整联蛋白受体拮抗剂 本发明涉及结合于整联蛋白(integrins)，如玻连蛋白受体和纤维蛋白原受体的药物活性化合物。这些化合物可用于抑制血小板凝集和附着于骨骼的破骨细胞。
整联蛋白是一族常见的介导细胞结合的杂二聚体蛋白质，典型的此类蛋白是玻连蛋白受体(αvβ3杂二聚体)和纤维蛋白原受体(αIIbβ3)。已经发现这些受体如玻连蛋白和纤维蛋白原的天然配体共享一个-Arg-Gly-Asp-氨基酸序列，这是结合的关键。事实上，很多整联蛋白受体好象能与具有这种氨基酸序列的配体发生交联反应。例如使αIIbβ3受体与纤连蛋白和玻连蛋白、血小板反应蛋白和Von Willebrand因子，以及纤维蛋白原反应。功能性纤维蛋白原，对αIIbβ3有二个结合点，与血小板表面上发现的活化受体进行反应。αIIbβ3受体通过纤维蛋白原在相邻血小板上的结合导致交联被认为是血小板凝聚的主要因素。能够抑制αIIbβ3受体与纤维蛋白原结合的化合物可以显示出体外抑制血小板凝聚和在体内抑制血栓形成的性质，参见例如EP-A-0341915。
在多种细胞中发现了玻连蛋白受体，例如在破骨细胞和在血管内壁的内皮细胞中。最近的研究表明，破骨细胞对骨骼基质的附着是通过这些细胞表面不粘着受体介导的。例如，Davies，等人，J.Cell Biol.，1989，109，1817公开了破骨细胞的功能性抗原，它与骨吸收的调节有关，此抗原与玻连蛋白受体在生化方面是相关的。已知玻连蛋白受体与骨骼基质蛋白质如骨桥蛋白、骨骼诞蛋白和血小板反应蛋白相结合，它们含有三肽Arg-Gly-Asp(或RGD)基元。Horton等人在Exp.Cell Res.，1991，195，368中公开了含有RGD的肽以及抗玻连蛋白受体抗体(23C6)能抑制破骨细胞引起地牙质的吸收和细胞扩散。Bertolini等在J.Bone Min.Res.，6，Sup.1，S146，252中指出环-S，S-Nα-乙酰基一半胱氨酰基-Nα-甲基-精氨酰基-甘氨酰基-天冬氨酰基-青霉胺酰胺能抑制破骨细胞附着在骨骼上。此外，Sato等人在J.Cell Biol.，1990，111，1713公开了锯鳞血抑肽(echistatin)，是含有RGD序列的一种蛇毒液肽，它是组织培养中骨吸收的潜在抑制剂，并且能抑制破骨细胞附着于骨骼。Fishcr等人在Endocrinology，1993，132，1411中进一步指出锯鳞血抑肽抑制大鼠体内的骨吸收。EP528587和528586报导了抑制介导骨吸收的破骨细胞的取代的苯基衍生物。
Bondinell等人在WO93/00095(PCT/US92/05463)和WO94/14776(PCT/US93/12436)中公开了用于抑制纤维蛋白原(αIIbβ3)受体的某些含有取代6-7双环体系的化合物。能抑制纤维蛋白原受体的其它6-7双环体系由Blackburn等公开在WO93/08174(PCT/US92/08788)。Blackburn等在WO95/04057 PCT(US94/07989)中还公开了有5-或6-元环稠合于这些6-7双环体系形成三环的体系，它们可用作纤维蛋白原受体的拮抗剂。其它具有6-7双环体系能选择抑制玻连蛋白受体的化合物公开于WO96/00730(PCT/US95/08306)和WO96/00574(PCT/US95/08146)。现已公开了在制备整联蛋白受体拮抗剂时是有用的模板的某些新的三环体系，还公开了以这种环系作为模板，还可以适当取代它们，以制备对纤维蛋白原受体或玻连蛋白受体之一有选择性的化合物。
本发明的目的是提供如下文所述的式(I)化合物，该化合物具有抑制整联蛋白受体的药学活性。本发明的目的是提供一种模板，使该模板适当取代以使其相对于其相互之间的结合和与其它整联蛋白之间的结合能与特异性整联蛋白，特别是与纤维蛋白原(αIIbβ3)或玻连蛋白(αvβ3)受体选择结合。
本发明还涉及含有式(I)化合物和药用载体的药物组合物。
本发明还涉及治疗疾病的方法，这些疾病的病理可能由于和整联蛋白，特别是玻连蛋白或纤维蛋白原受体结合而改变。更具体的说，本发明的化合物可用于治疗骨质疏松症、动脉粥样硬化、再狭窄、癌症以及需要抑制血小板凝聚的症状，例如中风、瞬时局部缺血、心肌梗塞和溶解血栓的治疗后再次形成的血栓。
本发明包括下式(I)化合物或其药学上可接受的盐：其中
A是C或N；
E是被R3或R4任意取代的五-或六-元杂芳基或六-元芳基环；
X1-X2是CHR1-CH，CR1＝CH，NR1-CH，S(O)u-CH或O-CH；
X3是CR5R5′，NR5，S(O)u或O；
R′是H，C1-6烷基，C3-7环烷基-C0-4烷基，Ar-C0-4烷基；
R″是R′，-C(O)R′或-C(O)OR5；
R′″是C1-6烷基，C3-7环烷基-C0-4烷基或Ar-C0-4烷基；
R1是H，C1-6烷基，C3-7环烷基-C0-4烷基或Ar-C0-4烷基；
R2是-OR′，-NR′R″，-NR′SO2R′″，NROR′，-OCR′2C(O)OR′，-OCR′2OC(O)R′，-OCR′2C(O)NR′2，CF3或-COCR′2R2′；
R2′是-OR′，-CN，-S(O)rR′，S(O)2NR′2，-C(O)R′C(O)NR′2或-CO2R′；
R5和R5′各自独立的是H，C1-6烷基，C3-7环烷基-C0-4烷基或Ar-C0-4烷基；
R6是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-或W′-(CR′2)q-U-(CR′2)s；
R3、R4和R7各自独立的是H，卤素，-OR12，-SR12，-CN，-NR′R12，NO2，-CF3，CF3S(O)r-，-CO2R′，-CONR′2，R14-C0-6烷基-，R14-C1-6氧代烷基-，R14-C2-6链烯基-，R4-C2-6炔基-，R14-C0-6烷氧基，R14-C0-6烷氨基或R14-C0-6烷基-S(O)r-，
R8是R′，C(O)R′，CN，NO2，SO2R′，或C(O)OR5；
R9是R′，-CF3，-SR′或-OR′；
R10是H，C1-4烷基或-NR′N″；
R12是R′，-C(O)R′，-C(O)NR′2，-C(O)OR5，-S(O)mR′或S(O)2NR′2；
R14是H，C3-6环烷基，Het或Ar；
R15是H，C1-10烷基，C3-7环烷基-C0-8烷基或Ar-C0-8烷基；
U和V可以没有，或为CO，CR′2，C(＝CR152)，S(O)n，O，NR15，CR15′OR15，CR′(OR″)CR′2，CR′2CR′(OR″)，C(O)CR′2，CR152C(O)，CONR15，NR15CO，OC(O)，C(O)O，C(S)O，OC(S)，C(S)NR15，NR15C(S)，SO2NR15，NR15SO2，N＝N，NR15NR15，NR15CR152，NR15CR152，CR152O，OCR152，C≡C，CR15＝CR15，Het或Ar，条件是U和V不能同时没有；
W是R′R″N-，R′R″NR′N-，R′R″NR′NCO-，R′2NR′NC(＝NR′)-，R′ONR′C(＝NR′)-，
Q是NR′，O或S；
Ra是H，C1-6烷基，Ar-C0-6烷基，Het-C0-6烷基，或C3-6环烷基-C0-6烷基，卤素，OR1，SR1，COR1，OH，NO2，N(R1)2，CO(NR1)2，CH2N(R1)2；
Rb和Rc各自独立地选自H，C1-6烷基，Ar-C0-6烷基，Het-C0-6烷基，或C3-6环烷基-C0-6烷基，卤素，OR1，SR1，COR1，OH，NO2，N(R1)2，CO(NR1)2，CH2N(R1)2，或者Rb和Rc结合形成五或六元芳环或非芳环，并且被卤素、C1-4烷基、OR1、SR1、COR1、OH、NO2、N(R1)2、CO(NR1)2、CH2N(R1)2、CN，或R″R′NC(＝NR′)-任意取代；
X是N＝CR′，C(O)或O；
Y可以没有，或是S或O；
Z是(CH2)t，Het，Ar或C3-7环烷基；
m是1或2；
n是0，1，2或3；
q是0，1，2或3；
r是0，1或2；
s是0，1或2；
t是0，1或2；
u是0，1或2；
v是0或1；和
W是0或1。
本发明还包括本发明化合物的药学上可接受的加成盐、复合物或前药。前药是在体内能释放出本发明式(I)活性母体药物的任何以共价键键合载体。在本发明化合物中有1个或多个手性中心的情况下，除非另有说明，本发明包括了每种单一的对映体化合物，它们可以是合成的和是用常规技术拆分的。在本发明化合物有碳-碳不饱和双键的情况下；顺式(Z)和反式(E)两种异构体都在本发明保护范围之内。在一些化合物中，可能存在着互变异构体，如酮-烯醇互变异构体，如和以及胍型基团的互变异构体，如R″和不管它们是在平衡状态下还是由R′适当取代而确定每一种形式的情况下各种互变异构形式均应理解为包括在本发明范围之内。在任一情况下某一取代基的意义是独立于在任何其它情况之下其本身的意义或任何其它取代基的意义，另有说明者除外。
更具体地说，本发明化合物是通式(II)或(III)化合物：其中A1和R1-12如通式(I)定义，A2-A5选自CH，CR3，CR4和N，B1-B3选自CR3，CR4，O，N和S，条件是所形成的E环是稳定的，并且是用常规制备方法容易制得的。
在一个实施方案中，本发明是式(IV)和碳环化合物：具体地说，是式(V-1)至(V-9)化合物：
在另一实施方案中，本发明化合物是有杂芳环连接于其上的碳环体系，如式(VI)或(VII)化合物：
在本发明的另一实施方案中包括了式(VIII)或(IX)的苯并氮杂化合物
适当的，A1是C。
优选X1-X2是CHR1-CH或NR1-CH。
适当的，X3是CR5R5′，优选的X3是CH2。
适当的，R1是H。适当的R2是OR′。适当的R3和R4是H。
适当的U是COR15，NR15CO，CH2CH2或CH2O，其中R15是C1-10烷基，由NO2、CN、CO2R′、R14-C0-6烷基或R14-C0-6烷氨基任意取代。
适当的，当U是Ar时它是苯环，优选是1，3-二取代的。
适当的R15是R′，更合适的R15是C1-6烷基，更合适的为H或甲基。
适当的，当要求式(I)化合物对纤维蛋白原受体有选择性亲合性时，R6是W-(CR′2)q-Z-(CR′R10)r-U-(CR′2)s-V-，以及R6优选取代为：在要求纤维蛋白原拮抗活性时，对R6而言适当的取代基是：，R″HNC(＝NH)NH-(CH2)3(CHR10)-U，and R″HN-(CH2)5-U其中G是N或CH，R20是氢，氨基，一或二C1-4烷氨基，羟基或C1-4烷基，以及U是NR′CO，CONR′，(CH2)CO，CH＝CH，C≡C，CH2O，OCH2和(CH2)2。
能激发纤维蛋白原选择性拮抗活性的最好的取代基是：或其中R′是H或C1-4烷基，优选的R′是甲基，和R″是H。
R6的特别优选基团是及
适当的，当要求式(I)化合物对玻连蛋白受体有选择性亲合性时，R6是W′-(CR′2)q-U-，并且优选R6被取代为：当要求有玻连蛋白结合活性时，优选的W′取代基是：及其中Q是NH。优选Rb和Rc结合形成环己基、苯基或吡啶环，适当的Ra是C1-6烷基，C1-6环烷基，卤素或R′NH。
适当的，-(CR′2)q-U-是(CH2)q-NR′CO，(CH2)q-CH2O或(CH2)q-CH2CH2。
为了增加玻连蛋白活性，特别优选的R6取代基是：及
通过适当选择取代基W和/或W′在6-7环体系的苯环上的位置，可以得到对玻连蛋白和纤维蛋白原受体之一，或是对二种受体均有选择性活性的化合物。一般来说，对纤维蛋白原拮抗活性而言，连接于七元环上的羰基部分的氧原子与W和W′的碱性氮原子之间的分子内距离最好为大约16埃；而对玻连蛋白拮抗活性而言，酸性和碱性中心各自之间的距离最好为大约14埃。
本发明的具体化合物是：
(±)-10，11-二氢-3-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；
(±)-10，11-二氢-3-[[[(4-氮杂-5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；
(±)-10，11-二氢-3-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；和
(±)-10，11-二氢-3-[1-(4，4′-联哌啶基)羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；
(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-苯并咪唑基)-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；
(±)-10，11-二氢-3-[[[2-(2-吡啶氨基)乙基]氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；
(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-吡啶氨基)-1-丙氧基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸；和
2-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-6，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-6-乙酸；
本文描述本发明化合物时所用的缩写和符号是肽和化学领域中常用的。
本文中所用的C1-4烷基是指甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。C1-6烷基是指除此之外还包括戊基、正戊基、异戊基、新戊基、和己基，以及他们简单的脂族异构体。除非另有说明，任何C1-4烷基和C1-6烷基可被R7取代。C0-4烷基和C0-6烷基是指另外还包括没有烷基基团存在的情况(例如，存在共价键的情况)。
