一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法.pdf

本发明公开了一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法，属水产养殖领域。本技术核心是先用蒸馏瓶培养3种海洋微藻作为鸟喙尖头涵饵料，然后用抽滤瓶充气培养溞，投喂海洋微藻并补充投喂面包酵母。该技术培养鸟喙尖头溞，溞体质健壮，生长快，操作方便，设备简单，不易污染，溞产量提高120％。

1.  一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法，其特征在于步骤如下：
步骤1鸟喙尖头溞饵料微藻的培养
微藻培养液成分(重量份数比)：硝酸铵0.6份，过磷酸钙0.4份，牛粪浸出液1.2份，海泥抽提液1.5份，土壤浸出液0.8份，碳酸氢钠0.5份，氯化钙0.6份，硫酸钾0.8份，人尿1份，异丁叉环二脲0.05份，α-萘乙酸0.001份，硅酸钠0.02份，硫酸亚铁0.02份，维生素B₁0.002份，维生素B₁₂0.0001份，生物素0.004份，尼克酸0.0003份，α-萘乙酸0.00001份，硫酸镁0.05份，Fe-EDTA 0.0002份，氯化锌0.0002份，钼酸铵0.00001份，脱落酸0.00001份，硼砂0.06分，硫酸铜0.004份，煮沸冷却后的磁化海水1000份；取一煮沸消毒过的1500毫升的圆形蒸馏瓶，加入上述培养液800毫升，摇匀，取生长旺盛、处于指数生长期、无污染、纯种的亚心形扁藻Platymonas subcordiformis，球等鞭金藻Isochrysis galbana，娇柔塔胞藻Pyramimonas delicatula依次分别进行接种，进行混合培养；接种密度为亚心形扁藻4万个细胞/毫升，球等鞭金藻6万个细胞/毫升，娇柔塔胞藻3.5万个细胞/毫升，摇匀，将此蒸馏瓶放进微藻培养室进行培养。瓶口处用一橡胶塞塞住，塞子上打一孔，插入一根直径4-5毫米的玻璃管用以充气，玻璃管底部插入接近瓶底，上端用较柔软的塑料或乳胶管与空压机相连，充入混合气体，充气量为1-2升/分钟，混合气体成分为V_空气∶V_{纯二氧化碳}∶V_纯氨气＝99％∶0.9％∶0.1％(体积比)，连续不间断充气；微藻培养室内空调控温，节能灯照明，共培养9天，前3天温度设为21℃，光照强度为4500lux，第4-6天温度设为24C，光照强度6000lux，第7-9天设为27℃和8000lux，第6天添加新鲜培养液60毫升，以补充营养盐的消耗，第7天添加蒸馏水50毫升，以补充因充气造成的水分的损耗并稀释藻液，到第9天，亚心形扁藻密度可达65万个细胞/毫升，球等鞭金藻密度达150万个细胞/毫升，娇柔塔胞藻达90万个细胞/毫升，停止培养，撤除空压机和充气管等，准备用此混合藻液投喂鸟喙尖头溞；
步骤2用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞
取一洗刷干净的3000毫升的抽滤瓶，加入煮沸冷却后的磁化海水1200毫升，用体质健壮、无污染的鸟喙尖头溞进行接种，接种量为30个，轻轻摇匀，第1天投喂步骤1所述微藻液50毫升，从第2天开始，每天投喂步骤1所述微藻液30毫升，分早中晚三次投喂，每次间隔8小时，每次10毫升；瓶口处用一橡胶塞塞住，塞子上打一孔，插入一根直径5-6毫米的玻璃管用以充气，玻璃管底部插入接近瓶底，上端用较柔软的塑料或乳胶管与空压机相连，充入空气，充气量为2-3升/分钟；每隔3分钟充气一次，每次充3分钟，循环往复；将此抽滤瓶放入室内培养，空调控温，温度设为25-28℃，节能灯提供光照，光照强度设为5000-6000 