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1、10申请公布号CN104173438A43申请公布日20141203CN104173438A21申请号201410450520222申请日20140905A61K36/535200601A61K127/0020060171申请人南京泽朗生物科技有限公司地址211225江苏省南京市溧水县白马镇工业集中区食品园3号72发明人苏刘花杨存54发明名称一种紫苏总黄酮的制备方法57摘要本发明涉及一种紫苏总黄酮的制备方法，具体涉及一种采用酶微波法提取紫苏总黄酮的方法。其处理步骤包括将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量12的复合酶，混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于3040发酵35天；取出，加入。
2、5070的乙醇溶液，进行微波萃取2040MIN，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；将所得浓缩液经大孔树脂上柱、洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮。本发明以乙醇为溶剂，既价廉又无毒，其纯化物总黄酮的含量可达70以上，且重现性好，树脂可重复使用。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104173438ACN104173438A1/1页21一种紫苏总黄酮的制备方法，其特征在于A将紫苏叶阴干，粉碎；B向上述原料中加入原料重量12的复合酶，混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于3040发酵35天。
3、；C取出，加入35倍的5070的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率400600W的条件下萃取2040MIN，过滤，滤液减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；D将所得浓缩液上大孔树脂柱，经46倍树脂体积的6070的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮。2根据权利要求1所述一种紫苏总黄酮的制备方法，其特征在于步骤B中所述的复合酶为比例050302的纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的混合物。3根据权利要求1所述的一种紫苏总黄酮的制备方法，其特征在于步骤D中所述的树脂用量与原料的质量比为11。4根据权利要求1所述的一种紫苏总黄酮的制备方法，其特征在于步骤D中所述的大孔树脂类型为HPD100、HPD400、AB。
4、8。权利要求书CN104173438A1/2页3一种紫苏总黄酮的制备方法技术领域0001本发明涉及一种紫苏总黄酮的制备方法，属于中药有效成分提取领域。背景技术0002紫苏叶为唇形科植物紫苏的叶，又称苏叶，为一年生草本植物。其含有多种化学成分，如花色素苷、黄酮、黄酮苷等16种黄酮类化合物，以及迷迭香酸、紫苏醛、紫苏酮、榄香素、石竹烯等。0003黄酮类化合物是指基本母核为2苯基色原酮的系列化合物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分，种类繁多，具有多种生物活性，除具有抗菌、消炎、抗病变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显著效果，是一种重要的具有开发。
5、前景的天然有机抗氧化剂。近年来黄酮类化合物的研究倾向于其药用价值的开发，更多地涉及提取工艺的应用研究、黄酮类化合物的含量测定及制剂制备。0004目前国内外黄酮的提取、纯化方法主要有回流提取法、超临界流体萃取法、聚酰胺柱层析法等。这些方法均存在诸多不足回流提取法，具有耗时长、有效成分提取率低、操作复杂的缺点；超临界流体萃取法虽然具有无溶剂残留、提取率高、环保等优点，但其提取条件苛刻，设备昂贵，维修困难，不适合工业化生产；而聚酰胺纯化法对黄酮类成分的不可逆吸附值高，其得率低，且洗脱麻烦。发明内容0005本发明是针对现有技术的不足，旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现。
6、的制备紫苏总黄酮的方法。0006本发明的技术方案按照下列步骤进行A将紫苏叶阴干，粉碎；B向上述原料中加入原料重量12的复合酶，混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于3040发酵35天；C取出，加入35倍的5070的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率400600W的条件下萃取2040MIN，过滤，滤液减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；D将所得浓缩液上大孔树脂柱，经46倍树脂体积的6070的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮。0007步骤B中所述的复合酶为比例050302的纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的混合物。0008步骤D中所述的树脂用量与原料的质量比为11。0009步骤D中所述。
7、的大孔树脂类型为HPD100、HPD400、AB8。0010黄酮类化合物是胞内物质，选用复合酶来分解构成细胞壁和细胞质的纤维素、半纤维素和果胶质，使其细胞壁水解破裂，从而增大了有效成分的扩散面积，有利于细胞内物质的溶出。而微波是一种超高速电磁波，具有很强的穿透作用，使植物细胞中的水分或有机说明书CN104173438A2/2页4溶剂迅速升温升压，细胞壁穿孔，使成分从细胞中溶出，以增加紫苏中有效成分在溶剂中的溶解，而且微波电磁场使分子运动短时间内加剧，从而缩短了时间，提高了提取率。本发明利用酶法和微波提取两种技术联用，优势互补，大大地提高了紫苏总黄酮的提取率，再结合大孔吸附树脂的纯化技术，即可得。
8、到高得率、高含量的紫苏总黄酮。0011下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。0012具体实施方式实施例1将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量1的复合酶（纤维素酶半纤维素酶果胶酶050302），混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于30发酵3天。取出，加入3倍的50的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率400W的条件下萃取20MIN，萃取液减压浓缩，回收乙醇，将所得浓缩液加入与原料等质量的HPD100大孔树脂柱，经4倍树脂体积的60的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮，提取率为801，经UV检测，总黄酮的含量为706。0013实施例2。
9、将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量2的复合酶（纤维素酶半纤维素酶果胶酶050302），混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于40发酵4天。取出，加入4倍的60的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率500W的条件下萃取30MIN，萃取液减压浓缩，回收乙醇，将所得浓缩液加入与原料等质量的AB8大孔树脂柱，经5倍树脂体积的70的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮，提取率为852，经UV检测，总黄酮的含量为754。0014实施例3将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量15的复合酶（纤维素酶半纤维素酶果胶酶050302），混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于35发酵5天。取出，加入5倍的70的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率600W的条件下萃取40MIN，萃取液减压浓缩，回收乙醇，将所得浓缩液加入与原料等质量的HPD400大孔树脂上柱，经6倍树脂体积的65的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮，提取率为831，经UV检测，总黄酮的含量为752。说明书CN104173438A。