本文中所用的C2-6链烯基是指其中的碳-碳单键被碳-碳双键代替的C2-6烷基，C2-6链烯基包括乙烯、1-丙烯、2-丙烯、1-丁烯、2-丁烯、异丁烯和戊烯或己烯的几个异构体，反式和顺式异构体两者均包括在内。除非另有说明，任何C2-6链烯基均可被R7任意取代。
C2-6炔基是指其中的碳-碳单键被碳-碳三键所代替的C2-6烷基、C2-6炔基包括乙炔、1-丙炔、2-丙炔、1-丁炔、2-丁炔、3-丁炔和戊炔和己炔的各种异构体。C2-6炔基中的任一SP3碳原子可被R7任意取代。
C1-4氧代烷基是指最多有4个碳的烷基上的CH2基团被C(O)，或羰基基团代替。各自是取代的甲酰基、乙酰基、1-丙醛、2-丙酮、3-丙醛、2-丁酮、3-丁酮、1-和4-丁醛基团。C1-6氧代烷基还包括羰基取代的更高级的五和六碳的类似物和异构体。C3-6氧代链烯基和C3-6氧代炔基是指其中的CH2基团被C(O)基团取代的C3-6链烯基或C3-6炔基。C3-4氧代烯基包括1-氧代-2-丙烯基，3-氧代-1-丙烯基、2-氧代-3-丁烯基等等。
在C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基或C1-6氧代烷基基团上的取代基，例如R7，可以是在能形成稳定结构的任一碳原子上，并且是由常规合成技术可以得到的。
R14-C1-6烷基是指其任一位置的碳-氢键被碳-R14键所代替。相对于C2-6链烯基和C2-6炔基而言R14-C2-6链烯基和R14-炔基有类似意义。
这里所用的Ar，或者芳基是指苯基或萘基，或者是由1至3个R7部分取代的苯基或萘基，具体的说，R7可以是C1-4烷基，C1-4烷氧基，C1-4烷硫基，三氟烷基，OH，F，cl，Br或I。
Het，或杂环是指含有1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的五或六元任选取代的单环，或任选取代的九或十元双环，它们是稳定的，并且是由常规化学合成方法能够得到的。可说明杂环的是苯并呋喃、苯并咪唑、苯并吡喃、苯并噻吩、呋喃、味唑、吲哚、二氢吲哚、吗啉、哌啶、哌嗪、吡咯、吡咯烷、四氢吡啶、吡啶、噻唑、噻吩、喹啉、异喹啉，和四氢和全氢喹啉和异喹啉。对Z部分而言，含有一个或两个氮的六元杂环，如哌啶、哌嗪、四氢吡啶和吡啶是优选的杂环。在杂环最多有三个例如R7的取代基的任何可想到的，而且是化学合成可以得到的组合都在本发明的范围之内。
C3-7环烷基是指任意取代的3至7个碳原子的碳环体系，最多可含有2个不饱和碳-碳键。具体的C3-7环烷基是环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基和环庚基。与碳环上最多有三个例如选自R7的取代基，只要是用常规化学合成可以获得的，并且是稳定的，都在本发明范围之内。
本文中所用的是指氮杂环，它可以是令有多达3个氮原子的，或者是含有一个氮原子和选自氧和硫的杂原子的饱和或不饱和的稳定五、六或七元单环环，或者是七至十元的双环环系，并且在可形成稳定结构的任一原子上被取代。在这些环上的氮原子可被取代，因而形成四级氮。氮杂环可在其任一稳定位置上被R20取代，R20例如是H、C1-4烷氧基、F、Cl、Br、I、NO2、NR′2、OH、CO2R′、CONHR′、CF3、R14-C0-4烷基、R14-C1-4烷基-S(O)u(如U是0，1或2)或由前述任一取代基取代的C1-4烷基。有代表性的是吡咯啉、吡咯烷、咪唑、咪唑啉、咪唑烷、吡唑、吡唑啉、吡唑烷、哌啶、哌嗪、吗啉、吡啶、吡啶鎓、四氢吡啶、四氢或六氢-氮杂、奎宁环、奎宁环鎓喹啉、异喹啉，以及四或全氢-喹啉或异喹啉。特别是可以是吡啶基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、奎宁环基或四氢吡啶基。优选的是4-吡啶基、4-(2-氨基-吡啶基)、4-四氢吡啶基、4-哌啶基、或4-哌嗪基。
当Rb和Rc结合一起形成五或六元芳环或非芳环稠合于Rb和Rc所连接的环时，所形成的环通常选自上文关于Het所列出的五-或六-元杂环，或者是苯基、环己基或环戊基环。对W′部分而言，优选苯并咪唑基，4-氮杂苯并咪唑基、5-氮杂苯并咪唑基和它们的取代衍生物。
本文中某些基团以缩写形式给出，t-Bu是叔丁基，BOC是指叔丁氧羰基基团，Fmoc是指芴基甲氧羰基基团，Ph是指苯基基团，Cbz是指苄氧羰基基团，BrZ是指邻溴苄氧羰基基团，ClZ是指邻氯苄氧羰基基团，Bn是指苄基基团，4-MBzl是指4-甲基苄基基团，Me是指甲基，Et是乙基，Ac是乙酰基，AIR是指C1-4烷基，Nph是指1-或2-萘基，以及cHex是指环己基，MeArg是指Nα-甲基精氨酸，Tet是指5-四唑基。
本文中某些试剂以缩写形式给出。DCC是指二环己基碳化二亚胺，DMAP是指二甲氨基吡啶，DIEA是指二异丙基乙胺，EDC是指N-乙基-N′-(二乙氨基丙基)-碳化二亚胺，HOBt是指1-羟基苯并三唑，THF是指四氢呋喃，DMF是指二甲基甲酰胺，NBS是指N-溴代琥珀酰亚胺，Pd/c是指钯披碳催化剂，DPPA是指二苯基碳酰基叠氮化物，BOP是指苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸盐，HF是指氢氟酸，PPA是指多磷酸，TEA是指三乙胺，TFA是指三氟乙酸，PCC是指氯铬酸吡啶鎓。
制备式(I)化合物时特别有用的中间体是式(X)化合物：其中X1、X2、X3、R2、R3、R4、A1和E如式(I)化合物定义，L1相对于环连接是间位，而且是CHO、CO2R1、Br、I、OH、CF3SO3、CH2-T或NR′R15，T是OH、NHR15、Cl、Br或I。优选的，L1是OH、CF3SO3、CO2R′或NR′R″和R1是H、C1-4烷基、C1-4氧代烷基，R2是C1-6烷基或苄基，R4是H或Q-C1-6烷基，以及R5/R5′是H。优选A1和环E一起形成稠合苯环，X1-X2是CHR1-CH或NR1-CH，和X3是CHR5。
式(I)化合物通常由式(X)中间体与式(X1)化合物偶合制备：
R6′-L2
(XI)其中R6′是W-(CR′2)q-Z-(CR1R10)r-U-(CR′2)s-L2或W′-(CR′2)q-L2，其中W、W′、R′、Z、R10、U、q、r和s如式(I)化合物定义，L2是OH、NHR15、C≡C、CHO、CO2R′、Br、I或Cl。正如本文进一步说明的，在某些情况下，还要求通过适当反应对W或W′基团进一步改性以引入官能基团，或去除保护基团。偶合通常可形成U或V基团，这些偶合反应的方法是本领域中所熟知的。WO93/08174(PCT/US92/08788；Genentech)，WO93/08174(PCT/US92/08788；Genentech)，WO96/00730(PCT/US95/08306；Smithkiline Beecham)，WO96/00574(PCT/US95/08146；SmithKline Beecham)，WO93/00095(PCT/US92/05463；SmithKline Beecham)和WO94/14776(PCT/US93/12436；SmithKline Beecham)一般性地公开了这些反应，本文引用来作为参考。
其中A1是C和A2-A4是CH的式X化合物用流程1所述方法制备：
流程1a)Tf2O，2，6二甲基吡啶，CH2Cl2；b)烯丙基三丁基锡，LiCl，(Ph3P)2PdCl2，DMF；c)RuCl3，H5IO6，CCl4，CH3CN，H2O；d)PPA；e)EtOAc/LiHMDS，THF；f)H2，10％Pd/C，浓HCl，AcOH；g)EtSH，AlCl3，CH2Cl2；h)Tf2O，2，6二甲基吡啶，CH2Cl2；i)CO，Pd(OAc)2，KOAc，dppf，DMSO。
在适当的碱如2，6-二甲基吡啶存在下，在惰性溶剂，通常为CH2Cl2中使2-苄基-4-甲氧基苯酚(J.Am.Chem.Soc.，1949，71，64)与三氟甲磺酸酐(Tf2O)反应转化成相应的三氟甲磺酸酯，即流程1化合物2(例如，1-2)。在惰性溶剂如DMF中，在有LiCl和钯催化剂如双(三苯膦)氯化钯(II)((Ph3P)2PdCl2)存在下，使1-2与烯丙基三丁基锡如Tilley所述方法(J.Org.Chem.，1990，55，906)反应，得到1-3。使流程1-3烯烃氧化裂解直接得到羧酸，此反应可在适当的含水溶剂如含水丙酮或含水乙酸中用适当的氧化剂，典型的如KMnO4反应来完成。但是，由烯烃1-3直接得到羧酸1-4的氧化裂解优选按Sharpless的一般方法进行(J.Org.Chem.，1981，46，3936，J.Org.Chem.，1985，50，1560，附注4)，其中的RuO4是在CCl4·CH3CN和水的混合溶剂中，使RuCl3或RuO2与NaIO4或H5IO6反应现场制备。另外，氧化可分二步进行，包括第一步烯烃氧化裂解成相应的醛，这一步可按本领域中熟知的方法进行，接着按pinnick所述(Tetrahedron，1981，37，2091)或按Dalcanale和Mantanari所述(J.Org.Chem.，1986，51，567)的方法用NaClO2将醛氧化为羧酸。将1-4环化成1-5可按Proctor，Renfrew和Savage所述(J.Chem.Soc.(C)，1969，1000)方法用多磷酸完成。另外，也可以通过1-4相应的酰氯化物转化成1-5，酰氯化物可用本领域熟知的方法制备，将此酰卤化物在惰性溶剂如CH2Cl2或CS2中用适当的Friedel-Crafts催化剂如AlCl3或SnCl4处理，得到环酮1-5。在醛醇(aldol)型的反应中使1-5与烯醇化的乙酸乙酸反应得到1-6，后者可由乙酸乙酯与适当的胺化物碱如二异丙基氨化锂(LDA)或双(三甲基甲硅烷基)氨化锂(LiHMDS)接触制得。通常，常选用THF作为醛醇反应溶剂，虽然使用THF会存在数种加成物如HMPA或TMEDA。将1-6还原成1-7可在适当的溶剂如乙酸中，在无水酸如盐酸存在下，用适当的催化剂例如活性炭上的钯金属(Pd/C)催化氢化来完成。另外，此还原反应也以在三氟化硼乙醚化物存在下用Orphanopoulos和Smonu(Synth.Commun.，1988，833)所述的一般方法用三乙基甲硅烷处理来完成。去除1-7的甲醚基得到1-8的反应可在惰性溶剂如CH2Cl2中与BBr3反应，或在惰性溶剂，优选在CH2Cl2中与乙硫醇和AlCl3反应来完成。其它去除甲醚基的有用方法如Greene″Protcctive Groups in Organic Synthesis″(John Wiley and Sons出版)中所述。按前文所述在1-1转化成1-2的方法制备1-9，(1-8的三氟甲磺酸酯)，在适当溶剂，优选在DMSO中，与乙酸钾、1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(dppf)和钯催化剂如乙酸钯[Pd(OAc)2]存在下按Cacchi和Lupi(Tet.Lett.，1992，33，3939)所述的一般方法使其与一氧化碳进行反应得到1-10。
可以理解发的是，在上文所述中如果是一脱水化合物1-6代替进行氢化反应，可以得到通式(V-2)的化合物。
其中X3是NR5、O或S(O)0-2的式(I)化合物用流程1的一般方法制备，只是，例如用4-甲氧基-2-(苯氨基)-，2-(苯氧基)-，或2-(苯硫基)苯乙酸代替化合物1-4，所述化合物可用本领域已知的方法制备。
其中X1-X2为NR′-CH和X3为CR5CR5′、NR1、O或S(O)0-2的式(X)化合物可用流程2所述一般方法制备。
流程2
流程2-化合物1(如2-1)用本领域已知方法合成，另外溴代可用碘代、三氟甲磺酰氧基或能转化成溴代、碘代或三氟甲磺酰氧基的基团替代。在适当溶剂中和在适当温度下将化合物2-1用适当试剂如甲酸、甲酸酯或甲乙酐处理而转化成N-甲酰基化合物2-2。在适当温度下用适当的试剂如多磷酸和磷酰氯的混合物处理化合物2-2使其转化成环亚胺2-3。应用Bull.Chem.Soc.Jpn.，1990，63，3122-3131所述一般方法，在适当溶剂如二氯甲烷中，在有三甲基甲硅烷基氰化物和有适当催化剂如二-μ-氯代双(1，5-环辛二烯)二铑([Rh(COD)Cl]2)存在下，用适当试剂如乙酸甲酯的叔丁基二甲基甲硅烷基乙缩醛(Ketal acetal)处理化合物2-3使其转化为乙酸酯2-4。另外，也可以用Ball.Soc.Chim.Fr.，1973，1668中的一般方法，使用Reformatsky试剂；也可以用J.Am.Chem.Soc.，1950，72，3874中的一般方法，使用乙酸中的乙酸酐。
按照流程1中所述的一般方法，使化合物2-4转化成羧酸2-5。
其中U是NR′CO的式(I)化合物也可用J.Org.Chem.，1974，39，3327中的一般方法，由化合物1-9或2-5通过用CO、伯或仲胺和钯催化剂处理直接得到。
简单的三取代苯起始物可以购得，或用本领域熟知的常规方法制得。
形成酰胺键的偶合方法通常是本领域中已知的。Bodansky等人.，THEPRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS，Springer-Verlag，Berlin 1984，Ali等，J.Med.Chem.，29，984(1986)和J.Med.Chem.30，2291(1987)中提到的肽合成的方法是对这些技术的一般性说明本文引用作为参考。这里所用的偶合试剂是指可用于形成酰胺键的试剂。典型的偶合方法使用碳化二亚胺、活性酸酐和酯以及酰基卤化物。典型的试剂如EDC，DCC，DPPA，BOP试剂，HOBt，N-羟基琥珀酰亚胺和草酰氯。
