂作为癌症治疗的效果。HGF( 肝细胞生长因子 ) 和 HGF 受体 c-met 与肿瘤细胞破坏 VEGF 抑制的活性 的能力有关。 衍生自肿瘤细胞周围的基质纤维母细胞或由肿瘤本身表达的 HGF 在肿瘤的 血管生成、侵入和转移过程中起到关键性作用。 例如，某些癌细胞的侵略性生长通过肿 瘤 - 基质的相互作用 ( 与 HGF/c-Met(HGF 受体 ) 途径有关 ) 而得到急速提高。 HGF( 最 初将其确定为肝细胞的有效分裂素 ) 主要由基质细胞分泌，并且分泌的 HGF 可以促进以 副分泌方式表达 c-Met 的各种癌细胞的活动性和侵入性。 HGF 与 c-Met 的结合导致受体 磷酸化和 Ras/ 促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 信号途径的激活作用，由此增加癌细胞的 恶性行为。 此外，HGF/c-met 途径本身的刺激可以诱导 VEGF 表达，本身直接有助于血 管生成的活性。
     由此，靶向 VEGF/VEGFr 信号传导或 HGF/c-met 信号传导的抗肿瘤抗血管生成 策略或方法可以代表改进的癌症治疗。
     酪氨酸激酶还促进眼科疾病、障碍和病症 ( 例如年龄相关的黄斑变性 (AMD) 和糖尿病性视网膜病 (DR)) 的病理。 这种疾病所造成的失明与视网膜新生血管形成的 异常有关系。 新血管的形成是由生长因子例如 VEGF 和 HGF 调节的，所述生长因子例 如 VEGF 和 HGF 活化受体酪氨酸激酶，引起信号传导途径的起始，导致血浆渗漏成为斑 点，引起视力丧失。 由此，激酶是治疗与新生血管形成有关的眼病的有吸引力的靶点。
     由此，还需要开发控制眼睛的新生血管生成的策略，和开发治疗眼睛疾病的策略。 在这里，我们描述了作为蛋白酪氨酸激酶活性的有效抑制剂的小分子。
     发明概述
     本发明提供了治疗对抑制激酶活性有响应的疾病的新化合物和方法，所述疾病 例如对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸 激酶活性有响应的疾病，例如对抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导有响应的疾病，或例 如对抑制 VEGF 受体信号传导有响应的疾病。 在一个实施方案中，疾病是细胞增殖疾 病。 在另一个实施方案中，疾病是眼科疾病。 本发明的化合物是激酶活性的抑制剂，所 述激酶活性例如蛋白酪氨酸激酶活性，例如生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性，或例 如受体类型酪氨酸激酶信号传导。
     在第一个方面，本发明提供了用作激酶抑制剂的式 (I) 化合物 ：
     及其 N- 氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和外消旋与非 外消旋 (scalemic) 混合物，其非对映异构体和对映异构体，其中 D、 M、 Z、 Ar 和 G 如 本文所定义。 因为本发明的化合物用作激酶抑制剂，因此，它们是研究正常和疾病状态 下激酶作用的有效研究工具。 在一些实施方案中，本发明提供了用作 VEGF 受体信号传 导抑制剂的化合物，并因此作为研究正常和疾病状态下的 VEGF 作用的研究工具。
     关于 “式 (I) 化合物”( 或相当于 “按照第一个方面的化合物”，或者 “本发明
     的化合物”，等等 )，应理解为包括其 N- 氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、前药 和复合物，和外消旋与非外消旋混合物，其非对映异构体、对映异构体和互变异构体， 除非另有陈述。
     在第二个方面，本发明提供了组合物，其包含按照本发明的化合物和可药用载 体、赋形剂或稀释剂。 例如，本发明提供了组合物，其包含作为 VEGF 受体信号传导的 抑制剂的化合物、或其可药用盐和可药用载体、赋形剂或稀释剂。
     在第三个方面，本发明提供了抑制激酶活性的方法，所述激酶活性例如蛋白酪 氨酸激酶，例如生长因子受体的酪氨酸激酶活性，该方法包括 ：使激酶与按照本发明的 化合物接触，或与按照本发明的组合物接触。 在该方面的一些实施方案中，本发明提供 了抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导 ( 例如，抑制 VEGF 受体信号传导 ) 的方法。 抑制 可以在细胞或多细胞有机体中。 如果在细胞中，按照本发明该方面的方法包括 ：使细胞 与按照本发明的化合物接触，或与按照本发明的组合物接触。 如果在多细胞有机体中， 按照本发明该方面的方法包括 ：向有机体给药按照本发明的化合物，或按照本发明的组 合物。 在一些实施方案中，所述有机体是哺乳动物，例如，灵长类，例如人。
     在第四个方面，本发明提供了抑制血管生成的方法，该方法包括 ：向有此需要 的患者给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或治疗有效量的按照本发明的组合物。 在该方面的一些实施方案中，待抑制的血管生成涉及肿瘤生长。 在一些其它实施方案 中，待抑制的血管生成为视网膜血管生成。 在该方面的一些实施方案中，所述患者是哺 乳动物，例如灵长类，例如人。
     在第五个方面，本发明提供了治疗对抑制激酶活性有响应的疾病的方法，所述 疾病例如对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对抑制生长因子受体的蛋白酪 氨酸激酶活性有响应的疾病。 在该方面的一些实施方案中，本发明提供了治疗对抑制受 体类型酪氨酸激酶信号传导有响应的疾病 ( 例如，对抑制 VEGF 受体信号传导有响应的 疾病 ) 的方法，该方法包括 ：向有此需要的有机体给药治疗有效量的按照本发明的化合 物，或按照本发明的组合物。 在该方面的一些实施方案中，所述有机体是哺乳动物，例 如灵长类，例如人。
     在第六个方面，本发明提供了治疗细胞增殖疾病的方法，该方法包括 ：向有此 需要的患者给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或治疗有效量的按照本发明的组合 物。 在该方面的一些实施方案中，细胞增殖疾病是癌症。 在一些实施方案中，所述患者 是哺乳动物，例如灵长类，例如人。
     在第七个方面，本发明提供了治疗眼睛疾病、障碍或病症的方法，该方法包 括 ：向有此需要的患者给药治疗有效量的按照本发明的化合物，或治疗有效量的按照本 发明的组合物。 在该方面的一些实施方案中，所述疾病是由脉络膜的血管生成所引起的 疾病。 在该方面的一些实施方案中，所述患者是哺乳动物，例如灵长类，例如人。
     在第八个方面，本发明提供了按照本发明的化合物用于或在药物制备中的用 途，该药物用于抑制激酶活性，例如抑制蛋白酪氨酸激酶活性，例如抑制生长因子受体 的蛋白酪氨酸激酶活性。 在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合 物用于或在药物制备中的用途，该药物用于抑制受体类型酪氨酸激酶信号传导，例如抑 制 VEGF 受体信号传导。 在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合物用于或在药物制备中的用途，该药物用于治疗对抑制激酶活性有响应的疾病。 在该方 面的一些实施方案中，所述疾病对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应，例如抑制生长因子 受体的蛋白酪氨酸激酶活性。 在该方面的一些实施方案中，所述疾病对抑制受体类型酪 氨酸激酶信号传导 ( 例如 VEGF 受体信号传导 ) 有响应。 在一些实施方案中，所述疾病 是细胞增殖疾病，例如癌症。 在该方面的一些实施方案中，所述疾病是眼睛疾病、障碍 或病症。 在该方面的一些实施方案中，所述眼睛疾病、障碍或病症是由脉络膜的血管生 成所引起的。 在该方面的一些实施方案中，所述疾病是年龄相关的黄斑变性、糖尿病性 视网膜病或视网膜网膜水肿。
     在第九个方面，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物抑制激酶活性的 用途，例如抑制受体类型酪氨酸激酶活性，例如抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活 性。 在该方面的一些实施方案中，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物抑制受 体类型酪氨酸激酶信号传导的用途，例如抑制 VEGF 受体信号传导。
     在第十个方面，本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物用于治疗对抑制 激酶活性有响应的疾病的用途，例如对抑制蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病，例如对 抑制生长因子受体的蛋白酪氨酸激酶活性有响应的疾病。 在该方面的一些实施方案中， 本发明提供了按照本发明的化合物或其组合物用于治疗对抑制受体类型酪氨酸激酶信号 传导有响应的疾病的用途，例如对抑制 VEGF 受体信号传导有响应的疾病。 在该方面的 一些实施方案中，所述疾病是细胞增殖疾病，例如癌症。 在该方面的一些实施方案中， 所述疾病是眼睛疾病、障碍或病症。 在该方面的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病 症是由脉络膜的血管生成所引起的。
     上文仅仅总结了本发明的一些方面，本质上并不是用来加以限制。 下面将更充 分地描述这些方面及其它方面和实施方案。
     详细说明
     本发明提供了抑制激酶活性的化合物、组合物和方法，所述激酶活性例如蛋白 酪氨酸激酶活性，例如受体蛋白激酶活性，例如 VEGF 受体 KDR。 本发明还提供了抑制 血管生成、治疗对抑制激酶活性有响应的疾病、治疗细胞增殖疾病和病症和治疗眼睛疾 病、障碍和病症的化合物、组合物和方法。 在本文中涉及的专利和科学文献反映本领域 技术人员可以获得的知识。 本文引用的授权的专利、公开的专利申请和参考文献以如同 每个是具体地和单独地注明的程度在本文中引入作为参考。 在不一致的情况下，以本公 开为准。
     对本发明来说，使用下列定义 ( 除非另外明确地陈述 ) ：
     为简单起见，将化学部分进行定义，并且主要指的是一价化学部分 ( 例如，烷 基，芳基，等等 )。然而，这种术语在本领域技术人员清楚的合适结构情况下还用于表达 相应的多价部分。 例如，尽管 “烷基” 部分泛指一价基团 ( 例如 CH3-CH2-)，但在某些 情况下，二价连接部分可以是 “烷基”，在这样的情况下，本领域技术人员可以理解， 烷基是二价基团 ( 例如，-CH2-CH2-)，其相当于术语 “亚烷基”。 类似地，在需要二价 部分并且陈述为 “芳基” 的情况下，本领域技术人员可以理解，术语 “芳基” 是指相应 的二价部分 ( 亚芳基 )。 应该理解，所有原子具有其用于键形成的正常的价键数值 ( 即， 碳 ：4， N ：3， O ：2， S ：2、4 或 6，取决于 S 的氧化态 )。 有时，可以将部分定义为例如 (A)a-B-，其中 a 是 0 或 1。 在这种情况下，当 a 是 0 时，该部分是 B-，当 a 是 1 时，组成部分是 A-B-。
     为简单起见， “Cn-Cm” 杂环基或 “Cn-Cm” 杂芳基是指具有 “n” 至 “m” 个 环原子的杂环基或杂芳基，其中 “n” 和 “m” 是整数。 由此，例如， C5-C6 杂环基是 具有至少一个杂原子的 5- 或 6- 元环，并且包括吡咯烷基 (C5) 和哌嗪基和哌啶基 (C6) ； C6 杂芳基包括，例如，吡啶基和嘧啶基。
     术语 “烃基” 是指直链、支链或环状烷基、烯基或炔基，每个如本文所定义。 “C0” 烃基是指共价键。 由此， “C0-C3 烃基” 包括共价键，甲基，乙基，乙烯基，乙 炔基，丙基，丙烯基，丙炔基和环丙基。
     术语 “烷基” 是指直链或支链脂肪族基团，其具有 1 至 12 个碳原子，或者 1-8 个碳原子，或者 1-6 个碳原子。 在一些实施方案中，烷基具有 2 至 12 个碳原子，或者 2-8 个碳原子，或者 2-6 个碳原子。 烷基的实例包括但不限于 ：甲基，乙基，丙基，异丙 基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，己基等等。 “C0” 烷基 ( 例如在 “C0-C3 烷基” 中 ) 是共价键。
     术语 “烯基” 是指具有一个或多个碳 - 碳双键的直链或支链脂肪族基团，其具 有 2 至 12 个碳原子，或者 2-8 个碳原子，或者 2-6 个碳原子。 烯基的实例包括但不限 于 ：乙烯基，丙烯基，丁烯基，戊烯基和己烯基。 术语 “炔基” 是指具有一个或多个碳 - 碳叁键的直链或支链脂肪族基团，其具 有 2 至 12 个碳原子，或者 2-8 个碳原子，或者 2-6 个碳原子。 炔基的实例包括但不限 于 ：乙炔基，丙炔基，丁炔基，戊炔基和己炔基。
     本文使用的术语 “亚烷基”、 “亚烯基” 或 “亚炔基” 是指位于两个其它化学 基团之间并且连接两个其它化学基团的上文分别定义的烷基、烯基或炔基。 亚烷基的实 例包括但不限于 ：亚甲基，亚乙基，亚丙基和亚丁基。 亚烯基的实例包括但不限于 ：亚 乙烯基，亚丙烯基和亚丁烯基。 亚炔基的实例包括但不限于 ：亚乙炔基，亚丙炔基和亚 丁炔基。
     本文使用的术语 “碳环” 是指环烷基或芳基部分。
     术语 “环烷基” 是指饱和、部分不饱和或不饱和的单、二、三或多环烃基，其 具有大约 3 至 15 个碳，或者具有 3 至 12 个碳，或者 3 至 8 个碳，或者 3 至 6 个碳，或者 5 或 6 个碳。 在一些实施方案中，环烷基与芳基、杂芳基或杂环基稠合。 环烷基的实例 包括但不限于 ：环戊烯 -2- 烯酮，环戊烯 -2- 烯醇，环己 -2- 烯酮，环己 -2- 烯醇，环丙 基，环丁基，环丁烯基，环戊基，环戊烯基，环己基，环己烯基，环庚基，环辛基，等 等。
     术语 “杂烷基” 是指饱和、部分不饱和或不饱和的直链或支链脂肪族基团，其 中基团中的一个或多个碳原子独立地被选自 O、 S 和 N 的杂原子取代。
     术语 “芳基” 是指包含一个至三个芳香环的单、二、三或多环芳香部分。 在一 些实施方案中，芳基是 C6-C14 芳香部分，或者芳基是 C6-C10 芳基，或者 C6 芳基。 芳基 的实例包括但不限于 ：苯基，萘基，蒽基和芴基。
     术语 “芳烷基” 或 “芳基烷基” 是指包含芳基的基团，其中芳基与烷基共价 连接。 如果芳烷基被描述为 “任选取代的”，则芳基和烷基部分中的一个或两个可以独
     立地是任选取代的或未取代的。 在一些实施方案中，芳烷基是 (C1-C6) 烷基 (C6-C10) 芳 基，包括但不限于 ：苄基，苯乙基和萘甲基。 为简单起见，在写成 “芳烷基” 时，该术 语和与其相关的术语用来表示化合物中的基团的顺序为 “芳基 - 烷基”。 类似地， “烷 基 - 芳基” 用来表示化合物中的基团的顺序为 “烷基 - 芳基”。
     术语 “杂环基”、 “杂环的” 或 “杂环” 是指单、二或多环结构的基团，其 具有大约 3 至大约 14 个原子，或者 3 至 8 个原子，或者 4 至 7 个原子，或者 5 或 6 个原 子，其中一个或多个原子 ( 例如，1 或 2 个原子 ) 独立地选自 N、 O 和 S，剩下的环构成 原子是碳原子。 环结构可以是饱和、不饱和或部分不饱和的。 在一些实施方案中，杂环 基团是非芳香的杂环基团，在这样的情况下，该基团亦称为杂环烷基。 在双环或多环结 构中，一个或多个环可以是芳香环 ；例如，双环杂环的一个环或三环杂环的一或两个环 可以是芳香环，例如，在茚满和 9，10- 二氢蒽中。 杂环基团的实例包括但不限于 ：环氧 基，氮丙啶基，四氢呋喃基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，噻唑烷基， 烷酮基，吗啉代，噻吩基，吡啶基，1，2，3- 三唑基，咪唑基，异 唑烷基， 唑 唑基，吡唑基，哌嗪子基 (piperazino)，哌啶基，哌啶子基，吗啉基，高哌嗪基，高哌嗪子基，硫吗啉基， 硫吗啉子基，四氢吡咯基和氮杂环庚烷基。 在一些实施方案中，杂环基与芳基、杂芳基 或环烷基稠合。 这种稠杂环的实例包括但不限于 ：四氢喹啉和二氢苯并呋喃。 被该术语 范围具体排除的是其中环的 O 或 S 原子与另一个 O 或 S 原子相邻的化合物。
     在一些实施方案中，杂环基团是杂芳基。 本文使用的术语 “杂芳基” 是指具有 5 至 14 个环原子的单、二、三或多环基团，或者 5、6、9 或 10 个环原子 ；在环序列中共 享例如 6、10 或 14 个 π 电子 ；且除了碳原子之外，具有一个或多个独立地选自 N、O 和 S 的杂原子。 例如，杂芳基包括但不限于 ：嘧啶基，吡啶基，苯并咪唑基，噻吩基，苯 并噻唑基，苯并呋喃基和二氢吲哚基。 杂芳基的其它实例包括但不限于 ：噻吩基，苯并 噻吩基，呋喃基，苯并呋喃基，双苯并呋喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，吡啶基，吡 嗪基，嘧啶基，吲哚基，喹啉基，异喹啉基，喹喔啉基，四唑基， 唑基。
     唑基，噻唑基和异术语 “亚芳基”、 “亚杂芳基” 或 “亚杂环基” 是指位于两个其它化学基团之 间并且用来连接两个其它化学基团的上文分别定义的芳基、杂芳基或杂环基。 杂环基和杂芳基的实例包括但不局限于 ：氮杂 基，氮杂环丁烷基，吖啶基，
     吖辛因基，苯并吲哚基，苯并咪唑基，苯并呋喃基 (benzofuranyl)，苯并呋咱基，苯并呋 喃基 (benzofuryl)，苯并硫呋喃基 (benzothiofuranyl)，苯并噻吩基 (benzothiophenyl)，苯 并 唑基，苯并噻唑基，苯并噻吩基 (benzothienyl)，苯并三唑基，苯并四唑基，苯并异 唑基，苯并异噻唑基，苯并咪唑啉基，苯并 唑基，苯并 二唑基，苯并吡喃基，咔唑基，4aH- 咔唑基，咔啉基，苯并二氢吡喃基，色烯基，噌琳基，香豆素基，十氢喹啉 基，1，3- 二氧戊环，2H，6H-1，5，2- 二噻嗪基，二氢呋喃并 [2，3-b] 四氢呋喃，二氢 异吲哚基，二氢喹唑啉基 ( 例如 3，4- 二氢 -4- 氧代 - 喹唑啉基 )，呋喃基，呋喃并吡啶 基 ( 例如呋喃并 [2，3-c] 吡啶基，呋喃并 [3，2-b] 吡啶基或呋喃并 [2，3-b] 吡啶基 )， 呋喃基，呋咱基，六氢二氮杂 基，咪唑烷基，咪唑啉基，咪唑基，吲唑基，1H- 吲唑 基，吲哚烯基 (indolenyl)，二氢吲哚基，吲嗪基，吲哚基，3H- 吲哚基，异苯并呋喃基， 异苯并二氢吡喃基，异吲唑基，异二氢吲哚基，异吲哚基，异喹啉基，异噻唑烷基，异16CN 102015723 A CN 102015733 A说唑啉基 (isoxazolinyl)，异 二唑基，1，2，3唑烷基， 二唑基，明书7/108 页噻唑基，异唑基，亚甲基二氧基苯基，吗啉基，二氮杂萘 二唑基，1，2，4唑基， 二唑基，1，2，5二 唑烷基，氧杂环丁烷基，2- 氧代氮杂 嗪基，酞嗪基，哌嗪基，哌啶基，基，八氢异喹啉基， 唑基，1，3，4-基，2- 氧代哌嗪基，2- 氧代哌啶基，2- 氧代吡咯烷基，嘧啶基，菲啶基，菲咯啉基， 吩嗪基，吩噻嗪基，吩噻 基 (phenoxathiinyl)，吩 哌啶酮基，4- 哌啶酮基，胡椒基，蝶啶基，嘌呤基，吡喃基，吡嗪基，吡唑烷基，吡唑 啉基，吡唑基，哒嗪基，吡啶并 唑，吡啶并咪唑，吡啶并噻唑，吡啶基 (pyridinyl)， 吡啶基 (pyridyl)，嘧啶基，吡咯烷基，吡咯啉基，吡咯并吡啶基，2H- 吡咯基，吡咯 基，喹唑啉基，喹啉基，4H- 喹嗪基，喹喔啉基，奎宁环基，四氢 -1，1- 二氧代噻吩 基，四氢呋喃基 (tetrahydrofuranyl)，四氢呋喃基 (tetrahydrofuryl)，四氢异喹啉基，四氢 喹啉基，四氢吡喃基，四唑基，噻唑烷基，6H-1，2，5- 噻二嗪基，噻二唑基 ( 例如， 1，2，3- 噻二唑基，1，2，4- 噻二唑基，1，2，5- 噻二唑基，1，3，4- 噻二唑基 )，硫 杂吗啉基 (thiamorpholinyl)，硫吗啉基亚砜，硫吗啉基 (thiamorpholuiyl) 砜，噻蒽基，噻 唑基，噻吩基，噻吩并噻唑基，噻吩并 基氮杂
     唑基，噻吩并咪唑基，噻吩基，三嗪基，三嗪基，三唑基 ( 例如，1，2，3- 三唑基，1，2，4- 三唑基，1，2，5- 三唑基，1，3，4- 三唑基 )，和呫吨基。 本文使用的术语 “唑基 (azolyl)”是指含有两个或多个杂原子作为环原子的 5 元 饱和或不饱和杂环基团，所述杂原子选自氮、硫和氧，其中至少一个杂原子是氮原子。 唑基的实例包括但不局限于 ：任选取代的咪唑基， 4二唑基。 唑基，噻唑基，吡唑基，异 唑 基，异噻唑基，1，3，4- 噻二唑基，1，2，4- 噻二唑基，1，2，4
     二唑基和 1，3，除非另有说明，当本文使用的部分 ( 例如，烷基，杂烷基，环烷基，芳基，杂 芳基，杂环基，等等 ) 描述为 “任选取代的” 时，是指基团任选具有一个至四个、或者 一个至三个、或者一或两个独立选择的非氢取代基。 合适的取代基包括但不限于 ：卤 素，羟基，氧代基团 ( 例如，被氧代基团取代的环 -CH- 是 -C(O)-)，硝基，卤代烃基， 烃基，烷基，环烷基，杂环基，芳基，杂芳基，芳烷基，烷氧基，芳氧基，氨基，酰氨 基，烷基氨基甲酰基，芳基氨基甲酰基，氨基烷基，酰基，羧基，羟烷基，烷磺酰基， 芳磺酰基，烷磺酰氨基，芳磺酰氨基，芳烷基磺酰氨基，烷基羰基，酰氧基，氰基和脲 基。 本身不被进一步取代 ( 除非另外明确地陈述 ) 的取代基的实例是 ：
     (a) 卤素，氰基，氧代基团，羧基，甲酰基，硝基，氨基，脒基，胍基，
     (b)C1-C5 烷基或烯基或芳烷基亚氨基，氨基甲酰基，叠氮基，羧酰氨基，巯 基，羟基，羟烷基，烷基芳基，芳烷基， C1-C8 烷基， C1-C8 烯基， C1-C8 烷氧基， C1-C8 烷基氨基，C1-C8 烷氧羰基，芳氧羰基，C2-C8 酰基，C2-C8 酰氨基，C1-C8 烷硫基，芳基 烷硫基，芳硫基， C1-C8 烷基亚磺酰基，芳烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基， C1-C8 烷基磺 酰基，芳基烷基磺酰基，芳基磺酰基，C0-C6N- 烷基氨基甲酰基，C2-C15N，N- 二烷基氨 基甲酰基， C3-C7 环烷基，芳酰基，芳氧基，芳烷基醚，芳基，与环烷基或杂环或其它芳 基环稠合的芳基， C3-C7 杂环， C5-C15 杂芳基或与环烷基、杂环基或芳基稠合或螺合的任 何这些环，其中上述中的每一个进一步任选被一个或多个列于上面 (a) 的部分取代 ；和
     (c)-(CR32R33)s-NR30R31，
     其中 s 是 0( 其中氮直接与被取代的部分键合 ) 至 6，
     R32 和 R33 各自独立地是 ：氢，卤素，羟基或 C1-C4 烷基，且 R30 和 R31 各自独 立地是氢，氰基，氧代基团，羟基， C1-C8 烷基， C1-C8 杂烷基， C1-C8 烯基，羧酰氨 基， C1-C3 烷基 - 羧酰氨基，羧酰氨基 -C1-C3 烷基，脒基， C2-C8 羟烷基， C1-C3 烷基 芳基，芳基 -C1-C3 烷基， C1-C3 烷基杂芳基，杂芳基 -C1-C3 烷基， C1-C3 烷基杂环基， 杂环基 -C1-C3 烷基 C1-C3 烷基环烷基，环烷基 -C1-C3 烷基， C2-C8 烷氧基， C2-C8 烷氧 基 -C1-C4 烷基， C1-C8 烷氧羰基，芳氧羰基，芳基 -C1-C3 烷氧羰基，杂芳基氧羰基，杂 芳基 -C1-C3 烷氧羰基， C1-C8 酰基， C0-C8 烷基 - 羰基，芳基 -C0-C8 烷基 - 羰基，杂芳 基 -C0-C8 烷基 - 羰基，环烷基 -C0-C8 烷基 - 羰基， C0-C8 烷基 -NH- 羰基，芳基 -C0-C8 烷基 -NH- 羰基，杂芳基 -C0-C8 烷基 -NH- 羰基，环烷基 -C0-C8 烷基 -NH- 羰基，C0-C8 烷基 -O- 羰基，芳基 -C0-C8 烷基 -O- 羰基，杂芳基 -C0-C8 烷基 -O- 羰基，环烷基 -C0-C8 烷基 -O- 羰基，C1-C8 烷基磺酰基，芳基烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基烷基磺酰基， 杂芳基磺酰基， C1-C8 烷基 -NH- 磺酰基，芳烷基 -NH- 磺酰基，芳基 -NH- 磺酰基，杂 芳烷基 -NH- 磺酰基，杂芳基 -NH- 磺酰基芳酰基，芳基，环烷基，杂环基，杂芳基，芳 基 -C1-C3 烷基 -，环烷基 -C1-C3 烷基 -，杂环基 -C1-C3 烷基 -，杂芳基 -C1-C3 烷基 -， 或保护基，其中上述中的每一个进一步任选被一个或多个列于上面 (a) 的部分取代 ；或
     R30 和 R31 与它们相连接的 N 结合在一起，形成杂环基或杂芳基，每个任选被 1 至 3 个选自上面 (a)、保护基和 (X30-Y31-) 的取代基取代，其中所述杂环基还可以是桥联 的 ( 与亚甲基、亚乙基或亚丙基桥形成双环部分 ) ；其中
     X30 选 自 ：C1-C8 烷 基， C2-C8 烯 基 -， C2-C8 炔 基 -， -C0-C3 烷 基 -C2-C8 烯 基 -C0-C3 烷 基， C0-C3 烷 基 -C2-C8 炔 基 -C0-C3 烷 基， C0-C3 烷 基 -O-C0-C3 烷 基 -， HO-C0-C3 烷基 -，C0-C4 烷基 -N(R30)-C0-C3 烷基 -，N(R30)(R31)-C0-C3 烷基 -，N(R30) (R31)-C0-C3 烯 基 -， N(R30)(R31)-C0-C3 炔 基 -， (N(R30)(R31))2-C ＝ N-， C0-C3 烷 基 -S(O)0-2-C0-C3 烷基 -，CF3-C0-C3 烷基 -，C1-C8 杂烷基，芳基，环烷基，杂环基，杂 芳基，芳基 -C1-C3 烷基 -，环烷基 -C1-C3 烷基 -，杂环基 -C1-C3 烷基 -，杂芳基 -C1-C3 烷基 -，N(R30)(R31)- 杂环基 -C1-C3 烷基 -，其中芳基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被 1 至 3 个 (a) 中的取代基取代 ；和
