含有嘧啶的噁唑烷酮类化合物及其制备方法.pdf

本发明提供通式I的噁唑烷酮类化合物及其制备方法，以及该化合物在制备治疗微生物感染性疾病的药物中的应用。

1、  通式I的化合物，

所述化合物还包括其消旋体或旋光异构体，或其药学上可接受的盐和/或溶剂化物，其中
R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₇环烷基、C₂-C₁₀烯基和C₂-C₁₀炔基，
或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成5-10元杂环基或5-10元杂芳基，所述杂环基和杂芳基除了与R₁和R₂连接的氮原子外，可以含有1-4个选自N、O和S的杂原子，除了R₁和R₂所连接的氮原子外，所述杂环基任选包括1或2个碳碳双键或叁键。

2、  权利要求1的通式I化合物，其中R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₇环烷基，
或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成4-吗啉基、4-甲基-1-哌嗪基、1-哌啶基、1-吡咯烷基、1H-1，2，4-三氮唑-1-基、1-咪唑基、2-甲基-1-咪唑基和1H-四氮唑-1-基。

3、  权利要求2的通式I化合物，其中R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₆烷基，
或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成4-吗啉基、4-甲基-1-哌嗪基、1-哌啶基、1-吡咯烷基。

4、  权利要求3的通式I化合物，其中R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成4-吗啉基、4-甲基-1-哌嗪基、1-哌啶基、1-吡咯烷基。

5、  权利要求3的通式I化合物，为N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺。

6、  权利要求1的通式I化合物，其中所述药学上可接受的盐为与酸形成的盐，所述酸选自：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、磷酸、硝酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、羟乙磺酸、对甲基苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸、三氟乙酸和天冬氨酸。

7、  权利要求6的通式I化合物，其中所述与酸形成的盐为盐酸盐和甲磺酸盐。

8、  制备权利要求1的通式I化合物的方法，包括以下步骤：

将式II化合物与R₁和R₂取代的胍反应，其中，R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₇环烷基、C₂-C₁₀烯基和C₂-C₁₀炔基，
或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成5-10元杂环基或5-10元杂芳基，所述杂环基和杂芳基除了与R₁和R₂连接的氮原子外，可以含有1-4个选自N、O和S的杂原子，除了R₁和R₂所连接的氮原子外，所述杂环基任选包括1或2个碳碳双键或叁键。

9、  一种药物组合物，所述组合物含有权利要求1-7任一项化合物。

10、  权利要求1-7任一项化合物在制备用于治疗微生物感染的药物中的应用。

11、  权利要求10中的应用，其中微生物感染是细菌感染。

含有嘧啶的噁唑烷酮类化合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药物化学领域，特别涉及一种含有嘧啶的噁唑烷酮化合物，或其旋光异构体，药学上可接受的盐和/或溶剂化物，以及含有它们的药物组合物，制备方法及应用。
背景技术：
近几十年来，抗菌药物的滥用导致感染性疾病的死亡率急剧上升。在临床上，细胞的耐药性逐年增加，致使一些抗菌药物疗效降低，甚至无效，如耐甲氧西林金葡萄球菌、耐甲氧西林表皮葡葡球菌和耐万古霉素肠球菌等；一些非致病菌成为条件致病菌，如变形杆菌、铜绿假单胞菌等。所有这些耐药菌株的形成和发展，导致了治疗上的困难，现在的抗菌药物已不能满足临床上的需要，临床上急需具有新型作用机制的抗菌药物。
噁唑烷酮类抗菌药物是一类结构全新的化学全合成抗菌药物，该类药物作用于蛋白质合成的早期阶段，与其它抗菌药很少出现交叉耐药性。1987年杜邦公司报道的DuP721为先导化合物，美国普强公司成功研制开发了第一个噁唑烷酮类抗菌剂——利奈唑酮(Linezolid)，用于治疗耐青霉素、大环内酯类和其他抗菌药物的革兰氏阳性菌感染，该药物已于2000年4月在美国批准上市。