具体地说，在有或没有催化剂如1-羟基苯并三唑(HOBt)和二甲氨基吡啶(DMAP)存在下，用适当的碳化二亚胺偶合试剂可使胺或苯胺通过它的游离胺基团偶合于适当的羧酸底物上。其它方法，例如也可以使适当保护的酸底物的游离羧基形成活性酯，酐或酰卤，接着在有或没有碱存在下与适当保护的胺上的游离胺进行反应。例如，在无水溶剂如二氯甲烷或四氢呋喃中，在碱如N-甲基吗啉、DMAP或三烷基胺存在下，将保护的BOC-氨基酸或Cbz-脒基苯甲酸用氯甲酸并丁酯处理以形成“活性酐”，接着使其与第二种保护的氨基酸或苯胺的游离胺反应。
例如化合物1-10可通过偶合反应，如流程3中的酰胺偶合反应转化成式(I)化合物。
按流程1所述制得的(±)-10，11-二氢-3-羧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(1-10)用例如EDC和HOBt，或SOCl2处理转化成羧酸的活化形式，在适当的溶剂如DMF、CH2Cl2或CH3CN中使上述活化形式化合物与适当的胺，如1-BOC-4，4′-联哌啶或2-(甲氨基)甲基苯并咪唑二盐酸化物反应得到流程3-化合物2(例如3-2)。视乎是否需要中和，都可以加碱，如二异丙基乙胺[(i-pr)2NEt]或吡啶。已知有很多把羧酸转化成酰胺的其它方法，在标准参考书目中可以找到，例如“Compendium of Organic SyntheticMethods”，Vol.I-VI(Wiley Interscience出版)。将乙基酯5-2用含水碱液水解，所述含水碱液如含水THF中的LiOH，或含水甲醇中的NaOH，用适当的酸例如TFA或HCl酸化中间体羧酸盐，得到羧酸1-3。另外，如果需要，可将中间体羧酸盐分离出来，或者用本领域熟练技术人员已知的方法制备游离羧酸的羧酸盐。如果形成酰胺键反应中的胺组分(1-10到3-2)上含有保护基团时，保护基团可在酯水解之前或之后使用特异性保护基团的适当选择性脱保护方法脱去，这些方法在Green，“protective Groups in Organic Syhthesis”(Wiley-interscience出版)中已有描述。例如，如果在胺组分上带有被叔丁氧羰基(BOC)基团保护的氨基团，如化合物3-3，BOC基团可在酸性条件下，例如在二噁烷中用4N HCl，或是在CH2Cl2中用三氟乙酸(TFA)，得到铵盐3-4。如果需要，上述铵盐可用本领域熟练技术人员已知的方法中和。
流程4说明了形成碳-碳键的偶合方法，此方法通过选择使用适当的还原剂(如在步骤b)用来引入碳-碳三键、双键或单键。a)THPOCH2CH2CCSn(Bu)3，(PPh3)2PdCl2，LiCl，二噁烷，b)H2，10％ Pd/C，EtOAc；c)p-TsOH·H2O，EtOH；d)2，2，6，6-四甲基氧代氯化哌啶鎓，CH2Cl2；e)NaClO2，Na2HPO3，2-甲基-2-丁烯，H2O；f)氯甲酸异丁酯，4-甲基吗啉，然后在1，2-苯二胺；g)AcOH；THF；h)1.0N NaOH，EtOH，然后酸化。
在芳香族三氟乙酸酯与有机锡烷的Stille型偶合反应(J.Am.Chem.Soc.，1987，109，5478-5486)中使流程4-化合物1(4-1)与4-(2-四氢吡喃基氧基)-1-三丁基甲锡烷基-1-丁炔进行反应得到4-2。此反应由钯盐，优选用双(三苯膦)氯化钯(II)[(PPh3)2PdCl2]催化，并且是在惰性溶剂，通常在DMF或1，4-二噁烷中，在氯化锂存在下进行反应。4-2中的炔单元的还原反应是在本领域熟练技术人员已知的标准氢化条件下完成的。得到的化合物4-3在脱去四氢吡喃基(THP)醚的标准条件下脱保护得到4-4。THP醚脱保护的各种条件在标准参考书中已有叙述，例如Greene，“Protective Groupsin Organic Synthesis”(Wiley-Interscience出版)。用Wovkulick(J.Org.Chem.，1993，58，832-839)中所述的二步法可将4-4的伯醇部分氧化成相应的羧酸4-5。将伯醇氧化成相应羧酸的很多其它方法已有描述，并且可在这类参考书中找到。按照WO中所述的常规方法可将羧酸4-5转化成苯并咪唑衍生物4-6。因此，可在惰性溶剂如THF或CH2Cl2中，在有适当的碱，一般是4-甲基吗啉三乙胺或二异丙基乙胺存在下，用例如氯甲酸异丁酯先将4-5转化成活化的羧酸形式，接着使此活化形式与过量的适当1，2-二氨基芳族衍生物如1，2-苯二胺进行反应得到相应的单酰胺，然后使其在标准条件下，例如在THF中回流并加入乙酸环化得到4-6。将乙基酯4-6用含水碱液如含水THF中的LiOH，或在含水甲醇或乙醇中的NaOH水解，并将羧酸盐中间体用适当的酸如TFA或HCl酸化，得到羧酸4-7。另外，如果需要，可分离出羧酸盐中间体，或者可用本领域熟练技术人员已知的方法制备游离羧酸的羧酸盐。
流程5说明了形成碳-氧键的偶合方法，它可用于形成醚键。类似的偶合方法也可以用于形成硫醚和胺键。a)2-[(3-羟基-1-丙基)氨基]吡啶-N-氧化物，DEAD，(ph)3P，DMF；b)环己烯，10％Pd/C，2-丙醇；c)1.0NNaOH，EtOH，然后酸化。
流程5的化合物1(5-1)与2-[(3-羟基-1-丙基)氨基]吡啶-N-氧化物进行Mitsunobu型偶合反应(Organic Reactions，1992，42，335-656；Synthesis，1981，1-28)得到5-2。反应由偶氮二甲酸二乙酯和三苯膦形成的复合物介导，并在质子惰性溶剂如THF，CH2Cl2或DMF中进行反应。在惰性溶剂例如甲醇、乙醇或2-丙醇之中，在使用钯催化剂，优选披炭钯金属的转移氢化条件下将5-2的吡啶-N-氧化物部分还原成相应的吡啶5-3。在这类反应中通常用环己烯，1-4-环己二烯，甲酸，和甲酸盐如甲酸钾或甲酸铵作为氢转移剂。按流程1所述使乙基酯5-3皂化得到5-4。
本发明化合物的酸加成盐可在适当溶剂中由母体化合物和过量的酸如盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸或甲磺酸按标准方法制备。某些化合物可形成内盐或可接受的两性离子。阳离子盐可用过量的、含有适当阳离子的碱性试剂如氢氧化物、碳酸盐或醇盐处理母体化合物来制备；或者用适当的有机胺处理来制备。在药学上可接受的盐之中阳离子的具体实例是例如Li+、Na+、K+、Ca++、Mg++和NH4+的阳离子。
本发明还提供了药物组合物，其中，包括式(±)化合物和药学上可接受的载体。相对应的，式(I)化合物可用于制备药物。按前文所述制备的式(I)化合物的药物组合物可以制剂成为溶液或用于胃肠外制剂的冻干粉。在使用前加入适当稀释剂或其它药学上可接受的载体可将该粉末再制剂，液体的剂型可以是缓冲的，等渗的，含水的溶液。适当的稀释剂的实例是等渗盐水标准溶液，5％葡萄糖标准水溶液或乙酸钠或乙酸铵缓冲溶液。这些制剂特别适于胃肠外约药，但也可用于口服给药，或者装入吸入法使用的能计量给药的吸入器或喷雾器中。最好加入赋形剂如聚乙烯吡咯烷酮，明胶，羟基纤维素，聚乙二醇，甘露醇，氯化钠或柠檬酸钠。
另外，这些化合物可制成适于口服口药的胶囊，片剂或乳剂或糖浆。可以加入药学上可接受的固体或液体载体以使组合物增量或稳定，或者更有助于制剂。固体载体包括淀粉、乳糖、硫酸钙二水合物、白土、硬脂酸镁或硬脂酸、滑石、果胶、阿拉伯胶、琼脂或明胶。液体载体包括糖浆、花生油、橄榄油、盐水和水。载体还包括延缓释放的物质如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，单独使用或与石腊一起使用。固体载体的量是可以变化的，但优选每剂量单位为大约20mg至大约1g。药物制剂可用药学的常规技术制备，包括研磨。混合、造粒，以及在制片剂时还需压片；或者对于硬明胶囊形式而言，包括研磨、混合和装填。在使用液体载体时，制剂是糖浆、酏剂、乳化剂或是含水或非水的悬浮剂。这些液体制剂可以直接口服给药，或者装入软明胶胶囊。
对直肠给药而言，可将本发明化合物与赋形剂如可可脂、甘油、明胶或聚乙二醇结合并模塑成栓剂。
本发明所述化合物是玻连蛋白受体拮抗剂，用于治疗其病理在于与玻连蛋白受体相互作用的受体或细胞的疾病。例如，这些化合物可用来治疗骨质损失的病理过程的疾病。因此，本发明化合物用于治疗骨质疏松症、甲状旁腺机能亢进、佩吉特氏(Paget)症、恶性高血钙、由骨骼转移产生的溶骨损害、由固定术或性激素缺失导致的骨损失。确信本发明化合物还可用作抗癌冲剂、抗感染剂、抗血管原和抗转移剂，可用于治疗癌症、动脉粥样硬化和再狭窄。具体地说，本发明化合物用于抑制成血管细胞造成的狭窄。
抑制纤维蛋白结合的本发明化合物提供了一种抑制哺乳动物，特别是人的血小板凝集和形成凝血的方法，该方法包括于内部施用式(I)化合物和药学上可接受的载体。这种治疗的适应症包括急性心肌梗塞(AMI)、深静脉血栓形成、肺栓塞、dissecting anurysm、瞬时局部缺血(TIA)、中风和其它与梗塞有关的疾病，以及不稳定的烟炎。这种治疗对于慢性或急性过高凝集的症状，如分散性血管内血凝固(DIC)、败血症、外科休克和传染性休克、术后或产后创伤、心肺旁路手术、不相容的输血、胎盘早期剥离、血栓形成的血小板减少性紫癜(TTP)、蛇毒或免疫性疾病好象也是有效的。此外，本发明化合物还可用于预防转移症状，预防或治疗真菌和细菌感染，减小免疫刺激，治疗鎌状细胞疾病，以及预防或治疗骨骼吸收因素造成的疾病。
本发明还提供了抑制溶解纤维蛋白治疗后动脉和静脉再闭塞的方法，该方法包括于内部施用式(I)化合物和溶解纤维蛋白剂。在溶解纤维蛋白的治疗中施用式(I)化合物或者能完全防止再闭塞，或者能延迟再闭塞的时间。在本发明上下文中使用的术语溶解纤维蛋白剂是指能直接或间接地溶解血纤维蛋白凝血的任何化合物，不管是天然还是合成的。纤维蛋白溶酶原活化剂是一组已知的溶解纤维蛋白试剂。有用的纤维蛋白溶酶原活化剂包括例如anistreplase、尿激酶(UK)、尿激酶原(pUK)、链球菌激酶、组织纤维蛋白溶解酶原活化剂(tPA)和其突变种，或其变种。
本发明化合物还可在体外使用以抑制血液和血液制品中血小板的凝集，例如用于贮存，或者用于体外(ex vivo)操作如在诊断时或研究应用中。
本发明化合物以口服或胃肠外形式给患者用药，药的施用浓进应足以抑制骨吸收，或抑制血小板凝集，或其它适应症。根据患者的状况施用含本发明化合物的药物组合物对其口服剂量在大约0.1至大约50mg/kg之间，优选口服剂量为大约0.5至大约20mg/kg之间。对于急性治疗，优选胃肠外给药。虽然也使用肌内药团注射，但是静脉输注本发明化合物的5％葡萄糖水或常规盐水溶液，或加入适当赋形剂的类似制剂是最有效的。典型的，胃肠外给药剂量可以是大约0.01至大约100mg/kg；优选0.1至20mg/kg。每天用药1-4次，以达到总的日剂量水平为大约0.4至大约400mg/kg/天。通过比较药剂在血液中的浓度与达到治疗效果所需的浓度，本领域普通技术人员很容易确定用药的水平和方法。
在一个或几个生物试验中对本发明化合物进行试验以确定达到要求的药学效果时所需要的化合物浓度。玻连蛋白结合的抑制
固相[3H]-SK & F-107260与αγβ3的结合：溶在缓冲液T(含2mM CaCl2和1％辛基葡糖苷)的人胎盘或人血小板αγβ3(0.1-0.3mg/mL)用含1mM CaCl2的缓冲液T，1mM MnCl2，1mM MgCl2(缓冲液A)和0.05％NaN3稀释，然后立刻加到96-孔酶联免疫吸附测定(ELISA)板(Corning，NewYork，NY)内，每孔0.1ml。每孔加入0.1-0.2μg αγβ3。平板于4℃培养过夜。实验时，各孔用缓冲液A洗涤一次并于室温下在相同缓冲液中用0.1ml 3.5％胎牛血清蛋白孵育1小时。孵育后完全吸去各孔内的缓冲液并用0.2ml缓冲液A洗涤两次。
将化合物溶于100％DMSO内，得到2mM原溶液，此溶液用结合缓冲液(15mM Tris-HCl(pH7.4)，100mM NaCl，1mM CaCl2，1mM MnCl2，1mM MgCl2)稀释至最终化合物浓度100μM。然后将该溶液稀释至最终需要的化合物浓度。一式三份向各孔中加入不同浓度未标记拮抗物(0.001-100μM)，随后加入5.0mM[3H]-SK & F-107260(65-86Ci/mmol)。
将板于室温培养1小时。培养后完全吸出各孔内物并用0.2ml冰冷却的缓冲液A以孔对孔方式洗涤。受体用0.1ml 1％SDS增溶并通过加入3mL Ready Safe用Beckmam LS液体闪烁计数器进行液体闪烁计数测定结合[3H]-SK & F107260，效率40％。在2μM SK & F-107260存在下测定[3H]-SK & F-107260的非特异性结合且始终低于总放射配体进量的1％。采用非线形最小二乘法曲线拟合法(改进的LUN DON-2程序)测定IC50(抑制50％[3]-SK & F-107260结合的拮抗剂浓度)。根据下述方程计算Ki(拮抗剂的解离常数)：
Ki＝IC50/(1+L/Kd)，式中L和Kd分别表示[3H]-SK & F-107260的浓度和解离常数。
本发明化合物在0.1-25微摩尔浓度范围内抑制玻连蛋白与SK & F-107260的结合。优选化合物抑制玻连蛋白结合的浓度低于1微摩尔。
采用本领域评价抑制骨形成的标准测定法，如EP-528587中所述的小窝(pit)形成测定法测定本发明化合物的体内和体外骨吸收，此法也可采用人破骨细胞代替大鼠破骨细胞进行，以及用Wronski等人在Cells and Materials，1991，Sup.1，69-74中所述的卵巢切除的大鼠模型进行。甲状旁腺切除的大鼠模型。
