RHD6及其调节植物根毛发育的应用.pdf

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摘要
申请专利号:

CN200880025561.X

申请日:

2008.04.09

公开号:

CN101796068A

公开日:

2010.08.04

当前法律状态:

撤回

有效性:

无权

法律详情:

发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):C07K 14/415申请公布日:20100804|||实质审查的生效IPC(主分类):C07K 14/415申请日:20080409|||公开

IPC分类号:

C07K14/415; C12N15/82; A01H5/00

主分类号:

C07K14/415

申请人:

植物生物科学有限公司

发明人:

利亚姆·多兰; 伯努瓦·梅南; 易可可

地址:

英国诺里奇

优先权:

2007.05.22 GB 0709835.3

专利代理机构:

中科专利商标代理有限责任公司 11021

代理人:

王旭

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内容摘要

本发明涉及通过改变RHD6相关基因的表达调节植物中的根毛发育,例如,增加植物中根毛的数量、长度和/或寿命。这可以有效用于,例如,改善植物从土壤吸取营养的能力。

权利要求书

1: 分离的根毛缺陷6(RHD6)相关基因。
2: 按照权利要求1的分离的基因,其选自由根毛缺陷6(RHD6)基因,根毛缺陷6-样1(RSL1)基因,及其功能同源物组成的组。
3: 编码由RHD6基因、RSL1基因或基因产物编码的氨基酸序列的分离的基因,所述基因产物与RHD6基因、RSL1基因足够同源,以允许在rhd6突变细胞中,在其产生时功能性补偿所述突变。
4: 表达按照权利要求1-3中任一项的基因的分离的产物。
5: 表达构建体,其包含权利要求1-4中任一项的基因。
6: 按照权利要求5的表达构建体,其中所述基因与异源调节序列可操作相连。
7: 植物细胞,其包含按照权利要求1-4中任一项的基因或按照权利要求5或权利要求6的表达构建体。
8: 植物或其后代,包括种子,其包括按照权利要求7的细胞。
9: 编码RHD6相关多肽的分离的核酸,所述RHD6相关多肽包含与选自由SEQ ID NOS:13-25组成的组中氨基酸序列具有至少50%序列同一性的氨基酸序列。
10: 按照权利要求9的分离的核酸,其编码包含选自由SEQ ID NOS:13-25组成的组中氨基酸序列的多肽。
11: 分离的核酸,其与SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:4,或二者具有至少50%核酸序列同一性。
12: 按照权利要求11的分离的核酸,其编码功能性补偿rhd6突变的氨基酸产物。
13: 调节植物中根毛发育的方法,包括; 相对于对照植物增加所述植物细胞中RHD6相关多肽的表达,所述RHD6相关多肽包含与选自由SEQ ID NOS:13-25组成的组中氨基酸序列具有至少50%序列同一性的氨基酸序列。
14: 增加植物对营养缺乏条件的耐受性的方法,包括; 相对于对照植物增加所述植物细胞中RHD6相关多肽的表达,所述RHD6相关多肽包含与选自由SEQ ID NOS:13-25组成的组中氨基酸序列具有至少50%序列同一性的氨基酸序列。
15: 按照权利要求14的方法,其中所述营养缺乏条件选自由硝酸盐缺乏、磷酸盐缺乏或铁缺乏条件组成的组。
16: 增加植物中根分泌的植物化学物质产生或分泌的方法,包括; 增加通过其根分泌植物化学物质的植物细胞内的RHD6相关多肽的表达。
17: 按照权利要求13-16中任一项的方法,其中所述RHD6相关多肽包含与SEQ ID N0:1或SEQ ID NO:3具有至少55%序列同一性的氨基酸序列。
18: 按照权利要求13-16中任一项的方法,其中所述RHD6相关多肽包含与SEQ ID NOS:5,7,9,或11,26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112和114中任一项具有至少55%序列同一性的氨基酸序列。
19: 按照权利要求13-18中任一项的方法,其中增加所述植物中根毛的长度、数量和/或寿命中的一种或多种。
20: 按照权利要求13-19中任一项的方法,其中表达是通过在所述植物的细胞内表达编码所述RHD6相关多肽的异源核酸增加的。
21: 按照权利要求20的方法,其中所述异源核酸包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4具有至少40%序列同一性的核苷酸序列。
22: 按照权利要求20的方法,其中所述异源核酸包含与SEQ ID NOS:6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113和115中任一项具有至少40%序列同一性的核苷酸序列。
23: 按照权利要求20-22中任一项的方法,其中所述异源核酸与启动子操作性相连。
24: 按照权利要求23的方法,其中所述启动子是组成型启动子。
25: 按照权利要求23的方法,其中所述启动子是根特异性启动子。
26: 按照权利要求23的方法,其中所述启动子是可诱导的启动子。
27: 按照权利要求23-26中任一项的方法,其中所述异源核酸包括在载体中。
28: 按照权利要求13-19中任一项的方法,其中表达是通过这样的方法增加的,所述方法包括; 使第一和第二植物杂交,以产生后代植物群; 确定所述群中后代植物中的RHD6相关多肽的表达,和; 在所述群中识别其中RHD6相关多肽表达相对于对照增加的后代植物。
29: 按照权利要求13-19中任一项的方法,其中表达是通过这样的方法增加的,所述方法包括; 使植物群暴露于诱变剂, 确定所述群中一株或多株植物中RHD6相关多肽的表达,和 识别具有增加的RHD6相关多肽表达的植物。
30: 按照权利要求13-29中任一项的方法,包括有性或无性繁殖或生长具有增加的RHD6相关多肽表达的植物的后代或后裔。
31: 生成具有改变的根毛表型的植物的方法,包括; 将编码RHD6相关多肽的异源核酸通过转化的方式引入植物细胞,所述RHD6相关多肽包含与选自由SEQ ID NOS:13-25组成的组中氨基酸序列具有至少50%序列同一性的氨基酸序列,和; 由一个或多个转化的细胞再生植物。
32: 按照权利要求31的方法,其中所述植物具有相对于对照植物增加的针对营养缺乏条件的耐受性。
33: 按照权利要求32的方法,其中所述营养缺乏条件选自由硝酸盐缺乏、磷酸盐缺乏或铁缺乏条件组成的组。
34: 按照权利要求31的方法,其中所述植物具有增加的根分泌的植物化学物质的产生或分泌。
35: 按照权利要求31-34中任一项的方法,其中所述RHD6相关多肽包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3具有至少55%序列同一性的氨基酸序列。
36: 按照权利要求31-35中任一项的方法,其中所述RHD6相关多肽包含与SEQ ID NOS: 5,7,9,或11,26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112和114中任一项具有至少55%序列同一性的氨基酸序列。
37: 按照权利要求31-36中任一项的方法,其中增加所述植物中根毛的长度、数量和/或寿命中的一种或多种。
38: 按照权利要求31-37中任一项的方法,其中表达是通过在所述植物的细胞内表达编码所述RHD6相关多肽的异源核酸增加的。
39: 按照权利要求38的方法,其中所述异源核酸包含与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4具有至少40%序列同一性的核苷酸序列。
40: 按照权利要求38的方法,其中所述异源核酸包含与SEQ ID NOS:6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113和115中任一项具有至少40%序列同一性的核苷酸序列。
41: 按照权利要求38-40中任一项的方法,其中所述异源核酸与启动子操作性相连。
42: 按照权利要求41的方法,其中所述启动子是组成型启动子。
43: 按照权利要求41的方法,其中所述启动子是根特异性启动子。
44: 按照权利要求41的方法,其中所述启动子是可诱导的启动子。
45: 按照权利要求38-44中任一项的方法,其中所述异源核酸包括在载体中。
46: 按照权利要求31-37中任一项的方法,其中表达是通过这样的方法增加的,所述方法包括; 使第一和第二植物杂交,以产生后代植物群; 确定所述群中后代植物中的RHD6相关多肽的表达,和; 在所述群中识别其中RHD6相关多肽表达相对于对照增加的后代植物。
47: 按照权利要求31-37中任一项的方法,其中表达是通过这样的方法增加的,所述方法包括; 使植物群暴露于诱变剂, 确定所述群中一株或多株植物中RHD6相关多肽的表达,和 识别具有增加的RHD6相关多肽表达的植物。
48: 按照权利要求31-47中任一项的方法,包括有性或无性繁殖或生长具有增加的RHD6相关多肽表达的植物的后代或后裔。
49: 按照权利要求13-48中任一项的方法,其中所述植物是高等植物。
50: 按照权利要求49的方法,其中所述植物是农业植物,其选自由紫草(Lithospermum erythrorhizon)、红豆杉属(Taxus)物种、烟草属、葫芦、胡萝卜、蔬菜芸苔属、瓜、辣椒属、葡萄藤、莴苣属、草莓属、芸苔属油料作物、甜菜、小麦属、大麦属、玉蜀黍属、稻属、大豆属、豌豆属、蜀黍属、向日葵属、番茄属、马铃薯、胡椒属、茼蒿属、麝香石竹、亚麻籽、大麻属和黑麦属组成的组。
51: 通过按照权利要求31-50任一项的方法产生的植物。
52: 按照权利要求51的植物,其具有改变的根毛表型。
53: 按照权利要求51或权利要求52的植物,其具有增加的针对营养缺乏条件的耐受 性。
54: 按照权利要求51或权利要求52的植物,其具有增加根分泌植物化学物质的产生。
55: 按照权利要求51或权利要求52的植物,其具有增加的土壤污染物的吸收。
56: 减少污染土壤中污染物的量的方法,包括; 增加植物细胞内RHD6相关多肽的表达,所述植物通过其根吸收污染物, 在包含污染物的土壤中生长所述植物或其后代,从而使得所述植物或后代从土壤中吸收污染物,和 收获所述植物或其后代。

说明书


RHD6及其调节植物根毛发育的应用

    【发明领域】

    本发明涉及植物中根毛发育的调节。

    【发明背景】

    在1990年,Schiefelbein和Somerville27发表了一篇论文,描述他们关于拟南芥(Arabidopsis thaliana)突变体的工作,他们试图理解根毛发育的遗传控制。他们检查了来自12,000株诱变的拟南芥(Arabidopsis)幼苗的根,由此引起识别高于40株在根毛形态发生中损伤的突变体。将突变体表征为属于四种表型类型,其在遗传上由四种不同基因,称为RHD1,RHDP,RHD3,和RHD4中的单核隐性突变产生。作为突变体和纯合双突变体的表型分析的结果,提议关于根毛发育的模型,包括通常需要所述基因的阶段。RHD1基因产物似乎对根毛的适当起始是必需的,而RHDS,RHD3,和RHD4基因产物是正常毛伸长所需要的。这些作者推断他们获得的结果证明拟南芥属(Arabidopsis)中的根毛发育经得起遗传解剖的检验,并应该证实为是研究植物中管理细胞分化的分子机制的有效模型系统。

    在1994年,Masucci和Schiefelbein7通过识别另一种突变体,即rhd6突变体,扩展了那些结果,推断拟南芥中的根毛起始提供用于研究细胞极性及其在植物形态发生中作用的模型。他们观察到根毛通常出现在根表皮细胞的顶末端,这暗示这些细胞是极化的。rhd6突变体的特征在于表现出三种缺点:(a)根毛数量的减少;(b)在根毛出现的位点的全面基质移位;和(c)相对高频的具有多根毛的表皮细胞。他们推断这些缺点暗示根毛起始中的RHD6基因并说明RHD6通常与根表皮细胞极性的形成有关,或对根表皮细胞极性响应有关。在根毛出现位点中的类似变化,尽管不太明显,但也在生长素-,乙烯-,脱落酸-抗性突变体axr2和乙烯-抗性突变体etr1的根中被发现。当生长培养基中包括生长素(吲哚乙酸)或乙烯前体(1-氨基环丙烷-1-羧酸)时,拯救全部三种rhd6突变体表型。rhd6根表型可以通过用乙烯途径的抑制剂(氨基乙氧基乙烯基甘氨酸)处理野生型幼苗进行表型模拟。这些结果说明RHD6通常参与通过涉及生长素和乙烯的过程指导选择或装配根毛起始位点。

    根毛在植物营养和水分吸收中起重要作用。在大多数土壤中,它们对于磷酸盐和铁吸收很重要。在干旱的条件下,它们在吸收其他营养诸如硝酸盐中很重要。因此,控制根毛特征应该对开发能够从土壤有效吸取营养的农作物非常重要。至今为止,这仍然很困难,因为尚未确定具有仅限于根毛的功能的基因。

    EP0803572B1公开拟南芥CPC基因的识别、分离、克隆、和表征,从而调节根毛形成的起始,以及过表达CPC基因的转基因植物。CPC基因不是造成上述rhd突变表型的原因。这在例如US661749,以及EP0803572B1本身中得到证实。

    发明概述

    本发明涉及植物中过表达根毛缺陷6(RHD6)基因改变根毛发育,例如导致植物具有增加数量、长度和/或寿命的根毛的发现。此外,过表达不同基因家族(根毛缺陷6样1(ROOT HAIR DEFECTIE SIX LIKE)(RSL)基因)产生类似的效果。调节这些基因(共同称为‘RHD6相关基因’)在植物中的表达可以有效用于,例如,操作不同组植物种(包括农作物)中的根毛实验,从而改进它们由土壤吸取营养的能力。

    本发明的方面提供分离的根毛缺陷(ROOT HAIR DEFECTIE)6(RHD6)相关基因。

    RHD6相关基因包括根毛缺陷6(RHD6)基因和根毛缺陷6样1(RSL1)基因,及其功能同源物,如本文中所述。RHD6相关基因包括能够补偿植物中rhd6突变的基因。

    本发明的另一方面提供编码由RHD6相关基因编码的氨基酸序列的分离的基因或其基因产物,所述基因产物足以与其同源,以允许在rhd6突变细胞中,在其产生时对所述突变的功能性补偿。

    本发明的另一方面提供表达分离的RHD6相关基因的分离的产物。

    本发明的另一个方面提供分离的多核苷酸,其编码包括以下各项所示的氨基酸序列的基因产物:SEQ ID NO:1,3,5,7,9,11,13-26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112和114。

    本发明的另一方面提供分离的多核苷酸,其与以下各项中地一项或多项具有至少40%同一性的核酸序列:SEQ ID NOS:2,4,6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113,和115。

    本发明的其他方面提供表达构建体、植物细胞、和植物或植物后代,包括种子,其包括分离的RHD6相关基因或本文中所述的多核苷酸。

    本发明的另一方面提供调节在植物中根毛发育的方法,其包括;

    相对于对照植物增加所述植物细胞中RHD6相关多肽的表达。

    RHD6相关多肽可以,例如,包括SEQ ID NO:1,3,5,7,9,11,13-26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112或114中所示的氨基酸序列。

    本发明的另一方面提供改进植物对营养缺乏条件的耐受性的方法,其包括;

    相对于对照植物增加所述植物细胞中RHD6相关多肽的表达。

    本发明的另一方面提供增加植物中根分泌的植物化学物质(phytochemical)产生的方法,其包括;

    增加产生根分泌的植物化学物质的植物细胞内的RHD6相关多肽的表达。

    在一些实施方案中,RHD6相关多肽在植物中的表达可以通过在所述植物细胞内表达编码所述RHD6相关多肽的异源核酸来增加。

    在一些实施方案中,RHD6相关多肽在植物中的表达可以通过以下各项来增加;

    使第一和第二植物杂交,以产生后代植物群;

    确定所述群中植物后代中的RHD6相关多肽的表达,和;

    在所述群中识别其中RHD6相关多肽表达相对于对照增加的后代植物。

    在一些实施方案中,RHD6相关多肽在植物中的表达可以通过以下各项来增加;

    使植物群暴露于诱变剂,

    确定所述群中一株或多株植物中RHD6相关多肽的表达,和

    识别具有增加的RHD6相关多肽表达的植物。

    被识别为具有增加的RHD6相关多肽表达的植物可以有性或无性繁殖或生长,以产生表现出增加的RHD6相关多肽表达的后代(off-spring)或后裔(descendants)。

    本发明的另一方面提供产生具有改变的根毛发育的植物的方法,其包括:

    将改变RHD6相关多肽表达的异源核酸通过转化方式引入到植物细胞中,和;

    由一个或多个转化的细胞再生植物。

    本发明的另一方面提供通过本文中所述方法产生的植物,其相对于对照表现出改变的根毛发育。

    附图简述

    图1显示AtRHD6是拟南芥中根毛发育的阳性调节子。图1a显示Atrhd6-1,Atrhd6-2和Atrhd6-3突变体以及它们各自野生型和具有基因组AtRHD6p::GFP:AtRHD6融合的Atrhd6-3突变体的互补的根。图1b显示Atrhd6-3背景中基因组AtRHD6p::GFP:AtRHD6融合的荧光图像,其显示毛细胞核内的AtRHD6蛋白。图1c显示根横截面中Atrhd6-2增强子捕获GUS基因的表达。图1d显示增强子捕获GUS基因在Atrhd6-2中和在不同背景(cpc,wer,ttg1和gl2)中表达的全封固(mount)纵视图。H,毛细胞;N,非毛细胞;C,皮层。比例尺,500μm(a),50μm(b),25μm(c)和100μm(d)。

    图2显示AtRSL1阳性调节拟南芥中的根毛发育。图2a显示WT,Atrhd6-3单突变体,Atrsl1-1单突变体,Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体和携带AtRSLIp::GFP:AtRSL1转基因的Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体的根。在具有蔗糖的MS培养基上生长的植物覆盖在赛璐玢膜上,从而增加Atrhd6-3突变体中的根毛产生。图2b显示Atrhd6-3 Atrsl1-1背景中的基因组AtRSL1p::GFP:AtRSL1融合的荧光图像,其显示毛细胞核中的AtRSL1蛋白。H,毛细胞;N,非毛细胞。比例尺,500μm(a)和50μm(b)。

    图3显示来自拟南芥和Physcomitrella的RHD6样蛋白之间的关系。该树图是利用表1和2中所示bHLH结构域氨基酸序列比对产生的12种最简约数图中的严格共同树(consensus tree)。所用的拟南芥基因是bHLH亚家族VIIIc中的成员,例外是AtIND(INDEHISCENT)/At4g00120,其作为外类群使用并属于bHLH亚家族VIIIb8,10,26。Physcomitrella PpRSL 1-7序列通过Physcomitrella基因组序列的BLAST获得。PpIND1是与AtIND类似的Physcomitrella序列和Physcomitrella中家族VIIIb的推定成员。数字为自展值(bootstrap value)并表示82%的出现AtRHD6进化枝的置信水平。括号表示AtRHD6进化枝和姐妹进化枝。

    图4显示PpRSL1和PpR3L2阳性控制Physcomitrella中茎原丝细胞和假根的发育,且PpRSL1和AtRHD6具有保守的分子功能。图4a和b显示来自在0.8%琼脂上由孢子生长的WT、Pprsl1和Pprsl2单突变体、和Pprsl1 Pprsl2双突变体的18日龄原丝体。图4a显示由单孢子生长的全原丝体。图4b显示来自图4a中所示原丝体的分裂丝(dissected filaments)。图4c显示分离的1月龄配子孢子。图4d显示与WT和Atrhd6-3根相比,携带35S::PpRSL1转基因的拟南芥Atrhd6-3突变体的根,ca,茎原丝细胞;ch,chloronemal细胞;rh,假根。比例尺,1mm(a),100μm(b),1mm(c),和500μm(d)。

    图5显示转化株35S::RHD6的表型。图5A显示具有35S::RHD6的col-0rhd6/rsl1;图5B显示具有35S::RHD6的col-0 rhd6/rsl1;图5C.具有35S::RHD6的rhd6/rsl1。

    图6显示转化株35S::RSL2和35S::RSL3的表型。图6A显示具有35S::RSL2/3的col-0rhd6/rs11;图6B显示根下胚轴。

    图7显示拟南芥AtRHD6(A)和AtRSL1(B)基因中突变的分子基础。白色框对应编码区(黑色框对应bHLH结构域编码区)。灰色三角表示各个插入的位置。括号内的数字表示每个T-DNA插入和起始密码子之间的距离。(C)RT-PCR显示Atrhd6-3,Atrsl1-1和Atrhd6-3 Atrsl1-1是RNA无效突变体。AtAPT1,腺嘌呤磷酸核糖基转移酶1。

    图8显示Atrhd6-3和Atrsl1-1单突变体和Atrhd6 Atrsl1双突变体不具有可检测的花粉管生长缺陷。来自与WT回交的Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体的F2代植物耐受抗生素的比例关于磺胺嘧啶(Sulfadiazin,由Atrsl1-1等位基因携带的抗性)是76.7%(n=1404;χ2(3/1)=2,19;P>0,05)且关于phosphinothricin(由Atrsl1-1等位基因携带的抗性)是74.9%(n=1289;χ2>(3/1)=0.0023;P>0,05),这显示单突变体和双突变体配子的正偏析。(图8A显示以下显示的基因型的花粉,每幅图用于对WT柱头授粉。授粉后用苯胺蓝染色心皮4小时。通过蓝色胼胝质染色揭示WT心皮中每个突变花粉管的生长(白色箭头)。在WT和突变体花粉管中观察到类似的花粉管生长。图9B显示体外花粉管生长实验。WT和突变体花粉在琼脂板上发芽。用发芽率(600花粉粒/品系的平均值,具有标准误差)显示代表性板。在WT和突变体花粉之间观察到相似的发芽率(Student’s t-检验p值关于Atrhd6-3对比WT是0.554,关于Atrsl1-1对比WT是0.904,和关于Atrhd6-3 Atrsl1-1对比WT是0.87)。比例尺,200μm(图8A和B)。

    图9显示P.patens Pprsl1,Pprsl2和Pprsl1 Pprsl2突变体(三种独立的突变体,称为1-3,分别显示在每种情形中)的分子基础。图9A和D显示PpRSL1(A)和PpRSL2(D)基因的结构(上),和预期的同源重组结果(下)。白色框对应于编码区(黑色框对应于bHLH结构域编码区)且灰色框对应于抗性基因盒(NptII和AphIV)。用于基因替换的同源物区域通过灰色线划界。还显示用于Southern印迹的限制性位点和所用探针的位置之间的距离。图9B、C、E和F显示用ScaI(B和C)或NcoI(E和F)消化并与图下所示探针杂交的WT和突变体DNA的southern印迹。印迹C和F是在除去基因特异性探针后,与用于印迹B和E分别相同的膜的杂交。当用基因特异性探针进行杂交时(B和E),用突变品系中较大预期尺寸条带(见A和D)替换WT条带,且仅突变条带与抗性基因探针杂交(C和F),说明PpRSL1和PpRSL2基因座中存在单插入。(G)RT-PCR显示突变体是RNA无效突变体。PpGAPDH,三磷酸甘油醛脱氢酶。在每种情形中,存在的三种独立插入突变体具有相同的表型并且只有突变体1显示在图4中。

    图10显示过表达RSL4和表现出类似真菌共生体诸如菌根(Mycorrhizae)的根形态的拟南芥植物的根毛系统。

    发明优选实施方案详述

    本发明内容证明植物中根毛缺陷6(RHD6)和根毛缺陷6样(RSL)基因(本文中总称为“RHD6相关基因)的识别、分离、克隆和表达。显示突变由疏远相关基因补偿,提供在其中灭活疏远相关基因的植物中的根毛发育功能。因此,本领域中的技术人员应该理解,按照本发明首次分离和克隆了造成以前识别的突变表型的基因。还应该理解,由本发明内容,功能性益处可以通过引入植物和在所述植物中表达这些基因的方式赋予植物。本领域中已知的方法可以用于该目的。因此,例如,本领域中的技术人员应该理解,例如,用于获得本发明的RHD6和RSL基因表达的方法可以按照本文中公开的方法,和通过,例如在,但不限于EP0803572B1中公开的方法实现,EP0803572B1公开了cpc基因的克隆和表达,所述cpc基因,如同本发明的RHD6和RSL基因,也与植物中的根毛发育控制有关,虽然处于植物和根毛发育的不同阶段。

    在不同的方面,本发明提供由根毛缺陷6(RHD6)相关基因编码的根毛缺陷6(RHD6)相关多肽和本文中所述的核酸序列。

    根毛缺陷6(RHD6)相关多肽包括根毛缺陷6(RHD6)多肽和根毛缺陷6样1(RSL1)多肽二者,及其功能同源物,如本文中所述。RHD6相关多肽包括可以能够在植物中表达时补偿rhd6突变的那些。

    根毛缺陷6(RHD6)相关多肽可以属于RHD6进化枝,其包括蛋白质序列的进化分枝图中的AtRHD6,AtRSL1,PpRSL1,PpRSL2,BdRSLb,TaRSLa,OsRSLc,BdRSLc,OsRSLb,ZmRSLa,PtRSLa,PrRSLb,OsRSLa,BdRSLa,SmRSLa,SmRSLb,SmRSLc和SmRSLd(根毛缺陷6(RHD6)进化枝),其例如利用AtIND和PpINDa的序列作为外类群(见图3)。

    备选地,根毛缺陷6(RHD6)相关多肽可以属于RSL进化枝,其包括蛋白质序列的进化分枝图中的AtRSL3,CtRSLa,PtRSLe,OsRSLi,AtRSL5,AtRSL4,PtRSLc,PtRSLd,AtRSL2,MtRSLa,OsRSLd,OsRSLh,LsRSLa,MaRSLa,OsRSLe,GmRSLb,GmRSLa,ZmRSLb,ZmRSLd,BdRSLd,ZmRSLc,OsRSLg,BdRSLe,OsRSLf,PpRSL3,PpRSL4,PpRSL5,PpRSL6,PpRSL7,SmRSLg,SmRSLf,SmRSLh和SmRSLe(根毛缺陷6样(RSL)进化枝),其例如利用AtIND和PpINDa的序列作为外类群(见图3)。

    进化分枝图可以利用常规技术生成。例如,进化分枝图可以利用用于比对蛋白质序列的ClustalW,关于具有1000个自展复制的数图输出的Phylip形式和用于视觉化TreeViewX(版本0.5.0)计算。

    合适的根毛缺陷6(RHD6)相关多肽可以包括SEQ ID NO:1,3,5,7,9,11,13-26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112或114所示的氨基酸序列或可以是这些序列之一的片段或变体,所述片段或变体保持RHD6活性。

    在一些优选的实施方案中,根毛缺陷6(RHD6)相关多肽可以是具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列的根毛缺陷6(RHD6)多肽(At1g66470;NP_176820.1 GI:15219658),或可以是该序列的片段或变体,所述片段或变体保持RHD6活性。

    在其他实施方案中,根毛缺陷6(RHD6)相关多肽可以是具有SEQ IDNOS:5,7,9和11中任意之一的氨基酸序列的根毛缺陷6样(RSL)多肽或可以是这些序列中任意之一的片段或变体,所述片段或变体保持RHD6活性。

    根毛缺陷6(RHD6)相关多肽,其是本文中所述参考序列,诸如SEQ IDNO:1,3,5,7,9,11,13-26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112或114的变体,可以包括与参考氨基酸序列共享高于20%,优选高于30%,高于40%,高于50%,高于60%,高于65%,高于70%,高于80%,高于90%或高于95%序列同一性的氨基酸序列。

    具体的氨基酸序列变体可以通过插入、添加、置换或缺失1个氨基酸,2,3,4,5-10,10-20 20-30,30-50,或多于50个氨基酸与本文所述的RHD6相关多肽序列相区别。

    序列同一性一般参考运算法则GAP(Wisconsin Package(威斯康星包装),Accelerys,圣地亚哥,美国)定义。GAP使用Needleman和Wunsch运算法则比对两个完整序列,其最大化匹配的数量和最小化裂隙的数量。通常,使用默认参数,其裂隙形成处罚=12和裂隙伸长处罚=4。

    使用GAP可以是优选的但是可以使用其他运算法则,例如BLAST(其使用Altschul等(1990)J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)215:405-410的方法),FASTA(其使用Pearson和Lipman(1988)PNAS美国85:2444-2448的方法),或Smith-Waterman运算法则(Smith和Waterman(1981)J.Mol Biol.(分子生物学杂志)147:195-197),或上文Altschul等(1990)的TBLASTN程序其通常使用默认参数。特别地,可以使用ψ-Blast运算法则(Nucl.AcidsRes.(核酸研究)(1997)253389-3402)。

    序列比较可以在本文中所述相关序列的全长上进行。

    RHD6相关多肽的某些结构域相对于作为整体的RHD6相关多肽序列,可以显示出与参考序列,诸如SEQ ID NO:1,3,5,7,9,11,13-26,28,30,32,34,36,38,40,42,44,46,48,50,52,54,56,58,60,62,64,66,68,70,72,74,76,78,80,82,84,86,88,90,92,94,96,98,100,102,104,106,108,110,112或114的结构域增高的同一性水平。例如,RHD6相关多肽可以包括一个或多个由这样的氨基酸序列组成的结构域或基序,所述氨基酸序列与选自由SEQ ID NOS:13-25或表1和2中所示的其它RHD6相关多肽结构域组成的组中的氨基酸序列具有至少70%,至少75%,至少80%,至少90%,至少95%或至少98%序列同一性或相似性。