但由于该药物已经应用很长时间，逐渐产生了一些耐药菌，使其疗效降低，因此寻找新的药物是必要的。
发明内容：
本发明经过研究，找到了一种通式I的噁唑烷酮类化合物，并发现其与现有技术相比具有良好的抗耐药菌活性。

本发明的化合物，包括其消旋体或旋光异构体，也包括其药学上可接受的盐和/或溶剂化物。
其中
R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₇环烷基、C₂-C₁₀烯基和C₂-C₁₀炔基，
或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成5-10元杂环基或5-10元杂芳基，所述杂环基和杂芳基除了与R₁和R₂连接的氮原子外，可以含有1-4个选自N、O和S的杂原子，除了R₁和R₂所连接的氮原子外，所述杂环基任选包括1或2个碳碳双键或叁键。
本发明优选的化合物中R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₁₀烷基、C₃-C₇环烷基，或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成4-吗啉基、4-甲基-1-哌嗪基、1-哌啶基、1-吡咯烷基、1H-1，2，4-三氮唑-1-基、1-咪唑基、2-甲基-1-咪唑基和1H-四氮唑-1-基。
本发明更优选的化合物中R₁和R₂相同或不同，分别独立地选自氢、C₁-C₆烷基，或R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成4-吗啉基、4-甲基-1-哌嗪基、1-哌啶基、1-吡咯烷基。
本发明特别优选的化合物其中R₁和R₂与和它们所连接的氮原子一起形成4-吗啉基、4-甲基-1-哌嗪基、1-哌啶基、1-吡咯烷基。
本发明最优选的化合物为N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺。
按照本发明所属领域的一些通常方法，本发明的通式I化合物可以与酸生成其药学上可接受的盐。酸可以包括无机酸或有机酸，下列酸是特别优选的：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、磷酸、硝酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、羟乙磺酸、对甲基苯磺酸、苯磺酸、萘磺酸、三氟乙酸和天冬氨酸。
本发明最优选的化合物的盐为盐酸盐或甲磺酸盐。
本发明还包括本发明化合物的溶剂化物，如乙醇，水等，其中，可含有不同量的水，如一水合物、半水合物、一个半水合物、二水合物或者三水合物。
本发明还包括本发明化合物的前药。依据本发明，前药是通式I化合物的衍生物，它们自身可能具有较弱的活性或甚至没有活性，但是在给药后，在生理条件下(例如通过代谢、溶剂分解或另外的方式)被转化成相应的生物活性形式。
本发明还包括本发明化合物的外消旋体、旋光活性异构体、多晶型形式或其混合物，它们具备本发明所述的有用性质。本发明通式I化合物含有手性中心(噁唑烷酮环的C-5位)，因此存在两种对映体或二者的外消旋混合物。本发明涉及有用性质的两种对映体以及含有两种异构体的混合物。
除非另外指出，本发明所用的术语“烷基”是指直链或支链的烷基；“环烷基”是指取代或未取代的环烷基；“烯基”是指直链或支链的烯基；“炔基”是指直链或支链的炔基；5-10元杂芳基包括含有一个或多个选自N、0和S的杂原子，其中每个杂芳基的环状体系可以是单环或多环的，环状体系是芳香性的，一共含有5-10个原子，可以举出例如咪唑基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、(1，2，3)-和(1，2，4)-三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噁唑基、吡唑基、吡咯基、噻唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、吲哚基、喹啉基等；5-10元杂环基包括含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，其中每个杂芳基的环状体系可以是单环或多环的，但是是非芳香性的，环状体系一共含有5-10个原子，可以任选包括1或2个碳碳双键或碳碳叁键，可以举出例如吡咯烷基、吗啉基、哌嗪基、哌啶基、噻唑啉基等。
本发明还包括药物组合物，该组合物包括通式I化合物及它们药学上可接受的盐和/或溶剂化物作为活性成分以及药学上可接受的载体；本发明的化合物可以与其他活性成分组合使用，只要它们不产生其他不利的作用，例如过敏反应。
用于本发明药物组合物的载体是药学领域中可得到的常见类型，包括：口服制剂用的粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂等；可注射制剂用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可将其配制成肠衣片剂。
本发明还包括其在制备用于治疗哺乳动物微生物特别是细菌感染的药物中的应用。该应用方法给以有效量的通式I化合物，可以将化合物在药物组合物中对哺乳动物口服、肠胃外、透皮或局部给药。
由于按照本发明的通式I的噁唑烷酮类化合物具有抗微生物感染特别是抗细菌活性，因此，它可以用作制备治疗哺乳动物细菌感染的药物，根据本发明的化合物可作为活性成分用于制备治疗哺乳动物细菌感染的方法，包括给予患有或易患有此病的病人治疗有效量的根据本发明的化合物。
治疗微生物特别是细菌感染所需的本发明化合物的精确量将因受治疗者而异，依赖于受治疗者的种类、年龄与一般条件、所治疗疾病的严重性、所用特定化合物和给药方式，例如给药的途径和频率等等。本领域普通技术人员仅仅利用常规实验方法即可确定适当的有效量。
化合物的给药量可以从约0.1～100mg/kg体重每天，优选1～50mg/kg体重/天。可以理解的是，剂量可以因患者的需求，所治疗的细菌感染的严重性和所使用的特定化合物而异。而且，可以理解的是，所给药的最初剂量可以增加超出上限，目的是迅速达到所需血液水平，或者最初剂量可以小于最佳值，每日剂量可以在治疗期间逐渐增加，这依赖于具体的情况。如果需要的话，每日剂量也可以分为多剂量给药，例如每天2-4次。
哺乳动物表示人或动物。
活性成分，也就是根据本发明的化合物在药物组合物及其单位剂型中的量可以各不相同，依赖于特定应用、特定化合物的效力和所需浓度。一般而言，活性成分的含量将在0.5％～90％之间，按组合物的总重量计。
在联合疗法中，本发明化合物和其它化合物可以被同时或间隔给药，在同时给药时，本发明化合物和其他化合物可以被结合在单一的药物组合物中或者在分开的组合物中。
本发明还提供通式I的化合物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

