本发明涉及一种高效、谱广的抗肿瘤生物制剂（简BC-369以下同）的制造方法。利用本发明方法制造的BC-369对肝癌、肺癌、恶性淋巴癌、宫颈癌、白血病、乳腺癌、结肠癌、胃癌都有明显的治疗效果。 目前尚未发现抗肿瘤效果较高的生物制剂，因此也未发现相应的制造方法。现在国内外承认和使用的抗肿瘤生物制剂为“卡介菌”其制造方法是从结核菌培养、分离而得。用这种方法制造的“卡介菌”对肿瘤虽有抑制作用，但主要增强机体的免疫力、食欲和抵抗力，对肿瘤的治疗作用很小。
本发明的目的在于提供一种抗肿瘤谱广、治疗作用显著，既有免疫作用、又有对癌细胞有杀伤作用的生物制剂的制造方法。
本发明的制造方法是将鸡新城病毒、神经氨酸酶、唾液酸酶、核酸酶、生物素、磷脂、胆固醇、岩藻糖和附加剂糖蛋白G1，糖蛋白G2，尿嘧啶、维生素C、三磷酸腺戎（ATP）、氯化钾、半乳糖、吐温-80，硫酸镁等配制而成。
本发明的制造方法包括下列步骤：
1、鸡新城病毒的培养和选择。
首先选择出呼吸道紊乱，伴有罗音、气喘和咳嗽、抑郁、虚脱和严重腹泻、排出绿色稀粪的患鸡瘟的病鸡。然后，从病鸡呼吸道分泌物或肺组织中分离出鸡新城病毒。
选择健康母鸡孵育地鸡胚，最好为9-11令的鸡胚，将上述分离的鸡新城病毒接种于鸡胚的尿囊腔中。置于37-38℃下培养48-72小时。至胚内含大量病毒，呈现较高血凝性。
从鸡胚中抽出尿囊液，利用血凝集抑制试验方法，进行病毒定性。
2、鸡新城病毒的扩大种植，培养和鸡新城病毒尿囊液的收集
先用抗菌素处理病料（即上述鸡新城病毒尿囊液），使病料中的抗菌素浓度分别为每毫升青霉素1000单位和链霉素1000毫克。也可以用静脉滴注金霉素处理，浓度为每毫升1毫克，处理的病料置于4℃中感作1-2小时。
选择10-12日令的鸡胚，画出气室和胚位，在气室接近胚位处涂3%的碘酒和75%的酒精消毒，用无菌钢锥穿一小孔，随后将注射器沿小孔插入0.5～1.0厘米处，注入0.1～0.2毫升接种物（即上述采用抗菌素处理过的鸡新城病毒尿囊液），用石蜡封口，在孵育箱中孵育48-72小时。
将孵育好的鸡胚冻死，用碘酒和酒精消毒后，除去气室端的卵壳或人工卵窗的封盖物，除去卵壳、撕去内层壳膜和绒毛尿囊膜，直接吸收尿囊液。
以上各项操作必须在无菌条件下进行。
3、鸡新城病毒尿囊液效价测定及效价调整。
利用红细胞凝集法测定效价，然后将测定的鸡新城病毒尿囊液的效价调整到1∶640。方法是：取鸡新城病毒尿囊液10毫升测定其效价，若效价低于1∶640，则滴加无菌高效价1∶1280鸡新城病毒尿囊液，使抽样10毫升的效价达1∶640为止，算出滴加无菌高效价的毫升数。
利用公式计算：
配制效价1∶640鸡新城病毒尿囊液X毫升需加无菌高效价（1∶1280）鸡新城病毒尿囊液的毫升数＝效价低于1∶640的鸡新城病毒尿囊液X毫升× (滴加高效价毫升数（1∶1280）)/(抽样毫升数（10毫升）)
取鸡新城病毒尿囊液10毫升测效价若高于1∶640则滴加生理盐水（0.85%），使取样10毫升效价为1∶640为止，算出滴加无菌生理盐水毫升数。
利用计算公式：
配制效价1∶640鸡新城病毒尿囊液X毫升需加无菌高效价（1∶1280）鸡新城病毒尿囊液的毫升数＝效价高于1∶640的鸡新城病毒尿囊液X毫升× (生理盐水毫升数)/(抽样毫升数（10毫升）)
4、对调整好效价的尿囊液进行灭菌，灭菌方法可采用中速低温离心法灭菌，也可以采用过滤法灭菌，即用0.2-0.5mμ滤膜过滤灭菌。还可以采用低温灭菌即在-70℃以下或-196℃以下（液氮）中保存灭菌。
5、鸡新城病毒尿囊液、酶、附加剂注射液的配制。
鸡新城病毒尿囊液三酶及附加剂配制成BC-369注射液的具体方法。
A：糖蛋白G10.72克
糖蛋白G20.36克
按顺序溶于160毫升0.075NHCL溶液中，置水浴中半小时。
B：生物素1.0毫克
先溶于7.5毫升去离子水中，再加入0.1毫升1NHCL再加去离子水至10毫升。
C：磷脂2.0毫克
胆固醇4.0毫克
将磷脂溶于4毫升95%酒精中，然后加入胆固醇，用力振荡使之溶化，再加入5%吐温-80水溶液10毫升。
D：唾液酸酶2毫克，溶于10毫升去离子水中。
E：尿嘧啶10毫克
溶于100毫升去离子水中，予先在瓶内加0.35毫升的浓NH4OH。
F：神经氮酸酶2毫克
溶于20毫升去离子水中，4℃冰箱中避光保存备用。
G：Vjt C5毫克溶于10毫升去离子水中。
H：核酸酶2毫克。
溶于10毫升去离子水中，4℃冰箱中避光保存备用。
I：95%ATP200毫克溶于10毫升去离子水中。
J：鸡新城病毒尿囊液1500毫升去菌备用。
K：凝血素10毫克溶于去离子水中，室温保存。
L：各组溶液混合秩序：
1.先加160毫升A溶液。
2.加B溶液2毫升。
3.加F溶液20毫升。
4.加10%KCL22毫升。
5.加MgSO4·7H2O3.6克。
6.加半乳糖水溶液25毫升。
7.加岩藻糖水溶液10毫升。
8.加唾液酸酶水溶液10毫升。
9.加C溶液14毫升。
10.加H溶液10毫升。
11、加J200毫升。
12、加E溶液54毫升。
13、加G溶液10毫升。
14、加J溶液1500毫升。
15、加K溶液20毫升。
配制好的注射液进行灌封，灌封必须在同一室内进行，间隔不能超过6小时，且要在严格的无菌操作条件下进行，室温4℃以下为宜。
本发明具有如下的优点和效果：
利用本发明的方法所制备的生物制剂BC-369，对动物试验和对人的临床试验都显示了较好的治疗效果。
一、对动物试验结果。
①BC369对昆明杂系小鼠EAC的影响：
BC369 24μg/kg48μg/kg腹腔注射给药后12只小鼠长期存活30天以上，4只死亡小鼠均为30天后意外死亡或处死。而非治疗组则于接种后第16天内全部死亡，平均生存时间为12.7天。
②BC369对S180、HAC和Lewis肺癌的抑制作用
不同剂量的BC369经腹腔给药后对S180、HAC和LeWis肺癌有较强的抑制作用（P＜0.001）：见表1