用作硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶抑制剂的氮杂环烷衍生物
发明领域
本发明涉及为硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶(SCD)抑制剂的氮杂环烷衍生物，以及这类化合物在控制、预防和/或治疗由SCD活性介导的病症或疾病中的用途。本发明的化合物可用于控制、预防和治疗涉及脂质合成和代谢异常的病症和疾病，包括动脉粥样硬化等心血管疾病、肥胖症、糖尿病、神经病、代谢综合征、胰岛素抵抗、癌症和肝脂肪变性。
发明背景
至少有三类脂酰辅酶A(CoA)去饱和酶(δ-5去饱和酶、δ-6去饱和酶和δ-9去饱和酶)负责由膳食来源或哺乳动物体内从头合成得到的单不饱和酯酰辅酶A和多不饱和酯酰辅酶A中双键的形成。δ-9特异性硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)催化在单不饱和脂酰辅酶A的C9-C10位置上限速性地形成顺式双键。优选的底物为硬脂酰辅酶A和棕榈酰辅酶A，其中所得到的油酰辅酶A和棕榈油酰辅酶A是磷脂、甘油三酯、胆固醇酯和蜡酯生物合成中的主要组分(Dobrzyn和Natami，Obesity Reviews，6：169-174(2005))。
在1974年首次分离出大鼠肝微粒体SCD蛋白并进行了表征(Strittmatter等，PNAS，71：4565-4569(1974))。此后从不同物种中克隆出多个哺乳动物SCD基因并进行了研究。例如，从大鼠中鉴定出2个基因(SCD1和SCD2，Thiede等，J.Biol.Chem.，261，13230-13235(1986)；Mihara，K.，J.Biochem.(Tokyo)，108：1022-1029(1990))；从小鼠鉴定出4个基因(SCD1、SCD2、SCD3和SCD4)(Miyazaki等，J.Biol.Chem.，278：33904-33911(2003))；以及从人中鉴定出2个基因(SCD1和ACOD4(SCD2))(Zhang等，Biochem.J.，340：255-264(1991)；Beiraghi等，Gene，309：11-21(2003)；Zhang等，Biochem.J.，388：135-142(2005))。自1970年代以来就了解到SCD在大鼠和小鼠中参与脂肪酸代谢(Oshino，N.，Arch.Biochem.Biophys.，149：378-387(1972))。这得到下列生物学研究的进一步支持：a)携带SCD1基因的自然突变的Asebia小鼠(Zheng等，Nature Genetics，23：268-270(1999))，b)得自靶定基因缺失的SCD1失效小鼠(Ntambi等，PNAS，99：11482-11486(2002)，以及c)在瘦蛋白诱导的体重减轻期间抑制SCD1表达(Cohen等，Science，297：240-243(2002))。小鼠中使用反义寡核苷酸抑制剂(ASO)证实了药物抑制SCD活性的潜在益处(Jiang等，J.Clin.Invest.，115：1030-1038(2005))。在小鼠原代肝细胞中，ASO抑制SCD活性减少脂肪酸合成并增加脂肪酸氧化。用SCD-ASO治疗小鼠可预防饮食诱发的肥胖症、减肥、减轻肝肿大、脂肪变性、降低餐后血浆胰岛素水平和葡萄糖水平、减少脂肪酸从头合成、降低脂肪生成基因的表达以及增加在肝和脂肪组织内促进能量消耗的基因的表达。因此，SCD抑制表示治疗肥胖症及其相关代谢紊乱的新的治疗策略。
存在非常有说服力的证据支持人体内SCD活性升高直接参与若干普通疾病的进程。例如，在非酒精性脂肪肝病患者中存在肝脂肪生成升高到分泌出甘油三酯(Diraison等，Diabetes Metabolism，29：478-485(2003))；Donnelly等，J.Clin.Invest.，115：1343-1351(2005))。在肥胖受治疗者中，餐后从头开始的脂肪生成显著升高(Marques-Lopes等，American Journal of Clinical Nutrition，73：252-261(2001))。高SCD活性与心血管风险范围加大之间存在显著相关性，包括血浆甘油三酯升高、体重指数过高和血浆HDL降低(Attie等，J.LipidRes.，43：1899-1907(2002))。SCD活性在控制人转化细胞的增殖和存活中起着重要作用(Scaglia和Igal，J.Biol.Chem.，(2005))。
除了上面提及的反义寡核苷酸外，SCD活性的抑制剂包括非选择性硫杂脂肪酸底物类似物[B.Behrouzian和P.H.Buist，Prostaglandins，Leukotrienes，and Essential Fatty Acids，68：107-112(2003)]；环丙烯脂肪酸(cyclopropenoid fatty acid)(Raju和Reiser，J.Biol.Chem.，242：379-384(1967))；某些共轭长链脂肪酸异构体(Park等，Biochim.Biophys.Acta，1486：285-292(2000))；已公布的国际专利申请公布号WO 2005/011653、WO 2005/011654、WO 2005/011656、WO2005/011656和WO 2005/011657(所有均转让给XenonPharmaceuticals，Inc.)中所公开的一系列哒嗪衍生物以及国际专利申请公布号WO 2006/014168、WO 2006/034279、WO 2006/034312、WO2006/034315、WO 2006/034338、WO 2006/034341、WO 2006/034440、WO 2006/034441和WO 2006/034446(所有均转让给XenonPharmaceuticals，Inc.)中所公开的一系列杂环衍生物。
本发明涉及作为硬脂酰辅酶A δ-9去饱和酶抑制剂的新的氮杂环烷衍生物，它可用于治疗和/或预防由SCD活性介导的各种病症和疾病，包括但不限于脂质水平升高(以非酒精性脂肪肝病为例)、心血管疾病、肥胖症、糖尿病、代谢综合征和胰岛素抵抗。
硬脂酰辅酶A去饱和酶在脂质代谢中的作用可参见M.Miyazaki和J.M.Ntambi，Prostaglandins，Leukotrienes，and Essential Fatty Acids，68：113-121(2003)。用药物控制SCD活性的治疗潜力可参见A.Dobryzn和J.M.Ntambi，“Stearoyl-CoA desaturase as a new drug targetfor obesity treatment(用作治疗肥胖症的新药物靶标的硬脂酰辅酶A去饱和酶)”，Obesity Reviews，6：169-174(2005)。
发明概述
本发明涉及下列结构式I的氮杂环烷衍生物：
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这些氮杂环烷衍生物可有效地作为SCD的抑制剂。因此，它们可用于治疗、控制或预防响应SCD抑制的疾病，例如糖尿病、胰岛素抵抗、脂质紊乱(lipid disorder)、肥胖症、动脉粥样硬化和代谢综合征。
本发明还涉及包含本发明化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物和药物组合物用于治疗、控制或预防有需要的受治疗者的响应SCD抑制的障碍、疾病或病症的方法。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物和药物组合物用于治疗、控制或预防以下疾病的方法：2型糖尿病、胰岛素抵抗、肥胖症、脂质紊乱、动脉粥样硬化和代谢综合征。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物以及治疗有效量的已知可用于治疗肥胖症的另一类药物以用于治疗、控制或预防肥胖症的方法。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物以及治疗有效量的已知可用于治疗2型糖尿病的另一类药物以用于治疗、控制或预防2型糖尿病的方法。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物以及治疗有效量的已知可用于治疗动脉粥样硬化的另一类药物以用于治疗、控制或预防动脉粥样硬化的方法。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物以及治疗有效量的已知可用于治疗脂质紊乱的另一类药物以用于治疗、控制或预防脂质紊乱的方法。
本发明还涉及通过给予本发明的化合物以及治疗有效量的已知可用于治疗代谢综合征的另一类药物以用于治疗代谢综合征的方法。
发明详述
本发明涉及可用作SCD抑制剂的氮杂环烷衍生物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物如下列结构式I所示：
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其中：
每个m独立地为0-4的整数；
每个n独立地为0-2的整数；
每个s独立地为1-3的整数；
每个t独立地为1-3的整数；
q为0或1；
r为0或1；
Z为O、S或NR4；
X-Y为N-CRaRb、CR14-O、CR14-S(O)0-2或CR13-CRaRb；
W为选自以下的杂芳基：
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Ar为任选被1-5个R3取代基取代的苯基、萘基或杂芳基；
Ra和Rb各自独立地为氢或C1-3烷基，其中烷基任选被1-3个独立选自氟和羟基的取代基取代；
R1为选自以下的杂芳基：
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其中Rc为-(CH2)mCO2H、-(CH2)mCO2C1-3烷基、-(CH2)m-Z-(CH2)pCO2H或-(CH2)m-Z-(CH2)pCO2C1-3烷基，其中每个(CH2)亚甲基任选被一个或两个选自以下的取代基取代：C1-4烷基、氟、氧代和羟基；且其中所述R1杂芳环任选被一个独立选自以下的取代基取代：氰基、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷基磺酰基和三氟甲基；
每个R2独立选自：
氢，
卤素，
羟基，
氰基，
氨基，
硝基，
任选被1-5个氟取代的C1-4烷基，
任选被1-5个氟取代的C1-4烷氧基，
任选被1-5个氟取代的C1-4烷硫基，
C1-4烷基磺酰基，
羧基，
C1-4烷氧基羰基，和
C1-4烷基羰基；
每个R3独立选自：
C1-6烷基，
C2-6烯基，
(CH2)n-苯基，
(CH2)n-萘基，
(CH2)n-杂芳基，
(CH2)n-杂环基，
(CH2)nC3-7环烷基，
卤素，
硝基，
(CH2)nOR4，
(CH2)nN(R4)2，
(CH2)nC≡N，
(CH2)nCO2R4，
(CH2)nNR4SO2R4，
(CH2)nSO2N(R4)2，
(CH2)nS(O)0-2R4，
(CH2)nNR4C(O)N(R4)2，
(CH2)nC(O)N(R4)2，
(CH2)nNR4C(O)R4，
(CH2)nNR4CO2R4，
(CH2)nC(O)R4，
O(CH2)nC(O)N(R4)2，
(CH2)s-Z-(CH2)t-苯基，
(CH2)s-Z-(CH2)t-萘基，
(CH2)s-Z-(CH2)t-杂芳基，
(CH2)s-Z-(CH2)t-杂环基，
(CH2)s-Z-(CH2)t-C3-7环烷基，
(CH2)s-Z-(CH2)t-OR4，
(CH2)s-Z-(CH2)t-N(R4)2，
(CH2)s-Z-(CH2)t-NR4SO2R4，
(CH2)s-Z-(CH2)t-C≡N，
(CH2)s-Z-(CH2)t-CO2R4，
(CH2)s-Z-(CH2)t-SO2N(R4)2，
(CH2)s-Z-(CH2)t-S(O)0-2R4，
(CH2)s-Z-(CH2)t-NR4C(O)N(R4)2，
(CH2)s-Z-(CH2)t-C(O)N(R4)2，
(CH2)s-Z-(CH2)t-NR4C(O)R4，
(CH2)s-Z-(CH2)t-NR4CO2R4，
(CH2)s-Z-(CH2)t-C(O)R4，
CF3，
CH2CF3，
OCF3，和
OCH2CF3；
其中苯基、萘基、杂芳基、环烷基和杂环基任选被1-3个独立选自以下的取代基取代：卤素、羟基、C1-4烷基、三氟甲基和C1-4烷氧基；且其中R3中的任何亚甲基(CH2)的碳原子任选被1-2个独立选自以下的基团取代：氟、羟基和C1-4烷基；或者两个取代基当位于同一亚甲基(CH2)上时，其与它们所连接的碳原子结合在一起时形成环丙基；
每个R4独立选自：
氢，
C1-6烷基，
(CH2)n-苯基，
(CH2)n-杂芳基，
(CH2)n-萘基，和
(CH2)nC3-7环烷基；
其中烷基、苯基、杂芳基和环烷基任选被1-3个独立选自以下的基团取代：卤素、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基；或者两个R4基团与它们所连接的原子一起形成4-8元任选含有选自O、S、NH和NC1-4烷基的其他杂原子的单环环系或二环环系；
R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自独立地为氢、氟或C1-3烷基，其中烷基任选被1-3个独立选自氟和羟基的取代基取代；
R13为氢、C1-3烷基、氟或羟基；和
每个R14为氢或C1-3烷基。
在本发明化合物的一个实施方案中，m为1或2。在这个实施方案的一类中，m为1。
在本发明化合物的第二个实施方案中，q和r同时为1，得到6元哌啶环。
在本发明化合物的第三个实施方案中，q为1，r为0，得到5元吡咯烷环。
在本发明化合物的第四个实施方案中，q和r同时为0，得到4元氮杂环丁烷环。
在本发明化合物的第五个实施方案中，X-Y为CH-O。在这个实施方案的一类中，Ar是被1-3个如上定义的R3取代基取代的苯基。
在本发明化合物的第六个实施方案中，X-Y为CH-S(O)p。在这个实施方案的一类中，Ar是被1-3个如上定义的R3取代基取代的苯基。
在本发明化合物的第七个实施方案中，X-Y为N-CRaRb。在这个实施方案的一类中，Ar是被1-3个如上定义的R3取代基取代的苯基。在本实施方案的又一类中，Ra和Rb为氢，Ar是被1-3个R3取代基取代的苯基。
在本发明化合物的第八个实施方案中，X-Y为CR13-CRaRb。在这个实施方案的一类中，Ar是被1-3个如上定义的R3取代基取代的苯基。在本实施方案的又一类中，Ra、Rb和R13为氢，Ar是被1-3个R3取代基取代的苯基。
在本发明化合物的另一个实施方案中，R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自为氢。
在又一个实施方案中，W为选自以下的杂芳基：