    在一些优选的实施方案中,RHD6-相关多肽可以包括一个或多个由氨基酸序列组成的结构域或基序,所述氨基酸序列选自由SEQ ID NOS:13-25或表1和2中所示的其它RHD6相关多肽结构域组成的组。

    在不同方面,本发明提供根毛缺陷6(RHD6)相关基因和编码根毛缺陷6(RHD6)相关多肽的核酸序列,如本文中所述。

    编码RHD6相关多肽的核酸可以包括下列核苷酸序列或由下列核苷酸序列组成:SEQ ID NOS:2,4,6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113,和115中任意之一的核苷酸序列,或可以是这些序列中任意之一的变体或片段,所述变体或片段编码保持RHD6活性的多肽。

    在一些优选的实施方案中,编码RHD6相关多肽的核酸可以包括或由SEQ ID NO:2的核苷酸序列组成或可以是这些序列中任意之一的变体或片段,所述变体或片段编码保持RHD6活性的多肽。

    变体序列可以是SEQ ID NOS:2,4,6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113和115中任意之一的突变体、同源物、或等位基因,或可以通过核酸中的一个或多个添加、插入、缺失或置换一个或多个核苷酸相区别,由此导致在编码的多肽中添加、插入、缺失或置换一个或多个氨基酸。当然,包括对核酸的这样的改变,该改变不对编码的氨基酸序列产生改变。编码RHD6相关多肽的核酸,其具有本文中所述的RHD相关核酸序列的变体的核苷酸序列,可以包括与SEQ ID NOS:2,4,6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113和115中任意之一的核酸序列具有至少30%,例如,优选高于40%,高于50%,高于60%,高于65%,高于70%,高于80%,高于90%或高于95%的序列同一性。序列同一性如上所述。

    片段或变体可以包括这样的序列,其编码功能性RHD6相关多肽,即保持由野生型RHD6基因编码的多肽的一种或多种功能性特征,例如,能够刺激或增加植物中根毛数量、生长或寿命或补偿rhd6突变的多肽。

    在其他实施方案中,编码RHD6多肽的核酸,其具有这样的核苷酸序列,所述核苷酸序列是SEQ ID NOS:2,4,6,8,10,12,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45,47,49,51,53,55,57,59,61,63,65,67,69,71,73,75,77,79,81,83,85,87,89,91,93,95,97,99,101,103,105,107,109,111,113,和115中任意之一的序列的变体,可以在严格条件下与该核酸序列或其补体选择性杂交。

    严格条件包括,例如,为了约80-90%相同的序列杂交,在42℃,0.25MNa2HPO4,pH 7.2,6.5%SDS,10%葡聚糖硫酸酯中杂交过夜,并在55℃,0.1X SSC,0.1%SDS中最后清洗。为了检测高于约90%相同的序列,合适的条件包括在65℃,0.25M Na2HPO4,pH 7.2,6.5%SDS,10%葡聚糖硫酸酯中杂交过夜,并在60℃,0.1X SSC,0.1%SDS最后清洗。

    备选方案,其可特别适合于植物核酸制备,是5x SSPE溶液(最终0.9M NaCl,0.05M磷酸钠,0.005M EDTA pH 7.7),5X Denhardt溶液,0.5%SDS,在50℃或65℃,过夜。清洗可以在0.2x SSC/0.1%SDS中,65℃或在50-60℃,在1x SSC/0.1%SDS中进行,如所需。

    如本文中所述的核酸可以是完全或部分合成的。具体地,它们可以是重组体,其中将天然不共同存在(不连续存在)的核酸序列人工连接或否则组合。备选地,它们可以例如利用自动化合成仪直接合成。

    核酸当然可以是双链或单链,cDNA或基因组DNA,或RNA。根据设计,核酸可以是完全或部分合成的。自然,技术人员应该理解当核酸包括RNA时,针对所示序列的参考应该被解释为针对RNA等价物的参考,其中U被置换为T。

    根毛缺陷6(RHD6)相关多肽和核酸可以容易地通过植物,包括选自由以下各项组成的组中的农业植物的范围内的常规序列分析技术识别:紫草(Lithospermum erythrorhizon)、红豆杉属(Taxus)物种、烟草属(tobacco)、葫芦(cucurbits)、胡萝卜(carrot)、蔬菜芸苔属(vegetable brassica)、瓜(melons)、辣椒属(capsicums)、葡萄藤(grape vines)、莴苣属(lettuce)、草莓属(strawberry)、芸苔属油料作物(oilseed brassica)、甜菜(sugar beet)、小麦属(wheat)、大麦属(barley)、玉蜀黍属(maize)、稻属(rice)、大豆属(soyabeans)、豌豆属(peas)、蜀黍属(sorghum)、向日葵属(sunflower)、番茄属(tomato)、马铃薯(potato)、胡椒属(pepper)、茼蒿属(chrysanthemum)、麝香石竹(carnation)、亚麻籽(linseed)、大麻属(hemp)和黑麦属(rye)组成的组。

    如本文中所述的RHD6相关核酸可以可操作地连接于异源调节序列,诸如启动子,例如组成型可诱导、根特异性或发育特异性启动子。

    “异源的”表示有疑问的核苷酸的基因/序列或调节有疑问的基因/序列的序列,利用遗传工程或重组方式,即通过人干涉连接于RHD6相关核酸。与RHD6相关核酸异源的调节序列可以是天然不调节RHD6相关核酸或天然不与RHD6相关核酸有关的调节序列。“分离的”包括分离的分子(例如多肽或核酸)存在于这样的环境中,所述环境与其天然存在的环境不同。例如,分离的核酸可以基本针对其天然存在的基因组环境分离。

    许多合适的调节序列是本领域中已知的且可以按照本发明使用。合适的调节序列的实例可以来源于植物病毒,例如花椰菜花叶病毒35S(CaMV35S)基因启动子,其事实上在所有植物组织中高水平表达(Benfey等,(1990)EMBO J(EMBO杂志)9:1677-1684)。其他合适的组成型调节元件包括花椰菜花叶病毒19S启动子;玄参花叶(Figwort mosaic)病毒启动子;和胭脂氨酸合成酶(nos)基因启动子(Singer等,Plant Mol.Biol.(植物分子生物学)14:433(1990);An,Plant Physiol.(植物生理学)81:86(1986))。例如,RHD6相关基因诸如AtRHD6,AtRSL1和AtRSL4可以利用组成型启动子表达。

    在下文中例证用于在强组成型启动子(35S启动子)控制下表达RHD6和RSL基因的构建体。显示由35S启动子开始表达AtRHD6,AtRSL1和AtRSL4在不引起另外的表型变化的条件下调节植物中根毛的发育。

    然而,本领域中的那些技术人员应该理解可以在具体的上下文中使用广泛多种其他启动子,以突显其优势。因此,例如,可以选择表皮或根特异性启动子来确保这些构建体仅在根中表达。合适的根特异性启动子记述在例如Qi等PNAS(2006)103(49)18848-18853中。例如,RHD6相关基因诸如AtRSL2和ATRSL3可以利用根特异性启动子表达。

    备选地,或另外地,可以选择可诱导的启动子。这样,例如,在细胞培养设置中,生成特殊目的基因产物可以通过诱导驱动本文中所述基因表达的启动子来增强或抑制。可诱导的启动子包括可以使用醇可诱导的alc基因表达系统(Roslan等,Plant Journal(植物杂志);2001 Oct;28(2):225-35)。

    RHD6相关核酸可以包含在核酸构建体或载体上。构建体或载体优选适合于转化到植物细胞中和/或在植物细胞中表达。

    尤其是,载体是采用双链或单链线性或圆形的任何质粒、粘粒、噬菌体或土壤杆菌属(Agrobacterium)二元载体,其可以或不可以可自我传递或可移动的,且其可以通过整合到细胞基因组中或存在于染色体外(例如,具有复制源的自发复制质粒),转化原核或真核宿主,特别是植物宿主。

    具体包括穿梭载体,通过穿梭载体意指能够天然地或通过设计在两种不同生物体内复制的DNA载体,其可以选自放线菌和相关物种,细菌和真核(例如,高等植物、哺乳动物、酵母或真菌)细胞。

    包括如上所述的核酸的构建体或载体不需要包括启动子或其他调节序列,特别是如果该载体将用于将核酸引入到细胞,从而重组到基因组中。

    构建体或载体还可以包括可选择的遗传标记物,其由赋予可选择表型诸如针对抗生素诸如卡那霉素,潮霉素,草胺膦(phosphinotricin),氯磺隆(chlorsulfuron),甲氨蝶呤,庆大霉素,大观霉素,咪唑啉酮,草甘磷和d-氨基酸的抗性的基因组成。

    本领域中的那些技术人员充分能够构建载体和设计流程,以用于特别在植物细胞中获得重组基因表达。合适的载体可以选择或构建为包含适当的调节序列,包括启动子序列、终止子片段、多聚腺嘌呤序列、增强子序列、标记物基因和其他适当的序列。为了其他详细信息,参见,例如,Molecular Cloning:a Laboratory Manual:3rd edition(分子克隆:实验室手册:第3版),Sambrook & Russell,2001,Cold Spring Harbor Laboratory Press(冷泉港实验室出版社)。

    本领域中的那些技术人员可以构建载体和设计流程,以用于例如在微生物或植物细胞中获得重组基因的表达。合适的载体可以选择或构建为包含适当的调节序列,包括启动子序列、终止子片段、多聚腺嘌呤序列、增强子序列、标记物基因和其他适当的序列。为了其他详细信息,参见,例如,Molecular Cloning:a Laboratory Manual:3rd edition(分子克隆:实验室手册:第3版),Sambrook & Russell,2001,Cold Spring Harbor LaboratoryPress(冷泉港实验室出版社)和Protocols in Molecular Biology(分子生物学流程),第2版,Ausubel等编.John Wiley & Sons,1992。以前广泛成功用于植物的特异性程序和载体记述在Bevan,Nucl.Acids Res.(核酸研究)(1984)12,8711-8721),和Guerineau和Mullineaux,(1993)Planttransformation and expression vectors(植物转化和表达载体)中。在PlantMolecular Biology Labfax(Croy RRD ed)Oxford,BIOS Scientific Publishers(BIOS科学出版社),第121-148页。

    当将所选的基因构建体引入到细胞中时,必须考虑某些事项,其是本领域中那些技术人员公知的。待插入的核酸应该在包含应该驱动转录的有效调节元件的构建体内装配。应当存在将构建体运送到细胞中的方法。构建体一旦在细胞膜内,将发生或不将发生整合到内源染色质中。最后,靶细胞类型优选是这样的,即能够将细胞再生到整个植物中。

    本领域中的那些技术人员还应该理解,在制备用于获得按照本发明的基因表达的构建体中,使用增强RHD6基因、RSL基因或其功能同源物表达的构建体或转化方法是理想的。将仅有的单拷贝整合到植物细胞的基因组中可以有益于最小化基因沉默作用。同样地,控制整合的复杂性可以在这方面有益。在这方面特别感兴趣的是利用最少基因表达构建体转化植物细胞,其根据例如,EP专利号EP 1 407 000 B1,为了该目的通过参考将其引入本文中。

    本领域中的技术人员公知的技术可以用于将核酸构建体和载体引入植物细胞,从而产生具有本文中所述特性的转基因植物。土壤杆菌属(Agrobacterium)转化是本领域中技术人员广泛使用的转化木本植物物种,具体的硬木物种诸如白杨的方法。产生稳定可繁殖转基因植物现在在本领域中是常规的:(Toriyama,等(1988)Bio/Technology(生物/技术)6,1072-1074;Zhang,等(1988)Plant Cell Rep.(植物细胞报告)7,379-384;Zhang,等(1988)Theor Appl Genet(应用遗传学理论)76,835-840;Shimamoto,等(1989)Nature(自然)338,274-276;Datta,等(1990)Bio/Technology(生物/技术)8,736-740;Christou,等(1991)Bio/Technology(生物/技术)9,957-962;Peng,等(1991)International RiceResearch Institute(国际稻米研究所),马尼拉,菲律宾563-574;Cao,等(1992)Plant Cell Rep.(植物细胞报告)11,585-591;Li,等(1993)Plant CellRep.(植物细胞报告)12,250-255;Rathore,等.(1993)Plant MolecularBiology(植物分子生物学)21,871-884;Fromm,等(1990)Bio/Technology(生物/技术)8,833-839;Gordon-Kamm,等(1990)Plant Cell(植物细胞)2,603-618;D′Halluin,等(1992)Plant Cell(植物细胞)4,1495-1505;Walters,等.(1992)Plant Molecular Biology(植物分子生物学)18,189-200;Koziel,等(1993)Biotechnology(生物技术)11,194-200;Vasil,I.K.(1994)PlantMolecular Biology(植物分子生物学)25,925-937;Weeks,等(1993)PlantPhysiology(植物生理学)102,1077-1084;Somers,等(1992)Bio/Technology(生物/技术)10,1589-1594;WO92/14828;Nilsson,O.等(1992)Transgenic Research(转基因研究)1,209-220)。

    其他方法,诸如显微注射或颗粒轰击(US 5100792,EP-A-444882,EP-A-434616),电穿孔(EP 290395,WO 8706614),和显微注射(WO92/09696,WO 94/00583,EP 331083,EP 175966,Green等(1987)Plant Tissueand Cell Culture(植物组织和细胞培养),Academic Press(学术出版社)),直接DNA吸收(DE 4005152,WO 9012096,US 4684611),脂质体介导的DNA吸收(例如Freeman等Plant Cell Physiol.(植物细胞生理学)29:1353(1984)),或涡旋法(例如Kindle,PNAS U.S.A.87:1228(199Od))可以是优选的,其中土壤杆菌属转化,例如在一些裸子植物物种中,是效率低或无效的。

    用于转化植物细胞的物理方法在Oard,1991,Biotech.Adv.(生物技术进展)9:1-11中综述。

    备选地,可以使用不同技术的组合提高转化过程,例如使用土壤杆菌属包被的微粒的轰击(EP-A-486234)或微注射轰击诱导损伤及随后使用土壤杆菌属共培养(EP-A-486233)的效率。

    转化后,可以例如由单细胞、胼胝体组织或叶盘(discs)再生植物,如本领域中的标准。几乎任何植物可以完全由植物的细胞、组织和器官再生。可使用的技术综述在Vasil等,Cell Culture and Somatic Cell Genetics ofPlants(植物细胞培养和体细胞遗传学),卷I,II和III,LaboratoryProcedures and Their Applications(实验室程序及其应用),Academic Press(学术出版社),1984,和Weissbach和Weissbach,Methods for PlantMolecular Biology(关于植物分子生物学的方法),Academic Press(学术出版社),1989中。

    转化技术的具体选择应该由其转化某些植物物种的效率以及利用选择的具体方法学实践本发明的人的经验和偏好决定。对技术人员应该清楚的是,具体选择转化系统以将核酸引入植物细胞既不是本发明的必需或限制,也不是植物再生技术的选择。

    本发明的其他方面涉及利用如本文中所述的RHD6相关多肽和核酸对植物根毛发育的调节。

    在植物中调节根毛发育或改变根毛表型的方法可以包括;

    相对于对照植物,增加所述植物细胞内RHD6相关多肽的表达。

    调节植物中根毛发育可以包括增加以下的一种或多种:根毛生长、根毛数量、根毛长度、根毛生长速度、和植物上每根根毛的寿命。

    RHD6相关多肽在上文中更详细记述。

    RHD6相关多肽的表达可以通过任何合适的方法增加。在一些实施方案中,RHD6相关多肽的表达可以通过在所述植物的细胞内表达编码RHD6相关多肽的异源核酸来增加。

    合适的对照对技术人员而言应该是清楚的,且可以包括这样的植物,其中RHD6相关多肽的表达不增加。

    生成具有改变的根毛表型的植物的方法可以包括:

    将改变RHD6相关多肽表达的异源核酸通过转化的方式引入植物细胞,和;

    由一个或多个转化的细胞再生植物。

    合适的RHD6相关多肽在上文中更详细记述。

    在一些实施方案中,所述植物可以是这样的植物,其根天然不被共生真菌,诸如菌根所定居。其根天然不被真菌定居的植物,包括非菌根植物诸如芸苔属植物(Brassicas)。

    用于本文中所述方法的植物优选缺少RHD6相关基因中的突变。例如,所述植物可以是野生型植物。

    如上所述生成的具有改变的根毛表型的植物可以显示出针对营养缺乏生长条件改善的耐受性、植物化学物质(phytochemicals)增加的产生和/或增加的植物除污特性,诸如吸收重金属。

    编码RHD6相关多肽的核酸及其在植物中的表达在上文中更详细记述。

    在其他实施方案中,RHD6相关多肽的表达可以通过增加所述植物的细胞中编码RHD6相关多肽的内源核酸的表达来增加。

    编码RHD6相关多肽的内源核酸在所述植物的细胞中的表达可以通过重组方式,诸如调节因子的靶向插入来增加。

    编码RHD6相关多肽的内源核酸在所述植物的细胞中的表达可以通过非重组方式来增加,例如,RHD6相关多肽在植物中的表达可以通过选择植物育种方法来增加,所述选择植物育种方法使用RHD6相关氨基酸或核酸序列作为分子标记物,从而生成具有改变的根毛表型,例如相对于对照增加的根毛尺寸、数量或寿命的植物。

    生成具有改变的根毛表型的植物的方法可以包括:

    提供植物群,

    确定如本文中所述的RHD6相关多肽在所述群中的一株或多株植物中表达的量,和

    识别所述群中具有相对于所述群中其他成员增加的RHD6相关多肽表达的一株或多株植物。

    识别的植物可以进一步繁殖或,例如与具有增加的RHD6相关多肽表达的其他植物杂交,或自花受粉杂交生成近交系。可以确定RHD6相关多肽在后代植物群中的表达并识别具有减少的RHD6相关多肽表达的一株或多株后代植物。

    RHD6相关多肽在植物中的表达可以通过任何常规方法确定。在一些实施方案中,RHD6相关多肽的表达量可以以蛋白质水平确定。生成具有改变的根毛发育的植物的方法可以包括:

    提供植物群,

    确定RHD6相关多肽在所述群中的一株或多株植物中的量,和

    识别所述群中具有相对于所述群中其他成员增加的RHD6相关多肽的量的一株或多株植物。

    RHD6相关多肽的量可以在植物的一种或多种细胞,优选来自植物的地下部分或组织,诸如根的细胞中确定。

    RHD6相关多肽的量可以利用任何合适的技术确定。常规地,可以使用免疫学技术,诸如Western印迹,其利用结合RHD6相关多肽并对植物中的其他抗原表现出很少或无结合的抗体。例如,植物细胞中的RHD6相关多肽的量可以通过使包含所述植物细胞的样品与针对RHD6相关多肽的抗体或其他特异性结合成员相接触,和确定RHD6相关多肽与所述样品的结合来确定。特异性结合成员的结合量指示在细胞中表达的RHD6相关多肽的量。

    在其他实施方案中,RHD6相关多肽的表达可以以核酸水平确定。例如,可以确定编码RHD6相关多肽的核酸的量。生成具有改变的根毛发育的植物的方法可以包括:

    提供植物群,

    确定所述群中的一株或多株植物的细胞中编码RHD6相关多肽的核酸,例如mRNA的水平或量,和

    识别所述群中具有相对于所述群中其他成员增加的编码RHD6相关多肽的核酸量的一株或多株植物。

    编码核酸在植物细胞中的水平或量可以例如通过检测细胞中转录的编码核酸的量来确定。本领域中存在许多用于确定植物细胞中编码RHD6相关多肽的核酸量的合适方法,包括,例如,Northern印迹或RT-PCR(参见例如Molecular Cloning:a Laboratory Manual:3rd edition(分子克隆:实验室手册:第3版),Sambrook & Russell(2001)Cold Spring Harbor LaboratoryPress(冷泉港实验室出版社)NY;Current Protocols in Molecular Biology(当前分子生物学流程),Ausubel等编.John Wiley & Sons(1992);DNACloning,The Practical Approach Series(DNA克隆,实践方法丛书)(1995),series eds(丛书版).D.Rickwood和B.D.Hames,IRL Press(IRL出版社),牛津,英国和PCR Protocols:A Guide to Methods and Applications(PCR流程:方法和应用指导)(Innis,等1990.Academic Press(学术出版社),圣地亚哥,加利福尼亚州)。

    合适的细胞可以来自植物的地下部分或组织,诸如根。

    被识别为具有增加的RHD6相关多肽表达的后代植物可以相对于对照测试其改变的根毛发育,例如,增加的根毛生长、数量或寿命,或可以测试其它特性,诸如对营养缺乏条件增加的耐受性,增加的植物化学物质产生,增加的植物除污特性或组成型低磷酸盐响应。

    生成具有改变的根毛表型的植物的方法可以包括:

    使第一和第二植物杂交,以产生后代植物群;

    确定所述群中植物后代中的RHD6相关多肽的表达,和;

    在所述群中识别其中RHD6相关多肽表达相对于对照增加的后代植物。

    具有改变的根毛表型的后代植物可以表现出相对于对照(例如,具有野生型表型的群的其他成员)增加的根毛生长、数量或寿命。

    识别的后代植物可以进一步繁殖或,例如与所述第一或第二植物杂交(即回交)或自花受粉杂交,以生成近交系。

    可以相对于对照,测试识别的后代植物针对营养缺乏条件增加的耐受性。

    本发明的其他方面提供如本文中所述的RHD6相关多肽或编码核酸作为标记物选择育种相对于对照植物具有改变的根毛表型的植物的用途,和选择育种相对于对照植物具有改变的根毛表型的植物的方法,其使用RHD6相关氨基酸和编码核酸序列。

    在一些实施方案中,具有减少的RHD6相关多肽表达的植物可以通过随机诱变,随后筛选突变体以获得减少的RHD6相关多肽表达来生成。合适的技术是本领域中公知的且包括基因组中靶诱导局部病灶(TargetingInduced Local Lesions IN Genomes(TILLING))。TILLING是高通量筛选技术,其导致系统性识别特定靶基因中的非GMO来源突变(Comai和Henikoff,The Plant Journal(植物杂志)(2006)45,684-694 Till等_BMCPlant Biol.(BMC植物生物学)2007年4月7日,19。

    本领域中技术人员还应该理解,基于本文中公开的遗传信息,可以进行基因组中靶诱导局部病灶(“TILLING”,例如,利用基于PCR筛选通过化学诱变(通常通过甲磺酸乙酯(EMS)处理)产生的植物,通常导致靶基因的错义和无义突变等位基因的分离;TILLING允许在不产生遗传学修饰生物体的条件下高通量识别靶基因中的突变,且其可以是识别可能不通过其自身赋予强表型的特定基因中的突变的有效途径),以生成在RHD6或RSL基因中具有变化的植物和其后代,由此允许识别具有与植物根毛产生有关的特定表型的植物。

    生成具有改变的根毛表型的植物的方法可以包括:

    使植物群暴露于诱变剂,

    确定所述群中一株或多株植物中RHD6相关多肽或核酸的表达,和

    识别具有相对于所述群中其他成员增加的RHD6相关多肽表达的植物。

    合适的诱变剂包括甲磺酸乙酯(EMS)。

    用于确定在植物中的RHD6相关多肽或核酸表达的方法在上文中更详细记述。

    可以相对于对照,进一步测试识别的植物,以获得针对低营养条件增加的耐受性或抗性,增加的植物化学物质的产生或增加的植物除污。

    被识别为具有相对于对照(例如所述群的其他成员)增加的RHD6相关多肽表达的植物可以表现出相对于对照增加的根毛生长、数量或寿命。

    如上所述生成或识别的植物可以有性或无性繁殖或生长,以生成后代(off-spring)或后裔。由一种或多种细胞再生的植物的后代(off-spring)或后裔可以有性或无性繁殖或生长。所述植物或其后代(off-spring)或后裔可以与其他植物或其本身杂交。

    RHD6相关基因诸如RSL4的表达显示在本文中,以生成其中根毛表现出真菌样形态的表型。该形态的特征在于类似真菌样菌落的生长细胞的大量不确定团块(图10)并导致极大增大的根毛表面积。该表型可以赋予显著增强的根吸收磷酸盐和铁,这主要受根毛长度和表面积的限制。

    通过本文中所述基因在植物中的表达,植物可以被制备为表现出对否则较低效率吸收的营养增强的吸收。因此,例如,本领域中已知,从土壤吸收磷酸盐和铁主要通过植物根毛完成。通过表达、过表达、或靶向错表达(在否则可能不生成根毛的细胞中表达)RHD6相关基因,提高植物根毛的数量、长度、生成时间或存活期间,铁或磷酸盐或二者,以及其他营养的吸收可以得到增强。特别地,吸收可以通过真菌样根毛形态增加,所述真菌样根毛形态通过过表达RHD6相关基因诸如AtRSL4产生(见图10)。因此,在该文献中显示,rhd6突变体在其吸收磷酸盐的能力上受到损害,见Plant Growth and Phosphorus Accumulation of Wild Type and TwoRoot Hair Mutants of Arabidopsis thaliana(Brassicaceae)(拟南芥(芸苔)的野生型和两种根毛突变体的植物生长和磷累积)″,Terence R.Bates和Jonathan P.Lynch,American Journal of Botany(美国植物学杂志)87(7):958-963.2000。该作用可以通过增补本文中所述的功能性基因而逆转。本发明的方面应该,例如,在含有低铁或低磷酸盐的土壤,诸如中国、黑非洲(sub-Saharan Africa)和澳大利亚中存在的土壤中特别有益。

    改善植物针对营养缺乏条件的耐受性或抗性的方法可以包括;

    相对于对照植物增加所述植物的细胞内RHD6相关多肽的表达。

    营养缺乏条件包括包含一种或多种营养诸如硝酸盐、磷酸盐和/或铁水平的条件,其不足以满足野生型植物的营养需要。经历营养缺乏条件的野生型植物可以采用营养缺乏表型,诸如减少的生长导致极大降低的产量和农作物品质。

    例如,相对于对照植物(即其中RHD6相关多肽表达不改变的植物),所述植物可以在含有低水平的一种或多种营养诸如硝酸盐、磷酸盐和/或铁的土壤中表现出改进的生长。

    此外,磷酸盐的缺乏增加RHD6相关多肽诸如AtRHD6和AtRSL1在植物根表皮中的表达。RHD6相关多肽在根表皮中的表达可以因此有效用于在植物中产生组成型“低磷酸盐”响应。

    本文中所述的基因可以用于实现提高生成目的化合物,包括医学有关化合物。因此,例如,已知植物根毛是生成抗生素化合物的原因。在自然界中,这些化合物通过植物的根和尤其是植物根毛分泌,从而改变或否则控制植物根周围的微生物区系和微动物区系。这些植物化学物质的产生在这样的植物中增强,在所述植物中根毛发育和生长的数量、长度、产生期间、产生时间和其他特征可以按照本发明的方法改变。

    增加根分泌植物化学物质在植物中的生成或分泌的方法包括;

    增加通过其根分泌植物化学物质的植物的细胞中RHD6相关多肽的表达。

    根分泌的植物化学物质包括可以由紫草(Lithospermum erythrorhizon)产生的紫草宁(Brigham LA,等Plant Physiol.(植物生理学)1999年2月;119(2):417-28),和可以由紫杉属物种(Taxus spp)产生的紫杉醇。

    重金属是重要的环境污染并可以通过在污染的土壤上生长植物去除。在植物除污或植物吸取中,植物由土壤中吸收污染物质诸如重金属,并且植物在成熟时收获,由此从这些区域除去这些污染物。由增加RHD6相关多肽表达赋予的长根毛表型可以提高植物物种的植物除污特性。

    减少土壤中污染物质的量的方法包括;

    增加植物细胞内RHD6相关多肽的表达,所述植物通过其根吸收污染物质,

    在包含污染物质的土壤中生长所述植物或其后代,从而使得所述植物或后代从土壤中吸收污染物质,和

    收获所述植物或其后代。

    污染物质包括铀、多氯联苯、盐、砷和重金属诸如镉、锌和铅。

    适合用于本方法的植物优选是高等植物,例如,选自由以下各项组成的组的农业植物:其选自由紫草(Lithospermum erythrorhizon)、红豆杉属(Taxus)物种、烟草属(tobacco)、葫芦(cucurbits)、胡萝卜(carrot)、蔬菜芸苔属(vegetable brassica)、瓜(melons)、辣椒属(capsicums)、葡萄藤(grapevines)、莴苣属(lettuce)、草莓属(strawberry)、芸苔属油料作物(oilseedbrassica)、甜菜(sugar beet)、小麦属(wheat)、大麦属(barley)、玉蜀黍属(maize)、稻属(rice)、大豆属(soyabeans)、豌豆属(peas)、蜀黍属(sorghum)、向日葵属(sunflower)、番茄属(tomato)、马铃薯(potato)、胡椒属(pepper)、茼蒿属(chrysanthemum)、麝香石竹(carnation)、亚麻籽(linseed)、大麻属(hemp)和黑麦属(rye)组成的组。