将式II化合物与胍或者R₁和R₂取代的胍在有机溶剂中反应可制得通式I化合物，有机溶剂可选择醇、乙腈、DMF等溶剂，其中优选的反应溶剂为乙醇，反应温度为0～100℃，优选25～80℃。
其中R₁和R₂定义同上。
当需要通式I化合物的药学上可接受的盐时，可通过使用常规方法将所述化合物与适宜的酸反应来获得。
下面的合成路线1描述了本发明的通式I的制备，所有的原料都是通过这些示意图中描述的方法、通过有机化学领域普通技术人员熟知的方法制备的或者可商购。本发明的全部最终化合物都是通过这些示意图中描述的方法或通过与其类似的方法制备的，这些方法是有机化学领域普通技术人员熟知的。这些示意图中R₁和R₂定义同上。
以3-氟苯胺(VII)为起始原料，经与氯代甲酸甲酯发生酰化反应后，得到(3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(VI)，经与乙酰氯进行傅克反应后，制得化合物(4-乙酰基-3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(V)。在叔丁醇锂、甲醇的存在下，与化合物N-[(2S)-2-(乙酰氧基)-3-氯丙基]乙酰胺(IV)进行反应，经酸中和后，制得化合物N-[((5S)-3-(4-乙酰基-3-氟苯基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基)甲基]乙酰胺(III)。化合物III与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(DMF-DMA)发生反应，得到化合物II。化合物II与胍或者R₁和R₂取代的胍进行环合，制得通式I化合物。

路线1 化合物I的合成
其中化合物IV的制备如路线2所示，以苯甲醛为起始原料，经与(S)-环氧氯丙烷、氨水反应、酸水解制得(S)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐，再与乙酸酐发生酰化反应制得N-[(2S)-2-(乙酰氧基)-3-氯丙基]乙酰胺(IV)。

