复合溶媒的稀释后供静脉注射的大蒜素浓缩溶液 技术领域
本发明涉及一种复合溶媒的稀释后供静脉注射的大蒜素注射液。
背景技术
大蒜素(diallyl trisulfide)又名大蒜新素，化学名为三硫二丙烯。是百合科葱属植物大蒜Allium Satium L.的地下鳞茎中分离出的一种活性化合物，目前用于注射液的研究和生产的原料多系人工合成。现代药理研究表明：大蒜素具有广谱的抑真菌和杀真菌作用。同时大蒜素还具有降血脂、扩张血管、抗动脉粥样硬化、抗血小板聚集、抗肿瘤等作用。由于大蒜素抗菌和抑菌效果确切，主要是作为抗感染药物应用。大蒜素注射液是临床上的常用剂型之一。适用于深部真菌和细菌感染，用于防治急慢性菌痢和肠炎、百日咳、肺部和消化道的真菌感染、白色念珠菌菌血症、隐球菌性脑膜炎、肺结核等。因其疗效高、安全、起效快、无副作用等优点而被广泛用于临床。
目前，有关大蒜或其活性成分的注射液的研究，都集中在大蒜素的提取工艺或其以水为溶剂的注射液的工艺。但在以水为溶媒的条件下，大蒜素性能较不稳定，在外界条件影响下，大蒜素的颜色易加深甚至变得粘稠，其生物学功能也随着降低。研究表明，常温(28℃)下大蒜素水溶液在偏酸性(尤其是pH5～7)的条件下较为稳定；在不同的温度范围内，随着时间地延长，大蒜素含量均呈下降趋势，但温度越高，大蒜素含量下降越快。以水为溶媒的大蒜素注射液通过调整pH、加入抗氧剂、尽量在晾暗处贮存等方面尽可能的降低大蒜素的分解。但对已上市的某种大蒜素注射液(水性溶媒)进行质量研究，表明，储存12个月后，大蒜素分解了30％以上。有关物质(杂质)增加。这一现象不利于大蒜素注射液产品的长期的安全的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复合溶媒的稀释后供静脉注射的大蒜素浓缩溶液，在该复合溶媒中，温度、光等外界条件对大蒜素的影响下降，可保证大蒜素的化学成分三硫二丙烯长期稳定。
本发明的技术方案是：一种复合溶媒的稀释后供静脉注射的大蒜素浓缩溶液，包括活性化合物大蒜素、混合溶媒、注射用非离子型增溶剂，所述的混合溶媒包括乙醇，所述的混合溶媒还包括丙二醇、丙三醇、液态聚乙二醇三种溶媒中的至少一种，所述的浓缩溶液中大蒜素的含量为5～40毫克/毫升；所述的混合溶媒的用量应足以使所述的大蒜素溶解并保持稳定。
所述大蒜素又名大蒜新素，化学名为三硫二丙烯。所述大蒜素、乙醇、低碳多元醇、液态聚乙二醇、水、注射剂用非离子型增溶剂均为可供静脉注射的药用产品。
注射用非离子型增溶剂是指可用于注射给药的可增加难溶性药物在溶媒中的溶解度的非离子型表明活性剂。一般包括：聚氧乙烯单硬脂酸酯、蔗糖的高级脂肪酸酯、吐温、司盘、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段聚合物、聚氧乙烯与高级脂肪醇缩合物。
称取大蒜素和注射剂用非离子型增溶剂混合均匀，加入预先混合制得的乙醇、低碳多元醇、液态聚乙二醇与水中的几种组成的复合溶媒，调pH值，过滤得微黄色的澄明溶液，灌封于医药注射液允许使用的容器中，无菌检查合格，包装即得。
本发明与现有技术相比，专利88103251.4涉及了使用95％乙醇从大蒜中提取，主要为含醇的大蒜注射液的提取制备；专利00117206.9及02129468.2涉及了使用超临界萃取技术提取大蒜素，属前道工序技术。所有关于大蒜注射液的制备技术均为水或者含醇的水溶液。按照专利和相关制剂技术制得的大蒜素注射液，正常条件下，大蒜素分解速度仍达到每年20％以上，有关物质(杂质)增加较快，产品稳定性差。我们经过充分研究和摸索后，证实采用复合溶媒制备大蒜素注射液，可以较好地抑制大蒜素分解，大大提高产品稳定性。在正常条件下，大蒜素分解速度每年低于3％。
2、大蒜素稳定性试验：
我们根据中国药典2000年版二部附录“药物稳定性实验指导原则”中的有关内容，对我们试制的大蒜素注射液综合进行大蒜素注射液的稳定性考察。做加速试验和长期试验。同时对相同条件下贮存6个月的市售的一种大蒜素注射液进行对比研究。试制样品共3批。
表1大蒜素注射液40℃加速试验考察结果
时间 批号 考察项目
性状 pH值 颜色 澄明度 含量(％)
030316
微黄色澄明液体 4.83 Y-3号 符合规定 104.9
2003.3.19 030317
微黄色澄明液体 4.80 Y-3号 符合规定 104.7
(0个月) 030318
微黄色澄明液体 4.77 Y-3号 符合规定 106.8
030316
微黄色澄明液体 4.85 Y-3号 符合规定 104.7
2003.4.19 030317
微黄色澄明液体 4.89 Y-3号 符合规定 104.3
(1个月) 030318
微黄色澄明液体 4.91 Y-3号 符合规定 105.7
030316
微黄色澄明液体 4.75 Y-3号 符合规定 103.9
2003.5.19 030317
微黄色澄明液体 4.65 Y-3号 符合规定 105.0
(2个月) 030318
微黄色澄明液体 4.79 Y-3号 符合规定 105.5