lux；共培养24天，从第12天开始，每天补充投喂面包酵母150毫克，分早中晚三次投喂，每次间隔8小时，每次50毫克；从第8天开始，每隔2天用煮沸冷却后的磁化海水换水1次，换水量为总水量的1/4-1/3，换水时用孔径100-150微米的筛绢过滤，防止鸟喙尖头溞逃逸；从15天开始每隔2天采收鸟喙尖头溞一次，每次采收量为总溞量的1/3-1/2，采收方法是用孔径为100-150微米的筛绢做成的小网捞取；采收后，换水并补充投喂饵料，继续培养，到第24天，全部一次性采收，培养完毕。

一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法
技术领域 本发明属于水产养殖领域，尤其涉及一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法。
背景技术
鸟喙尖头溞Penlilia avirosoros是一种生活于海洋中的小型枝角类浮游动物，隶属于节肢动物门Arthropoda，甲壳纲Crustacea，鳃足亚纲Babchiopoda，双甲目Diplostraca，枝角亚目Cladocera，仙达溞科Sididae。枝角类广布于淡水、海水和内陆半咸水，迄今为止，中国已发现淡水枝角类136种，海水5种，内陆咸水23种。作为生物饲料培养的淡水枝角类有大型溞Daphnia magna和多刺裸腹溞Moina macrocopa，半咸水种类蒙古裸腹溞Moina mongolina，海水种鸟喙尖头溞Penlilia avirosoros。我国渔民很早就掌握了发塘技术，懂得在鱼池中培养枝角类作为稚、幼鱼饲料。随着水产养殖业发展，枝角类作为水产动物苗种活饲料，需要量越来越大，现有产量不能满足生产需要，有关枝角类生长、繁殖、人工培养和饲料价值研究正在深入。
鸟喙尖头溞雌体长0.78-1.30毫米。体近长方形，透明。壳瓣背缘稍拱起，腹缘几乎平直，后缘弯曲几呈S形。腹缘与后缘边沿均具细棘。后腹角突出，延伸出一根短而粗的壳刺。头与吻部均尖突。复眼较小，无单眼。第一触角前侧有一长触毛，长度超过触角，末端为一簇嗅毛。第二触角长大，内、外肢均分2节，共有游泳刚毛13根。胸肢6对。后腹部细长，无肛刺列。尾毛很长，位于圆锥状突起上。尾爪细长，具2个大小不等爪刺。生活于海洋近岸温暖低盐水域，为常见种，主要出现于7-9月。分布于福建台山、平潭、厦门、东山、闽南渔场等地和渤海、黄海、东海、南海(香港、海南和东、西、中沙群岛)海域及世界其它温暖海区，主要以细菌、酵母菌、藻类及有机碎屑(动植物残片)为食，是带鱼、舌鳎、大小黄鱼、鲳鱼、河豚、对虾、梭子蟹等经济鱼虾蟹优良饵料。
关于枝角类培养方法，过去瞿孝江、陈瑞芳发明了一种蒙古裸腹溞集约化的生产方法(申请号CN201210555801)，该发明通过对蒙古裸腹溞的生殖、发育、摄食、生长等方面展开的综合研究，了解其在各个阶段的特性。利用室内水泥池及室外池塘培育实现蒙古裸腹溞的集约化生产，形成科学可行并在生产上能被充分应用的实用技术，缓解我国目前育苗生产中生物饵料供应不足的现状。但该法投资和占地面积大，产量低，养殖周期长。