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其中R1和R2如上定义。在这个实施方案的一类中，每个R2为氢。
在本实施方案的另一类中，W为：
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其中R1和R2如上定义。在这一类的一个亚类中，每个R2为氢。
在本发明化合物的又一个实施方案中，R1为选自以下的杂芳基：
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其中Rc为-CH2CO2H或-CH2CO2C1-3烷基。在这个实施方案的一类中，R1为：
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在本发明化合物的又一个实施方案中，q和r同时为1；X-Y为CH-O；W为选自以下的杂芳基：
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R1为选自以下的杂芳基：
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其中Rc为-CH2CO2H或-CH2CO2C1-3烷基，R2如上定义。
在这个实施方案的一类中，W为：
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在本实施方案的另一类中，R2、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自为氢。
可用作SCD抑制剂的本发明化合物及其药学上可接受的盐的示例性但非限制性的实例如下：
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本文所用的下列术语如下定义。
“烷基”以及具有前缀“烷”的其他基团，例如烷氧基和烷酰基，是指可以是直链或支链及其组合的碳链，除非碳链另有定义。烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基等等。如果未规定碳原子数目，则是指C1-6。
“环烷基”是指具有规定碳原子数的饱和碳环。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等等。环烷基一般为单环的，除非另有说明。环烷基是饱和的，除非另有说明。
术语“烯基”可指具有规定碳原子数的直链或支链烯烃。烯基的实例包括乙烯基、1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等等。
术语“烷氧基”是指规定碳原子数(例如C1-6烷氧基)或该范围内任何数目的直链或支链烃氧化物残基(alkoxide)[即甲氧基(MeO-)、乙氧基、异丙氧基等]。
术语“烷硫基”是指规定碳原子数(例如C1-6烷硫基)或该范围内任何数目的直链或支链烷基硫化物残基(alkylsulfide)[即甲硫基(MeS-)、乙硫基、异丙硫基等]。
术语“烷基氨基”是指规定碳原子数(例如C1-6烷基氨基)或该范围内任何数目的直链或支链烷基胺残基(alkylamine)[即甲基氨基、乙基氨基、异丙基氨基、叔丁基氨基等]。
术语“烷基磺酰基”是指规定碳原子数(例如C1-6烷基磺酰基)或该范围内任何数目的直链或支链烷基砜残基(alkylsulfone)[即甲基磺酰基(MeSO2-)、乙基磺酰基、异丙基磺酰基等]。
术语“烷基亚磺酰基”是指规定碳原子数(例如C1-6烷基亚磺酰基)或该范围内任何数目的直链或支链烷基亚砜残基(alkylsulfoxide)[即甲基亚磺酰基(MeSO-)、乙基亚磺酰基、异丙基亚磺酰基等]。
术语“烷氧基羰基”是指规定碳原子数(例如C1-6烷氧基羰基)或该范围内任何数目的直链或支链的本发明羧酸衍生物的酯残基[即甲基氧基羰基(MeOCO-)、乙基氧基羰基或丁基氧基羰基]。
“芳基”是指含有碳环原子的芳族单环环系或芳族多环环系。优选的芳基为6-10元芳族单环环系或芳族多环环系。苯基和萘基为优选的芳基。最优选的芳基为苯基。
“杂环基”是指饱和或不饱和的非芳族环或环系，所述环或环系含有至少一个选自O、S和N的杂原子，还包括硫的氧化形式，即SO和SO2。杂环的实例包括四氢呋喃(THF)、二氢呋喃、1，4-二氧杂环己烷、吗啉、1，4-二噻烷、哌嗪、哌啶、1，3-二氧杂环戊烷、咪唑烷、咪唑啉、吡咯啉、吡咯烷、四氢吡喃、二氢吡喃、氧硫杂环戊烷、二硫杂环戊烷、1，3-二氧杂环己烷、1，3-二噻烷、氧硫杂环己烷、硫代吗啉、2-氧代哌啶-1-基、2-氧代吡咯烷-1-基和2-氧代氮杂环丁烷-1-基等等。
“杂芳基”是指含有至少一个选自O、S和N的环杂原子的芳族杂环或部分芳族杂环。因此杂芳基包括与其他种类的环(例如芳环、不是芳族的环烷基环和杂环)稠合的杂芳基。杂芳基的实例包括：吡咯基、异噁唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶基、噁唑基、噁二唑基(特别是1，3，4-噁二唑-2-基和1，2，4-噁二唑-3-基)、噻二唑基、噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、三嗪基、噻吩基、嘧啶基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、二氢苯并呋喃基、二氢吲哚基、哒嗪基、吲唑基、异吲哚基、二氢苯并噻吩基、吲嗪基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、萘啶基、咔唑基、苯并二氧杂环戊烯基、喹喔啉基、嘌啉基、呋咱基、异苯并呋喃基(isobenzylfuranyl)、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基、吲哚基、异喹啉基、二苯并呋喃基等等。对于杂环基和杂芳基，包括含有3-15个原子的环或环系，形成1-3个环。
“卤素”是指氟、氯、溴和碘。一般优选氯和氟。当卤素取代于烷基或烷氧基上时(例如CF3O和CF3CH2O)，最优选为氟。
结构式I的化合物可含有一个或多个不对称中心，因此可产生外消旋体和外消旋混合物、单独的对映异构体、非对映异构体混合物和各自的非对映异构体。本发明包括结构式I化合物的所有这类异构形式。
可通过例如从合适的溶剂(例如甲醇或乙酸乙酯或其混合物)中分级结晶，或者通过采用旋光固定相的手性色谱法，将结构式I的化合物分离成其各个非对映异构体。可通过结晶产物或结晶中间体(必要时，用含有已知绝对构型的不对称中心的试剂衍生化)的X射线晶体学测定法来确定绝对立体化学结构。
或者，可采用已知绝对构型的旋光纯原料或试剂，通过立体有择合成，获得通用结构式I的化合物的任何立体异构体。
如有需要，可以对化合物的外消旋混合物进行分离，以便分离出各自的对映异构体。可采用本领域众所周知的方法进行分离，例如使化合物的外消旋混合物与对映异构纯的化合物偶合形成非对映异构体混合物，接着通过标准方法(例如分级结晶或色谱法)分离各自的非对映异构体。偶合反应通常采用对映异构纯的酸或碱以形成盐。然后可通过解离附加的手性残基，将非对映体衍生物转化成纯的对映异构体。还可通过采用本领域众所周知的手性固定相的色谱方法，直接分离化合物的外消旋混合物。
本文所述的某些化合物含有烯属双键，除非另有说明，否则是指包括E和Z几何异构体。
本文所述的某些化合物可以互变异构体存在，它具有不同的氢连接点，并伴以一个或多个双键的移动。例如，酮及其烯醇形式为酮-烯醇互变异构体。各个互变异构体及其混合物均包括在本发明的化合物内。
应当了解的是，本文所提及的结构式I的化合物是指还包括药学上可接受的盐，且同样包括当它们用作游离化合物或其药学上可接受的盐或其他合成操纵形式的前体时的非药学上可接受的盐。
可以药学上可接受的盐的形式给予本发明的化合物。术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒碱或酸(包括无机碱或有机碱以及无机酸或有机酸)制备的盐。包括在术语“药学上可接受的盐”内的碱性化合物的盐是指本发明化合物的无毒盐，一般通过使游离碱与合适的有机酸或无机酸反应来制备。本发明碱性化合物的代表性盐包括但不限于：乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、黏酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-葡甲胺铵盐(N-methylglucamine ammonium salt)、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐(扑酸盐)、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、triethiodide和戊酸盐。此外，当本发明的化合物带有酸性部分时，其合适的药学上可接受的盐包括但不限于由有机碱衍生的盐，包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等等。特别优选的是铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。由药学上可接受的有机无毒碱衍生的盐包括伯胺、仲胺、叔胺、环状胺和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇，等等。
同样，在本发明化合物中存在羧酸(-COOH)或醇基的情况下，可以采用羧酸衍生物的药学上可接受的酯，例如甲酯、乙酯或新戊酰氧基甲酯，或者醇的酰基衍生物，例如乙酰基、新戊酰基、苯甲酰基和氨酰基的衍生物。本领域已知的用于改进溶解或水解特性的酯类和酰基类也包括在内，以用作缓释剂型或前药剂型。
结构式I化合物的溶剂合物，特别是水合物，也包括在本发明内。
主题化合物可用于在需要这种抑制的患者(例如哺乳动物)体内抑制硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶(SCD)的方法，该方法包括予有效量的所述化合物。因此，本发明的化合物可用于控制、预防和/或治疗由SCD酶活性过高或异常介导的病症和疾病。
因此，本发明的一个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的高血糖症、糖尿病或胰岛素抵抗的方法，该方法包括给予所述患者有效量的结构式I的化合物或其药用盐或溶剂合物。
本发明的第二个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的非胰岛素依赖型糖尿病(2型糖尿病)的方法，该方法包括给予患者对抗糖尿病是有效量的结构式I的化合物。
本发明的第三个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的肥胖症的方法，该方法包括给予所述患者对治疗肥胖症是有效量的结构式I的化合物。
本发明的第四个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的代谢综合征及其后遗症的方法，该方法包括给予所述患者对治疗代谢综合征及其后遗症是有效量的结构式I的化合物。代谢综合征的后遗症包括高血压、血糖水平升高、高甘油三酯和低HDL胆固醇水平。
本发明的第五个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的脂质紊乱的方法，该方法包括给予所述患者对治疗所述脂质紊乱是有效量的结构式I的化合物，所述脂质紊乱选自血脂异常(dyslipidemia)、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL和高LDL。
本发明的第六个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的动脉粥样硬化的方法，该方法包括给予所述患者对治疗动脉粥样硬化是有效量的结构式I的化合物。
本发明的第七个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的癌症的方法，该方法包括给予所述患者对治疗癌症是有效量的结构式I的化合物。
本发明另一方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的选自以下疾病的方法，该方法包括给予患者对治疗所述疾病是有效量的结构式I的化合物：(1)高血糖症，(2)葡萄糖耐量低(low glucose tolerance)，(3)胰岛素抵抗，(4)肥胖症，(5)脂质紊乱，(6)血脂异常，(7)高脂血症，(8)高甘油三酯血症，(9)高胆固醇血症，(10)低HDL水平，(11)高LDL水平，(12)动脉粥样硬化及其后遗症，(13)血管再狭窄，(14)胰腺炎，(15)腹部肥胖，(16)神经变性性疾病，(17)视网膜病，(18)肾病，(19)神经病，(20)脂肪肝病，(21)多囊性卵巢综合征，(22)睡眠呼吸紊乱，(23)代谢综合征，以及(24)其中胰岛素抵抗是部分因素的其他病症和障碍。
本发明又一方面涉及在需要这类治疗的哺乳动物患者中延迟发生选自以下疾病的方法，该方法包括给予患者对延迟所述疾病发生是有效量的结构式I的化合物：(1)高血糖症，(2)葡萄糖耐量低减，(3)胰岛素抵抗，(4)肥胖症，(5)脂质紊乱，(6)血脂异常，(7)高脂血症，(8)高甘油三酯血症，(9)高胆固醇血症，(10)低HDL水平，(11)高LDL水平，(12)动脉粥样硬化及其后遗症，(13)血管再狭窄，(14)胰腺炎，(15)腹部肥胖，(16)神经变性性疾病，(17)视网膜病，(18)肾病，(19)神经病，(20)脂肪肝病，(21)多囊性卵巢综合征，(22)睡眠呼吸紊乱，(23)代谢综合征，以及(24)胰岛素抵抗是部分因素的其他病症或障碍。
本发明又一方面涉及在需要这类治疗的哺乳动物患者中降低发生选自以下疾病的风险的方法，该方法包括给予患者对降低发生所述疾病的风险是有效量的结构式I的化合物：(1)高血糖症，(2)葡萄糖耐量低减，(3)胰岛素抵抗，(4)肥胖症，(5)脂质紊乱，(6)血脂异常，(7)高脂血症，(8)高甘油三酯血症，(9)高胆固醇血症，(10)低HDL水平，(11)高LDL水平，(12)动脉粥样硬化及其后遗症，(13)血管再狭窄，(14)胰腺炎，(15)腹部肥胖，(16)神经变性性疾病，(17)视网膜病，(18)肾病，(19)神经病，(20)脂肪肝病，(21)多囊性卵巢综合征，(22)睡眠呼吸紊乱，(23)代谢综合征，以及(24)胰岛素抵抗是部分因素的其他病症或障碍。
还可按照本发明的方法治疗除灵长类(例如人)以外的各种其他哺乳动物。例如，可以治疗的哺乳动物物种包括但不限于牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠，或者其他的牛、绵羊、马、犬、猫、啮齿动物(例如小鼠)。然而，还可在其他物种(例如雏鸡等禽类物种)中实施该方法。