路线2 N-[(2S)-2-(乙酰氧基)-3-氯丙基]乙酰胺(IV)的合成
以(R)-环氧氯丙烷或者(R，S)-环氧氯丙烷为起始原料，按照化合物IV的制备方法，可分别得到(R)-1-乙酰胺基-3-氯-2-丙醇锂或者(R，S)-1-乙酰胺基-3-氯-2-丙醇锂，继而与(4-乙酰基-3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(V)反应，可分别得到通式I化合物的对映异构体或者消旋体。
对本发明多个化合物进行了体外抗菌活性研究，结果如下：
供试样品除菌后用M-H肉汤对倍稀释成一系列浓度，最高浓度为128mg/L。在96微孔稀释板每排第12孔中加入100μL M-H肉汤培养基作为空白对照，第11孔加入50μL M-H肉汤，按照从低至高的顺序从第10孔至第1孔依次加入50μL样品供试液。
挑取适量受试菌及标准菌株接种在适合其生长的Mueller-Hinton(M-H)营养肉汤培养基中，于37℃培养16-18h，生长后的菌液用生理盐水校正浓度至0.5麦氏比浊标准，再用M-H肉汤1∶100稀释，此液作为供试菌液。然后在第1～11孔接种50μL试验菌液，振摇混合后置于垫有湿纱布的有盖方盘内，37℃培养18-20h。
在有黑色背景的光源下观察结果，有菌生长的孔内会有弥漫性混浊或孔底部呈扣子样沉淀，无菌生长的孔内无此现象。在无菌生长的孔内所含的最低药物浓度即为最低抑菌浓度(MIC)。试验结果见表1。
表1部分实施例化合物对多种细菌的活性
MIC：ug/mL



