单核甘氨酰异羟肟酸、丙氨酰异羟肟酸 二烃基锡配合物及其合成 【技术领域】
本发明涉及一系列具有抗癌活性的有机锡配合物及其合成方法。具体为单核甘氨酰异羟肟酸、丙氨酰异羟肟酸二烃基锡配合物及其合成。
背景技术
有机锡类抗癌配合物(见文献Coord.Chem.Rev.1996，151，41；Appl.Organomet.Chem，1993，7，201；1994，8，19；1995，9，639；1995，9，251)普遍存在水溶性差的问题。在开发成新药时这一问题给剂型研究带来很大困难。同时，水溶性差，脂溶性相对好带来了较大的毒性，降低了生物利用度。这些都不利于新药开发。
【发明内容】
本发明为解决现有技术中存在的问题，开发一系列具有高效、广谱、低毒抗癌活性、水溶性好的有机锡配合物及其合成方法。
本发明是采用如下技术方案实现的：本发明合成的单核氨基酰异羟肟酸二烃基锡配合物R2Sn(H2NCH(Z)CONHO)2，通过元素分析、红外光谱以及核磁共振氢谱确认了该配合物的结构通式如下：结构式中R＝Bu，Ph；结构式中Z＝H时，配体(HL1)为甘氨酰异羟肟酸，Z＝CH3时，配体(HL2)为丙氨酰异羟肟酸。1.合成路线：
2.合成方法
(1)配体(HL1)—甘氨酰异羟肟酸的合成：
将1.4克(35mmol)氢氧化钠溶于10ml的冰水中，并在搅拌下加入0.8克(12mmol)盐酸羟胺，再缓慢地加入1.4克(12M，10mmol)甘氨酸乙酯盐酸化物，室温搅拌，然后冰浴中用浓盐酸酸化至pH＝7，产生白色沉淀，抽滤。用双蒸水重结晶，干燥至恒重得产品。
(2)配体(HL2)—丙氨酰异羟肟酸的合成：
将1.5克(10mmol)丙氨酸乙酯盐酸化物和0.8克(12mmol)盐酸羟胺溶于10ml冰水中，搅拌下缓慢滴加1.4克(12M，35mmol)氢氧化钠溶液，室温搅拌，冰浴中用浓盐酸酸化至pH＝8，析出白色沉淀，抽滤。用水重结晶，干燥至恒重得产品。
(3)配合物R2SnL2的合成按下述反应进行：
将2.0-2.8mmol HL(HL1、HL2)溶于10ml甲醇中，加入0.112克(2mmol)KOH的甲醇溶液10ml，然后加入1.0-1.7mmol二氯二烃基锡，搅拌逐渐有沉淀产生。然后室温下继续搅拌，过滤，沉淀先用冷水洗再用冷甲醇洗。重结晶，干燥至恒重得到单核氨基酰异羟肟酸二烃基锡配合物。
3.本发明实验所用仪器药品：
仪器：德国varlo EL元素分析仪
美国PE1730傅立叶变换红外光谱仪，以KBr压片制样
1HNMR用Varian 300MHz核磁共振仪
北京泰克仪器有限公司制显微熔点测定仪
药品：二氯二烃基锡购自Aldrich公司，其它试剂为分析纯，溶剂均经常规无水处理。
4.结构表征
(1).红外光谱分析
配体和配合物的IR数据列入表1中。我们可以观察到配体处于3200-2700cm-1的宽峰在相应配合物中均消失。这是由于在配合物中异羟肟酸-OH质子的离去和O原子的配位，造成分子内氢键的缔合作用消失所引起的。配体HL1的νc＝o出现在1609cm- 1，配体HL2的νc＝o出现在1632cm-1，而在相应配合物中νc＝o明显向低频移动至1594-1566cm-1，这表明配体的羰基氧原子与锡发生了很强的配位作用[5]。并且HL1的νN-O出现在886cm-1，HL2的νN-O在861cm-1，而配位后均移向高频至875-1024cm-1，这一方面排除了NH-OH基团中的氮原子配位，另一方面也佐证了是CONH-OH中的羰基氧与锡配位[6]。