    在涉及植物化学物质生成的实施方案中,紫草和紫杉属物种可以是优选的。

    在涉及植物除污的实施方案中,向日葵(Helianthus annuus),中国凤尾蕨(Chinese Brake fern),阿尔卑斯菥蓂(alpine pennycress)(天蓝遏蓝菜(Thlaspi caerulescens)),印度芥末(芥菜(Brassica juncea)),豚草(Ambrosia artemisiifolia)白麻(加拿大麻(Apocymun cannabinum))和白杨可以是优选的。

    本发明的另一方面提供通过本文中所述方法生成的植物,其中所述植物相对于对照表现出改变的根毛表型。

    例如,植物可以表现出相对于对照(例如,具有野生型表型的群中的其他成员)增加的根毛生长、数量或寿命。

    植物可以表现出针对营养缺乏条件增加的耐受性和/或增加的根分泌植物化学物质的产生。

    还提供所述植物的任何部分或繁殖体,例如,种子,自花受粉或杂交的后代和后裔。

    按照本发明的植物可以是在一种或多种特性中不正确繁殖(breed true)的植物。可以排除植物变体,特别是按照植物育种者权利可登记的植物变体。

    除通过本文中所述方法生成的植物外,本发明包括所述植物、种子、自花授粉或杂交后代和后裔的任何克隆,和这些中任一项的任何部分或繁殖体,诸如插枝和种子,其可以用于再生或繁殖,无性或有性。本发明还包括所述植物的有性或无性繁殖的后代、克隆或后裔,或所述植物、后代、克隆或后裔的任何部分或繁殖体。

    虽然前述公开内容提供本发明范围内包括的主题,包括制备和使用本发明的方法,以及其最佳模式的一般描述,提供以下实施例进一步容许本领域中技术人员实践本发明并提供其完整书面描述。然而,本领域中的技术人员应该理解,这些实施例的具体性不应该被解读为对本发明的限制,本发明的范围应该由本说明书所附的权利要求书及其等效物来理解。由本公开内容,本发明的多种其他方面和实施方案应该对本领域中技术人员非常清楚。

    本说明书中提及的所有文献通过参考作为整体引入本文。

    “和/或”在用于本文中时,意欲解释为两种特定要素或成分中的每一种具有或不具有其中另一种的具体公开。例如,“A和/或B”意欲解释为(i)A,(ii)B和(iii)A和B每一种的具体公开,正如同在本文中分别陈述每种。

    除非上下文另外指明,以上所述要素的说明和定义不局限于本发明的任何具体方面或实施方案,且同等地应用于所述的所有方面和实施方案。

    现将通过实施例和参考以上所述附图和以上所述的表,例证本发明的某些方面和实施方案。

    表1和2显示由ClustalW(http://www.ebi.ac.uk)产生的bHLH氨基酸序列(Heim等Mol.Biol.Evol.(分子生物进化)2003)的序列比对。

    表3显示通过DNA Strider(Christain Mark,Center.d′Etudes de Saclay)确定的RHD6相关蛋白的%同一性。

    表4显示RHD6相关蛋白的bHLH结构域与RHD6的相对同一性。

    表5显示图3树图上名称之间的相关性和表1和2与各自物种和基因座或GI编号的比对。

    实施例

    根毛是高度极化的细胞,其增加植物与土壤接触的表面积。它们在那些具有根的陆生植物中起重要的营养获得和固着作用1,2。其他顶端生长细胞诸如假根和茎原丝细胞在缺少根的更基础陆生植物组中具有类似的功能3,4。于此,我们识别和表征两种基本螺旋环螺旋转录因子,其控制拟南芥孢子体中根毛细胞的发育,并显示它们在小立碗藓(Physcomitrellapatens)的最接近同源物是在该苔藓的配子体中发育假根和茎原丝细胞二者所必需的。这说明古老机制控制功能性和形态学类似但非同源细胞类型在这些趋异陆生植物组中的发育。这提示陆生植物体经过超过475,000,000年的进化5,6至少部分地由配子体到孢子体的独立基因募集引起。

    除非另外指出,标准技术如下:

    RT-PCR

    用Superscript第一链合成系统(Invitrogen,Carlsbad,美国),在20μl含有寡d(T)12-18引物的反应物中反转录总RNA(关于拟南芥5μg和关于小立碗藓1μg)。将1μg该产物用于在本文中所述的含有引物的20μl反应物中进行PCR。

    花粉生长实验

    如前所述进行体内和体外花粉管生长实验(44,45)。

    插入物的Southern分析

    按照制造商的流程,使用DIG系统对DNA探针(Roche Diagnostics(罗氏诊断),Penzberg,德国)的PCR标记进行Southern印迹。杂交在DIG EasyHyb杂交缓冲液中,在42℃进行。

    拟南芥生长条件

    拟南芥(L.)Heyn.品系在连续照射下,24℃,在用0.5%Phytagel固化的MS培养基+2%蔗糖上垂直生长4天。为了赛璐玢膜实验,在应用种子前,用赛璐玢膜(AA包装,Preston,英国)覆盖琼脂。

    增强子捕获和克隆AtRHD6基因

    Atrhd6-2是用DsE元件18产生的拟南芥的增强子捕获品系(1261)(生态型Lansberg erecta),其被筛选以获得根无毛表型和在毛细胞中的报告基因表达。未能补偿Atrhd6-17说明品系1261携带与Atrhd6-1等位的突变。侧邻DsE元件插入的DNA序列通过反向PCR识别19。1261品系的基因组DNA由Sau3A I消化并随后用T4DNA连接酶连接。连接的DNA用于使用Ds元件特异性引物的PCR。这显示DsE在Atlg66470基因的ATG位点上游111bp处插入(图7)。

    GUS染色拟南芥根和包埋

    4日龄幼苗在37℃,1mM 5-溴-4-氯-3-吲哚基-葡糖苷酸,0.5mM氰铁酸钾,0.5mM氰亚铁酸钾,和10mM磷酸钠缓冲液(pH 7)中染色12小时。按照制造商的说明将幼苗包埋在Technovit树脂(Kulzer GmbH,德国)中并由根获得10μm横切面。

    识别拟南芥突变体和生成转基因植物

    在该工作中使用的突变体中确认T-DNA插入位点(图7)通过测序使用本文中所述引物扩增的PCR片段进行。Atrhd6-3(生态型哥伦比亚(Columbia)0)对应于GABI-Kat品系475E09(10)。对应于品系WiscDsLox356A02的Atrsl1-1(生态型哥伦比亚0)来自威斯康星大学生物技术中心(Biotechnology centre of the University of Wisconsin),先前描述了cpc,wer,ttg1和g12突变体(32-35)。

    基因组构建体AtRHD6p::GFP:AtRHD6和AtRSL1p::GFP:AtRSL1包含启动子和GFP编码序列的AtRHD6或AtRSL1上游的5′UTR,所述GFP编码序列融合在AtRHD6或AtRSL1编码区的N端,所述AtRHD6或AtRSL1编码区包括内含子和具有终止子的AtRHD6或AtRSL13′UTR。这些构建体利用Gateway系统(Invitrogen,Carlsbad,美国)生成。AtRHD6或AtRSL1启动子+5′UTR和AtRHD6或AtRSL1编码区+3′UTR+终止子利用包含重组序列的PCR引物扩增并克隆到pDONR P4-P1R和pDONRP2R-P3中。然后利用两种由此产生的pDONR质粒,质粒p207-GFP2.5和二元载体pGWBmultisite(目的载体)进行GATEWAY多位点反应。二元载体pGWBmultisite通过将pGWB1的R1-CmR-ccdB-R2盒替换到R4-CmR-ccdB-R3中产生(pGWB1来自Tsuyoshi Nakagawa,Shimane大学,日本)。AtRHD6p::GFP:AtRHD6和AtRSL1p::GFP:AtRSL1通过花浸泡(36)分别转化到Atrhd6-3中和Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体中,并在卡那霉素(50μg/ml)和潮霉素(50μl/ml)上选择转化株。获得9种在Atrhd6-3背景中包含AtRHD6p::GFP:AtRHD6构建体的独立转基因品系。它们表现出AtRhd6-无毛表型的不同水平的补偿,但是所有品系在出现根毛前在毛细胞中表达GFP。针对Atrhd6Atrsl1中的AtRSL1p::GFP:AtRSL1转化株,获得5种具有相同GFP表达模式并恢复Atrhd6-3表型的独立品系。

    对于p35S::PpRSL1构建体,PpRSL1编码序列由原丝体cDNA开始扩增。该片段被克隆在修饰的pCAMBIA1300质粒的BamHI和SalI位点之间,所述修饰的pCAMBIA1300质粒包含CaMV 35S启动子和豌豆Rubisco小亚单E9的终止子,所述豌豆Rubisco小亚单E9来自克隆到其EcoRI和PstI位点中的35S-pCAMBIA1301(37)。p35S::PpRSL1构建体通过在Atrhd6-3中花浸泡转化并在潮霉素(50μg/ml)上选择转化株。获得10种补充Atrhd6-3无毛表型的独立转基因品系。

    Physcomitrella基因分离和系统发育分析

    PhyscomitrellaRSLs和PpIND1基因组序列在从可获得的基因组序列的BLAST获得时,装配到重叠群中(http://moss.nibb.ac.jp/)。使用NetPlantGene20预期剪接位点并通过RTPCR和测序验证bHLH编码序列。PpRSL1的全长编码序列通过测序EST克隆pdp31414获得,其由RIKEN BioResourceCenter(RIKEN生物资源中心)提供21,且PpRSL2的全长编码序列通过RT-PCR获得。序列如下保藏在GenBank中:PpRSL1(EF156393),PpRSL2(EF156394),PpRSL3(EF156395),PpRSL4(EF156396),PpRSL5(EF156397)PpRSL6(EF156398),PpRSL7(EF156399)和PpIND1(EF156400)。系统发育分析如前所述利用PAUP*软件进行22。

    Physcomitrella生长条件

    在本研究中使用小立碗藓(Hedw.)的Gransden野生型品系Bruch和Schimp 23。培养物在25℃生长,并用16h光亮/8h黑暗的光照方案和40μEm-2s-1量子辐照度照射。为了分析原丝体表型,使在4℃保持至少1个月的孢子在涂布在9cm Petri皿中的5ml顶层琼脂(0.8%)中发芽,其中包含25ml用赛璐玢膜(AA包装,Preston,英国)覆盖的0.8%琼脂。叶状配子孢子在增补了5mg/L NH4酒石酸盐和50mg/L葡萄糖的100倍稀释的基本培养基24中生长。

    构建Physcomitrella基因中的突变体

    用于Physcomitrella转化的构建体在质粒pBNRF和pBHSNR中制备。pBNRF携带由克隆在pBilox,即携带克隆在XhoI-KpnI和BglII-SpeI位点中的loxP位点的2个直接重复的pMCS5(MoBiTec,Goettingen,德国)的衍生物的EcoRI位点中的35S启动子驱动的NptII基因。pBHSNR包含由使用SacI和NotI克隆在pBilox的2个loxP位点之间的35S启动子驱动的AphIV基因。pPpRSL1-KO通过以下步骤制备:在被XbaI和XhoI消化的pBNRF中克隆PpRSL1基因组片段1和然后在被HpaI和AscI消化的由此产生的质粒中克隆PpRSL1基因组片段2。pPpRSL2-KO通过以下步骤制备:在被MluI和SpeI消化的pBHSNR中克隆PpRSL2基因组片段1和然后在被BamHI和HindIII消化的由此产生的质粒中克隆PpRSL2基因组片段2。

    原生质体的PEG转化

    原生质体的PEG转化如先前所述进行25。在原生质体转化前使用ScaI和SspI线性化pPpRSL1-KO并在G418(50μl/ml)上选择转化株。在原生质体转化前使用BclI和SspI线性化pPpRSL2-KO并在潮霉素B(25μl/ml)上选择转化株。Pprsl1 Pprsl2双突变体通过用pPpRSL2-KO构建体转化Pprsl1品系1获得。稳定的转化株首先通过使用侧邻重组位点的引物的PCR进行选择并然后通过Southern印迹和RT-PCR进行分析。对于各种转化,选择三个具有预期的单插入模式且是RNA无效突变体的独立品系(图9)。在每种情形中,选择的3个转化株具有相同的表型。

    过表达RHD6或RSL基因的植物

    对于35S::RHD6和RSL2,3,和4构建体,使用如下列出的引物,由根cDNA扩增各种基因的编码序列。将该片段亚克隆到修饰的pCAMBIA1300质粒中,所述修饰的pCAMBIA1300质粒含有CaMV 35S启动子和豌豆Rubisco小亚单E9的终止子。所有这些过表达构建体均通过在rhd6/rsl1中花浸泡转化,并在潮霉素(50μl/ml)上选择转化株。

    35S::RHD6

    CCAGGATCCATGGCACTCGTTAATGACCAT

    CCAGTCGACTTAATTGGTGATCAGATTCGAA

    35S::RSL2

    CCAGGATCCATGGGAGAATGGAGCAACAA

    CCAGTCGACTCATCTCGGTGAGCTGAGA

    35S::RSL3

    CGGGGTACC ATGGAAGCCATGGGAGAAT

    CGCGGATCC TCATCTGGTCAGTGCATTGAG

    35S::RSL4

    CGGGGTACCATGGACGTTTTTGTTGATGGT

    CGCGGATCCTCACATAAGCCGAGACAAAAG

    结果

    拟南芥根表皮以交替的生成顶端生长突起(根毛)的毛形成细胞(H细胞)行和保持无毛的非毛细胞(N细胞)行排列。AtRHD6(根毛缺陷6)阳性调节H细胞的发育-Atrhd6突变体发育很少的根毛(图1a)7。

    我们使用增强子捕获品系(Atrhd6-2)克隆AtRHD6,其中GUS报告基因在H细胞而非N细胞中表达(图1c,d,图7)。AtRHD6编码基本-螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子At1g664708。另一种具有类似表型的独立等位基因(Atrhd6-3)的识别和用完整基因AtRHD6p::GFP:AtRHD6融合补偿Atrhd6-3突变证实在该突变体中观察到的根毛发育缺陷归因于At1g66470的突变(图1a)。该补偿性AtRHD6p::GFP:AtRHD6融合说明AtRHD6蛋白在分裂组织和伸长区中的H细胞核内累积(图1b),但在出现根毛前消失。拟南芥根表皮中的N细胞和H细胞的空间模式受到转录网络,包括H细胞同一性阳性调节子CPC和H细胞同一性阴性调节子WER,TTG和GL2的控制9。

    为了确定AtRHD6是否受到这些基因的调节,我们分析了不同突变背景中Atrhd6-2增强子捕获的启动子活性。虽然Atrhd6-2增强子捕获在H位置中的细胞内表达GUS,但是该表达散布到wer,ttg和gl2突变背景中的N位置中的细胞,这说明WER,TTG和GL2阴性调节N位置中的AtRHD6转录(图1d)。在cpc突变体中没有观察到表达,这说明CPC阳性调节AtRHD6表达(图1d)。因此,AtRHD6控制根毛细胞发育并在参与表皮模式形成的基因下游起作用。

    AtRHD6是bHLH转录因子亚家族VIIIc的成员,所述亚家族包括5种其他成员8,10。这些基因之一,即At5g37800,今后称为RHD6样1(AtRSL1),非常类似于AtRHD6,并且这些两种基因可以源自相对近期的复制事件8。这提供这样的指示,即AtRHD6和AtRSL1可以具有冗余的功能。为了确定AtRSL1是否也是根毛发育所需的,我们识别了携带AtRSL1基因完全失功能突变的品系(Atrsl1-1)并构建Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体(图7)。

    因为当这些突变体在我们的标准生长条件中生长时没有观察到新的表型,所以我们在赛璐玢膜表面上生长它们,其中在Atrhd6-3单突变体中发育小量根毛(图2a)。Atrsl1-1突变的纯合植物在赛璐玢膜上生长时,具有野生型根毛形态(图2a)。然而,Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体没有发育根毛,这说明AtRHD6和AtRSL1在根毛发育中具有部分冗余的功能(图2a)。携带基因组构建体AtRSL1p::GFP:AtRSL1的Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体植物表现出AtRhd6突变体表型,这证实Atrhd6-3 Atrsl1-1双突变体的极端无毛表型是AtRHD6和AtRSL1基因二者失功能的结果(图2a)。补偿性GFP:AtRSL1融合蛋白在分裂组织和伸长区中的毛细胞核内累积,这说明AtRHD6和AtRSL1具有相似的表达模式(图2b)。这些数据说明AtRHD6和AtRSL1一起起阳性调节根毛发育的作用。

    为了确定AtRHD6和AtRSLl是否是开花植物中唯一其他顶端生长细胞,即花粉管发育所需要的,我们体外和体内表征了Atrhd6-3,Atrsl1-1和Atrhd6-3 Atrsl1-1突变体中的花粉管表型。我们既未在花粉管生长中检测到缺陷也未在与野生型回交的F2代中的突变等位基因分离中检测到缺陷(图8)。在Atrhd6-3,Atrsl1-1或Atrhd6-3 Atrsl1-1突变体中任何其他部分中未检测到其他缺陷性表型。

    总之,这些数据说明AtRHD6和AtRSL1是bHLH转录因子,其是根毛发育特别需要的,且在调节开花植物拟南芥中表皮模式形成的基因下游起作用。

    最祖先级的陆生植物是苔藓类植物-来自中奥陶纪约475Ma的最早的陆生植物微化石具有苔藓类植物特征6。苔藓类植物不具有根但具有顶端生长细胞,其在形态学上类似于根毛并满足根固定(rooting)功能。在苔藓中,茎原丝细胞增加与基层相接触的丝状原丝体组织的表面积,且假根使叶状配子孢子锚定它们的生长基层3,4并假设这两种细胞类型参与营养的获得3。然而,假根和茎原丝由苔藓的配子体开始发育,而根毛由现代维管植物的孢子体开始发育。因此,根据当前的观点,即陆生植物通过由单倍体藻类祖先开始插入孢子体世代及随后与减少配子体并行地递增孢子体的尺寸和复杂性来进化11,12,假根或茎原丝均不与根毛同源。

    为了确定控制被子植物中根毛发育的发育机制是否也控制苔藓植物中与根固定功能非同源的顶端生长细胞的发育,我们识别了来自苔藓小立碗藓的RHD6样基因。我们从可公开获得的Physcomitrella基因组序列(http://moss.nibb.ac.jp/)中识别了bHLH基因AtRHD6亚家族的7个成员,这提供这样的指示,即这些基因在陆生植物进化中是保守的。将这些命名为小立碗藓RHD6样1-7(PpRSL1-PpRSL7)。为了分析Physcomitrella和拟南芥RSL基因之间的关系,我们通过最大简约性构建系统发育树图。严格共同树显示在图3中。这显示AtRHD6,AtRSL1和两种PhyscomitrellaPpRSL1和PpRSL2基因紧密相关并共同形成单源进化枝(AtRHD6进化枝),所述单源进化枝(AtRHD6进化枝)是包括该亚家族所有其他成员的进化枝的姐妹枝(姐妹进化枝)(图3)。这说明AtRHD6进化枝在苔藓植物和维管植物由共同祖先分开前进化。

    为了表征苔藓中RHD6样基因的功能,我们构建了缺少PpRSL1和PpRSL2基因功能的缺失突变体,并确定它们是否发育形态学缺陷。制备了三种在PpRSL1中和在PpRSL2基因中具有单插入的独立RNA无效突变体。还生成在这两个基因中具有单插入的双突变体(图9)。然后分析这些突变体中每一种的表型。单倍体原丝体在野生型Physcomitrella孢子3发芽基础上是发育。这种丝状组织包括两种细胞类型,即chloronema和茎原丝(图4a,b)。Chloronemal细胞含有大叶绿体并通过缓慢顶端生长机制生长。茎原丝细胞更加伸长,含有少量较小的叶绿体,通过快速顶端生长而生长并参与基层的集群。叶状配子孢子通常由茎原丝开始发育并通过顶端生长多细胞假根锚定它们的基层,所述假根在形态学上类似于茎原丝(图4c)。Pprsl1和Pprsl2单突变体具有比WT稍微更小和更绿的原丝体培养物,且该表型在产生少深绿原丝体的Pprsl1 Pprsl2双突变体中更加强烈得多(图4a)。Pprsl1和Pprsl2单突变体比WT产生更少茎原丝细胞,这说明更绿的原丝体表型是茎原丝细胞发育缺陷的结果(图4b)。在Pprsl1Pprsl2双突变体中没有茎原丝细胞发育,且该突变体的原丝体仅包括chloronemal细胞(图4b)。在野生型植物中,配子孢子由茎原丝开始发育,但是在Pprsl1 Pprsl2双突变体中,配子孢子由chloronema开始发育,如以前在另一种茎原丝缺陷性突变体中观察到的13。Pprsl1 Pprsl2双突变体的配子孢子发育少量非常短的假根(图4c)。在chloronema中,在配子孢子的叶状部分中或在单或双突变体的孢子体中没有检测到其他缺陷性表型。这说明PpRSL1和PpRSL2共同调节苔藓配子体中茎原丝细胞和假根的发育。为了确定蛋白质功能在陆生植物间是否保守,我们进行了交叉物种补偿实验。PpRSL1在Atrhd6-3突变体中CaMV35S启动子作用下表达导致形成野生型根毛(图4d)。因此,苔藓PpRSL1基因可以替代拟南芥中AtRHD6功能失去。这说明PpRSL1和AtRHD6的分子功能从种子植物和苔藓由共同的祖先分开起是保守的,并提示相同的分子机制控制拟南芥根毛和Physcomitrella茎原丝和假根的发育。

    利用组成型启动子,将植物改造为过表达RHD6或RSL基因,如上所述。这些转化株的表型描述如下。

    35S::RHD6

    rhd6/rsl1的根毛表型缺陷可以通过过表达RHD6拯救。转化株获得比col-0更长的根毛和更高的异位根毛(在非毛细胞上发育的根毛)百分比。在下胚轴上可以观察到少量根毛。

    磷酸盐缺乏改变AtRHD6和AtRSL1基因表达。当在存在足量磷酸盐的条件下生长时,这些基因在分裂组织和伸长区内表达,并且毛形成区域内的转录受到下调。当在磷酸盐限制的条件下生长时,AtRHD6和AtRSL1在根毛形成区表达,在该区域中它们阳性调节根毛的发育。这显示磷酸盐缺乏促进表达。因此,在根表皮中表达高水平AtRSL1和AtRHD6导致组成型“低磷酸盐”响应。

    35S::RSL2和35S::RSL3

    具有35S::RSL2或35S::RSL3构建体的rhd6/rsl1也发育一些根毛。该根毛比col-0更长。一些转基因品系在根和下胚轴上显示出肿胀的表皮细胞。在下胚轴上也存在一些根毛。

    在野生型植物中利用CaMV35S启动子过表达AtRSL2和AtRSL3导致长根毛的发育。这些毛不如在过表达AtRSL4形成真菌样菌落的那些长。过表达AtRSL2和AtRSL3的植物发育矮小表型。这可能归因于在非根毛细胞中的表达。

    35S::RSL4

    rhd6/rsl1的根毛表型缺陷还可以部分地通过引入RSL4的过表达来补偿。转化株显示出比col-0更长的根毛。在下胚轴也检测到少量根毛,这与RHD6过表达转化株非常类似。

    在野生型植物中利用CaMV35S启动子过表达AtRSL4,导致形成长根毛,其可以形成与真菌样菌落类似的细胞的大量不确定生长团块(图10)。过表达RSL4的植物的根毛系统显示在图10中。该根被真菌样细胞团块包围,这类似于菌根,即与根形成连接的营养清除真菌。此外,当RSL4通过35S启动子表达时,发现该表型效果(长根毛)局限于根毛细胞。在植物的其他处没有观察到由RSL4表达产生的缺陷性表型。

    过表达RHD6相关基因的植物可以因此具有增加的营养吸收能力,因为它们由提高的根毛生长引起的增加的表面积。该作用在植物,诸如芸苔中可以是显著的,所述芸苔在贯穿其整个生命周期中缺乏菌根。

    在此,我们显示出控制种子植物孢子体和苔藓植物配子体中具有根固定功能的顶端生长细胞发育的转录因子是多么紧密地相关。这些数据说明我们已经确定了苔藓和维管植物(导管植物)的共同祖先中存在的古老的发育机制。这些基因在需要营养获得和锚定大陆表面固体基层时,对植物入侵陆地一直很重要。这样的观察,即在一些最古老的陆生植物大化石上发现假根,与该观点相一致14-16。

    我们的结果提供这样的指示,即RHD6样基因在早期陆生植物生命周期,其可以是苔藓植物样14,的单倍体世代(配子体)中起作用,其中它们用根固定功能控制细胞的形成。我们提议在随后照射陆生植物过程中,这些基因在脉管植物的双倍体世代(孢子体)的发育中展开(deploy),其中它们控制被子植物中根毛的发育,且我们预期它们控制lycophytes(石松和allies)和monilophytes(蕨类和马尾)中根毛和假根的发育。可能地,由生命周期的单倍体到双倍体阶段独立募集基因是造成绿色植物集落在星球的陆地表面的中古生代中出现的生命周期(孢子体)双倍体阶段形态多样性爆发的部分原因17。

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    AtRHD6     TSPKDPQSLAAKNRRERISERLKILQELVPNGTKVDLVTMLEKAISYVKFLQVQVKVLATDEFWPAQ  67

    AtRSL1     TSPKDPQSLAAKNRRERISERLKVLQELVPNGTKVDLVTMLEKAIGYVKFLQVQVKVLAADEFWPAQ  67

    PpRSL1     GSANDPQSIAARVRRERISERLKVLQALIPNGDKVDMVTMLEKAISYVQCLEFQIKMLKNDSLWPKA  67

    PpRSL2     GSANDPQSIAARVRRERISERLKVLQALIPNGDKVDMVTMLEKAITYVQCLELQIKMLKNDSIWPKA  67

    PpRSL5     GSATDPQSVYARHRREKINERLKSLQNLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVKFLQNQVELLKSDELWIYA  67

    PpRSL6     GSATDPQSVYARHRREKINERLKNLQNLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVKFLQTQVELLKSDEFWMFA  67

    PpRSL3     GSATDPQSVYARHRREKINERLKTLQHLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVQFLQLQVTLLKSDEYWMYA  67

    PpRSL4     GSATDPQSVHARARREKIAERLRKLQHLIPNGGKVDIVTMLDEAVHYVQFLKRQVTLLKSDEYWMYA  67

    PpRSL7     GSATDPQSVYARHRREKINERLKTLQRLVPNGEQVDIVTMLEEAIHFVKFLEFQLELLRSDDRWMFA  67

    At4g33880  GAATDPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGTKVDISTMLEEAVHYVKFLQLQIKLLSSDDLWMYA  67

    At2g14760  GAATDPQSLYARKRRERINERLRILQHLVPNGTKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSDDLWMYA  67

    At1g27740  GTATDPQSLYARKRREKINERLKTLQNLVPNGTKVDISTMLEEAVHYVKFLQLQIKLLSSDDLWMYA  67

    At5g43175  GIASDPQSLYARKRRERINDRLKTLQSLVPNGTKVDISTMLEDAVHYVKFLQLQIKLLSSEDLWMYA  67

    AtIND      RISDDPQTVVARRRRERISEKIRILKRIVPGGAKMDTASMLDEAIRYTKFLKRQVRILQPHSQIGAP  67

    PpIND1     RISKDPQSVAARHRRERISDRIRVLQRLVPGGTKMDTASMLDEAIHYVKFLKLQLQVCDTCNLVPVD  67

                . ***::*:***:*::::*:::*.*::*:**:.*::.:*:*::  .