030316
微黄色澄明液体 4.87 Y-3号 符合规定 102.5
2003.6.19 030317
微黄色澄明液体 4.89 Y-3号 符合规定 105.1
(3个月) 030318
微黄色澄明液体 4.80 Y-3号 符合规定 104.2
030316
微黄色澄明液体 4.71 Y-3号 符合规定 102.6
2003.9.19 030317
微黄色澄明液体 4.79 Y-3号 符合规定 105.3
(6个月) 030318
微黄色澄明液体 4.76 Y-3号 符合规定 104.8
表2大蒜素注射液长期试验考察结果
时间 考察项目
批号
(月)
性状 pH值 颜色 澄明度 含量(％)
030316
微黄色澄明液体 4.83 Y-3号 符合规定 104.9
2003.3.19 030317
微黄色澄明液体 4.80 Y-3号 符合规定 104.7
(0个月) 030318
微黄色澄明液体 4.77 Y-3号 符合规定 106.8
030316
微黄色澄明液体 4.73 Y-3号 符合规定 106.7
2003.6.19 030317
微黄色澄明液体 4.78 Y-3号 符合规定 105.0
(3个月) 030318
微黄色澄明液体 4.81 Y-3号 符合规定 107.5
030316
微黄色澄明液体 4.87 Y-3号 符合规定 104.4
2003.9.19 030317
微黄色澄明液体 4.85 Y-3号 符合规定 105.8
(6个月) 030318
微黄色澄明液体 4.70 Y-3号 符合规定 104.6
表3贮存条件下放置6个月后试制样品与对照药品各项测试结果对比
项目 对照药品 我公司样品
批号 20030301 030316 030317 030318
微黄色澄明液 微黄色澄明液 微黄色澄明液体， 微黄色澄明液
性状
体，具蒜臭 体，具蒜臭 具蒜臭 体，具蒜臭
鉴别 呈正反应 呈正反应 呈正反应 呈正反应
溶液的颜色 Y-3号 Y-3号 Y-3号 Y-3号
pH 5.13 4.83 4.80 4.77
澄明度 符合规定 符合规定 符合规定 符合规定
含量(％) 49.8 104.9 104.7 106.8
结论 不符合规定 符合规定 符合规定 符合规定
具体实施方式
下面通过实施例对本发明的技术方案作进一步的描述：
一种复合溶媒的稀释后供静脉注射的大蒜素浓缩溶液，包括活性化合物大蒜素、混合溶媒、注射用非离子型增溶剂和药用配方辅料，所述的混合溶媒包括乙醇，还包括低碳多元醇或聚乙二醇或低碳多元醇与聚乙二醇的混合物，所述的低碳多元醇是指丙二醇或丙三醇或丙二醇与丙三醇的混合物，所述的聚乙二醇是指液态聚乙二醇，所述的浓缩溶液中大蒜素的含量为5～40毫克/毫升；所述的混合溶媒的用量应足以使所述的大蒜素溶解并保持稳定。
所述的混合溶媒中，乙醇的用量的体积比为40％～60％。
所述的混合溶媒中还包括水，在所述的混合溶媒中，低碳多元醇的用量体积比为30～60％、液态聚乙二醇用量的体积比为0～30％、水的用量体积比为0～20％。
所述的注射用非离子型增溶剂是聚氧乙烯单硬脂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油之一或其混合物；
所使用的注射剂用非离子型增溶剂的量与所述活性化合物大蒜素的用量有关，相对于1克活性化合物，加注射剂用非离子型增溶剂的量为4～15克。
药用配方辅料包括pH调节剂，可以从盐酸、乳酸、乙酸、枸橼酸、苹果酸中选用。药用配方辅料还可以是抗氧剂，但一般不需应用，如必要可以选用亚硫酸氢钠或硫脲。灌装容器可选择2ml～10ml安瓿或医药注射液允许使用的玻璃容器，如条件允许可以充氮气以进一步减缓大蒜素分解。如需灭菌，可用100℃流动蒸汽灭菌30min。浓缩溶液的pH值应为3.0～5.0。
实施例：
(1)
乙醇 400ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 320ml 吐温-80 60～90ml
液态聚乙二醇 280ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(2)
乙醇 400ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 360ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 240ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(3)
乙醇 400ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 400ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 200ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(4)