每实验组包含5-6只Sprague-Dawley大鼠。使用前7天切除大鼠的甲状旁腺(由卖主切除，Taconic Farms)。使用前24小时，在采用尾静脉穿刺术将全血抽出到肝素化试管内后立即测量其中的循环离子化的钙水平。选用离子化钙水平≤1.2mM/L(采用Ciba-Corning634型钙pH分析仪测量)的大鼠。然后给大鼠进用无钙食物和去离子水。实验开始时各大鼠重约100g。测量基准Ca水平并对大鼠一次静脉(尾静脉)药团注射给药对照载体(盐水)或化合物(溶在盐水内)，随后立即一次皮下注射人甲旁腺素1-34肽(hPTH1-34，剂量0.2mg/kg盐水/0.1％胎牛血清蛋白，Bachem，Ca)或注射PTH载体。施用化合物/PTH 2小时后，测量血钙对PTH的应答(以及化合物对此应答的任何影响)。大鼠尺骨漂变模型
每实验组8-10只雄性Spargue-Dawley或Wistar大鼠，实验开始前每只重约30-40g。测试药剂通过适当途径以单一或混合日剂量方式施用7天。在施用每一剂之前，给大鼠以单剂量荧光标记物(四环素25mg/kg，或calcein 10mg/kg)，它们能及时标记骨形成表面的位置。在化合物给药结束后，处死大鼠从肘部切除两前肢，由踝关节切除足并去皮。冷冻保藏样品并垂直悬挂在切片机夹头上。用恒冷切片机切开尺骨中轴的横断面。在皮骨的中背位利用形态测定法测量骨吸收率。测量按以下所述进行：骨膜表面的骨吸收量等于骨膜面向第0天在骨内骨形成表面上掺入的荧光标记物前进的距离；此距离通过将第0天和第7天标记物与骨膜面间的宽度相减进行计算；将结果除以7可以计算每天的吸收率(以微米表示)。人破骨细胞吸收测定法(“小窝测定法”)· 从液氮贮藏库中取出数等份破骨细胞瘤源细胞悬浮液，迅速温热至37℃并用RPMI-1640培养基离心洗涤一次(1000rpm，5min，4℃)。· 吸去培养基并用1∶3 RPMI-1640培养基稀释的鼠抗-HLA-DR抗体替换。在冰上培养30分钟并时常混合细胞悬浮液。· 细胞用冷RPMI-1640培养基通过离心(1000rpm，5min，4℃)洗涤二次并将细胞转至无菌15ml离心管内。以改进的Neubauer计数池计数单核细胞数。· 从贮存瓶内取出足量的由山羊抗小鼠IgG涂布的磁珠(5/单核细胞)，放入5ml新鲜培养基(此培养基洗去了有毒的叠氮化物防腐剂)内。利用磁铁固定磁珠移去培养基并用新鲜培养基替换。· 将磁珠与细胞混合并将悬浮液在冰上培养30分钟，并时常混合悬浮液。· 用磁铁固定涂细胞磁珠并将剩余细胞(富破骨细胞部分)移注到无菌50ml离心管内。· 向涂细胞磁珠中加入新鲜培养基，以移出任何截留的破骨细胞。此洗涤过程重复10次，弃去涂细胞磁珠。· 利用一次性巴氏灭菌大孔塑管向计数池中注入样品，用计数池计数破骨细胞数。· 将细胞离心成片状，在EMEM培养基中调节破骨细胞密度为1.5×104/ml，补加10％胎牛血清和1.7g/升碳酸氢钠。· 取3ml等份细胞悬浮液(每处理组)移至15ml离心管中。将细胞离心成片状。· 向每管中加入3ml合适处理物(在EMEM培养基中稀释至50μM)。同样包含合适的载体对照物，阳性对照物(87 MEMI，稀释至100μg/ml)和同种对照物(IgG2a，稀释至100μg/ml)。37℃培养30分钟。· 0.5ml等份细胞接种到48孔滴定板中的无菌牙质切片上并在37℃培养2小时。每种处理物一式四份。· 切片用改变六次的热PBS洗涤(用6-孔滴定板，每孔10ml)，然后加到新配处理物或对照物中。于37℃培养48小时。耐酒石酸磷酸酶(trap)法(破骨细胞系的选择染色剂)· 切片用磷酸盐缓冲的盐水洗涤并用2％戊二醛(在0.2M卡可酸钠中)固定5分钟。· 将它们用水洗涤并在TRAP缓冲液中于37℃培养5分钟。· 在冷水洗涤之后，将它们在冷乙酸盐缓冲液/固红石榴石中于4℃培养5分钟。· 吸去过量缓冲液，水洗之后将切片空气干燥。· 以明视场显微镜计数TRAP阳性破骨细胞，然后通过超声处理从牙质表面除去。· 采用Nikon/Lasertec ILM 21 W同焦点显微镜测量小窝体积。RGD-介导的αγβ3结合的抑制纯化αIIbβ3
4℃，将10单位陈旧的、洗涤过的人血小板(由Red Cross得到)在3％辛基葡糖苷，20mM Tris-HCl，pH7.4，140mM NaCl 2mM CaCl2中缓慢搅拌溶解2小时。以100,000g离心溶胞产物1小时。将得到的上清液加到5ml扁豆凝集素Sepharose 4B柱(E.Y.Labs)内，该柱先用20mM Tris-HCl，pH7.4，100mM NaCl，2mM CaCl2，1％辛基葡糖苷(缓冲液A)预平衡。培养2小时后，用50mL冷缓冲液A洗柱。残留凝集素的αIIbβ3用含10％葡萄糖的缓冲液A洗脱。所有过程均在4℃进行。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳表明，得到的αIIbβ3的纯度＞95％。在脂质体中掺入αIIbβ3
在氮气流下，将磷脂酰丝氨酸(70％)和磷脂酰胆碱(30％)(Avanti Polar Lipids)的混合物干燥到玻璃管的壁上。纯化的αIIbβ3用蛋白质∶磷脂比为1∶3(w∶w)的磷脂稀释至0.5mg/ml最终浓度并混合。再悬浮混合物并在超声破碎机水浴中超声处理5分钟。然后采用12,000-14,000分子量截断透析管，相对于1000倍过量的50mMTris-HCl，pH7.4，100mM NaCl，2mM CaCl2(改变2次)透析混合物过夜。以12,000g离心含脂质体的αIIbβ315分钟并再悬浮在最终蛋白质浓度为约1mg/ml的透析缓冲液中。在-70℃贮存脂质体至需要时。与αIIbβ3的竞争性结合
采用[3H]-SK & F-107260作为RGD-型配体，按照间接竞争性结合法测定与纤维蛋白原受体的结合。结合测定在96-孔微量滴定板装置(Millipore Corporation，Bedford，MA)上进行，使用0.22μm亲水durapore膜。室温下用0.2mL 10μg/mL聚赖氨酸(Sigma Chemical Co.，St.Louis，MO)预涂布各孔1小时，以阻滞非特异性结合。一式四份向各孔中加入不同浓度未标记的苯并二氮杂。向各孔中加入[3H]-SK & F-107260，最终浓度为4.5nM，随后加入1μg含纯化血小板αIIbβ3的质体，使结合了αIIbβ3[3H]-SK & F-107260与未结合部分分离，接着用冰缓冲液(2次，每次0.2ml)洗涤。在1.5mLready Solve(Beckman Instrument，Fullerton，CA)中以Beckman液体闪烁计数器(LS6800型)计数测定过滤器上保留的结合放射性，效率40％。在2μm未标记SK & F-107260存在下测定非特异性结合且始终低于加入到样品中的总放射性的0.14％。所有数据的点为一式四份测定的平均值。
采用非线型最小二乘法曲线拟合法分析竞争性结合数据。此方法提供了拮抗剂的IC50(平衡状态下能抑制50％[3H]-SK & F-107260特异性结合的拮抗剂浓度)。IC50与根据下述Cheng和Prusoff方程计算得到的拮抗剂的解离常数(Ki)有关：
Ki＝IC50/(1+L/Kd)，式中L表示竞争性结合测定中[3H]-SK & F-107260的浓度(4.5mM)，以及Kd表示[3H]-SK & F-107260的解离常数，Scatchard分析测得为4.5nM。
血小板聚集的抑制可按照WO93/00095(PCT/US/92/05463)中所述的方法测定。体内血栓形成已按照Aiken等人在Prostaglandins，19，620(1980)中所述方法通过记录麻醉狗体内注入的肽的系统和血液动力学作用来证实。
与纤维蛋白原受体相比，本发明优选化合物对玻连蛋白受体的亲和性大于5∶1，或者与玻连蛋白受体相比，对纤维蛋白原受体的亲和性大于5∶1。更优选的化合物具有大于10∶1的活性比。最优选的化合物具有大于100∶1的选择性。相对于纤维蛋白原受体，本发明化合物对玻连蛋白受体增强结合的比较结果见下表I所示：
化合物(Ex.#) Ki/αIIbβ3(μM) Ki/αγβ3(μM)
1 ＞50 0.23
2 0.009 15血管平滑机细胞迁移测定
测试本发明化合物抑制平滑肌组织在动脉或静脉内迁移和增生的能力，以估测它们抑制再狭窄的能力，再狭窄一般发生在血管成形术之后。
使用大鼠或人主动脉平滑肌细胞。采用具有8μm孔径的聚碳酸酯膜(Costar)，在Transwell细胞培养皿中检测细胞迁移。滤器的下表面用玻连蛋白涂布。将细胞悬浮在补加有0.2％胎牛血清白蛋白的DMEM中，浓度为2.5-5.0×106细胞/ml，并于20℃用不同浓度测试化合物预处理20分钟。单独使用溶剂作为对照物。取0.2ml细胞悬浮液放在池的上区室内。下区室含有0.6ml补加有0.2％胎牛血清白蛋白的DMEM。37℃下，在95％空气/5％CO2气氛中培养24小时。培养后，轻轻刮去滤器上表面的非迁移细胞。然后将滤器用甲醇固定，用10％吉姆萨染液染色。通过下述任一种方法测量迁移：a)计数迁移到滤器下表面上的细胞数，或者b)用10％乙酸提取染色细胞，随后在600nM测定吸光度。概述
采用Bruker AM 250或Bruker AC 400光谱仪分别在250或400MHz磁场中测量核磁共振光谱。CDCl3是指氘代氯仿，DMSO-d6是指六氘代二甲亚砜，以及CD3OD是指四氘代甲醇。化学位移用距内标四甲基硅烷的百万份之一(δ)低磁场报道。NMR数据中的缩写含义如下：s＝单峰，d＝二重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，dd＝双二重峰，app＝表观峰，br＝宽峰。J表示用赫兹测量的NMR偶合常数。连续波红外(IR)光谱用Perkin-Elmer683红外光谱仪记录，傅里叶变换红外(FTIR)光谱用NicoletImpact 400D红外光谱仪记录。IR和FTIR光谱以透射方式记录，谱带位置用反波数(cm-1)报道。质谱是利用快原子轰击(FAB)或电喷射离子化技术采用VG 70FE，PE Syx API III，或VGZAB HF测量。元素分析值是利用Perkin-Elmer 240C元素分析仪得到的。熔点用Thomas-Hoover熔点仪测量且未经校正。所有温度均以摄氏度表示。
薄层色谱使用Analtech硅胶GF和E.Merck硅胶60F-254薄层板。快速和重力色谱均使用E.Merck Kieselgel 60(230-400目)硅胶。分析和制备HPLC均采用Rainin或Beckman色谱仪进行。ODS是指十八烷基甲硅烷基改性的硅胶色谱载体。5μApex-ODS是指具有5μm公称颗粒尺寸的十八烷基甲硅烷基改性的硅胶色谱载体(Jones Chromatography，Littleton，Colorado制造)。YMC ODS-AQR是指ODS色谱载体，为YMC Co.Ltd.，Kyoto，Japan注册的商标。PRP-1R是指聚合的(苯乙烯-二乙烯基苯)色谱载体，为hamiliton Co.，Reno，Nevada注册的商标。CeliteR为由酸洗硅藻土构成的助滤剂，为Manville Corp.，Denver，Colorado注册的商标。
制备1制备(±)-10，11-二氢-3-羧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯a)3-苄基-4-(三氟甲磺酰氧基)茴香醚
-78℃，氩气氛下，于3分钟内将三氟甲磺酸酐(10.0ml，60mmol)加到2-苄基-4-甲氧基苯酚(10.71g，50mmol；按《美国化学会誌》，1949，71，64所述制得)和无水2，6-二甲基吡啶(12.0ml，100mmol)的无水CH2Cl2(250ml)溶液内。反应于-78℃搅拌0.5小时，然后温热至RT。1小时后，反应用己烷(250ml)稀释，随后依次用1.0N HCl(2×100ml)，1.0N NaOH(2×50ml)，H2O(100ml)和盐水(50ml)洗涤。干燥(Na2SO4)，浓缩，硅胶层析(10％ EtOAc/己烷)得到标题化合物(16.65g，96％)，为浅黄色固体。TLC Rf0.51(10％ EtOAc/己烷)；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ7.10-7.40(m，6H)，6.77(dd，J＝9.0，3.1Hz，1H)，6.66(d，J＝3.1Hz，1H)，4.03(s，2H)，3.73(s，3H)；FTIR(CCl4)1492，1423，1405，1249，1216，1161，1144，1039，869cm-1；MS(ES)m/e369(M+Na)+，364.0(M+NH4)+，347.0(M+H)+.b)4-烯丙基-3-苄基茴香醚
真空火焰干燥置于圆底烧瓶内的LiCl(3.08g，72.8mmol)，并将此体系于氩气氛下冷却至室温。加入-3-苄基-4-(三氟甲磺酰氧基)茴香醚(21.0g，60.6mmol)、氯化双(三苯膦)合钯(II)(2.13g，3.0mmol)、无水DMF(150ml)和烯丙基三丁基锡(22.6ml，72.8mmol)，混合物通过三次抽真空/氩气清洗循环用氩气清洗。混合物在预热至95℃的油浴内加热，形成均相黄色溶液。1.5小时后，用旋转蒸发仪(高真空)浓缩深色混合物，残留物用二甲苯再浓缩。所得到的残留物溶于Et2O(120ml)内并与10％KF(120ml)一起快速搅拌0.5小时。分层，水层用Et2O(2×120ml)提取。通过硅藻土(celite)过滤合并的有机相，以除去不溶固体，滤液依次用H2O(60ml)和盐水(60ml)洗涤。干燥(MgSO4)并浓缩，余下不透明的黄色油。层析(硅胶，5％EtOAc/己烷)，给出标题化合物(14.21g，98％)，为浅黄色油。TLC Rf(5％EtOAc/己烷)0.51；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ7.03-7.31(m，6H)，6.74(dd，J＝8.3，2.7Hz，1H)，6.66(d，J＝2.7Hz，1H)，5.79-5.98(m，1H)，4.89-5.07(m，2H)；3.97(s，2H)，3.75(s，3H)，3.21-3.33(m，2H)；FTIR(CCl4)1610，1496，1256，1046，914cm-1；MS(ES)m/e369.2(M+H)+.c)2-苄基-4-甲氧基苯乙酸