    表1

    表2

    表3

      蛋白  序列同一性  AtRHD6  蛋白  序列同一性  AtRHD6  AtRHD6  1  PpRSL1  0.625  AtRSL1  0.93  PpRSL2  0.611  AtRSL2  0.611  PpRSL3  0.583  AtRSL3  0.611  PpRSL4  0.513  AtRSL4  0.597  PpRSL5  0.597  AtRSL5  0.583  PpRSL6  0.611  BdRSLa  0.835  PpRSL7  0.527  BdRSLb  0.763  PtRSLa  0.791  BdRSLc  0.675  PtRSLb  0.847  BdRSLd  0.611  PtRSLc  0.597  BdRSLe  0.569  PtRSLd  0.597  CtRSLa  0.625  PtRSLe  0.611  GmRSLa  0.611  SmRSLa  0.708  GmRSLb  0.597  SmRSLb  0.708  LsRSLa  0.611  SmRSLc  0.722  MaRSLa  0.611  SmRSLd  0.722  MtRSLa  0.611  SmRSLe  0.625  OsRSLa  0.78  SmRSLf  0.625  OsRSLb  0.902  SmRSLg  0.625

      蛋白  序列同一性  AtRHD6  蛋白  序列同一性  AtRHD6  OsRSLc  0.652  SmRSLh  0.625  OsRSLd  0.597  TaRSLa  0.777  OsRSLe  0.638  ZmRSLa  0.835  OsRSLf  0.597  ZmRSLb  0.561  OsRSLg  0.602  ZmRSLc  0.493  OsRSLh  0.611  ZmRSLd  0.589  OsRSLi  0.597  AtIND  0.424

    表4

    名称       物种                            基因座名称         G1编号

    AtRHD6                                     AT1G66470

    AtRSL1                                     AT5G37800

    AtRSL2                                     AT4G33880

             拟南芥(Arabidopsis thaliana)

    AtRSL3                                     AT2G14760

    AtRSL4                                     AT1G27740

    AtRSL5                                     AT5G43175

    8dRSLa

    BdRSLb

    BdRSLc  紫短柄草(Brachypo diumdistachyon)  N/A

    BdRSLd

    BdRSLe

    CtRSLa  红花(Carthamus tinctorius)                         125399878

    GmRSLa                                                     26056905

            大豆

    GmRSLb                                                     15663066

    LsRSLa  Lactuca saligna                                    83790803

    MaRSLa  小果野蕉(Musa acuminata)                           102139852

    MtRSLa  截形苜蓿(Medicago truncatula)                      92870204

    OsRSLa                                     Os01g02110

    OsRSLb                                     Os02g48060

    OsRSLc                                     Os06g30090

    OsRSLd                                     Os03g10770

            水稻(Oryza sativa ssp

    OsRSLe  japonica)                          Os03g42100

    OsRSLi                                     Os07g39940

    OsRSLf                                     Os11g41640

    OsRSLg                                     Os12g32400

    OsRSLh                                     Os12g39850

    PpRSL1                                                      140084326

    PpRSL2                                                      140084333

    PpRSL3

    PpRSL4  小立碗藓(Physcomitrella patens)

    PpRSL5

    PpRSL6

    PpRSL7

    PtRSLa

    PtRSLb

    PtRSLc   Populus trichocarpa

    PtRSLd

    PtRSLe                                     N/A

    SmRSLa

    SmRSLh

    SmRSLb

    SmRSLc

            江南卷柏(Selaginella moelendorfii)

    SmRSLd

    SmRSLe

    SmRSLf

    SmRSLg

    TaRSLa  普通小麦(Triticum aestivum)

    ZmRSLa  玉蜀黍(Zea mays)                   AZM4_60871

    ZmRSLb                                     AZM4_70092

    ZmRSLc                                     AZM4_91750

    ZmRSLd                                     AZM4_86104

    表5

    引物

    A,扩增和测序拟南芥突变体的插入

    位点

    rhd6-1插入位点

    AtRHD6-A:5′-GGATTGATTTAATTACCATATTTAT-3′

    LB2:5′-CAAGTATCAAACGATGTG-3′

    rhd6-2插入位点(反向PCR)

    DL3:5′-CACCG GTACCGACCGTTACCGACCG-3′

    Ds3I2:5′-TACCGGTACCGAAAACGAACGGGA-3′

    rhd6-3插入位点

    AtRHD6-B:5′-GTTCCCAATGGCACCAAGGTACA-3′

    GABI-LB:5′-CCCATTTGGACGTGAATGTAGACAC-3′

    rsl1-1插入位点

    AtRSL1-A:5′-CGTGTGGACCGACGTCTGA

    JL-202:5′-CATTTTATAATAACGCTGCGGACATCTAC-3′

    B,构建pRHD6::GFP-RHD6::RHD6t质粒

    扩增AtRHD6启动子+来自BAC F28G11的5’UTR片段

    RHD6prom-attB4F:5′-GGGACAACTTTGTATAGAAAAGTTGTTCTCAAAGAGGGACAAGACCAAAGCCCATGAC-3′

    RHD6prom-attB1R:5′-GGGGACTGCTTTTTTGTACAAACTTGCTAGACACTAATAAGTTTGATAAGTGATTTTTTGT-3′

    扩增AtRHD6编码区+3’UTR+来自BAC F28G11的终止子片段

    RHD6term-attB2F:5′-GGGGACAGCTTTCTTGTACAAAGTGGCCATGGCACTCGTTAATGACCATCCCAACGAGA-3′

    RHD6term-attB3R:5′-GGGGACAACTTTGTATAATAAAGTTGCTGATAAATCGAGATCTTAGGTATGTCGTCC-3′

    C,构建pRSL1::GFP-RSL1::RSL1t质粒

    扩增AtRSL1启动子+来自Col 0基因组DNA的5’UTR

    片段

    RSL1prom-attB4F:5′-GGGGACAACTTTGTATAGAAAAGTTGTGATAATGGATTGGAGAAAAATTAAAG-3′

    RSL1prom-attB1R:5′-GGGGACTGCTTTTTTGTACAAACTTGTATTGCAATGTTCGTTAATGAGTGAC-3′

    扩增AtRSL1编码区+3’UTR+来自Col 0基因组DNA的终止子片段

    RSL1term-attB2F:5′-GGGGACAGCTTTCTTGTACAAAGTGGGTAATTACATCTCAACCCCAAATTCTT-3′

    RSL1term-attB3R:5′-_ACAACTTTGTATAATAAAGTTGATGTATAATTTCCGAAGATGCTTAAAA-3′

    D,构建p35S::PpRSL1质粒

    扩增来自Col 0CDNA的RSL1编码区

    35SPpRDL1 F:5′-CCAGGATCCATGGCAGGTCCAGCAGGA-3′

    35SPpRDL2 R:5′-CCAGTCGACTTAGTCAGCAGAAGGCTGATT-3′

    E,构建pPpRSL1-KO质粒

    扩增来自小立碗藓WT DNA的PpRSL1片段1

    PpRSL1KO 1 F:5′-CCTCTAGAAGTACTTGTGATCCACAGCCTA-3′

    PpRSL1KO 1 R:5′-GGCTCGAGCCGTACTGGGTGGTTTG-3′

    扩增来自小立碗藓WT DNA的PpRSL1片段2

    PpRSL1KO 2 F:5′-CCGTTAACTTCTACATGTTGCGTTATTTATGGT-3′

    PpRSL1KO 2 R:5′-CCGGCGCGCCAATATTTATATAAATAAGCATAATACACTTCGA-3′

    F,构建pPpRSL2-KO质粒

    扩增来自小立碗藓WT DNA的PpRSL2片段1

    PpRSL2KO 1 F:5′-GCAACGCGTGGGTTTGATCAAAGACGGAA-3′

    PpRSL2KO 1 R:5′-GCTACTAGTCGTCAACCTAACCCAAACAT-3′

    扩增来自小立碗藓WT DNA的PpRSL2片段2

    PpRSL2KO 2 F:5′-GAGGGATCCGTGAGGTGAAAGCAGTGAAA-3′

    PpRSL2KO 2 R:5′-CCAAAGCTTAGGCCTGTGAACTCGGACA-3′

    G,扩增用于Southern印迹的大标记探针

    扩增来自小立碗藓WT DNA的PpRSL1探针

    PpRSL1探针F:5′-GCTGCTAGGGTAACATAAACATTCTT-3′

    PpRSL1探针R:5′-CTGGACACTGGAATGAACCTA-3′

    扩增来自pBNRF的NptII(新霉素磷酸转移酶II)探针

    NptII探针F:5′-CCCATGGAGTCAAAGATTCA-3′

    NptII探针R:5′-CCGCGAATTCGAGCTCGGT-3′

    扩增来自小立碗藓WT DNA的PpRSL2探针

    PpRSL2探针F:5′-CCCAAATATGCATTTTTAATCTTT-3′

    PpRSL2探针R:5′-GCGACAATCCAGCAGCCTCTAT-3′

    扩增来自pBHSNR的AphIV(氨基糖苷磷酸转移酶IV)

    探针

    AphIV探针F:5′-GTAGGAGGGCGTGGATATGT-3′

    AphIV探针R:5′-CGAGTGCTGGGGGCGT-3′

    H,扩增来自原丝体cDNA的PpRSL2编码序列

    PpRSL2RT-PCR F:5′-GGGACCTCAAGGATGCAGCA-3′

    PpRSL2RT-PCR R:5′-CGAACTCAATAACGTCAGGA-3′

    I,RT-PCRs

    AtAPT1(腺嘌呤磷酸核基糖转移酶1)的RT-PCR

    AtAPT1 RT-PCR F:5′-TCCCAGAATCGCTAAGATTGCC-3′

    AtAPT1 RT-PCR R:5′-CCTTTCCCTTAAGCTCTG-3′

    AtRHD6的RT-PCR

    AtRHD6 RT-PCR F:5′-CTCACACGGGAGAGAGCA-3′

    AtRHD6 RT-PCR R:5′-CTTCGATTCTTGGCTGCTA-3′

    AtRSL1的RT-PCR

    AtRSL1 RT-PCR F:5′-GCCTAGCAGCCAAGAACCGAA-3′

    AtRSL1 RT-PCR R:5′-CTCATCGGCTGCAAGTACCTTA-3′

    PpRSL1的RT-PCR

    PpRSL1 RT-PCR F:5′-CTGGTTGGTTAGGAGATCTTGCAT-3′

    PpRSL1 RT-PCR R:5′-GTTGTAATTTGGTCCATTTCTGCT-3′

    PpRSL2的RT-PCR

    PpRSL2 RT-PCR F:5′-GGGACCTCAAGGATGCAGCA-3′

    PpRSL2 RT-PCR R:5′-CGAACTCAATAACGTCAGGA-3′

    PpGAPDH(三磷酸甘油醛脱氢酶)的RT-PCR

    PpGAPDH RT-PCR F:5′-GAGATAGGAGCATCTGTACCGCTTGT-3′

    PpGAPDH RT-PCR R:5′-CGCATGGTGGGATCGGCT-3′

    序列

    MALVNDHPNETNYLSKQNSSSSEDLSSPGLDQPDAAYAGGGGGGGSASSSSTMNSDHQQH

    QGFVFYPSGEDHHNSLMDFNGSSFLNFDHHESFPPPAISCGGSSGGGGFSFLEGNNMSYG

    FTNWNHQHHMDIISPRSTETPQGQKDWLYSDSTVVTTGSRNESLSPKSAGNKRSHTGEST

    QPSKKLSSGVTGKTKPKPTTSPKDPQSLAAKNRRERISERLKILQELVPNGTKVDLVTML

    EKAISYVKFLQVQVKVLATDEFWPAQGGKAPDISQVKDAIDAILSSSQRDRNSNLITN

    RHD6氨基酸序列(At1g66470;NP_176820.1 GI:15219658 SEQ ID NO:

    1)

    atggcactcgttaatgaccatcccaacgagaccaattacttgtcaaaacaaaattcctcc

    tcttccgaagatctctcctcgccgggactggatcagccagatgcagcttatgccggtgga

    ggaggaggaggaggctcggcttcgagcagtagcacgatgaattcagatcatcaacaacat

    caggggtttgtattttacccatccggtgaagatcatcacaactctttgatggatttcaac

    ggatcatcatttcttaactttgatcatcacgagagctttcctcctccagccataagctgt

    ggtggtagtagcggtgggggcggcttctccttcttggagggcaacaacatgagctacggc

    ttcacaaactggaatcatcaacatcatatggatattattagccctagatccaccgaaact

    ccccaaggccagaaagactggttatattctgattcaactgttgtaaccactggttctaga

    aacgagtctctttcgcctaaatccgctggaaacaaacgttctcacacgggagagagcact

    caaccgtcgaagaaactgagtagcggtgtgaccggaaagaccaagcctaagccaacaact

    tcacctaaagatccacaaagcctagcagccaagaatcgaagagaaaggataagtgaacgt

    ctcaagatattgcaagaacttgttcccaatggcaccaaggttgatttggtgacaatgctt

    gaaaaggctattagttatgtcaagttccttcaagtacaagttaaggtattagcgaccgat

    gagttttggccggctcaaggaggaaaagctcctgacatttctcaagttaaagacgccatt

    gatgccattctctcctcatcacaacgagacaggaattcgaatctgatcaccaattaa

    RHD6核苷酸序列(NM_105318.2 GI:30697352 SEQ ID NO:2)

    MSLINEHCNE RNYISTPNSS EDLSSPQNCG LDEGASASSS STINSDHQNN QGFVFYPSGE

    TIEDHNSLMD FNASSFFTFD NHRSLISPVT NGGAFPVVDG NMSYSYDGWS HHQVDSISPR

    VIKTPNSFET TSSFGLTSNS MSKPATNHGN GDWLYSGSTI VNIGSRHEST SPKLAGNKRP

    FTGENTQLSK KPSSGTNGKI KPKATTSPKD PQSLAAKNRR ERISERLKVL QELVPNGTKV

    DLVTMLEKAI GYVKFLQVQV KVLAADEFWP AQGGKAPDIS QVKEAIDAIL SSSQRDSNST

    RETSIAE

    RSL1氨基酸序列(At5g37800 SEQ ID NO:3)

    atgtcactcattaacgaacattgcaatgagcgtaattacatctcaaccccaaattcttca

    gaagatctctcttcaccacagaattgcggattagacgaaggagcttcagcttcaagcagt

    agcaccataaattctgatcatcaaaataatcaagggtttgtgttttacccttccggggaa

    accattgaagatcataattctttgatggatttcaatgcttcatcattcttcacctttgat

    aatcaccgaagccttatctctcccgtgaccaacggtggtgccttcccggtcgtggacggg

    aacatgagttacagctatgatggctggagtcatcatcaagtggatagtattagccctaga

    gtcatcaaaactccaaatagctttgaaacaacgagcagttttggattgacttcaaactcc

    atgagtaaaccggccacaaaccatggaaatggagactggttatactctggttcaactatt

    gtaaacatcggttcaaggcacgagtccacgtcccctaaactggctggcaataaacggcct

    ttcacgggagagaacacacaactttcaaagaagccgagtagcggtacgaatggaaagatc

    aagcctaaggcaacaacttcacctaaagatccacaaagcctagcagccaagaaccgaaga

    gaaaggataagcgaacgcctcaaggtattgcaagaacttgtaccgaatggtaccaaggtg

    gatttggtaactatgcttgagaaagcaattggctatgtaaagtttcttcaagtacaagtt

    aaggtacttgcagccgatgagttttggccggcacaaggagggaaagctccggacatttct

    caagttaaagaagctattgacgcaatcctctcatcatcacaacgagatagtaactcaact

    agagaaacaagtatagcagaataa

    RSL1核苷酸序列(SEQ ID NO:4)

    MEAMGEWSNN LGGMYTYATE EADFMNQLLA SYDHPGTGSS SGAAASGDHQ GLYWNLGSHH

    NHLSLVSEAG SFCFSQESSS YSAGNSGYYT VVPPTVEENQ NETMDFGMED VTINTNSYLV

    GEETSECDVE KYSSGKTLMP LETVVENHDD EESLLQSEIS VTTTKSLTGS KKRSRATSTD

    KNKRARVNKR AQKNVEMSGD NNEGEEEEGE TKLKKRKNGA MMSRQNSSTT FCTEEESNCA

    DQDGGGEDSS SKEDDPSKAL NLNGKTRASR GAATDPQSLY ARKRRERINE RLRILQNLVP

    NGTKVDISTM LEEAVHYVKF LQLQIKLLSS DDLWMYAPIA FNGMDIGLSS PR

    RSL2氨基酸序列(At4g33880;SEQ ID NO:5)

    atggaagccatgggagaatggagcaacaacctcggaggaatgtacacttatgcaaccgag

    gaagccgatttcatgaaccagcttctcgcctcttatgatcatcctggcaccggctcatcc

    tccggcgcagcagccagtggtgaccaccaaggcttgtattggaaccttggttctcatcac

    aaccaccttagcctcgtgtctgaagccggtagcttctgtttctctcaagagagcagcagc

    tacagcgctgggaacagcggatattacaccgttgttccacccacggttgaagagaaccaa

    aatgagacaatggactttgggatggaagatgtgaccatcaatacaaactcataccttgtt

    ggtgaggagacaagtgagtgtgacgttgagaaatactcttctggaaagactcttatgcct

    ttggaaaccgtagtggagaaccacgatgacgaggaaagcttgttgcaatctgagatctct

    gtgactactacaaaatctctcaccggctccaaaaagagatcccgtgccacatctactgat

    aaaaacaagagagcaagagtgaataagagggcccagaagaacgtagagatgagtggggat

    aacaatgaaggagaagaggaagaaggagagacgaagttgaagaaaagaaagaatggggca

    atgatgagtagacagaactcaagcaccactttctgtacggaggaagaatcaaactgcgct

    gatcaagacggtggaggagaagactcatcctctaaggaagatgatccctcaaaggccctc

    aacctcaatggtaaaacaagagccagtcgtggtgcagccaccgatcctcaaagcctctat

    gcaaggaaaagaagagaaaggattaacgagagactaaggattttacaaaatctcgtcccc

    aatggaacaaaggtcgatattagtacaatgcttgaggaagcagttcattacgtcaaattt

    ttgcagctccaaattaagttattgagctctgatgatctatggatgtatgcgccgattgct

    ttcaatgggatggacattggtctcagctcaccgagatga

    RSL2核苷酸序列(SEQ ID NO:6)

    MEAMGEWSTG LGGIYTEEAD FMNQLLASYE QPCGGSSSET TATLTAYHHQ GSQWNGGFCF

    SQESSSYSGY CAAMPRQEED NNGMEDATIN TNLYLVGEET SECDATEYSG KSLLPLETVA

    ENHDHSMLQP ENSLTTTTDE KMFNQCESSK KRTRATTTDK NKRANKARRS QKCVEMSGEN

    ENSGEEEYTE KAAGKRKTKP LKPQKTCCSD DESNGGDTFL SKEDGEDSKA LNLNGKTRAS

    RGAATDPQSL YARVDISTML EEAVQYVKFL QLQIKRLLAI GTNHRNRSIP LWTARNRQIS

    KAHSRKRLRL RAVAKIIWSD EMTRFLLELI TLEKQAGNYR GKSLIEKGKE NVLVKFKKRF

    PITLNWNKVK NRLDTLKKQY EIYPAKLRSH PLRFIPLLDV VFRDETVVVE ESWQPRRGVH

    RRAPVLDLSD SECPNNNGDE REDLMQNRER DHMRPPTPDW MSQTPMENSP TSANSDPPFA

    SQERSSTHTQ VKNVSRNRKR KQNPADSTLD RIAATMKKI

    RSL3氨基酸序列(At2g14760;SEQ ID NO:7)

    atggaagccatgggagaatggagcaccggcctaggcggaatatatacagaggaagctgac

    tttatgaatcagctccttgcctcctatgagcaaccttgtggcggttcatcttcagagaca

    accgccacactcacggcctaccaccaccagggttctcaatggaatggtggcttttgcttc

    tctcaggagagcagtagttatagtggttactgcgcggcgatgccacggcaagaagaagat

    aacaatgggatggaggacgcgacaatcaacacgaacttgtaccttgttggtgaagagaca

    agtgaatgtgatgcgacggaatactccggtaaaagcctcttgcctttggagactgtcgca

    gaaaaccacgaccatagtatgctacagcctgagaactccttgaccacgaccactgatgag

    aaaatgttcaaccaatgtgagagttcaaagaagaggacgcgtgccacaacaactgataag

    aacaagagagccaacaaggcacgaaggagccagaaatgcgtagagatgagtggcgaaaat

    gaaaatagcggcgaagaagaatatacggagaaggctgcggggaagagaaagaccaaacca

    cttaagccgcaaaagacttgttgttcggatgacgaatcaaacggtggagacactttcttg

    tccaaagaagatggcgaggactctaaggctctcaacctcaacggcaagactagggccagc

    cgcggcgcggccacagatcctcaaagcctttacgcaaggaaaagaagagagaggataaac

    gagaggctaaggattttgcaacatctcgtccctaatggaacaaaggttgatattagcacg

    atgttggaagaagcagtacaatacgtcaaatttctacagctccaaattaagttattgagc

    tctgatgatctatggatgtatgcgcctattgcttacaacggaatggacattggccttgac

    ctaaaactcaatgcactgaccagatga

    RSL3核苷酸序列(SEQ ID NO:8)

    MDVFVDGELE SLLGMFNFDQ CSSSKEERPR DELLGLSSLY NGHLHQHQHH NNVLSSDHHA

    FLLPDMFPFG AMPGGNLPAM LDSWDQSHHL QETSSLKRKL LDVENLCKTN SNCDVTRQEL

    AKSKKKQRVS SESNTVDESN TNWVDGQSLS NSSDDEKASV TSVKGKTRAT KGTATDPQSL

    YARKRREKIN ERLKTLQNLV PNGTKVDIST MLEEAVHYVK FLQLQIKLLS SDDLWMYAPL

    AYNGLDMGFH HNLLSRLM

    RSL4氨基酸序列(At1g27740;SEQ ID NO:9)

    atggacgtttttgttgatggtgaattggagtctctcttggggatgttcaactttgatcaa

    tgttcatcatctaaagaggagagaccgcgagacgagttgcttggcctctctagcctttac  

    aatggtcatcttcatcaacatcaacaccataacaatgtcttatcttctgatcatcatgct

    ttcttgctccctgatatgttcccatttggtgcaatgccgggaggaaatcttccggccatg

    cttgattcttgggatcaaagtcatcacctccaagaaacgtcttctcttaagaggaaacta

    cttgacgtggagaatctatgcaaaactaactctaactgtgacgtcacaagacaagagctt

    gcgaaatccaagaaaaaacagagggtaagctcggaaagcaatacagttgacgagagcaac

    actaattgggtagatggtcagagtttaagcaacagttcagatgatgagaaagcttcggtc

    acaagtgttaaaggcaaaactagagccaccaaagggacagccactgatcctcaaagcctt

    tatgctcggaaacgaagagagaagattaacgaaaggctcaagacactacaaaaccttgtg

    ccaaacgggacaaaagtcgatataagcacgatgcttgaagaagcggtccattacgtgaag

    ttcttgcagcttcagattaagttgttgagctcggatgatctatggatgtacgcaccattg

    gcttacaacggcctggacatggggttccatcacaaccttttgtctcggcttatgtga

    RSL4核苷酸序列(SEQ ID NO:10)

    MENEAFVDGELESLLGMFNFDQCSSNESSFCNAPNETDVFSSDDFFPFGTILQSNYAAVL

    DGSNHQTNRNVDSRQDLLKPRKKQKLSSESNLVTEPKTAWRDGQSLSSYNSSDDEKALGL

    VSNTSKSLKRKAKANRGIASDPQSLYARKRRERINDRLKTLQSLVPNGTKVDISTMLEDA

    VHYVKFLQLQIKLLSSEDLWMYAPLAHNGLNMGLHHNLLSRLI

    RSL5氨基酸序列(At5g43175;SEQ ID NO:11)

    atggagaatgaagcttttgtagatggtgaattggagtctcttttggggatgttcaacttt

    gatcaatgttcatctaacgaatcgagcttttgcaatgctccaaatgagactgatgttttc

    tcttctgatgatttcttcccatttggtacaattctgcaaagtaactatgcggccgttctt

    gatggttccaaccaccaaacgaaccgaaatgtcgactcaagacaagatctgttgaaacca

    aggaagaagcaaaagttaagctcggaaagcaatttggttaccgagcctaagactgcttgg

    agagatggtcaaagcctaagcagttataatagttcagatgatgaaaaggctttaggttta

    gtgtctaatacatcaaaaagcctaaaacgcaaagcgaaagccaacagagggatagcttcc

    gatcctcagagcctatacgctaggaaacgaagagaaaggataaacgataggctaaagaca

    ttgcagagcctagttcctaatgggacaaaggtcgatataagcacaatgctggaagatgct

    gtccattacgtgaagttcctgcagcttcaaatcaagctcttgagttcagaagatctatgg

    atgtatgcacctcttgctcacaatggtctgaatatgggactacatcacaatcttttgtct

    cggcttatttaa

    RSL5核苷酸序列(SEQ ID NO:12)

    TSPKDPQSLAAKNRRERISERLKILQELVPNGTKVDLVTMLEKAISYVKFLQVQVKVLATDEFWPAQ

    AtRHD6 bHLH氨基酸序列(SEQ ID NO:13)

    TSPKDPQSLAAKNRRERISERLKVLQELVPNGTKVDLVTMLEKAIGYVKFLQVQVKVLAADEFWPAQ

    AtRLD1 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:14)

    GSANDPQSIAARVRRERISERLKVLQALIPNGDKVDMVTMLEKAISYVQCLEFQIKMLKNDSLWPKA

    PpRSL1 bHLH氨基酸序列(SEQ ID NO:15)

    GSANDPQSIAARVRRERISERLKVLQALIPNGDKVDMVTMLEKAITYVQCLELQIKMLKNDSIWPKA

    PpRSL2 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:16)

    GSATDPQSVYARHRREKINERLKSLQNLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVKFLQNQVELLKSDELWIYA

    PpRSL5 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:17)

    GSATDPQSVYARHRREKINERLKNLQNLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVKFLQTQVELLKSDEFWMFA

    PpRSL6 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:18)

    GSATDPQSVYARHRREKINERLKTLQHLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVQFLQLQVTLLKSDEYWMYA

    PpRSL3 bHLH氨基酸序列(SEQIDNO:19)

    GSATDPQSVHARARREKIAERLRKLQHLIPNGGKVDIVTMLDEAVHYVQFLKRQVTLLKSDEYWMYA

    PpRSL4 bHLH氨基酸序列(SEQ ID NO:20)

    GSATDPQSVYARHRREKINERLKTLQRLVPNGEQVDIVTMLEEAIHFVKFLEFQLELLRSDDRWMFA

    PpRSL7 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:21)

    GAATDPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGTKVDISTMLEEAVHYVKFLQLQIKLLSSDDLWMYA

    At4g33880 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:22)

    GAATDPQSLYARKRRERINERLRILQHLVPNGTKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSDDLWMYA

    At2g14760 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:23)

    GTATDPQSLYARKRREKINERLKTLQNLVPNGTKVDISTMLEEAVHYVKFLQLQIKLLSSDDLWMYA

    At1g27740bHLH氨基酸序列(SEQID NO:24)

    GIASDPQSLYARKRRERINDRLKTLQSLVPNGTKVDISTMLEDAVHYVKFLQLQIKLLSSEDLWMYA

    At5g43175 bHLH氨基酸序列(SEQID NO:25)

    MAGPAGALWSTCDPQPIQQAEIFSGPDNQAGLMSFHVDTPFHWGSEPWALHSRSDDIALMSPSLVHDISPYDSVL

    HLSGVSGDVQDLVCGNPKFRQSGQWGQSEFSYSVQDNMQDLLTNQFIPYNTSSLGLNHLSPNFTDLDCAPVYNDT

    KAFGTVTHNRAVPSTNTQSAQHGSSSMVSSNRPITSTASPTTQYGGPRTPSQTTQYGGSSMVTNSMEMFASAAPQ

    GIMTTSGLSGGCNSDLMHLPKRQHAHSLPPTTGRDLTASEVVSGNSISNISGVGSFNSSQKSSASVMMSPLAASS

    HMHKAAAVSEELKMASFNPGPFVPTQKKQQHEQQDTMTSNRIWADKNNLGKISSSPIPIMGFEQSQQQSMSNSSP

    VTSLGFEQRQKMSMGSSPSITIIGFEQRQKQPMSSSSPISNMVFEPRQKQPMSSSSPISNIVFEQRQLPTVGSSP

    PISISGFEPKKQPSLSNSPPLSNLGFEQRLQPMSNASPISNLPFEQQRQQATMSNTRSAEPDSVESTTKWPLRMD

    GAIGGCAGLPSSQKAPVIMQPETGTMKCPIPRTMPSNAKACPAVQNANSVNKRPLTVDDKDQTGSMNKKSMQKFL

    GPQGCSRLESISALAHQKVSQSTTSGRALGPALNTNLKPRARQGSANDPQSIAARVRRERISERLKVLQALIPNG

    DKVDMVTMLEKAISYVQCLEFQIKMLKNDSLWPKALGPLPNTLQELLELAGPEFAGIDGKNTEESSEKPKKSALE

    VIELDGNQPSAD*

    Physcomitrella RHD6样1(PpRSL1)氨基酸序列(SEQ ID NO:26;