     Y31 选自直接键、-O-、-N(R30)-、-C(O)-、-O-C(O)-、-C(O)-O-、-N(R30)C(O)-、-C(O)-N(R30)-、-N(R30)-C(S)-、-C(S)-N(R30)-、-N(R30)-C(O)-N(R31)-、-N( R30)-C(NR30)-N(R31)-、-N(R30)-C(NR31)-、-C(NR31)-N(R30)-、-N(R30)-C(S)-N(R31) -、-N(R30)-C(O)-O-、-O-C(O)-N(R31)-、-N(R30)-C(S)-O-、-O-C(S)-N(R31)-、-S(O) 31 31 30 31 0-2-、 -SO2N(R )-、 -N(R )-SO2- 和 -N(R )-SO2N(R )-。
     被取代的部分是其中一个或多个 ( 例如一个至四个，或者一个至三个，或者一 或两个 ) 氢被其它化学取代基取代的部分。 作为非限制性实例，取代的苯基包括 2- 氟苯 基，3，4- 二氯苯基，3- 氯 -4- 氟 - 苯基，2- 氟 -3- 丙基苯基。 作为另一个非限制性实 例，取代的正辛基包括 2，4- 二甲基 -5- 乙基 - 辛基和 3- 环戊基 - 辛基。 包括在该定义 内的是被氧取代的亚甲基 (-CH2-) 以形成羰基 -CO-。
     当有两个任选的取代基与环状结构 ( 例如，苯基、噻吩基或吡啶基 ) 的相邻原子键合时，取代基与它们键合的原子一起任选形成 5 或 6 元环烷基或具有 1、2 或 3 个环杂 原子的杂环。
     在一些实施方案中，烃基、杂烷基、杂环和 / 或芳基是未取代的。
     在一些实施方案中，烃基、杂烷基、杂环和 / 或芳基被 1 至 3 个独立选择的取代 基取代。
     烷基上的取代基的实例包括但不局限于 ：羟基，卤素 ( 例如，单个卤素取代基 或多个卤素取代基 ；在后者的情况下，基团例如 CF3 或携带 Cl3 的烷基 )，氧代基团，氰 基，硝基，烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，杂环，芳基， -ORa， -SRa， -S( ＝ O) Re， -S( ＝ O)2Re， -P( ＝ O)2Re， -S( ＝ O)2ORe， -P( ＝ O)2ORe， -NRbRc， -NRbS( ＝ O)2Re，-NRbP( ＝ O)2Re，-S( ＝ O)2NRbRc，-P( ＝ O)2NRbRc，-C( ＝ O)ORe，-C( ＝ O) Ra，-C( ＝ O)NRbRc，-OC( ＝ O)Ra，-OC( ＝ O)NRbRc，-NRbC( ＝ O)ORe，-NRdC( ＝ O)NRbRc， -NRdS( ＝ O)2NRbRc， -NRdP( ＝ O)2NRbRc， -NRbC( ＝ O)Ra 或 -NRbP( ＝ O)2Re，其中 Ra 是氢，烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，杂环或芳基 ；Rb、 Rc 和 Rd 独立地是氢，烷基，环烷基，杂环或芳基，或所述 Rb 和 Rc 与它们键合的 N 一起任选形成 杂环 ；且 Re 是烷基，环烷基，烯基，环烯基，炔基，杂环或芳基。 在上述示例性的取代 基中，基团例如烷基、环烷基、烯基、炔基、环烯基、杂环和芳基本身可以是任选取代 的。
     烯基和炔基上的取代基实例包括但不局限于 ：烷基或取代的烷基，以及作为烷 基取代基的实例所列举的那些基团。
     环烷基上的取代基的实例包括但不局限于 ：硝基，氰基，烷基或取代的烷基， 以及上面作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。 取代基的其它实例包括但不局限 于 ：螺连接的或稠合的环状取代基，例如，螺连接的环烷基，螺连接的环烯基，螺连接 的杂环 ( 杂芳基除外 )，稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环或稠合的芳基，其中上述 的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。
     环烯基上的取代基的实例包括但不局限于 ：硝基，氰基，烷基或取代的烷基， 以及作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。 取代基的其它实例包括但不局限于 ： 螺连接的或稠合的环状取代基，例如螺连接的环烷基，螺连接的环烯基，螺连接的杂环 ( 杂芳基除外 )，稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环，或稠合的芳基，其中上述的环 烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。
     芳基上的取代基的实例包括但不局限于 ：硝基，环烷基或取代的环烷基，环烯 基或取代的环烯基，氰基，烷基或取代的烷基，以及上面作为烷基取代基的实例所列举 的那些基团。 取代基的其它实例包括但不局限于 ：稠合的环基团，例如稠合的环烷基， 稠合的环烯基，稠杂环，或稠合的芳基，其中上述的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代 基本身可以是任选取代的。 芳基 ( 苯基，作为非限制性实例 ) 上的取代基的其它实例包 括但不局限于 ：卤代烷基和作为烷基取代基的实例所列举的那些基团。
     杂环上的取代基的实例包括但不局限于 ：环烷基，取代的环烷基，环烯基，取 代的环烯基，硝基，氧代基团 ( 即，＝ O)，氰基，烷基，取代烷基，以及作为烷基取代 基的实例所列举的那些基团。 杂环基团上的取代基的其它实例包括但不局限于 ：在任 何有效点或连结点的螺连接的或稠合的环取代基，例如螺连接的环烷基，螺连接的环烯基，螺连接的杂环 ( 杂芳基除外 )，稠合的环烷基，稠合的环烯基，稠杂环和稠合的芳 基，其中上述的环烷基、环烯基、杂环和芳基取代基本身可以是任选取代的。
     在一些实施方案中，在杂环基团的碳、氮和 / 或硫的一个或多个位置上被取 代。 氮上的取代基的实例包括但不局限于 ：烷基，芳基，芳烷基，烷基羰基，烷基磺酰 基，芳基羰基，芳基磺酰基，烷氧羰基，或芳烷氧基羰基。 硫上的取代基的实例包括但 不局限于 ：氧代基团和 C1-6 烷基。 在一些实施方案中，氮和硫杂原子可以独立地任选被 氧化，且氮杂原子可以独立地任选被季铵化。
     在一些实施方案中，环基团上的取代基，例如芳基、杂芳基、环烷基和杂环 基，包括卤素、烷氧基和 / 或烷基。
     在一些实施方案中，烷基上的取代基包括卤素和 / 或羟基。
     本文使用的 “卤代烃基” 是其中一个至所有的氢被一个或多个卤素取代的烃基 部分。
     本文使用的术语 “卤素” 或 “卤” 是指氯、溴、氟或碘。 本文使用的术语 “酰基” 是指烷基羰基或芳基羰基取代基。 术语 “酰氨基” 是指连接在氮原子上的酰氨 基 ( 即， R-CO-NH-)。 术语 “氨基甲酰基” 是指连接在羰基碳原子上的酰氨基 ( 即， NH2-CO-)。 酰氨基或氨基甲酰基取代基的氮原子也可以是任选取代的。 术语 “磺酰氨 基” 是指通过硫或氮原子连接的磺酰胺取代基。 术语 “氨基” 包括 NH2，烷基氨基，二 烷基氨基 ( 其中每个烷基可以相同或不同 )，芳氨基和环氨基。 本文使用的术语 “脲基” 是指取代或未取代的脲部分。
     本文使用的术语 “残基” 是指包含一个或多个未成对电子的化学部分。
     如果任选的取代基选自 “一个或多个” 基团，应理解，该定义包括所有的选自 所列举基团之一或选自所有列举基团的组合的取代基。
     另外，环部分 ( 即，环烷基，杂环基，芳基，杂芳基 ) 上的取代基包括 5 至 6 元 单环和 9 至 14 元二环部分，其与母体环部分稠合形成二或三环稠环体系。 环部分上的取 代基还包括 5 至 6 元单环和 9 至 14 元二环部分，其通过共价键与母体环部分连接形成二 或三环的双环体系。 例如，任选取代的苯基包括但不局限于下列 ：
     “未取代的”部分 ( 例如，未取代的环烷基，未取代的杂芳基，等等 ) 是指不具 有任何任选的取代基的如上所述部分。
     饱和、部分不饱和或不饱和的三至八元碳环是例如四至七元、或五或六元饱和 或不饱和碳环。 饱和或不饱和三至八元碳环的实例包括苯基，环丙基，环丁基，环戊 基，环己基和环庚基。
     饱和或不饱和羧基和杂环基团可以与另一个饱和或杂环基团缩合形成双环基 团，例如，饱和或不饱和 9 至 12 元双环碳环或杂环基团。 双环基团包括萘基，喹啉基，
     1，2，3，4- 四氢喹啉基，1，4- 苯并 基。嗪基，茚满基，吲哚基和 1，2，3，4- 四氢萘当碳环或杂环基团被两个 C1-C6 烷基取代时，两个烷基可以结合在一起，形成亚 烷基链，例如 C1-C3 亚烷基链。 具有交联结构的碳环或杂环基团包括二环 [2.2.2] 辛基和 降冰片基。
     术语 “激酶抑制剂” 和 “激酶活性的抑制剂”，等等，用于鉴定能够与激酶相 互作用并抑制其酶活性的化合物。
     术语 “抑制激酶酶活性” 是指降低激酶从供体分子例如 ATP 将磷酸基转移至特 异靶分子 ( 底物 ) 的能力。 例如，激酶活性的抑制可以至少为大约 10％。 在本发明的一 些实施方案中，激酶活性的这种降低至少为大约 25％，或者至少大约 50％，或者至少大 约 75％，或者至少大约 90％。 在其它实施方案中，激酶活性降低至少 95％，或者至少 99％。 IC50 值是可将激酶活性降低至未受抑制的酶活性的 50％的激酶抑制剂的浓度。
     术语 “VEGF 受体信号传导的抑制剂” 用于鉴定具有本文所定义结构的化合 物，其能够与 VEGF 受体相互作用并能够抑制 VEGF 受体的活性。 在一些实施方案中， 这种降低至少为大约 50％，或者至少大约 75％，或者至少大约 90％。 在一些实施方案 中，活性降低至少 95％，或者至少 99％。
     术语 “抑制有效量” 代表足够导致抑制激酶活性的剂量。 构成 “抑制有效量” 的本发明化合物的量将根据化合物、激酶等等而有所不同。 抑制有效量通常可以由本领 域普通技术人员来确定。 激酶可以在细胞中，其也可以在多细胞有机体中。 多细胞有机 体可以是 ：例如，植物，真菌或动物，例如，哺乳动物，例如，人。 真菌可以是感染的 植物或哺乳动物，例如人，并且可以因此位于植物或哺乳动物中和 / 或位于其上。
     在示例性的实施方案中，这种抑制是特异性抑制，即，激酶抑制剂降低激酶从 供体分子例如 ATP 将磷酸基转移至特异靶分子 ( 底物 ) 的能力，其浓度比产生其它无关生 物学效应所要求的抑制剂的浓度低。 例如，与产生无关生物学效应所要求的浓度相比， 激酶抑制活性所需要的浓度为 1/2 以下，或者为 1/5 以下，或者 1/10 以下，或者 1/20 以 下。
     由此，本发明提供了抑制激酶活性的方法，该方法包括 ：使激酶与抑制有效量 的按照本发明的化合物或组合物接触。 在一些实施方案中，激酶在有机体中。 由此，本 发明提供了抑制有机体中激酶活性的方法，该方法包括 ：给予有机体抑制有效量的按照 本发明的化合物或组合物。 在一些实施方案中，有机体是哺乳动物，例如驯养的哺乳动 物。 在一些实施方案中，有机体是人。
     本文使用的术语 “治疗有效量” 是本发明化合物的量，当给予患者时，该量可 以引起所需要的治疗效果。 治疗效果取决于所治疗的疾病和所需要的结果。 因此，治疗 效果可以是疾病状态的治疗。 进一步的，治疗效果可以是抑制激酶活性。 构成 “治疗有 效量” 的本发明化合物的量将根据化合物、疾病状态和它的严重程度、所治疗患者的年 龄等等而有所不同。 治疗有效量通常可以由本领域普通技术人员来确定。
     在一些实施方案中，治疗效果是抑制血管生成。 短语 “血管生成的抑制” 用于 表示按照本发明化合物阻止血管生长的能力，例如，接触抑制剂的血管与未接触抑制剂 的血管进行比较。 在一些实施方案中，血管生成是肿瘤血管生成。 短语 “肿瘤血管生 成” 是指渗入例如肿瘤或者接触癌性生长的肿瘤的血管的增殖。 在一些实施方案中，血 管生成是眼睛中的异常的血管形成。在示例性的实施方案中，与未接触抑制剂的血管的血管生成相比较，血管生成 被阻止至少 25％，或者至少 50％，或者至少 75％，或者至少 90％，或者至少 95％，或者 至少 99％。 或者，血管生成得到 100％抑制 ( 即，血管的大小或数量没有增加 )。 在一 些实施方案中，与未接触抑制剂的血管相比较，短语 “血管生成的抑制” 包括血管的数 量或大小衰退。 由此，抑制血管生成的按照本发明的化合物可以引起血管生长迟缓、血 管生长停止，或引起血管生长的衰退。
     由此，本发明提供了抑制动物血管生成的方法，该方法包括 ：给予需要这种治 疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。 在一些实施方案中，动物是哺乳动 物，例如驯养的哺乳动物。 在一些实施方案中，动物是人。
     在一些实施方案中，治疗效果是治疗眼睛疾病、障碍或病症。 短语 “眼睛疾 病、障碍或病症的治疗” 是指按照本发明的化合物治疗下列的能力 ：渗出性的和 / 或炎 性的眼睛疾病、障碍或病症，与视网膜血管渗透性和 / 或完整性削弱有关的病症，与导 致灶性出血的视网膜血管破裂有关的病症，眼睛后面 (the back of the eye) 的疾病，视网膜 疾病，或眼睛前面 (the front of the eye) 的疾病，或其它眼睛疾病、障碍或病症。
     在一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症包括但不局限于 ：年龄相关的黄斑 变性 (ARMD)，渗出性的黄斑变性 ( 亦称 “湿式” 或新生血管性年龄 - 相关的黄斑变 性 ( 湿式 -AMD)，黄斑水肿，老年黄斑盘状变性，黄斑囊样水肿，眼睑水肿，视网膜水 肿，糖尿病性视网膜病，急性黄斑视神经网膜病，中心浆液性脉络膜视网膜病，脉络膜 视网膜病，脉络膜的新生血管形成，新生血管性黄斑病，新生血管性青光眼，梗阻性的 动脉和静脉视网膜病 ( 例如视网膜静脉堵塞或视网膜动脉阻塞 )，中心视网膜静脉堵塞， 弥散性血管内凝血，视网膜分支静脉阻塞，高血压性的眼底改变，眼睛缺血性综合症， 视网膜动脉小动脉瘤， Coat′ s 疾病，近窝区的毛细血管扩张，半侧视网膜静脉阻塞， 视 ( 神经 ) 乳头病 (Papillophlebitis)，中心视网膜动脉堵塞，视网膜分枝动脉堵塞，颈动 脉疾病 (CAD)，霜样树枝状视网膜血管炎，镰状细胞视网膜病及其它血红蛋白病，血管 样纹，以病原结果例如疾病形式存在的斑点性水肿 ( 例如，糖尿病性的斑点性水肿 )，眼 外伤或眼睛手术，由创伤、损伤或肿瘤造成的视网膜局部缺血或退化，葡萄膜炎，虹膜 炎，视网膜血管炎，眼内炎，全眼球炎，转移性眼炎，脉络膜炎，视网膜色素上皮炎， 结膜炎，睫状体炎，巩膜炎，巩膜外层炎，视神经炎，眼球后的视神经炎，角膜炎，睑 炎，渗出性视网膜脱离，角膜溃疡，结膜溃疡，慢性钱币形角膜炎， Thygeson 角膜炎， 进行性角膜侵蚀性溃疡，由细菌或病毒感染或眼睛手术所引起的眼睛炎性疾病，由对眼 睛的物理伤害所引起的眼睛炎性疾病，和由眼睛炎性疾病所引起的症状，包括发痒、潮 红、水肿和溃疡，红斑，渗出性多形红斑，结节性红斑，环形红斑，硬化病，皮炎，急 性自发水肿，喉水肿，声门水肿，声门下喉炎，支气管炎，鼻炎，咽炎，窦炎，喉炎或 中耳炎。
     在一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症包括但不局限于 ：年龄相关的黄斑 变性，糖尿病性视网膜病，视网膜水肿，视网膜静脉堵塞，新生血管性青光眼，早产儿 视网膜病变，视网膜色素性变性，葡萄膜炎，角膜新生血管形成或增殖性视网膜病变。
     在一些实施方案中，眼睛疾病、障碍或病症是年龄相关的黄斑变性、糖尿病性 视网膜病或视网膜水肿。由此，本发明提供了治疗动物的眼睛疾病、障碍或病症的方法，该方法包括 ： 给予需要这种治疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。 在一些实施方案中， 动物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。 在一些实施方案中，动物是人。
     在一些实施方案中，治疗效果是抑制视网膜新生血管形成。 短语 “视网膜新 生血管形成的抑制” 是指按照本发明的化合物阻止眼睛中血管生长的能力，例如，源于 视网膜静脉的新血管，例如，阻止源于视网膜静脉的新血管的生长和沿着视网膜的内部 ( 玻璃体 ) 表面的扩展。
     在示例性的实施方案中，与非接触的血管的视网膜新生血管形成相比较，视网 膜新生血管形成被迟缓至少 25％，或者至少 50％，或者至少 75％，或者至少 90％，或者 至少 95％，或者至少 99％。 或者，视网膜新生血管形成得到 100％抑制 ( 即，血管的大 小或数量没有增加 )。在一些实施方案中，与未接触抑制剂的血管相比较，短语 “视网膜 新生血管形成的抑制” 包括血管的数量或大小衰退。 由此，抑制视网膜新生血管形成的 按照本发明的化合物可以引起血管生长迟缓、血管生长停止，或引起血管生长的衰退。
     由此，本发明提供了抑制动物的视网膜新生血管形成的方法，该方法包括 ：给 予需要这种治疗的动物治疗有效量的本发明的化合物或组合物。 在一些实施方案中，动 物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动物。 在一些实施方案中，动物是人。
     在一些实施方案中，治疗效果是抑制细胞增殖。 短语 “抑制细胞增殖” 用于表 示按照本发明的化合物阻止与抑制剂接触的细胞生长的能力 ( 与未接触抑制剂的细胞进 行比较 )。 可以如下进行细胞增殖的评估 ：使用 Coulter 细胞计数装置 (Coulter，Miami， Fla.) 或血细胞计数器，统计接触和未接触抑制剂的细胞。 如果细胞以实体生长 ( 例如， 实体瘤或器官 )，细胞增殖的这种评估可以如下进行 ：用卡尺测定生长，或将接触抑制 剂的细胞与未接触抑制剂的细胞的生长大小进行比较。
     在示例性的实施方案中，与未接触抑制剂的细胞的生长相比较，与抑制剂接触 的细胞的生长被迟缓至少 25％，或者至少 50％，或者至少 75％，或者至少 90％，或者至 少 95％，或者至少 99％。 或者，细胞增殖得到 100％抑制 ( 即，接触抑制剂的细胞的数 量没有增加 )。 在一些实施方案中，与未接触抑制剂的细胞相比较，短语 “抑制细胞增 殖” 包括 ：接触抑制剂的细胞的数量或大小得到降低。 由此，抑制细胞增殖 ( 在接触抑 制剂的细胞中 ) 的按照本发明的化合物可以引起接触抑制剂的细胞的生长迟缓、生长停 止、细胞程序死亡 ( 即，细胞凋亡 ) 或坏死性的细胞死亡。
     在一些实施方案中，接触的细胞是新生瘤细胞 (neoplastic cell)。 术语 “新生瘤 细胞” 用于表示显示出异常细胞生长的细胞。 在一些实施方案中，新生瘤细胞的异常性 细胞生长是增加的细胞生长。 新生瘤细胞可以是增生性的细胞、显示出缺乏体外生长的 接触性抑制的细胞、不能体内转移的良性肿瘤细胞、或能够体内转移并且在尝试除去之 后可以复发的癌细胞。 术语 “肿瘤生成” 用于表示可导致肿瘤生长发展的细胞增殖的诱 导。
     在一些实施方案中，接触的细胞是动物中的细胞。 由此，本发明提供了治疗动 物的细胞增殖疾病或病症的方法，该方法包括 ：给予需要这种治疗的动物治疗有效量的 本发明的化合物或组合物。 在一些实施方案中，动物是哺乳动物，例如驯养的哺乳动 物。 在一些实施方案中，动物是人。术语 “细胞增殖疾病或病症” 是指以异常细胞生长为特征的任何病症，例如， 异常增加的细胞增殖。 应该抑制和治疗的这种细胞增殖疾病或病症的实例包括但不局限 于癌症。 癌症的具体类型的实例包括但不局限于 ：乳腺癌，肺癌，结肠癌，直肠癌，膀 胱癌，前列腺癌，血癌和肾癌。 在一些实施方案中，本发明提供了抑制动物的新生瘤细 胞增殖的方法，该方法包括 ：给予具有至少一种新生瘤细胞存在于身体中的动物治疗有 效量的本发明的化合物或其组合物。
     对于本发明的目的来说，本文使用的术语 “患者” 包括人及其它动物，例如哺 乳动物，及其它有机体。 由此，本发明的化合物、组合物和方法适用于人类治疗和兽 用。 在一些实施方案中，患者是哺乳患者，例如人。
     本文使用的术语 “治疗”、 “医治” 等等，包括有机体中的疾病状态的治疗， 并且包括下列中的至少一种 ：(i) 预防疾病状态出现，尤其是，当动物有感染疾病的倾 向、但还没有确诊时 ；(ii) 抑制疾病状态，即，部分或完全停止其发展 ；(iii) 减轻疾病 状态，即，引起疾病状态的症状的衰退，或改善疾病的症状 ；和 (iv) 使疾病状态得到逆 转或衰退，例如，消除或治愈疾病。 在本发明的一些实施方案中，有机体是动物，例 如，哺乳动物，例如，灵长类，例如，人。 正如本领域所已知的那样，相对于局部递送 的全身性调节，年龄、体重、综合健康状况、性别、饮食、给药时间、药物相互作用、 病症的严重程度等等是必要的，并且本领域普通技术人员可用常规实验确定。 在一些实 施方案中，本文使用的术语 “治疗”、 “医治” 等等，包括治疗有机体的疾病状态，并 且包括上面 (ii)、 (iii) 和 (iv) 中的至少一种。
     对于非眼睛的疾病、障碍或病症，可以通过任何途径给药，包括但不限于 ：肠 胃外，口服，舌下，透皮，局部，鼻内，气管内或直肠内。 在一些实施方案中，在医院 环境中静脉内给予本发明的化合物。 在一些实施方案中，可以通过口服途径给药。
     眼睛疾病、障碍和病症的给药途径的实例包括但不局限于 ：全身性给药，眼 周给药，眼球后给药，小管内给药，玻璃体腔注射，局部给药 ( 例如，滴眼剂 )，结 膜 下 注 射， Tenon 囊 下 给 药 (subtenon)， 巩 膜 睫 状 体 给 药 (transcleral)， 前 眼 房 给 药 (intracameral)，视网膜下给药，电穿孔法给药和缓释植入物。 眼睛状况的其它给药途 径、其它注射部位或其它给药形式对本领域技术人员来说是已知的或在他们的考虑范 围，并且在本发明范围之内。
     在本发明的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括 ：局部给 药，结膜下注射，眼内注射，或其它眼睛途径、全身途径，或本领域技术人员已知的患 者眼睛手术之后的其它方法。
     在本发明的其它实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括 ：局部给 药，眼内给药，巩膜睫状体给药，眼周给药，结膜给药，结膜下给药 (subtenon)，前眼房 给药，视网膜下给药，结膜下给药，眼球后给药或小管内给药。
     在本发明的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括 ：局部给 药 ( 例如，滴眼剂 )，全身性给药 ( 例如，口服或静脉内 )，结膜下注射，眼周注射，眼 内注射和手术植入。
     在本发明的一些实施方案中，眼睛疾病、障碍和病症的给药途径包括 ：眼内注 射，眼周注射和缓释植入物。在本发明的一些实施方案中，眼球内注射可以注射到玻璃体 ( 眼内 ) 中、结膜下 面 ( 结膜下 )、眼睛后面 ( 眼球后 )、巩膜内、Tenon 囊下面 (sub-Tenon)，或可以是储存 形式。
     本发明的化合物可以形成盐，其也在本发明范围内。 关于本发明的化合物，例 如式 (I) 化合物，应理解，包括其盐，除非另有陈述。
     本文使用的术语 “盐” 表示与无机和 / 或有机酸和碱形成的酸和 / 或碱盐。 另 外，当本发明的化合物含有碱性部分 ( 例如但不局限于 ：吡啶或咪唑 ) 和酸性部分 ( 例如 但不局限于 ：羧酸 ) 时，可以形成两性离子 ( “内盐”)，并且包括在本文所使用的术语 “盐”的范围之内。 可药用 ( 即，无毒的 ( 显示出最小或没有不希望有的毒理学效果 )， 生理学可接受的 ) 盐是优选的，不过其它盐也是有用的，例如，在制备期间可以使用的 分离或纯化步骤中。 可以如下形成本发明化合物的盐 ：例如，在介质中，例如，在盐沉 淀的介质或水性介质中，本发明的化合物与适量的酸或碱进行反应，例如等量反应，而 后冷冻干燥。
     含有碱性部分的本发明的化合物 ( 例如但不局限于胺或吡啶或咪唑环 ) 可以与 各种有机和无机酸形成盐。 酸加成盐的实例包括乙酸盐 ( 例如，与乙酸或三卤乙酸例如 三氟乙酸形成的那些盐 )，己二酸盐，海藻酸盐，抗坏血酸盐，天冬氨酸，苯甲酸盐，苯 磺酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，环戊烷丙酸 盐，二葡糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐， 半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，羟基乙磺酸盐 ( 例如， 2- 羟基乙磺酸盐 )，乳酸盐，马来酸盐，甲磺酸盐，萘磺酸盐 ( 例如，2- 萘磺酸盐 )，烟 酸盐，硝酸盐，草酸盐，果胶酯酸盐 (pectinate)，过硫酸盐，苯丙酸盐 ( 例如，3- 苯丙 酸盐 )，磷酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸酯，水杨酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐 ( 例如， 与硫酸形成的那些盐 )，磺酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，甲苯磺酸盐，例如甲苯磺酸盐， 十一烷酸盐，等等。