本发明还涉及制备用于在人和动物体内抑制硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶活性的药物的方法，该方法包括将本发明的化合物与药学上可接受的载体或稀释剂相混合。更具体地讲，本发明涉及结构式I的化合物在制备用于治疗哺乳动物的选自以下疾病的药物中的用途：高血糖症、2型糖尿病、胰岛素抵抗、肥胖症和脂质紊乱，其中脂质紊乱选自血脂异常、高脂血症、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、低HDL和高LDL。
本发明方法中待治疗的受治疗者一般为雄性或雌性哺乳动物，优选为人，其中需要抑制硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶的活性。术语“治疗有效量”是指由研究人员、兽医、医学博士或其他临床医师所确定的主题化合物在组织、系统、动物或人中可诱导生物反应或药物反应的量。
本文所用术语“组合物”是指包括包含规定剂量的规定成分的产品，以及由规定剂量的规定成分直接或间接组合而得到的任何产品。与药物组合物有关的该术语是指包括包含活性成分和构成载体的惰性成分的产品，以及直接或间接由任何两种或更多种成分组合、复合或聚集，或者从一种或多种成分解离，或者从一种或多种成分的其他类型反应或相互反应而产生的任何产品。因此，本发明的药物组合物包括通过将本发明的化合物和药学上可接受的载体混合而制成的任何组合物。所谓“药学上可接受的”是指载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂的其他成分配伍且对其接受者无毒。
术语化合物“的给予”和/或“给予”化合物应当理解为是指向需要治疗的个体提供本发明的化合物或本发明化合物的前药。
可通过下列基于微粒体和基于完整细胞的测定法来证实本发明化合物作为硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶(SCD)酶活性抑制剂的效用：
I.SCD诱导的大鼠肝微粒体测定法：
使用SCD1诱导的大鼠肝微粒体并对以前披露的方法(Joshi等，J.Lipid Res.，18：32-36(1977))作一些修改，通过使放射性标记的硬脂酰辅酶A转化为油酰辅酶A来测定式I化合物对SCD酶的活性。Wistar大鼠用高糖/无脂啮齿动物饮食(LabDiet#5803，Purina)饲喂3天后，取SCD诱导的肝脏在250mM蔗糖、1mM EDTA、5mM DTT和50mM Tris-HCl(pH 7.5)中匀浆(1∶10重量/体积)。离心(18,000xg/4℃)20分钟以除去组织和细胞碎片后，通过100,000xg离心(60分钟)将所得沉淀悬浮于100mM磷酸钠、20％甘油和2mM DTT中，来制备微粒体。将试验化合物的2μL DMSO溶液与180μL微粒体(通常约为100μg/mL，于Tris-HCl缓冲液(100mM，pH 7.5)、ATP(5mM)、辅酶A(0.1mM)、Triton X-100(0.5mM)和NADH(2mM)中)在室温下温育15分钟。通过加入20μL[3H]-硬脂酰辅酶A(终浓度为2μM，放射性浓度为1μCi/mL)开始反应，通过加入150μL 1N氢氧化钠终止反应。在室温下经过60分钟后，使油酰辅酶A和硬脂酰辅酶A水解，通过加入补充了0.5mg/mL硬脂酸和0.5mg/mL油酸的150μL 15％磷酸(体积/体积)的乙醇溶液使该溶液酸化。然后在配备C-18反相柱和PackardFlow闪烁分析仪的HPLC中，定量测定[3H]-油酸和[3H]-硬脂酸。或者，将反应混合物(80μL)与氯化钙/活性炭水悬浮液(100μL 15％(重量/体积)活性炭加上20μL 2N CaCl2)相混合。对所得混合物进行离心以使放射性脂肪酸类物质沉淀为稳定的沉淀物。用闪烁计数器对50μL上清液进行计数，对得自SCD催化的9，10-[3H]-硬脂酰辅酶A去饱和的氚化水进行定量测定。
II.基于完整细胞的SCD(δ-9)去饱和酶、δ-5去饱和酶和δ-6去饱和酶测定法：
在37℃、5％CO2下，在湿润培养箱中将人HepG2细胞在24孔板内的MEM培养基(Gibco目录号11095-072)中生长，培养基补充了10％热灭活胎牛血清。将溶于培养基的试验化合物与半融合的细胞在37℃下温育15分钟。向每孔加入[1-14C]-硬脂酸至0.05μCi/mL的终浓度，以检测SCD催化的[14C]-油酸的形成。分别使用0.05μCi/mL[1-14C]-二十碳三烯酸或[1-14C]-亚麻酸加上10μM 2-氨基-N-(3-氯苯基)苯甲酰胺(一种δ-5去饱和酶抑制剂)，以指示δ-5去饱和酶和δ-6去饱和酶活性。在37℃下温育4小时后，除去培养基后，在室温下用PBS(3×1mL)洗涤标记的细胞。在氮气氛、65℃下，使用400μL 2N氢氧化钠加上50μL L-α-磷脂酰胆碱(2mg/mL的异丙醇溶液，Sigma#P-3556)，使标记的细胞脂质水解1小时。用磷酸(60μL)酸化后，放射物(radioactive species)用300μL乙腈萃取，并用配备C-18反相柱和Packard Flow闪烁分析仪的HPLC进行定量测定。分别用[14C]-油酸相对于[14C]-硬脂酸的水平、[14C]-花生四烯酸相对于[14C]-二十碳三烯酸的水平和[14C]-二十碳四烯酸(8，11，14，17)相对于[14C]-亚麻酸的水平作为相应的SCD去饱和酶、δ-5去饱和酶和δ-6去饱和酶的活性指数。
式I的SCD抑制剂(特别是实施例1-23的抑制剂)的抑制常数IC50小于1μM，更通常小于0.1μM。对于式I化合物，特别是实施例1-23的化合物，δ-5去饱和酶或δ-6去饱和酶与SCD的IC50比一般至少约为10以上，优选约为100以上。
本发明化合物的体内功效：
用下面的例子说明，在动物体内使[1-14C]-硬脂酸转化为[1-14C]油酸来测定式I化合物的体内功效。给予小鼠式I化合物，1小时后经静脉内按20μCi/kg给予放射性示踪物[1-14C]-硬脂酸。在给予化合物后3小时，收获肝脏，然后在10N氢氧化钠中于80℃水解24小时，得到整个肝脂肪酸库。提取物用磷酸酸化后，用配备C-18反相柱和PackardFlow闪烁分析仪的HPLC定量测定[1-14C]-硬脂酸和[1-14C]-油酸的量。
主题化合物还可用于与另外的药物联用以预防或治疗前述疾病、障碍和病症的方法。
本发明的化合物可以在治疗、预防、抑制或改善其中式I化合物或另外的药物可对其具有功效的疾病或障碍中与一种或多种另外的药物联用，其中药物组合在一起比任一种药物单用更安全或更有效。这类另外的药物可以通过其常用的途径和剂量与式I化合物同时或序贯给予。当式I化合物与一种或多种另外的药物同时使用时，优选单位剂型中含有这类另外的药物和式I化合物的药物组合物。然而，联合疗法还可包括其中式I化合物和一种或多种另外的药物以不同的重叠的方案给药的疗法。还预期当与一种或多种另外的活性成分联用时，本发明的化合物和另外的活性成分可以低于各自单用时的剂量使用。因此，本发明的药物组合物包括含有一种或多种另外的活性成分以及式I化合物的药物组合物。
本发明的化合物可以在治疗、预防、抑制或改善其中式I化合物或另外的药物可对其具有功效的疾病或障碍中与一种或多种另外的药物联用，其中药物组合在一起比任一种药物单用更安全或更有效。这类另外的药物可以通过其常用的途径和剂量与式I化合物同时或序贯给予。当式I化合物与一种或多种另外的药物同时使用时，优选单位剂型中含有这类另外的药物和式I化合物的药物组合物。然而，联合疗法还可包括其中式I化合物和一种或多种另外的药物以不同重叠的方案给药的疗法。还预期当与一种或多种另外的活性成分联用时，本发明的化合物和另外的活性成分可以低于各自单用时的剂量使用。因此，本发明的药物组合物包括含有一种或多种另外的活性成分以及式I化合物的药物组合物。
可与式I化合物联用以及可以分开给药或以同一药物组合物给药的另外的活性成分的实例包括但不限于：
(a)二肽基肽酶-IV(DPP-4)抑制剂；
(b)胰岛素增敏剂包括(i)PPARγ激动剂，例如格列酮类(glitazones)(例如曲格列酮(troglitazone)、吡格列酮(pioglitazone)、恩格列酮(englitazone)、MCC-555、罗格列酮(rosiglitazone)、巴格列酮(balaglitazone)等)和其他PPAR配体，包括PPARα/γ双重激动剂，例如KRP-297、莫格列扎(muraglitazar)、那格列扎(naveglitazar)、Galida、TAK-559；PPARα激动剂，例如非诺贝酸(fenofibric acid)衍生物(吉非贝齐(gemfibrozil)、氯贝丁酯(clofibrate)、非诺贝特(fenofibrate)和苯扎贝特(bezafibrate))及选择性PPARγ调节剂(SPPARγM)，例如公开于WO 02/060388、WO 02/08188、WO 2004/019869、WO2004/020409、WO 2004/020408和WO 2004/066963的化合物；(ii)双胍类(biguanides)，例如二甲双胍(metformin)和苯乙双胍(phenformin)，以及(iii)蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂；
(c)胰岛素或胰岛素模拟物；
(d)磺酰脲(sulfonylureas)和其他胰岛素促分泌素(insulinsecretagogue)，例如甲苯磺丁脲(tolbutamide)、格列本脲(glyburide)、格列吡嗪(glipizide)、格列美脲(glimepiride)和美格列奈类(meglitinides)，例如那格列奈(nateglinide)和瑞格列奈(repaglinide)；
(e)α-葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖(acarbose)和米格列醇(miglitol))；
(f)高血糖素受体拮抗剂，例如WO 98/04528、WO 99/01423、WO 00/39088和WO 00/69810中所公开的化合物；
(g)GLP-1、GLP-1类似物或模拟物和GLP-1受体激动剂，例如毒蜥激动肽4(exendin-4)(艾塞那肽(exenatide))、利拉糖肽(liraglutide)(NN-2211)、CJC-1131、LY-307161和WO 00/42026和WO 00/59887中所公开的化合物；
(h)GIP和GIP模拟物，例如WO 00/58360中所公开的化合物，和GIP受体激动剂；
(i)PACAP、PACAP模拟物和PACAP受体激动剂，例如WO01/23420中所公开的化合物；
(j)降胆固醇药，例如(i)HMG辅酶A还原酶抑制剂(洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、伊伐他汀(itavastatin)和罗苏伐他汀(rosuvastatin)和其他他汀类(statins))，(ii)螯合剂(消胆胺(cholestyramine)、考来替泊(colestipol)和交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物)，(iii)烟醇(nicotinyl alcohol)、烟酸或其盐，(iv)PPARα激动剂，例如非诺贝酸衍生物(吉非贝齐、氯贝丁酯、非诺贝特和苯扎贝特)，(v)PPARα/γ双重激动剂，例如那格列扎和莫格列扎，(vi)胆固醇吸收抑制剂，例如β-谷甾醇(beta-sitosterol)和依泽麦布(ezetimibe)，(vii)酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶抑制剂，例如阿伐麦布(avasimibe)，以及(viii)抗氧化剂，例如普罗布考(probucol)；
(k)PPARδ激动剂，例如WO 97/28149中所公开的化合物；
(l)减肥化合物，例如芬氟拉明(fenfluramine)、右芬氟拉明(dexfenfluramine)、芬特明(phentermine)、西布曲明(sibutramine)、奥利司他(orlistat)、神经肽Y1或神经肽Y5拮抗剂、CB1受体逆激动剂和拮抗剂、β3肾上腺素能受体激动剂、黑皮质素受体激动剂(特别是黑皮质素4受体激动剂)、生长素释放肽拮抗剂、铃蟾肽受体激动剂(例如铃蟾肽受体亚型-3激动剂)和黑色素浓集激素(MCH)受体拮抗剂；
(m)回肠胆汁酸转运蛋白抑制剂；
(n)欲用于炎症性疾病的药物，例如阿司匹林(aspirin)、非甾体抗炎药物(NSAID)、糖皮质素、柳氮磺胺吡啶和选择性环加氧酶-2(COX-2)抑制剂；
(o)抗高血压药，例如ACE抑制剂(依那普利(enalapril)、赖诺普利(lisinopril)、卡托普利(captopril)、喹那普利(quinapril)、群多普利(trandolapril))、A-II受体阻滞药(氯沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、厄贝沙坦(irbesartan)、缬沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)和依普罗沙坦(eprosartan))、β阻滞药和钙通道阻滞药；
(p)葡糖激酶激活剂(GKA)，例如WO 03/015774、WO 04/076420和WO 04/081001中所公开的化合物；
(q)11β-羟基类固醇脱氢酶1型抑制剂，例如美国专利号6,730,690、WO 03/104207和WO 04/058741中所公开的化合物；
(r)胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂，例如托塞匹布(torcetrapib)；
(s)果糖1，6-二磷酸酶抑制剂，例如美国专利号6,054,587、6,110,903、6,284,748、6,399,782和6,489,476中所公开的果糖1，6-二磷酸酶抑制剂；
(t)乙酰辅酶A羧化酶-1和/或乙酰辅酶A羧化酶-2抑制剂；
(u)AMPK激活剂；和
(v)GPR-119激动剂。
可与结构式I的化合物组合的二肽基肽酶-IV抑制剂包括美国专利号6,699,871、WO 02/076450(2002年10月3日)、WO 03/004498(2003年1月16日)、WO 03/004496(2003年1月16日)、EP 1258476(2002年11月20日)、WO 02/083128(2002年10月24日)、WO02/062764(2002年8月15日)、WO 03/000250(2003年1月3日)、WO 03/002530(2003年1月9日)、WO 03/002531(2003年1月9日)、WO 03/002553(2003年1月9日)、WO 03/002593(2003年1月9日)、WO 03/000180(2003年1月3日)、WO 03/082817(2003年10月9日)、WO 03/000181(2003年1月3日)、WO 04/007468(2004年1月22日)、WO 04/032836(2004年4月24日)、WO 04/037169(2004年5月6日)和WO 04/043940(2004年5月27日)中所公开的化合物。具体的DPP-IV抑制剂化合物包括西格列汀(sitagliptin)(MK-0431)、维格列汀(vildagliptin)(LAF 237)、地格列汀(denagliptin)、P93/01、沙格列汀(saxagliptin)(BMS 477118)、RO0730699、MP513、SYR-322、ABT-279、PHX1149、GRC-8200和TS021。