    ABO84930.1 GI:140084327)

    atggcaggtccagcaggagctttatggagtacttgtgatccacagcctattcaacaggcagagatatttagtggt

    cctgacaaccaagctggtttgatgtcttttcatgtggataccccgttccattggggatctgaaccatgggctctc

    cactctcggtcagatgacatcgccttgatgtccccctcgcttgttcacgacatatcaccttatgattctgtcttg

    catctttccggagtgtctggggatgtgcaagatttagtttgcgggaatcccaaatttcgccaaagtgggcaatgg

    gggcagagcgagttttcatactctgttcaggacaacatgcaagatctcctaaccaaccagttcataccgtacaac

    acatcttcattgggtttaaatcatctctccccgaatttcaccgacttggattgcgcaccggtatacaatgatacc

    aaggcttttggcactgttacacacaacagggcagtcccgagcactaatacccagagtgctcagcacgggagttcg

    tctatggtttcaagtaacaggccaatcactagcacagcttctcctactactcagtatggaggtccgaggactcca

    tcccaaaccacccagtacgggggttcatctatggttaccaactcgatggaaatgtttgcttcagctgcacctcag

    ggtattatgactacatctggcttgagtggcggttgcaactcagacttgatgcatctgccgaagcgccagcatgct

    cactctcttcctcctaccactggcagagatttaactgcatctgaagtggtatctggaaattcgatatcaaacatt

    tccggggttggatcttttaacagcagccagaaaagcagtgcatccgtgatgatgtctcctttagctgcttcttct

    cacatgcacaaggctgctgctgtatctgaagaacttaagatggcaagtttcaaccctggtccattcgtacctacg

    cagaaaaagcagcaacatgagcagcaggatacgatgacctctaatcgtatatgggcggataagaacaacttggga

    aaaattagttcatcgcccattccgatcatggggtttgagcagagtcaacagcaatccatgagcaattcctcccct

    gttaccagtttggggtttgagcaaaggcaaaaaatgtccatgggtagctctccctccatcacgatcattggattt

    gagcaaagacagaagcaacctatgagtagttcttcccccatttcaaacatggtttttgaaccaagacaaaaacag

    ccaatgagtagctcttctcctatctctaatattgtctttgagcaaagacaactcccaactgtgggtagctctcct

    ccgatttcaatctcaggatttgagccaaagaaacaaccatctttgagcaattctcctcccctctctaatctgggt

    tttgagcaaaggctacaacccatgagtaatgcatctcctatttccaacttaccctttgagcaacaaagacaacaa

    gcaaccatgagtaacaccagatctgcagaacccgattctgtcgagtctaccacgaagtggcccttgcggatggat

    ggtgccataggtggatgtgctggcttaccaagcagtcagaaagctcctgttatcatgcagcctgagactgggact

    atgaagtgtcctattccgaggaccatgcccagcaatgctaaggcttgcccagctgtgcagaatgctaattccgta

    aacaagcgccctcttacggttgatgacaaggaccaaactggatcgatgaataagaagtcgatgcaaaagtttttg

    ggacctcaaggttgtagcagacttgaaagtatcagtgctttagctcaccaaaaagtgagtcaaagtacaacaagc

    ggtcgtgctctagggcctgctttgaacaccaatctcaagcctcgtgcacgccaagggagtgccaatgatccgcag

    agcattgctgctagggtgcgaagagaaagaataagtgagcggctcaaagttttgcaagccttgatacctaacggt

    gataaagtggatatggtcaccatgctggagaaggctatcagctacgtgcagtgtttggaatttcagattaagatg

    ttaaaaaatgactctttgtggcctaaggcgcttggccctctaccgaacactttgcaagagcttctcgaacttgct

    gggccagagtttgccggcatagatggcaagaatactgaggagtcgtcagagaaaccgaagaaatctgctcttgaa

    gtaattgagttggacggcaatcagccttctgctgactaa

    Physcomitrella RHD6样1(PpRSL1)核苷酸序列(SEQ ID NO:27;

    EF156393.1 GI:140084326)

    MNKKPMQKALGPQGCSRLESISALAHQKVSQSASGRALGPALNTNLKPRARQGSANDPQSIAARVRRERISERLK

    VLQALIPNGDKVDMVTMLEKAITYVQCLELQIKMLKNDSIWPKALGPLPNTLQELLELAGPEFSGTESKNVEEPP

    AKPKKSAPDVIEFDGNQPSADKE*

    Physcomitrella RHD6样2(PpRSL2)氨基酸序列(SEQ ID NO:28

    ABO84931.1 GI:140084334)

    atgaataagaagcctatgcaaaaagctttgggacctcaaggatgcagcaggctagaaagcatcagtgctttagct

    catcaaaaagtgagtcagagtgcaagtggtcgtgcactagggcctgctctgaacaccaacctcaagcctcgtgct

    cgtcaagggagtgccaatgacccacagagcattgccgctagggttcgaagagaaaggataagtgagcggctgaaa

    gttttgcaagccttgatacctaatggtgataaggtagatatggtgaccatgctggagaaggctatcacctacgtg

    cagtgtctggaactccagattaagatgttaaagaatgattctatctggcccaaggcgcttggacctctaccaaac

    actcttcaagagcttctggagcttgctggaccagaattttctggaacggaaagcaagaatgtagaggagccccca

    gcgaagccaaagaaatcagctcctgacgttattgagttcgacggcaatcaaccttctgccgacaaagagtag

    Physcomitrella RHD6样2(PpRSL2)核苷酸序列(SEQ ID NO:29;

    EF156394.1 GI:140084333)

    GSATDPQSVYARHRREKINERLKTLQHLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVQFLQLQVTLLKSDEYWMYA

    Physcomitrella RHD6样3(PpRSL3)氨基酸序列(SEQ ID NO:30;

    ABO84932.1 GI:140084346)

    ggttcagcgactgatccgcagagtgtatatgccaggcatagaagggagaagatcaacgagcgcttgaagacatta

    cagcacttggtaccaaatggagctaaggtagacatcgtgaccatgcttgacgaagccattcactacgtccaattt

    ctgcagctccaagtgacgctgttgaagtcggatgaatattggatgtacgcc

    Physcomitrella RHD6样3(PpRSL3)核苷酸序列(SEQ ID NO:31;

    EF156395.1 GI:140084345)

    MTDLISILESSGSSREEMCPVAVPSSVASSCERLIWEGWTAQPSPVEESTTSKLLPKLLPELETSSYSALTLQQP

    DALSSILSVLHPFSHYSSASLELARNPDWSLKSSNPLRESSSEAGIRTSSFEGLYSGQHTTKKIHLGVIPYHLSE

    DQRQCAVSPPENECRLLSANSSGSLHWWHSIGPESPSSTLAFHNIGIQHSTFEKCEPRGQSHSSWPAASGTSPTV

    QYFHAHSADNEGVEVVKQDDSQISKALATYQPHGDHSLVLNSDRIASTTSHSEDPCGPKPGRRPAASYDTEMILS

    PSESFLTTPNMLSTLECVISGASNISDQYMNFVREPQEQRLSSISDLSLIPDSHADPHSIGFISGTFRTDSHGTG

    IRKNRIFLSDEESDFLPKKRSKYTVRGDFQMDRFDAVWGNTGLRGSSCPGNSVSQMMAIYEFGPALNRNGRPRVQ

    RGSATDPQSVHARARREKIAERLRKLQHLIPNGGKVDIVTMLDEAVHYVQFLKRQVTLLKSDEYWMYATPTSYRS

    KFDDCSLVPGENN*

    Physcomitrella RHD6样4(PpRSL4)氨基酸序列(SEQ ID NO:32;

    ABO84933.1 GI:140084359)

    ATGACCGATCTGATTTCGATCTTGGAGTCATCAGGGTCATCACGAGAGGAGATGTGCCCTGTTGCTGTGCCAAGC

    TCCGTGGCTTCTTCTTGTGAAAGGTTGATATGGGAGGGGTGGACTGCACAACCATCTCCTGTCGAAGAAAGCACC

    ACCAGCAAGTTACTTCCAAAGCTACTTCCAGAGCTCGAGACATCATCCTACTCTGCACTCACCCTTCAGCAACCT

    GATGCGCTCTCCAGCATACTTTCAGTCCTCCACCCTTTTTCTCATTACAGTTCGGCCAGTTTAGAACTCGCTCGC

    AATCCTGACTGGAGCTTGAAATCTTCAAATCCTCTGCGGGAAAGCAGCTCGGAGGCTGGCATCCGAACCTCATCT

    TTCGAAGGCTTGTACTCTGGTCAGCACACCACCAAAAAGATTCATTTGGGGGTCATACCCTACCACTTGTCCGAA

    GATCAGCGCCAGTGCGCTGTCAGTCCTCCGGAAAATGAGTGCCGCCTACTGTCTGCAAATTCCTCTGGATCCCTT

    CACTGGTGGCATTCCATAGGCCCCGAGTCTCCTTCCTCTACTCTTGCATTCCATAATATTGGGATCCAACACTCT

    ACCTTCGAAAAGTGTGAGCCTAGGGGCCAGTCGCACTCATCATGGCCAGCGGCCAGCGGCACGTCGCCAACAGTT

    CAATACTTTCATGCCCATTCTGCAGATAATGAAGGTGTCGAGGTCGTCAAGCAAGATGACTCGCAGATATCCAAG

    GCTCTGGCGACCTATCAACCCCACGGCGACCATAGTCTCGTGCTAAATTCAGACCGCATTGCAAGCACAACCAGC

    CACTCAGAAGATCCTTGCGGCCCTAAACCTGGACGCAGACCAGCTGCATCATACGACACCGAGATGATTCTTAGC

    CCAAGTGAGAGTTTCTTGACAACTCCCAATATGTTATCAACGTTGGAGTGCGTAATATCCGGTGCAAGTAACATA

    TCTGATCAGTATATGAACTTCGTCAGAGAACCGCAGGAGCAAAGGCTGTCCTCTATCTCCGATCTGTCCCTTATT

    CCTGACAGCCACGCGGATCCGCACAGTATCGGATTTATCTCTGGGACCTTTAGAACAGACTCCCACGGAACTGGA

    ATAAGAAAGAACCGCATCTTTCTCAGTGATGAGGAATCCGACTTCTTGCCTAAGAAGCGATCCAAGTACACGGTC

    CGCGGCGATTTTCAGATGGATCGCTTCGACGCAGTTTGGGGGAATACCGGTCTTCGGGGATCTAGCTGTCCTGGA

    AATTCAGTATCCCAGATGATGGCGATTTACGAATTCGGACCCGCACTGAACAGGAACGGCAGGCCGCGAGTACAA

    CGTGGTTCGGCGACTGATCCGCAGAGTGTACACGCCAGGGCGCGGAGGGAGAAAATCGCCGAGCGCTTGAGAAAG

    TTGCAGCACCTCATTCCAAACGGCGGGAAGGTGGACATCGTAACCATGCTCGACGAAGCCGTTCACTATGTTCAG

    TTTTTGAAGCGACAAGTTACGCTTCTGAAATCCGACGAGTATTGGATGTACGCCACGCCGACCTCGTACCGGAGC

    AAATTCGACGACTGCAGTCTGGTTCCCGGCGAGAACAACTGA

    Physcomitrella RHD6样4(PpRSL4)核苷酸序列(SEQ ID NO:33;

    EF156396.1 GI:140084358)

    MVQLYMSSVEEQRETMVQPYVSSMDSGSTSGRQTPSCVVQQGSNTFETSNLWEEWTQASNGDDTVSTSNFLPEIS

    SFTSSRLSFQQSDSLTTWMSGFPPLSQTALSPDLSHSSDPVDHPPAFMQEGLGPGDSILDYSPALTEMYPKSSSK

    HNSSDCLPYPAASAPDKKMTDHELGSAISLAYDRGTVSRQLLRALGPLSPSSPLALQNGLQNPLGDPWDASPSAM

    PWPMATTGHAYGPGATRTSIPDHLANAINHLEGIAPSSASHASKPRHTDIFIAPNGTFDSTPGGWTPQYYDGSVT

    TDESVKAMKLIASLREAGHAEATIGFCTESKPSFLRGGDRTTSPVDSFFGKCVGAKTSIKQACSGKHPLELEEIV

    DSENSELNPTQLKRSKLFENHPNALWSDQSMNGRELRSYSHLVGSSLTASQPMDIIAIGPALNTDGKPRAKRGSA

    TDPQSVYARHRREKINERLKSLQNLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVKFLQNQVELLKSDELWIYATPNKYNGMDIS

    DLSDMYLQELESRA*

    Physcomitrella RHD6样5(PpRSL5)氨基酸序列(SEQ ID NO:34:

    ABO84934.1 GI:140084368)

    ATGGTGCAGTTATACATGTCCTCAGTTGAAGAGCAGCGGGAAACAATGGTACAGCCATACGTCTCAAGCATGGAC

    TCAGGCTCAACGTCGGGGCGCCAGACGCCATCTTGCGTCGTTCAGCAGGGAAGTAACACATTTGAGACTTCGAAT

    CTGTGGGAGGAATGGACGCAAGCATCGAACGGCGACGATACAGTCTCCACCAGCAATTTCCTCCCCGAAATCAGT

    TCCTTCACGTCGAGTCGTCTCTCCTTCCAGCAAAGCGACTCTCTCACCACTTGGATGTCAGGGTTCCCTCCCCTC

    TCCCAAACTGCCTTGAGCCCGGATCTTAGTCACTCCTCCGACCCCGTGGATCATCCCCCAGCATTCATGCAGGAG

    GGTTTAGGCCCCGGTGATTCTATTCTGGACTATTCCCCCGCTCTCACAGAGATGTACCCGAAAAGTAGCTCCAAA

    CATAATTCCTCGGATTGTTTACCTTACCCTGCGGCCAGTGCACCAGACAAAAAAATGACTGATCACGAACTAGGT

    TCGGCTATTTCCCTCGCGTATGATAGAGGCACCGTTTCCCGCCAGCTTCTTCGAGCCTTGGGCCCATTGTCGCCT

    TCATCGCCTCTAGCATTGCAGAATGGGCTGCAAAACCCGCTTGGGGACCCCTGGGATGCTTCTCCATCTGCAATG

    CCGTGGCCAATGGCAACAACCGGTCATGCTTATGGACCAGGCGCCACCAGGACTTCTATTCCAGATCACTTAGCA

    AATGCAATTAATCACCTGGAGGGCATTGCACCGTCCAGTGCCAGTCATGCATCGAAACCTCGTCACACTGATATT

    TTCATTGCACCCAATGGCACGTTCGATTCGACGCCGGGAGGTTGGACACCGCAGTATTACGATGGGTCCGTGACG

    ACAGATGAGTCTGTGAAGGCGATGAAGCTGATTGCGTCCCTACGTGAAGCAGGCCACGCAGAGGCTACAATTGGA

    TTCTGTACAGAGAGCAAGCCTAGTTTTCTCAGGGGTGGGGACAGAACAACCTCGCCAGTGGACAGCTTCTTCGGC

    AAATGTGTAGGGGCCAAAACGAGTATAAAGCAAGCCTGTTCTGGGAAACACCCTCTTGAACTTGAGGAGATCGTT

    GATAGTGAAAACAGTGAATTAAATCCCACCCAGCTCAAACGCTCTAAACTTTTTGAGAATCATCCGAATGCCTTG

    TGGAGCGATCAGAGTATGAATGGAAGAGAACTGAGATCGTACTCTCATTTGGTTGGCAGCAGTCTTACTGCATCG

    CAGCCCATGGACATAATTGCAATTGGCCCAGCGCTCAACACTGATGGCAAACCACGAGCAAAGCGGGGTTCAGCA

    ACCGATCCTCAGAGTGTTTACGCTAGACATAGGAGAGAAAAAATCAACGAACGATTGAAGAGTTTACAAAACCTA

    GTACCTAATGGAGCCAAGGTTGACATAGTAACCATGCTGGACGAAGCTATACATTACGTCAAATTTTTACAAAAT

    CAAGTTGAGCTGCTGAAGTCCGACGAGTTGTGGATTTACGCAACACCAAATAAGTACAACGGCATGGACATTTCC

    GACCTCTCTGACATGTATTTGCAGGAGCTGGAGTCACGTGCGTGA

    Physcomitrella RHD6样5(PpRSL5)核苷酸序列(SEQ ID NO:35;

    EF156397.1 GI:140084367)

    MVRFNYMYPVQEQLEAMTDQHTPSMDSVSSAGEKTSSCIVQQGGNASETSNLWEEWTQGSNGDDSVSTSNFLPEL

    NSSTSSRLAFHQSDILSTWISGYHPLSQSSLSSEFSHTSDRENHPPAFMQEGLIPSGLILDSDPALTDIYTRSSS

    SDSLPYPTARIMDKALTDHELESAVPLAYEKGCVPPQVLRNLGPLSPSSPLAFQNGLLNPLRDPWDSCPSALPWS

    NVTTASQTYGQVTTRTFIPDHSASAIDKLEAVATITAGYGASKPQHTDVFIEPNGTFQSTPAGWAPQFYDGSEAT

    GLLVKPMRAIASLGEAGCGEATSEFCTKTKPGLLKGGDTITSPVGSLLGDCKKAESSMKQVWPGKHRLELVELVD

    GEDTKSSPTQLKRPKHSTDYANVLLSDHILKGAELRSYFHSGDVGLNASQAMDIIVIGPALNTNGKPRAKRGSAT

    DPQSVYARHRREKINERLKNLQNLVPNGAKVDIVTMLDEAIHYVKFLQTQVELLKSDEFWMFANPHNYNGIDISD

    PSSMHSPELESNI*

    Physcomitrella RHD6样6(PpRSL6)氨基酸序列(SEQ ID NO:36;

    ABO84935.1 GI:140084376)

    ATGGTGCGGTTTAACTACATGTACCCGGTTCAAGAGCAGCTGGAAGCCATGACGGACCAACACACCCCAAGCATG

    GATTCGGTCTCGTCGGCCGGAGAGAAGACATCCTCTTGCATCGTCCAGCAGGGAGGAAATGCATCCGAAACTTCA

    AACTTGTGGGAAGAATGGACACAAGGGTCGAACGGCGACGATTCTGTCTCTACCAGCAACTTCCTCCCCGAACTG

    AATTCCTCCACCTCCAGTCGTCTCGCATTCCACCAAAGCGACATTCTTTCCACTTGGATCTCAGGCTACCACCCA

    CTCTCGCAAAGCAGCCTGAGTTCCGAATTCAGCCACACCTCCGACCGCGAGAATCACCCCCCAGCATTCATGCAA

    GAGGGTTTAATCCCCAGTGGTTTAATTCTTGACTCTGATCCTGCTCTCACAGATATTTATACGAGAAGCAGCTCC

    TCGGACTCTTTGCCATACCCCACGGCTAGGATCATGGACAAAGCATTGACCGATCACGAGCTTGAGTCTGCTGTC

    CCACTTGCATATGAAAAAGGCTGCGTTCCTCCCCAGGTTCTGCGTAACCTAGGGCCATTGTCACCTTCTTCGCCT

    CTGGCATTCCAGAATGGACTGCTAAACCCCCTCAGGGACCCTTGGGATTCGTGTCCATCTGCATTGCCATGGTCA

    AATGTGACCACAGCCAGCCAGACTTACGGTCAAGTGACAACCAGGACTTTCATTCCAGATCACTCTGCAAGTGCA

    ATCGACAAGTTGGAGGCCGTCGCAACGATCACTGCCGGATACGGCGCGTCGAAACCACAACATACTGACGTCTTC

    ATAGAACCCAACGGGACGTTTCAGTCGACTCCGGCAGGGTGGGCACCGCAGTTTTACGATGGATCCGAGGCGACG

    GGCCTGTTGGTCAAGCCAATGAGGGCCATCGCATCTCTGGGTGAAGCCGGCTGTGGGGAGGCCACTAGTGAATTC

    TGCACAAAGACCAAGCCAGGACTTCTCAAAGGTGGGGACACAATAACCTCGCCGGTGGGTAGCCTGTTGGGCGAT

    TGCAAAAAAGCTGAGTCAAGTATGAAGCAAGTTTGGCCTGGAAAACACCGTCTTGAACTCGTGGAACTAGTCGAT

    GGTGAAGACACCAAATCAAGTCCCACCCAGCTCAAACGGCCGAAACATTCTACGGATTATGCGAATGTCCTGTTG

    AGCGATCATATTCTGAAAGGAGCGGAGCTGCGGTCCTACTTCCATTCTGGTGATGTTGGTCTAAATGCATCTCAA

    GCGATGGACATTATTGTAATTGGCCCAGCCTTGAATACTAATGGCAAGCCGCGAGCTAAACGGGGTTCAGCCACC

    GATCCCCAGAGTGTGTACGCTAGACATAGGCGAGAAAAAATCAACGAACGACTGAAGAATTTACAAAATCTCGTG

    CCAAATGGAGCCAAGGTTGACATTGTGACCATGCTAGACGAAGCCATACACTACGTCAAATTCTTGCAAACTCAA

    GTTGAGCTGCTGAAATCCGACGAGTTCTGGATGTTCGCAAATCCACACAACTACAACGGCATAGATATCTCCGAT

    CCCTCTAGCATGCATTCGCCGGAGCTGGAGTCGAATATTTAG

    Physcomitrella RHD6样6(PpRSL6)核苷酸序列(SEQ ID NO:37:

    EF156398.1 GI:140084375)

    GSATDPQSVYARHRREKINERLKTLQRLVPNGEQVDIVTMLEEAIHFVKFLEFQLELLRSDDRWMFA

    Physcomitrella RHD6样7(PpRSL7)氨基酸序列(SEQ ID NO:38;

    ABO84936.1 GI:140084384)

    Gggtcagctactgatcctcagagtgtgtacgcaaggcatcgccgggagaagattaacgagcgcctaaagacattg

    cagcggttggttcctaacggagaacaggtcgacattgtgaccatgctggaagaagccattcactttgtcaaattt

    ttggagttccaactggagctgttgcgatccgatgatcgctggatgttcgcc

    Physcomitrella RHD6样7(PpRSL7)核苷酸序列(SEQ ID NO:39;

    EF156399.1 GI:140084383)

    LNTNLKPRAKQGCANDPQSIAARQRRERISDRLKILQELIPNGSKVDLVTMLEKAINYVKFLQLQVKVLMNDEYW

    PPKGD

    江南卷柏SmRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:40)

    CTCAACACTAATCTTAAGCCGCGAGCAAAGCAAGGTTGTGCTAATGATCCACAAAGCATTGCTGCCAGACAACGA

    AGAGAACGGATAAGTGACCGGCTTAAAATCCTGCAGGAGCTCATACCAAATGGATCCAAGGTCGATCTGGTAACC

    ATGCTGGAGAAGGCCATCAACTACGTCAAGTTCTTGCAATTGCAAGTCAAAGTTCTTATGAACGATGAGTATTGG

    CCACCAAAGGGAGAT

    江南卷柏SmRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:41)

    LNTNLKPRAKQGCANDPQSIAARQRRERISDRLKILQELIPNGSKVDLVTMLEKAINYVKFLQLQVKVLMNDEYW

    PPKGD

    江南卷柏SmRSLb氨基酸序列(SEQ ID NO:42)

    CTCAACACTAATCTTAAGCCGCGAGCAAAGCAAGGTTGTGCTAATGATCCACAAAGCATTGCTGCCAGACAACGA

    AGAGAACGGATAAGTGACCGGCTTAAAATCCTGCAGGAGCTCATACCAAATGGATCCAAGGTCGATCTGGTAACC

    ATGTTGGAGAAGGCCATCAACTACGTCAAGTTCTTGCAATTGCAAGTCAAAGTTCTTATGAACGATGAGTATTGG

    CCACCAAAGGGAGAT

    江南卷柏SmRSLb核苷酸序列(SEQ ID NO:43)

    LNTNFKPRARQGSANDPQSIAARHRRERISDRLKILQELVPNSTKVDLVTMLEKAINYVKFLQLQVKVLTSDDYW

    P

    江南卷柏SmRSLc氨基酸序列(SEQ ID NO:44)

    CTCAACACCAATTTCAAGCCTCGAGCCAGGCAGGGAAGCGCCAATGATCCCCAGAGCATCGCTGCTAGACATCGC

    CGGGAGAGGATCAGTGACAGGCTCAAGATCTTGCAAGAGCTCGTTCCAAACAGCACAAAGGTTGATCTAGTGACG

    ATGCTGGAGAAGGCCATCAATTACGTCAAGTTCCTCCAGCTGCAAGTTAAGGTGCTTACGTCGGACGACTACTGG

    CCA

    江南卷柏SmRSLc核苷酸序列(SEQ ID NO:45)

    LNTNFKPRARQGSANDPQSIAARHRRERISDRLKILQELVPNSTKVDLVTMLEKAINYVKFLQLQVKVLTSDDYW

    P

    江南卷柏SmRSLd氨基酸序列(SEQ ID NO:46)

    CTCAACACCAATTTCAAGCCTCGAGCCAGGCAGGGAAGCGCCAATGATCCCCAGAGCATCGCTGCTAGACATCGC

    CGGGAGAGGATCAGTGACAGGCTCAAGATCTTGCAAGAGCTCGTTCCAAACAGCACAAAGGTTGATCTAGTGACG

    ATGCTGGAGAAGGCCATCAATTACGTCAAGTTCCTCCAGCTGCAAGTTAAGGTGCTTACGTCGGACGACTATTGG

    CCA

    江南卷柏SmRSLd核苷酸序列(SEQ ID NO:47)

    LNTDGKPRAKRGSATDPQSIYARQRRERINERLRALQGLVPNGAKVDIVTMLEEAINYVKFLQLQVKLLSSDEYW

    MYAPT

    江南卷柏SmRSLe氨基酸序列(SEQ ID NO:48)

    CTAAACACCGACGGAAAGCCACGCGCAAAGCGTGGATCTGCCACGGACCCGCAAAGCATCTACGCTCGGCAAAGA

    AGAGAAAGGATCAACGAGCGTTTGAGAGCGCTACAAGGACTCGTACCAAACGGAGCGAAGGTTGACATTGTGACG

    ATGCTCGAGGAAGCCATCAACTATGTCAAGTTTTTGCAGCTGCAAGTAAAGCTGCTCAGCTCGGACGAGTATTGG

    ATGTACGCCCCCACA

    江南卷柏SmRSLe核苷酸序列(SEQ ID NO:49)

    LNTNGKPRAKRGSATDPQSVYARHRRERINERLKTLQHLVPNGAKVDIVTMLEEAIHYVKFLQLQVNMLSSDEYW

    IYAPT

    江南卷柏SmRSLf氨基酸序列(SEQ ID NO:50)

    CTCAACACGAATGGCAAGCCCAGAGCAAAGCGTGGATCTGCAACAGATCCCCAAAGCGTTTACGCAAGGCACCGG

    AGAGAGAGGATCAACGAGAGGCTCAAAACTTTACAACACCTTGTTCCAAATGGTGCAAAGGTTGACATAGTGACA

    ATGCTTGAAGAAGCAATACATTACGTGAAGTTTCTACAGCTGCAAGTCAACATGTTAAGCTCTGATGAGTACTGG

    ATTTATGCACCCACA

    江南卷柏SmRSLf核苷酸序列(SEQ ID NO:51)

    LNTNGKPRAKRGSATDPQSVYARHRRERINERLKTLQHLVPNGAKVDIVTMLEEAIHYVKFLQLQVNMLSSDEYW

    TYAPT

    江南卷柏SmRSLg氨基酸序列(SEQ ID NO:52)

    CTCAACACGAATGGCAAGCCCCGAGCAAAGCGTGGATCTGCAACAGATCCCCAAAGCGTTTATGCAAGGCACCGG

    AGAGAGAGGATCAACGAGAGGCTCAAAACTTTACAACACCTTGTTCCAAATGGTGCAAAGGTTGACATTGTGACA

    ATGCTTGAAGAAGCAATACATTACGTGAAGTTTCTACAGCTGCAAGTCAACATGTTAAGCTCTGATGAGTACTGG

    ACTTATGCACCCACA

    江南卷柏SmRSLg核苷酸序列(SEQ ID NO:53)

    LNTDGKPRAKRGSATDPQSIYARQRRERINERLRALQGLVPNGAKVDIVTMLEEAINYVKFLQLQVKLLSSDEYW

    MYAPT

    江南卷柏SmRSLh氨基酸序列(SEQ ID NO:54)