a：耐甲氧西林金葡菌；b：耐万古霉素金葡菌；c：耐青霉素肺炎链球菌
体外抗菌活性测试结果表明，本发明中的化合物具有比利奈唑酮更为优良的抗菌活性，并且对耐药菌抗菌活性显著，同时副作用小，生物利用度高，稳定性好，溶解迅速，优于利奈唑酮的效果。
具体实施方式：
以下实施例旨在阐述而不是限制本发明的范围。化合物的核磁共振氢谱用Bruker ARX-300测定，质谱用Agilent 1100 LC/MSD测定；所用试剂均为分析纯或化学纯。
实施例1 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
1.1 N-[(2S)-2-乙酰氧基-3-氯丙基]乙酰胺(IV)的制备
1.1.1 (S)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐的制备
将苯甲醛59.0g(0.56mol)溶于乙醇150ml中，向反应液中滴加氨水58.0ml(0.55mol)，搅拌，向反应液中滴加(S)-环氧氯丙烷58ml(0.88mol)，控制滴加速度保持反应温度低于40℃。滴毕，35-40℃反应6h，然后将反应液降至室温继续反应12h。减压蒸出大部分溶剂，加入甲苯100ml。搅拌，将溶液升至35-40℃，滴入盐酸水溶液(68ml盐酸，77ml水)，滴毕，35-40℃搅拌3h。静置，分出水层，有机层水洗，合并水层。加入乙醇40mL，减压蒸除乙醇，反复加入乙醇并蒸除乙醇。残余液于-18℃冷冻过夜，析出白色固体，抽滤，用冷的少量乙醇洗，真空干燥，得(S)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐，43g，收率52.7％。
1.1.2 N-[(2S)-2-(乙酰氧基)-3-氯丙基]乙酰胺(IV)的制备
将(S)-1-氨基-3-氯-2-丙醇盐酸盐40g(0.27mol)、乙酸酐60ml(0.62mol)加入二氯甲烷100mL中，控制温度在35-40℃滴加吡啶28ml(0.34mol)。滴毕，于此温度下反应5h，然后室温反应14h。反应毕，向反应液中加入水50mL，冰水浴冷却，滴入47％碳酸钾水溶液800mL，控制反应温度低于10℃。滴毕，二氯甲烷提取，合并有机层，水洗，无水硫酸钠干燥。蒸干，得固体，抽滤，异辛烷洗涤，得固体N-[(2S)-2-(乙酰氧基)-3-氯丙基]乙酰胺43.7g，收率为88.3％。
1.2 N-[[(5S)-3-(4-乙酰基-3-氟苯基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺(III)的制备
1.2.1 (3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(VI)的制备
将3-氟苯胺20.0g(VII，0.18mol)加入二氯甲烷120ml中，加入吡啶14.2g(0.18mol)，搅拌，向反应液中滴加氯甲酸甲酯18.7g(0.2mol)的二氯甲烷溶液(30ml)，控制滴加速度使反应温度低于40℃。滴毕，室温反应5h。反应毕，水洗反应液，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸干，得白色固体30.1g，收率98.8％。
1.2.2 (4-乙酰基-3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(V)的制备
将(3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(VI)16.9g(0.1mol)加入三颈瓶中，加入三氯化铝40.0g(0.3mol)，搅拌升温至35-40℃，向反应瓶中滴加乙酰氯15.7g(0.2mol)。滴毕，升温到50-60℃反应3h。将反应液倒入适量碎冰中，搅拌，抽滤，滤饼用80％甲醇重结晶，得(4-乙酰基-3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(V)14.9g，收率70.8％。
1.2.3 N-[[(5S)-3-(4-乙酰基-3-氟苯基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺(III)的制备
将化合物(4-乙酰基-3-氟苯基)氨基甲酸甲酯(V)21.1g(V，0.1mol)加入无水DMF 100mL中，搅拌溶解，加入无水甲醇8.14mL(0.2mol)。20℃下，向反应液中滴加叔丁醇锂23.7g(0.3mol)的无水DMF 100mL溶液，控制滴加速度，维持反应温度低于24℃。滴毕，将反应液冷至0-5℃，加入N-[(2S)-2-(乙酰氧基)-3-氯丙基]乙酰胺34.6g(0.2mol)。反应液缓慢升温至20-25℃反应21h。反应毕，向反应液中滴加饱和氯化铵溶液100ml，搅拌，再加入200ml水和200mL二氯甲烷，分液，水层用二氯甲烷提取，合并有机层，饱和氯化钠溶液洗，干燥，减压蒸干溶剂，得油状物，甲醇重结晶，得N-[[(5S)-3-(4-乙酰基-3-氟苯基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺10.2g，收率34.7％，[M+H⁺]：295.5。
1.3 N-[[(5S)-3-[4-[(E)-3-(二甲氨基)-2-烯-丙酰基]-3-氟苯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺(II)的制备
将N-[[(5S)-3-(4-乙酰基-3-氟苯基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺20.8g(III，0.071mol)、N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(DMF-DMA)50.5mL(0.38mol)加入至乙醇300mL中，在N₂保护下，加热回流反应5h，然后将反应液冷至室温继续搅拌10h。反应毕，蒸干溶剂，抽滤，得固体11.2g，收率45.4％，[M+H⁺]：349.9。