可与结构式I的化合物组合的减肥化合物包括芬氟拉明、右芬氟拉明、芬特明、西布曲明、奥利司他、神经肽Y1或神经肽Y5拮抗剂、大麻素CB1受体拮抗剂或逆激动剂、黑皮质素受体激动剂(特别是黑皮质素4受体激动剂)、生长素释放肽拮抗剂、铃蟾肽受体激动剂和黑色素浓集激素(MCH)受体拮抗剂。可与结构式I化合物组合的减肥化合物的有关综述参见S.Chaki等，“Recent advances in feedingsuppressing agents：potential therapeutic strategy for the treatment ofobesity(抑制进食药物的最新进展：治疗肥胖症的潜在治疗策略)”Expert Opin.Ther.Patents，11：1677-1692(2001)；D.Spanswick和K.Lee，“Emerging antiobesity drugs(新型减肥药)”Expert Opin.EmergingDrugs，8：217-237(2003)；以及J.A.Fernandez-Lopez等，“Pharmacological Approaches for the Treatment of Obesity(治疗肥胖症的药物方法)”Drugs，62：915-944(2002)。
可与结构式I化合物组合的神经肽Y5拮抗剂包括美国专利号6,335,345(2002年1月1日)和WO 01/14376(2001年3月1日)中所公开的化合物；且具体的化合物被标为GW 59884A、GW 569180A、LY366377和CGP-71683A。
可与式I化合物组合的大麻素CB1受体拮抗剂包括以下文献中所公开的化合物：PCT公布说明书WO 03/007887；美国专利号5,624,941，例如利莫纳班(rimonabant)；PCT公布说明书WO 02/076949，例如SLV-319；美国专利号6,028,084；PCT公布说明书WO 98/41519；PCT公布说明书WO 00/10968；PCT公布说明书WO 99/02499；美国专利号5,532,237；美国专利号5,292,736；PCT公布说明书WO 03/086288；PCT公布说明书WO 03/087037；PCT公布说明书WO 04/048317；PCT公布说明书WO 03/007887；PCT公布说明书WO 03/063781；PCT公布说明书WO 03/075660；PCT公布说明书WO 03/077847；PCT公布说明书WO 03/082190；PCT公布说明书WO 03/082191；PCT公布说明书WO 03/087037；PCT公布说明书WO 03/086288；PCT公布说明书WO 04/012671；PCT公布说明书WO 04/029204；PCT公布说明书WO 04/040040；PCT公布说明书WO 01/64632；PCT公布说明书WO01/64633和PCT公布说明书WO 01/64634。
用于本发明的黑皮质素4受体(MC4R)激动剂包括但不限于以下文献所公开的化合物：US 6,294,534、US 6,350,760、6,376,509、6,410,548、6,458,790、US 6,472,398、US 5837521、US 6699873，所述专利通过引用全部结合到本文中；美国专利申请公布号US2002/0004512、US2002/0019523、US2002/0137664、US2003/0236262、US2003/0225060、US2003/0092732、US2003/109556、US 2002/0177151、US 2002/187932、US2003/0113263，所述专利通过引用全部结合到本文中；以及WO99/64002、WO 00/74679、WO 02/15909、WO 01/70708、WO01/70337、WO 01/91752、WO 02/068387、WO 02/068388、WO02/067869、WO 03/007949、WO 2004/024720、WO 2004/089307、WO 2004/078716、WO 2004/078717、WO 2004/037797、WO01/58891、WO 02/070511、WO 02/079146、WO 03/009847、WO03/057671、WO 03/068738、WO 03/092690、WO 02/059095、WO02/059107、WO 02/059108、WO 02/059117、WO 02/085925、WO03/004480、WO 03/009850、WO 03/013571、WO 03/031410、WO03/053927、WO 03/061660、WO 03/066597、WO 03/094918、WO03/099818、WO 04/037797、WO 04/048345、WO 02/018327、WO02/080896、WO 02/081443、WO 03/066587、WO 03/066597、WO03/099818、WO 02/062766、WO 03/000663、WO 03/000666、WO03/003977、WO 03/040107、WO 03/040117、WO 03/040118、WO03/013509、WO 03/057671、WO 02/079753、WO 02//092566、WO03/-093234、WO 03/095474和WO 03/104761。
联合疗法的一个具体方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的选自以下疾病的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的结构式I的化合物和HMG辅酶A还原酶抑制剂：高胆固醇血症、动脉粥样硬化、低HDL水平、高LDL水平、高脂血症、高甘油三酯血症和血脂异常。
更具体地讲，联合疗法的这个方面涉及治疗需要这类治疗的哺乳动物患者的选自以下疾病的方法：高胆固醇血症、动脉粥样硬化、低HDL水平、高LDL水平、高脂血症、高甘油三酯血症和血脂异常，其中HMG辅酶A还原酶抑制剂是选自以下的他汀：洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀和罗苏伐他汀。
在本发明的另一个方面，公开了降低发生选自以下疾病及这类疾病的后遗症的风险的方法，该方法包括给予需要这类治疗的哺乳动物患者治疗有效量的结构式I的化合物和HMG辅酶A还原酶抑制剂：高胆固醇血症、动脉粥样硬化、低HDL水平、高LDL水平、高脂血症、高甘油三酯血症和血脂异常。
在本发明的另一个方面，公开了用于在需要这类治疗的人类患者中延迟发生动脉粥样硬化或降低发生动脉粥样硬化的风险的方法，该方法包括给予所述患者有效量的结构式I的化合物和HMG辅酶A还原酶抑制剂。
更具体地讲，公开了用于在需要这类治疗的人类患者中延迟发生动脉粥样硬化或降低发生动脉粥样硬化的风险的方法，其中HMG辅酶A还原酶抑制剂是选自以下的他汀：洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀和罗苏伐他汀。
在本发明的另一个方面，公开了用于在需要这类治疗的人类患者中延迟发生动脉粥样硬化或降低发生动脉粥样硬化的风险的方法，其中HMG辅酶A还原酶抑制剂为他汀，并且还包括给予胆固醇吸收抑制剂。
更具体地讲，在本发明的另一个方面，公开了用于在需要这类治疗的人类患者中延迟发生动脉粥样硬化或降低发生动脉粥样硬化的风险的方法，其中HMG辅酶A还原酶抑制剂为他汀，胆固醇吸收抑制剂为依泽麦布。
在本发明的另一个方面，公开了包含以下化合物的药物组合物：
(1)结构式I的化合物；
(2)选自以下的化合物：
(a)二肽基肽酶IV(DPP-IV)抑制剂；
(b)胰岛素增敏剂包括(i)PPARγ激动剂，例如格列酮类(例如曲格列酮、吡格列酮、恩格列酮、MCC-555、罗格列酮、巴格列酮等等)和其他PPAR配体，包括PPARα/γ双重激动剂，例如KRP-297、莫格列扎、那格列扎、Galida、TAK-559；PPARα激动剂，例如非诺贝酸衍生物(吉非贝齐、氯贝丁酯、非诺贝特和苯扎贝特)和选择性PPARγ调节剂(SPPARγM’s)，例如WO 02/060388、WO 02/08188、WO2004/019869、WO 2004/020409、WO 2004/020408和WO 2004/066963中所公开的化合物；(ii)双胍类，例如二甲双胍和苯乙双胍，以及(iii)蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂；
(c)胰岛素或胰岛素模拟物；
(d)磺酰脲和其他胰岛素促分泌素，例如甲苯磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、格列美脲和美格列奈类，例如那格列奈和瑞格列奈；
(e)α-葡糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖和米格列醇)；
(f)高血糖素受体拮抗剂，例如WO 98/04528、WO 99/01423、WO 00/39088和WO 00/69810中所公开的化合物；
(g)GLP-1、GLP-1类似物或模拟物和GLP-1受体激动剂，例如毒蜥激动肽4(艾塞那肽)、利拉糖肽(NN-2211)、CJC-1131、LY-307161和WO 00/42026和WO 00/59887中所公开的化合物；
(h)GIP和GIP模拟物(例如WO 00/58360中所公开的化合物)以及GIP受体激动剂；
(i)PACAP、PACAP模拟物和PACAP受体激动剂(例如WO01/23420中所公开的化合物)；
(j)降胆固醇药，例如(i)HMG辅酶A还原酶抑制剂(洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、伊伐他汀和罗苏伐他汀和其他他汀类)，(ii)螯合剂(消胆胺、考来替泊和交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物)，(iii)烟醇、烟酸或其盐，(iv)PPARα激动剂，例如非诺贝酸衍生物(吉非贝齐、氯贝丁酯、非诺贝特和苯扎贝特)，(v)PPARα/γ双重激动剂，例如那格列扎和莫格列扎，(vi)胆固醇吸收抑制剂，例如β-谷甾醇和依泽麦布，(vii)酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶抑制剂，例如阿伐麦布，以及(viii)抗氧化剂，例如普罗布考；
(k)PPARδ激动剂，例如WO 97/28149中所公开的化合物；
(l)减肥化合物，例如芬氟拉明、右芬氟拉明、芬特明、西布曲明、奥利司他、神经肽Y1或神经肽Y5拮抗剂、CB1受体逆激动剂和拮抗剂、β3肾上腺素能受体激动剂、黑皮质素受体激动剂(特别是黑皮质素4受体激动剂)、生长素释放肽拮抗剂、铃蟾肽受体激动剂(例如铃蟾肽受体亚型-3激动剂)和黑色素浓集激素(MCH)受体拮抗剂；
(m)回肠胆汁酸转运蛋白抑制剂；
(n)欲用于炎症性疾病的药物，例如阿司匹林、非甾体抗炎药物(NSAID)、糖皮质素、柳氮磺胺吡啶和选择性环加氧酶-2(COX-2)抑制剂；
(o)抗高血压药，例如ACE抑制剂(依那普利、赖诺普利、卡托普利、喹那普利、群多普利)、A-II受体阻滞药(氯沙坦、坎地沙坦、厄贝沙坦、缬沙坦、替米沙坦和依普罗沙坦)、β阻滞药和钙通道阻滞药；
(p)葡糖激酶激活剂(GKA)，例如WO 03/015774、WO 04/076420和WO 04/081001中所公开的化合物；
(q)11β-羟基类固醇脱氢酶1型抑制剂，例如美国专利号6,730,690、WO 03/104207和WO 04/058741中所公开的化合物；
(r)胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂，例如托塞匹布；
(s)果糖1，6-二磷酸酶抑制剂，例如美国专利号6,054,587、6,110,903、6,284,748、6,399,782和6,489,476中所公开的化合物；
(t)乙酰辅酶A羧化酶-1和/或乙酰辅酶A羧化酶-2抑制剂；
(u)AMPK激活剂；和
(v)GPR 119激动剂；和
(3)药学上可接受的载体。
当本发明的化合物与一种或多种另外的药物同时使用时，优选药物组合物除有本发明的化合物外还含有这类另外的药物。因此，本发明的药物组合物包括除本发明的化合物以外还含有一种或多种另外的活性成分的药物组合物。
本发明化合物与第二活性成分的重量比可以改变，并将取决于各成分的有效剂量。一般可使用各成分的有效剂量。因此，例如当本发明的化合物与另一药物组合时，本发明化合物与另一类药物的重量比的范围一般为约1000∶1至约1∶1000，优选约200∶1至约1∶200。本发明的化合物与另外的活性成分的组合一般也可在前述范围内，但是在所有情况下，都应使用各活性成分的有效剂量。
本发明化合物与其他活性剂的这类组合可以分开或联合给予。另外，一种药物可以在给予另外的药物之前、同时或之后给予。
本发明的化合物可以口服、胃肠外(例如肌内、腹膜内、静脉内、ICV、脑池内注射或输注、皮下注射或植入)、通过吸入喷雾、经鼻、阴道、直肠、舌下或局部给药途径给予，还可以单独或与含有适于各种给药途径的常规无毒的药学上可接受的载体、辅料和溶媒一起配制成合适的剂量单位剂型。除了治疗温血动物例如小鼠、大鼠、马、牛、绵羊、狗、猫、猴等以外，本发明的化合物可有效地用于人。
用于给予本发明化合物的药物组合物可适当地呈单位剂型，可通过制药领域众所周知的任何方法制备。所有方法都包括将活性成分与组成一种或多种助剂成分的载体相混合的步骤。一般而言，通过将活性成分与液体载体或微细固体载体或它们两者混合均匀而制备所述组合物，然而如有需要，可将该产品制成所需要的剂型。药物组合物中包含的活性目标化合物的量足以对疾病进程或病况产生所需要的作用。本文所用术语“组合物”用于涵盖包含规定剂量的规定成分的产品，以及直接或间接由规定剂量的规定成分组合生产的任何产品。