    CTAAACACCGACGGAAAGCCACGCGCAAAGCGTGGATCTGCCACGGACCCGCAA GTATCTACGCTCGGCAAAGA

    AGAGAAAGGATCAACGAGCGTTTGAGAGCGCTACAAGGACTCGTACCAAACGGAGCGAAGGTTGACATTGTGACG

    ATGCTCGAGGAAGCCATCAACTATGTCAAGTTTTTGCAGCTGCAAGTAAAGCTGCTCAGCTCGGACGAGTATTGG

    ATGTACGCCCCCACA

    江南卷柏SmRSLh核苷酸序列(SEQ ID NO:55)

    MMAAQASSKRGMLLPREAVLYDDEPSMPLEILGYHGNGVGGGGCVDADYYYSWSGSSSSSSSSVLSFDQAAVGGS

    GGGCARQLAFHPGGDDDDCAMWMDAAAGAMVENTSVVAGGGNNYCHRLQFHGGAAGFGLASPGSSVVDNGLEIHE

    SNVSKPPPPAAKKRACPSGEARAAGKKQCRKGSKPNKAASASSPSPSPSPSPSPNKEQPQSAAAKVRRERISERL

    KVLQDLVPNGTKVDLVTMLEKAINYVKFLQLQVKVLATDEFWPAQGGKAPELSQVKDALDAILSSQHPNK*

    稻属(Oryza sativa subsp.Japonica)OsRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:

    56;LOC_Os01g02110.1 11971.m06853)

    ATGATGGCAGCTCAGGCAAGCAGCAAGCGCGGCATGCTGCTGCCACGGGAGGCGGTGCTCTACGACGACGAGCCC

    TCCATGCCGCTGGAGATCTTGGGCTACCACGGCAATGGCGTCGGCGGCGGTGGCTGCGTTGACGCCGATTACTAC

    TACAGCTGGTCGGGGTCCAGCTCCAGCTCCAGCTCGTCGGTGCTCAGCTTTGACCAGGCGGCGGTCGGCGGCAGC

    GGCGGCGGCTGCGCCCGGCAGCTGGCTTTCCATCCCGGCGGCGACGACGACGACTGCGCCATGTGGATGGACGCC

    GCCGCCGGCGCCATGGTCGAGAACACGTCTGTCGTCGCCGGCGGCGGCAACAACTACTGTCATCGCCTGCAGTTC

    CACGGCGGCGCCGCCGGTTTCGGACTCGCGAGCCCAGGCTCGTCGGTCGTTGACAACGGCCTCGAAATCCACGAG

    AGCAACGTCAGCAAGCCGCCACCGCCGGCAGCCAAGAAGCGCGCATGCCCGAGCGGCGAGGCGAGAGCAGCGGGG

    AAGAAGCAGTGCAGGAAAGGGAGCAAGCCAAACAAGGCTGCTTCTGCTTCTTCTCCTTCTCCTTCTCCTTCTCCT

    TCTCCTTCTCCTAACAAGGAACAACCTCAAAGCGCCGCTGCAAAGGTAAGAAGAGAGCGGATCAGTGAGAGGCTC

    AAAGTTCTTCAGGATCTCGTGCCTAATGGCACAAAGGTAGACTTGGTCACCATGCTAGAAAAGGCGATCAACTAC

    GTCAAATTCCTCCAGCTGCAAGTGAAGGTTTTGGCTACTGATGAGTTCTGGCCGGCACAAGGAGGGAAAGCACCA

    GAGCTCTCTCAAGTCAAGGACGCCTTGGACGCCATCCTATCTTCTCAGCATCCAAACAAATGA

    稻属OsRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:57;LOC_Os01g02110.1

    11971.m06853)

    MRMALVRERAMVYGGGCDAEAFGGGFESSQMGYGHDALLDIDAAALFGGYEAAASAGCALVQDGAAGWAGAGASS

    SVLAFDRAAQAEEAECDAWIEAMDQSYGAGGEAAPYRSTTAVAFDAATGCFSLTERATGGGGGAGGRQFGLLFPS

    TSGGGVSPERAAPAPAPRGSQKRAHAESSQAMSPSKKQCGAGRKAGKAKSAPTTPTKDPQSLAAKNRRERISERL

    RILQELVPNGTKVDLVTMLEKAISYVKFLQLQVKVLATDEFWPAQGGKAPEISQVKEALDAILSSSSPLMGQLMN

    *

    稻属OsRSLb氨基酸序列(SEQ ID NO:58;LOC_Os02g48060.1

    11972.m09840)

    ATGCGCATGGCGCTGGTGCGGGAGCGCGCGATGGTGTACGGTGGAGGGTGCGACGCCGAGGCGTTCGGCGGCGGG

    TTCGAGTCGTCCCAGATGGGGTACGGCCACGACGCGCTGCTCGACATCGACGCGGCGGCGCTGTTCGGGGGGTAC

    GAGGCGGCCGCCAGCGCCGGGTGCGCCCTCGTGCAGGACGGCGCCGCGGGGTGGGCGGGCGCGGGCGCGTCGTCC

    TCGGTGCTGGCGTTCGACCGCGCCGCTCAGGCGGAGGAGGCCGAGTGCGACGCGTGGATCGAAGCCATGGACCAG

    AGCTACGGCGCCGGCGGCGAGGCGGCGCCGTACCGGTCGACGACGGCCGTCGCCTTCGACGCGGCCACCGGCTGC

    TTCAGCCTGACGGAGAGAGCCACCGGCGGCGGCGGCGGCGCGGGTGGGCGGCAGTTCGGGCTGCTGTTCCCGAGC

    ACGTCGGGCGGCGGCGTCTCCCCCGAACGCGCCGCGCCGGCGCCGGCGCCCCGCGGCTCGCAGAAGCGGGCCCAC

    GCGGAGTCGTCGCAGGCCATGAGCCCTAGCAAGAAGCAGTGCGGCGCCGGCAGGAAGGCGGGCAAGGCCAAGTCG

    GCGCCGACCACCCCAACCAAGGACCCGCAAAGCCTCGCGGCCAAGAATCGGCGCGAGAGGATCAGCGAGCGGCTG

    CGGATCCTGCAGGAGCTCGTGCCCAACGGCACCAAGGTCGACCTCGTCACCATGCTCGAGAAGGCCATCAGCTAC

    GTCAAGTTCCTCCAGCTTCAAGTCAAGGTTCTTGCGACGGACGAGTTCTGGCCGGCGCAGGGAGGGAAGGCGCCG

    GAGATATCCCAGGTGAAGGAGGCGCTCGACGCCATCTTGTCGTCGTCGTCGCCGCTGATGGGACAACTCATGAAC

    TGA

    稻属OsRSLb核苷酸序列(SEQ ID NO:59;LOC_Os02g48060.1

    11972.m09840)

    MAMVAGDEAMSVPWHDVGVVVDPEAAGTAPFDAGAGYVPSYGQCQYYYYYDDHHHHPCSTELIHAGDAGSAVAVA

    YDGVDGWVHAAAAATSPSSSSALTFDGHGAEEHSAVSWMDMDMDAHGAAPPLIGYGPTAATSSPSSCFSSGGSGD

    SGMVMVTTTTPRSAAASGSQRRARPPPSPLQGSELHEYSKKQRANNKETQSSAAKSRRERISERLRALQELVPSG

    GKVDMVTMLDRAISYVKFMQMQLRVLETDAFWPASDGATPDISRVKDALDAIILSSSSPSQKASPPRSG*

    稻属OsRSLc氨基酸序列(SEQ ID NO:60;LOC_Os06g30090.1

    11976.m07553)

    ATGGCTATGGTGGCCGGCGACGAGGCGATGTCAGTGCCATGGCACGACGTCGGCGTCGTCGTCGACCCCGAGGCG

    GCCGGGACGGCGCCGTTCGACGCCGGCGCCGGCTATGTCCCATCGTACGGTCAGTGCCAATACTACTACTACTAC

    GACGACCACCACCACCACCCGTGCAGCACGGAGCTGATCCACGCGGGCGACGCTGGCAGTGCGGTTGCGGTTGCG

    TACGACGGCGTCGACGGCTGGGTTCACGCCGCCGCCGCAGCCACCTCCCCGTCCTCGTCATCTGCGCTCACCTTC

    GATGGTCACGGCGCCGAGGAGCACAGCGCAGTGTCGTGGATGGACATGGACATGGACGCGCACGGCGCCGCGCCT

    CCCCTAATCGGCTACGGCCCGACGGCGGCGACCTCCTCCCCCTCCTCCTGCTTCAGCTCCGGCGGCTCCGGCGAC

    AGCGGCATGGTGATGGTGACCACCACCACCCCGAGGAGCGCCGCCGCCTCTGGTTCGCAGAGGCGGGCACGCCCG

    CCGCCGTCGCCGTTGCAGGGATCAGAGCTGCACGAGTACTCCAAGAAGCAGCGCGCCAACAACAAGGAGACACAG

    AGCTCAGCTGCCAAGAGCCGGCGGGAGAGGATCAGCGAGCGGCTGAGGGCGCTGCAGGAGCTGGTGCCGAGCGGC

    GGGAAGGTGGACATGGTGACCATGCTGGACAGGGCCATCAGCTACGTCAAGTTCATGCAGATGCAGCTCAGGGTG

    CTGGAGACCGACGCGTTCTGGCCGGCGTCCGACGGCGCCACGCCGGACATCTCCCGGGTCAAGGACGCGCTCGAC

    GCCATCATCCTCTCCTCGTCCTCGCCCTCGCAAAAGGCTTCTCCTCCTCGGTCGGGCTAG

    稻属OsRSLc核苷酸序列(SEQ ID NO:61;LOC_Os06g30090.1

    11976.m07553)

    MEDSEAMAQLLGVQYFGNDQEQQQPAAAAPPAMYWPAHDAADQYYGSAPYCYMQQQQHYGCYDGGAMVAGGDFFV

    PEEQLVADPSFMVDLNLEFEDQHGGDAGGAGSSAAAAAAATKMTPACKRKVEDHKDESCTDNVARKKARSTAATV

    VQKKGNKNAQSKKAQKGACSRSSNQKESNGGGDGGNVQSSSTNYLSDDDSLSLEMTSCSNVSSASKKSSLSSPAT

    GHGGAKARAGRGAATDPQSLYARKRRERINERLKILQNLIPNGTKVDISTMLEEAVHYVKFLQLQIKLLSSDDMW

    MFAPIAYNGVNVGLDLKISPPQQQ*

    稻属OsRSLd氨基酸序列(SEQ ID NO:62;LOC_Os03g10770.1

    11973.m06529)

    ATGGAGGACTCGGAGGCGATGGCGCAGCTGCTCGGCGTGCAGTACTTCGGCAATGACCAGGAGCAGCAGCAGCCG

    GCGGCGGCGGCGCCGCCGGCGATGTACTGGCCGGCGCACGACGCGGCCGACCAGTACTACGGCTCGGCGCCATAC

    TGCTACATGCAGCAGCAGCAGCATTACGGGTGCTACGACGGCGGCGCGATGGTGGCCGGCGGCGACTTCTTCGTG

    CCGGAGGAGCAGCTGGTGGCCGACCCGAGCTTCATGGTGGACCTGAACCTCGAGTTCGAGGACCAGCACGGCGGC

    GATGCTGGCGGCGCTGGGAGCAGCGCCGCCGCCGCCGCCGCCGCCACCAAGATGACACCGGCGTGCAAGAGGAAG

    GTTGAGGATCACAAGGATGAGAGCTGCACGGACAACGTCGCGAGGAAGAAGGCGCGCTCCACGGCAGCAACAGTG

    GTGCAGAAGAAGGGTAATAAGAACGCGCAGTCAAAGAAGGCGCAGAAGGGCGCGTGCAGCCGGAGCAGCAACCAG

    AAGGAGAGCAATGGCGGCGGCGACGGCGGCAATGTGCAGAGCTCGAGCACCAACTACCTCTCTGATGACGACTCG

    CTGTCGCTGGAGATGACTTCGTGCAGCAACGTGAGCTCGGCGTCCAAGAAGTCGTCGTTGTCATCGCCGGCGACC

    GGGCACGGCGGCGCGAAGGCGAGGGCCGGGCGCGGGGCGGCGACCGATCCGCAAAGCCTCTATGCCAGGAAGAGG

    AGAGAAAGGATCAATGAACGGCTAAAGATACTGCAGAATCTTATCCCAAATGGAACCAAGGTGGACATCAGCACG

    ATGCTTGAAGAAGCAGTTCACTACGTCAAGTTCTTGCAGCTCCAAATCAAGCTTCTGAGCTCGGATGATATGTGG

    ATGTTCGCGCCGATCGCGTACAACGGGGTCAACGTCGGGCTCGACCTCAAGATCTCTCCACCGCAGCAGCAATGA

    稻属OsRSLd核苷酸序列(SEQ ID NO:63;LOC_Os03g10770.1

    11973.m06529)

    MESGGVIAEAGWSSLDMSSQAEESEMMAQLLGTCFPSNGEDDHHQELPWSVDTPSAYYLHCNGGSSSAYSSTTSS

    NSASGSFTLIAPRSEYEGYYVSDSNEAALGISIQEQGAAQFMDAILNRNGDPGFDDLADSSVNLLDSIGASNKRK

    IQEQGRLDDQTKSRKSAKKAGSKRGKKAAQCEGEDGSIAVTNRQSLSCCTSENDSIGSQESPVAAKSNGKAQSGH

    RSATDPQSLYARKRRERINERLKILQNLVPNGTKVDISTMLEEAMHYVKFLQLQIKLLSSDEMWMYAPIAYNGMN

    IGIDLNLSQH*

    稻属OsRSLe氨基酸序列(SEQ ID NO:64;LOC_Os03g42100.1

    11973.m09268)

    ATGGAGTCCGGAGGGGTGATCGCGGAGGCGGGGTGGAGCTCGCTCGACATGTCGTCGCAGGCCGAGGAGTCGGAG

    ATGATGGCGCAGCTGCTTGGAACCTGCTTCCCCTCCAATGGCGAGGATGATCATCACCAAGAGCTTCCTTGGTCG

    GTTGACACCCCCAGTGCCTACTACCTCCATTGCAATGGAGGTAGCTCAAGTGCATACAGCTCTACCACTAGCAGC

    AACAGTGCTAGTGGTAGCTTCACTCTCATTGCACCAAGATCTGAGTATGAGGGGTACTATGTGAGTGACTCTAAT

    GAGGCGGCCCTCGGGATCAGCATCCAGGAGCAAGGTGCAGCTCAGTTCATGGATGCCATTCTCAACCGGAACGGC

    GATCCGGGCTTCGATGATCTCGCTGACTCGAGCGTTAATCTGCTGGATTCCATCGGCGCTTCTAACAAGAGAAAG

    ATTCAGGAGCAAGGCAGGCTAGATGACCAAACGAAAAGTAGGAAATCTGCGAAGAAGGCTGGCTCGAAGCGGGGA

    AAGAAGGCGGCGCAATGTGAAGGTGAAGATGGCAGCATTGCTGTCACCAACAGGCAAAGCTTGAGCTGCTGCACC

    TCTGAAAATGATTCGATTGGTTCTCAAGAATCTCCTGTTGCTGCTAAGTCGAATGGCAAGGCTCAATCTGGCCAT

    CGGTCAGCAACCGATCCCCAGAGCCTCTATGCAAGGAAAAGAAGAGAGAGGATCAATGAGAGGCTCAAGATTCTG

    CAGAACCTTGTACCAAATGGAACCAAAGTAGATATCAGCACTATGCTTGAAGAGGCAATGCATTACGTGAAGTTC

    TTGCAGCTTCAAATCAAGCTCCTCAGCTCTGATGAAATGTGGATGTACGCACCGATTGCTTACAACGGGATGAAC

    ATCGGGATCGATTTGAACCTCTCTCAGCATTGA

    稻属OsRSLe核苷酸序列(SEQ ID NO:65;LOC_Os03g42100.1

    11973.m09268)

    MDARCANIWSSADARSEESEMIDQLKSMFWSSTDAEINFYSPDSSVNSCVTTSTMPSSLFLPLMDDEGFGTVQLM

    HQVITGNKRMFPMDEHFEQQQKKPKKKTRTSRSVSSSSTITDYETSSELVNPSCSSGSSVGEDSIAATDGSVVLK

    QSDNSRGHKQCSKDTQSLYAKRRRERINERLRILQQLVPNGTKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSDDTWMF

    APLAYNGMNMDLGHTLAENQE*

    稻属OsRSLf氨基酸序列(SEQ ID NO:66;LOC_Os11g41640.1

    11981.m08005)

    ATGGATGCAAGGTGTGCAAACATCTGGAGCTCTGCTGATGCAAGGAGTGAGGAATCTGAGATGATTGATCAACTA

    AAGTCCATGTTCTGGAGCAGCACTGATGCTGAAATCAACTTTTATTCTCCTGACAGTAGTGTAAATTCTTGTGTC

    ACAACTAGCACAATGCCTAGCAGCTTGTTTCTTCCTCTGATGGATGATGAGGGATTTGGCACAGTGCAATTGATG

    CATCAGGTCATCACTGGGAACAAGAGGATGTTCCCCATGGATGAGCACTTTGAGCAGCAGCAGAAGAAGCCGAAG

    AAGAAAACCCGAACTTCTCGCTCGGTATCAAGTAGTTCAACCATTACTGACTATGAGACTAGCTCTGAACTTGTC

    AATCCTAGCTGTTCCTCCGGGAGCAGCGTCGGAGAGGATTCAATTGCTGCAACTGATGGATCTGTAGTGCTGAAA

    CAAAGTGACAATTCAAGAGGCCATAAGCAGTGCTCCAAGGATACACAAAGCCTCTATGCTAAGAGGAGAAGGGAA

    AGGATTAATGAGAGACTGAGAATACTTCAGCAGCTTGTTCCCAATGGCACTAAAGTTGACATCAGCACAATGCTG

    GAGGAAGCAGTTCAGTATGTCAAGTTTTTGCAGTTGCAAATAAAGCTATTGAGCTCTGACGACACATGGATGTTT

    GCGCCCCTAGCCTATAATGGCATGAACATGGATCTCGGTCATACTCTTGCTGAAAACCAAGAATGA

    稻属OsRSLf核苷酸序列(SEQ ID NO:67;LOC_Os11g41640.1

    11981.m08005)

    MECSSFEAICNESEMIAHLQSLFWSSSDADPCFGSSSFSLISSEGYDTMTTEFVNSSTNVCFDYQDDSFVSAEET

    TIGNKRKVQMDTENELMTNRSKEVRTKMSVSKACKHSVSAESSQSYYAKNRRQRINERLRILQELIPNGTKVDIS

    TMLEEAIQYVKFLHLQIKLLSSDEMWMYAPLAFDSGNNRLYQNSLSQE*

    稻属OsRSLg氨基酸序列(SEQ ID NO:68;LOC_Os12g32400.1

    11982.m07043)

    ATGGAATGCAGCTCCTTTGAAGCAATCTGCAATGAGTCGGAGATGATTGCGCATTTGCAGTCATTGTTCTGGAGC

    AGCAGCGATGCTGATCCTTGTTTTGGTAGCTCATCATTTTCTCTCATCAGTAGTGAGGGCTACGACACAATGACC

    ACAGAGTTTGTGAATAGCAGCACAAATGTATGTTTTGATTACCAAGATGATAGCTTCGTTTCAGCAGAGGAGACT

    ACCATTGGTAACAAGAGAAAAGTTCAGATGGATACTGAGAATGAGCTGATGACGAACCGCAGCAAGGAAGTTCGC

    ACCAAGATGTCGGTGTCAAAAGCATGCAAACATTCTGTTTCTGCAGAGAGCTCACAGTCTTATTATGCAAAGAAC

    AGGAGACAGAGGATCAATGAGAGATTGAGAATACTGCAAGAACTGATCCCTAATGGAACAAAAGTTGACATCAGC

    ACAATGTTGGAGGAAGCAATTCAGTATGTCAAGTTTCTACACCTGCAAATCAAGCTCTTGAGCTCTGATGAAATG

    TGGATGTATGCGCCCCTTGCTTTTGACAGTGGTAACAACAGGCTCTATCAGAACTCTCTGTCACAAGAGTAG

    稻属OsRSLg核苷酸序列(SEQID NO:69;LOC_Os12g32400.1

    11982.m07043)

    MEGGGLIADMSWTVFDLPSHSDESEMMAQLFSAFPIHGEEEGHEQLPWFDQSSNPCYYSCNASSTAYSNSNASSI

    PAPSEYEGYCFSDSNEALGVSSSIAPHDLSMVQVQGATEFLNVIPNHSLDSFGNGELGHEDLDSVSGTNKRKQSA

    EGEFDGQTRGSKCARKAEPKRAKKAKQTVEKDASVAIPNGSCSISDNDSSSSQEVADAGATSKGKSRAGRGAATD

    PQSLYARKRRERINERLKTLQNLVPNGTKVDISTMLEEAVHYVKFLQLQIKLLSSDEMWMYAPIAYNGMNIGLDL

    NIDT*

    稻属OsRSLh氨基酸序列(SEQ ID NO:70;LOC_Os12g39850.1

    11982.m07769)

    ATGGAGGGTGGAGGACTGATCGCCGATATGAGCTGGACCGTCTTCGACTTGCCATCGCACAGCGATGAGTCGGAG

    ATGATGGCGCAGCTCTTCAGTGCATTCCCCATCCATGGTGAGGAGGAAGGCCATGAGCAGCTCCCATGGTTTGAT

    CAATCTTCCAATCCATGCTACTATAGCTGCAATGCTAGCAGCACTGCATACAGCAACAGCAATGCTAGTAGCATT

    CCTGCTCCATCTGAGTATGAAGGATACTGCTTCAGTGACTCAAATGAGGCCCTGGGTGTCAGCTCCAGCATTGCA

    CCACATGACCTGAGCATGGTCCAGGTGCAAGGTGCAACTGAGTTTCTGAATGTGATCCCAAACCATTCCCTTGAT

    TCATTCGGTAATGGCGAGCTGGGCCACGAGGATCTTGATTCGGTTAGTGGGACTAACAAGAGAAAACAGTCGGCA

    GAAGGAGAATTTGATGGCCAAACAAGAGGTTCAAAATGCGCGAGAAAGGCTGAACCGAAGCGAGCGAAGAAGGCC

    AAGCAAACTGTGGAGAAGGATGCAAGTGTTGCCATCCCAAATGGGAGCTGTTCCATTTCTGACAATGATTCCAGT

    TCATCCCAGGAGGTTGCAGATGCTGGTGCTACTTCGAAAGGCAAATCCCGGGCTGGCCGCGGAGCAGCCACTGAT

    CCCCAGAGCCTCTATGCAAGGAAAAGGAGAGAGAGGATCAATGAGAGGCTCAAGACACTTCAGAACCTTGTGCCC

    AATGGCACCAAAGTTGATATCAGCACCATGCTTGAGGAGGCAGTCCACTATGTGAAGTTCCTGCAGCTTCAGATC

    AAGCTCCTCAGCTCCGATGAAATGTGGATGTATGCGCCAATTGCGTACAACGGGATGAACATTGGGCTCGATCTG

    AACATTGATACATGA

    稻属OsRSLh核苷酸序列(SEQID NO:71;LOC_Os12g39850.1

    11982.m07769)

    MAQFLGAHGDHCFTYEQMDESMEAMAAMFLPGLDTDSNSSSGCLNYDVPPQCWPQHGHSSSVTSFPDPAHSYGSF

    EFPVMDPFPIADLDAHCAIPYLTEDLISPPHGNHPSARVEEATKVVTPVATKRKSSAAMTASKKSKKAGKKDPIG

    SDEGGNTYIDTQSSSSCTSEEGNLEGNAKPSSKKMGTRANRGAATDPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGTK

    VDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSDDTWMYAPIAYNGVNISNIDLNISSLQK*

    稻属OsRSLi氨基酸序列(SEQ ID NO:72;LOC_Os07g39940.1

    11977.m08236)

    ATGGCGCAGTTTCTTGGAGCTCATGGTGATCACTGCTTCACCTACGAGCAAATGGATGAGTCCATGGAGGCAATG

    GCAGCGATGTTCTTGCCTGGCCTTGACACCGACTCCAATTCTTCTTCTGGTTGTCTCAACTACGATGTGCCTCCA

    CAATGCTGGCCTCAGCATGGCCATAGCTCTAGCGTCACCAGCTTCCCTGATCCAGCTCATAGCTATGGAAGCTTT

    GAGTTCCCGGTCATGGATCCGTTCCCGATCGCCGATCTCGACGCGCATTGCGCCATCCCCTACCTTACTGAGGAT

    CTGATCAGCCCTCCACATGGCAACCATCCATCAGCAAGAGTGGAAGAAGCTACAAAGGTTGTTACACCAGTGGCT

    ACCAAGAGGAAGTCTAGTGCTGCCATGACGGCATCAAAGAAGAGCAAGAAGGCTGGCAAAAAAGATCCTATTGGC

    AGCGACGAAGGCGGCAACACCTACATTGATACGCAAAGTTCTAGCAGTTGCACCTCAGAGGAAGGAAACCTGGAG

    GGCAACGCGAAGCCGAGCTCGAAGAAGATGGGTACTAGGGCCAACCGTGGGGCGGCAACCGATCCCCAGAGTCTC

    TATGCAAGGAAGAGGAGAGAGAGGATCAATGAAAGATTGAGGATCCTGCAGAACTTGGTTCCCAATGGAACAAAG

    GTTGACATCAGTACAATGCTGGAGGAAGCAGTGCAGTATGTCAAATTTTTGCAACTTCAGATTAAGTTGCTAAGC

    TCTGATGACACGTGGATGTATGCACCAATCGCTTACAATGGAGTCAACATCAGCAATATTGATCTGAACATCTCT

    TCTCTGCAAAAATAA

    稻属OsRSLi核苷酸序列(SEQ ID NO:73;LOC_Os07g39940.1

    11977.m08236)

    MALAKDRMGSVQTCPYNGNVMGDFSSMGSYGFDEYQKVAFYEEGNSTFEKTSGLMIKNLAMTSSPSSLGSPSSAI

    SGELVFQATDHQAEEAHSLISFKGIGFDNIMHN GSLLSFEQSSRVSQTSSQKDDYSAWEGNLSYNYQWNEMNPK

    CNTSPRLMEDFNCFQRAGNFISMTGKENHGDWLYAESTIVADSIQDSATPDASSFHKRPNMGESMQALKKQCNNA

    TKKPKPKSAAGPAKDLQSIAAKNRRERISERLKVLQDLVPNGSKVDLVTMLEKAISYVKFLQLQVKVLATDELWP

    VQGGKAPDISQVKEAIDALLSSQTKDGNSSSSPK*

    Populus trichocarpa PtRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:74)

    ATGGCACTTGCCAAGGACCGTATGGGATCGGTTCAAACTTGCCCCTATAATGGAAATGTGATGGGGGATTTTTCC

    TCCATGGGGTCTTACGGATTTGATGAATATCAGAAGGTAGCATTTTATGAAGAGGGAAATAGCACCTTTGAGAAA

    ACCAGTGGGCTTATGATCAAGAATTTAGCTATGACCTCTTCTCCTTCTTCTCTTGGCAGTCCGAGCAGCGCGATT

    TCTGGTGAATTAGTGTTTCAGGCTACTGACCATCAAGCTGAGGAAGCTCATTCTTTGATCAGCTTCAAAGGTATC

    GGATTCGATAACATCATGCATAATAATGGATCTTTGCTTAGCTTTGAGCAAAGTAGTAGGGTTTCTCAAACTAGT

    AGCCAGAAAGATGACTACTCAGCCTGGGAGGGTAATTTGAGTTACAACTACCAGTGGAACGAAATGAATCCAAAA

    TGTAACACAAGTCCTCGGTTGATGGAAGATTTTAATTGCTTTCAAAGAGCTGGCAACTTCATTTCCATGACTGGA

    AAGGAAAATCATGGTGATTGGTTATACGCTGAATCCACAATTGTTGCTGATAGCATTCAGGATTCTGCAACACCA

    GATGCCAGCAGCTTCCATAAGCGTCCTAATATGGGAGAGAGTATGCAGGCTCTAA GAAGCAATGCAACAATGCA

    ACAAAAAAGCCAAAACCGAAGTCCGCAGCAGGTCCAGCTAAGGATCTACAGAGTATTGCTGCCAAGAATCGACGA

    GAGAGGATTAGCGAGAGGCTTAAGGTATTGCAGGATTTAGTCCCTAATGGCTCAAAGGTTGATTTGGTTACTATG

    CTAGAGAAAGCCATTAGTTATGTTAAGTTTCTTCAATTGCAAGTAAAGGTGTTAGCCACTGATGAATTATGGCCA

    GTTCAAGGTGGTAAAGCTCCTGATATTTCTCAAGTAAAGGAAGCCATCGATGCCCTACTCTCATCTCAGACTAAA

    GACGGAAACTCAAGCTCAAGCCCAAAGTAA

    Populus trichocarpa PtRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:75)