将H5IO6(23.83g，104.5mmol)的水(56ml)溶液加到4-烯丙基-3-苄基茴香醚(5.30g，22.24mmol)的CCl4(28ml)和CH3CN(28ml)溶液内，并将充分搅拌的混合物完全冷却至0℃。向其中加入RuCl3(231mg，1.11mmol)，在0℃快速搅拌反应4小时，然于RT搅拌45min。通过硅藻土(celite)过滤混合物，滤饼先用CH2Cl2(120ml)，然后用H2O(120ml)洗涤。分层，水层用CH2Cl2(3×120ml)提取，干燥(Na2SO4)并浓缩，余下一棕色油。此油分配在Et2O(90ml)和0.25N NaOH(90ml)之间，分层，Et2O层用0.25N NaOH(2×10ml)提取，并将合并的水层用浓HCl酸化(pH2)，CH2Cl2提取，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到标题化合物，为黄色油，此油固化成黄色固体(4.19g，74％)。1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ7.05 7.35(m，6H)，6.77(dd，J＝8.3，2.7Hz，1H)，6.71(d，J＝2.7Hz，1H)，4.00(s，2H)，3.76(s，3H)，3.54(s，2H)；FTIR(CCl4)2300-3500(broad)，1710，1611，1502，1496，1285，1257，1045cm-1；MS(ES)m/e279.0(M+Na)+，274.0(M+NH4)+，257.0(M+H)+.d)3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-(11H)-酮
100-110℃下，将细粉状2-苄基-4-甲氧基苯乙酸(3.26g，12.72mmol)加到充分搅拌的多磷酸(165g)中。15min后，将反应物倒入冰(330g)中，加入Et2O(330ml)，快速拌混合物15分钟。分离各层，水层用Et2O(330ml)提取。合并的有机层用5％ NaHCO3(2×80ml)和盐水(80ml)依次洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。残留物用甲苯再次浓缩，然后层析(硅胶，20％ EtOAc/己烷)。得到标题化合物。为黄色固体(1.44g，48％)。TLC Rf(20％EtOAc/己烷)0.46；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ8.07-8.15(m，1H)，7.39-7.49(m，1H)，7.25-7.48(m，2H)，7.19(d，J＝8.3Hz，1H)，6.86(d，J＝2.6Hz，1H)，6.17(dd，J＝8.3，2.6Hz，1H)，4.21(s，2H)，4.11(s，2H)，3.77(s，3H)；FTIR(CCl4)1680，1501，1282，1270cm-1； MS(ES)m/e261(M+Na)+，256.0(M+NH4)+，239.0(M+H)+.e)(±)-10，11-二氢-10-羟基-3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
-78℃，氩气氛下，向置于火焰干燥过的烧瓶内的双(三甲基甲硅烷基)氨化锂(1.0M THF溶液，6ml，6mmol)的无水THF(24ml)溶液中滴加无水EtOAc(0.58ml，6.6mmol)。黄色溶液于-78℃搅拌0.5小时，然后在3分钟内滴加入3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10(11H)-酮(715mg，3mmol)的无水THF(3ml)溶液。在转移器中，另外再使用0.4ml无水THF。在-78℃，反应0.5小时后，反应物用饱和NH4Cl(15ml)骤冷，温热至RT，并用EtOAc(2×30ml)提取。干燥(MgSO4)，浓缩，并层析(硅胶，先用10％ EtOAc/己烷(400ml)，再用20％ EtOAc/己烷)，先回收到3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10(11H)-酮(305.4mg，43％)黄色固体，然后得到标题化合物(531.9mg，54％)，为浅黄色油。TLC Rf 0.37(20％EtOAc/己烷)；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ7.63(d，J＝7.7Hz，1H)，7.00-7.30(m，4H)，6.80(d，J＝2.6Hz，1H)，6.69(dd，J＝8.2，2.6Hz，1H)，3.95-4.35m，2H)，4.07(s，2H)，3.76(s，3H)；3.68(s，1H)，3.64(d，J＝14.2Hz，1H)，3.35(d，J＝14.2Hz，1H)，2.79(d，J＝16.0Hz，1H)，2.66(d，J＝16.0Hz，1H)，1.22(t，J＝7.2Hz，3H)；FTIR(CCl4)3580(尖峰)，3509(宽峰)，1735，1715，1503，1261，1198，1156，1044cm-1；MS(ES)m/e675.2(2M+Na)+，653.2(2M+H)+.f)(±)-10，11-二氢-3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
把10％ Pd/C(242mg，0.23mmol)加到(±)-10，11-二氢-10-羟基-3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(741.1mg，2.27mmol)和浓HCl(0.19ml，2.27mmol)的冰乙酸(23ml)溶液内，并于RT和氢气氛(50psi)中将混合物于帕尔装置中摇动。6小时后，反应物通过硅藻土Celite过滤，并用EtOAc洗涤滤饼。浓缩滤液并将残留物利用甲苯再浓缩。层析(硅胶，20％ EtOAc/己烷)所得到的淡黄色油残留物，得标题化合物(643.6mg，91％)无色油。TLC Rf 0.57(20％EtOAc/己烷)；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ7.05-7.22(m，4H)，7.01(d，J＝8.2Hz，1H)，6.76(d，J＝2.7Hz，1H)，6.67(dd，J＝8.2，2.7Hz，1H)，4.30(d，J＝15.0Hz，1H)，4.11-4.25(m，2H)，3.85(d，J＝15.0Hz，1H)，3.70-3.90(m，1H)，3.77(s，3H)，3.31(dd，J＝15.0，4.1Hz，1H)，2.93(dd，J＝15.0，9.2Hz，1H)，2.64(dd，J＝15.6，5.0Hz，1H)，2.52(dd，J＝15.6，9.3Hz，1H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)；FTIR(CCl4)1734，1611，1504，1285，1263，1155，1044cm-1；MS(ES)m/e333.0(M+Na)+，328.0(M+NH4)+，311.0(M+H)+，265.0(M+H-EtOH)+.g)(±)-10，11-二氢-3-羟基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
0℃，氩气氛下，将无水AlCl3(1.38g，10.35mmol)一次加到(±)-10，11-二氢-3-甲氧基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯-10-乙酸乙酯(643.6mg，2.07mmol)的无水CH2Cl2(21ml)溶液内。温热黄色溶液至RT并搅拌3小时，然后冷却至0℃并用3N冷HCl(10ml)使反应停止。分离各层，将水层用CH2Cl2提取。干燥(MgSO4)合并的有机层并浓缩。硅胶层析(25％ EtOAc/己烷)，得到标题化合物(611.7mg，100％)，为几乎无色的油。TLC Rf 0.26(20％EtOAc/己烷)；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.03-7.22(m，4H)，6.93(d，J＝8.1Hz，1H)，6.69(d，J＝2.6Hz，1H)，6.58(dd，J＝8.1，2.6Hz，1H)，5.00(s，1H)，4.25(d，J＝14.9Hz，1H)，4.11-4.25(m，2H)，3.73-3.88(m，1H)，3.79(d，J＝14.9Hz，1H)，3.28(dd，J＝15.0，4.1Hz，1H)，2.91(dd，J＝15.0，9.3Hz，1H)，2.65(dd，J＝15.6，4.9Hz，1H)，2.53(dd，J＝15.6，9.5Hz，1H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)；FTIR(CCl4)3611(尖峰)，3447(宽峰)，1734，1504，1291，1272，1176，1152cm-1；MS(ES)m/e314.2(M+NH4)+，297.2(M+H)+.h)(±)-10，11-二氢-3-(三氟甲磺酰氧基)-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
-78℃，氩气氛下，将三氟甲磺酸酐(0.45ml，2.68mmol)滴加到(±)-10，11-二氢-3-羟基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(611.7mg，2.06mmol)和2，6-二甲基吡啶(0.48ml，4.12mmol)的无水CH2Cl2(10.3ml)溶液内。0.5小时后，温热反应物至RT并搅拌1小时。用Et2O(50ml)稀释黄色溶液，并依次用1.0N HCl(5ml)、5％NaHCO3(5ml)和盐水(5ml)洗涤。干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(20％ EtOAc/己烷)，得到标题化合物无色油(808.9mg，92％)。TLC Rf(20％EtOAc/己烷)0.58；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ6.98-7.30(m，7H)，4.35(d，J＝15.1Hz，1H)，6.19(q，J＝7.1Hz，2H)，3.91(d，J＝15.2Hz，1H)，3.78-3.95(m，1H)，3.37(dd，J＝15.2，4.1Hz，1H)，3.02(dd，J＝15.2，9.6Hz，1H)，2.70(dd，J＝15.8，4.8Hz，1H)，2.53(dd，J＝15.8，9.6Hz，1H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)；FTIR(CCl4)1735，1493，1427，1250，1215，1144，961，856cm-1；MS(ES)m/e451.1(M+Na)+，446.2(M+NH4)+，429.2(M+H)+.i)(±)-10，11-二氢-3-羧基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯-10-乙酸乙酯
将(±)-10，11-二氢-3-(三氟甲磺酰氧基)-5H-二苯并-[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(808.9mg，1.89mmol)、KOAc(742mg，7.56mmol)、Pd(OAc)2(21.2mg，0.095mmol)、1，1′-双(二苯膦基)二茂铁(210mg，0.38mmol)和无水DMSO(11ml)的混合物用CO清洗(三次抽真空/CO清洗循环，接着向混合物中通入CO鼓泡5分钟)，然后在70℃油浴中于CO气袋压力下搅拌。3.5小时后，反应物用H2O(11ml)稀释，冷却至0℃，并用1.0N HCl(约8ml)酸化。用CH2Cl2提取(3×30ml)，干燥(Na2SO4)，浓缩并利用甲苯再浓缩，余一橙红色液体(2-3ml)。层析(硅胶，3∶2∶0.1 EtOAc/甲苯/AcOH；混合馏分用1∶1∶0.1 EtOAc/甲苯/AcOH再次层析)，得标题化合物(581.9g，95％)，为黄色粘性油，在40℃及高真空下可部分结晶。TLC Rf(3∶2∶0.1 EtOAc/甲苯/AcOH)0.60；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ7.95(d，J＝1.5Hz，1H)，7.87(dd，J＝7.8，1.5Hz，1H)，7.00-7.35(m，5H)，4.40(d，J＝15.2Hz，1H)，4.19(q，J＝7.1Hz，2H)，3.97(d，J＝15.2Hz，1H)，3.82-4.00(m，1H)，3.43(dd，J＝15.3，4.0Hz，1H)，3.07(dd，J＝15.3，9.5Hz，1H)，2.69(dd，J＝15.8，4.8Hz，1H)，2.53(dd，J＝15.8，9.5Hz，1H)，1.28(t，J＝7.1Hz，3H)；FTIR(CCl4)2357-3378(宽峰)，1735，1692，1280cm-1；MS(ES)m/e342.2(M+NH4)+，325.2(M+H)+，307.2(M+H-H2O)+.