含有活性成分的药物组合物可呈适于口服使用的形式，例如片剂、含片、糖锭剂、水性或油性混悬剂、可分散粉剂或颗粒剂、乳剂、硬质或软质胶囊剂或者糖浆剂或酏剂。可按照本领域已知用于制备药物组合物的任何方法制备用于口服的组合物，而且该组合物可含有一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的成分，以提供药学上精致且适口的制剂。片剂含有与适于制备片剂的药学上可接受的无毒赋形剂相混合的活性成分。这些赋形剂可以为例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯树胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以不包衣，或者可以通过已知技术包衣以便在胃肠道中延迟崩解和吸收，从而在较长一段时间内提供缓释作用。例如，可以使用延时材料，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们还可通过美国专利4,256,108、4,166,452和4,265,874中所披露的技术进行包衣以制成用于控释的渗透性治疗片剂。
口服用剂型还可呈硬明胶胶囊剂或软明胶胶囊剂，硬明胶胶囊剂中活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合，软明胶胶囊剂中活性成分与水或油性介质(例如花生油、液状石蜡或橄榄油)混合。
水性混悬剂含有与适于制备水性混悬剂的赋形剂混合的活性物质。这类赋形剂为悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可为天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七乙烯氧基十六醇，或者环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或者环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的部分酯的缩合产物，例如聚乙烯失水山梨醇单油酸酯。水性混悬剂还可以含有一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂及一种或多种甜味剂(例如蔗糖或糖精)。
油性混悬剂可通过将活性成分悬浮于植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(例如液状石蜡)中来配制。油性混悬剂可含有增稠剂，例如蜂蜡、石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂(例如上文中列出的甜味剂)和矫味剂以提供适口的口服制剂。可通过加入抗氧化剂(例如抗坏血酸)来保存这些组合物。
适于加入水来制备水性混悬剂的可分散粉剂和颗粒剂提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂及一种或多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂以上文中提及的为例。还可以存在其他赋形剂，例如甜味剂、矫味剂和着色剂。
本发明的药物组合物还可为水包油乳剂形式。油相可以是植物油(例如橄榄油或花生油)或矿物油(例如液状石蜡)或这些油的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的树胶(例如阿拉伯树胶或西黄蓍胶)、天然存在的磷脂(例如大豆磷脂、卵磷脂)以及由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或部分酯(例如失水山梨醇单油酸酯)和所述部分酯与环氧乙烷的缩合产物(例如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯)。乳剂还可含有甜味剂和矫味剂。
糖浆剂和酏剂可与甜味剂(例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖)一起配制。这类剂型还可含有缓和剂、防腐剂及矫味剂和着色剂。
药物组合物可以是无菌注射用水性或油性混悬剂的形式。可按照本领域所述方法，采用上文中提及的合适的分散剂或润湿剂以及悬浮剂来制备这种混悬剂。无菌注射用制剂还可以是胃肠外可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌注射用溶液剂或混悬剂，例如1，3-丁二醇的溶液剂。可以使用的可接受的溶媒和溶剂有水、林格氏液(Ringer′ssolution)和等渗氯化钠溶液。另外，无菌固定油通常用作溶剂或悬浮介质。对于该目的，可采用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，脂肪酸(例如油酸)可用于注射剂的制备中。
还可以用于药物直肠给药的栓剂形式给予本发明的化合物。这些组合物可通过将药物与合适的无刺激性的赋形剂一起混合制备，该赋形剂在正常温度下为固体但在直肠温度下为液体，因此可在直肠中融化释放出药物。这类材料为可可脂和聚乙二醇。
对于局部应用，可使用含有本发明化合物的乳膏剂、软膏剂、胶冻剂、溶液剂或混悬剂等。(对于此应用来说，局部应用应包括漱口剂和含漱剂)。
本发明的药物组合物和方法还可包括本文提到的通常用于治疗上述病理病症的其他有治疗活性的化合物。
在治疗或预防需要抑制硬脂酰辅酶Aδ-9去饱和酶活性的疾病的情况下，合适的剂量水平一般为约0.01-500mg/kg患者体重/天，可以单剂量或多剂量给予。优选剂量水平为约0.1mg/kg/天至约250mg/kg/天；更优选约0.5mg/kg/天至约100mg/kg/天。合适的剂量水平可为约0.01-250mg/kg/天、约0.05-100mg/kg/天或约0.1-50mg/kg/天。在该范围内，剂量可为0.05-0.5mg/kg/天、0.5-5mg/kg/天或5-50mg/kg/天。对于口服给药，组合物优选以片剂形式提供，该片剂含有1.0-1000mg活性成分，特别是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0mg活性成分，以对待治疗患者的剂量进行对症调整。可按1-4次/天、优选1次/天或2次/天的方案给予该化合物。
当治疗或预防糖尿病和/或高血糖症或高甘油三酯血症或其他需要本发明化合物的疾病时，如果按每天约0.1mg/千克动物体重至约100mg/千克的剂量，优选以单次日剂量或一天2-6次的分剂量或者以缓释形式给予本发明的化合物，则一般可获得令人满意的结果。对于大多数大哺乳动物，每日总剂量为约1.0mg至约1000mg，优选约1mg至约50mg。在70kg成人的情况下，每日总剂量一般可为约7mg至约350mg。可以调整此剂量方案以提供最佳治疗反应。
然而，应当了解的是，任何特定患者的具体剂量水平和剂量频率都可以改变，并将取决于不同的因素，包括所用具体化合物的活性、代谢稳定性及该化合物的作用时间长短、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药方式和时间、排泄率、药物组合、具体病症的严重程度及接受治疗的宿主。
缩写词一览：
Alk＝烷基
APCI＝大气压化学电离
Ar＝芳基
Boc＝叔丁氧羰基
br＝宽峰
d＝双峰
DBU＝1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯
DMF＝N，N-二甲基甲酰胺
DAST＝三氟二乙氨基硫
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＝三氟双(2-甲氧基乙基)氨基硫
DIBAL-H＝氢化二异丁基铝
DMSO＝二甲亚砜
ESMS＝电喷雾离子质谱法
EtOAc＝乙酸乙酯
m＝多重峰
m-CPBA＝3-氯过苯甲酸
MeOH＝甲醇
MS＝质谱法
NaHMDS＝双(三甲基硅烷基)氨基钠
NMP＝1-甲基-2-吡咯烷酮
NMR＝核磁共振波谱法
PG＝保护基
rt＝室温
s＝单峰
t＝三重峰
TFFA＝三氟乙酸酐
THF＝四氢呋喃
TLC＝薄层色谱法
TsOH＝甲苯-4-磺酸
本发明化合物制备：
可以按照下列流程和实施例，采用合适的原料来制备结构式I的化合物，现通过下列具体实施例作进一步说明。然而，实施例中所述化合物不得解释为是本发明仅有的种类。实施例进一步说明制备本发明化合物的详情。本领域技术人员容易地理解的是，可利用下列制备方法中条件和步骤的已知变体来制备这些化合物。所有温度均为摄氏度，除非另有说明。质谱(MS)用电喷雾离子质谱法(ESMS)测定。
方法A：
在三苯基膦和偶氮二甲酸叔丁酯存在下，采用4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯1和2-溴-5-氟苯酚2进行Mitsunobu反应，得到偶合产物3。
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方法B：
4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯1和2-溴-1，5-二氟苯4用叔丁醇钾的二噁烷溶液处理，得到偶合产物3。
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方法C：
然后可以用HCl的二噁烷溶液处理，使中间体3转化为游离胺5。
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方法D：
将含有胺5、5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯6和碳酸钾在二噁烷中的混合物在100℃下加热2小时，得到酯7。在密封管中，在0℃下向酯7的MeOH悬浮液中通入氨气，将混合物在55℃下加热几天，得到酰胺，该酰胺进而用三氟乙酸酐和三乙胺的THF溶液处理，得到腈8。
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方法E：
可以用叠氮化钠和氯化铵处理，使腈8转化为四唑9。或者，还可以采用叠氮三甲基硅烷或三丁基叠氮化锡。
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方法F：
可以用溴乙酸乙酯和氢化钠的DMF溶液处理，接着对酯进行水解，将四唑9转化为两个四唑乙酸区域异构体(regioisomer)10和11。两个区域异构体可以在酯阶段通过柱色谱法分离。
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方法G：
方法A和方法B可适用于其他环状胺，例如12，得到胺13，可以采用方法C-F将胺13转化为四唑14和15。
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方法H：
可以采用合适的酯或丙烯酸酯，使方法F和方法G扩展，在四唑上得到较长链烷酸侧链。另外，可通过使酯还原，使所得醇溴化后，进行氰化物置换并水解成酸，直接由11使链扩展。可以重复该步骤，得到扩展的链烷酸11b。
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方法I：
在碱(例如碳酸钾的二噁烷溶液或DBU的2-丙醇溶液)的存在下，二卤代吡嗪、嘧啶或三嗪16可以用胺13处理，得到杂芳基中间体17，该中间体进而可以用叠氮化钠和碘化亚铜转化为叠氮化物18。随后，可以采用3-丁炔-1-醇、CuI和抗坏血酸钠使叠氮化物转化为三唑19。可以采用斯韦恩条件(Swern condition)将该醇氧化成醛，之后再用NaClO2在磷酸缓冲液中氧化成酸20。
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方法J：
在碱(例如碳酸钠在DMF等溶剂中)存在下，使用钯源使吡唑21与硼酸酯22偶合，在碱水解之后得到化合物23。
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方法K：
可以将方法D延伸到其他类型的环状胺，得到酯25，可按照现有方法使该酯转化为杂芳基链烷酸。
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方法L：
在碱(例如三乙胺)存在下，在乙醇等溶剂中，使5-溴-2-氯嘧啶26与适当取代的环状胺27反应，得到溴加合物28。在回流条件下，在DMF等溶剂中，使溴化物28与氰化亚铜(I)反应，得到氰基化合物29。在回流条件下，在氯化铵存在下，在溶剂(例如DMF)中，使氰基化合物29与叠氮化钠反应，得到四唑衍生物30。在碱(例如三乙胺和氢化钠)存在下，在溶剂(例如THF)中，将四唑30用卤代烷基羧酸酯(例如溴乙酸乙酯)烷基化，得到四唑乙酸酯区域异构体31和32，其可通过快速柱色谱法或重结晶法分离。可以在大致室温至约回流温度的温度范围内，在溶剂(例如THF和MeOH)中，用NaOH水溶液使酯基水解后，通过萃取后处理，用快速柱色谱法或重结晶法纯化，得到杂芳基四唑乙酸34。
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提供下面的实施例对本发明进行说明，不得解释为以任何方式限制本发明的范围。
实施例1
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步骤1：4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
方法(i)：
向4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯(50.6g，251mmol)和偶氮二甲酸二叔丁酯(71g，308mmol)的THF(350mL)溶液中加入2-溴-5-氟苯酚(36mL，324mmol)。使混合物冷却至-78℃后，通过套管加入三苯基膦(81.5g，311mmol)的二氯甲烷(130mL)溶液。在室温下经过18小时后，真空除去溶剂，得到标题化合物，为油状物，无需进一步纯化便可用于步骤2。
方法(ii)：
向叔丁醇钾(109g，974mmol)的二噁烷溶液(800mL)中依次加入4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁酯(200g，994mmol)和1-溴-2，4-二氟苯(182g，994mmol)。在60℃下经过10小时后，使反应混合物在水和叔丁基甲基醚之间分配。有机溶剂用盐水洗涤，经硫酸镁干燥后蒸发，得到残余物，无需进一步纯化便可使用用于步骤2。
步骤2：4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶
将得自步骤1方法(i)的4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯溶于乙醇(200mL)，冷却至-78℃后，用4N HCl的二噁烷溶液(450mL)处理。使反应物升温后在室温下搅拌过夜。减压除去溶剂，使混合物在1N NaOH(750mL)和1∶1乙醚-己烷混合物之间分配。若干次萃取后，合并有机层并蒸发至干。将粗产物溶于庚烷(1L)，过滤并弃去白色沉淀物。庚烷层用乙醚稀释后，用4N HCl的二噁烷溶液(100mL)处理。所得到沉淀物经过滤收集后，用1∶1乙醚-己烷混合物洗涤三次。使该盐再一次在1N NaOH(500mL)和1∶1乙醚-己烷混合物之间分配。若干次萃取后，合并有机层，用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤后蒸发。将粗产物溶于庚烷(2L)后，用1N NaOH(250mL)洗涤四次。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤后蒸发，得到标题化合物，为无色油状物。