     含有酸性部分的本发明的化合物 ( 例如但不局限于羧酸 ) 可以与各种有机和无 机碱形成盐。 碱盐的实例包括铵盐，碱金属盐例如钠、锂和钾盐，碱土金属盐例如钙和 镁盐，与有机碱 ( 例如，有机胺 ) 成的盐，例如苯乍生 (benzathines)，二环己基胺，哈 胺 (hydrabamines)( 与 N， N- 二 ( 去氢枞基 ) 乙二胺形成的盐 )， N- 甲基 -D- 葡糖胺， N- 甲基 -D- 咪唑双酰胺 (glycamides)，叔丁胺，和与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等等成 的盐。 可以用试剂例如低级烷基卤化物 ( 例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物，溴化物 和碘化物 )、二烷基硫酸酯 ( 例如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯 )、长链卤化 物 ( 例如癸基、月桂基、十四烷基和硬脂酰基氯化物、溴化物和碘化物 )、芳烷基卤化物 ( 例如苄基和苯乙基溴化物 ) 及其它试剂将含有碱性氮的基团季铵化。
     本文使用的术语 “可药用盐” 是指可以保持上述鉴定化合物的所需生物活 性、并显示出最小或没有不希望的毒理学效果的盐。 这种盐的实例包括但不局限于 ： 与无机酸 ( 例如，盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸，等等 ) 形成的盐，和与有机酸 形成的盐，所述有机酸例如乙酸，草酸，酒石酸，琥珀酸，苹果酸，抗环血酸，苯甲 酸，鞣酸，棕榈酸，海藻酸，聚谷氨酸，萘磺酸，萘二磺酸，甲磺酸，对甲苯磺酸和 多聚半乳糖醛酸。 其它盐包括 ：本领域技术人员已知的可药用季铵盐，其具体地包括式 --NR+Z-- 的季铵盐，其中 R 是氢、烷基或苄基，Z 是反离子，包括氯离子、溴离子、 碘离子、 --O- 烷基、甲苯磺酸根、甲磺酸根、磺酸根、磷酸根、或羧酸根 ( 例如苯甲酸 根，琥珀酸根，乙酸根，乙醇酸根，马来酸根，苹果酸根，柠檬酸根，酒石酸根，抗坏 血酸根，苯甲酸根，桂皮酸根，扁桃酸根，苯甲酸根 (benzyloate) 和联苯乙酸根 )。
     本发明的另一个方面提供了包含按照本发明化合物的组合物。 例如，在本发明 的一些实施方案中，组合物包含按照本发明的化合物、按照本发明化合物的 N- 氧化物、 水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药，以至少大约 30％对映异构体或非对映异 构体过量的形式存在。 在本发明的一些实施方案中，化合物、 N- 氧化物、水合物、溶 剂合物、可药用盐、复合物或前药以至少大约 50％、至少大约 80％或甚至至少大约 90％ 对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。 在本发明的一些实施方案中，化合物、 N- 氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药以至少大约 95％、或者至少大 约 98％和或者至少大约 99％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。 在本发明的其 它实施方案中，化合物、 N- 氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、复合物或前药以基 本上外消旋混合物的形式存在。
     本发明的一些化合物可以具有手性中心和 / 或几何异构中心 (E- 和 Z- 异构体 )， 本发明包括所有这种旋光异构体、对映异构体、非对映异构体和几何异构体。 本发明还 包括本文所公开化合物的所有互变异构形式。 如果本发明的化合物包含手性中心，本发 明包括这种化合物的对映异构体和 / 或非对映异构体纯的异构体、这种化合物的对映异 构体和 / 或非对映异构体富集混合物和这种化合物的外消旋和非外消旋 (scalemic) 混合 物。 例如，组合物可以以至少大约 30％非对映异构体或对映异构体过量形式包含式 (I) 化合物的对映异构体或非对映异构体的混合物。 在本发明的一些实施方案中，化合物以 至少大约 50％对映异构体或非对映异构体过量、至少大约 80％对映异构体或非对映异构 体过量、或甚至至少大约 90％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。 在本发明的 一些实施方案中，化合物以至少大约 95％或者至少大约 98％对映异构体或非对映异构体 过量、和或者至少大约 99％对映异构体或非对映异构体过量的形式存在。
     本发明的手性中心可以具有 S 或 R 构型。 外消旋形式可以通过物理方法进行拆 分，例如，非对映异构体衍生物的分级结晶、分离或结晶或手性柱色谱分离。 单一旋光 异构体可以如下获得 ：从手性前体 / 中间体或从消旋体起始，利用任何合适的方法，包 括但不限于 ：常规方法，例如，与光学活性的酸形成盐，而后结晶。
     本发明还包括本发明化合物的前药。 术语 “前药” 代表与载体共价键合的化合 物，当给予哺乳动物受试者前药时，前药能够释放活性组分。 活性组分的释放发生在体 内。 前药可以利用本领域技术人员已知的技术制备。 这些技术通常可以修饰给定化合 物中的合适官能团。 然而，这些修饰的官能团通过常规操作或在体内可以恢复初始官能 团。 本发明化合物的前药包括其中羟基、氨基、羧基或类似基团被修饰的化合物。 前药 的实例包括但不局限于 ：酯 ( 例如，醋酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物 )，本发明化合物 中的羟基或氨基官能团的氨基甲酸酯 ( 例如，N，N- 二甲基氨基羰基 )，酰胺 ( 例如，三 氟乙酰基氨基，乙酰胺，等等 )，等等。
     本发明的化合物可以原态给予，或以前药形式给予，例如，以体内可水解的酯 或体内可水解的酰胺形式给予。 包含羧基或羟基的本发明化合物的体内可水解的酯是，例如，在人或动物体内可水解产生母体酸或醇的可药用酯。 羧基的合适的可药用酯包 括 ：C1-C6 烷氧基甲基酯 ( 例如，甲氧基甲基 )，C1-C6 烷酰氧基甲基酯 ( 例如，新戊酰氧 基甲基 )，酞基酯，C3-C8 环烷氧基羰基氧基 -C1-C6 烷基酯 ( 例如，1- 环己基羰基氧基乙 基 ) ；1，3- 二氧杂环戊烯 -2- 酮基甲基酯 ( 例如，5- 甲基 -1，3- 二氧杂环戊烯 -2- 酮 基甲基 ；和 C1-C6 烷氧羰基氧基乙酯 ( 例如，1- 甲氧羰基氧基乙基 )，并且可以在本发明 化合物的任何合适羧基处形成。
     含有羟基的本发明化合物的体内可水解的酯包括 ：无机酯，例如磷酸酯和 α- 酰氧烷基醚和相关化合物，作为酯的体内水解的结果，其发生分解，得到母体羟基。 α- 酰氧烷基醚的实例包括乙酰氧基甲氧基醚和 2，2- 二甲基丙酰氧基 - 甲氧基醚。 可形 成羟基的体内可水解酯的选择包括 ：烷酰基，苯甲酰基，苯乙酰基和取代的苯甲酰基和 苯乙酰基，烷氧羰基 ( 得到碳酸烷基酯 )，二烷基氨基甲酰基和 N-(N，N- 二烷基氨基乙 基 )-N- 烷基氨基甲酰基 ( 得到氨基甲酸酯 )， N， N- 二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。 苯甲酰基上的取代基的实例包括吗啉代和哌嗪子基 (piperazino)，其通过亚甲基连接环氮 原子与苯甲酰基环的 3- 或 4- 位。 含有羧基的本发明化合物的体内可水解的酰胺的合适 意义是，例如， N-C1-C6 烷基或 N， N- 二 -C1-C6 烷基酰胺，例如 N- 甲基， N- 乙基， N- 丙基， N， N- 二甲基， N- 乙基 -N- 甲基或 N， N- 二乙基酰胺。 当给予受试者前药时，通过代谢或化学过程，前药进行化学转化，得到本发明 的化合物，例如，其盐和 / 或溶剂合物。 本发明化合物的溶剂合物包括，例如，水合 物。
     在整个说明书中，一个或多个化学取代基的实施方案是确定的。 还包括的是各 种实施方案的组合。 例如，本发明描述了化合物中的 D 的一些实施方案，并且描述了基 团 G 的一些实施方案。 由此，例如，在本发明范围内，还包括描述了 D 的实例和描述了 基团 G 的实例的化合物。
     化合物
     按照一个实施方案，本发明提供了式 (I) 化合物 ：
     包括其 N- 氧化物、水合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和外消旋与 非外消旋混合物，其非对映异构体和对映异构体，其中，
     D 选自芳香环、杂芳香环、环烷基环或杂环体系，每个任选被 1 至 5 个独立选择 38 的 R 取代 ；
     M 是任选取代的稠合杂环部分 ；
     Z 是 -O- ；
     Ar 是 5 至 7 元芳香环体系，其任选被 0 至 4 个 R2 基团取代 ；和
     G 是基团 B-L-T，其中
     B 是 -N(R13)- 或 -C( ＝ S)- ；
     L 选 自 -C( ＝ O)N(R13)-， -C( ＝ O)C0-C1 烷 基 -C( ＝ O)N(R13)- 和 -C( ＝ O)-，其中上述 L 基团的烷基是任选取代的 ；和
     T 选 自 ：-C0-C5 烷 基， -C0-C5 烷 基 -Q， -O-C0-C5 烷 基 -Q， -O-C0-C5 烷 基， -C( ＝ S)-N(R13)-C0-C5 烷 基 -Q， -C0-C5 烷 基 -S(O)2-Q， 和 -C( ＝ S)-N(R13)-C0-C5 烷基，其中每个 C0-C5 烷基是任选取代的 ；
     其中
     每个 R38 独立地选自卤素，任选取代的 C1-C6 烷基， -C0-C6 烷基 -( 任选取代 的杂环 )，任选取代的 -C2-C6 烯基＝ N- 杂环 -C1-C6 烷基，任选取代的 -CH ＝ N- 杂 环， -(CH2)jNR39(CH2)nR36， -C(O)(CH2)jNR39(CH2)nR36， -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2) 99 39 3 39 i ] x ( CH 2 ) j R ， -( CH 2 ) j NR C ( O )( CH 2 ) j O ( CH 2 ) j OR ， -( CH 2 ) j NR ( CH 2 ) j ( CH )( NH 2 ) (COOH)， -(CH2)jNR39CH(CH3)(CH2)jR99 和 -(CH2)jNR39(CH2)jCOOH ；
     其中
     每个 j 独立地是 0 至 4、或者 1-2 的整数，
     n 是 0-6 的整数，
     x 是从 0-6 或者 2-3 的整数，
     每个 i 独立地是 2 或 3，和
     上述 R38 基团的 -(CH2)n- 部分任选被 C1-C6 烷基取代 ；
     R36 是 H 或 -(CH2)n3OR37 ；
     其中
     n3 是 0-6 的整数 ；
     条件是，当 R36 和 R39 两个都与相同的氮连接时，则 R36 和 R39 两个不都直接通过 氧与氮键合 ；
     每个 R37 独立地选自 ：H， C1-C6 烷基， -(CH2)nO(CH2)aO-C1-C6 烷基， -(CH2) nCH(NH)(CH2)nO-C1-C6 烷 基， -(CH2)nCH(NH)(CH2)nC1-C6 烷 基， -(CH2)nO(CH2) aO-C3-C10 环 烷 基， -(CH2)nCH(NH)(CH2)nO-C3-C10 环 烷 基 和 -(CH2)nCH(NH)(CH2) 37 nC3-C10 环烷基，其中每个 n 独立地是 0 至 6 的整数， a 是 2 至 6 的整数，其中上述 R 基 团的烷基和环烷基部分任选被一个或多个独立选择的取代基取代 ；
     R39 选 自 H， C1-C6 烷 基， -SO2-C1-C6 烷 基， -C(O)-C1-C6 烷 基， -C(O) O-C1-C6 烷 基， -C(O)-C1-C6 烷 基 -NR3R3， -C1-C6 烷 基 -O-C1-C6 烷 基， -C(O) (CH2)0-4O(CH2)1-4OC1-C6 烷 基， -C(O)-C1-C6 烷 基 -OH， -C(O)-CF3 和 -C(O) CH[CH(C1-C6 烷基 )2]NR3R3 和用于保护仲氨基的保护基，条件是，当 R36 和 R39 两个都与 相同的氮连接时，则 R36 和 R39 两个不都直接通过氧与氮键合 ；
     R99 在每次出现时独立地是 -H、 -NH2 或 -OR3 ；
     R2 在每次出现时独立地选自 -H 和卤素 ；
     每个 R3 独立地选自 -H 和 R4 ；
     R4 是 (C1-C6) 烷基 ；
     每个 R13 独立地选自 -H， -C(O)NR3R3 和 C1-C6 烷基 ；
     Q 是三至十元环体系，任选被零至四个 R20 取代 ；和
     每个 R20 独立地选自 -H，卤素，三卤甲基，-OR3，-S(O)0-2R3，-S(O)2NR3R3，-C(O)OR3，-C(O)NR3R3，-(CH2)0-5( 杂芳基 )，C1-C6 烷基，-(CH2)nP( ＝ O)(C1-C6 烷 基 )2，其中 n 是 0 至 6 的整数，杂芳基和 C1-C6 烷基是任选取代的。
     在按照本发明化合物的一些实施方案中，D 是芳香环或杂芳香环体系，每个被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。
     在按照本发明化合物的一些实施方案中，D 是 5 或 6 元杂芳香环体系，每个被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。
     在按照本发明化合物的一些实施方案中，D 是 6 元芳香环或 6 元杂芳香环体系， 每个被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。
     在按照本发明化合物的一些实施方案中，D 是 6 元芳香环体系，被 1 或 2 个独立 38 选择的 R 基团取代。
     在按照本发明化合物的一些实施方案中，D 是 6 元杂芳香环体系，被 1 或 2 个独 立选择的 R38 基团取代。
     在按照本发明化合物的一些实施方案中，D 是 5 元杂芳香环体系，被 1 或 2 个独 立选择的 R38 基团取代。
     在本发明的一些实施方案中， D 选自
     其中所述基团的成员被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。 在本发明的一些实施方案中， D 选自
     其中所述基团的成员被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。
     在按照本发明的一些实施方案中， D 被一个 R38 基团取代。
     在本发明的一些实施方案中， D 是苯基，吡啶基，咪唑基或四氢吡啶基，每个 被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。
     在按照本发明的一些实施方案中， R38 是
     在按照本发明的一些实施方案中， D 是苯基，被 1 个 R38 基团取代。 在按照本发明的一些实施方案中，D 是吡啶基，被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代。 在按照本发明的一些实施方案中， D 是吡啶基，被一个 R38 基团取代。
     在按照本发明的一些实施方案中， D 是咪唑基，被一或两个 R38 基团取代。
     在按照本发明的一些实施方案中， D 是咪唑基，被两个 R38 基团取代。
     在本发明的一些实施方案中， D 是四氢吡啶基，被 1 个 R38 基团取代。
     在 本 发 明 的 一 些 实 施 方 案 中， 每 个 R38 独 立 地 选 自 ：C1-C6 烷 基， -(CH2) 39 39 39 j NR ( CH 2 ) j ( CH )( CH 2 )( COOH ) ， -( CH 2 ) j NR ( CH 2 ) j COOH ， -( CH 2 ) j NR ( CH 2 ) 99 39 36 i[O(CH2)i]x(CH2)jR ， -(CH2)jNR (CH2)nR 和 -C0-C6 烷基 -( 任选取代的杂环 )。
     在 本 发 明 的 一 些 实 施 方 案 中， 每 个 R38 独 立 地 选 自 ：C1-C6 烷 基， -(CH2) 39 99 39 36 jNR (CH2)i[O(CH2)i]x(CH2)jR 和 -(CH2)jNR (CH2)nR 。
     在本发明的一些实施方案中，每个 R38 独立地是 ：-(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2)i]
     (CH2)jR99 或 -(CH2)jNR39(CH2)nR36。
     在本发明的一些实施方案中，R38 是 -(CH2)jNR39(CH2)nR36，其中 j 是 1，n 是 2。
     在本发明的一些实施方案中， R38 是 -(CH2)NR39(CH2)2OCH3。
     在本发明的一些实施方案中， R38 是 -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2)i]x(CH2)jR99。
     在本发明的一些实施方案中， R38 是 -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2)i]x(CH2)jR99，其 中 j 是 1， i 是 2， x 是 2 或 3。
     在本发明的一些实施方案中，D 是吡啶基，被一个 -(CH2)jNR39(CH2)nR36 取代， 或者被一个 -(CH2)jNR39(CH2)nR36 取代，其中 j 是 1，且 n 是 2。
     在本发明的一些实施方案中， D 是吡啶基，被一个 -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2)i] 99 39 x(CH2)jR 取代，或者被一个 -(CH2)jNR (CH2)i[O(CH2)i]x(CH2)jOMe 取代，其中 j 是 1，xi 是 2， x 是 2 或 3。
     在本发明的一些实施方案中， D 是吡啶基，被一个 -(CH2)jNR39(CH2)j(CH) (NH2)(COOH) 取代。
     在本发明的一些实施方案中，D 是吡啶基，被一个 -C0-C6 烷基 -( 任选取代的杂 环 ) 取代，例如 -C0-C6 烷基 -( 被一个氧代基团取代的杂环 )。
     在本发明的一些实施方案中， D 是吡啶基，被一个 -(CH2)jNR39(CH2)jCOOH 取 代。
     在 本 发 明 的 一 些 实 施 方 案 中， D 是 吡 啶 基， 被 一 个 -(CH2)jNR39C(O)(CH2) 3 jO(CH2)jOR 取代。
     在本发明的一些实施方案中，D 是四氢吡啶基，被一个任选取代的 -CH ＝ N- 杂 环取代。
     在本发明的一些实施方案中， D 是四氢吡啶基，被一个 -C(O)(CH2)jNR39(CH2) 36 nR 取代。
     在本发明的一些实施方案中， D 是咪唑基，被一个 C1-C6 烷基和一个 -(CH2) 39 36 jNR (CH2)nR 取代。
     在本发明的一些实施方案中， D 是苯基，被一个 -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2)i] 99 x(CH2)jR 取代。
     在 本 发 明 的 一 些 实 施 方 案 中， R39 选 自 H， -C(O)-C1-C6 烷 基 ( 例 如， -C(O)-Me)， -C(O)-O-C1-C6 烷基， -C(O)-C1-C6 烷基 -NH2， -SO2-Me， -C(O) (CH2)0-4O(CH2)1-4OC1-C6 烷基和 -C(O)CH[CH(C1-C6 烷基 )2]NR3R3。
     在 本 发 明 的 另 一 个 实 施 方 案 中， R39 选 自 H， -C(O)-Me， -C(O)(CH2) O(CH2)2OC1 烷基和 -C(O)CH(CHMe2)NH2。
     在本发明的一些实施方案中， R39 是 H 或 -C(O)-Me。
     在本发明的一些实施方案中， R39 是 H。
     在本发明的一些实施方案中， R36 是 -OMe。
     在本发明的一些实施方案中， R99 是 -OMe。
     在本发明的一些实施方案中， M 是 其中 * 代表与 D 的连结点 ；和 代表与 Z 的连结点。
     在本发明的一些实施方案中， Ar 选自苯基，吡嗪，哒嗪，嘧啶和吡啶，其中所 述苯基、吡嗪、哒嗪、嘧啶和吡啶中的每一个任选被 0 至 4 个 R2 基团取代。
     在本发明的一些实施方案中， Ar 是苯基，任选被 0 至 4 个 R2 基团、或者 1 或 2 个 R2 基团、或者 0、1 或 2 个卤素取代。
     在本发明的一些实施方案中， Ar 是苯基，被一个卤素例如一个 F 取代。
     在本发明的一些实施方案中， G 选自
     在本发明的一些实施方案中， G 选自
     在本发明的一些实施方案中， G 选自
     在本发明的一些实施方案中， Q 选自苯基，环丙基，异20唑基，环己基，噻唑基，四氢呋喃，吡唑基，环丁基和环戊基，任选被零至两个 R 取代。
     在本发明的一些实施方案中， Q 是苯基，任选被一或两个 R20 取代。
     在本发明的一些实施方案中， Q 是环丙基。
     在本发明的一些实施方案中， Q 是四氢呋喃。
     在本发明的一些实施方案中， Q 是任选被一个 R20 取代的吡唑基。 在本发明的一些实施方案中，每个 R20 独立地选自 ：-P( ＝ O)(Me)2，甲基， 卤素 ( 例如 F)，三卤甲基，甲氧基， -C(O)NH2，杂芳基， -COOH， -SO2HN2， -C(O) NH2， -COOMe， -C(O)N(H)(Me)， -C(O)N(Me)2 和 -SO2Me。
     在本发明的一些实施方案中，Q 被一个选自下列的 R20 取代 ：-P( ＝ O)(Me)2， 甲基和甲氧基。
     在本发明的一些实施方案中，Q 是被一个 -P( ＝ O)(Me)2 取代的苯基。 在本发
     明的一些实施方案中， Q 是被一个甲基取代的吡唑基、异
     唑基或噻唑基。在本发明的一些实施方案中， D 是苯基，吡啶基，咪唑基或四氢吡啶基，每个 被 1 或 2 个独立选择的 R38 基团取代 ；
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被零至四个卤素取代 ；和 G 选自
     其中 Q 任选被 0 至 4 个独立选择的 R20 取代。
     在本发明的一些实施方案中，
     D 是被下列取代的吡啶基 ：-(CH2)jNR39(CH2)nR36， -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2) 99 39 i]x(CH2)jR ， -C0-C6 烷基 -( 任选被一或两个氧代基团取代的杂环 )， -(CH2)jNR (CH2) 39 99 39 jCOOH， -(CH2)jNR CH(CH3)(CH2)jR 或 -(CH2)jNR (CH2)j(CH)(NH2)(COOH) ；
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团 ( 例如一个 F) 取代的苯基 ；和 G是
     其中 Q 任选被 0 至 4 个独立选择的 R20 取代。
     在本发明的一些实施方案中，
     D 是被下列取代的吡啶基 ：-(CH2)jNR39(CH2)nR36， -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2) 99 39 i]x(CH2)jR ， -C0-C6 烷基 -( 被一个氧代基团取代的杂环 )， -(CH2)jNR (CH2)jCOOH 或 -(CH2)jNR39(CH2)j(CH)(NH2)(COOH) ；
     R99 是 OMe ；
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中
     R13 是 H ；和
     Q 是 任 选 被 1 或 2 个 独 立 选 择 的 R20 取 代 的 苯 基， 其 中 每 个 R20 独 立 地 选 自 -P( ＝ O)(Me)2， 甲 基， 卤 素 ( 例 如 F)， 三 卤 甲 基， 甲 氧 基， -C(O)NH2， 杂 芳 基， -COOH， -SO2HN2， -C(O)NH2， -COOMe， -C(O)N(H)(Me)， -C(O)N(Me)2 和 -SO2Me，或 Q 是任选被甲基取代的吡唑基，或 Q 是环丙基，环丁基或四氢呋喃，或 Q
     是被甲基取代的异唑基。在本发明的一些实施方案中，
     D 是被下列取代的吡啶基 ：-(CH2)jNR39(CH2)nR36， -(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2) 99 39 i]x(CH2)jR ， -C0-C6 烷基 -( 被一个氧代基团取代的杂环 )， -(CH2)jNR (CH2)jCOOH 或 -(CH2)jNR39(CH2)j(CH)(NH2)(COOH) ；
     R99 是 OMe ；
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中 R13 是 H ；和 Q 是环丙基。 在本发明的一些实施方案中， D 是被 -C0-C6 烷基 -( 任选取代的杂环 ) 取代的吡啶基 ； M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中