1.4 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
将钠(10.6g，0.46mol)加入乙醇460mL中，加热回流至完全溶解。加硝酸胍56.1g(0.46mol)回流1h，冷却，抽滤，得到胍的乙醇溶液。将化合物N-[[(5S)-3-[4-[(E)-3-(二甲氨基)-2-烯丙酰基]-3-氟苯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺40g(II，0.115mol)加入400mL无水乙醇中，搅拌，向反应液中滴加上述制得胍的乙醇溶液，滴毕，室温搅拌2h，反应液中析出大量固体，抽滤，乙醇洗，得固体23.8g，收率60.3％。mp：238-240℃；¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ1.82(s，3H)，3.42(t，2H，J＝5.4Hz，)，3.77(dd，1H，J＝6.7，9.1Hz)，4.16(dd，1H，J＝8.9，9.1Hz)，4.76(m，1H)，6.71(s，2H)，6.94(m，1H)，7.46(dd，1H，J＝1.9，8.8Hz)，7.58(d，1H)，8.04(t，1H，J＝8.9Hz)，8.25(m，1H)，8.29(d，1H，J＝5.4Hz)；[M+H⁺]：346.1；[α]²⁰_D＝-27.2(c＝1.00，DMSO)。
实施例2 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺盐酸盐的制备
将N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺5.2g(0.015mol)加入80％乙醇中，搅拌下滴加盐酸乙醇溶液至pH＝2，加热回流，活性碳脱色，趁热抽滤，干燥，得N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺盐酸盐5.4g，收率95.1％。mp：227.3℃；[α]²⁰_D＝-25.3(c＝1.00，DMSO)。
实施例3 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺甲磺酸盐的制备
将N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺5.2g(0.015mol)加入80％乙醇中，搅拌下滴加甲磺酸至pH＝2，加热回流，活性碳脱色，趁热抽滤，干燥，得N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺甲磺酸盐6.2g，收率93.9％。
实施例4 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺羟乙磺酸盐的制备
将N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺5.2g(0.015mol)加入80％乙醇中，搅拌下滴加羟乙磺酸至pH＝2，加热回流，活性碳脱色，趁热抽滤，干燥，得N-[[(5S)-3-氟-4-(2-氨基嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺羟乙磺酸盐6.5g，收率92.6％。
实施例5 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(4-吗啉基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
5.1吗啉-4-甲脒硝酸盐的制备
将吗啉1.7g(0.02mol)加入无水乙醇10mL中，搅拌，加入硝酸1.4mL(0.02mol)和氰胺1.3g(0.03mol)，加热回流反应15h，反应毕，冷至室温，向反应液中加入乙醚80ml，冷冻过夜，析出白色结晶，抽滤，得吗啉-4-甲脒硝酸盐2.9g，收率75.2％。
5.2 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-(4-吗啉基)-嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
将钠(6.9g，0.3mol)加入乙醇460mL中，加热回流至完全溶解。加吗啉-4-甲脒硝酸盐57.6g(0.3mol)回流1h，冷却，抽滤，得到吗啉-4-甲脒的乙醇溶液。将化合物N-[[(5S)-3-[4-[(E)-3-(二甲氨基)-2-烯丙酰基]-3-氟苯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺26.1g(II，0.075mol)加入270mL无水乙醇中，搅拌，向反应液中滴加上述制得吗啉-4-甲脒的乙醇溶液，滴毕，加热回流5h，反应液中析出大量固体，抽滤，乙醇洗，得固体15.5g，收率60.3％。[M+H⁺]：416.1。
实施例6 N-[[(5S)-3-氟-4-(2-(1-吡咯烷基)-嘧啶-4-基)-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
按照实施例5中5.2的制备方法，将化合物II和四氢吡咯-1-甲脒反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(1-吡咯烷基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率80.2％，[M+H⁺]：410.3。
实施例7 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
按照实施例5中5.2的制备方法，将化合物II和4-甲基哌嗪-1-甲脒反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率79.0％，[M+H⁺]：429.3。