配合物在523-420cm-1区域内，出现了两个吸收峰，而在配体中未有此峰，这是νsn-O峰。νSn-O二重峰的出现很可能是由于不同的Sn-O键长所致[7]，说明配体的两个O原子都和锡发生了配位作用。低于600cm-1范围内地吸收峰，这是νSn-C峰，这是R基团中的C原子和Sn原子作用的νSn-C峰。在配合物IR谱中确实未观察到νSn-N吸收峰，此峰大约在415cm-1处[8]。以上IR参数表明，配体是以其CO-NHOH基团中的两个氧原子与锡螯合的。表1.配体与配合物的红外光谱(IR)数据 No. Compound 1700-1500 Sn-O Sn-C N-O ＞2500 HL1 1609s，1562 m 886s 3032s，2877s， 3244m，3171m 1535m 2662s 1 Bu2Sn(L1)2 1578s 451w 588w 929m 3430sh，3357m 425w 562m 3239m，3150m 629m 2955s，2924s 2 Ph2Sn(L1)2 1566s 456s 582s 1024m 3430m，3335m 432s 540s 3275m，3162sh 3057m，2925m HL21632s，1522s 861s 3445sh，3029s，2796s，2625s，2527s 3 Bu2Sn(L2)2 1567s 523w 598w 875m 3430s，3265sh 420w 577w 2957s，2926s 619m 2857m 4 Ph2Sn(L2)2 1580s 520m 571m 972m 3436sbr 423m 2932m br 2714m br3040mw＝weak，m＝medium，s＝strong，vs＝very strong，br＝broad，sh＝shoulder.
(2).核磁共振氢谱分析
NMR数据见表2。图谱给出了所有相应于配合物的结果。表2.配体与配合物的核磁谱(NMR)数据N o.CompoundSolvertCH3CH2CHNH2Sn-R NH-OH(-NHO-)Otherdata HL1 a 2.97s 3.25s u b 1.61s 2.20s u 1 Bu2Sn(L1)2 a · u 0.83t u 1.05- 1.66m b · 3.53s br 0.89s 3.29s br 1.33s br 2 Ph2Sn(L1)2 b 1.91s br 3.65s br 7.49- 7.98m u HL2 a 1.05d 3.12d 3.33s u b 1.61d 2.21s 3.53s u 3 Bu2Sn(L2)2 b 1.35d 2.18m 3.67s br 0.88t 3.43s br 1.34- 1.53m 4 Ph2Sn(L2)2a 1.25d 3.64s 3.55s br 7.34- 7.98m ua，DMSO-d6；b，CDCl3；u，unobserved；*，D2O；·，overlapped by Bu group；m，multiplet；br，broad；d，doublet；s，singlet；t，triplet.