制备2制备2-羧基-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯a)2-苯甲酰基-5-甲氧基苯乙酸甲酯
按J.Chem.Soc.，Perkin Trans I，1991，171所述，采用苯甲酰氯和氯化铝处理3-甲氧基苯乙酸甲酯，制得标题化合物。b)2-苄基-5-甲氧基苯乙酸甲酯
按照Synthesis，1978，763中所述的一般方法，用硼氢化钠和三氟乙酸处理制备2(a)的化合物，得到标题化合物。c)2-苄基-5-甲氧基苯乙酸
用氢氧化钠水溶液和甲醇处理制备2(b)的化合物并搅拌，浓缩混合物并用稀盐酸处理，得到标题化合物。d)5，11-二氢-2-甲氧基-10H-二苯并[a，d]环庚烯-10-酮
按照美国专利3,567,730中所述的一般方法，将制备2(c)的化合物加到磷酸和五氧化二磷的混合物中并加热搅拌至80℃，得到标题化合物。e)5，11-二氢-2-羟基-10H-二苯并[a，d ]环庚烯-10-酮
按照Tetrahedron Letters，1978，5211中的一般方法，用乙硫醇和氯化铝处理制备2(d)的化合物，得到标题化合物。f)5，11-二氢-2-(三氟甲磺酰)氧基-10H-二苯并[a，d]环庚烯-10-酮
按照J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，1987，904中所述的一般方法，用三氟甲磺酸酐处理制备2(e)的化合物，得到标题化合物。g)5，11-二氢-2-甲氧羰基-10H-二苯并[a，d]-环庚烯-10-酮
按照J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1987，904中的一般方法，在二甲亚砜中用CO、甲醇、乙酸钯和1，3-双(二苯膦基)Propare处理制备2(f)的化合物，得到标题化合物。h)5，11-二氢-2-羧基-10H-二苯并[a，d]环庚烯-10-酮
将制备2(g)的化合物与稀氢氧化钠水溶液一同搅拌，混合物用稀盐酸处理，得到标题化合物。i)5，11-二氢-2-叔丁氧羰基-10H-二苯并[a，d]环庚烯-10-酮
按照Synthesis，1983，2，135中所述的一般方法，用N，N-二甲基甲酰胺缩二叔丁醇处理制备2(h)的化合物，得到标题化合物。j)2-叔丁氧羰基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
按照Org.Reactions，1947，1，1和J.Am.Chem.Soc.，1938，60，2947中所述的一般方法，用锌粉和溴代乙酸乙酯处理制备2(i)的化合物，得到标题化合物。k)2-羧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
在二氯甲烷中用三氟乙酸处理制备(2j)的化合物并搅拌，浓缩混合物，得到标题化合物。1)2-羧基-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
采用实施例1(f)的一般方法，只是用制备2(k)化合物替代制备1(e)的化合物，得到标题化合物。
制备3制备7-羧基-9，10-二氢-4H-苯并[4，5]环庚并[1，2-b]呋喃-10-乙酸乙酯
采用制备2的一般方法，只是用3-呋喃甲酰氯替代苯甲酰氯，得到标题化合物。
制备4制备8-羧基-10，11-二氢-5H-四唑并[5，1-c][1，4]-苯并二氮杂-11-乙酸甲酯a)4-[N-(叔丁氧羰基)-N-(甲氧羰基)氨基甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯
向4-溴甲基-3-硝基苯甲酸叔丁酯(2.27g，7.2mmol)(Int.J.Peptide Res.，1990，36，31)的二甲基甲酰胺(25ml)溶液内加入叔丁基甲基亚氨基二羧酸钾(J.C.S.Perkin I，1977，1088-90) (1.56g，7.3mmol)的二甲基甲酰胺(20ml)悬浮液。搅拌此暗棕色溶液1小时并倾入水中(400ml)，乙酸乙酯(3×100ml)提取，合并的有机层用水(5×75ml)洗涤，干燥(硫酸钠)并浓缩，得浅橙色油，硅胶快速色谱纯化(20％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(2.15g，73％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，8.2(d，1H)，7.45(d，1H)，5.3(s，2H)，3.8(s，3H)，1.6(s，9H)，1.45(s，9H).b)4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]-3-硝基苯甲酸叔丁酯
将制备4(a)的化合物(2.15g，5.24mmol)溶于甲醇(120ml)和0.95N氢氧化钠(15ml)的混合液内。15分钟后，加乙酸(3.0ml)并浓缩混合物。残留物溶于乙酸乙酯(300ml)并用水(3×75ml)提取。有机层用盐水(75ml)洗涤、干燥(硫酸钠)并浓缩，得黄色油，用硅胶色谱纯化(20％乙酸乙酯/己烷)纯化，得标题化合物(1.0g，54％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.6(s，1H)，8.2(d，1H)，7.7(d，1H)，5.35(m，1H)，4.6(d，2H)，1.65(s，9H)，1.4(s，9H).c)3-氨基-4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]-苯甲酸叔丁酯
将含10％钯/碳(0.5g)的制备4(b)的化合物(0.80g，2.27mmol)的乙醇(100ml)溶液氢化(40psi)。30分钟后，混合物过滤并浓缩，得标题化合物(0.72g，100％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.25(m，2H)，7.1(d，1H)，4.9(b，1H)，4.25(d，2H)，1.6(s，9H)，1.45(s，9H).d)(E，Z)-4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁烯基)氨基]-苯甲酸叔丁酯
将制备4(c)的化合物(0.7g，2.2mmol)和乙炔二羧酸二甲酯(0.37g，2.6mmol)于甲醇(40ml)中的混合物加热回流30分钟，冷却并浓缩。残留物用快速色谱纯化(硅胶，20％乙酸乙酯/己烷)，得标题化合物(0.7g，70％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ9.6(s，1H)，7.7(d，1H)，7.35(m，2H)，5.5(s，1H)，5.0(b，1H)，4.4(d，2H)，3.75(s，3H)，3.7(s，3H)，1.6(s，9H)，1.45(s，9H).e)4-[N-(叔丁氧羰基)氨基甲基]-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸叔丁酯
制备4(d)的化合物(0.68g，1.5mmol)和10％钯/碳(0.5g)在甲醇(70ml)中于40psi氢气压力下摇动1小时，混合物过滤并浓缩，得标题化合物(0.66g，95％)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.8(d，1H)，7.75(s，1H)，7.1(d，1H)，5.4(b，1H)，4.9(b，1H)，4.6(m，1H)，4.3(m，2H)，3.7(s，3H)，3.65(s，3H)，2.9(m，2H)，1.6(s，9H)，1.45(s，9H).f)4-(氨甲基)-3-[2-(1，4-二甲氧基-1，4-二氧代-2-丁基)氨基]苯甲酸
制备4(e)的化合物(0.66g，1.4mmol)于二氯甲烷(10ml)和三氟乙酸(10ml)中保持室温1小时，浓缩，得标题化合物。(g)(R，S)-8-羧基-2，3，4，5-四氢-3-氧代-1H-1，4-苯并二氮杂-2-乙酸甲酯
将制备4(f)的化合物溶于甲醇(60ml)并用25％甲醇钠的甲醇溶液(0.73ml，3.2mmol)处理，温热至50℃反应1小时。混合物用溶在乙醚中的1N盐酸(3.5ml)酸化，浓缩，得标题化合物(0.44g，98％)。1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ8.15(t，1H)，7.2(s，1H)，7.1(d，1H)，7.05(d，1H)，5.0(dd，1H)，4.9(m，1H)，3.75(dd，1H)，3.6(s，3H)，2.8(dd，1H)，2.6(dd，1H).(h)(R，S)-8-羧基-10，11-二氢-5H-四唑并[5，1-c][1，4]苯并二氮杂-11-乙酸甲酯
按照J.Org.Chem.，1991，56，2395中所述的一般方法，在四氢呋喃中用三苯膦、偶氮二甲酸二乙酯和三甲基甲硅烷基叠氮化物处理制备4(g)的化合物，得标题化合物。
制备5制备(R，S)-8-羧基-10，11-二氢-5H-咪唑并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-11-乙酸甲酯a) (R，S)-8-羧酸-2，3，4，5-四氢-3-硫代-1H-1，4-苯并二氮杂-2-乙酸甲酯
按照Tet.Lett.，1980，21，4061的一般方法，用Lawesson试剂处理制备4(g)的化合物，得标题化合物。b)(R，S)-8-羧基-2，5-二氢-3-甲硫基-1H-1，4-苯并二氮杂-2-乙酸甲酯
按照Tetrahedron，1960，517的一般方法，用碘甲烷处理制备5(a)的化合物，得标题化合物。c)(R，S)-8-羧基-2，5-二氢-3-[(2，2-二甲氧基乙基)氨基]-1H-1，4-苯并二氮杂-2-乙酸甲酯
按照J.Heterocyclic Chem.，1989，26，205的一般方法，用氨基乙醛缩二甲醇处理制备5(b)的化合物，得标题化合物。d)(R，S)-8-羧基-10，11-二氢-5H-咪唑并[2，1-c][1，4]苯并二氮杂-11-乙酸甲酯
用三氟乙酸水溶液处理制备5(c)的化合物，得标题化合物。
制备6制备(R，S)-2-氨基-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]-环庚烯-10-乙酸乙酯a)2-苄氧羰基氨基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
加热制备2(k)化合物、三乙胺和二苯磷酰基叠氮化物于甲苯中的混合物。所形成的混合物用苄醇处理，搅拌并浓缩。残留物用硅胶色谱纯化，得标题化合物。b)(R，S)-2-氨基-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
将制备6(a)化合物溶于甲醇并用10％钯/碳和1M盐酸乙醚溶液处理，混合物在氢气环境中摇动。过滤混合物并浓缩得标题化合物。
制备7制备2-[1-[4-(苄氧羰基)哌嗪基]]-N-甲基-乙胺a)2-[1-[4-(苄氧羰基)哌嗪基]乙胺
用Tet.Lett.，1986，27，4391中的一般方法保护2-(1-哌嗪基)乙胺。10℃下，向搅拌的2-(1-哌嗪基)乙胺(4.0ml，31mmol)和三乙胺(6.3ml，45mmol)的乙腈(20ml)溶液内滴加入叔丁基二苯基氯甲硅烷(7.8ml，30mmol)的乙腈(10ml)溶液。混合物于RT搅拌2小时，冷至10℃，用三乙胺(6.3ml，45mmol O和氯甲酸苄酯(4.3ml，30mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液处理。混合物于RT搅拌2小时，过滤并浓缩。残留物在80％乙酸(100ml)中搅拌过夜，倾入盐水内并用乙酸乙酯洗涤。水相用饱和碳酸钠碱化，乙酸乙酯提取，并将有机相干燥(硫酸镁)，过滤和浓缩，得标题化合物(1.1g，14％)。1NMR(400 MHz，CDCl3)δ2.43(6H，m)，2.80(2H，m)，3.52(4H，m)，5.14(2H，s)，7.38(5H，s).h)2-[1-[4-(苄氧羰基)哌嗪基]]-N-甲基乙胺
10℃下，利用注射器向乙酐(1.0mL，9.8mmol)中滴加甲酸(0.5ml，12.2mmol)。搅拌混合物10分钟并加热至50℃反应2小时。冷却混合物至RT，加入无水四氢呋喃(10ml)，随后将制备7(a)化合物(1.0g，3.8mmol)溶于四氢呋喃中。混合物于RT搅拌2.5小时，浓缩和将残留物溶于四氢呋喃(25ml)，且冷却至10℃。10℃下向其中滴加溶在四氢呋喃(10ml)内的1.0M硫化甲基硼(Boron methyl sulfide)(1ml，10mmol)，搅拌此混合物，直至无气体逸出为止，再加热回流2小时。冷却混合物，小心用饱和盐酸甲醇溶液(20ml)处理并加热回流1小时，浓缩此混合物，得标题化合物(400mg，40％)。MS(ES)m/e 278.0[M+H]+；1NMR(400 MHz，CDCl3)δ2.68-3.92(15H，m)，5.15(2H，s)，7.37(5H，s).