    MALAKDRMDSVQTCALYGNVMGDLSSLGPNYRFDEEGDRNFEKNSALMIKNLAMSPSPPSLGSPSSANSGELVFQ

    ATDNQVEEAHSLINFKGTGFDSIMHANGSLISFEQSNRVSQTSSHKDDYSAWEGNLSCNYQWNQINPKCNANPRL

    MEDLNCYQSASNFNSITNSAEKENHGDWLYTHESTIVTDSIPDSATPDASSFHKRPNMGESMQALKKQRDSATKK

    PKPKSAGPAKDPQSIAAKNRRERISERLKMLQDLVPNGSKVDLVTMLEKAISYVKFLQLQVKVLATDEFWPVQGG

    KAPDISQVKGAIDATLSSQTKDRNSNSSSK*

    Populus trichocarpa PtRSLb氨基酸序列(SEQ ID NO:76)

    ATGGCACTTGCCAAGGACCGTATGGATTCGGTTCAAACTTGCGCCCTTTATGGAAATGTGATGGGGGATCTTTCC

    TCCTTGGGGCCTAATTATAGATTTGATGAAGAGGGAGATAGGAACTTTGAGAAAA TAGTGCGCTTATGATCAAG

    AATTTAGCTATGAGCCCTTCTCCTCCTTCTCTTGGCAGTCCAAGCAGTGCAAATTCTGGTGAACTAGTGTTTCAG

    GCTACTGACAATCAAGTTGAGGAAGCTCATTCTTTGATCAACTTCAAAGGTACCGGATTTGATAGTATCATGCAT

    GCTAATGGATCTTTGATTAGCTTTGAGCAAAGTAATAGGGTTTCTCAAACTAGTAGTCACAAAGATGACTACTCT

    GCTTGGGAGGGTAATTTGAGTTGCAATTACCAGTGGAACCAAATCAATCCAAAATGTAACGCAAATCCTCGGTTG

    ATGGAAGATCTTAATTGCTATCAAAGTGCAAGCAACTTCAACTCCATAACCAACAGTGCTGAAAAGGAAAACCAT

    GGTGATTGGTTATACACTCATGAATCCACAATTGTTACTGATAGCATTCCCGATTCTGCAACACCAGATGCCAGC

    AGCTTCCATAAGCGTCCCAATATGGGAGAGAGTATGCAGGCTCTAAAGAAGCAACGCGACAGCGCCACAAAAAAG

    CCGAAACCCAAGTCTGCTGGTCCAGCTAAGGATCCACAAAGTATTGCTGCCAAGAATCGACGAGAGCGGATTAGC

    GAGCGCCTTAAGATGTTGCAGGATTTAGTCCCTAACGGCTCCAAGGTTGATTTGGTTACTATGCTAGAGAAAGCC

    ATTAGTTATGTTAAGTTTCTTCAATTGCAAGTAAAGGTGTTGGCCACTGATGAATTCTGGCCAGTTCAAGGTGGT

    AAAGCTCCTGATATTTCTCAAGTAAAGGGAGCCATTGATGCCACACTCTCATCTCAGACTAAAGACAGAAATTCA

    AACTCAAGCTCAAAGTGA

    Populus trichocarpa PtRSLb核苷酸序列(SEQ ID NO:77)

    MAEGEWSSLGGMYTSEEADFMAQLLGNCPNQVDSSSNFGVPSSFWPNHEPTTDMEGANECLFYSLDFANINLHHF

    SQGSSSYSGGSGILFPNTSQDSYYMSDSHPILANNNSSMSMDFCMGDSYLVEGDDCSNQEMSNSNEEPGGNQTVA

    ALPENDFRAKREPEMPASELPLEDKSSNPPQISKKRSRNSGDAQKNKRNASSKKSQKVASTSNNDEGSNAGLNGP

    ASSGCCSEDESNASHELNRGASSSLSSKGTATLNSSGKTRASRGAATDPQSLYARKRRERINERLRILQTLVPNG

    TKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSEDLWMYAPIAYNGMDIGLDHLKVTAP*

    Populus trichocarpa PtRSLc氨基酸序列(SEQ ID NO:78)

    ATGGCAGAGGGAGAGTGGAGTTCTCTTGGTGGAATGTACACTAGTGAGGAGGCTGATTTCATGGCACAGTTGCTT

    GGTAACTGTCCTAATCAGGTTGATTCAAGTTCAAACTTTGGAGTTCCATCTAGTTTCTGGCCTAACCACGAACCA

    ACAACGGACATGGAAGGGGCTAATGAATGTTTATTTTATTCTTTGGATTTTGCTAATATTAATTTGCACCATTTT

    TCACAAGGGAGTAGTAGTTATAGTGGTGGCAGTGGCATTCTTTTTCCCAACACAAGCCAAGATAGCTACTACATG

    AGTGATTCTCATCCAATTTTGGCTAACAATAATAGCTCAATGTCAATGGATTTTTGCATGGGAGACTCATATCTC

    GTTGAAGGCGATGACTGCTCAAACCAAGAAATGAGCAATAGCAATGAGGAGCCTGGTGGAAACCAGACTGTAGCT

    GCTCTTCCTGAAAACGATTTTCGGGCCAAGAGAGAACCAGAGATGCCAGCTTCTGAACTACCCCTGGAAGACAAA

    AGCAGCAACCCACCTCAGATTTCTAAGAAAAGATCACGAAATTCAGGAGATGCTCAAAAGAACAAGAGGAATGCA

    AGTTCAAAGAAGAGCCAGAAGGTTGCCTCGACTAGCAACAATGATGAAGGAAGTAATGCTGGCCTTAATGGGCCT

    GCCTCAAGCGGTTGCTGCTCAGAGGATGAATCCAATGCCTCTCATGAGCTCAATAGAGGAGCGAGTTCAAGTTTG

    AGCTCGAAAGGGACTGCAACTCTCAACTCAAGTGGCAAAACAAGAGCCAGCAGGGGGGCAGCCACTGATCCCCAG

    AGTCTCTATGCAAGGAAAAGAAGAGAAAGAATAAATGAGAGGCTGAGAATTCTACAAACCCTTGTCCCCAACGGA

    ACAAAGGTTGACATTAGCACAATGCTTGAAGAAGCTGTCCAGTATGTGAAGTTTTTGCAACTCCAAATTAAGCTG

    CTAAGCTCTGAGGACTTGTGGATGTATGCGCCTATCGCTTACAACGGGATGGACATCGGTCTTGATCATCTGAAG

    GTTACCGCACCATGA

    Populus trichocarpa PtRSLc核苷酸序列(SEQ ID NO:79)

    MEPIGATAEGEWSSLSGMYTSEEADFMEQLLVNCPPNQVDSSSSFGVPSSFWPNHESTMNMEGANECLLYSLDIA

    DTNLYHFSQVSSGYSGELSNGNVEESGGNQTVAALPEPESNLQPKRESKMPASELPLEDKSRKPPENSKKRSRRT

    GDAQKNKRNVRSKKSQKVASTGNNDEESNGGLNGPVSSGCCSEDESNASQELNGGASSSLSSKGTTTLNSSGKTR

    ASKGAATDPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGTKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSEDLWMYAPIAYN

    GMDIGLDHLKLTTPRRL*

    Populus trichocarpa PtRSLd氨基酸序列(SEQ ID NO:80)

    ATGGAGCCTATTGGAGCCACTGCGGAGGGAGAGTGGAGTTCTCTTAGTGGAATGTACACAAGTGAGGAGGCTGAT

    TTCATGGAACAGTTGCTTGTCAACTGTCCTCCTAATCAGGTTGATTCAAGTTCAAGCTTTGGAGTTCCATCTAGT

    TTTTGGCCTAACCATGAATCAACAATGAACATGGAAGGGGCCAATGAATGTTTATTGTATTCTTTGGATATTGCT

    GATACTAATCTGTACCATTTTTCACAAGTGAGCAGTGGTTATAGTGGTGAATTGAGCAATGGAAATGTGGAAGAG

    TCTGGTGGAAACCAGACTGTAGCTGCTCTTCCTGAACCTGAAAGCAATTTGCAACCCAAGAGAGAATCAAAGATG

    CCAGCATCTGAACTACCCCTGGAAGATAAAAGCAGAAAGCCACCTGAGAATTCCAAGAAAAGATCACGACGTACG

    GGAGATGCCCAAAA AACAAGAGGAATGTAAGGTCAAAGAAGAGCCAGAAGGTTGCCTCGACTGGCAACAATGAT

    GAAGAAAGCAATGGTGGCCTTAATGGTCCTGTCTCAAGCGGTTGCTGCTCAGAGGATGAATCCAATGCCTCCCAG

    GAGCTCAATGGAGGAGCGAGTTCAAGTTTGAGCTCAAAAGGGACAACAACTCTCAACTCAAGTGGCAAA CAAGA

    GCCAGTAAGGGGGCAGCCACTGATCCCCAGAGCCTCTATGCAAGGAAAAGAAGAGAAAGAATAAATGAGAGGCTG

    AGAATTCTACAAAACCTTGTCCCCAATGGAACAAAGGTTGACATTAGCACAATGCTTGAAGAGGCTGTCCAGTAT

    GTGAAGTTTTTGCAACTCCAAATTAAGCTGCTAAGCTCTGAAGACCTGTGGATGTATGCTCCTATCGCGTACAAT

    GGTATGGACATCGGTCTTGATCATCTGAAGCTTACCACACCAAGACGATTGTAG

    Populus trichocarpa PtRSLd核苷酸序列(SEQ ID NO:81)

    MNTQAMEAFRDGELWNFSRMFSMEEPDCTPELLGQCSFLQDTDEGLHFTIPSAFFPAPESDASMAEDESLFYSWH

    TPNPNLHFDSQESSNNSNSSSSVFLPYSSHESYFFNDSNPIQATNNNSMSMDIMDEENIGLFMPLFPEIAMAETA

    CMNGDMSGDKTGDLDDNLKPAANDVLAKGLQLKRKLDVPEPIANTLDDMKKKARVTRNVQKTRKVGQSKKNQKNA

    PDISHDEEESNAGPDGQSSSSCSSEEDNASQDSDSKVSGVLNSNGKTRATRGAATDPQSLYARKRRERINERLKI

    LQNLVPNGTKVDISTMLEEAVHYVNFLQLQIKLLSSDDLWMYAPLAYNGIDIGLNQKLSMFL*

    Populus trichocarpa PtRSLe氨基酸序列(SEQ ID NO:82)

    ATGAATACGCAGGCTATGGAAGCCTTTCGTGATGGAGAATTATGGAACTTCAGCAGAATGTTCTCCATGGAAGAG

    CCTGATTGCACCCCAGAATTACTTGGTCAGTGCTCTTTTCTTCAGGATACTGATGAAGGATTGCATTTTACAATC

    CCATCAGCTTTCTTCCCTGCTCCTGAATCCGACGCGAGCATGGCTGAGGACGAGAGTTTGTTTTATTCTTGGCAT

    ACTCCCAACCCCAATTTGCATTTTGATTCTCAAGAAAGTAGTAATAACAGTAATTCTAGCAGTAGTGTATTTCTT

    CCCTATTCCAGCCATGAATCCTACTTCTTCAATGATTCTAATCCCATTCAAGCTACGAACAATAACTCTATGTCC

    ATGGATATTATGGATGAGGAAAATATTGGCTTGTTTATGCCACTTTTTCCTGAAATTGCAATGGCAGAAACTGCC

    TGTATGAATGGAGATATGAGCGGTGACAAAACAGGAGATTTAGATGATAATCTGAAGCCAGCAGCTAATGATGTT

    CTGGCCAAGGGATTGCAGCTCAAAAGGAAGCTTGATGTTCCAGAACCAATAGCCAACACATTGGACGACATGAAG

    AAAAAAGCCCGGGTTACAAGAAATGTGCAAAAGACTAGGAAGGTTGGACAGTCAAAAAAAAATCAGAAGAACGCA

    CCAGATATTAGCCATGATGAAGAAGAGAGTAATGCTGGACCAGACGGACAAAGTTCCAGCAGTTGTAGTTCAGAA

    GAGGACAATGCCTCTCAGGATTCTGATTCCAAGGTTTCTGGAGTTCTCAATTCCAATGGAAAAACAAGAGCTACT

    AGGGGAGCTGCCACAGACCCCCAGAGCCTTTATGCAAGGAAA GAAGGGAGAGGATAAACGAGAGACTGAAAATC

    TTGCAGAATCTTGTCCCTAACGGAACCAAGGTTGATATCAGCACGATGCTAGAAGAGGCAGTCCATTACGTAAAC

    TTTTTGCAGCTTCAAATCAAGCTTTTGAGCTCGGATGATCTATGGATGTATGCACCTCTGGCTTACAATGGAATA

    GATATTGGACTCAACCAGAAGCTCTCTATGTTTCTATGA

    Populustrichocarpa PtRSLe核苷酸序列(SEQ ID NO:83)

    MAQESTWSSFDATMLAEEESRMIAQLLSNYQCFGEQDRDVGCCELPPSSCCSSHAADSCYCWSANENSNPGLCYW

    SQSGDESDGAHAIGTVPVFTNHCLVGDQVAVNQTLSIHEPTAAHAEMPKRKIESHASEDDFRRQSSKKKLQAPTN

    ALKSVKKARPGRNQKSIVCGDEEENNARSSGRSCCSYSSEEDSQAFQADLNAKTRSNRWPATDPQSLYAKQRRER

    INARLRTLQNLVPNGTKVDISTMLEEAVRYVKFLQLQIKLLSSDELWMYAPVVHSGMIDGQVNSEIFVSANTRNE

    WF*

    小果野蕉(Musa acuminata)MaRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:84;GI102139852,

    ABF70010.1)

    atggctcaggagtcaacttggagctcgtttgatgctacaatgcttgctgaggaggagtcccgaatgatcgcacaa

    ttgctcagcaactaccagtgttttggcgagcaagatcgagatgttggatgctgtgaactcccgccatcgtcttgt

    tgttcttctcatgcagctgattcatgttactgttggtcagcaaatgagaacagtaacccgggtttgtgctactgg

    tctcagagtggagatgaatccgatggagcacatgcaatcggcactgtgccggtcttcacgaaccattgcttggtg

    ggagatcaagtcgctgtgaatcaaactttgagcattcacgaacctactgctgctcatgcagagatgccaaagcgc

    aagatagagtctcatgcttctgaagatgatttccgtcgtcaaagttctaagaaaaagcttcaggctccgacgaat

    gctctgaagagcgtgaagaaggcacgacctgggaggaaccagaagagcattgtgtgtggtgatgaggaagagaac

    aatgccaggagcagtggccggagttgctgcagctacagctctgaggaagactcacaagctttccaggctgatctt

    aatgcaaaaacacgatcgaatcgatggccagccacagatcctcaaagcctctatgcaaagcaaagaagggaaaga

    atcaatgctagattgaggacattgcagaacctggtgcctaatggaactaaagttgacattagcacaatgctcgaa

    gaagctgttcgttacgtcaagttcttgcagctgcagataaagcttttgagctcggatgagctgtggatgtacgct

    cctgttgtccacagtgggatgattgatggccaagtcaactcagagatatttgtgtctgcaaatactcgtaatgag

    tggttctga

    小果野蕉(Musa acuminata)MaRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:85).

    MEPIGTFPEGEWDFFRKMFASEDHEYYSQQFLDQNSLLLGENDGLNNGTQSTFCTAEIGENERMFYSFDHAHIQN

    SNYIPQTQENSYNSNSSASDDTNYYFSYPNHVLENNINNCISNDFRMDENLFASSVPSLNEIVMEENVRMNEDSA

    SDDHIVEKNGYNTQIMEPFDLHTKHEMQMKLKRKLDVIEVEVPVEEKINNNPKKKPRVSNDGQGCMKNARSKKNH

    KVIASHEEEMTEEINRGSNGNSSSSNISEDDNASQENSGGTTLNSNGKTRASRGSATDPQSLYARKRRERINERL

    RVLQNLVPNGTKVDISTMLEEAVNYVKFLQTQIKLLSSDDMWMYAPLAYNGLDLGLNLNLNSSLPL*

    Medicago truncatula MtRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:86;AC140548.11

    GI:156231148)

    atggaacctataggtactttccctgaaggagaatgggatttctttcgcaaaatgtttgcaagtgaagatcatgaa

    tattactcacaacaatttcttgatcaaaattcacttcttctaggggaaaatgatgggttgaacaatggaacacag

    tccacattttgcactgctgaaattggtgaaaatgagcgtatgttttattcttttgatcatgctcatatccaaaac

    tctaactatattcctcaaactcaagagaatagttacaatagcaattctagtgctagtgatgatacaaattactat

    tttagttatcctaatcatgtactagaaaataatattaataattgtatatccaatgattttcgcatggatgagaat

    ttgtttgcttcttctgttccatcccttaatgagattgtaatggaagagaatgtgagaatgaatgaagattctgca

    agtgatgatcatattgtggagaaaaatggttacaatactcaaataatggaaccttttgatcttcacaccaagcat

    gagatgcaaatgaagctcaaaaggaaacttgatgtgatagaagtggaggttcccgttgaagaaaaaattaacaac

    aatccgaagaaaaaacctcgtgtttcgaatgatggccaaggatgcatgaaaaatgcaaggtcaaagaagaaccac

    aaagttattgctagccatgaagaggagatgacagaagagattaatagaggatcaaatggaaatagttctagtagt

    aacatttctgaggatgataatgcttctcaagaaaatagtggaggaactactctcaactcaaatgggaagacaaga

    gctagtagaggatctgcaacagatccccaaagtctatatgcaaggaaaagaagagagagaataaatgaacgacta

    agagtcttacaaaatcttgtaccaaacggaacaaaggttgatatcagtacaatgcttgaagaggcagtcaattat

    gtgaaatttttacagactcaaatcaagcttttgagctctgatgatatgtggatgtatgcaccacttgcttacaat

    ggacttgaccttggactcaatctcaacctcaacagctctctaccactatga

    Medicago truncatula核苷酸序列(SEQ ID NO:87,AC140548.11

    GI:156231148)

    XFLCFSQGSSSSTDNSGNNIFSITSSGAYSCDPEANFDSVSMVLCLGDAKFSPHSFQCDDNSNQQINENTDEESS

    LDPWKLAIADNNLQAKREYEMMVSEPVEVDRSRNLENLAKRLKSSIEVSKTLRSAKSGKNSKSASVSNDEDDRSL

    SLQAQRNSCFSQSDSNAYLEPNGGASKDPAPPNLHRKSRATTGAATDPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGT

    KVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSDDLWMY

    大豆(Soybean)GmRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:88)

    (gi|26056905|gb|CA799819.1|CA799819)

    ATTTTTTGTGTTTCTCACAAGGGAGTAGCTCCAGTACTGATAATAGTGGTAATAATATCTTTTCCATTACAAGTA

    GTGGAGCCTACTCCTGTGATCCAGAAGCAAACTTTGATTCTGTGTCCATGGTTTTGTGCCTTGGAGATGCCAAAT

    TTAGTCCCCATAGTTTTCAATGTGATGACAACTCAAACCAACAGATAAATGAAAACACTGATGAAGAGTCAAGTC

    TAGACCCATGGAAGTTGGCTATAGCTGACAATAATTTGCAGGCTAAGAGGGAGTATGAAATGATGGTTTCTGAAC

    CTGTAGAAGTGGATAGAAGCAGAAACCTGGAGAACCTAGCAAAAAGACTAAAGAGTTCAATAGAGGTTTCAAAAA

    CATTGAGGAGTGCTAAATCAGGGAAAAATTCAAAATCTGCTTCAGTGAGCAACGATGAAGATGATAGAAGCTTGA

    GCCTCCAAGCCCAAAGGAATAGCTGTTTTTCACAGAGTGACTCTAATGCTTATCTGGAGCCAAATGGAGGGGCAT

    CAAAAGATCCTGCACCTCCCAATTTGCATAGAAAATCAAGAGCAACTACCGGTGCTGCCACTGATCCACAGAGCC

    TCTATGCAAGAAAGAGAAGAGAAAGAATAAATGAAAGGTTGAGAATACTGCAAAATCTTGTTCCCAACGGAACTA

    AGGTGGATATCAGCACCATGCTTGAGGAAGCTGTCCAATACGTGAAGTTTTTACAGCTCCAAATTAAGCTTCTGA

    GCTCTGACGATCTGTGGATGTAT

    大豆(Soybean)GmRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:89)

    (gi|26056905|gb|CA799819.1|CA799819)

    XNLENLPKRLKSSIEVPKTSRNAKSRKNSKSASTSNDEDDRSLSLQVQRNNSCFSQSDSNAYLEPNGGASKDPAP

    PNLDRKSRATTSAAADPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGTKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKLLSSEDLW

    MYAPIVYNGINIGLDLGISPTKGRSM*

    大豆(Soybean)GmRSLb氨基酸序列(SEQ ID NO:90)

    (gi|15663066|gb|BI700437.1|BI700437)

    GAAACCTGGAGAACCTACCAAAAAGACTAAAGAGCTCAATAGAGGTCCCAAAAACATCGAGGAATGCTAAATCAA

    GGAAAAATTCAAAATCTGCTTCAACTAGCAACGATGAAGATGATAGAAGCTTGAGCCTCCAAGTCCAAAGGAATA

    ATAGCTGTTTTTCACAGAGTGACTCTAATGCTTATCTTGAGCCAAATGGAGGGGCATCAAAAGATCCTGCACCTC

    CTAATTTGGATAGAAAATCAAGAGCAACTACCAGTGCCGCCGCTGATCCACAGAGCCTCTATGCAAGAAAGAGAA

    GAGAAAGAATAAATGAAAGGCTGAGAATACTGCAAAATCTTGTCCCCAACGGAACTAAGGTGGATATCAGCACCA

    TGCTTGAAGAAGCTGTCCAATACGTTAAGTTTTTACAGCTCCAAATTAAGCTTCTGAGCTCTGAAGATTTGTGGA

    TGTATGCTCCAATTGTTTACAATGGAATAAACATTGGACTAGACCTCGGTATTTCTCCAACCAAAGGAAGATCAA

    TGTGATAGCATAGCAATTAAAGAGGATATAATATTTCATTAACTTA

    大豆(Soybean)GmRSLb核苷酸序列(SEQ ID NO:91).

    (gi|15663066|gb|BI700437.1|BI700437)

    XRSKEAEILSSNGKRKASRGSATDPQSVYARKRRERINERLRILQNLVPNGTKVDISTMLEEAVEYVKFLQLQIK

    LLSSDDMWMYAPIAYDGMDIGLHSTTIPSSSTR*

    Lettuce saligna LsRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:92)

    (gi|83790803|gb|DW051020.1|DW051020 CLLX3812.b1_H18.ab1)

    TGAGATCAAAAGAGGCTGAAATTCTGAGCTCAAATGGCAAGAGAAAAGCAAGTAGGGGGTCAGCAACTGATCCAC

    AAAGTGTCTATGCACGGAAAAGAAGAGAAAGAATTAACGAACGTTTAAGAATATTACAAAATCTTGTTCCTAATG

    GTACAAAGGTTGATATAAGCACAATGCTTGAAGAGGCTGTTGAGTACGTGAAGTTTTTGCAGCTTCAAATCAAGC

    TCTTGAGCTCCGATGATATGTGGATGTATGCTCCGATTGCATACGATGGAATGGACATTGGGCTTCATTCAACAA

    CCATCCCATCATCGTCAACAAGATAATGCAAAGTTGGGCTATCCATATTGTCACATTTTTGTTGAATAAAAGGCA

    ATCGATAACAAAATTCAAAGTTTATAAAGAGTACACATTTATGC

    Lettuce saligna LsRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:93)

    (gi|83790803|gb|DW051020.1|DW051020 CLLX3812.b1_H18.ab1)

    MASKRATTRELRAMYDDEPSSMSLELFGYHGVVVDGDDENDDTATALPQLSFVDNFKGGCGSAADYYSWAYNASG

    GTPGASSSSTSSVLSFEHAGGAGHQLAYNSGTGDDDCALWMDSMADHQHGAARFGFMNPGSADVVPEIQESSIKQ

    PAKSAQKRSSSGGEAQAAAKKQCGGGRKSKAKVVPTKDPQSAVAKVRRERISERLKVLQDLVPNGTKVDMVTMLE

    KAITYVKFLQLQVKVLATDEFWPVQGGKAPELSQVKTALDAILSSQQQP*

    普通小麦(Triticum aestivum)TaRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:94)

    (gi|25232820|gb|CA654295.1|CA654295)

    ATGGCGAGCAAGCGGGCCACCACGCGGGAGCTCCGGGCGATGTACGACGACGAGCCCTCCTCCATGTCCCTCGAG

    CTCTTCGGCTACCATGGCGTGGTCGTCGACGGTGACGATGAAAACGACGACACTGCCACCGCCCTGCCCCAGCTC

    TCCTTCGTCGACAACTTCAAAGGTGGGTGCGGGTCGGCGGCGGACTACTACAGCTGGGCGTACAACGCCTCCGGC

    GGGACGCCGGGCGCCTCCTCCAGCTCCACCTCGTCGGTGCTCAGCTTTGAGCATGCCGGCGGTGCCGGTCATCAG

    CTGGCTTATAATTCCGGCACAGGCGACGATGACTGCGCGCTCTGGATGGACAGCATGGCCGATCATCAGCACGGC

    GCGGCCAGGTTTGGGTTCATGAACCCAGGGTCGGCCGATGTCGTCCCAGAAATCCAGGAGAGCAGCATCAAGCAG

    CCGGCCAAGTCTGCGCAGAAGCGCTCGAGCTCGGGTGGTGAGGCGCAAGCAGCGGCGAAGAAGCAGTGTGGAGGA

    GGCAGGAAGAGCAAGGCCAAAGTTGTCCCTACCAAGGATCCTCAGAGCGCTGTTGCAAAGGTCCGAAGAGAGCGC

    ATCAGTGAGAGGCTCAAAGTTCTGCAGGATCTTGTACCCAACGGCACGAAGGTGGACATGGTCACCATGCTCGAG

    AAGGCAATCACCTATGTCAAGTTCCTGCAGCTGCAAGTCAAGGTGTTGGCGACCGACGAGTTCTGGCCGGTGCAA

    GGAGGGAAGGCGCCGGAGCTCTCCCAAGTGAAGACCGCGCTGGACGCCATCCTTTCTTCCCAGCAGCAACCCTAG

    普通小麦(Triticum aestivum)TaRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:95)

    (gi|25232820|gb|CA654295.1|CA654295)

    DSQIIHPMPCDELHKSLI*LYHIRRRYPYWVFTDGESTSFARPLLNDSRIRGELLLTLSTTKHCKVTASSMRRSY

    SMMHDHEKS*KIQRRKSQKLVSKGNESEADHDAVFGQIMKMCGSDNDSNWPRESSTSPRPKEAANLNSNGKTKAN

    RGSATDPQSVYARKRRERINERLRILQSLVPNGTKVDISTMLEDAVQYVKFLQLQIKPLSSDDLWMYAPIAYNGM

    ETGLDSTIPSPR*RLSKVAASFFLKKGKPGA

    红花(Safflower Carthamus tinctorius)CtRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:96)

    (gi|125399878|gb|EL411863.1|EL411863 CFFS9477.b1_I18.ab1)

    GATTCACAGATAATCCACCCTATGCCGTGTGATGAACTCCACAAATCCTTAATTTAATTGTACCACATCAGGCGA

    CGTTATCCATATTGGGTGTTCACTGATGGTGAAAGCACATCTTTCGCGCGACCTCTACTCAATGACTCAAGAATT

    AGAGGTGAACTATTGCTTACACTATCTACTACTAAACATTGTAAAGTGACTGCCAGTTCTATGAGACGTTCGTAT

    AGCATGATGCATGATCATGAGAAAAGCTAAAAGATACAGCGCAGAAAGAGCCAGAAGCTCGTTTCTAAAGGCAAC

    GAAAGTGAAGCTGACCATGATGCAGTTTTTGGGCAAATAATGAAAATGTGTGGATCTGACAATGACTCGAATTGG

    CCTCGGGAGTCGAGCACAAGTCCAAGACCAAAAGAGGCTGCAAATCTGAACTCAAATGGGAAGACAAAAGCAAAT

    AGGGGGTCAGCAACGGATCCACAAAGTGTCTACGCACGGAAGAGAAGAGAACGAATTAATGAACGGTTAAGAATA

    CTACAGAGTCTGGTTCCTAATGGTACAAAGGTTGATATAAGCACAATGCTTGAAGATGCTGTCCAGTATGTGAAA

    TTTTTGCAGCTCCAAATCAAGCCGTTGAGCTCTGATGATCTGTGGATGTATGCCCCCATCGCGTACAACGGGATG

    GAGACGGGGCTTGATTCTACGATCCCCTCGCCAAGGTGAAGACTATCCAAAGTTGCCGCATCTTTTTTCTTGAAA

    AAAGGGAAGCCTGGGGCAA

    红花(Safflower Carthamus tinctorius)CtRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:97)

