一种制备4-[(4-羟基苯)偶氮]苯甲基酸胆固醇的方法 【技术领域】
本发明涉及一种制备4-[(4-羟基苯)偶氮]苯甲基酸胆固醇酯的方法。进一步说是由胆固醇出发，经酯化、还原、偶联反应生成4-[(4-羟基苯)偶氮]苯甲基酸胆固醇酯的方法。
技术背景
胆固醇是组成生物膜的重要成分之一，胆固醇最主要的功能是调节生物膜的流动性，在相变温度以下，胆固醇增加生物膜的流动性；在相变温度以上，胆固醇减小生物膜的流动性(R.Lewis，R.N.McElhaney.In：P.L. Yegle，editor.Thestructure of biological membranes.Boca Raton(FL，USA)：CRC Press，73-156，1992；R.A.Demel，B.de Kruij.Biochim.Biophys.Acta 457(2)，109-32，1976)。胆固醇还具有增加生物膜的机械强度及减小生物膜的渗透性的功能(P.L. Yeagle.Biochim Biophys Acta 822(3-4)，267-87，1985；D.Needham，R.S.Nunn.Biophys.J.58(4)，997-1009，1990)。因此，作为药物释放体系的脂质体中往往要加入一定量的胆固醇来增加脂质体的稳定性和机械强度。
近年的发展趋势是研发智能化脂质体药物释放体系，如对pH敏感的脂质体、对温度敏感的脂质体、对光敏感的脂质体等，它们因为能够定点、定时、定量的释放药物，成为未来的发展方向。其中光敏性脂质体很有特色，它是将光控材料与磷脂共同形成脂质体包入药物，导入身体特定位置后用外来光源诱导脂质体组分中的光敏材料发生结构上地变化，从而控制其内包药物靶向释放。目前所报导的光控释放材料有1，2-二取代苯乙烯的衍生物及偶氮苯衍生物等。例如美国Hurst小组(Y. Lei and J.K.Hurst.Langmuir 15，3424-3429，1999)利用含偶氮苯基团的阳离子表面活性剂作为光控材料；又如英国的Morgan小组(R.H.Bisby，C.Mead and C.G.Morgan.FEBS Lett.463，165-168，1999；R.H.Bisby，C.Mead and C.G.Morgan.Photochem.Photobiol.72，57-61，2000)用含偶氮苯基团的磷脂作为光控释放材料。
本发明人认为用在胆固醇上引入偶氮苯基团并且使其具有一定极性，然后与天然磷脂共同制成脂质体，不但增加脂质体的稳定性，而且通过光照可引起偶氮苯的构型发生变化，有可能达到通过光来控制脂质体内包物释放的目的。
4-[(4-羟基苯)偶氮]苯甲基酸胆固醇酯是满足上述条件的化合物之一，具有液晶相和显色性能，可被用来作为液晶显示材料(EP 896048，1999)，但该化合物的合成方法却未见报道。
【发明内容】
本发明的目的是提供一种制备4-[(4-羟基苯)偶氮]苯甲基酸胆固醇酯的方法。
本发明是由胆固醇出发，经酯化、还原、偶联反应生成4-[(4-羟基苯)偶氮]苯甲基酸胆固醇酯的方法，该方法操作简单，反应条件不苛刻，易于工业化生产。
本发明的合成方法可用下述反应式表示：
本发明的方法具体描述如下：
(1).在非质子性有机溶剂中和0-30℃温度下，化合物1、化合物2、催化剂反应1-24小时得化合物3。化合物1、化合物2、催化剂的摩尔比是1∶1-1.5∶0.01-0.5；所述的非质子性有机溶剂是二氯甲烷，苯、甲苯、四氯化碳或氯仿等；所述的催化剂是氮原子上含有孤电子对的有机碱。如吡啶、三乙胺或4-二甲胺基吡啶等。
(2).在质子性有机溶剂中，化合物3和还原剂在50-100℃反应1-48小时，中和，萃取，得化合物4。化合物3、还原剂的摩尔比是1∶4-10，更多的还原剂对反应没有影响，推荐摩尔比是1∶5-6；所述质子性有机溶剂可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等；所述的还原剂可以是Zn、SnCl2、Fe等。
(3).在极性溶剂中，化合物4与一定量的浓盐酸混合，然后向此溶液中滴加NaNO2水溶液，反应5-180分钟，反应温度-10～+10℃；然后将上述反应液加入苯酚的碱性水溶液中，反应1-6小时，反应温度-10～+10℃，得化合物5。化合物4、浓盐酸、NaNO2、苯酚的摩尔比分别是1∶1-5∶1-1.5∶1-1.5；所述极性溶剂是水、或水及与水互溶的有机溶剂混合液，如水与丙酮、乙腈、乙二醇或乙醇等的混合液；所述的碱是一价金属的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，如NaOH、KOH、KHCO3、NaHCO3、K2CO3或Na2CO3。
本发明的方法以价廉易得的原料出发，反应条件不苛刻，易操作，是一种适合工业化生产的方法。
具体实施方法
通过以下具体实施方法将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
实施例1
将10mmol化合物1加入到100ml苯中，然后滴加50ml含10mmol化合物2的苯溶液，室温反应8h，有机相旋干，快速柱层析分离，得化合物3(80％)。C34H49NO4
1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)：8.30-8.19(4H，m)，5.45-5.43(1H，m)，4.95-4.85(1H，m)，2.50-0.70(43H，m).
MS(MALDI)：535.5.
IR：2945，1721，1527，1467，1348，1272.
实施例2
将7mmol化合物3加入到100ml无水乙醇中，然后加入35mmol SnCl2，回流反应3小时，加入碱液中和，二氯甲烷萃取，有机相旋干，快速柱层析分离，得化合物4(90％)。
C34H51NO2
1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)：7.87-7.84(2H，dd，J＝9Hz)，6.65-6.62(2H，d，J＝9Hz)，5.41-5.39(1H，m)，4.85-4.75(1H，m)，2.45-0.69(43H，m).
MS(MALDI)：505.5.
IR：3339，2941，1697，1602，1467，1274，1172，1117.
实施例3
5mmol化合物4溶于含3ml浓盐酸的丙酮-水溶液中，冷却至0℃，然后滴加20ml含6mmol NaNO2的水溶液，0℃反应1h后，将此溶液加入到含6mmol苯酚的80ml碱性水溶液中。0℃反应4h后，加盐酸调pH至弱酸性，过滤，快速柱层析分离，得化合物5(75％)。
C40H54N2O3
1H NMR(300MHz，CDCl3，ppm)：8.19-8.16(2H，d，J＝9Hz)，7.93-7.88(4H，dd，J＝6Hz)，6.99-6.96(2H，d，J＝9Hz)，5.45-5.43(1H，m)，4.95-4.85(1H，m)，2.51-0.69(43H，m).
MS(MALDI)：610.6.
IR：3446，3169，2951，1693，1596，1470，1441，1282，1137.