一种橘红色闭壳肌扇贝的培育方法 技术领域：
本发明属于海洋贝类产品养殖培育技术领域，涉及一种肉柱或肌肉组织中含类胡萝卜素地橘红色闭壳肌扇贝的培育方法。
背景技术：
在扇贝选择育种过程中，发现野生扇贝群体中个别个体(少于群体总数0.1％)的闭壳肌呈橘红色而非普通的白色，这一闭壳肌的颜色变异现象在扇贝包括贝类中未见过报道。经分离实验测试和结构鉴定证实两种类胡萝卜素——Pectenolone和Pectenoxanthin在闭壳肌中的积累是橘红色泽产生的原因。类胡萝卜素具有多种生物活性，是人类不能自身合成而需要从食物中摄取的必需维生素。因此，富含类胡萝卜素可明显提升扇贝闭壳肌的营养价值，同时橘红色闭壳肌还可为餐桌上增添一份菜色。试养过程发现橘红色闭壳肌扇贝相对于野生白色闭壳肌扇贝，其生长速度明显较快，并且在苗期和养殖过程中的成活率也高于白色闭壳肌扇贝，表现出良好的生产性状和抗逆性能。
目前，某些海洋或农牧水产新品种的培育主要是根据人们的目标，利用生物的遗传变异性能，通过选择和杂交来定向培育适合人们需要的优良品种，而针对扇贝闭壳肌富含类胡萝卜素的突变个体进行培养育种成高产抗逆优质的橘红色闭壳肌扇贝的技术尚未见报导。
发明内容：
本发明的目的在于克服现有技术难以培育富含类胡萝卜素海产品的缺陷，寻求提供一种经过选苗、繁育、催产、授精和培育等工艺步骤培育扇贝的新工艺方法。
为了实现上述目的，本发明利用在自然地理群体发现的极少数的橘红色闭壳肌扇贝，经选苗、繁育、催产、授精和培育等步骤，培育出具有稳定遗传，生长速度快、抗逆性强，且具有保健营养价值的橘红色闭壳肌扇贝，并实现大面积养殖；其工艺步骤包括：
(1)、从野生成体扇贝群体中选择肉柱含有类胡萝卜素的个体，先轻缓微微分开扇贝的双壳，肉眼观察肉柱是否呈金黄色，将肉柱明显呈金黄色的扇贝挑选出来移到室内暂养，并将雌雄分开，室内促熟亲贝发育至产卵期；
(2)、应用高效液相检测红柱扇贝肉柱含有Pectenolone和Pectenoxanthin类胡萝卜素的含量，选择两种类胡萝卜素含量均高于15μg/g的雌、雄扇贝作为苗种并催产繁育；
(3)、将苗种以筏式养殖至成贝，再重复上述(1)、(2)步骤选择、培育，经四代选择，选育群体100％的扇贝个体肉柱呈明显橘红色，类胡萝卜素含量稳定，二龄贝肉柱类胡萝卜素平均总含量在30μg/g以上；
(4)、再选取人工繁育群体或自然地理群体中的性腺发育饱满的橘红色闭壳肌扇贝个体作为亲贝；
(5)、将选择的亲贝置于室内亲贝培育池，洗刷去除亲贝壳上的污泥及各种附着物，采用积温促熟方法，缓慢将过滤的自然海水温度升至8-8.5℃，每天升温不高于1℃，然后在该温度下培育20天至性成熟；
(6)、将雌雄个体分开，阴干30-40分钟，然后加入高于亲贝暂养水温2℃的过滤海水刺激其产卵和排精，分别收集卵子和精子；
(7)、将精子加到收集的带有卵子的海水中，精子用量为显微镜下观察一个卵子周围有3-5个精子即可，受精在产后1.5个小时之内完成；
(8)、受精后按扇贝常规孵化和培育方法即可获得批量橘红色闭壳肌扇贝苗种供养殖。
本发明与现有技术相比，不需要通过转基因等复杂技术导入外源基因，在对生物和环境安全没有任何影响的前提下，利用在自然群体和人工养殖群体中发现的极少量的扇贝突变体，经过四代选育，培育出稳定遗传的大量富含类胡萝卜素的橘红色闭壳肌扇贝，形成稳定遗传的生产性状优良的养殖新品种，其培育原理可行，工艺步骤简单，节省成本，育成种苗存活率高，养殖收益大，产品营养价值高，经济效益明显。
具体实施方式：
下面通过实施例对本发明做进一步说明。
实施例：
本实施例按下列步骤进行：
(1)、从山东荣成海域的野生成体虾夷扇贝群体中选择肉柱含有类胡萝卜素的个体约1300只，轻缓微微分开扇贝的双壳，肉眼观察肉柱是否呈金黄色，将肉柱明显呈金黄色的扇贝挑选出来移到室内暂养，并将雌雄分开，室内促熟亲贝发育至产卵期；
(2)、应用高效液相检测部分红柱虾夷扇贝肉柱含有Pectenolone和Pectenoxanthin类胡萝卜素的含量，选择两种类胡萝卜素含量均高于15μg/g的扇贝，以此肉柱颜色为参考，选择肉柱颜色甚于此参考颜色的雌、雄虾夷，催产繁育；
(3)、苗种按常规方式以筏式养殖至成贝，继续按上述方法选择、培育，经四代选择，选育群体100％的扇贝个体肉柱呈明显橘红色，类胡萝卜素含量稳定，经检测，二龄贝肉柱类胡萝卜素平均总含量在30μg/g以上；
(4)、橘红色闭壳肌亲贝选择：选取自然地理群体或人工繁育群体中的性腺发育饱满的橘红色闭壳肌虾夷扇贝个体作为亲贝；
(5)、亲贝促熟：在虾夷扇贝繁殖季节，将选择的亲贝置于室内亲贝培育池，洗刷去除亲贝壳上的污泥及各种附着物，采用积温促熟的办法，缓慢将过滤的自然海水温度升至8-8.5℃(每天升温不得高于1℃)，然后在该温度下培育20天至性成熟，积温促熟时间越长效果越好，然后在该温度下培育至性成熟；
(6)、催产：将雌雄个体分开，阴干30-40分钟，然后加入高于亲贝暂养水温2℃的过滤海水刺激其产卵和排精，分别收集卵子和精子；
(7)、受精：将精子加到收集的带有卵子的海水中，精子用量为显微镜下观察一个卵子周围有3-5个精子即可，受精在产后1.5个小时之内完成；
(8)、幼虫培育：受精后按虾夷扇贝常规孵化和培育方法即可获得橘红色闭壳肌虾夷扇贝苗种；
本实施例的两种虾夷扇贝22月龄的生长性状比较与抗逆性比较见表1和表2.
表1.红色与白色两种闭壳肌虾夷扇贝各项生长性状比较(各取30个体)
注：*与野生型对照组比较，P＜0.05；**与野生型对照组比较，P＜0.001
表2.红色与白色两种闭壳肌虾夷扇贝的抗逆性状比较