5.抗癌活性
体外抗癌活性见下表3。从表中的测试结果可知，本发明的系列化和物具有广谱、低毒和强效抗癌活性：
(1)广谱：该系列配合物中配体HL1和HL2的正丁基锡配合物对人白血病HL-60，人鼻癌KB，人肝癌Bel-7402，Hela，B，T均有很好抑制作用；配体HL1和HL2的苯基配合物有一定抑制作用。
(2)低毒：以Wish-人羊膜细胞为例，用SRB法，作用时间72h，发现该系列配合物对正常细胞的毒性浓度为10-6mol/L，比其对肿瘤细胞的抑制浓度10-8mol/L差两个数量级。
(3)强效：该系列配合物中HL1和HL2的正丁基锡配合物对人白血病HL-60，人鼻癌KB，人肝癌Bel-7402，Hela，B，T均呈现很好的抗癌活性。HL1的苯基配合物对Hela，B，T均呈现很好的抗癌活性。HL2的苯基配合物对人白血病HL-60，人肝癌Bel-7402，B，T均呈现很好的抗癌活性。其中HL1和HL2的正丁基锡配合物能强烈抑制人鼻咽癌细胞的增殖，因此这一性质对于鼻咽癌化疗药物的开发具有开拓性的意义，有可能进一步研制开发出对鼻咽癌有特效的药物。
表3。单核氨基酸异羟肟酸有机锡配合物体外活性测试结果
BGC- Bel-编号 配合物 HL-60 EJ KB Hela
823 7402
HL1 - - - - - -
HL2 - - - - - -1 Bu2Sn(L1)2 + + + + +++ ++2 Bu2Sn(L2)2 + + + ++ +++ ++3 Ph2Sn(L1)2 - - - ++ + ++4 Ph2Sn(L2)2 + - ++ - ++ ++ 结果评价：-无效；+弱效；++显效；+++强效
本发明的系列配合物，由于配体采用氨基酰异羟肟酸，水溶性好，便于人体吸收和各种剂型的研制。同时，合成方法简便易行，无脂溶性溶剂存在，改善了环保，减少了回收投资。
【具体实施方式】
实施例1：
配合物[Bun2Sn(L1)2]的合成，结构如前所述：
1、合成路线：
2.合成方法
(1)配体(HL1)—甘氨酰异羟肟酸的合成：
将1.4克(35mmol)氢氧化钠溶于10ml的冰水中，并在搅拌下加入0.8克(12mmol)盐酸羟胺，再缓慢地加入1.4克(12M，10mmol)甘氨酸乙酯盐酸化物，室温搅拌，然后冰浴中用浓盐酸酸化至pH=7，产生白色沉淀，抽滤。用双蒸水重结晶，干燥至恒重得产品。
(2)单核甘氨酰异羟肟酸二烃基锡配合物——Bu2Sn(H2NCH2CONOH)2的合成：
将0.180克(2.0mmol)HL1溶于10ml甲醇中，加入O.112克(2mmol)KOH的甲醇溶液10ml，然后加入0.303克(1.0mmol)二氯二丁基锡，搅拌逐渐有沉淀产生，然后室温下搅拌，过滤，沉淀先用冷水洗再用冷甲醇洗。重结晶，干燥至恒重，得到产品Bu2Sn(L1)2。
3、用途：
该配合物对人白血病HL-60，人鼻癌KB，人肝癌Bel-7402，Hela癌细胞，B癌细胞，T癌细胞均呈现极好的抑制力。
实施例2：
配合物[Phn2Sn(L2)2]的合成，结构如前所述：
1、合成路线：
2.制备方法
(1)配体(HL2)—丙氨酸异羟肟酸[CH3(H2N)CHCONHOH]的合成：
将1.5克(10mmol)丙氨酸乙酯盐酸化物和0.8克(12mmol)盐酸羟胺溶于10ml冰水中，搅拌下缓慢滴加1.4克(12M，35mmol)氢氧化钠溶液，室温搅拌，冰浴中用浓盐酸酸化至PH8，析出白色沉淀，抽滤。用水重结晶，干燥至恒重得产品。
(2)单核丙氨酸异羟肟酸二烃基锡配合物——Phn2Sn[CH3(H2N)CH2CONOH]2的合成
将0.291克(2.8mmol)HL2溶于10ml甲醇中，加入0.112克(2mmol)KOH的甲醇溶液10ml，然后加入0.550克(1.6mmol)二氯二苯基锡，搅拌逐渐有沉淀产生，然后室温下搅拌，过滤，沉淀先用冷水洗再用冷甲醇洗。重结晶，干燥至恒重，得到产品Phn2Sn(L2)2。3.用途：
该配合物对人白血病HL-60，人鼻癌KB，人肝癌Bel-7402，Hela癌细胞，B癌细胞，T癌细胞均呈现极好的抑制力。