     R13 是 H ；和
     Q 是环丙基。
     在本发明的一些实施方案中，
     D 是被 -C0-C6 烷基 -( 任选被一或两个氧代基团取代的杂环 )( 例如 -CH2-( 被 0、1 或 2 个氧代基团取代的 5 或 6 元杂环基 )) 取代的吡啶基 ；
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中 R13 是 H ；和 Q 是环丙基。 在本发明的一些实施方案中，
     D 是被下列取代的吡啶基 ：
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中 R13 是 H ；和 Q 是环丙基。 在本发明的一些实施方案中， D 是被下列取代的吡啶基 ：-(CH2)jNR39(CH2)i[O(CH2)i]x(CH2)jR99 ； R99 是 OMe ；
     M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中 R13 是 H ；和 Q 是环丙基。 在本发明的一些实施方案中， D 是被一个 C1-C6 烷基和一个 -(CH2)jNR39(CH2)nR36 取代的咪唑基。 M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团 ( 例如一个 F) 取代的苯基 ；和 G是
     其中 Q 任选被 0 至 4 个独立选择的 R20 取代。 在本发明的一些实施方案中， D 是被一个 C1-C6 烷基和一个 -(CH2)jNR39(CH2)nR36 取代的咪唑基。 M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中 R13 是 H ；和 Q 是任选被 0 至 4 个独立选择的 R20 取代的苯基。 在本发明的一些实施方案中， D 是被一个 C1-C6 烷基和一个 -(CH2)jNR39(CH2)nR36 取代的咪唑基。 M是 Z 是 -O- ； Ar 是任选被 0 至 4 个 R2 基团取代的苯基，例如，被一个 F 取代的苯基 ；和 G是
     其中 R13 是 H ；和 Q 是任选被一或两个独立选自下列的基团取代的苯基 ：-P(O)Me2，甲基，卤素 唑基 )，( 例如 F)，三卤甲基 ( 例如三氟甲基 )，甲氧基， -C(O)NH2 和杂芳基 ( 例如 或 Q 是环丙基。
     上式的化合物通常可以按照下列反应路线制备。 上式化合物的互变异构体和溶 剂合物 ( 例如水合物 ) 也在本发明范围内。 溶剂化的方法在本领域通常是已知的。 因 此，本发明的化合物可以是游离、水合物或盐形式，并且可以利用下面反应路线中所说 明的方法来获得。
     下列实施例和制备描述了制备和使用本发明的方法，并且是说明性的，而不是 限制性的。 应该理解，可以有属于如本文附加权利要求所定义的本发明的精神和范围内 的其它实施方案。
     按照本发明的化合物包括但不局限于下面实施例中所描述的那些化合物。 化合 物使用 Chemdraw Ultra 10.0 版或 8.0.3 版 ( 可通过 Cambridgesoft.com，100Cambridge Park Drive， Cambridge， MA02140 获得 ) 命名，或是由此衍生而来的。
     本文提供的数据显示了本发明的激酶抑制剂的抑制效果。 这些数据使人们可以 合理地预期，本发明的化合物不但可以用于抑制激酶活性、蛋白酪氨酸激酶活性或其实 施方案 ( 例如， VEGF 受体信号传导 )，而且可以用作治疗增殖疾病 ( 包括癌症和肿瘤生 长 ) 和眼科疾病、障碍和病症的治疗剂。
     合成反应路线和试验方法
     可以使用本领域普通技术人员已知的方法、按照下面说明的反应路线或实施例 来制备本发明的化合物。 这些反应路线用来说明可用于制备本发明化合物的一些方法。 本领域技术人员能够认识到，可以使用其它普通的合成方法。 本发明的化合物可以由可 商购的起始组份来制备。 对于起始组份，可以进行任何种类的替代，以便按照本领域技术人员清楚了解的方法获得本发明的化合物。 具体实施例
     反应路线 1
     (2-(7-(4- 氨基 -2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪 唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (46)
     步骤 1.5-(1，3- 二烷 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 (38)[Shafiee A.， RastkaryN.， Jorjani M.， Shafaghi B.， Arch.Pharm.Pharm.Med.Chem.2002，2，69-76]
     向 1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 甲醛 (2.9g，26.3mmol) 的甲苯 (20mL) 溶液中加入丙 烷 -1，3- 二醇 (4.01g，52.7mmol) 和 CSA(0.306g，1.317mmol)，并将反应混合物加热至 回流，保持 24 小时，同时共沸除去析出的水。 将反应混合物冷却至 RT，用 DCM 稀释， 用 NaHCO3 溶液洗涤。 然后用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱色谱纯化 (80％ EtOAc/ 己烷至 EtOAc)，得到 38(2.53g，57 ％产率 ) 黄色油状物，其静置时凝固为黄色固体。MS(m/z) ：169.2(M+H)。
     步骤 2.5-(1，3- 二烷 -2- 基 )-2- 碘 -1- 甲基 -1H- 咪唑 (39)在 -78 ℃，向 38(295g，1.754mmol) 的无水 THF(10mL) 溶液中加入正丁基锂 (0.772mL，1.929mmol，2.5M 溶液，在己烷中 )，并搅拌反应混合物 20 分钟。 慢慢地逐 滴加入碘 (445mg，1.754mmol) 的 THF(2mL) 溶液，同时保持温度在 -78℃，进一步搅拌 反应混合物 30 分钟，通过加入水猝灭反应，然后用 EtOAc 提取。 用硫代硫酸钠溶液洗涤 有机相，分离，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱色谱纯化 (20％ EtOAc/ 己烷 )，得到 39(305mg，59％产率 ) 白色固体。 MS(m/z) ：294.1(M+H)。
     步骤 3.2-(5-(1，3- 二烷 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 )-7- 氯噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (40)
     在 -78 ℃， 向 7- 氯 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 (1)[Klemm， L.H. ；Louris， J.N. ； Boisvert ， W. ；Higgins ， C. ；Muchiri ， D.R. ；J.Heterocyclic Chem. ， 22 ， 1985 ， 1249-1252](11.7g，，69.0mmol) 的 THF(300mL) 溶 液 中 加 入 正 丁 基 锂 (30.46mL， 76mmol，2.5M， 在 己 烷 中 ) 溶 液， 并 搅 拌 反 应 混 合 物 10 分 钟。 加 入 ZnCl2 溶 液 (76.15mL，76mmol，1.0M， 在 Et2O 中 )， 并 在 RT 搅 拌 混 合 物 10 分 钟。 加 入 Pd(PPh3)4(2.287mg，0.104mmol) 以及 39(5.82g，19.79mmol) 的 THF(20mL) 溶液，并在 N2 氛围下将反应混合物加热至回流，保持 4 小时。 然后将反应冷却至 RT，用氢氧化铵和 EtOAc 稀释。 收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 将得到的物质用 Et2O 研磨， 得到标题化合物 40(5.79g，87％产率 ) 白色固体。 MS(m/z) ：336.1(M+H)。
     步骤 4.2-(5-(1，3- 二烷 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 )-7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (41)
     将 40(5.9g，17.57mmol)、2- 氟 -4- 硝 基 苯 酚 (5.52g，35.1mmol) 和 NaHCO3(1.346g，16.02mmol) 的 混 合 物 在 Ph2O(7mL) 中 加 热 至 180 ℃， 保 持 4 小 时。 将反应混合物冷却至 RT，用 DCM 稀释，过滤，浓缩。 用柱色谱纯化残余物 ( 洗脱液 EtOAc)，得到 41(2.5g，31％产率 ) 黄色固体。 MS(m/z) ：457.1(M+H)。
     步骤 5.2-(5-( 二甲氧基甲基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 )-7-(2- 氟 -4- 硝基苯 氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (42)
     向 41(2.5g，5.48mmol) 的 MeOH(200mL) 溶 液 中 加 入 CSA(127mg， 0.548mmol)，并将反应混合物加热至回流，保持 5 小时。 然后将其冷却至 RT，并加入固 体 NaHCO3。 过滤混合物，浓缩滤液至干。 将残余的固体溶于 DCM 中，用水洗涤，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 将得到的固体用 Et2O 研磨，得到 42(1.8g，74％产率 )，其 不用更进一步纯化就可以使用。 MS(m/z) ：445.1(M+H)。
     步 骤 6.2-(7-(2- 氟 -4- 硝 基 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲 基 -1H- 咪唑 -5- 甲醛 (43)
     向 42(1.8g，4.05mmol) 的 丙 酮 (100mL) 和 水 (100mL) 溶 液 中 加 入 稀 HCl(20mL，2M，40.0mmol)，并在 RT 搅拌反应混合物过夜。 然后将它浓缩至干。 将 残余的固体溶于 DCM 中，用水洗涤，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 将得到的固体 用 Et2O 研磨，得到 43(1.3g，81 ％产率 )，其不用另外纯化就可以使用。 MS(m/z) ： 399.2(M+H)。步骤 7.N-((2-(7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 )-1- 甲 基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-2- 甲氧基乙胺 (44)
     在室温，向 43(1.3g，3.26mmol) 的无水 DCM(50mL) 悬浮液中加入 2- 甲氧基 乙胺 (1.226g，16.32mmol)、乙酸 (0.98g，16.32mmol) 和三乙酰氧基硼氢化钠 (3.46g， 16.32mmol)，并在 RT 搅拌反应混合物 24 小时。 然后将其用额外的 DCM 稀释，用饱和 NaHCO3 溶液洗涤，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩至干，得到 44(1.5g，100％产率 )，为黄 色油状物，其是不用另外纯化就可以在下一步使用的粗品。 MS(m/z) ：458.2(M+H)。
     步 骤 8.(2-(7-(2- 氟 -4- 硝 基 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲 基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (45)
     在室温，向 44(1.5g，3.28mmol) 的 DCM(50mL) 溶液中加入 Boc2O(1.073mg， 4.92mmol)，并在 RT 搅拌反应混合物过夜。 将混合物浓缩至干，用柱色谱纯化残余物 ( 洗脱液 EtOAc)，得到 45(1.3g，71％产率 )，为黄色固体。 MS(m/z) ：558.2(M+H)。
     步 骤 9.(2-(7-(4- 氨 基 -2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲 基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (46)
     向 45(1.1g，0.717mmol) 的 MeOH(30mL) 和 水 (10mL) 溶 液 中 加 入 氯 化 铵 (211mg，3.95mmol) 和锌 (1.61g，17.76mmol)，并将反应混合物加热至回流，保持 24 小 时。 将反应混合物冷却至 RT，然后浓缩至干。 将残余物在 DCM 和水之间分配，收集有 机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩，得到标题化合物 46(1.04g，100％产率 )，其是不用 额外纯化就可在下一步使用的粗品。 MS(m/z) ：528.1(M+H)。
     反应路线 9
     (6-(7-(4- 氨基 -2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基(2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (126)
     步骤 1.N-((6- 溴吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-2- 甲氧基乙胺 (143)
     向 6- 溴吡啶 -3- 甲醛 (5g，26.9mmol) 的 DCM(40mL) 溶液中加入 2- 甲氧基乙 基胺 (2.80mL，32.3mmol)。 10 分钟之后，将三乙酰氧基硼氢化钠 (7.98g，37.6mmol) 加 入到混合物中，并在室温搅拌 17 小时。 将 DCM(100mL 水 (50mL 和 NH4Cl(50mL) 加入 到反应混合物中。 收集有机相，将水层用 DCM(3x100mL) 萃取。 用盐水洗涤合并的有机 溶液，并减压浓缩。 用快速柱色谱纯化残余物，洗脱液 98/2 至 95/5DCM/MeOH，得到 标题 143(2.958g，45％产率 )，为棕色油状物。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm) ： 8.31(dd， J ＝ 2.6，0.6Hz，1H)，7.70(dd， J ＝ 8.2，2.6Hz，1H)，7.58(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)，3.69(s，2H)，3.37(t， J ＝ 5.8Hz，2H)，3.22(s，3H)，2.60(t， J ＝ 5.8Hz，2H)。 MS(m/z) ：245.1(M+H)。
     步骤 2.(6- 溴吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (144)
     向 143(13.072g，53.3mmol) 的 THF(40mL) 溶 液 中 加 入 焦 碳 酸 二 叔 丁 基 酯 (di-tert-butyl dicarbonate)(14.86mL，64.0mmol)。 将混合物在室温搅拌 16 小时，减压 浓缩。 用快速柱色谱纯化残余物，洗脱液己烷 /EtOAc ：7/3、6/4、5/5，得到标题化合 物 144(16.196g，88％产率 )，为黄色油状物。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm) ： 8.26(dd，J ＝ 2.4，0.8Hz，1H)，7.64-7.58(m，2H)，4.39(s，2H)，3.40-3.33(m，4H)， 3.20(s，3H)，1.41-1.31(m，9H)。 MS(m/z) ：345.2(M+H)。
     步骤 3.(6-(7- 氯噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (145)
     在 -78℃，向 7- 氯噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (1)(8.84g，52.1mmol) 的 THF(100mL) 溶 液 中 加 入 正 丁 基 锂 (20.86mL，52.1mmol)。 30 分 钟 之 后， 在 -78 ℃ 加 入 氯 化 锌 (52.1mL，52.1mmol)(1M，在乙醚中 )，并将反应混合物加热至室温。 1 小时之后，加 入四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (1.004g，0.869mmol) 和 144(6g，17.38mmol) 的 THF(25mL) 溶 液，并将混合物加热至回流，保持 1 小时。 然后将其在饱和 NaHCO3 水溶液和 EtOAc 之 间分配。 收集有机层，用 EtOAc(3x100mL) 萃取水层。 用盐水洗涤合并的有机层，并减 压蒸发。 用快速柱色谱纯化残余物，洗脱液己烷 /EtOAc ：5/5、3/3、0/10，得到化合物 145(5.41g，72％产率 )。 1HNMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：8.65(d， J ＝ 5.1Hz， 1H)，8.52(d， J ＝ 1.6Hz，1H)，8.39(s，1H)，8.27(d， J ＝ 8.0Hz，1H)，7.80(dd， J ＝ 8.1，2.1Hz，1H)，7.58(d， J ＝ 5.1Hz，1H)，4.48(s，2H)，3.43-3.35(m，4H)， 3.22(s，3H)，1.43-1.33(m，9H)。 MS(m/z) ：434.2(M+H)。
     步骤 4.(6-(7-(4- 氨基 -2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (126)
     向 4- 氨基 -2- 氟苯酚 (1.933g，15.21mmol) 的 DMSO(30mL) 溶液中加入叔丁醇 钾 (2.017g，17.97mmol)。 30 分钟之后，加入氯化物 145(6g，13.83mmol)，并在 100℃ 将反应混合物加热 45 分钟。 将混合物冷却，然后在 40-45℃倾倒在水 (250mL) 中，搅 拌 30 分钟。 过滤收集沉淀，用水 (2x30mL) 洗涤，干燥过夜。 用 Et2O(50mL) 将粗品 固体研磨 1 小时，得到标题化合物 126(4.18g，58 ％产率 )，为褐色固体。 MS(m/z) ： 525.2(M+H)。反应路线 14实施例 179
     1-(3-( 二甲基膦酰基 ) 苯基 )-3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡 啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (289)
     步骤 1.1-( 二甲基膦酰基 )-3- 硝基苯 (286)
     在耐压瓶中，在氮气氛围中，在室温下，向 1- 碘 -3- 硝基苯 (2.4g，9.6mmol)
     的 无 水 1，4- 二烷 (24mL) 溶 液 中 加 入 二 甲 基 膦 氧 化 物 [WO2005/009348](1.5g，19.2mmol)、 Pd2(dba)3(0.44g，0.48mmol)、4，5- 双 ( 二苯基膦 )-9，9- 二甲基氧杂蒽 (Xantphos)(0.56g，0.96mmol) 和碳酸铯 (4.38g，13.5mmol)。 通过向溶液中鼓入氮气 (10 分钟 ) 将混合物脱气。 将耐压瓶封闭，并在 90℃加热 3 小时。 减压除去溶剂，通 过 Biotage 纯化残余物 ( 线性梯度 0-20％，甲醇 / 乙酸乙酯 ；25M 柱 )，得到标题化合物 286，为褐色固体 (1.52g，7.63mmol，79％ )。 MS(m/z) ：200.1(M+H)。
     步骤 2.3-( 二甲基膦酰基 ) 苯胺 (287)
     在氮气氛围中，在室温下，向化合物 286(1.5g，7.5mmol) 的甲醇 (62mL) 和 水 (12mL) 溶液中加入氯化铵 (0.604g，11.3mmol) 和铁 (1.68g，30.1mmol)。 将得到的 混合物加热至回流，保持 30 分钟，然后通过硅藻土过滤。 用甲醇冲洗硅藻土垫。 将 滤液和洗液合并，浓缩，通过 Biotage 纯化残余物 ( 线性梯度 0-20 ％，甲醇 / 二氯甲 烷 ；25M 柱 )，得到化合物 287，为黄色固体 (1.27g，7.51mmol，定量 )。 MS(m/z) ： 170.1(M+H)。
     步骤 3.(6-(7-(4-(3-(3-( 二甲基膦酰基 ) 苯基 ) 脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3， 2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (288)在氮气氛围中，在 -20℃，向化合物 126( 反应路线 6 或 9)(200mg，0.381mmol) 的无水四氢呋喃 (8mL) 溶液中加入 4- 硝基苯基氯甲酸酯 (115mg，0.572mmol)。在 -20℃ 搅拌反应混合物 2 小时。 在 -20℃，加入 3-( 二甲基膦酰基 ) 苯胺 287(97mg，0.57mmol) 和 N， N ′ - 二异丙基乙胺 (0.200mL，1.14mmol) 在无水四氢呋喃 (2mL) 和无水 N， N′ - 二甲基甲酰胺 (2mL) 的混合物中的溶液，并使反应混合物慢慢地升温至室温，额外 继续搅拌 16 小时。 减压除去溶剂 ；用乙酸乙酯稀释残余物，用饱和氯化铵水溶液洗涤， 用无水硫酸钠干燥，浓缩。 通过 Biotage 纯化 ( 线性梯度 0-20％，甲醇 / 二氯甲烷 ；25M 柱 )，得到化合物 288(230mg，0.32mmol，84％ )。 MS(m/z) ：720.4(M+H)。
     步骤 4.1-(3-( 二甲基膦酰基 ) 苯基 )-3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (289)
     在氮气氛围中，在室温下，向化合物 288(230mg，0.32mmol) 的二氯甲烷 (7mL) 溶液中加入三氟乙酸 (2.5mL，32mmol)。 在室温下将反应混合物搅拌 16 小时。 减 压除去溶剂，加入饱和碳酸氢钠水溶液。 用乙酸乙酯萃取水相 (3X)，将合并的有机 层浓缩。 通过 Biotage 纯化残余物 ( 线性梯度 0-20 ％，甲醇 / 二氯甲烷 ；25M 柱 )， 得到化合物 289，为类白色固体 (75.3mg，0.122mmol，38.0 ％ )。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：9.15(s，1H)，9.06(s，1H)，8.57(d， J ＝ 1.6Hz，1H)，8.53(d， J ＝ 5.6Hz，1H)，8.31(s，1H)，8.23(d，J ＝ 8.0Hz，1H)，7.92-7.83(m，2H)，7.76(dd， J ＝ 13.2，2.4Hz，1H)，7.67-7.62(m，1H)，7.49-7.42(m，2H)，7.41-7.33(m，1H)， 7.32-7.26(m，1H)，6.67(d，J ＝ 5.6Hz，1H)，3.78(s，2H)，3.54-3.34(2H，隐藏在水信 号下面 )，3.24(s，3H)，2.65(t， J ＝ 5.6Hz，2H)，1.65(d， J ＝ 13.2Hz，6H)。 MS(m/ z) ：620.4(M+H)。
     实施例 180
     1-(4-( 二甲基膦酰基 ) 苯基 )-3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡 啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (290)
     按照上面化合物 289 描述的方法 ( 实施例 179)，获得化合物 290。 化合物 290 和化合物 295-300 的特征提供于表 1 中。
     表1
     反应路线 16实施例 202
     步 骤 1.(2-(7-(2- 氟 -4-(3- 异 丙 基 脲 基 ) 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (314)
     在微波反应器中，将苯胺 46(200mg，0.379mmol) 和 2- 异氰酰丙烷 (64.5mg， 0.758mmol) 的 反 应 混 合 物 加 热 至 100 ℃， 保 持 15 分 钟。 将 反 应 混 合 物 直 接 装 填 到 Biotage(Silicycle， HR，12g 柱，50-100 ％ EA/ 己 烷， 然 后 MeOH/EA，0-20 ％ ) 上。 收集馏份，得到目标产物 314(150mg，0.245mmol，64.6 ％产率 )，为白色固体。 MS ： 613(MH)+，非常弱的信号。