或者，将得自步骤1方法(ii)的4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯溶于甲酸(600mL)，并升温至回流温度。45分钟后，使反应混合物浓缩，使残余物在NaOH水溶液和叔丁基甲基醚之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥后过滤。然后滤液用2N HCl的乙醚溶液(550mL)处理。10小时后，将混合物过滤，固体用乙醚洗涤后，在真空烘箱中于50℃干燥2小时，得到标题化合物，为HCl盐。然后使该盐(1.00g，3.22mmol)在乙酸乙酯和1N NaOH之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥，过滤后蒸发，得到标题化合物，为油状物。
步骤3：5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲酸甲酯
将得自步骤2的4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶(1.90g，6.95mmol)、5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(1.00g，5.79mmol)和碳酸钾(1.60g，11.59mmol)与二噁烷(30mL)的混合物在100℃下加热。2小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化铵水溶液之间分配。分离出溶剂，经硫酸钠干燥后蒸发。标题化合物用快速色谱法纯化(50％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物。
步骤4：5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲酰胺
在密封管中，将得自步骤3的5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲酸甲酯(2.00g，4.87mmol)的甲醇(30mL)悬浮液在0℃下用氨气饱和。然后将混合物在油浴中于55℃加热2天。使反应混合物冷却后蒸发。向白色固体残余物中加入乙醚后过滤，得到标题化合物。
步骤5：5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲腈
在0℃下，向得自步骤4的5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲酰胺(1.65g，4.17mmol)的THF(50mL)悬浮液中依次加入三乙胺(1.45mL，10.5mmol)和三氟乙酸酐(0.885mL，6.26mmol)。在0℃下经过10分钟后，使反应混合物逐渐升温至室温。然后使混合物在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥后蒸发。粗制混合物用快速色谱法纯化(35％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物。
步骤6：2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]-5-(2H-四唑-5-基)吡嗪
向得自步骤5的5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲腈(0.200g，0.530mmol)的DMF(2mL)溶液中加入叠氮化钠(0.070g，1.06mmol)和氯化铵(0.284g，5.30mmol)。在130℃下经过3小时后，使反应混合物冷却，在乙酸乙酯和盐水之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥后蒸发。向粗产物中加入乙醚-己烷混合物(1∶1)。将所得到的固体过滤后，得到标题化合物。
步骤6的替代方法：
向得自步骤5的5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-甲腈(11.1g，29.4mmol)的DMF(100mL)溶液中加入叠氮化钠(3.83g，58.9mmol)和氯化铵(1.73g，32.4mmol)。在130℃下经过4小时后，使反应混合物冷却，在乙酸乙酯和1M HCl之间分配。将沉淀物过滤，用水和乙醚洗涤。将滤液再次过滤后，固体用水和乙醚洗涤。合并固体后加入甲苯。甲苯经减压蒸发后，得到标题化合物。
步骤7：(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)乙酸乙酯(异构体A)和(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯(异构体B)
向得自步骤6的2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]-5-(2H-四唑-5-基)吡嗪(0.100g，0.238mmol)的DMF(2mL)混合物中依次加入氢化钠(60％在油中)(0.015g，0.38mmol)和溴乙酸乙酯(0.040mL，0.359mmol)。在100℃下经过2小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和1N HCl之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥后蒸发。粗制混合物用快速色谱法分离(30％-50％乙酸乙酯/己烷)，得到较易流动的异构体A和较不易流动的异构体B。
异构体A：
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ9.00(s，1H)，8.45(s，1H)，7.65(m，1H)，7.15(dd，1H)，6.75(dt，1H)，5.75(s，2H)，5.00(m，1H)，4.25(q，2H)，4.10-3.90(m，4H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)，1.20(t，3H).
异构体B：
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.85(s，1H)，8.45(s，1H)，7.65(m，1H)，7.15(dd，1H)，6.75(dt，1H)，5.75(s，2H)，4.95(m，1H)，4.20(q，2H)，4.10-3.90(m，4H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)，1.20(t，3H).
步骤7B的替代方法：
在60℃下，向得自步骤6的2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]-5-(2H-四唑-5-基)吡嗪(5.00g，11.9mmol)和三乙胺(3.32mL，23.8mmol)的THF(50mL)混合物中加入溴乙酸叔丁酯(3.48g，17.9mmol)。在60℃下经过1小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化铵之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥，过滤后蒸发。向该固体中加入50mL丙酮后，慢慢加入100mL己烷。将所得到的固体过滤，得到(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸叔丁酯。
步骤8：(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)-乙酸
向得自步骤7的(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)乙酸乙酯(异构体A)(0.067g，0.132mmol)的THF(2mL)和MeOH(2mL)溶液中加入1N NaOH(2mL)。大约2小时后，将乙酸乙酯和1N HCl加到反应混合物中。分离有机相，经硫酸钠干燥后蒸发，得到标题化合物。
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ9.00(s，1H)，8.45(s，1H)，7.65(m，1H)，7.15(dd，1H)，6.75(dt，1H)，5.75(s，2H)，5.00(m，1H)，4.10-3.90(m，4H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)；MS(-ESI)476(M-1).
实施例2
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(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
采用与实施例1步骤8所述的相同条件，由得自实施例1步骤7的(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯(异构体B)获得标题化合物。
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.85(s，1H)，8.55(s，1H)，7.65(m，1H)，7.15(dd，1H)，6.75(dt，1H)，5.75(s，2H)，4.95(m，1H)，4.10-3.90(m，4H)，2.20(m，2H)，1.95(m，2H)；MS(+ESI)478(M+1).
替代方法：
将(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸叔丁酯(2.50g，4.68mmol)溶于TFA(11.3mL)和水(1.3mL)的混合物中。在室温下经过18小时后，使反应混合物蒸发，接着与甲苯共蒸发两次。将黄色油状物溶于乙酸乙酯(12.5mL)，然后慢慢加入己烷(37.5mL)。将所得到的固体过滤，得到(5-{5-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸。
实施例3
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(5-{2-[4-(5-溴-2-氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
步骤1：1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-醇
将5-溴-2-氯嘧啶(5g，25.8mmol)、哌啶-4-醇(2.88g，28.4mmol)和三乙胺(5.40mL，38.8mmol)与EtOH(51.7mL)的混合物在90℃下加热0.5小时。使溶剂蒸发，残余物用1N HCl(20mL)稀释，用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的有机部分经Na2SO4干燥后，使溶剂蒸发。产物用CH2Cl2/己烷重结晶，过滤后用己烷洗涤，得到标题产物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ8.36(s，2H)，4.29(dt，2H)，3.94-3.87(m，1H)，3.38(ddd，2H)，1.91-1.85(m，2H)，1.51-1.42(m，2H)ppm.MS：m/z 258，260(MH+).
步骤2：2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-甲腈
将1-(5-溴嘧啶-2-基)哌啶-4-醇(5g，19.37mmol)和氰化亚铜(I)(6.94g，77mmol)与DMF(48.4mL)的混合物在140℃下加热18小时。混合物用水(100mL)和EtOAc(50mL)稀释后经Celite硅藻土过滤。滤液用EtOAc(3×20mL)萃取。合并的有机部分用1N HCl(20mL)洗涤后经Na2SO4干燥。使溶剂蒸发，产物用CH2Cl2/己烷重结晶，过滤后用己烷洗涤，得到标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ8.64(s，2H)，4.35(dt，2H)，3.98(t，1H)，3.60(ddd，2H)，1.95-1.89(m，2H)，1.57-1.48(m，2H).MS：m/z 205MH+).
步骤3：1-[5-(1H-四唑-5-基)嘧啶-2-基]哌啶-4-醇
将2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-甲腈(2g，9.79mmol)、叠氮化钠(0.955g，14.69mmol)和氯化铵(1.048g，19.59mmol)与DMF(24.48mL)的混合物在130℃下加热1小时。使混合物冷却至室温，用1N NaOH(5mL)稀释，用Et2O(2×10)mL洗涤。水层用2N HCl酸化至pH约为1后，在冰箱中放置1小时。将固体过滤后，依次用水和Et2O洗涤。将固体真空干燥，得到标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ8.98-8.93(m，2H)，4.43(dt，2H)，3.99-3.94(m，1H)，3.59-3.52(m，2H)，1.97-1.90(m，2H)，1.57-1.48(m，2H).MS：m/z 248(MH+).
步骤3：{5-[2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-2H-四唑-2-基}乙酸乙酯
将1-[5-(1H-四唑-5-基)嘧啶-2-基]哌啶-4-醇(550mg，2.224mmol)、三乙胺(0.62mL，4.45mmol)、溴乙酸乙酯(371μL，3.34mmol)与THF(77.4mL)的混合物在80℃下加热1小时。使溶剂蒸发，用水(5mL)稀释，用Et2O(5mL)制成浆状物。将混合物过滤，依次用水和Et2O洗涤。将固体真空干燥，得到标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ8.96(s，2H)，5.73(s，2H)，4.48-4.40(m，2H)，4.30(q，2H)，3.96(d，1H)，1.96-1.89(m，2H)，1.56-1.48(m，2H)，1.30(t，3H).MS：m/z 334(MH+).