另外，赵文和何志辉发明了蒙古裸腹溞的海水驯化及室内高密度培养方法(申请号CN200710011131)，该发明具体步骤是采集蒙古裸腹溞及原水至容器中，采集密度小于100个/l；将蒙古裸腹溞在原水中培养，每日填加过滤海水将盐度升高1-2，使盐度达到30-35， 光照强度5000-7000lux，光周期L∶D＝12h∶12h，温度保持25-28℃，每日用海水培养的小球藻(200万个/mL)投喂，直至蒙古裸腹溞正常生长繁殖。蒙古裸腹溞的室内高密度培养方法是：将经过海水驯化的蒙古裸腹溞接种到养殖容器，用海水培养的小球溞投喂，培养至溞密度为2000-5000个/l；取经过上一步骤培养后的蒙古裸腹溞至微流水养成池，用小球藻及酵母作为饵料连续投喂。光照强度5000-7000lux，光周期L∶D＝12h∶12，溶解氧含量6-8mg/l，水体pH 7-8；当培养溞密度达到15000-20000个/l，进行采收。但该法投资大，效益低，技术要求高，一般工人难以掌握。
为了克服目前技术的不足，本发明提供了一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法。本技术核心是先用蒸馏瓶培养3种海洋微藻作为鸟喙尖头溞饵料，然后用抽滤瓶充气培养溞，投喂海洋微藻并补充投喂面包酵母。该技术培养鸟喙尖头溞，溞体质健壮，生长快，操作方便，设备简单，不易污染，溞产量提高120％。
发明内容
为了克服目前技术的不足，本发明提供了一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞方法，方法如下：
步骤1鸟喙尖头溞饵料微藻的培养
微藻培养液成分(重量份数比)：硝酸铵0.6份，过磷酸钙0.4份，牛粪浸出液1.2份，海泥抽提液1.5份，土壤浸出液0.8份，碳酸氢钠0.5份，氯化钙0.6份，硫酸钾0.8份，人尿1份，异丁叉环二脲0.05份，α-萘乙酸0.001份，硅酸钠0.02份，硫酸亚铁0.02份，维生素B₁ 0.002份，维生素B₁₂ 0.0001份，生物素0.004份，尼克酸0.0003份，α-萘乙酸0.00001份，硫酸镁0.05份，Fe-EDTA 0.0002份，氯化锌0.0002份，钼酸铵0.00001份，脱落酸0.00001份，硼砂0.06分，硫酸铜0.004份，煮沸冷却后的磁化海水1000份。取一煮沸消毒过的1500毫升的圆形蒸馏瓶，加入上述培养液800毫升，摇匀，取生长旺盛、处于指数生长期、无污染、纯种的亚心形扁藻Platymonas subcordiformis，球等鞭金藻Isochrysis galbana，娇柔塔胞藻Pyramimonas delicatula依次分别进行接种，进行混合培养。接种密度为亚心形扁藻4万个细胞/毫升，球等鞭金藻6万个细胞/毫升，娇柔塔胞藻3.5万个细胞/毫升，摇匀，将此蒸馏瓶放进微藻培养室进行培养。瓶口处用一橡胶塞塞住，塞子上打一孔，插入一根直径4-5毫米的玻璃管用以充气，玻璃管底部插入接近瓶底，上端用较柔软的塑料或乳胶管与空压机相连，充入混合气体，充气量为1-2升/分钟，混合气体成分为V_空气∶V_{纯二氧化碳}∶V_纯氨气＝99％∶0.9％∶0.1％(体积比)。连续不间断充气。微藻培养室内空调控温，节能灯照明，共培养9天，前3天温度设为21℃，光照强度为4500lux，第4-6天温度设为24℃，光照强度6000lux，第7-9天设为27℃和8000lux，第6天添加新鲜培养液60毫升，以补充营养盐的消耗，第7天添加蒸馏水50毫升，以补充因充气造成的水分的损耗并稀释藻液， 到第9天，亚心形扁藻密度可达65万个细胞/毫升，球等鞭金藻密度达150万个细胞/毫升，娇柔塔胞藻达90万个细胞/毫升，停止培养，撤除空压机和充气管等，准备用此混合藻液投喂鸟喙尖头溞。
步骤2用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞
取一洗刷干净的3000毫升的抽滤瓶，加入煮沸冷却后的磁化海水1200毫升，用体质健壮、无污染的鸟喙尖头溞进行接种，接种量为30个，轻轻摇匀，第1天投喂步骤1所述微藻液50毫升，从第2天开始，每天投喂步骤1所述微藻液30毫升，分早中晚三次投喂，每次间隔8小时，每次10毫升。瓶口处用一橡胶塞塞住，塞子上打一孔，插入一根直径5-6毫米的玻璃管用以充气，玻璃管底部插入接近瓶底，上端用较柔软的塑料或乳胶管与空压机相连，充入空气，充气量为2-3升/分钟。每隔3分钟充气一次，每次充3分钟，循环往复。将此抽滤瓶放入室内培养，空调控温，温度设为25-28℃，节能灯提供光照，光照强度设为5000-6000lux。共培养24天，从第12天开始，每天补充投喂面包酵母150毫克，分早中晚三次投喂，每次间隔8小时，每次50毫克。从第8天开始，每隔2天用煮沸冷却后的磁化海水换水1次，换水量为总水量的1/4-1/3，换水时用孔径100-150微米的筛绢过滤，防止鸟喙尖头溞逃逸。从15天开始每隔2天采收鸟喙尖头溞一次，每次采收量为总溞量的1/3-1/2，采收方法是用孔径为100-150微米的筛绢做成的小网捞取。采收后，换水并补充投喂饵料，继续培养，到第24天，全部一次性采收，培养完毕。
有益结果
为了克服目前技术的不足，本发明提供了一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法。本技术核心是先用蒸馏瓶培养3种海洋微藻作为鸟喙尖头溞饵料，然后用抽滤瓶充气培养溞，投喂海洋微藻并补充投喂面包酵母。该技术培养鸟喙尖头溞，溞体质健壮，生长快，操作方便，设备简单，不易污染，溞产量提高120％。
附图说明
图1鸟喙尖头溞的形态；
图2用蒸馏瓶培养饵料微藻的方法；箭头所指为气体走向；
图3用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法；箭头所指为气体走向；
具体实施方式
一种用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞的方法，步骤如下：
步骤1鸟喙尖头溞饵料微藻的培养
微藻培养液成分(重量份数比)：硝酸铵0.6份，过磷酸钙0.4份，牛粪浸出液1.2份，海泥抽提液1.5份，土壤浸出液0.8份，碳酸氢钠0.5份，氯化钙0.6份，硫酸钾0.8份， 人尿1份，异丁叉环二脲0.05份，α-萘乙酸0.001份，硅酸钠0.02份，硫酸亚铁0.02份，维生素B₁ 0.002份，维生素B₁₂ 0.0001份，生物素0.004份，尼克酸0.0003份，α-萘乙酸0.00001份，硫酸镁0.05份，Fe-EDTA 0.0002份，氯化锌0.0002份，钼酸铵0.00001份，脱落酸0.00001份，硼砂0.06分，硫酸铜0.004份，煮沸冷却后的磁化海水1000份；取一煮沸消毒过的1500毫升的圆形蒸馏瓶，加入上述培养液800毫升，摇匀，取生长旺盛、处于指数生长期、无污染、纯种的亚心形扁藻Platymonas subcordiformis，球等鞭金藻Isochrysis galbana，娇柔塔胞藻Pyramimonas delicatula依次分别进行接种，进行混合培养；接种密度为亚心形扁藻4万个细胞/毫升，球等鞭金藻6万个细胞/毫升，娇柔塔胞藻3.5万个细胞/毫升，摇匀，将此蒸馏瓶放进微藻培养室进行培养。