     步骤 2.1-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-3- 异丙基脲 (315)
     在 室 温 下， 将 脲 314(150mg，0.245mmol) 和 TFA(1mL，12.98mmol) 的 DCM(20mL) 溶液搅拌 4 小时，并浓缩。 将残余物在 EtOAc/NaHCO3 饱和溶液之间分 配。 过滤收集固体，并与有机层合并。 浓缩混合物，并通过 Biotage 纯化残余物 (EA/ MeOH 0-40％，12g Silicycle HR 柱 )。收集馏份，得到目标产物 315(70mg，0.137mmol， 55.8 ％ 产 率 )， 为 白 色 固 体。 1HNMR(dmso-d6)δ(ppm)1H ：8.67(s，1H)，8.48(d， 1H， J ＝ 5.5Hz)，7.91(s，1H)，7.65(dd，1H， J1 ＝ 13.7Hz， J2 ＝ 2.6Hz)，7.32(t， 1H， J ＝ 9.0Hz)，7.07(m，2H)，6.63(d，1H， J ＝ 5.5Hz)，6.13(d，1H， J ＝ 7.6Hz)， 4.04(s， br，2H)，3.08(s，3H)，3.72(m，1H)，3.47(t，2H， J ＝ 5.2Hz)，3.24(s， 3H)，2.94(m，2H)，1.07(s，3H，1.05(s，3H)( 推测是单 TFA 盐 )。 MS ：513.4(MH)+
     反应路线 17
     步骤 4.4-(2-(5-(1，3- 二 步骤 1.2- 溴 -5-(1，3- 二烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基 烷 -2- 基 ) 吡啶 (316)氧基 )-3- 氟苯胺 (319)
     向 6- 溴吡啶 -3- 甲醛 (25g，134mmol) 的甲苯 (130mL) 溶液中加入 1，3- 丙二醇 (20.45g，269mmol) 和 10- 樟脑磺酸 (3.12g，13.44mmol)。 将反应混合物加热至回流，同 时共沸除去析出的水，保持 50 分钟，冷却至室温，并浓缩。 将残余物在 EtOAc(150mL) 和饱和 NaHCO3 水溶液 (100mL) 之间分配。 收集有机相，用 EtOAc(2x150mL) 萃取水 相。 用盐水 (100mL) 洗涤合并的有机馏份，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩，得到褐色 固体，将其用 Et2O 和己烷 (10/200mL) 研磨，得到中间体 316(27.7g，84 ％产率 )，为 米 色 固 体。 MS(m/z) ：244.1，246.1(M+H)。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)(ppm) ： 8.40(d， J ＝ 2.4Hz，1H)，7.35(dd， J ＝ 8.0，2.4Hz，1H)，7.66(dd， J ＝ 8.0，0.4Hz， 1 H ) ， 5 . 61( s ， 1 H ) ， 4 . 15( ddd ， J ＝ 11 . 8 ， 5 . 0 ， 1 . 2 Hz ， 2 H ) ， 3 . 98-3 . 91( m ， 2 H ) ， 2.028-1.95(m，1H)，1.46(d 五重峰， J ＝ 13.2，1.2Hz，1H)。
     步骤 2.2-(5-(1，3- 二烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-7- 氯噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (317)在 -5℃ /-10℃，用 50 分钟向 7- 氯噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (1)(13.33g，79mmol) 的 THF(204mL) 溶液中加入正丁基锂 (2.5M，在己烷中，31.6mL，79mmol)。 30 分钟 之后，在 -5℃ /-10℃，用 50 分钟加入氯化锌的醚溶液 (1M，79mL，79mmol)，并将反 应混合物加热至室温。 45 分钟之后，加入 2- 溴 -5-(1，3- 二 烷 -2- 基 ) 吡啶 (316) (15.98g，65.5mmol) 和四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (2.27g，1.964mmol) 的 THF(28mL) 溶液，并 将混合物加热至回流，保持 2 小时，冷却至室温，浓缩。 将残余物用 DCM(600mL)、水 (500mL) 和 NH4OH(100mL) 稀释，在室温搅拌 1 小时，并分离各相。 用 DCM(2x100mL)萃取水相 ；用无水 Na2SO4 干燥合并的有机相，过滤，浓缩。 用 MTBE(150mL) 研磨残余 物，得到中间体 317(12.796g，59％产率 )，为米色固体。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ(ppm) ：8.66-8.65(m，2H)，8.43(d， J ＝ 0.8Hz，1H)，8.30(d， J ＝ 8.4Hz，1H)， 7.94(d， J ＝ 8.4Hz，1H)，7.59(dd， J ＝ 5.0，0.6Hz，1H)，5.68(s，1H)，4.19(dd， J ＝ 11.6，4.8Hz，2H)，3.99(t， J ＝ 11.4Hz，2H)，2.07-2.01(m，1H)，1.49(d， J ＝ 13.2Hz，1H)。 MS(m/z) ：333.1(M+H)。
     步骤 3.2-(5-(1，3- 二烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 )-7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 (318)
     向 317(22.48g，67.5mmol) 的 苯 基 醚 (65mL) 悬 浮 液 中 加 入 碳 酸 钠 (14.32g， 135mmol) 和 2- 氟 -4- 硝基苯酚 (15.92g，101mmol)。 将反应混合物在 180 ℃加热 2 小 时，冷却至 40 ℃，用 DCM(300mL) 稀释，在室温搅拌 15 分钟，过滤。 收集滤液，浓 缩至最小体积 ；加入 Et2O(200mL)，并将形成的悬浮液搅拌 30 分钟。 过滤收集固体物 质，得到中间体 318(25.20g，55.6mmol，82％产率 )，为米色固体。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：8.63-8.62(m，2H)，8.48(dd， J ＝ 10.6，2.6Hz，1H)，8.43(s， 1H)，8.31(d， J ＝ 8.0Hz，1H)，8.21(dt， J ＝ 8.8，1.2Hz，1H)，7.94(dd， J ＝ 8.4， 2.0Hz，1H)，7.71(t， J ＝ 8.6Hz，1H)，6.98(d， J ＝ 5.2Hz，1H)，5.67(s，1H)， 4.19(dd，J ＝ 10.8，5.2Hz，2H)，3.98(td，J ＝ 12.0，2.0Hz，2H)，2.08-1.99(m，1H)， 1.46(d， J ＝ 13.6Hz，1H)。 MS(m/z) ：454.2(M+H)。
     步骤 4.4-(2-(5-(1，3- 二烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯胺 (319)
     方法 A
     向 318(10g，22.05mmol) 的 EtOH(216mL) 和 水 (108mL) 悬 浮 液 中 加 入 铁 粉 (10.47g，187mmol) 和氯化铵 (1.015g，18.97mmol)。 将混合物加热至回流，保持 30 分 钟，过滤，同时加热，并用乙醚 (200mL) 洗涤固体。 将滤液和洗液合并，浓缩，得到 标题化合物 319(9.62g，99％产率 )，为米色固体。 该物质不用额外纯化就可以在下一步 ( 反应路线 18) 中使用。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：8.64(d， J ＝ 2.0Hz， 1H)，8.51(dd， J ＝ 5.6，2.0Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.28(dd， J ＝ 8.0，0.8Hz，1H)， 7.93(dd， J ＝ 8.4，2.0Hz，1H)，7.13(t， J ＝ 9.0Hz，1H)，6.61(dd， J ＝ 5.4，0.6Hz， 1H)，6.54(dd， J ＝ 13.2，2.4Hz，1H)，6.46(ddd， J ＝ 8.8，2.8，0.6Hz，1H)，5.67(s， 1H)，5.56(s，2H)，4.19(dd，J ＝ 10.6，5.0Hz，2H)，3.98(td，J ＝ 12.0，2.5Hz，2H)， 2.09-1.99(m，1H)，1.49(dt， J ＝ 13.2，1.3Hz，1H)。 MS(m/z) ：424.1(M+H)。 方法 B
     向 4- 氨基 -2- 氟苯酚 (7.42g，58.4mmol) 的 DMSO(65mL) 溶液中加入叔丁醇钾 (7.75g，69.0mmol)。 30 分钟之后，加入中间体 317(17.67g，53.1mmol)，在 100℃加热 反应混合物 1.5 小时，冷却至室温，在 40-45℃倾倒在水 (300mL) 中，搅拌 30 分钟。 过 滤收集固体，用水 (2x30mL) 洗涤，干燥 2 小时。 用乙醚 (60mL) 研磨该物质，得到标题 化合物 319(19.80g，88％产率 )，为褐色固体。 MS(m/z) ：424.1(M+H)。
     反应路线 18
     实施例 203
     1-(4-(2-(5-5，8，11，14- 四氧杂 -2- 氮杂十五烷基吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3， 2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基 )-3- 环丙基脲 (323)
     步骤 1 ：1-(4-(2-(5-(1，3- 二烷 -2- 基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基 )-3- 环丙基脲 (320)
     将 100mL 圆 底 烧 瓶 装 入 319(0.55g，1.3mmol) 和 DIPEA(0.91mL，5.2mmol) ( 在无水四氢呋喃 (55mL) 中 )，得到无色溶液。 将反应混合物冷却至 0℃，然后加入三 光气 (0.154g，0.520mmol)。 在 0℃搅拌反应混合物 1 小时，然后加入环丙胺 (1.8mL， 26mmol)。 最后，将反应混合物在室温搅拌 3 小时，然后浓缩。 将残余物在水和乙酸 乙酯之间分配，形成稠白色固体。 将其通过抽滤分离，用水和乙酸乙酯冲洗，真空干 燥，得到粗品 320(0.65g，1.2mmol，99％产率 )，其不用进一步纯化就可以使用。 MS ： 507.2(M+H)。
     步骤 2 ：1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5- 甲酰基吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (321)
     将 320(0.65g，1.3mmol) 的 5 ∶ 2 ∶ 1 丙酮 / 水 /TFA(100mL) 悬浮液加热至回 流，保持 6 小时。 然后将混合物冷却，浓缩。 将得到的固体残余物悬浮在水中，通过抽 滤分离，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到 321(0.49g，1.1mmol，85％产率 )，其不用进 一步纯化就可以在下一步使用。 MS ：449.0(M+H)。
     步骤 3.2，5，8，11- 四氧杂十三 -13- 胺 (322)
     将四乙二醇一甲基醚 (10.0mL，47.5mmol)、邻苯二酰亚胺 (7.20g，48.9mmol) 和三苯基膦 (12.8g，48.8mmol) 悬浮在无水四氢呋喃 (200mL) 中，得到无色悬浮液。 通过注射器逐滴加入偶氮二羧酸二乙基酯 (8.0mL，50.5mmol)，并在室温搅拌混合物 18 小 时。 然后加入乙醇 (50mL)，进一步搅拌混合物 30 分钟，然后减压浓缩。 将残余物溶于 1 ∶ 1 乙酸乙酯 / 己烷 (100mL) 中，在 0℃搅拌 2 小时，并通过抽滤将得到的白色沉淀除 去。 浓缩滤液 (13.5g，40.0mmol，84％产率 )，其不用进一步纯化就可以在下一步使用。
     将 上 述 粗 品 溶 于 乙 醇 (100mL) 中， 得 到 无 色 溶 液。 加 入 水 合 肼 (2.3mL， 40mmol)，并将混合物加热至回流，保持 4 小时。 然后将其冷却，加入浓 HCl(10.0mL)， 并将混合物回流 1 小时以上。 然后将其冷却至室温，通过抽滤除去白色沉淀，浓缩滤 液。 在水和乙醚之间分配残余物。 用乙醚萃取水相 ( 有机相，通过 MS 分析含有大部 分 PPh3O(MS)，将其除去 )，然后用 3M NaOH(50mL) 碱化至 pH ＝ 13。 用氯化钠饱和 水相，用二氯甲烷 ( ～ 10x50mL) 重复萃取。 将有机萃取物干燥 (MgSO4)，浓缩，得到 322(7.0g，33.8mmol，84％产率，71％，2 步 )。 该物质不用进一步纯化就可以在随后的 步骤中使用。 MS(m+1) ＝ 208.1。
     步骤 4 ：1-(4-(2-(5-5，8，11，14- 四氧杂 -2- 氮杂十五烷基吡啶 -2- 基 ) 噻吩 并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基 )-3- 环丙基脲 (323)
     向 甲 醛 321(0.45g，1.0mmol) 和 胺 322(1.4g，6.75mmol) 的 二 氯 甲 烷 (75mL) 悬浮液中加入乙酸 (0.12mL，2.0mmol)。 搅拌反应混合物 1 小时，然后加入三乙酰氧 基硼氢化钠 (0.64g，3.0mmol)，并将得到的混合物搅拌 18 小时。 然后将混合物在水和 二氯甲烷之间分配，用 1M NaOH 和盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，过滤，减压浓缩。 通 过 Gilson 反 相 HPLC 纯 化残余物 (35-75 ％ MeOH/ 水， Aquasil C18，30 分 钟 )， 并 冷 冻干燥。 将纯产物 ( 含有一些甲酸 (HPLC)) 在热二氯甲烷和 1M NaOH 之间分配。 干 燥 (MgSO4) 有机相，过滤，浓缩，得到标题化合物 323(0.264g，0.413mmol，41.1 ％产 率 )。 1HNMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ：8.80(s，1H) ；8.57(s，1H) ；8.51(d， J ＝ 5.5， 1H) ；8.31(s，1H) ；8.23(d， J ＝ 8.0，1H) ；7.89(dd， J ＝ 8.0，1.5，1H) ；7.73(dd， J ＝ 13.5，2.2，1H) ；7.38(t， J ＝ 9.0，1H) ；7.20(d， J ＝ 8.2，1H) ；6.67(d， J ＝ 2.7， 1H) ；6.64(d， J ＝ 5.5，1H) ；3.78(s，2H) ；3.56-45(m，12H) ；3.41(t， J ＝ 5.7， 2H) ；3.21(s，3H) ；2.66(d， J ＝ 5.7，2H) ；2.58-2.51(m，1H) ；0.66-0.62(m，2H) ； 0.44-0.41(m，2H)。 LRMS ：640.5(M+H)。
     反应路线 19
     实施例 204
     (S)-2- 氨基 -6-((6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基氨基 ) 己酸 (324)
     向 321(0.26g，0.58mmol) 和 N-Boc- 赖 氨 酸 (1.1g，4.6mmol) 的 二 氯 甲 烷 (75mL) 悬浮液中加入乙酸 (0.066mL，1.2mmol)。 搅拌反应混合物 1 小时，然后加入三 乙酰氧基硼氢化钠 (0.37g，1.7mmol)，并将得到的混合物搅拌 18 小时。 然后将混合物 在水和二氯甲烷之间分配，通过硅藻土抽滤除去固体沉淀。 产物主要是固体滤饼形式， 因此，通过用 1 ∶ 1 二氯甲烷 / 甲醇洗涤将其溶解。 将此溶液浓缩，并通过 Gilson 反相 HPLC 纯化残余物 (35-75％ MeOH/ 水，Aquasil C18，30 分钟 )，冷冻干燥，得到 BOC- 保 护的产物。 将其溶于二氯甲烷 (75mL) 和三氟乙酸 (3mL) 中，并在室温搅拌 3 小时。 浓缩混合物，通过 Gilson 反相 HPLC 纯化残余物 (35-75 ％ MeOH/H2O， Aquasil C18， 30 分钟 )，冷冻干燥，得到标题化合物 324(44mg，69 ％产率 )。 1H NMR(DMSO-d6) δ ( ppm ) 1H ：9 . 02( s ， 1 H ) ；8 . 66( s ， 1 H ) ；8 . 53( d ， J ＝ 5 . 3 ， 1 H ) ；8 . 35( s ， 1 H ) ； 8.28(d，J ＝ 8.4，1H) ；7.98(d，J ＝ 6.3，1H) ；7.72(dd，J ＝ 13.5，2.3，1H) ；7.37(t， J ＝ 9.0，1H) ；7.21(d，J ＝ 10.0，1H) ；6.89(s，1H) ；6.68(d，J ＝ 5.3，1H) ；4.00(s， 2H) ；2.75-2.70(m，2H) ；2.55-2.52(m，1H) ；2.45(m，1H) ；1.70-1.30(m，6H) ； 0.67-0.62(m，2H) ；0.44-0.40(m，2H)。 LRMS ：579.5(M+H)。
     反应路线 20实施例 205
     1- 环 丙 基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2-(2- 甲 氧 基 乙 氧 基 ) 乙 氨 基 ) 甲 基 ) 吡 啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲
     步骤 1 ：6-(7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 烟甲醛 (325)
     在 90℃，将 318(2.64g，5.82mmol) 在 80％乙酸水溶液 (42mL) 中的悬浮液加热 18 小时。 将反应混合物冷却至室温，用水稀释。 通过抽滤收集得到的沉淀。 将固体转 入圆底烧瓶中，通过与甲苯共沸蒸馏除去水 (4 次 )，真空干燥固体，得到 325(1.76g， 76％ )。 LRMS(M+H) ：396.3
     步骤 2 ：2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙胺 (326)
     将二乙二醇一甲醚 (9.8mL，83mmol)、邻苯二酰亚胺 (14.7g，100mmol) 和三苯 基膦 (26.2g，100mmol) 悬浮在无水四氢呋喃 (200mL) 中，得到无色悬浮液 ( 参见反应路 线 18，步骤 3)。 通过注射器逐滴加入偶氮二羧酸二乙基酯 (15.8mL，100mmol)，并在室 温搅拌混合物 18 小时。 然后加入乙醇 (50mL)，进一步搅拌混合物 30 分钟，然后减压浓 缩。 将残余物溶于 1 ∶ 1 乙酸乙酯 / 己烷 (100mL) 中，在 0℃搅拌 2 小时，并通过抽滤 将得到的白色沉淀除去。 浓缩滤液，其不用进一步纯化就可以在下一步中使用。
     将 上 述 粗 品 溶 于 乙 醇 (200mL) 中， 得 到 无 色 溶 液。 加 入 水 合 肼 (5.1mL， 104mmol)，并将混合物加热至回流，保持 4 小时。 然后将其冷却，加入浓 HCl(16mL)， 并将混合物回流 1 小时以上。 然后将其冷却至室温，通过抽滤除去白色沉淀，浓缩滤 液。 在水和乙酸乙酯之间分配残余物。 用乙酸乙酯萃取水相 ( 有机相，含有大部分 PPh3O(MS)，将其除去 )，然后用 3M NaOH(50mL) 碱化至 pH ＝ 13。 用氯化钠饱和水 相，用二氯甲烷 ( ～ 10x50mL) 重复萃取。 将有机提取物干燥 (MgSO4)，浓缩，得到 326(6.6g，56mmol，67％产率，2 步 )。 该物质不用进一步纯化就可以在随后的反应中使 用。 MS(m+1) ＝ 120.2。
     步 骤 3 ：N-((6-(7-(2- 氟 -4- 硝 基 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡 啶 -3- 基 ) 甲基 )-2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙胺 (327)
     在 室 温 下， 将 甲 醛 325(0.50g，1.3mmol)、 胺 326(0.30g，2.5mmol) 和 乙 酸 (0.14mL，2.5mmol) 在二氯甲烷 (20mL) 中的悬浮液搅拌 1 小时。 然后加入三乙酰氧基 硼氢化钠 (0.80g，3.8mmol)，并在室温搅拌 16 小时。 然后进一步加入三乙酰氧基硼氢化 钠 (1.0g)，并继续搅拌 2 小时。 在二氯甲烷和 1NNaOH 之间分配反应混合物。 过滤除 去黄色悬浮液，并用二氯甲烷和 1NNaOH 冲洗。 用无水硫酸钠干燥有机萃取物，过滤， 浓缩。 通过 Biotage 纯化残余物 ( 线性梯度 0-20％，甲醇 / 二氯甲烷 ；Snap 100g 柱 )， 得到 327(280mg，0.562mmol，44％ )，为黄色固体。 LRMS(M+H) ：499.4
     步骤 4 ：(6-(7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (328)
     在室温下，向化合物 327(0.28g，0.56mmol) 的二氯甲烷 (100mL) 溶液中加入三 乙胺 (0.25mL，1.7mmol)、DMAP(0.017g，0.14mmol) 和 Boc2O(0.26g，1.1mmol)。 在室 温下搅拌反应混合物 2 小时，然后用水、饱和氯化铵和盐水顺序洗涤，用无水硫酸镁干 燥，过滤，浓缩。 用硅胶色谱纯化残余物 ( 乙酸乙酯 )，得到化合物 328(0.20g，60％产 率 )。 LRMS(M+H) ：599.5
     步骤 5 ：(6-(7-(4- 氨基 -2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (329)
     向硝基化合物 328(0.20g，0.33mmol) 的 MeOH(75mL) 溶液中加入铁屑 (0.37g， 6.7mmol) 和氯化铵 (0.089g，1.7mmol)( 在水 (5mL) 中 )。 将得到的混合物加热至回流，保持 4 小时，然后冷却，通过硅藻土过滤，浓缩。 将残余物在乙酸乙酯和水之间分配， 用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。 产物 329(0.18g，95％ ) 是可以在下一步 中使用的粗品。 LRMS(M+H) ：569.5
     步骤 6 ：(6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (330)
     在 0℃，向胺 330(0.17g，0.30mmol) 和 DIPEA(0.16mL，0.12g，0.90mmol) 的四 氢呋喃 (25mL) 溶液中加入三光气 (0.035g，0.12mmol)，并将得到的溶液在 0℃搅拌 1 小 时。 加入环丙胺 (0.26g，4.6mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌 18 小时，然后减压浓 缩。 将残余物在二氯甲烷和水之间分配，用饱和 NH4Cl(aq) 和盐水洗涤有机相，用 MgSO4 干燥，过滤，浓缩，得到粗品 330(0.15g，77％产率 )。 LRMS(M+H) ：652.6
     步骤 7 ：1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (331)
     将化合物 330(0.15g，0.23mmol) 溶于二氯甲烷 (20mL) 和三氟乙酸 (0.9mL) 中， 并将反应混合物在室温搅拌 12 小时。 浓缩混合物，通过 Gilson 反相 HPLC 纯化残余物 (40-80 ％ MeOH/H2O， Aquasil C18，30 分钟 )，冷冻干燥。 将纯产物 ( 含有一些甲酸 (HPLC)) 在热二氯甲烷和 1M NaOH 之间分配。 干燥 (MgSO4) 有机相，过滤，浓缩， 得到标题化合物 331(0.110g，72 ％产率 )( 尽管用 NaOH 处理，仍得到单 TFA 盐 )。 1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ：8.84(s，1H) ；8.65(d， J ＝ 1.3，1H) ；8.53(d， J ＝ 5.5， 1H) ；8.37(s，1H) ；8.30(d， J ＝ 8.2，1H) ；7.99(dd， J ＝ 8.2，2.0，1H) ；7.73(dd， J ＝ 13.7，2.5，1H) ；7.38(t， J ＝ 9.0，1H) ；7.22-7.18(m，1H) ；6.68-6.64(m，2H) ； 4.03(s，2H) ；3.60-3.52(m，4H) ；3.48-3.44(m，2H) ；3.25(s，3H) ；2.92-2.88(m， 2H) ；2.55( 七重峰， J ＝ 3.1，1H) ；0.69-0.62(m，2H) ；0.44-0.40(m，2H)。 LRMS ： (M+H) ：552.5。