制备8制备4-[N-(苄氧羰基)-(氨基亚氨基甲基)]苯甲酰氯
将4-[N-(苄氧羰基)-(氨基亚氨基甲基]苯甲酸(0.23g，1.0mmol)和亚硫酰氯(3ml)于二氯甲烷(3ml)中的混合物加热回流10分钟，浓缩，用甲苯处理和浓缩数次，得标题化合物。
制备9制备N-(叔丁氧羰基)-4，4′-联哌啶
将4，4′-联哌啶二盐酸化物(2.5g，10mmol)溶于水(10ml)并用5N氢氧化钠处理至pH8-9，用乙醇稀释至120ml并于RT搅拌。一次加入二碳酸二叔丁酯(2.4g，11mmol)的乙醇(80ml)溶液处理所形成的混合物，混合物于RT搅拌，其间加5NNaOH以保持pH8-9。5小时后，浓缩混合物并将残留物溶于1∶1乙醚∶水混合物(100ml)，且用5N氢氧化钠调节pH至12。水相用乙醚提取有机相依次用盐水，稀柠檬酸以及水洗涤。用5N氢氧化钠调节水相至pH12-13并用乙醚提取。有机相用盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，浓缩至清亮油，真空干燥，得标题化合物(1.7g，63％)固体。TLC Rf 0.4(Kieselgel 60 F254，15∶3∶22-丁醇∶甲酸∶水)；MS(ES)m/e 268.3[M+H]+.
制备10制备2-(甲氨基甲基)苯并咪唑二盐酸化物a)2-[(叔丁氧羰基]肌氨酰基]氨基苯胺
氩气氛下，将苯二胺(100g，0.924mol)和BOC肌氨酸(175g，0.924mol)的DMF(1750ml)溶液冷却至-10℃，1小时内缓慢连续加入DCC(190.8g，0.924mol)的CH2Cl2(1750ml)溶液。加料期间温度升至0℃。搅拌反应过夜，同时使温度升至RT。滤出白色沉淀，滤液用H2O(3.5L)和饱和盐水(1L)稀释。分离出CH2Cl2层，水层用EtOAc(2×1L)提取。合并的有机层用水(1L)及盐水(0.5L)洗涤，然后浓缩成黄色残留物(341g)。残留物用EtOAc研制，得标题化合物(179.4g，70％)，mp134-136℃。b)2-[(N-叔丁氧羰基-N-甲基)氨基甲基]苯并咪唑
将2-[(叔丁氧羰基)肌氨酰基]氨基苯胺(178.4g，0.639mol)的THF(900ml)和AcOH(900ml)溶液在氩气氛下加热回流1小时，然后小心对反应抽真空，并蒸去大部分THF。把残留溶液倒入搅拌的冰水中，加浓NH4OH溶液(1150ml)调节PH至10。将形成的油搅拌过夜进行结晶，滤出固体并于50℃大气压下干燥2天，得到黄白色固体(167g，100％)，mp140-150℃。在RT和大气压下进一步干燥，得粗制标题化合物(162g，97％)。b)2-(甲氨基甲基)苯并咪唑二盐酸化物
将4M HCl/二噁烷(616mL，2.46mol)和茴香醚(134ml，1.23mol)的溶液在氩气氛中冷却至0℃，再于30分钟内缓慢持续加入2-[(N-叔丁氧羰基-N-甲基)氨基甲基]苯并咪唑(161g，0.616mol)的CH2Cl2(800ml)溶液。加料期间温度升至8℃，且在物料未加完之前便有白色沉淀开始形成。搅拌反应20分钟，然后过滤收集标题化合物(66.6g，46％)，mp250-255℃(分解)。元素分析C9H11N3·2HCl：计算值：C，46.17；H，5.60；N，17.95，实测值：C，46.33；H，5.68；N，17.55。用Et2O稀释滤液，并将混合物放置过夜。过滤又得到标题化合物(62g，总产率128.6g，89％)，为粉色固体，mp248-253℃(分解)。
制备11制备2-[(2-氨基乙基)氨基]吡啶二盐酸化物a)单-BOC-1，2-乙二胺
0℃，氩气氛下，将二碳酸二叔丁酯(10.91g，50mmol)的CH2Cl2(50ml)溶液在30分钟内滴加到快速搅拌的1，2-乙二胺(33ml，500mmol)的CH2Cl2(250ml)溶液内。加料期间有沉淀析出。加料结束后将反应温热至RT，搅拌1小时，利用旋转蒸发仪浓缩。残留物溶于H2O(100ml)，过滤除去少量不溶物。滤液用CH2Cl2(3×100ml)提取，干燥(MgSO4)合并的有机物，浓缩，得标题化合物(6.00g，75％)，为混浊液体。1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ4.75-5.00(m，1H)，3.05-3.25(m，2H)，2.65-2.85(m，2H)，1.46(s，9H)，1.12(brs，2H).b)2-[[2-(BOC-氨基)乙基]氨基]吡啶N-氧化物
加热回流单-BOC-1，2-乙二胺(5.83g，36.39mmol)、2-氯吡啶-N-氧化物盐酸化物(7.25g，43.67mmol)、NaHCO3(15.29g，182mmol)和叔戊醇(36ml)的混合物。47小时后，冷却暗棕色混合物，用CH2Cl2(100ml)稀释，并抽滤除去不溶物。浓缩滤液，和用甲苯再浓缩，硅胶层析(10％ MeOH/CHCl3)后得到不纯标题化合物(8.23g，89％)，为黄色固体，该固体可不经进一步纯化而直接使用。TLC(10％MeOH/CHCl3)Rf0.42；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ8.16(dd，J＝6.5，1.3Hz，1H)，7.05-7.30(m，2H)，6.68(br d，J＝8.6Hz，1H)，6.50-6.65(m，1H)，5.70-5.95(m，1H)，3.25-3.60(m，4H)，1.44(s，9H)；MS(ES)m/e254(M+H)+.c)2-[[2-(BOC-氨基)乙基]氨基]吡啶
把10％Pd/C(106.4mg，0.10mmol)加到2-[[2-(BOC-氨基)乙基]氨基]吡啶-N-氧化物(126.7mg，0.5mmol)和环己烯(0.25ml，0.25mmol)的无水EtOH(5ml)溶液内，并加热回流混合物。16小时后，反应物通过硅藻土(celite)过滤并浓缩滤液。将各自制备(0.5mmol规模)得到的残留物合并，并将合并的物料通过硅胶色谱纯化(5％ MeOH/CHCl3)，得标题化合物(148.4g，63％，按1mmol 2-[[2-(BOC-氨基)乙基]氨基]吡啶-N-氧化物为基础计算)，为黄色油。TLC(5％MeOH/CHCl3)Rf0.43；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ8.05-8.12(m，1H)，7.37-7.46(m，1H)，6.53-6.61(m，1H)，6.41(d，J＝8.3Hz，1H)，5.12(br s，1H)，4.86(br s，1H)，3.26-3.51(m，4H)，1.44(s，9H)；MS(ES)m/e238(M+H)+.d)2-[(2-氨基乙基)氨基]吡啶二盐酸化物
0℃下，将4N盐酸的二噁烷溶液(3.2ml)连续加到2-[[2-(BOC-氨基)乙基]氨基]吡啶(148.4mg，0.63mmol)的无水CH2Cl2(3.2ml)溶液内，然后将反应温热至RT。2小时后，抽滤混合物，收集沉淀固体，并用无水Et2O洗涤，干燥得标题化合物(132.8mg，定量)，为黄色固体。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.99-8.07(m，1H)，7.92-7.98(m，1H)，7.19(d，J＝9.1Hz，1H)，6.98-7.04(m，1H)，3.76(t，J＝6.2Hz，2H)，3.27(t，J＝6.2Hz，2H，部分被残留溶剂信号遮盖)；MS(ES)m/e 138(M+H)+.
制备12制备2-[(3-羟基-1-丙基)氨基]吡淀-N-氧化物a)2-[(3-羟基-1-丙基)氨基]吡啶-N-氧化物
加热回流2-氯吡啶-N-氧化物(16.6g，0.1mol)、3-氨基-1-丙醇(15.3ml，0.2mol)，NaHCO3(42g，0.5mol)和叔戊醇(100ml)的混合物。2小时后，冷却反应物，用CH2Cl2(300ml)稀释，并抽滤除去不溶物。浓缩滤液并用甲苯再浓缩，余一黄色油。硅胶层析(20％ MeOH/CHCl3)后得标题化合物(15.62g，93％)黄色固体。TLC(20％MeOH/CHCl3)Rf0.48；1HNMR(250 MHz，CDCl3)δ8.07(dd，J＝6.6，1.2Hz，1H)，7.34(br t，1H)，7.10-7.30(m，1H)，6.64(dd，J＝8.5，1.4Hz，1H)，6.40-6.60(m，1H)，4.49(br s，1H)，3.65-3.90(m，2H)，3.35-3.60(m，2H)，1.75-2.00(m，2H)；MS(ES)m/e 169(M+H)+.
制备133-羧基-10，11-二氢-5-甲基二苯并[b，f]氮杂-10-乙酸甲酯a)5-甲氧基-2-(甲氧羰基)二苯胺
在甲醇中用间盐酸-甲醇处理5-甲氧基-2-(羧基)二苯胺(按Chem.Ber.，1956，89，2174-2190中所述制得)，得标题化合物。b)5，11-二氢-3-甲氧基-5-甲基-10H-二苯并[b，f]氮杂-10-酮
采用NL 7011296中所述的一般方法，只是用制备13(a)化合物替代5-氯-2-(甲氧羰基)二苯胺，得标题化合物。c)3-羧基-10，11-二氢-5-甲基-二苯并[b，f]-氮杂-10-乙酸甲酯
采用制备1(c-i)的方法，只是用制备13(b)化合物替代制备1(d)化合物，得标题化合物。
制备143-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f]噁庚因-10-乙酸甲酯a)3-甲氧基-二苯并[b，f]噁庚因-10(11H)-酮
采用J.Heterocycl.Chem.，1986，23，265-9中所述的一般方法，只是用苯酚替代4-氟苯酚，得标题化合物。b)3-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f]噁庚因-10-乙酸甲酯
采用制备1(e-i)的方法，只是用制备14(a)化合物替代制备1(d)化合物，得标题化合物。
制备153-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f]噻庚因-10-乙酸甲酯
采用制备1(e-i)的一般方法，只是用3-甲氧基二苯并[b，f]噻庚因-10(11H)-酮(按Collect.Czech.Chem.Commun.1979，44，2108-23所述制得)替代制备1(d)化合物，得标题化合物。
制备162-羧基-6，11-二氢-5H-二苯并[b，e]氮杂-6-乙酸甲酯a)2-苄基-4-溴-N-(甲酰基)苯胺
采用Coll.Czech.Chem.Commun.，1965，30，1163-1172中所述的一般方法，将2-苄基-4-溴苯胺(按Khim.Geterotsikl.Soedin.，1983，3，411-414所述制得)与甲酸乙酯一同加热，得到标题化合物。
b)2-溴-11H-二苯并[b，e]氮杂
采用Coll.Czech.Chem.Commun.，1965，30，1163-1172中所述的一般方法，将制备16(a)化合物在多磷酸和磷酰氯混合物中加热，得标题化合物。
c)2-溴-6，11-二氢-5H-二苯并[b，e]氮杂卓-6-乙酸甲酯
采用Bull.Chem.Soc.Jpn.，1990，63，3122-3131中所述的一般方法，冷却下将制备16(b)化合物在二氯甲烷中用乙酸甲酯的叔丁基二甲基甲硅烷基乙烯酮缩二乙醇、三甲基甲硅烷基氰化物和催化量的二-μ-氯-二(1，5-环辛二烯)合二铑([Rh(COD)Cl]2处理，得标题化合物。
d)2-羧基-6，11-二氢-5H-二苯并[b，e]氮杂卓-6-乙酸甲酯
采用步骤1(i)的一般方法，只是用制备16(c)化合物替代制备1(h)化合物，得标题化合物。
制备17
7-羧基-10，11-二氢-5-甲基-5H-二苯并[b，e][1，4]二氮杂-11-乙酸甲酯
a)2-氨基-5-溴-N-(甲基)二苯胺
采用Ann.Chem.，1898，303，322中所述的一般方法，只是用N-甲基苯胺替代苯胺，得2-硝基-5-溴-N-(甲基)二苯胺，将其用氯化亚锡还原，得标题化合物。
b)7-溴-5H-二苯并[b.e][1，4]二氮杂
采用Helv.Chem.Acta，1964，47，1163-72中所述的一般方法，只是用制备17(a)化合物替代2-氨基-N-(甲基)二苯胺，得标题化合物。
c)7-溴-10，11-二氢-5-甲基-5H-二苯并[b，e][1，4]二氮杂-11-乙酸甲酯
采用制备16(c)的一般方法，只是用制备17(b)化合物替代制备16(b)的化合物，得标题化合物。
d)7-羧基-10，11-二氢-5-甲基-5H-二苯并[b，e][1，4]二氮杂卓-11-乙酸甲酯
采用制备1(i)的一般方法，只是用制备17(c)化合物替代制备1(h)的化合物，得标题化合物。
制备18
7-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f][1，4]噁庚因-11-乙酸甲酯
a)4-溴-N-甲酰基-2-(苯氧基)苯胺
采用J.Chem.Soc.，Perkin I，1976，1279-1285所述的一般方法，将4-溴-2-(苯氧基)苯胺(按J.Chem.Soc.，1930，1202-1208所述制备)与甲酸一同加热，得标题化合物。
b)7-溴-二苯并[b，f][1，4]噁庚因
采用J.Chem.Soc.，Perkin I，1976，1279-1285中所述的一般方法，将制备18(a)化合物在多磷酸和磷酰氯混合物中加热，得标题化合物。
c)7-溴-10，11-二氢-二苯并[b，f][1，4]噁庚因-11-乙酸甲酯
采用制备16(c)的一般方法，只是用制备18(b)化合物替代制备16(b)的化合物，得标题化合物。
d)7-羧基-10，11-二氢二苯并[b，f][1，4]噁庚因-11-乙酸甲酯
采用制备1(i)的一般方法，只是用制备18(c)的化合物替代制备1(h)化合物，得标题化合物。
制备197-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f][1，4]噻庚因-11-乙酸甲酯a)2-苯硫基-4-(溴)苯胺
用氯化亚锡还原3-溴-6-硝基二苯基二硫化物(按J.Chem.Soc.，B，1966，963-72中所述制得)，得标题化合物。b)7-溴-二苯并[b，f][1，4]噻庚因
采用Helv.Chem.Acta，1964，47，1163-72中所述的一般方法，只是用制备19(a)化合物替代2-(苯硫基)苯胺，得标题化合物。c)7-溴-10，11-二氢-二苯并[b，f][1，4]噻庚因-11-乙酸甲酯
采用制备16(c)的一般方法，只是用制备19(b)的化合物替代制备16(b)的化合物，得标题化合物。d)7-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，d][1，4]噻庚因-11-乙酸甲酯
采用制备1(i)的一般方法，只是用制备19(c)化合物替代制备1(h)的化合物，得标题化合物。
制备20
2-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f]噁庚因-10-乙酸甲酯a)2-甲氧基-二苯并[b，f]噁庚因-10(11H)-酮
采用J.Heterocycl.Chem.，1986，23，265-9中所述的一般方法，只是用苯酚替代4-氟苯酚，得标题化合物。b)2-羧基-10，11-二氢-二苯并[b，f]噁庚因-10-乙酸甲酯