步骤4：(5-{2-[4-(5-溴-2-氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯
向{5-[2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-2H-四唑-2-基}乙酸乙酯(44mg，0.132mmol)、5-溴-2-氯苯酚(32.9mg，0.158mmol)和三苯基膦(45mg，0.172mmol)的THF(660μL)溶液中加入偶氮二甲酸二乙酯(27.2μL，0.172mmol)。将混合物在50℃下加热4小时。使溶剂蒸发后，粗产物用Combiflash色谱法纯化(SiO2-12g，在30分钟内用10-50％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到标题产物，为固体。MS：m/z 422，424(MH+)。
步骤5：(5-{2-[4-(5-溴-2-氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
向(5-{2-[4-(5-溴-2-氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯(50mg，0.096mmol)在THF(319μL)和MeOH(159μL)中的溶液中加入2N NaOH(96μL，0.191mmol)，将混合物在室温下搅拌10分钟。使THF和MeOH蒸发，水层用Et2O(2×2mL)洗涤。水层用2N HCl酸化至pH为1并搅拌5分钟。过滤混合物，依次用水和1∶1Et2O/己烷洗涤。将固体真空干燥，得到标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ9.00(s，2H)，7.49(d，1H)，7.40(d，1H)，7.18(dd，1H)，5.73(s，2H)，5.00-4.95(m，1H)，4.28-4.21(m，2H)，4.03-3.96(m，2H)，2.17-2.09(m，2H)，1.95-1.85(m，2H).MS：m/z494，496(MH+).
实施例4
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(5-{2-[4-(2-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
步骤1：5-{2-[4-(2-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯
按照类似于实施例3(步骤4)所述的方法，由{5-[2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-2H-四唑-2-基}乙酸乙酯、2-氯-5-氟苯酚、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯制备标题化合物。
MS：m/z 462(MH+)。
步骤2：(5-{2-[4-(2-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
按照类似于实施例3(步骤5)所述的方法，由5-{2-[4-(2-氯-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯和NaOH水溶液制备标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ9.00(s，2H)，7.46(dd，1H)，7.17(dd，1H)，6.80(td，1H)，5.74(s，2H)，4.96-4.91(m，1H)，4.27-4.20(m，2H)，4.03-3.96(m，2H)，2.16-2.09(m，2H)，1.93-1.85(m，2H).MS：m/z 434(MH+).
实施例5
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(5-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
步骤1：((5-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯
按照类似于实施例3(步骤4)所述的方法，由{5-[2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-2H-四唑-2-基}乙酸乙酯、2-溴-5-氟苯酚、三苯基膦和偶氮二甲酸二叔丁酯制备标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ9.01-8.97(m，2H)，7.63(dd，1H)，7.14(dd，1H)，6.76(td，1H)，5.74(s，2H)，4.99-4.94(m，1H)，4.30(q，2H)，4.22-4.15(m，2H)，4.11-4.04(m，2H)，2.11(dd，2H)，1.95-1.87(m，2H)，1.31(t，3H).MS：m/z 506，508(MH+).
步骤2：(5-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
按照类似于实施例3(步骤5)所述的方法，由((5-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯和NaOH水溶液制备标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ9.00(s，2H)，7.63(t，1H)，7.14(d，1H)，6.75(d，1H)，5.71(s，2H)，4.96(s，1H)，4.21-4.14(m，2H)，4.11-4.05(m，2H)，2.14-2.08(m，2H)，1.96-1.87(m，2H).MS：m/z 478，480(MH+).
实施例6
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(5-{2-[4-(2，5-二氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
步骤1：(5-{2-[4-(2，5-二氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯
按照类似于实施例3(步骤4)所述的方法，由{5-[2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-2H-四唑-2-基}乙酸乙酯、2，5-二氯苯酚、三苯基膦和偶氮二甲酸二叔丁酯制备标题化合物。
MS：m/z 478，480(MH+)。
步骤2：((5-{2-[4-(2，5-二氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
按照类似于实施例3(步骤5)所述的方法，由(5-{2-[4-(2，5-二氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯和NaOH水溶液制备标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ9.00(s，2H)，7.46(d，1H)，7.36(s，1H)，7.04(d，1H)，5.74(s，2H)，4.98(s，1H)，4.28-4.21(m，2H)，4.03-3.96(m，2H)，2.16-2.09(m，2H)，1.92-1.86(m，2H).MS：m/z450，452(MH+).
实施例7
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(5-{2-[4-(5-溴-2-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
步骤1：(5-{2-[4-(5-溴-2-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯
按照类似于实施例3(步骤4)所述的方法，由{5-[2-(4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-2H-四唑-2-基}乙酸乙酯、5-溴-2-氟苯酚、三苯基膦和偶氮二甲酸二叔丁酯制备标题化合物。
MS：m/z 506，508(MH+)。
步骤2：(5-{2-[4-(5-溴-2-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
按照类似于实施例3(步骤5)所述的方法，由(5-{2-[4-(5-溴-2-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯和NaOH水溶液制备标题化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)：δ8.99(s，2H)，7.49(d，1H)，7.17(d，2H)，5.72(s，2H)，4.92-4.83(m，1H)，4.41-4.33(m，2H)，4.87-4.79(m，2H)，2.18-2.11(m，2H)，1.88-1.78(m，2H).MS：m/z 478，480(MH+).
实施例8
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步骤1：5-溴-2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶
向配有磁力搅拌棒的100mL烧瓶中加入5-溴-2-氯嘧啶(3.80g，19.5mmol)、4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶盐酸盐(6.90g，24.5mmol)和2-丙醇(25mL)。悬浮液用N，N-二异丙基乙胺(8.6mL，49mmol)处理，在室温下搅拌10分钟后，加热至100℃达16小时。之后，使混合物冷却至室温，倒入装有饱和NH4Cl水溶液(125mL)的250mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。粗制固体用乙醚研磨，得到标题化合物，为灰白色固体。MS(ESI，Q+)m/z 403，405(35Br和37Br的M+1)。
步骤2：5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶
在氮气氛下，向火焰干燥的配有磁力搅拌棒的250mL圆底烧瓶中加入二硼酸二频哪醇酯(1.89g，7.5mmol)、5-溴-2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶(2.0g，5.0mmol)、PdCl2(dppf)(0.20g，0.25mmol)和乙酸钾(1.95g，20.0mmol)。将装有固体的烧瓶抽真空后，回充入氮气(重复3次)。将DMF(50mL)加到烧瓶中，悬浮液用氮气脱气20分钟后，加热至85℃达1小时。使深黑色反应混合物冷却至室温，减压下经旋转蒸发除去DMF。将固体悬浮于1∶1乙醚/乙酸乙酯的混合物中。使混合物冷却，倒入装有水(150mL)的250mL分液漏斗中，萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤后，经MgSO4干燥。将溶液经硅胶短塞过滤，用1∶1乙醚∶乙酸乙酯洗涤后，将溶剂减压蒸发。将粗制固体重新悬浮于庚烷(50mL)，超声处理5分钟。将悬浮液在烧结玻璃漏斗中通过Celite硅藻土塞过滤。将所得滤液冷却至-78℃达15分钟。将所得悬浮液在赫尔什漏斗(Hirsch funnel)中通过Whatman#1滤纸过滤，用冷的己烷洗涤，收集所得浅褐色固体。MS(ESI，Q+)m/z 450(M+1)。
步骤3：[4-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]乙酸乙酯
向配有磁力搅拌棒和回流冷凝器的50mL圆底烧瓶中加入5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶(311mg，1.35mmol)、(4-溴-1H-吡唑-1-基)乙酸乙酯(400mg，0.89mmol)、PdCl2(dppf)(36mg，0.05mmol)、2M碳酸钠水溶液(0.89mL，1.8mmol)和DMF(4mL)。在氮气氛下使所得悬浮液脱气20分钟后，在微波炉中于120℃加热20分钟。将混合物倒入装有饱和KH2PO4水溶液(50mL)的125mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。用硅胶柱色谱法纯化(用30％EtOAc/己烷至70％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到标题化合物，为白色固体。MS(ESI，Q+)m/z 476(M+1)。
步骤4：[4-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]乙酸
向配有磁力搅拌棒的10mL烧瓶中加入[4-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-吡唑-1-基]乙酸乙酯(50mg，0.10mmol)、甲醇(2mL)和1M氢氧化钠水溶液(0.52mL，0.53mmol)。将悬浮液在80℃下加热2小时。使反应混合物浓缩以除去甲醇后，将残余物倒入装有饱和KH2PO4水溶液(75mL)的125mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3× 30mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发，得到所需产物。
1H NMR(400MHz，d4-MeOH)：δ8.55(s，2H)，8.00(s，1H)，7.84(s，1H)，7.61-7.55(m，2H)，7.25(d，J＝8.5Hz，1H)，7.06(t，J＝7.5Hz，1H)，5.02(s，2H)，4.89-4.86(m，1H)，4.03-3.91(m，4H)，2.06-2.00(m，2H)，1.90-1.84(m，2H)；MS(ESI，Q+)m/z 448(M+1).
实施例9
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步骤1：2-[1-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-1，2，3-三唑-4-基]乙醇
向配有磁力搅拌棒的5mL小瓶中加入4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶盐酸盐(100mg，0.25mmol)、碘化亚酮(I)(48mg，0.25mmol)、叠氮化钠(33mg，0.5mmol)和外消旋反式-N，N′-二甲基环己烷-1，2-二胺(53mg，0.37mmol)。将固体置于乙醇(1.4mL)和水(0.6mL)后，将密封烧瓶在油浴中加热至75℃达5分钟。将L-抗坏血酸钠溶液(49mg，0.25mmol)溶于1mL EtOH∶水(7∶3)中，在2小时内边加热边滴加到悬浮液中。使反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(25mL)稀释后，经烧结玻璃漏斗中的硅胶垫过虑，用乙酸乙酯洗涤。所得滤液经浓缩后直接用于下一步骤。
向配有磁力搅拌棒的50mL烧瓶中加入上述粗制反应混合物(91mg，0.25mmol)、抗坏血酸钠(3mg，0.01mmol)、碘化亚酮(I)(3mg，0.01mmol)、乙醇(3.5mL)和水(1.5mL)。悬浮液用3-丁炔-1-醇(52mg，0.75mmol)处理后，在室温下搅拌2小时。使反应混合物浓缩以除去乙醇。将混合物倒入装有水(75mL)的125mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。用硅胶柱色谱法纯化(用75％EtOAc/己烷至100％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到所需产物，为黄色固体。MS(ESI，Q+)m/z 435(M+1)。
步骤2：[1-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-1，2，3-三唑-4-基]乙醛
向配有磁力搅拌棒的25mL烧瓶中加入2-[1-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-1，2，3-三唑-4-基]乙醇(50mg，0.12mmol)和二氯甲烷(5mL)。向该溶液中加入戴斯·马丁高价碘化物(Dess-Martin periodinane)(59mg，0.14mmol)，将反应混合物在室温下搅拌1小时。使反应混合物浓缩，用硅胶柱色谱法纯化(用60∶40己烷/EtOA至40∶60己烷/EtOAc洗脱)，得到所需产物，为黄色固体。MS(ESI，Q+)m/z 433(M+1)。
步骤3：[1-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-1，2，3-三唑-4-基]乙酸
向配有磁力搅拌棒的10mL圆底烧瓶中加入亚氯酸钠(28mg，0.31mmol)、2-甲基-2-丁烯(32μL，0.31mmol)和磷酸二氢钠(37mg，0.31mmol)的水(1.0mL)溶液。向该溶液中加入溶于丙酮(1.0mL)的[1-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-1，2，3-三唑-4-基]乙醛(22mg，0.05mmol)。将反应物在室温下搅拌1小时。使反应物浓缩，倒入装有饱和KH2PO4水溶液(30mL)的50mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤后将溶剂减压蒸发，得到所需产物。
1H NMR(400MHz，d4-MeOH)δ8.73(s，2H)，8.33(s，1H)，7.61-7.56(m，2H)，7.27(d，J＝8.5Hz，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，4.93-4.90(m，1H)，4.12-4.02(m，4H)，3.87(s，2H)，2.08-2.02(m，2H)，1.94-1.88(m，2H)；MS(ESI，Q+)m/z 449(M+1).