     反应路线 21
     实施例 206 和 2074-((6-(7-(4-(3- 环 丙 基 脲 基 )-2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基氨基 ) 丁酸 (332)，和 1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 氧代吡咯 烷 -1- 基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (333)
     向 甲 醛 321(0.20g，0.45mmol) 和 4- 氨 基 丁 酸 (1.0g，9.7mmol) 的 二 氯 甲 烷 (75mL) 悬浮液中加入乙酸 (0.051mL，0.89mmol)。 搅拌反应混合物 1 小时，然后加入 三乙酰氧基硼氢化钠 (0.38g，1.8mmol)，并将得到的混合物搅拌 18 小时。 然后将混合物 在水和二氯甲烷之间分配，通过硅藻土抽滤除去固体沉淀。 MS 分析显示 ：环化产物 333 在滤液中，而酸产物 332 主要在固体滤饼中。 将滤液中的有机相浓缩，通过硅胶色谱纯 化残余物 (10％ MeOH/ 乙酸乙酯 )，提供纯 333(35mg，15％产率 )。 通过用 1 ∶ 1 二氯 甲烷 / 甲醇洗涤，将硅藻土滤饼中的产物溶解。 浓缩此溶液，通过 Gilson 反相 HPLC 纯 化残余物 (35-75％ MeOH/H2O， Aquasil C18，30 分钟 )，冷冻干燥，得到酸 332(44mg， 69％产率 )。 化合物 332 和 333 的表征提供于下面。
     化 合 物 332( 实 施 例 206) ：1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ：9.23(s，1H) ； 8.58(s，1H) ；8.51(d， J ＝ 5.4，1H) ；8.36(s，1H) ；8.32(s，1H) ；8.24(d， J ＝ 8.2， 1H) ；7.91(dd， J ＝ 8.4，2.0，1H) ；7.74(dd， J ＝ 13.7，2.3，1H) ；7.37(t， J ＝ 9.0， 1H) ；7.22(d， J ＝ 9.0，1H) ；6.63(d， J ＝ 5.3，1H) ；3.79(s，2H) ；2.56(t， J ＝ 5.1，2H) ；2.47-2.43(m，1H) ；2.27(t， J ＝ 7.2，2H) ；1.65( 五重峰， J ＝ 6.7，2H) ； 0.66-0.61(m，2H) ；0.44-0.40(m，2H)。 LRMS ：(M+H)536.4。
     化 合 物 333( 实 施 例 207) ：1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ：8.76(s，1H) ； 8.52(s，1H) ；8.52(d，J ＝ 5.5，1H) ；8.35(s，1H) ；8.26(d，J ＝ 8.2，1H) ；7.79(dd，J ＝ 8.2，2.1，1H) ；7.73(dd， J ＝ 13.5，2.5，1H) ；7.38(t， J ＝ 9.2，1H) ；7.20(d， J ＝ 8.4，1H) ；6.65(d，J ＝ 5.3，1H) ；6.62(s，1H) ；4.46(s，2H) ；3.30-3.20(t，2H，被水 峰遮蔽？ ) ；2.55( 五重峰， J ＝ 3.3，1H) ；2.31(t， J ＝ 7.8，2H) ；1.95( 五重峰， J ＝ 7.6，2H) ；0.67-0.62(m，2H) ；0.45-0.40(m，2H)。 LRMS ：(M+H)518.4
     反应路线 22
     实施例 208 和 209 步骤 1.(S)-1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-((1- 甲氧基丙 -2- 基氨基 ) 甲基 )- 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (334)
     在 室 温， 在 氮 气 氛 围 中， 向 甲 醛 321(336mg，0.749mmol)、 (S)-1- 甲 氧 基 -2- 氨 基 丙 胺 (200mg，2.248mmol) 和 乙 酸 (68mg，1.124mmol) 的 DCM(20mL) 搅 拌悬浮液中加入 NaBH(OAc)3(418mg，1.873mmol)。 在室温下搅拌反应混合物过夜， 并用 10 ％ HCl 溶液淬灭。 分离各层 ；收集水层，用 DCM 洗涤两次，用 4N NaOH 碱 化 (pH12)，形成悬浮液，将其搅拌 30 分钟。 过滤收集固体，用水冲洗，空气干燥，通 过硅胶快速柱色谱纯化 ( 洗脱液 2％氢氧化铵 -MeOH/DCM ：10/90)，得到标题化合物 334(182mg，0.35mmol，46％产率 )，为黄色绒毛状固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6) δ(ppm) ：8.71(s，1H)，8.58(d， J ＝ 1.6Hz，1H)，8.51(d， J ＝ 5.5Hz，1H)，8.31(s， 1H)，8.23(d， J ＝ 8.2Hz，1H)，7.91(dd， J ＝ 8.2，2.2Hz，1H)，7.73(dd， J ＝ 13.6， 2.4Hz，1H)，7.38(t， J ＝ 9.0Hz，1H)，7.23-7.17(m，1H)，6.64(d， J ＝ 5.5Hz， 1H)，6.57(bd， J ＝ 2.7Hz，1H)，3.84(d， J ＝ 14.5Hz，1H)，3.78(d， J ＝ 14.5Hz， 1H)，3.27(dd， J ＝ 9.4，6.3Hz，1H)，3.24(s，3H)，3.19(dd， J ＝ 9.2，5.5Hz，1H)， 2.81-2.71(m，1H)，2.59-2.51(m，1H)，2.36-2.10(m，1H)，0.98(d，J ＝ 6.3Hz，3H)， 0.69-0.62(m，2H)，0.46-0.40(m，2H)。 MS(m/z) ：522.4(M+H)。
     步骤 2.(S)-N-((6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-N-(1- 甲氧基丙 -2- 基 ) 乙酰胺 (335)
     将 脲 334(66mg，0.127mmol) 的 乙 酸 酐 (2mL) 悬 浮 液 在 室 温 搅 拌 2 天。 通 过加入甲醇和水来猝灭反应混合物，并用 AcOEt 分配。 分离之后，收集有机层，用 水、1N NaOH(x4)、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。 通过硅胶快速 柱色谱纯化粗品 ( 洗脱液 2 ％氢氧化铵 -MeOH/DCM ：05/90 至 10/90)，得到标题化 合物 335(46mg，0.08mmol，64 ％产率 )，为类白色绒毛状固体。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ： 旋 转 异 构 体 的 混 合 物，8.70(s，1H)，8.58-8.48(m，2H)，8.34 和 8.30(2s，1H)，8.27 和 8.19(2d， J ＝ 8.3Hz，1H)，7.85-7.69(m，2H)，7.38(t， J ＝ 9.0Hz，1H)，7.20(bd， J ＝ 9.0Hz，1H)，6.67-6.54(m，2H)，4.74-4.16(m，3H)， 3.41-3.22(m，2H)，3.15 和 3.13(2s，3H)，2.59-2.52(m，1H)，2.16 和 1.96(2s，3H)， 1.09 和 1.04(2d，J ＝ 6.9Hz，3H)，0.72-0.58(m，2H)，0.50-0.36(m，2H)。 MS(m/z) ： 564.4(M+H)。
     反应路线 23
     实施例 210
     N-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 环丙烷甲酰胺 (337)
     步骤 1.(6-(7-(4-( 环丙烷甲酰氨基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (336)
     在氮气氛围中，在 0℃，向苯胺 126(200mg，0.36mmol) 的 DCM(10mL) 溶液中 加入 DIPEA(127μl，0.72mmol) 和环丙羰基氯 (50μL，0.54mmol)。 将反应混合物慢慢 地加热至室温，在室温下搅拌过夜。 在 AcOEt 中稀释反应混合物，连续地用饱和氯化铵 水溶液 (x4)、1N NaOH(x2)、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。 将粗品 残余物在最少量的 AcOEt/ 己烷中共沉淀。 过滤收集固体，用己烷冲洗，空气干燥，高真 空干燥，得到标题化合物 A( 定量产率 )，为淡褐色固体。 MS(m/z) ：593.4(M+H)。
     步骤 2.N-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3， 2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 环丙烷甲酰胺 (337)
     向 酰 胺 336(215mg， 粗 品 混 合 物 ) 的 DCM(10mL) 溶 液 中 加 入 TFA(2mL)。 在室温下搅拌反应混合物 2 小时，浓缩，在水和 AcOEt 之间分配，用 1N NaOH 溶液碱 化。 分离各层之后，收集有机层，用 1N NaOH(x2)、水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干 燥，过滤，浓缩。 通过硅胶快速柱色谱纯化残余物 ( 洗脱液 ：2 ％氢氧化铵 -MeOH/ DCM ：05/95 至 15/95)，得到标题化合物 336(87mg，0.177mmol，48％产率 ) 赭色粘性 固体。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：10.57(s，1H)，8.57(d， J ＝ 1.6Hz，， 1H)，8.52(d，J ＝ 5.5Hz，1H)，8.32(s，1H)，8.23(d，J ＝ 8.0Hz，1H)，7.93-7.83(m， 2H)，7.47(t， J ＝ 8.9Hz，1H)，7.41(dd， J ＝ 8.9，2.0，1H)，6.66(d， J ＝ 5.3Hz， 1H)，3.78(s，2H)，3.41(t， J ＝ 5.6Hz，2H)，3.24(s，3H)，2.66(t， J ＝ 5.7Hz，2H)， 1.79( 五 重 峰， J ＝ 6.2Hz，1H)，0.90-0.80(m，4H)， 有 一 个 NH 缺 失。 MS(m/z) ： 493.4(M+H)。
     反应路线 24
     实施例 340 和 341
     (6-(7-(4-(3- 环 丙 基 脲 基 )-2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡 啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸甲酯 (340) 和
     (R)-2- 氨基 -N-((6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-N-(2- 甲氧基乙基 )-3- 甲基丁酰胺 (341)
     步骤 1 ：(6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (338)
     在 0 ℃， 向 胺 126(0.24g，0.46mmol) 的 四 氢 呋 喃 (60mL) 溶 液 中 加 入 三 光 气 (0.054g，0.18mmol)，并将得到的溶液在 0 ℃搅拌 1 小时。 顺序加入 DIPEA(0.40mL， 0.30g，2.3mmol) 和环丙胺 (0.26g，4.6mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌 3 小时，然 后减压浓缩。 将残余物在二氯甲烷和水之间分配，收集有机相，用饱和 NH4Cl(aq) 和盐水 洗涤，用 MgSO4 干燥，过滤，浓缩。 通过硅胶快速色谱法纯化残余物 ( 乙酸乙酯至 5％ 甲醇 / 乙酸乙酯 )，得到 338(0.19g，67％产率 )。 MS(m/z) ：608.4(M+H)。
     步骤 2 ：1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (339)
     向 338(0.19g，0.31mmol) 的二氯甲烷 (40mL) 溶液中加入 TFA(3mL)。将溶液搅 拌 6 小时，然后浓缩。 在 98 ∶ 2 二氯甲烷 / 甲醇混合物和 1M NaOH(aq) 之间分配残余物， 用盐水洗涤，用 MgSO4 干燥，过滤，浓缩。 将得到的油状物用乙醚和乙酸乙酯研磨，得 到 339(0.13g，82％产率 )。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ(ppm) ：1H ：8.80(s，1H) ； 8.57(s，1H) ；8.51(d，J ＝ 5.5，1H) ；8.31(s，1H) ；8.23(d，J ＝ 8.0，1H) ；7.89(dd， J ＝ 8.0，1.5，1H) ；7.73(dd， J ＝ 13.5，2.2，1H) ；7.38(t， J ＝ 9.0，1H) ；7.20(d， J ＝ 8.2，1H) ；6.66-6.62(m，2H) ；3.78(s，2H) ；3.41(t，J ＝ 5.7，2H) ；3.24(s，3H) ；
     2.65(d， J ＝ 5.7，2H) ；2.57-2.51(m，1H) ；0.66-0.62(m，2H) ；0.44-0.41(m，2H)。 MS(m/z) ：508.3(M+H)。
     步骤 3.(6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸甲酯 (340)
     向 化 合 物 339(220mg，0.433mmol) 和 氯 甲 酸 甲 酯 (50.2μl，0.65mmol) 的 THF(4mL) 溶 液 中 加 入 DIPEA(227μl，1.30mmol)， 并 在 室 温 下 搅 拌 该 混 合 物 18 小 时。 减 压 除 去 溶 剂， 用 MeOH 研 磨 残 余 物， 过 滤 收 集 固 体 悬 浮 液， 通 过 Biotage 纯 化 ( 线 性 梯 度 0-20 ％， 甲 醇 / 二 氯 甲 烷 ；Snap 25g 柱 )， 得 到 化 合 物 340(123.1mg， 0.218mmol，50.2％产率 ) 米色固体。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：8.70(s， 1H)，8.56-8.50(m，2H)，8.33(s，1H)，8.25(d，J ＝ 8.0Hz，1H)，7.84-7.77(m，1H)， 7.73(dd， J ＝ 13.6，2.4Hz，1H)，7.38(t， J ＝ 9.2Hz，1H)，7.20(dd， J ＝ 8.8，1.2Hz， 1H)，6.65(d，J ＝ 5.6Hz，1H)，6.56(d，J ＝ 2.8Hz，1H)，4.54(s，2H)，3.64(s，2H)， 3.44(s，3H)，3.22(s，2H)，2.59-2.51(m，1H)，0.69-0.62(m，2H)，0.46-0.40(m， 2H)。 MS(m/z) ：566.4(M+H)。
     步骤 4 ：(R)-2- 氨基 -N-((6-(7-(4-(3- 环丙基脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3， 2-b] 吡啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 )-N-(2- 甲氧基乙基 )-3- 甲基丁酰胺 (341)
     向 339(48 mg ， 0 . 095 mmol ) 、 N - Boc - 缬 氨 酸 (41 mg ， 0 . 19 mmol ) 和 DIPEA(0.083mL，0.47mmol) 的 DMF(20mL) 溶液中加入 HATU(90mg，0.236mmol)。 在 室温下将得到的溶液搅拌 3 小时。 将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，用 1M HCl 和盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，过滤，浓缩，得到粗品 Boc- 保护的产物。 将该物质溶于 二氯甲烷 (75mL) 和三氟乙酸 (3mL) 中，并在室温搅拌 3 小时。 然后浓缩混合物，通过 Gilson 反相 HPLC 纯化残余物 (35-95％ MeOH/H2O，Aquasil C18，30 分钟 )，冷冻干燥。 将残余物 ( 含有一些甲酸 (HPLC)) 在二氯甲烷和 1M NaOH 之间分配。 干燥 (MgSO4) 有机相，过滤，浓缩，得到 341(18mg，50％产率 )，通过 1H NMR 证明其是旋转异构体 的 7 ∶ 3 混 合 物。 1HNMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ：8.73(s，1H) ；8.57-8.51(m，2H) ； 8.36(s，0.3H) ；8.32(s，0.7H) ；8，29-8.24(m，1H) ；7.84-7.71(m，2H) ；7.38(t， J ＝ 8.8，1H) ；7.21(d， J ＝ 8.3，1H) ；6.66-6.64(m，1H) ；6.59(s，1H) ；4.90(d， J ＝ 17.6，0.3H) ；4.73(d，J ＝ 15.6，0.7H) ；4.64(d，J ＝ 17.1，0.3H) ；4.53(d，J ＝ 15.6， 0 . 7 H ) ；3 . 73-3 . 39( m ， 5 H ) ；3 . 25( s ， 2 . 2 H ) ；3 . 22( s ， 1 . 1 H ) ；2 . 58-2 . 52( m ， 1 H ) ； 1 . 80-1 . 70( m ， 1 H ) ；0 . 89-0 . 84( m ， 6 H ) ；0 . 68-0 . 64( m ， 2 H ) ；0 . 45-0 . 41( m ， 2 H ) 。 LRMS ：(M+H)607.5。
     反应路线 25
     实施例 213 和 214
     N1-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-N3-(3-( 甲基磺酰基 ) 苯基 ) 丙二酰胺 (345) 和
     N1-(3- 氟 -4-(2-(5-((N-(2- 甲氧基乙基 ) 乙酰氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩 并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-N3-(3-( 甲基磺酰基 ) 苯基 ) 丙二酰胺 (346)
     步骤 1 ：3-(4-(2-(5-(( 叔丁氧羰基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基氨基 )-3- 氧代丙酸甲酯 (342)
     在室温下，向化合物 126(480mg，0.915mmol) 和 DIPEA(479μl，2.74mmol) 的 DCM(9mL) 溶液中加入甲基丙二酰氯 (196μl，1.83mmol)。 搅拌混合物 18 小时。 加入 饱和氯化铵水溶液，用 DCM 萃取水相两次。 合并有机层，用无水硫酸钠干燥，浓缩。 通过 Biotage 纯化残余物 ( 线性梯度 0-20％，甲醇 / 二氯甲烷 ；Snap 50g 柱 )，得到化合 物 342(540mg，0.86mmol，94％产率 )，黄色油状物。 MS(m/z) ：625.5(M+H)。
     步骤 2.3-(4-(2-(5-(( 叔丁氧羰基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基氨基 )-3- 氧代丙酸 (343)
     向化合物 342(540mg，0.864mmol) 的 THF(12mL) 和水 (6mL) 溶液中加入 LiOH 一水合物 (363mg，8.64mmol)。 在室温下搅拌混合物 48 小时，减压除去 THF。 将水溶 液用水 (10ml) 稀释，使用 1N HCl 酸化至 pH 4。 过滤悬浮液，高真空干燥沉淀，得到化 合物 343(485mg，0.79mmol，92％产率 )，为米色固体。 MS(m/z) ：611.5(M+H)。
     步骤 3 和 4.N1-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-N3-(3- 甲基磺酰基 ) 苯基 ) 丙二酰胺 (345)
     向 化 合 物 343(120mg，0.197mmol)、3- 甲 基 磺 酰 基 苯 胺 盐 酸 盐 (82mg， 0.393mmol) 和 DIPEA(172μl，0.983mmol) 的 DMF(4mL) 溶液中加入 BOP 试剂 (261mg， 0.59mmol)，并在室温下搅拌混合物 18 小时。 加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取 水相两次。 用盐水洗涤合并的有机萃取物，用无水硫酸钠干燥，减压除去溶剂。 通过
     Biotage 纯化残余物 ( 线性梯度 0-20％，甲醇 / 二氯甲烷 ；Snap25g 柱 )，得到化合物 344 黄色固体 ( 未鉴定 )，将其溶于 DCM(10ml) 中，并用 TFA(4.5mL，59mmol) 处理。 在室 温下搅拌混合物 18 小时。 减压除去溶剂，用乙酸乙酯稀释残余物，用 1N NaOH 萃取有 机层。 用乙酸乙酯萃取水相 3 次，将合并的有机层浓缩。 通过 Biotage 纯化残余物 ( 线 性梯度 0-30 ％，甲醇 / 二氯甲烷 ；Snap50g 柱 )，得到化合物 345(39mg，0.059mmol， 29.9 ％产率 )，为米色固体。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：10.65(s，1H)， 10.61(s，1H)，8.57(d， J ＝ 1.6Hz，1H)，8.52(d， J ＝ 5.2Hz，1H)，8.33(s，1H)， 8 . 28( s ， 1 H) ， 8 . 24( d ， J ＝ 8. 0Hz ，1 H ) ， 7 . 92-7 .85( m， 3 H ) ，7 . 66-7 . 60( m， 2 H ) ， 7.51(t， J ＝ 8.8Hz，1H)，7.45(dd， J ＝ 9.2，1.6Hz，1H)，6.68(dd， J ＝ 5.2，0.8Hz， 1H)，3.79(s，2H)，3.57(s，2H)，3.41(t， J ＝ 5.6Hz，2H)，3.24(s，3H)，3.21(s， 3H)，2.66(t， J ＝ 5.6Hz，2H)。 MS(m/z) ：664.5(M+H)。
     步骤 5.N1-(3- 氟 -4-(2-(5-((N-(2- 甲氧基乙基 ) 乙酰氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-N3-(3-( 甲基磺酰基 ) 苯基 ) 丙二酰胺 (346)
     将化合物 345(18.5mg，0.028mmol) 的乙酸酐 (1.31mL，13.9mmol) 溶液在室温 下搅拌 60 小时。 减压除去溶剂，并用水研磨残余物 3 小时。 过滤固体悬浮液，用水冲 洗沉淀，高真空干燥，得到化合物 346(6.4mg，9.07 ？ mol，32.5％ )，为米色固体。 1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ(ppm) ：旋转异构体的混合物，10.64(s，1H)，10.60(s， 1H)，8.55-8.49(m，2H)，8.38-8.21(m，3H)，7.91-7.86(m，2H)，7.78(td， J ＝ 8.8， 2.0Hz，1H)，7.66-7.60(m，2H)，7.51(t， J ＝ 8.8Hz，1H)，7.44(dd， J ＝ 9.2，1.6Hz， 1H)，6.71-6.67(m，1H)，4.71 和 4.59(2s，2H)，3.58-3.23(m，14H)，3.21(s，3H)， 2.13 和 2.05(2s，3H)。 .MS(m/z) ：706.5(M+H)。
     反应路线 26
     实施例 215
     N-((2-(7-(4-(3- 环 丙 基 脲 基 )-2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-N-(2- 甲氧基乙基 ) 甲磺酰胺 (349)
     步 骤 1 ：(2-(7-(4-(3- 环 丙 基 脲 基 )-2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡
     啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (347)
     向苯胺 46(400mg，0.758mmol) 溶液中加入三光气 (1125mg，5eq，3.79mmol) 和 iPr2NEt(490mg，5eq，3.79mmol)，并在室温搅拌反应混合物一小时。 加入环丙胺 (6103mg，141eq，107mmol)，并在室温搅拌反应混合物过夜。 浓缩混合物，然后用 DCM 稀释，用水洗涤。 收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，蒸发。 用柱色谱纯化残余 物 ( 洗脱液 20％ MeOH/EtOAc)，得到目标化合物 347，为黄色油状物 (426mg，92％产 率 )。 MS(m/z) ＝ 611.4(M+H)。
     步 骤 2 ：1- 环 丙 基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲 氧 基 乙 氨 基 ) 甲 基 )-1- 甲 基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (348)
     向 347(426mg，0.698mmol) 的 DCM(10mL) 溶液中加入 HCl/ 二烷 (0.7mL，4.01eq，2.80mmol，4M，在二烷中 )，并在室温搅拌反应混合物 3 小时。 将混合物用水稀释，并加入固体 NaHCO3。 用 EtOAc 充分萃取反应混合物，然后收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱色谱纯化残余物 ( 洗脱液 ：25％ MeOH/EtOAc 至 50％ MeOH/EtOAc)，得到目标化合物 348，为黄色粉末 (211mg，59％产率 )。 MS(m/z) ＝ 511.4(M+H)。
     步 骤 3 ：N-((2-(7-(4-(3- 环 丙 基 脲 基 )-2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-N-(2- 甲氧基乙基 ) 甲磺酰胺 (349)
     向胺 348(61mg，0.119mmol) 的 DCM(5mL) 悬浮液中加入甲磺酰氯 (20.53mg， 1.5eq，0.179mmol) 和 iPr2NEt(46.3mg，3eq，0.358mmol)， 并 在 室 温 搅 拌 反 应 混 合 物 3 小时。 用 EtOAc 稀释混合物，然后用饱和 NH4Cl 溶液、饱和 NaHCO3 溶液和盐 水洗涤。 收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱色谱纯化残余物 ( 洗脱 液 ：25 ％ MeOH/EtOAc)， 得 到 目 标 化 合 物 349， 为 浅 黄 色 固 体 (34mg，48 ％ )。 1H NMR(d6DMSO)8.27(s，1H)，8.10(d， J ＝ 5.48Hz，1H)，7.53(s，1H)，7.25(m，1H)， 6.95(t， J ＝ 9.0Hz，1H)，6.76(m，1H)，6.71(s，1H)，6.24(d， J ＝ 5.48Hz，1H)， 6.14(s，1H)，4.06(s，2H)，3.49(s，3H)，2.72(s，3H)，2.63(s，3H)，2.12(m，3H)， 0.23(m，2H)，0.00(s，2H)。
     反应路线 27
     实施例 216
     步骤 1 ：(2-(7-(4-(3-(2，4- 二氟苯基 ) 脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (350)
     向苯胺 46(500mg，0.948mmol) 的 DCM(10mL) 溶液中加入 2，4- 二氟 -1- 异 氰酰苯 (441mg，3eq，2.84mmol)，并在室温搅拌反应混合物 24 小时。 浓缩混合物，通 过柱色谱纯化 ( 洗脱液 ：10％ MeOH/EtOAc)，得到 350(600mg，93％ )，为白色固体。 MS(m/z) ＝ 683.7(M+H)
     步 骤 2 ：1-(2，4- 二 氟 苯 基 )-3-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲 氧 基 乙 氨 基 ) 甲 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (351)
     向 350(600mg，0.879mmol) 的 DCM(15mL) 溶液中加入 HCl/ 二烷 (2mL，7.17eq，8mmol，4M，在二烷中 )，并在室温搅拌反应混合物 3 小时。 将混合物用水稀释，并加入固体 NaHCO3。 用 EtOAc 充分萃取反应混合物，然后收集有机相， 用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用 EtOAc 研磨残余物，得到目标化合物 351，为类白 色 固 体 (314mg，61 ％ 产 率 )。 1H NMR(d6-DMSO) ：10.90(s，1H)，8.89(s，1H)， 8.50(d，J ＝ 5.48Hz，1H)，7.98(m，1H)，7.95(s，1H)，7.72(m，1H)，7.41(m，1H)， 7.28-7.20(m，3H)，7.04(m，1H)，6.68(d， J ＝ 5.28Hz，1H)，4.28(s，2H)，3.92(s， 3H)，3.61(m，2H)，3.27(s，3H)，3.13(m，2H)。
     步骤 3 ：(S)-1-(((2-(7-(4-(3-(2，4- 二氟苯基 ) 脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )(2- 甲氧基乙基 ) 氨基 )-3- 甲基 -1- 氧代丁 -2- 基氨基甲酸叔丁基酯 (352)
     向化合物 351(280mg，0.481mmol) 的 DMF(10mL) 溶液中加入 (S)-2-( 叔丁氧羰 基氨基 )-3- 甲基丁酸 (209mg，2eq，0.961mmol)、iPr2NEt(0.252mL，3eq，0.1.442mmol) 和 HATU(365mg，2eq，0.961mmol)，并将反应混合物搅拌过夜。 用 EtOAc 稀释反应混 合物，用水、饱和 NAHCO3 溶液、然后盐水洗涤。 收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤， 然后浓缩。 用柱色谱纯化残余物 ( 洗脱液 ：20％ MeOH/EtOAc)，得到目标化合物 352， 为类白色固体 (200mg，53％产率 )。 MS(m/z) ＝ 782.7(M+H)。
     步骤 4 ：(S)-2- 氨基 -N-((2-(7-(4-(3-(2，4- 二氟苯基 ) 脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 )-N-(2- 甲氧基乙基 )-3- 甲 基丁酰胺 (353)
     向化合物 352(200mg，0.256mmol) 的 DCM(10mL) 悬浮液中加入 HCl/ 二烷(0.7mL，10.95eq，2.80mmol，4M，在二烷中 )，并在室温搅拌反应混合物 3 小时。 将混合物用水稀释，并加入固体 NaHCO3。用 EtOAc 萃取反应混合物，然后收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱色谱纯化残余物 ( 洗脱液 ：30％ MeOH/EtOAc)，得到 目标化合物 353，为浅黄色粉末 (155mg，89％产率 )。1H NMR(d6-DMSO)9.36(s，1H)， 8.60(s，1H)，8.49(m，1H)，8.01(m，1H)，7.87(s，1H)，7.71(m，1H)，7.41(t， J ＝ 8.99Hz，1H)，7.31(m，1H)，7.20(m，1H)，7.02(m，1H)，6.98(s，1H)，6.65(d， J ＝ 5.09Hz，1H)，4.83(d， J ＝ 15.65Hz，1H)，4.48(d， J ＝ 15.65Hz，1H)，3.81(s，1H)， 3.80(s，2H)，3.40(m，1H)，3.39-3.295(m，6H)，1.71(m，2H)，0.81(m，6H)。
     反应路线 28
     实施例 217
     N1-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 噻 吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-N3-(2- 氟苯基 ) 丙二酰胺 (355)
     步骤 1.(2-(7-(2- 氟 -4-(3-(2- 氟苯基氨基 )-3- 氧代丙酰氨基 ) 苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基 酯 (354)
     向 苯 胺 46(300 mg ， 0 . 569 mmol ) 、 酸 2(224 mg ， 1 . 137 mmol ) 和 DIPEA(0.397mL，2.274mmol) 的 DMF(15mL) 溶液中加入 HATU(540mg，1.422mmol)。 在室温搅拌反应混合物 16 小时，然后在乙酸乙酯和水之间分配 ；收集有机层，用水、1M NaOH 和盐水洗涤，干燥 (Na2SO4)，然后过滤，浓缩。 通过 Biotage 纯化残余物 ( 洗脱 液 ：1-30％ MeOH/EA，Silicycle 12g 柱 )，得到 354(230mg，0.325mmol，57.2％产率 )， 为米色固体。
     TLC ：Rf ＝ 0.35( 洗脱液 ：10％ MeOH/EtOAc)，
     步 骤 2.N1-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲 氧 基 乙 氨 基 ) 甲 基 )-1- 甲 基 -1H- 咪 唑 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 )-N3-(2- 氟苯基 ) 丙二酰胺 (355)
     向 354(230mg，0.325mmol) 的 DCM(3mL) 溶液中加入 TFA(0.5mL)。 在室温下 搅拌反应混合物过夜，然后浓缩。 将残余物在 EtOAc 和 NaHCO3 饱和溶液之间分配。 收
     集有机层，干燥，浓缩。 通过 Biotage 纯化残余物 (0-50％ MeOH/EA ；10g SNAP 柱 )， 得到微红固体，将其再次通过快速柱色谱纯化 ( 洗脱液 ：MeOH/EA，20-25％ )，得到浅黄色固体，将其用乙醚研磨，得到标题化合物 355(80mg，0.132mmol，40.5％产率 )，为 类白色固体。 HNMR(dmso)d(ppm)1H ：10.53(s，1H)，10.01(s，1H)，8.47(d，1H， J ＝ 5.5Hz)，7.95(m，1H)，7.85-7.81(m，2H)，7.46(t，1H， J ＝ 8.8Hz)，7.39(d，1H， J ＝ 10.9Hz)，7.15-7.09(m，2H)，6.91(s，1H)，6.65(d，1H， J ＝ 5.5Hz)，3.81(s， 3H)，3.72(s，2H)，3.58(s，2H)，3.35(t，2H， J ＝ 5.6Hz)，3.20(s，3H)，2.64(t， 2H， J ＝ 5.6Hz)。 MS ：607.2(MH)+。
     实施例 218
     2- 氟 -N-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 苯甲酰胺 (357)
     步 骤 1.(2-(7-(2- 氟 -4-(2- 氟 苯 甲 酰 氨 基 ) 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 )-1- 甲基 -1H- 咪唑 -5- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (356)
     在 0 ℃， 向 苯 胺 46(300mg，0.569mmol) 的 DCM(10mL) 溶 液 中 加 入 DIPEA(0.199mL，1.137mmol) 和 2- 氟苯甲酰基氯 (135mg，0.853mmol)，并在室温下搅 拌该悬浮液过夜。 将反应混合物浓缩，并将残余物在 EtOAc 和水之间分配。 收集有机 层，干燥，浓缩。 使用 Biotage 纯化残余物 ( 洗脱液 ：EtOAc，25g Silicycle HR 柱 )，提 供标题化合物 356(400mg，0.616mmol，定量产率 )，为白色固体。
     MS ：650(MH)+。
     步骤 2.2- 氟 -N-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 )-1- 甲基 -1H- 咪 唑 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 苯甲酰胺 (357)
     将 356(400mg，0.616mmol) 和 TFA(0.047mL，0.616mmol) 的 DCM(15mL) 溶液 在室温下搅拌过夜，然后浓缩。 将残余物在 EtOAc 和 NaHCO3 饱和溶液之间分配。 在两 个层中都发现了产物。 将有机层合并，浓缩。 用 MeOH 萃取残余物，滤出无机固体。 浓 缩滤液，使用 Biotage 纯化残余物 ( 洗脱液 ：MeOH/EtOAc，10-50％，25g Silicycle 柱 )， 得到固体，将其用 EtOAc/ 乙醚的混合物研磨，得到 358(40mg，0.073mmol，11.82 ％ 产 率 )， 为 白 色 固 体。 HNMR ：(dmso)d(ppm)1H ：10.77(s，1H)，8.51(d，1H， J ＝ 5.5Hz)，7.94-7.91(m，2H)，7.68-7.63(m，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.49(t，1H)， J ＝ 8.8Hz)，7.36-7.30(m，2H)，7.15(s，1H)，6.70(d，1H， J ＝ 5.5Hz)，4.13(s，2H)， 3.89(s，3H)，3.51(t，2H， J ＝ 5.3Hz)，3.26(s，3H)，3.01(m，2H)。 MS ：550(MH)+
     反应路线 29
     实施例 219
     1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-( 吗啉代甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (360)
     步 骤 1.4-((6-(7-(2- 氟 -4- 硝 基 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡 啶 -3- 基 ) 甲基 ) 吗啉 (358)
     向甲醛 321(0.5g，1.265mmol) 的 DCM(12.65mL) 悬浮液中加入吗啉 (0.220mL， 2.53mmol) 和乙酸 (0.145mL，2.53mmol)，并在室温下搅拌混合物 1 小时，而后加入三 乙酰氧基硼氢化钠 (0.804g，3.79mmol)。 继续搅拌过夜。 然后将混合物在 DCM 和 1N NaOH 之间分配。 分离各相 ；收集有机层，用硫酸钠干燥，浓缩。 通过 Biotage 纯化残 余物 ( 线性梯度 0-20％， MeOH/EtOAc ；10g SNAP 柱 )，得到标题化合物 358(341mg， 0.731mmol，57.8％产率 )，为米色固体。 MS ：467(MH)+。
     步骤 2.3- 氟 -4-(2-(5-( 吗啉基甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基 氧基 ) 苯胺 (359)
     将 硝 基 化 合 物 358(432mg，0.926mmol)、 铁 粉 (440mg，7.87mmol) 和 氯 化 铵 (42.6mg，0.796mmol) 的混合物在水 (3.00mL) 和乙醇 (6mL) 的混合物中加热至 80℃，保 持 30 分钟。 然后过滤反应混合物，趁热通过硅藻土垫。 浓缩滤液，使用 Biotage 纯化残 余物 ( 洗脱液 ：0-20％ EtOAc/MeOH，10g SNAP 柱 )，得到胺 359(136mg，0.312mmol， 33.6％产率 )，为白色固体。 MS ：437(MH)+。
     步骤 3.1- 环丙基 -3-(3- 氟 -4-(2-(5-( 吗啉代甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3， 2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基 ) 脲 (360)
     将苯胺 359(136mg，0.312mmol) 和 DIPEA(0.218mL，1.246mmol) 的 THF(6mL) 溶液冷却至 0℃，然后加入三光气 (46.2mg，0.156mmol)，并在 0℃搅拌反应混合物 1 小 时，而后加入环丙胺 (89mg，1.558mmol)。 在室温额外搅拌反应混合物 3 小时，然后浓 缩，在水和乙酸乙酯之间分配。 形成粘性固体，通过抽滤将其分离，用水和乙酸乙酯冲 洗，真空干燥。 然后使用 Gilson 纯化该物质 ( 洗脱液 ：20-95％ MeOH/ 水，1 小时 )，得 到标题化合物 360(30mg，0.058mmol，18.53％产率 )，为白色固体。 1HNMR(DMSO-d6)
     d(ppm)1H ：HNMR9.16(s， br，1H)，8.16(d，1H， J ＝ 1.6HZ)，8.11(d，1H， J ＝ 5.4Hz)，7.91(s，1H)，7.83(d，1H， J ＝ 8.2Hz)，7.46(dd，1H， J1 ＝ 2.1Hz， J2 ＝8.2Hz)，7.34(dd，1H， J1 ＝ 2.6Hz， J2 ＝ 13.9Hz)，6.97-7.45(m，2H)，6.84-6.81(m， 1 H ) ， 6 . 23( d ， 1 H ， J ＝ 4 . 7 Hz ) ， 3 . 18( t ， 4 H ) ， 3 . 14( s ， 2 H ) ， 2 . 15-2 . 12( m ， 1 H ) ， 1.98(m，4H)，0.23-0.19(m，2H)，0.02-0.005(m，2H)。 MS ：520.4(MH)+。
     反应路线 30
     实施例 220 1-(4-(2-(4-5，8，11- 三 氧 杂 -2- 氮 杂 十 二 烷 基 苯 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 唑 -3- 基 ) 脲 (368) 步骤 1 ：4-(7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 苯甲醛 (362) 将碘噻吩并吡啶 361(US 2006/0287343)(2.10g，5.05mmol)、4- 甲酰基苯基硼酸 烷 (80mL)啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基 )-3-(5- 甲基异(1.51g，10.1mmol) 和四 ( 三苯基膦 ) 合钯 (0.29g，0.25mmol) 溶于无水二中。 将氟化铯 (0.92g，6.1mmol) 和碳酸氢钠 (2.12g，25.2mmol) 溶于水 ( 各自 5mL)，并 加入到反应混合物中，用 N2 流将其脱气，然后加热到回流，保持 3 小时，冷却，浓缩。 将残余物在乙酸乙酯和水之间分配，形成粘性沉淀。 将其通过抽滤分离，用水和乙酸乙 酯冲洗，得到 362(1.92g，96％ )。 LRMS(M+H) ：395.2
     步骤 2 ：N，N-(4-(7-(2- 氟 -4- 硝基苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 苄 基 )-2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙胺 (364)
     将 362(0.90g，2.3mmol)、胺 363(0.93g，5.7mmol)[ 已经按照合成胺 322( 反应 路线 18) 和 326( 反应路线 20) 所使用的方法合成胺 363] 和乙酸 (0.26mL，4.6mmol) 的 二氯甲烷 (50mL) 悬浮液在室温下搅拌 1 小时。 然后加入三乙酰氧基硼氢化钠 (1.45g， 6.85mmol)，并在室温搅拌混合物 16 小时。然后进一步加入三乙酰氧基硼氢化钠 (1.5g)，并继续搅拌 2 小时。 在二氯甲烷和 1N HCl 之间分配反应混合物。 除去有机相。 用 3M NaOH 碱化水相 (pH ＝ 13)，并用二氯甲烷萃取。 用无水硫酸钠干燥有机萃取物，过滤， 浓缩，得到 364(0.72g，58％ )，为黄色固体。 LRMS(M+H) ：542.4
     步 骤 3 ：4-(7-(2- 氟 -4- 硝 基 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 苄 基 (2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (365)
     在 室 温 下， 向 364(0.72g，1.3mmol) 的 二 氯 甲 烷 (100mL) 溶 液 中 加 入 DMAP(0.041g，0.33mmol) 和 Boc2O(0.58g，2.7mmol)。 在室温下搅拌反应混合物 2 小 时，然后用水和盐水顺序洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。 用硅胶色谱纯化残余 物 ( 洗脱液 ：EtOAc，然后 1 ％ MeOH/EtOAc)，得到化合物 365(0.51g，60 ％产率 )。 LRMS(M+H) ：642.5
     步 骤 4 ：4-(7-(4- 氨 基 -2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 苄 基 (2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (366)
     向 365(0.49g，0.76mmol) 的 MeOH(100mL) 溶液中加入铁屑 (0.43g，7.6mmol) 和氯化铵 (0.12g，2.3mmol) 的水溶液 (5mL)。 将得到的混合物加热至回流，保持 4 小 时，然后冷却，通过硅藻土垫过滤，浓缩。 将残余物在二氯甲烷和水之间分配 ；收集 有机相，用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。 用硅胶色谱纯化残余物 ( 洗脱 液 ：2％ MeOH/EtOAc)，得到 366(0.41g，88％产率 )。 LRMS(M+H) ：612.6
     步骤 5 ：4-(7-(2- 氟 -4-(3-(5- 甲基异唑 -3- 基 ) 脲基 ) 苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 苄基 (2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (367) 在 0 ℃，向 366(0.15g，0.25mmol) 和 DIPEA(0.11mL，0.080g，0.61mmol) 的四 氢呋喃 (50mL) 溶液中加入三光气 (0.029g，0.098mmol)，并在 0 ℃将得到的溶液搅拌 1
     小时。 加入 3- 氨基 -5- 甲基异唑 (0.025g，0.25mmol)，并将混合物加热至室温，搅拌 3 小时，然后用 1mL 水淬灭，减压浓缩。 将残余物在乙酸乙酯和水之间分配 ；收集有 机相，用盐水洗涤，用 MgSO4 干燥，过滤，浓缩。 用硅胶色谱纯化产物 ( 洗脱液 ：2％ MeOH/EtOAc)，得到 367(0.074g，4％产率 )。
     步骤 7 ：1-(4-(2-(4-5，8，11- 三氧杂 -2- 氮杂十二烷基苯基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基 )-3-(5- 甲基异
     唑 -3- 基 ) 脲 (368)向 367(0.074g，0.10mmol) 的二氯甲烷 (50mL) 溶液中加入三氟乙酸 (1.0mL)。 在室温搅拌反应混合物 3 小时，然后浓缩，在二氯甲烷和饱和 NaHCO3 之间分配残余物。 收集有机相，用盐水洗涤，用 MgSO4 干燥，过滤，浓缩。 通过 Gilson 反相 HPLC 纯化残 余物 (35-75％ MeOH/ 水，Aquasil C18，30 分钟 )，并冷冻干燥。 将纯产物 ( 含有一些甲 酸 (HPLC)) 在二氯甲烷和 1M NaOH 之间分配。 收集有机相，干燥 (MgSO4)，过滤，浓 缩，得到化合物 368(0.033g，0.052mmol，52％产率 )。 1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ： 9.71(s，1H) ；9.31(s，1H) ；8.48(d， J ＝ 5.5，1H) ；8.01(s，1H) ；7.82-7.79(m， 2H) ；7.73(dd， J ＝ 13.1，2.5，1H)7.46-7.41(m，3H) ；7.28-7.26(m，1H) ；6.60(d， J ＝ 5.5，1H) ；6.54(d，J ＝ 0.8，1H) ；3.75(s，2H) ；3.51-3.45(m，8H) ；3.41-3.35(m， 2H) ；3.20(s，3H) ；2.63(t， J ＝ 5.7，2H) ；2.35(d， J ＝ 0.6，3H)。 LRMS(M+H) ： 636.5