瓶口处用一橡胶塞塞住，塞子上打一孔，插入一根直径4-5毫米的玻璃管用以充气，玻璃管底部插入接近瓶底，上端用较柔软的塑料或乳胶管与空压机相连，充入混合气体，充气量为1-2升/分钟，混合气体成分为V_空气∶V_{纯二氧化碳}∶V_纯氨气＝99％∶0.9％∶0.1％(体积比)，连续不间断充气；微藻培养室内空调控温，节能灯照明，共培养9天，前3天温度设为21℃，光照强度为4500lux，第4-6天温度设为24℃，光照强度6000lux，第7-9天设为27℃和8000lux，第6天添加新鲜培养液60毫升，以补充营养盐的消耗，第7天添加蒸馏水50毫升，以补充因充气造成的水分的损耗并稀释藻液，到第9天，亚心形扁藻密度可达65万个细胞/毫升，球等鞭金藻密度达150万个细胞/毫升，娇柔塔胞藻达90万个细胞/毫升，停止培养，撤除空压机和充气管等，准备用此混合藻液投喂鸟喙尖头溞；
步骤2用抽滤瓶培养鸟喙尖头溞
取一洗刷干净的3000毫升的抽滤瓶，加入煮沸冷却后的磁化海水1200毫升，用体质健壮、无污染的鸟喙尖头溞进行接种，接种量为30个，轻轻摇匀，第1天投喂步骤1所述微藻液50毫升，从第2天开始，每天投喂步骤1所述微藻液30毫升，分早中晚三次投喂，每次间隔8小时，每次10毫升；瓶口处用一橡胶塞塞住，塞子上打一孔，插入一根直径5-6毫米的玻璃管用以充气，玻璃管底部插入接近瓶底，上端用较柔软的塑料或乳胶管与空压机相连，充入空气，充气量为2-3升/分钟；每隔3分钟充气一次，每次充3分钟，循环往复；将此抽滤瓶放入室内培养，空调控温，温度设为25-28℃，节能灯提供光照，光照强度设为5000-6000lux；共培养24天，从第12天开始，每天补充投喂面包酵母150毫克，分早中晚三次投喂，每次间隔8小时，每次50毫克；从第8天开始，每隔2天用煮沸冷却后的磁化海水换水1次，换水量为总水量的1/4-1/3，换水时用孔径100-150微米的筛绢过滤，防止鸟喙尖头溞逃逸；从15天开始每隔2天采收鸟喙尖头溞一次，每次采收量为总溞量的1/3-1/2，采收方法是用孔径为100-150微米的筛绢做成的小网捞取；采收后，换水并补充投喂饵料，继续培养，到 第24天，全部一次性采收，培养完毕。
步骤1中所述牛粪浸出液制备方法：取牛粪50公斤，加入麸皮3公斤，玉米面1公斤，自来水4升，充分搅拌，堆成圆锥状，自然发酵15天，后摊成薄层，阳光下暴晒3天，后取3公斤放入水桶中，加入10升蒸馏水，充分搅匀，静置，24小时后100目筛绢过滤，取滤液加热，煮沸45分钟，杀死其中的细菌、霉菌、病毒等，冷却，沉淀12小时，取上清液，即得牛粪浸出液，装入磨口塞试剂瓶，密封，置于4℃冰箱备用；
步骤1中所述土壤浸出液制备方法：取树林中上层土壤1000份，加蒸馏水1000份，再加NaOH 2.5份，加热，煮沸45分钟，冷却、沉淀12小时，取上清液，滤纸过滤，滤液即为土壤浸出液；
步骤1中所述海泥抽提液制备方法：取比较肥沃又不於黑的海泥，以1份泥加2份淡水，充分搅拌均匀，静置1-2分钟，取上层泥浆于铝锅中，按每1000毫升泥浆加1克NaOH的量加入NaOH，煮沸25分钟。煮时需不断搅拌均匀，煮后静置24小时取上清液备用；
步骤1中所述硝酸铵，碳酸氢钠，氯化钙，硫酸钾，异丁叉环二脲，α-萘乙酸，硅酸钠份，硫酸亚铁，维生素B₁，维生素B₁₂，生物素，尼克酸，α-萘乙酸，硫酸镁，Fe-EDTA，氯化锌，钼酸铵，脱落酸，硼砂，硫酸铜化学药品纯度均需化学纯级别；
步骤1和2中所述磁化水制作方法：海水经脱脂棉过滤后，煮沸，冷却，流经磁化水器后，即为磁化水。磁化水器磁感应强度为0.3T，流量为3t/h，流速为0.2m/s。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。