实施例10
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步骤1：5-溴-2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶
向配有磁力搅拌棒的100mL可密封耐压烧瓶中加入5-溴-2-氯嘧啶(2.50g，12.9mmol)、4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶盐酸盐(4.00g，12.9mmol)、2-丙醇(30mL)和N，N-二异丙基乙胺(4.50mL，25.8mmol)。将烧瓶密闭后，加热至120℃达3小时。使反应混合物冷却后，倒入装有水(250mL)的500mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。所得油状物用乙醚/己烷重结晶，并冷却至-40℃以产生沉淀，然后经Whatman#1滤纸过滤，得到米色固体，将其用真空泵干燥过夜。MS(ESI，Q+)m/z 432，434，437(2x35Br和37Br的M+1)。
步骤2：4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2-甲基丁-3-炔-2-醇
在氮气氛下，向火焰干燥的配有磁力搅拌棒的25mL可密封耐压烧瓶中加入5-溴-2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶(500mg，1.16mmol)、碘化亚酮(I)(44mg，0.23mmol)、Pd(PPh3)4(100mg，0.09mmol)和碳酸钾(400mg，2.90mmol)。将烧瓶抽真空(1mm Hg)后，回充入氮气(重复3次)。固体将置于二甲氧基乙烷(4mL)和水(4mL)后，用氮气流脱气10分钟。然后将烧瓶的内容物加热至90℃，加入2-甲基-3-丁炔-2-醇(0.135mL，1.39mmol)，将混合物在90℃下加热1小时。使混合物冷却，倒入装有水(125mL)的250mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。用硅胶柱色谱法纯化(用10％EtOAc/己烷至50％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到所需产物，为米色固体。
MS(ESI，Q+)m/z434，436(35Br和37Br的M+1)。
步骤3：2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]-5-乙炔基嘧啶
向配有磁力搅拌棒的50mL圆底烧瓶中加入4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-2-甲基丁-3-炔-2-醇(300mg，0.69mmol)和甲苯(10mL)。反应混合物用氢化钠(3mg，0.07mmol，60％(重量)矿物油中)处理，将烧瓶的内容物加热至110℃(无需与回流冷凝器连接)，以除去脱保护阶段所形成的丙酮。2.5小时后，通过TLC分析观察到原料完全转化。使反应混合物冷却至室温后，滴加饱和的NH4Cl水溶液(10mL)猝灭。将混合物倒入装有水(50mL)的125mL分液漏斗，混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。用硅胶柱色谱法纯化(用0％EtOAc/己烷至20％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到所需产物，为透明油状物。
MS(ESI，Q+)m/z376，378(35Br和37Br的M+1)。
步骤4：(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3，3-三唑-1-基)乙酸乙酯
向配有磁力搅拌棒的25mL圆底烧瓶中加入2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]-5-乙炔基嘧啶(160mg，0.43mmol)、异丙醇(2mL)、水(2mL)、硫酸铜(II)(7mg，0.04mmol)和抗坏血酸钠(17mg，0.09mmol)。所得悬浮液经滴加叠氮基乙酸乙酯(320mg，0.85mmol)进行处理，在室温下搅拌16小时过夜。将混合物倒入装有水(75mL)的125mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3× 50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。用硅胶柱色谱法纯化(用20％EtOAc/己烷至60％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到所需产物，为白色固体。
MS(ESI，Q+)m/z 505，507(35Br和37Br的M+1)。
步骤5：(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3，3-三唑-1-基)乙酸
向(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3，3-三唑-1-基)乙酸乙酯(125mg，0.25mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液中加入1N氢氧化锂水溶液(1.3mL，1.25mmol)，将悬浮液加热至回流1小时。将冷却的反应混合物倒入装有饱和KH2PO4水溶液(75mL)的125mL分液漏斗中，用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后浓缩成固体。该固体用热的乙醚/乙酸乙酯(1∶1，3mL)研磨后过滤，得到白色固体。
1H NMR(400MHz，d6-丙酮)δ8.85(s，2H)，8.41(s，1H)，7.64-7.61(m，1H)，7.25-7.21(m，1H)，6.80-6.75(m，1H)，5.06(s，2H)，4.94-4.92(m，1H)，4.15-4.09(m，2H)，3.94-3.89(m，2H)，2.06-2.02(m，2H)，1.84-1.78(m，2H).
MS(ESI，Q+)m/z 477，479(35Br和37Br的M+1)。
实施例11
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[4-(2-{4-[2-(三氟甲基)苯氧基]哌啶-1-基}嘧啶-5-基)-1H-1，2，3-三唑-1-基]乙酸
MS(ESI，Q+)m/z 449(M+1)。
实施例12
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(4-{2-[4-(2-丁基苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸
MS(ESI，Q+)m/z 437(M+1)。
实施例13
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(4-{2-[4-(2-碘苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸
MS(ESI，Q+)m/z 507(M+1)。
实施例14
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(4-{2-[4-(2，3-二氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸
MS(ESI，Q+)m/z449(M+1)。
实施例15
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(4-{2-[4-(5-溴-2-氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸
MS(-APCI，Q-)m/z 491，493(35Br和37Br的M-1)。
实施例16
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(4-{2-[4-(5-氟-2-氯苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸
MS(+APCI，Q+)m/z 433，435(M+1)。
实施例17
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{4-[2-(4-{2-溴-4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯氧基}哌啶-1-基)嘧啶-5-基]-1H-1，2，3-三唑-1-基)乙酸
MS(APCI，Q+)m/z 619，621(35Br和37Br的M+1)。
实施例18
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(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)乙酸
步骤1：3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
向Boc-3-羟基氮杂环丁烷(1.50g，8.67mmol)的DMF(9.1mL)溶液中依次加入1M叔丁醇钾的THF(9.96mL，9.96mmol)溶液和1-溴-2，4-二氟苯(2.50g，13.0mmol)。在50℃下经过1小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化铵之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥，过滤后减压蒸发。残余物用快速色谱法纯化(15％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物，为白色固体。
步骤2：3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷盐酸盐
向3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.28g，6.59mmol)的二噁烷(40mL)溶液中加入4M HCl的二噁烷溶液(4.49mL，19.8mmol)。18小时后，将白色固体过滤，用冷的二噁烷洗涤，得到标题化合物。
步骤3：5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-甲酸甲酯
将5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(0.47g，2.7mmol)、3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷盐酸盐(0.80g，3.2mmol)和碳酸钾(0.75g，5.42mmol)在二噁烷(13mL)中的混合物在100℃下加热。4小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化铵之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥，过滤后减压蒸发。将所得固体溶于乙醚后过滤，得到标题化合物。
步骤4：5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-甲酰胺
向5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-甲酸甲酯(0.080g，2.1mmol)的MeOH溶液中通入氨，将混合物在50℃下加热。两天后，使甲醇蒸发后，加入乙醚。将固体过滤，得到标题化合物，为白色固体。
步骤5：5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-甲腈
在0℃下，向5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-甲酰胺(0.66g，1.8mmol)的THF(30mL)中依次加入三乙胺(0.46g，4.5mmol)和TFAA(0.57g，2.7mmol)。在室温下经过15分钟后，使反应混合物在乙酸乙酯和饱和碳酸氢钠之间分配。分离有机相，经硫酸钠干燥后过滤。残余物用快速色谱法纯化，得到标题化合物，为白色固体。
步骤6：2-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]-5-(1H-四唑-5-基)吡嗪
将5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-甲腈(0.48g，1.36mmol)、叠氮化钠(0.18g，2.7mmol)和氯化铵(0.73g，1.36mmol)与DMF(4mL)的混合物在130℃下加热。4小时后，使反应混合物在乙酸乙酯和饱和氯化铵之间分配。将所得固体过滤后，用水和乙醚洗涤。将固体溶于甲苯后，使溶剂蒸发，得到所需产物。
步骤7：(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)乙酸乙酯(异构体A)和(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯(异构体B)
按照实施例1步骤7中所述方法，由2-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]-5-(1H-四唑-5-基)吡嗪制备标题化合物。
异构体A：
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.99(s，1H)，8.10(s，1H)，7.65(m，1H)，6.95(dd，1H)，6.85(dt，1H)，5.75(s，2H)，5.50(m，1H)，4.85(m，2H)，4.30(m，2H)，4.20(q，2H)，1.20(t，3H).
异构体B：
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.85(s，1H)，8.10(s，1H)，7.65(m，1H)，6.95(dd，1H)，6.80(dt，1H)，5.70(s，2H)，5.45(m，1H)，4.80(m，2H)，4.20-4.30(m，4H)，1.20(t，3H).
步骤8：(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)乙酸
按照实施例1步骤8中所述方法，由(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-1H-四唑-1-基)乙酸乙酯(异构体A)制备标题化合物。
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.90(s，1H)，8.15(s，1H)，7.70(m，1H)，6.95(dd，1H)，6.85(dt，1H)，5.50(s，2H)，5.40(m，1H)，4.80(m，2H)，4.30(m，2H).
实施例19
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(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
采用实施例1步骤8中所述条件，由得自实施例3步骤7的(5-{5-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]吡嗪-2-基}-2H-四唑-2-基)乙酸乙酯(异构体B)制备标题化合物。
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.85(s，1H)，8.15(s，1H)，7.70(m，1H)，6.95(dd，1H)，6.85(dt，1H)，5.45(m，1H)，5.40(s，2H)，4.80(m，2H)，4.30(m，2H)；MS(-ESI)450(M+1).
实施例20
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(5-{2-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]嘧啶-5-基}-1H-四唑-1-基)乙酸
按照类似于实施例1所述的方法，其中步骤3的4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶用3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷替换，5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯用2-(甲氧基磺酰基)嘧啶-5-甲酸甲酯替换，来制备标题化合物。
MS(APCI，Q-)m/z 448，450(35Br和37Br的M-1)。
实施例21
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(5-{2-[3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷-1-基]嘧啶-5-基}-2H-四唑-2-基)乙酸
按照类似于实施例2所述的方法，其中步骤3的4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶用3-(2-溴-5-氟苯氧基)氮杂环丁烷替换，5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯用2-(甲氧基磺酰基)嘧啶-5-甲酸甲酯替换，来制备标题化合物。
MS(APCI，Q+)m/z 450，452(35Br和37Br的M+1)。
实施例22
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2-(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)丙酸
步骤1：2-(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)丙酸乙酯
标题化合物按照类似于实施例10步骤4所述的方法制备。向配有磁力搅拌棒的25mL圆底烧瓶中加入2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]-5-乙炔基嘧啶(130mg，0.35mmol)、叠氮化钠(23mg，0.35mmol)、叔丁醇(1.5mL)、水(0.7mL)、碘化亚酮(I)(4mg，0.02mmol)和抗坏血酸钠(9mg，0.04mmol)。所得悬浮液通过滴加2-溴丙酸乙酯(45μL，0.35mmol)进行处理，在室温下搅拌16小时过夜。将混合物倒入装有水(75mL)的125mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发。用硅胶柱色谱法纯化(用5％EtOAc/己烷至55％EtOAc/己烷梯度洗脱)，得到所需产物，为米色固体。
MS(ESI，Q+)m/z 519，521(35Br和37Br的M+1)。
步骤2：2-(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)丙酸
向配有磁力搅拌棒的25mL圆底烧瓶中加入2-(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)丙酸乙酯(55mg，0.11mmol)、1mL THF和0.5mL MeOH。加入1.0M氢氧化锂水溶液(0.53mL，0.53mmol)后，将反应混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倒入装有饱和KH2PO4水溶液(75mL)的125mL分液漏斗中，混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤后将溶剂减压蒸发，得到米色结晶固体。
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.80(s，2H)，8.41(s，1H)，7.56(dd，1H)，7.06(dd，1H)，6.73-6.64(td，1H)，5.58(q，1H)，4.90-4.83(m，1H)，4.15-4.08(m，2H)，3.96-3.89(m，2H)，2.04-2.00(m，2H)，1.88(d，3H)，1.85-1.78(m，2H).
MS(ESI，Q+)m/z 491，493(35Br和37Br的M+1)。
实施例23
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2-(4-{2-[4-(2-溴-5-氟苯氧基)哌啶-1-基]嘧啶-5-基}-1H-1，2，3-三唑-1-基)(氟)乙酸
按照类似于实施例22所述的方法，使用溴氟乙酸乙酯替换步骤1中的2-溴丙酸乙酯制备标题化合物。得到标题化合物，为黄色油状物。
1H NMR(400MHz，丙酮-d6)：δ8.89(s，2H)，8.64(s，1H)，7.60(dd，1H)，7.11(dd，1H)，7.10(d，1H)，6.75-6.71(m，1H)，4.95-4.88(m，1H)，4.19-4.10(m，2H)，4.01-3.95(m，2H)，2.11-2.04(m，2H)，1.90-1.82(m，2H).
MS(ESI，Q+)m/z 495，497(35Br和37Br的M+1)。
药物制剂实施例
作为本发明口服药物组合物的一个具体实施方案，100mg强效片剂由100mg实施例中的任一种化合物、268mg微晶纤维素、20mg交联羧甲纤维素钠和4mg硬脂酸镁组成。先将活性物质、微晶纤维素和交联羧甲纤维素混匀。混合物然后用硬脂酸镁进行润滑后，压制成片剂。
虽然参照具体实施方案对本发明进行了描述和说明，但是本领域技术人员应了解的是，可在不偏离本发明的精神和范围的前提下进行各种变动、修改和替换。例如，可根据待治疗的人对特定情况的反应变化而采用上文中所给出的有效剂量而不是优选剂量。同样，所观察到药理反应可基于并取决于所选择的特定活性化合物或是否存在药物载体以及所使用的制剂类型和给药方式，在结果中这类预期的变化或差异都包括在本发明的目标和实施中。因此本发明仅受限于所附的权利要求书的范围，并且可在合理的广义范围内对所述权利要求书进行解释。