     反应路线 31
     实施例 221 N-(4-(7-(2- 氟 -4-(3-(5- 甲基异 唑 -3- 基 ) 脲基 ) 苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b]吡啶 -2- 基 ) 苄基 )-N-(2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 乙酰胺 (371)
     步 骤 1 ：N-(4-(7-(2- 氟 -4- 硝 基 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 苄 基 )-N-(2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 乙酰胺 (369)
     向 364(0.50g，0.92mmol) 的无水四氢呋喃 (50mL) 溶液中加入乙酸酐 (1.0mL， 11mmol)。 在室温下搅拌反应混合物 24 小时，然后浓缩。 将残余物在乙酸乙酯和水之间 分配 ；收集有机相，用饱和 NaHCO3、盐水洗涤，干燥 (MgSO4)，过滤，浓缩。 用硅胶 色谱纯化残余物 ( 洗脱液 ：EtOAc)，得到 369(0.36g，67％产率 )。 LRMS(M+H) ：584.4
     步 骤 2 ：N-(4-(7-(4- 氨 基 -2- 氟 苯 氧 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 苄 基 )-N-(2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 乙酰胺 (370)
     向 369(0.36g，0.62mmol) 的 MeOH(100mL) 溶液中加入铁屑 (0.68g，12mmol) 和氯化铵 (0.13g，2.5mmol) 水溶液 (5mL)。 将得到的混合物加热至回流，保持 4 小时， 然后冷却，通过硅藻土过滤，浓缩。 将残余物在二氯甲烷和水之间分配 ；收集有机相， 用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。 用硅胶色谱纯化产物 ( 洗脱液 ：2 ％ MeOH/EtOAc)，得到 370(0.35g，100％产率 )。 LRMS(M+H) ：554.4
     步骤 3 ：N-(4-(7-(2- 氟 -4-(3-(5- 甲基异唑 -3- 基 ) 脲基 ) 苯氧基 ) 噻吩并[3，2-b] 吡啶 -2- 基 ) 苄基 )-N-(2-(2-(2- 甲氧基乙氧基 ) 乙氧基 ) 乙基 ) 乙酰胺 (371) 在 0 ℃， 向 370(0.14g，0.25mmol) 和 DIPEA(0.11mL，0.080g，0.61mmol) 的 四氢呋喃 (50mL) 溶液中加入三光气 (0.030g，0.10mmol)，并将得到的溶液在 0 ℃搅拌 0.5 小时。 加入 3- 氨基 -5- 甲基异 唑 (0.074g，0.76mmol)，并将混合物加热至室温， 搅拌 3 小时，然后用 1mL 水淬灭，减压浓缩。 将残余物在乙酸乙酯和水之间分配 ；收 集有机相，用盐水洗涤，用 MgSO4 干燥，过滤，浓缩。 通过硅胶色谱纯化产物 (10 ％MeOH/EtOAc)，而后通过 Gilson 反相 HLC 纯化 (35-65％乙腈 / 水， Aquasil C18，30 分 钟 )，冷冻干燥。 将残余物 ( 含有一些甲酸 (HPLC)) 在二氯甲烷和 1M NaOH 之间分 配。 干燥 (MgSO4) 有机相，过滤，浓缩，得到 371(65mg，38％产率 )，通过 1H NMR 证明其是旋转异构体的 2 ∶ 1 混合物。 1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)1H ：9.64(s，1H) ； 9.19(s，1H) ；8.50-8.48(m，1H) ；8.04(s，0.4H) ；8.01(s，0.6H) ；7.89(d， J ＝ 8.2， 0.4H) ；7.82(d，J ＝ 8.2，0.6H) ；7.72(dd，J ＝ 12.9，2.5，1H) ；7.45(t，J ＝ 9.2，1H) ； 7.33(d， J ＝ 8.4，2H) ；7.27-7.24(m，1H) ；6.61-6.59(m，1H) ；6.54(d， J ＝ 0.8， 1H) ；4.68(s，0.4H) ；4.59(s，0.6H) ；3.52-3.38(m，12H) ；3.21(s，1.8H) ；3.20(s， 1.2H) ；2.35(d， J ＝ 0.4，3H) ；2.12(s，1.8H) ；2.00(1.2H)。 LRMS(M+H) ：678.8
     反应路线 32
     实施例 222
     3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲 氧 基 乙 氨 基 ) 甲 基 ) 吡 啶 -2- 基 ) 噻 吩 并 [3，2-b] 吡 啶 -7- 基氧基 ) 苯基氨基甲酸 2，2，2- 三氟乙基酯 (373)
     步骤 1.4-(2-(5-(( 叔丁氧羰基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩 并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 )-3- 氟苯基 2，2，2- 三氟乙基甲基氨基甲酸酯 (372)
     将 双 光 气 (0.017mL，0.143mmol) 加 入 到 苯 胺 126(0.15g，0.286mmol) 的 THF(2.86mL) 溶液中，并将反应混合物大力搅拌 2 小时。 向反应混合物中加入 2，2， 2- 三氟乙醇 (0.042mL，0.572mmol) 和 DIPEA(0.100mL，0.572mmol) 的 THF(2.86mL) 溶 液。 大力搅拌反应混合物过夜，用 DCM 稀释，用饱和氯化铵溶液洗涤，用无水硫酸钠 干燥，浓缩至干。 通过快速色谱法纯化残余物 (Biotage，Snap 10 柱，梯度 ：3％ 10CV， 3％至 5％ 2CV，5％ 10CVMeOH/DCM)，得到 372(0.1097g，0.169mmol，59.0％产率 ) 浅 棕色固体。 m/z ：651.4(M+H)+。
     步骤 2.3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基氨基甲酸 2，2，2- 三氟乙基酯 (373)
     向 372(0.1097g，0.169mmol) 的 DCM(1.0mL) 悬 浮 液 中 加 入 TFA(1.0mL，
     12.98mmol)， 并 在 室 温 下 搅 拌 反 应 混 合 物 2 小 时。 减 压 浓 缩 反 应 混 合 物， 将 残 余 物 溶 于 DCM 中， 用 1N NaOH 溶 液、 水 洗 涤， 用 无 水 硫 酸 钠 干 燥， 减 压 浓 缩， 得 到 373(0.0543g，0.097mmol，57.3 ％ 产 率 )， 为 白 色 固 体。 1H-NMR(DMSO-D6， 400 MHz )10 . 55( s ， 1 H ) ， 8 . 57( s ， 1 H ) ， 8 . 52( d ， J ＝ 5 . 62 Hz ， 1 H ) ， 8 . 32( s ， 1 H ) ， 8.23(d，J ＝ 8.1Hz，1H)，7.90(d，J ＝ 8.10Hz，1H)，7.63(d，J ＝ 9Hz，1H)，7.52(d， J ＝ 13.5Hz，1H)，7.39(t， J ＝ 9.0Hz，1H)，6.66(d， J ＝ 6.7Hz，1H)，4.85(q， J ＝ 9.0Hz，2H)，3.79(s，2H)，3.41(t， J ＝ 5.5Hz，2H)，3.24(s，3H)，2.66(t， J ＝ 5.5Hz，2H)。 m/z ：(M+H)+551.4。
     反应路线 33
     实施例 223
     N-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -7- 基氧基 ) 苯氨基甲酰基 ) 环丙磺酰胺 (376)
     步骤 1 ：环丙基磺酰基氨基甲酸乙基酯 (374)
     向 环 丙 磺 酰 胺 (Li， J. 等 人 ；Synlett 2006，5，725-728)(800mg，6.60mmol) 的丙酮 (25mL) 溶液中加入碳酸钾 (2.738g，3eq，19.81mmol) 和氯甲酸乙酯 (1.075g， 1.5eq，9.90mmol)，并在室温搅拌反应混合物过夜。将反应混合物倒入水中，用浓 HCl 使 其显酸性 (pH1)，然后用 EtOAc 萃取。 收集萃取物，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱 色谱纯化残余物 ( 洗脱液 ：30％ EtOAc/ 己烷 )，得到 374 无色油状物 (800mg，63％ )。1H NMR(DMSO， d6)11.47(s，1H)，4.10(q， J ＝ 10.27Hz，2H)，2.90(m，1H)，1.19(t， J ＝ 7.24Hz，3H)，1.039(m，4H)。
     步骤 2 ：(6-(7-(4-(3-( 环丙基磺酰基 ) 脲基 )-2- 氟苯氧基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡 啶 -2- 基 ) 吡啶 -3- 基 ) 甲基 (2- 甲氧基乙基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (375)
     向 胺 126(500mg，0.953mmol) 的 DME(4mL) 溶 液 中 加 入 氨 基 甲 酸 酯 374(460mg，2.5eq，2.383mmol)，并将反应混合物加热至 120℃，保持 1 天。 将混合物冷
     却至室温，用 EtOAc 和水稀释，收集有机相，用 Na2SO4 干燥，过滤，浓缩。 用柱色谱纯 化残余物 ( 洗脱液 ：EtOAc 至 50％丙酮 /EtOAc)，得到 375 棕色油状物 (130mg，55％ )。 MS(m/z) ＝ 672.5(M+H)
     步骤 3 ：N-(3- 氟 -4-(2-(5-((2- 甲氧基乙氨基 ) 甲基 ) 吡啶 -2- 基 ) 噻吩并 [3，2-b] 吡啶 -7- 基氧基 ) 苯基氨基甲酰基 ) 环丙磺酰胺 (376)
     向 375(140mg，0.208mmol) 的 DCM(5mL) 溶液中加入 HCl/ 二烷 (0.5mL，2mmol，9.6eq，4M，在二烷中 )，并搅拌反应混合物 4 小时。 用 EtOAc 稀释混合物，用 NaHCO3 溶液使其显碱性，用 EtOAc/ 丙酮萃取。 收集有机相，并除去。 浓缩 水相，并将残余物悬浮在 DCM 和丙酮的混合物中。 收集溶液相，用 Na2SO4 干燥，过 滤，浓缩，进一步用 Et2O 研磨之后，得到 376，为米色固体 ( 产率 8mg，7 ％ )。 1H NMR(DMSO-d6) ：8.67(s，1H)，8.56(s，1H)，8.47(d， J ＝ 5.28，1H)，8.27(s， 1 H ) ， 8 . 19( d ， J ＝ 8 . 02 Hz ， 1 H ) ， 7 . 85( m ， 2 H ) ， 7 . 80( s ， 1 H ) ， 7 . 22( m ， 2 H ) ， 6.59(d， J ＝ 5.28Hz，1H)，3.76(s，2H)，3.40(m，2H)，3.20(s，3H)，2.76(m，1H)， 2.60(m，2H)，0.75(m，2H)，0.65(m，2H)。 LRMS(ESI) ：( 计 算 值 )571.64( 实 测 值 )572.58(MH)+。
     按照本发明的其它化合物包括表 2 中的那些化合物。 表2
     按照本发明的其它化合物包括表 3 中的那些化合物。 表3
     按照本发明的其它化合物包括表 4 中的那些化合物。 表4
     按照本发明的其它化合物包括表 5 中的那些化合物。 表5
     按照本发明的其它化合物包括表 5a 中的那些化合物。
     药物组合物
     在一些实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含按照本发明的化合物和 可药用载体、赋形剂或稀释剂。 可以利用本领域众所周知的任何方法配制本发明的组合 物，并且可以通过任何途径给药，包括但不限于 ：肠胃外，口服，舌下，透皮，局部， 鼻内，气管内或直肠内。 在一些实施方案中，在医院环境中静脉内给予本发明的组合 物。 在一些实施方案中，可以通过口服途径给药。
     载体、赋形剂或稀释剂的特性取决于给药途径。 本文使用的术语 “可药用” 是 指与生物系统 ( 例如细胞、细胞培养物、组织或有机体 ) 相容的无毒物质，而且不会妨
     碍活性组分的生物活性的效果。 由此，除了抑制剂之外，按照本发明的组合物还可以含 有稀释剂，填充剂，盐，缓冲液，稳定剂，增溶剂，及本领域众所周知的其它物质。 可 药用制剂的制备描述在例如下列中 ：Remington′ s Pharmaceutical Sciences，第十八版， A.Gennaro， Mack PublishingCo.， Easton， Pa.，1990。
     活性化合物包含在可药用载体、赋形剂或稀释剂中，其数量应该足够给予患者 治疗有效量，并且在所治疗的患者中不会引起严重的毒性作用。 可以基于所递送的母体 化合物的重量，计算可药用衍生物的有效剂量范围。 如果衍生物本身显示出活性，则可 以按照上面的方法、使用衍生物的重量来估计有效剂量，或用本领域技术人员已知的其 它方式。
     VEGF 受体信号传导的抑制
     在一些实施方案中，本发明提供了在细胞中抑制 VEGF 受体信号传导的方法， 该方法包括 ：使想要抑制 VEGF 受体信号传导的细胞与按照本发明的 VEGF 受体信号传 导的抑制剂接触。 因为本发明的化合物抑制 VEGF 受体信号，所以，它们可用于 VEGF 受体信号传导在生物过程中作用的体外研究的研究工具。
     在一些实施方案中，抑制 VEGF 受体信号可以抑制接触抑制剂细胞的细胞增 殖。
     试验实施例
     VEGF 活性的抑制
     下列方案用于试验本发明的化合物。
     试验实施例 1
     体外受体酪氨酸激酶试验 (VEGF 受体 KDR)
     该试验测定了化合物抑制重组体人类 VEGF 受体酶活性的能力。
     将 1.6-kb cDNA( 相当于 VEGFR2(KDR) 的催化区域 )(Genbank 登录号 AF035121 氨基酸 806 至 1356) 克隆到 pDEST20Gateway 载体 (Invitrogen) 的 PstI 位点上，用于制备 该酶的 GST- 标记的型式。 按照制造商的说明书 (Invitrogen)，使用 Bac- 至 -BacTM 体 系，该结构用于产生重组体杆状病毒。
     用重组体杆状病毒构建体 (construct) 感染后，GST-VEGFR2806-1356 蛋白在 Sf9 细胞 (Spodoptera frugiperda) 中表达。 简要地说，在 72 小时期间，在 27℃，在旋转振荡 器上以 120rpm 的速度搅拌，使生长在悬浮液中、并保持在无血清培养基 (Sf900II，补充 有庆大霉素 ) 中的 Sf9 细胞 ( 细胞密度大约 2X106 个细胞 /ml) 感染上述病毒 (0.1 的多重 性感染 (MOI))。 在 398g 下离心采集受感染细胞 ( 采集 15 分钟 )。 将细胞沉淀在 -80℃ 冷冻，直到进行纯化为止。
     在 细 胞 提 取 和 纯 化 中 描 述 的 所 有 步 骤 是 在 4 ℃ 进 行 的。 将 感 染 上 GST-VEGFR2806-1356 重组体杆状病毒的冷冻 Sf9 细胞沉淀解冻，并平缓地再悬浮在缓 冲液 A(PBS， pH7.3，补充有 1μg/ml 胃酶抑素，2μg/ml 抑肽酶和亮肽素，50μg/ml PMSF，50μg/ml TLCK 和 10μM E64 和 0.5mM DTT) 中，每克细胞使用 3ml 缓冲液。 将悬浮液用 Dounce 进行均化，并将 1％ Triton X-100 加入到匀浆中，而后将其在 22500g 下、在 4℃离心 30 分钟。 上清液 ( 细胞提取物 ) 用作 GST-VEGFR2806-1356 纯化的起 始原料。将 上 清 液 装 填 到 用 PBS(pH7.3) 平 衡 的 GST- 琼 脂 糖 柱 (Sigma) 上。 用 PBS(pH7.3)+1 ％ Triton X-100 洗 涤 四 倍 柱 体 积 (CV)、 用 缓 冲 液 B(50mM Tris， pH8.0，20 ％ 甘 油 和 100mM NaCl) 洗 涤 4CV 之 后， 将 结 合 的 蛋 白 用 5CV 的 缓 冲 液 B( 补 充 有 5mM DTT 和 15mM 谷 胱 甘 肽 ) 逐 步 洗 脱。 将 得 自 于 该 色 谱 步 骤 的 富 集 GST-VEGFR2806-1356 的馏分进行收集 ( 基于 U.V. 示踪，即具有高 O.D.280 的馏份 )。 最后的 GST-VEGFR2806-1356 蛋白制剂浓度大约为 0.7mg/ml，纯度大约 70％。 将纯化 的 GST-VEGFR2806-1356 蛋白原料制成等分样品，并在 -80℃冷冻，而后在酶催试验中 使用。
     在 DELFIATM 试 验 (Perkin Elmer) 中 测 定 VEGFR/KDR 的 抑 制。 将 底 物 聚 (Glu4， Tyr) 固定到黑色高度结合的聚苯乙烯 96 孔板中。 将涂覆的板洗涤，并在 4℃保 存。 在试验期间，将酶在冰上、在聚丙烯 96 孔板中用抑制剂和 Mg-ATP 预先培养 4 分 钟，然后转入涂覆的板中。 随后在 30℃进行激酶反应 10-30 分钟。 对于 VEGFR/KDR， 试验中的 ATP 浓度是 0.6uM(2X Km)。 酶浓度是 5nM。 培养之后，用 EDTA 淬灭激酶反 应，并洗涤板。 通过用铕标记的抗磷酸酪氨酸 MoAb 进行培养，检测磷酸化产物。 洗涤 板之后，利用时间分辨荧光法，在 Gemini SpectraMax 读数器 (Molecular Devices) 中检测 结合的 MoAb。 在浓度范围内评价化合物，并测定 IC50 值 ( 得到 50％酶活性抑制的化合 物的浓度 )。 结果示于表 6 中。 在该表中， “a” 表示浓度小于 250 纳摩尔浓度的抑制 活性 ；“b” 表示浓度大于或等于 250 但小于 500 纳摩尔浓度的抑制活性 ；“c” 表示浓 度大于或等于 500 但小于 1000 纳摩尔浓度的抑制活性 ；“d” 表示浓度大于或等于 1000 纳摩尔浓度的抑制活性。
     试验实施例 2
     VEGF- 依赖性 Erk 磷酸化
     细胞和生长因子 ：HUVEC 细胞购买于 Cambrex Bio Science Walkersville， Inc， 并且按照供应商说明书进行培养。 对于表达 Sf9 细胞的杆状病毒，使用 Gateway 克隆技 术 (Invitrogen)，克隆 VEGF165 的全长编码序列。 用条件培养基 (conditioned media) 纯化 VEGF165，使用 NaCl 梯度洗脱 (HiTrap 肝素柱 (GEHealthcare Life Sciences))，而后使用咪 唑梯度洗脱 (HiTrap 螯合柱 (GEHealthcare Life Sciences))，然后缓冲保存在 PBS( 补充有 0.1％ BSA 并过滤消毒 ) 中。
     细胞试验 ：将细胞接种在 96 孔板中 (8000 个细胞 / 孔 )，并生长 48 小时。 然 后将细胞在血清和不含生长因子的介质中培育过夜，并接触化合物稀释物 1.5 小时。 在 介质中培养 15 分钟之后，将 VEGF165(150ng/ml) 细胞溶解在冰冷的溶解缓冲液 (50mM HEPES，pH7.4，150mM NaCl，1.5mM MgCl2，1％ Triton X-100，10％甘油 ) 中，该缓冲 液含有 1mM 4-(2 氨乙基 ) 苯磺酰氟盐酸盐、200μM 原钒酸钠、1mM 氟化钠、10μg/mL 亮肽素、10μg/mL 抑肽酶、1μg/mL 胃酶抑素和 50μg/mLNa- 对甲苯磺酰基 -L- 赖氨 酸氯甲基酮盐酸盐，并进行 Western 印迹，以便检测抗磷酸基 ERK1/2(T202/Y204)(Cell SignalingTechnologies)。
     Western 印迹分析 ：将得自于单处理孔的溶解产物样品在 5-20％ SDS-PAGE 凝 胶上分离，按照制造商说明书，使用 Immobilon 聚偏氟乙烯膜 (Amersham) 进行免疫印 迹。 在 Tris- 缓冲盐水 ( 含有 0.1％ Tween 20 净化剂 (TBST)) 中洗涤印记，并探测对磷酸基 -Thr202/Tyr204-ERK( 细胞信号传导技术 ) 的抗体。 按照制造商的说明书，使用成 像和密度测定分析的 Storm 显像密度计 (GE Healthcare ；800PMT，100nM 分辩率 )，进行 化学荧光检测 (Amersham， ECL plus)。 使用 4- 参数拟合模型，在稀释度范围内的值用 于制作 IC50 曲线。 使用 GraFit 5.0 软件，计算这些曲线。 结果示于表 6 中。 在该表中， “a” 表示浓度小于 250 纳摩尔浓度的抑制活性 ；“b” 表示浓度大于或等于 250 但小于 500 纳摩尔浓度的抑制活性 ；“c”表示浓度大于或等于 500 但小于 1000 纳摩尔浓度的抑 制活性 ；“d” 表示浓度大于或等于 1000 纳摩尔浓度的抑制活性。
     表6
     试验实施例 3
     体内实体瘤疾病模型
     该试验测定了化合物抑制实体瘤生长的能力。
     通过皮下注射 1X106U87、A431 或 SKLMS 细胞 / 小鼠，将肿瘤异种移植物建立 在雌性无胸腺 CD1 小鼠 (Charles River Inc.) 的侧腹部。 建立后，然后在裸小鼠宿主中， 肿瘤连续皮下传代 (passaged s.c.)。 得自于这些宿主动物的肿瘤片段在随后的化合物评价 实验中使用。 对于化合物评价实验，通过手术将重量大约 20g 的雌性裸小鼠皮下植入～ 30mg( 得自于供体肿瘤 ) 的肿瘤片段。 当肿瘤大约 100mm3 大小时 ( 植入之后～ 7-10
     天 )，将动物随机分成治疗和对照组。 每组有 6-8 只携带肿瘤的小鼠，在整个实验过程 中，将每个小鼠的耳朵进行标记并分别跟踪。
     将小鼠称重，利用卡尺进行肿瘤测定，每周三次，在第 1 天开始。 利用众所周 知的公式 (L+W/4)3 4/3π，将这些肿瘤测量数据转变为肿瘤体积。 当对照组肿瘤达到大 约 1500mm3 时，实验结束。 在该模型中，对于每个试验化合物，用 100 减去化合物治疗 组的平均肿瘤体积变化 / 对照组 ( 非治疗或溶媒治疗组 ) 的平均肿瘤体积变化 x100(ΔT/ ΔC)，得到百分比肿瘤生长抑制 (％ TGI)。 除了肿瘤体积之外，还监测动物的体重，每周两次，监测至多 3 周。
     试验实施例 4
     体内脉络膜的新生血管形成 (CNV) 模型
     该试验测定了化合物抑制 CNV 进展的能力。 CNV 是造成患有年龄相关的黄斑 变性 (AMD) 的患者严重视力丧失的主要原因。
     雄性 Brown-Norway 大鼠 (Japan Clea Co.， Ltd.) 用于这些研究。
     通过腹膜内注射戊巴比妥使大鼠麻醉，并用 0.5％托比卡胺和 0.5％盐酸去氧肾 上腺素 (phenylephrine hydrochloride) 使右侧散瞳。 使用 Green laserPhotocoagulator(Nidex Inc.， Japan) 的 狭 缝 灯 输 送 体 系， 在 视 网 膜 血 管 之 间 使 右 眼 接 受 6 次 激 光 灼 伤， HealonTM(AMO Inc) 的显微镜玻片用作接触镜。 激光功率是 100 或 200mW(0.1 秒 )，斑点 直径是 100μm。 在激光灼伤的时候，观察到鼓泡产生，这是 Bruch′ s 膜破裂的迹象， 其对于 CNV 产生是重要的。
     激光辐照之后 ( 第 0 天 )，使用 SAS 软件 (SAS institute Japan，R8.1)，基于体重 将大鼠分到各个组中。 动物麻醉和右侧散瞳 ( 上述 ) 之后，通过在第 3 天注射 (10μL/ 眼睛 )30nmol/ 眼睛的剂量，使动物的右眼接受化合物或溶媒。 将化合物溶解或悬浮在 CBS、 PBS 或其它合适的溶媒中，而后注射。
     在第 10 天，用乙醚使动物麻醉，通过尾静脉注射高分子量异硫氰酸荧光素 (FITC)- 葡聚糖 (SIGMA，2×106MW)(20mg/ 大鼠 )。 FITC- 葡聚糖注射之后大约 30 分钟，用乙醚或二氧化碳将动物安乐死，去除眼睛，并用 10％福尔马林中性缓冲溶液固 定。 固定超过 1 小时之后，通过从眼球上除去角膜、晶状体和视网膜，获得 RPE- 脉络 膜 - 巩膜铺片。 在显微镜载玻片上，将铺片固定在 50％甘油中，使用荧光显微镜 (Nikon Corporation，激发滤片 ：465-495nm，吸收滤片 ：515-555nm)，给激光灼伤的部分照 像。 使用 Scion 成像，通过测定在像片上观察到的过荧光面积，获得 CNV 面积。
     6 个灼伤的平均 CNV 面积用作 CNV 面积的独立单位值，将化合物治疗组的平 均 CNV 面积与赋形剂治疗组的平均 CNV 面积进行比较。 本发明一些化合物的结果示于 表 7 中，并且表示为 CNV 进展的％抑制 ( “A” 表示大于或等于 60％抑制， “B” 表示 ≥40％至＜ 60％抑制 )。
     表7
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