乙醇 500ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 400ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 100ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(5)
乙醇 500ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 450ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 50ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(6)
大蒜素 10～20g
乙醇 500ml 吐温-80 40～90ml
丙二醇 500ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(7)
乙醇 550ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 440ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 10ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(8)
大蒜素 10～20g
乙醇 600ml 吐温-80 40～90ml
丙二醇 400ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(9)
大蒜素 10～20g
乙醇 400ml 吐温-80 40～90ml
丙二醇 600ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(10)
乙醇 360ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 540ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 100ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(11)
乙醇 400ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 360ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 140ml 混合溶液 适量
水 100ml
组成混合溶液 总量 至1000ml
(12)
乙醇 500ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 300ml 吐温-80 40～90ml
液态聚乙二醇 50ml 混合溶液 适量
水 150ml
组成混合溶液 总量 至1000ml
(13)
乙醇 500ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 300ml 吐温-80 40～90ml
水 200ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(14)
乙醇 300ml 大蒜素 10～20g
丙二醇 500ml 吐温-80 40～90ml
水 200ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
(15)
乙醇 500ml 大蒜素 10～20g
液态聚乙二醇 300ml 吐温-80 40～90ml
水 200ml 混合溶液 适量
组成混合溶液 总量 至1000ml
本发明的复合溶媒的大蒜素浓缩溶液均按如下操作制得：称取处方量的大蒜素和吐温-80混合均匀，加入预先按一定比例制得的乙醇、低碳多元醇、液态聚乙二醇、水混合组成的复合溶媒，调pH值，再加入0.01％(w/v)活性炭，并加复合溶媒至全量，用钛棒初滤，然后通过0.45μm或0.22μm的滤芯精滤，灌封于2ml～10ml安瓿或医药注射液允许使用的玻璃容器中，无菌检查合格，包装即得。
相关试验表明：在正常贮存条件下，本发明的非水的大蒜素浓缩溶液能保证大蒜素的化学成分三硫二丙烯长期稳定。温度、光等外界条件对大蒜素的影响明显下降。
本发明的复合溶媒的大蒜素浓缩溶液可被稀释于临床普遍使用的氯化钠注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、甘露醇注射液、林格氏液等多种静脉输液中，采用静脉滴注等方法应用于人体或动物体的有关治疗。
本发明涉及的复合溶媒的稀释后供静脉注射的大蒜素浓缩溶液，与水、乙醇体系的大蒜素注射液一样，对多种球菌、百日咳杆菌、白喉杆菌、痢疾杆菌、伤寒及副伤寒杆菌、大肠杆菌、结核杆菌等有抑制和杀菌作用。对真菌感染有抑制作用。对阿米巴原虫、阴道滴虫、蛲虫等也有抑制杀灭作用。