    (gi|125399878|gb|EL411863.1|EL411863CFFS9477.b1_I18.ab1)

    MALVREPMVLYDGGFDASEASAFDSIGCFGHGHGHDALLGGVDAAALFGGYAHDEPAGASASAYVKDGSHWAGVG

    ASVLAFDRAARGHGAQAMATAAAQEEEECDAWIDAMDEDNGEAAPAPSIGFDPATGCFSLTQRPGAGARRPFGLL

    FPSASGGAPSPDSAAPAPASRGSQKRPSAGIARAQDAEPRASKKQCGASRKTTAKAKSPAPAITSPKDPQSLAAK

    NRREKISERLRTLQEMVPNGTKVDMVTMLEKAISYVKFLQLQVKVLATDEFWPAQGGMAPEISQVKEALDAILSS

    QRGQFNCSS*

    BdRSLa氨基酸序列(SEQ ID NO:98)

    ATGGCATTAGTGCGGGAGCCGATGGTACTGTATGACGGCGGTTTCGACGCCTCGGAGGCGTCGGCATTCGACTCC

    ATCGGCTGCTTCGGCCACGGCCACGGCCACGACGCGCTCCTAGGCGGCGTCGACGCGGCCGCGCTGTTCGGGGGC

    TACGCGCACGACGAGCCGGCCGGCGCCAGCGCCAGCGCCTACGTGAAGGACGGCTCGCACTGGGCCGGCGTGGGT

    GCGTCCGTGCTCGCGTTCGACCGTGCCGCTCGGGGCCACGGCGCGCAGGCCATGGCGACCGCGGCCGCTCAGGAG

    GAGGAAGAATGCGACGCGTGGATCGACGCCATGGACGAGGACAATGGCGAGGCGGCGCCGGCGCCGTCCATCGGC

    TTCGACCCGGCCACGGGCTGCTTCAGCCTCACGCAGCGGCCCGGCGCCGGCGCGCGGCGCCCGTTCGGGCTCCTG

    TTCCCGAGCGCGTCCGGTGGCGCGCCCTCGCCCGACAGCGCCGCGCCAGCGCCGGCATCCCGCGGTTCCCAGAAG

    CGGCCATCCGCCGGGATTGCGCGCGCGCAGGACGCGGAGCCGCGGGCCAGCAAGAAGCAGTGCGGCGCGAGCAGG

    AAGACGACGGCCAAGGCGAAGTCGCCTGCGCCTGCCATCACCTCGCCCAAGGACCCGCAGAGCCTCGCTGCAAAG

    AACCGGAGGGAGAAGATCAGCGAGCGGCTCCGGACGTTGCAGGAGATGGTGCCCAACGGCACCAAGGTGGACATG

    GTCACCATGCTCGAGAAGGCCATCAGCTACGTCAAGTTCCTGCAGCTGCAAGTCAAGGTGCTCGCGACGGACGAG

    TTCTGGCCGGCGCAGGGAGGGATGGCGCCGGAGATCTCCCAGGTGAAGGAGGCGCTCGACGCCATCCTGTCGTCG

    CAGAGGGGGCAATTCAACTGCTCCAGCTAG    

    BdRSLa核苷酸序列(SEQ ID NO:99)

    MASRHATTREPHLRTMYDDEPSMSLELFGYHGVVVDGDDDGDTATDLPQLTFVDNFKGGCGSADYYGWAYSASGG

    ASGACSSSSSSVLSFEQAGGAGHQLAYNAGTGDDDCALWMDGMADQHDTAKFGFMDPGMSDVSLEIQESSMKPPA

    KMAQKRACQGGETQAAAKKQCGGSKKSKAKAAPAKDPQSAVAKVRRERISERLKVLQDLVPNGTKVDMVTMLEKA

    ITYVKFLQLQVKVLATDDFWPVQGGKAPELSQVKDALDAILSSQNQS*

    BdRSLb氨基酸序列(SEQ ID NO:100)

    ATGGCAAGCAGGCACGCCACTACACGGGAGCCACACCTCCGGACCATGTACGACGACGAGCCATCCATGTCCCTC

    GAGCTCTTCGGCTACCATGGCGTCGTCGTCGACGGTGACGACGATGGCGACACCGCCACCGACCTTCCCCAGCTC

    ACCTTTGTTGACAACTTCAAAGGCGGGTGTGGGTCAGCCGACTACTACGGCTGGGCGTACAGCGCCTCCGGTGGT

    GCGTCAGGCGCCTGCTCCAGCTCCAGCTCGTCGGTGCTCAGCTTTGAGCAGGCGGGTGGTGCCGGTCATCAGCTG

    GCTTATAACGCCGGCACAGGTGACGATGACTGCGCGCTCTGGATGGACGGCATGGCTGACCAGCATGACACAGCC

    AAGTTTGGGTTCATGGACCCAGGCATGTCTGATGTCAGCCTAGAAATCCAGGAGAGCAGCATGAAACCGCCGGCC

    AAGATGGCACAGAAGCGCGCTTGCCAGGGTGGTGAGACGCAAGCAGCGGCGAAGAAGCAGTGTGGAGGAAGCAAG

    AAGAGCAAGGCAAAAGCTGCCCCTGCCAAGGATCCTCAAAGCGCCGTTGCAAAGGTCCGAAGAGAGCGCATCAGC

    GAGAGGCTCAAAGTTCTGCAGGATCTCGTGCCCAATGGCACAAAGGTTGACATGGTCACCATGCTCGAAAAGGCA

    ATCACCTATGTCAAGTTCCTGCAGCTGCAAGTCAAGGTATTGGCGACTGATGACTTCTGGCCGGTGCAAGGAGGG

    AAAGCTCCGGAGCTCTCCCAAGTGAAGGACGCTCTGGACGCGATCCTGTCTTCCCAGAATCAATCCTAG

    BdRSLb核苷酸序列(SEQ ID NO:101)

    MALVGQATKLCYDGFAGDGVPPFMDAACLAFDHGYDYNNPHAWEFPTGAEPGNSSAFDVAWTGVSSTSPVLTFDA

    AEWMDATATDRLSSYSPSAATVPASYKRPRAHVQPQQEAEEQESITPNPKKQCGDGKVVIKSSAAATGTSPRKEP

    QSQAAKSRRERIGERLRALQELVPNGSKVDMVTMLDKAITYVKFMQLQLTVLETDAFWPAQGGAAPEISQVKAAL

    DAIILSSSQKPRQWS*

    BdRSLc氨基酸序列(SEQ ID NO:102)

    ATGGCTCTAGTGGGTCAGGCAACGAAGCTCTGCTACGACGGCTTCGCCGGAGACGGTGTGCCGCCGTTCATGGAC

    GCAGCTTGTCTGGCATTCGACCACGGGTATGATTACAACAATCCCCACGCATGGGAATTCCCCACCGGCGCCGAG

    CCAGGCAACAGCAGCGCGTTCGACGTTGCCTGGACCGGCGTCTCCTCCACTTCTCCGGTGCTCACATTCGACGCC

    GCCGAGTGGATGGACGCCACGGCCACGGACCGGCTGAGCTCCTACAGCCCGTCTGCGGCCACCGTGCCGGCCTCT

    TACAAGCGGCCTCGTGCGCACGTGCAGCCACAGCAGGAAGCAGAAGAACAGGAAAGCATTACTCCCAATCCCAAG

    AAGCAGTGCGGCGATGGGAAAGTAGTTATCAAGTCATCGGCGGCGGCTACCGGCACCAGTCCACGCAAGGAACCC

    CAAAGCCAAGCTGCCAAGAGCCGTCGTGAGCGGATCGGCGAGCGGCTGAGAGCGCTGCAGGAGCTGGTGCCCAAC

    GGCAGCAAGGTGGACATGGTCACCATGCTCGACAAGGCCATCACTTATGTCAAGTTCATGCAGCTCCAGCTCACG

    GTGCTCGAGACAGACGCGTTCTGGCCTGCGCAGGGTGGCGCGGCGCCGGAGATCTCCCAGGTGAAGGCGGCGCTC

    GACGCCATCATCCTCTCCTCGTCGCAGAAGCCTCGTCAGTGGAGCTAG

    BdRSLc核苷酸序列(SEQ ID NO:103)

    MEAGGLISEAGWTMFDFPSQGEESEIMSQLLGAFPSHLEEGHQDLPWYQASDPSYYDCNLNTSSESNASSLAVPS

    ECMGYYLGDSSESLDLSSCIAPNDLNLVQEQDATEFLNMTPNLSLDLRGNGESSCEDLTSVGPTNKRKHSSAEEG

    IDCQARGQKFARKAEPKRTKKTKQSGWEVAVATRNGSTASCCTSDDDSNASQESADTGVCPKGKARAARGASTDP

    QSLYARKRRERINERLKTLQTLVPNGTKVDMSTMLEEAVHYVKFLQLQIKVLSSDDMWMYAPLAYNGMNIGLDLN

    IYTPERWRTASAAPSTEGREYAGVDRISDLPDGILGDIVSLLPTAEGARTQILKRRWRHIWRCSAPLNLDCCTLV

    ARGGGREAEDELVGLIPSILSSHQGTGRRFHVPSSRHSDRAATIEAWLQSAALDNLQELDLWCTHTYLYDYVPLP

    PAVFRFSATVRVVTIANCNLRDSAVQGLQFPQLKQLGFKDIIIMEDSLHHMIAACPDLECLMIERSLGFACVRIN

    SLSLRSIGVSTDHPHPHELQFVELVIDNAPCLKRLLHLEMCYHLDMHITVISAPKLETLSCCSSVSRSSTKLSFG

    SAAIQGLHIDSLTTVVRTVQILAVEMHSLCLDTIIDFMKCFPCLQKLYIKSFVSGNNWWQRKHRNVIKSLDIRLK

    TIALESYGGNQSDINFVTFFVLNARVLELMTFDVCSEHYTVEFLAEQYRKLQLDKRASRAARFHFTSNRCVRGIP

    YIGRAELFLPIKCSHVDTSPNLSSFRLSAVFSVCITRNLLRLKKAMWVISLYYSPEFTKQVAVHNPNEMPF*

    BdRSLd氨基酸序列(SEQID NO:104)

    ATGGAGGCTGGAGGGCTGATTTCTGAGGCTGGCTGGACCATGTTTGACTTCCCGTCGCAAGGCGAGGAATCAGAG

    ATCATGTCGCAGCTGCTAGGCGCCTTCCCCTCCCATCTTGAGGAAGGCCATCAGGATCTGCCTTGGTACCAGGCT

    TCTGACCCATCCTACTATGACTGTAATCTTAATACAAGTAGTGAAAGCAATGCTAGTAGTCTTGCTGTTCCATCC

    GAGTGTATGGGCTACTATTTGGGTGATTCAAGTGAGTCCCTGGACCTGAGCTCCTGCATTGCACCAAATGACCTG

    AACTTGGTCCAGGAGCAAGATGCAACTGAGTTTCTGAATATGACACCAAATCTTTCCCTTGATTTACGTGGGAAT

    GGTGAGTCGAGCTGCGAGGATCTCACTTCGGTCGGTCCTACTAACAAGCGAAAGCACTCCTCGGCAGAAGAAGGA

    ATCGACTGCCAAGCAAGAGGCCAGAAATTCGCCAGAAAGGCTGAACCGAAGCGAACAAAGAAGACCAAGCAAAGC

    GGATGGGAGGTTGCTGTTGCCACCAGGAATGGAAGCACAGCGAGCTGCTGCACCTCTGATGATGACTCAAACGCT

    TCTCAAGAATCTGCAGATACCGGTGTTTGTCCGAAAGGCAAGGCTCGGGCTGCCCGTGGCGCATCAACTGATCCC

    CAGAGCCTCTATGCAAGGAAAAGGAGGGAAAGGATCAATGAGAGACTGAAGACACTGCAGACCCTTGTGCCCAAT

    GGAACCAAAGTAGATATGAGCACCATGCTTGAGGAGGCAGTCCACTACGTGAAGTTCCTGCAGCTTCAGATCAAG

    GTCTTGAGCTCTGATGATATGTGGATGTATGCGCCGCTAGCATACAACGGGATGAACATTGGGCTTGATCTGAAC

    ATATATACTCCGGAGAGGTGGAGGACAGCGTCCGCGGCGCCCTCAACCGAAGGGCGTGAATACGCCGGCGTCGAC

    CGCATCAGCGACCTCCCCGACGGCATCCTCGGCGACATCGTCTCGTTGCTCCCCACCGCCGAAGGAGCCCGCACC

    CAGATCCTCAAGCGCAGGTGGCGCCACATCTGGCGCTGCTCCGCCCCTCTCAACCTCGATTGCTGTACCTTGGTC

    GCCCGTGGCGGCGGCCGTGAGGCTGAAGATGAACTCGTCGGTCTCATACCGTCCATCCTTTCTTCTCACCAAGGC

    ACCGGCCGCCGCTTCCACGTCCCCTCGTCGCGCCACTCTGACCGAGCTGCTACCATTGAAGCCTGGCTCCAATCT

    GCTGCCCTCGACAATCTCCAGGAGCTCGATTTATGGTGCACCCACACCTATCTTTACGACTATGTTCCGCTGCCA

    CCCGCCGTCTTTCGCTTCTCCGCCACCGTCCGTGTTGTCACCATCGCAAATTGTAACCTCCGTGACAGCGCCGTC

    CAAGGCCTTCAATTCCCACAACTTAAACAGCTCGGATTCAAAGATATCATCATCATGGAGGATTCGCTGCACCAC

    ATGATTGCTGCGTGTCCAGATCTCGAGTGCTTGATGATTGAAAGGAGCTTAGGTTTTGCTTGCGTCCGGATCAAT

    TCCCTTAGTCTTAGAAGCATCGGTGTGAGCACTGACCACCCTCACCCACATGAGCTCCAGTTTGTGGAACTCGTC

    ATTGATAATGCACCTTGTCTTAAGAGATTGCTCCATCTTGAAATGTGTTATCACCTTGACATGCATATAACAGTA

    ATCTCCGCGCCTAAACTGGAGACCTTGAGCTGCTGTTCTTCTGTGAGTCGCTCCTCCACCAAACTCTCGTTTGGC

    TCCGCGGCCATTCAGGGATTGCACATTGATAGCCTAACAACAGTGGTGCGCACTGTCCAAATTTTAGCTGTAGAG

    ATGCATTCTCTTTGTCTAGACACAATTATTGACTTCATGAAATGCTTTCCATGTCTGCAGAAGTTGTACATTAAG

    TCATTTGTAAGTGGAAACAATTGGTGGCAACGTAAACACCGGAACGTTATCAAATCCCTTGACATCCGTCTCAAG

    ACAATAGCGTTGGAAAGTTATGGGGGCAATCAGTCTGACATCAACTTTGTCACATTCTTTGTCTTGAACGCGAGA

    GTGCTAGAGTTGATGACATTTGACGTTTGTTCTGAGCATTACACTGTGGAGTTCTTGGCAGAGCAATATAGGAAG

    CTTCAGCTAGATAAGAGGGCTTCAAGAGCCGCTCGGTTCCATTTTACAAGTAACCGATGTGTCCGTGGTATTCCG

    TATATCGGACGTGCCGAGCTATTCTTGCCTATCAAATGTTCTCATGTTGACACCAGTCCAAACTTGAGTAGTTTC

    CGTTTGTCTGCAGTATTTTCAGTTTGTATTACCCGGAACCTTTTGCGTTTAAAAAAAGCTATGTGGGTCATTAGT

    TTGTATTATTCTCCAGAATTTACAAAACAAGTGGCCGTGCACAATCCCAATGAAATGCCGTTTTAG

    BdRSLd核苷酸序列(SEQ ID NO:105)

    MEAKCGAIWSSIDARSEDSEMIAHLQSMFWSNSDVALNLCSSNTSGNSCVTASTLPSSLFLPLVDNESYGAAPSV

    DTGMDSCFDHQHQSITGHKRISHMDEQMKKTRKKSRTVPSVSKALGSSLVDNQMNADIFNQSSSCCSSGEDSIGT

    SEKSIVANQSDNTSGCKRPSKNMQSLYAKKRRERINEKLRVLQQLIPNGTKVDISTMLEEAVQYVKFLQLQIKVL

    SSDETWMYAPLAYNGMDIGLTLALRTAANQE*

    BdRSLe氨基酸序列(SEQ ID NO:106)

    ATGGAGGCCAAGTGTGGAGCTATTTGGAGCTCTATCGATGCGAGGAGCGAGGACTCTGAGATGATTGCTCACCTG

    CAGTCCATGTTCTGGAGCAACAGTGATGTTGCTCTCAACCTCTGTTCGTCAAACACCAGTGGCAATTCTTGTGTC

    ACAGCTAGCACATTGCCTAGCAGCTTGTTCCTTCCTCTTGTCGATAATGAGAGCTATGGTGCAGCGCCATCGGTG

    GACACCGGCATGGATTCATGCTTTGATCACCAGCATCAGAGCATTACTGGTCACAAGAGGATATCGCACATGGAT

    GAGCAGATGAAGAAGACGAGAAAGAAGTCCCGGACTGTTCCATCGGTATCAAAGGCTCTGGGTTCCAGCCTAGTC

    GATAATCAGATGAATGCTGACATTTTCAATCAGAGCTCCTCCTGCTGCAGCTCGGGAGAAGATTCAATTGGAACA

    TCTGAGAAATCCATTGTTGCAAACCAGAGTGACAATACGAGTGGTTGTAAGCGGCCTTCAAAGAATATGCAAAGC

    CTTTATGCAAAGAAGAGAAGAGAGAGGATCAACGAGAAGTTGAGAGTACTGCAGCAGCTGATTCCCAATGGCACC

    AAAGTTGACATCAGCACAATGTTGGAGGAAGCAGTTCAGTATGTCAAGTTTCTGCAGCTGCAAATAAAGGTCTTA

    AGCTCTGACGAGACATGGATGTATGCGCCCCTCGCCTACAATGGTATGGACATCGGTCTCACTCTCGCTCTGAGA

    ACTGCTGCAAACCAAGAGTGA

    BdRSLe核苷酸序列(SEQ ID NO:107)

    MALVREHGGYYGGFDSVEAAAFDTLGYGHGASLGFDASSALFGEGGYAAGGGDAWAGAGASTVLAFNRTTAAAAV

    GVEEEEEECDAWIDAMDEDDQSSGPAAAAPEARHALTASVGFDASTGCFTLTERASSSSGGAGRPFGLLFPSTSS

    SGGTPERTAPVRVPQKRTYQAVSPNKKHCGAGRKASKAKLASTAPTKDPQSLAAKQNRRERISERLRALQELVPN

    GTKVDLVTMLEKAISYVKFLQLQVKVLATDEFWPAQGGKAPEISQVREALDAILSSAS

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLa氨基酸序列(AZM4_60871:SEQ ID NO:108)

    ATGGCGTTGGTGAGGGAGCACGGTGGGTACTACGGAGGCTTCGACAGCGTCGAGGCGGCGGCCTTCGACACGCTC

    GGCTACGGCCACGGCGCGTCGCTGGGCTTTGACGCGTCGTCGGCGCTGTTCGGGGAAGGCGGTTATGCGGCGGGC

    GGCGGGGACGCCTGGGCGGGCGCGGGGGCGTCGACCGTCCTGGCGTTCAACCGCACAACGGCAGCGGCGGCCGTG

    GGTGTGGAAGAGGAGGAGGAGGAGTGCGACGCGTGGATCGACGCTATGGACGAGGACGACCAGAGCTCCGGCCCC

    GCCGCGGCGGCGCCAGAGGCGCGCCACGCGCTGACGGCCTCCGTGGGTTTCGACGCCTCCACGGGGTGCTTCACC

    CTGACGGAGAGGGCGTCGTCGTCGTCAGGCGGAGCGGGGCGCCCGTTCGGCCTGCTGTTCCCGAGCACGTCGTCG

    TCGGGCGGCACGCCCGAGCGCACGGCGCCGGTGCGCGTCCCGCAGAAACGGACCTACCAGGCTGTGAGCCCCAAC

    AAGAAGCACTGCGGCGCGGGCAGGAAGGCGAGCAAGGCCAAGCTCGCGTCCACAGCCCCAACCAAAGATCCCCAG

    AGCCTCGCGGCCAAGCAGAACCGGCGCGAGCGGATCAGCGAGCGGCTGCGGGCGCTGCAGGAGCTGGTGCCCAAC

    GGCACCAAGGTCGACCTGGTCACCATGCTCGAGAAGGCCATCAGCTACGTTAAGTTCCTCCAGTTGCAAGTCAAG

    GTTCTGGCAACAGACGAATTCTGGCCGGCACAGGGAGGGAAGGCGCCGGAGATCTCCCAGGTGAGGGAGGCGCTC

    GACGCCATCTTGTCGTCGGCGTCG

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLa核苷酸序列(AZM4_60871:SEQ ID NO:109)

    MAQFLGAADDHCFTYEYEHVDESMEAIAALFLPTLDTDSANFSSSCFNYAVPPQCWPQPDHSSSVTSLLDPAENF

    EFPVRDPLPPSGFDPHCAVAYLTEDSSPLHGKRSSVIEEEAANAAPAAKKRKAGAAMQGSKKSRKASKKDNIGDA

    DDDGGYACVDTQSSSSCTSEDGNFEGNTNSSSKKTCARASRGAATEPQSLYARKRRERINERLRILQNLVPNGTK

    VDISTMLEEAAQYVKFLQLQIKLLSCDDTWMYAPIAYNGINIGNVDLNIYSLQK*

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLb氨基酸序列(AZM4_70092:SEQ ID NO:110)

    ATGGCTCAGTTTCTTGGGGCGGCTGATGATCACTGCTTCACCTACGAGTATGAGCATGTGGATGAGTCCATGGAA

    GCAATAGCAGCCCTGTTCTTGCCTACCCTTGACACCGACTCCGCCAACTTCTCCTCTAGCTGTTTCAACTATGCT

    GTCCCTCCACAGTGCTGGCCTCAGCCAGACCATAGCTCTAGCGTTACCAGTTTGCTTGATCCAGCCGAGAACTTT

    GAGTTTCCAGTCAGGGACCCGCTCCCCCCAAGCGGCTTCGATCCACATTGCGCTGTCGCCTACCTCACTGAGGAT

    TCGAGCCCTCTGCATGGCAAACGTTCATCAGTCATTGAGGAAGAAGCAGCCAACGCCGCACCTGCTGCTAAGAAG

    AGGAAGGCTGGTGCTGCAATGCAGGGATCAAAGAAATCCAGGAAGGCGAGCAAAAAGGATAACATCGGCGACGCC

    GACGATGATGGCGGCTATGCCTGTGTTGACACGCAAAGCTCCAGTAGCTGCACCTCCGAGGACGGGAACTTCGAA

    GGAAATACGAATTCAAGCTCCAAGAAGACCTGCGCCAGGGCCAGCCGCGGAGCAGCAACTGAACCTCAGAGTCTC

    TATGCAAGGAAGAGGAGAGAGAGGATCAACGAAAGGTTGAGAATCTTGCAGAACTTGGTTCCAAATGGAACAAAA

    GTAGACATTAGCACGATGCTCGAGGAAGCGGCGCAGTATGTCAAGTTTTTACAGCTCCAGATTAAGCTGTTGAGC

    TGTGACGACACATGGATGTATGCGCCAATCGCGTACAATGGAATTAACATCGGCAATGTTGATCTGAACATCTAC

    TCTCTGCAAAAGTAA

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLb核苷酸序列(AZM4_70092:SEQ ID NO:111)

    MEDGGLXSEAGAWAELGTGGDESEELVAQLLGAFFRSHGEEGRHQLLWSDDQASSDDVHGDGSLAVPLAYDGCCG

    YLSYSGSNSDELPLGSSSRAAPAGGPPEELLGAAETEYLNNVAAADHPFFKWCGNGEGLDGPTSVVGTLGLGSGR

    KRARKKSGDEDEDPSTAIASGSGPTSCCTTSDSDSNASPLESADAGARRPKGNENARAAGRGAAAATTTTAEPQS

    IYARVRRERINERLKVLQSLVPNGTKVDMSTMLEEAVHYVKFLQLQIRVLQLLSSDDTWMYAPIAYNGMGIGIDL

    RMHGQDR*

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLc氨基酸序列(AZM4_91750:SEQ ID NO:112)

    ATGGAGGACGGAGGGTTGRTCAGCGAGGCCGGCGCCTGGGCCGAGCTCGGCACCGGCGGCGACGAGTCGGAGGAG

    CTGGTGGCGCAGCTGCTGGGCGCCTTCTTCCGGTCCCACGGCGAGGAAGGCCGGCACCAGCTGCTTTGGTCTGAC

    GACCAAGCTTCTTCCGACGACGTGCACGGCGACGGCAGCCTTGCCGTGCCGCTCGCATACGACGGCTGCTGCGGC

    TATCTGAGCTACTCAGGTAGCAACTCGGACGAGCTCCCCCTCGGGAGCAGCTCCCGCGCTGCGCCAGCAGGTGGC

    CCACCGGAGGAGCTGCTCGGTGCAGCTGAGACTGAGTACCTGAATAATGTGGCCGCCGCAGACCATCCCTTCTTC

    AAATGGTGTGGGAATGGTGAGGGTCTGGATGGTCCGACGAGCGTCGTGGGCACGCTTGGGCTTGGCTCGGGCCGG

    AAACGCGCGCGCAAGAAGAGCGGGGACGAAGACGAAGACCCGAGCACGGCCATCGCCAGCGGAAGCGGCCCCACG

    AGCTGCTGCACTACCTCCGACAGCGACTCAAACGCGTCTCCTCTGGAGTCCGCGGACGCCGGCGCTCGTCGCCCC

    AAGGGCAACGAGAATGCCCGGGCAGCTGGCCGCGGCGCGGCGGCGGCGACGACGACGACAGCGGAGCCCCAGAGC

    ATCTACGCAAGGGTACGGAGGGAGCGGATCAACGAGAGGCTCAAGGTGCTGCAGAGCCTGGTGCCCAACGGCACC

    AAGGTGGACATGAGCACCATGCTCGAGGAGGCCGTCCACTACGTCAAGTTCCTGCAGCTTCAGATCAGGGTGCTG

    CAGCTCCTGAGCTCCGACGACACGTGGATGTACGCGCCCATCGCGTACAACGGGATGGGCATCGGGATCGACCTC

    CGCATGCATGGACAGGACAGATGA

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLc核苷酸序列(AZM4_91750:SEQ ID NO:113)

    SKKSRKASKKDCIVDDDDVYVDPQSSGSCTSEEGNFEGNTYSSAKKTCTRASRGGATDPQSLYARKRRERINERL

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    玉蜀黍(Zea mays)氨基酸序列(AZM4_86104:SEQ ID NO:114)

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    TCCGGTAGCTGCACCTCCGAGGAGGGGAATTTTGAAGGGAATACGTATTCAAGCGCGAAAAAGACCTGCACCAGG

    GCCAGCCGCGGAGGAGCAACTGATCCTCAGAGTCTCTATGCAAGGAAGAGGAGAGAGAGGATCAATGAAAGGTTG

    AGAATCTTGCAGAACTTGGTCCCCAATGGAACAAAGGTTGACATTAGTACGATGCTCGAGGAAGCAGCACAGTAT

    GTCAAATTTTTACAGCTTCAGATTAAGCTGTTGAGCTCTGACGACATGTGGATGTATGCGCCAATCGCGTACAAT

    GGGATCAACATCAGCAATGTTGATCTGAACATCCCTGCA

    玉蜀黍(Zea mays)ZmRSLd核苷酸序列(AZM4_86104:SEQ ID NO:115)

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本发明涉及通过改变RHD6相关基因的表达调节植物中的根毛发育,例如,增加植物中根毛的数量、长度和/或寿命。这可以有效用于,例如,改善植物从土壤吸取营养的能力。。

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