实施例8 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(1H-咪唑-1-基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺的制备
按照实施例5中5.2的制备方法，将化合物II和咪唑-1-甲脒反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(1H-咪唑-1-基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率74.9％，[M+H⁺]：397.2。
实施例9 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(环己基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺
按照实施例5中5.2的制备方法，将化合物II和1-环己基胍反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(环己基氨基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率82.1％，[M+H⁺]：428.2。
实施例10 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(甲丁氨基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺
按照实施例5中5.2的制备方法，将化合物II和1-甲基-1-丁基胍反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(甲丁氨基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率79.2％，[M+H⁺]：416.1。
实施例11 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(甲基环丙氨基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺
按照实施例5中5.2的制备方法，将化合物II和1-甲基-1-环丙基胍反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(甲环丙氨基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率77.1％，[M+H⁺]：400.1。
实施例12 N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺
按照实施例4中4.2的制备方法，将化合物II和哌啶-1-甲脒反应，制得N-[[(5S)-3-氟-4-[2-(哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基]甲基]乙酰胺，收率82.3％，[M+H⁺]：414.2。
实施例13实施例1化合物片剂(250mg/片)的制备
取实施例1化合物250g、淀粉30g、2％HPMC水溶液80mL、羧甲基淀粉钠15g、硬脂酸镁2g，按照以下步骤：
a、配制2％HPMC溶液适量，备用；
b、将原、辅料适当干燥，分别过100目筛，备用；
c、按处方量称取原、辅料。将实施例1化合物、淀粉、羧甲淀粉钠混合均匀后，加入2％HPMC溶液制成软材，用20目筛制湿颗粒；
d、湿颗粒于55℃干燥约3小时，干燥后稍放凉，加入硬脂酸镁，用20目筛整粒；测定含量，计算片重；
e、选用10mm浅凹型冲头压片，制得1000片；
f、成品检验，合格后，包装入库。
实施例14实施例2化合物胶囊(125mg/粒)的制备
取如下组分：实施例2化合物125g、淀粉15g、乳糖15g、2％HPMC水溶液约40mL、羧甲基淀粉钠7.5g、硬脂酸镁1g。按照以下步骤进行：
a、配制2％HPMC溶液适量，备用。
b、将原、辅料适当干燥，分别过100目筛，备用。
c、按处方量称取原、辅料。将实施例2化合物、淀粉、乳糖、羧甲基淀粉钠混合均匀后，加入2％HPMC溶液制软材，用20目筛制湿颗粒。
d、湿颗粒于55℃干燥约3小时，干燥后稍放凉，加入硬脂酸镁，用20目筛整粒。测定含量，计算装量。
e、选用2#胶囊壳灌装颗粒，得胶囊1000粒。
f、将胶囊剂抛光、除尘。
g、成品检验，合格后，包装入库。
实施例15实施例3化合物分散片(250mg/粒)的制备
取如下组分：实施例3化合物250g、预胶化淀粉50g、微晶纤维素50g、羧甲基淀粉钠20g、2％HPMC水溶液约90ml、微粉硅胶20g、甜叶菊糖甙18g、硬脂酸镁2g，按照如下步骤进行制备：
a、配制2％HPMC溶液适量，备用。
b、将原、辅料适当干燥，分别过100目筛，备用。
c、按处方量称取原、辅料。将实施例4化合物、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲淀粉钠、甜叶菊糖甙混合均匀后，加入2％HPMC溶液制成软材，用20目筛制湿颗粒。
d、湿颗粒于55℃干燥3小时，干燥后稍放凉，加入微粉硅胶、硬脂酸镁，用20目筛整粒。测定含量，计算片重。
e、选用11mm浅凹型冲头压片，得1000片。
f、成品检验，合格后，包装入库。
实施例16实施例4化合物氯化钠注射液(100mL:250mg)的制备
取如下组分：实施例4化合物250g、氯化钠825g、枸椽酸6.5g、注射用水加至100L，按照以下步骤进行：
a、称取处方量的实施例4化合物、氯化钠和枸椽酸。
b、将主、辅料溶于约占配制总量90％的注射用水(80℃左右)中，搅拌使完全溶解。
c、加入0.05％经120℃活化2小时的针用活性炭，搅拌，静置15分钟。
d、用0.6μm的钛棒过滤器过滤脱炭后，补加注射用水至全量。
e、检测中间体颜色、澄明度、pH值、含量等，合格后，用0.45μm的聚砜过滤器粗滤和0.22μm聚砜过滤器精滤。
f、灌封1000瓶、压塞、轧盖、110℃热压灭菌45分钟，灯检、全检合格、贴标签、包装即得。