采用制备1(e-i)的方法，只是用制备20(a)的化合物替代制备1(d)的化合物，得标题化合物。
下述化合物说明了由前述各制备中所述中间体化合物制备本发明生物活性化合物的方法。
实施例1
制备(±)-10，11-二氢-3-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)-甲基]甲氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸a)(±)-10，11-二氢-3-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
室温下，将EDC(202.4mg，1.06mmol)一次性加到(±)-10，11-二氢-3-羧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(285.6mg，0.88mmol)、2-(甲氨基)-甲基苯并咪唑二盐酸化物(247.2mg，1.06mmol)、HOBt.H2O(142.7mg，1.06mmol)和二异丙基乙胺(0.61ml，3.52mmol)的无水DMF(4.4ml)溶液内，反应于RT搅拌16.5小时，然后用旋转蒸发仪(高真空)浓缩。残留物利用二甲苯再浓缩，然后溶于H2O(5ml)，用EtOAc提取(2×5ml)，干燥(MgSO4)，浓缩，并层析(硅胶，含5％MeOH的1∶1 EtOAc/CHCl3)，得标题化合物，为淡黄色泡沫(389.2mg，95％)。TLC：Rf(10％MeOH于1∶1 EtOAc/CHCl3)0.60；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.70-7.80(m，1H)7.40-7.50(m，1H)，7.35(s，1H)，7.21-7.32(m，3H)，7.04-7.21(m.5H)，4.76-4.88(m，2H)，4.36(dJ＝15.2Hz，1H)，4.18(q，J＝7.1Hz，2H)，3.90(d，J＝15.2Hz，1H)，3.82-3.95(m，1H)，3.38(dd，J＝15.4，4.0Hz，1H)，3.11(s，3H)，3.03(dd，J＝15.4，9.5Hz，1H)，2.69(dd，J＝15.8，4.8Hz，1H)，2.52(dd，J＝15.8，9.6Hz，1H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)：FTIR(CCl4)2700-3470(宽峰)，1735，1629 (肩峰)，1617，1484，1454，1422，1397，1271，1180，1157cm-1；MS(ES)m/e 468.2(M+H)+。b)(±)-10，11-二氢-3-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸钠盐
把1.0N LiOH(1.0ml，1.0mmol)加到(±)-10，11-二氢-3-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(389.2mg，0.83mmol)于THF(4.2ml)和H2O(3.2ml)中的混合物内，并将形成的黄色溶液于RT搅拌2小时，于40℃搅拌15小时，然后回流搅拌0.5小时。然后将反应物用旋转蒸发仪浓缩至于，将残留物溶于H2O(4ml)。溶液用Et2O(2×4ml)洗涤，Et2O层弃之。过滤水层以除去颗粒，然后，用1.0N HCl(1.0ml)中和。抽滤收集沉淀固体并用H2O洗涤，然后将其溶于热1∶1CH3CN/H2O。将溶液热过滤，除去不溶性棕色油。并冷却至RT。由于产物成油析出，将混合物用旋转蒸发仪浓缩至干。残留物溶于MeOH(2ml)，加入5％NaHCO3(2ml)。温热混合物至产生均匀溶液，然后浓缩除去MeOH。ODS层析(30％MeOH/H2，然后用1∶1 MeOH/H2O再层析)，浓缩，冷冻干燥，得标题化合物，为无色粉末(187.5mg，45％)。HPLC K′1.47(Hamilton PRP-1R，35％ CH3CN/H2O-0.1％ TFA)；1H NMR(400 MHz，CD3OD)旋转异构体混合物；6.80-7.65(m，11H)，4.64-5.05(m，2H)，3.68-4.41(m，3H)，2.87-3.46(m，5H)，2.30-2.58(m，2H)；MS(ES)m/e 440.2(M+H)+。元素分析C27H24N3O3Na.2.25H2O：计算值：C，64.60；H，5.72；N，8.37，实测值：C，64.52；H，5.80；N，8.27。
实施例2
制备(±)-10，11-二氢-3-[1-(4，4′-联哌啶基)羰基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸a)(±)-10，11-二氢-3-[1-(1′-BOC-4，4′-联哌啶基)羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
室温下，将EDC(209.3mg，1.09mmol)一次加到(±)-10，11-二氢-3-羧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(296.3mg，0.91mmol)、1-BOC-4，4′-联哌啶(293mg，1.09mmol)、HOBt·H2O(147.6mg，1.09mmol)和二异丙基乙胺(0.32ml，1.82mmol)的无水DMF(4.6ml)溶液内。反应物于RT搅拌过夜，用旋转蒸发仪(高真空)浓缩，残留物用二甲苯再浓缩，然后溶于H2O(5ml)。用EtOAc提取(2×5ml)，干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(7∶3EtOAc/己烷)，得标题化合物(463.4mg，89％)，为淡黄色泡沫。TLC Rf(7∶3 EtOAc/己烷)0.59；1H NMR(250MHz，CDCl3)δ6.94-7.46(m，7H)，4.58-4.88(m，1H)，4.37(d，J＝15.2Hz，1H)，4.19(q，J＝7.1Hz，2H)，3.89(d，J＝15.2Hz，1H)，3.68-4.30(m，4H).3.38(dd，J＝15.3，4.1Hz，1H)，3.01(dd，J＝15.3，9.4Hz，1H)，2.40-3.09(m，5H)，1.45(s，9H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)，0.85-1.90(m，11H)；FTIR(CCl4(1734，1694，1637，1426，1171cm-1；MS(ES)m/e 1149.8(2M+H)+，597.4(M+Na)+，575.4(M+H)+，519.4(M+H-C4H8)+。b)(±)-10，11-二氢-3-[1-(4，4′-联哌啶基)羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸
在40℃搅拌(±)-10，11-二氢-3-[1-(1′-BOC-4，4′-联哌啶基)羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(463.4mg，0.81mmol)、1.0N LiOH(1.0ml，1.0mmol)、THF(4.1ml)和H2O(3.1ml)的非均匀混合物。17小时后，在冰中冷却均相溶液并用1.0N HCl(1.5ml)酸化，CH2Cl2提取(3×10ml)，干燥(MgSO4)，和浓缩，得到灰白色泡沫。将其溶于CH2Cl2(4.1ml)，并冷却溶液至0℃。一次加入4.1ml TFA并将反应物温热至RT。1.5小时后，用旋转蒸发仪将淡黄色溶液浓缩至干，给出油。ODS层析(30％CH3CN/H2O-0.1％ TFA)，浓缩并冷冻干燥，得无色粉末标题化合物(437.2mg，86％)。HPLC k′1.91(Hamilton PRP-1R，30％CH3CN/H2O-0.1％ TFA)；1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ7.02-7.29(m，7H)，4.53-4.73(m，1H)，4.34(d，J＝15.0Hz，1H)，3.99(d，J＝15.0Hz，1H)，3.65-3.89(m，2H)，3.30-3.50(m，3H)，2.70-3.15(m，5H)，2.68(dd，J＝16.0，5.2Hz，1H)，2.52(dd，J＝16.0，9.1Hz，1H)，1.06-2.09(m，10H)；MS(ES)m/e 447.2(M+H)+。元素分析C28H34N2O3·1.5CF3CO2H·0.75H2O：计算值：C，59.00；H，5.91；N，4.44。实测值：C，58.96；H，6.00；N，4.50。
实施例3
制备(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-苯并咪唑基)-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸
a)4-(2-四氢吡喃氧基)-1-三丁基甲锡烷基-1-丁炔
0℃下，氩气氛中，将正丁基锂己烷溶液(1.6M，18.8ml，30mmol)在2分钟内连续加到2 -(3-丁炔氧基)四氢-2H-吡喃(4.7ml，30mmol)的无水THF(60ml)溶液内。0.5小时后，一次加入三丁基氯化锡(8.1ml，30mmol)并温热反应物至RT。3小时后，反应物用己烷(300ml)稀释，随后依次用H2O(2×60ml)、10％ KF(2×30ml)和饱和盐水(60ml)洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩并硅胶层析(3％ EtOAc/己烷)，得标题化合物(3.58g，27％)，为几乎无色的油。
TLC(5％EtOAc/己烷)Rf0.37；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ4.66(窄t，1H)，3.75-3.96(m，2H)，3.49-3.62(m，2H)，2.56(appt，2H)，1.76-1.91(m，1H)，1.65-1.78(m，1H)，1.42-1.65(m，10H)，1.22-1.41(m，6H)，0.821.08(m，15H)。
b)(±)-3-[4-(2-四氢吡喃氧基)-1-丁炔-1-基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
将(±)-10，11′-二氢-3-(三氟甲磺酰氧基)-5H-二氧苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(1.34g，3.13mmol)、4-(2-四氢吡喃氧基)-1-三丁基甲锡烷基-1-丁炔(1.66g，3.76mmol)、LiCl(398mg，9.39mmol)、二氯化二(三苯膦)合钯(110mg，0.094mmol)和无水二噁烷(31ml)的混合物在氩气氛中加热回流。1.5小时后，浓缩反应物以除去大部分二噁烷，将残留物溶于Et2O(100ml)。加入10％KF(50ml)并快速搅拌混合物0.5小时。移去水层并将Et2O通过CeliteR和MgSO4的混合物过滤。浓缩滤液并硅胶层析残留物(10％EtOAc/己烷)，得标题化合物(1.12g，83％)，为浅黄色油。TLC(20％EtOAc/己烷)Rf 0.40；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.21-7.30(m，1H)，7.06-7.20(m，5H)，7.00(d，J＝7.8Hz，1H)，4.69(t，J＝3.6Hz，1H)，4.31(d，J＝15.2Hz，1H)，4.11-4.23(m，2H)，3.76-3.97(m，4H)，3.59-3.68(m，1H)，3.48-3.57(m，1H)，3.34(dd，J＝15.2，4.1Hz，1H)，2.97(dd，J＝15.2，9.5Hz，1H)，2.70(t，J＝7.3Hz，2H)，2.65(dd，J＝15.7，4.8Hz，H)，2.51(dd，J＝15.7，9.5Hz，1H)，1.78-1.92(m，1H)，1.68-1.78(m，1H)，1.44-1.68(m，4H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)；MS(ES)m/e 455(M+Na)+。
c)(±)-3-[4-(2-四氢吡喃氧基)-1-丁基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
室温下，将(±)-3-[4-(2-四氢呋喃氧基)-1-丁炔-1-基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(1.2g，2.77mmol)、10％Pd/C(0.3g，0.28mmol)，和EtOAc(28ml)的混合物在50psi氢气压下于帕尔装置上振动，3小时后，通过CeliteR过滤反应物并浓缩滤液。硅胶层析(10％EtOAc/己烷)，得标题化合物(1.06g，88％)，为无色油。TLC(20％EtOAc/己烷)Rf 0.51；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.05-7.20(m，4H)，6.92-7.03(m，3H)，4.53-4.60(m，1H)，4.34(d，J＝15.1Hz，1H)，4.12-4.26(m，2H)，3.80-3.90(m，3H)，3.71-3.70(m，1H)，3.44-3.53(m，1H)，3.35-3.44(m，1H)，3.33(dd，J＝15.1，4.1Hz，1H)，2.95(dd，J＝15.1，9.4Hz，1H)，2.65(dd，J＝15.5，4.9Hz，1H)，2.49-2.61(m，3H)，1.77-1.90(m，1H)，1.45-1.77(m，9H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)；MS(ES)m/e 459(M+Na)+。
d)(±)-3-[4-羟基-1-丁基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
室温下搅拌(±)3-[4-(2-四氢吡喃氧基)-1-丁基]-5H -二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(456.0mg，1.04mmol)和对甲苯磺酸一水合物(60mg，0.31mmol)的无水EtOH(10ml)溶液，2小时后，反应用5％NaHCO3(1ml)骤停，浓缩除去EtOH。残留物用H2O(2ml)稀释并用CH2Cl2提取，干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(1∶1 EtOAc/己烷)，得标题化合物(342.4mg，93％)，为无色油。TLC(1∶1 EtOAc/己烷)Rf0.49；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ6.85-7.25(m，7H)，4.34(d，J＝15.1Hz，1H)，4.08-4.30(m，2H)，3.75-3.95(m，2H)，3.53-3.72(m，2H)，3.33(dd，J＝15.1，4.1Hz，1H)，2.95(dd，J＝15.1，9.4Hz)，2.40-2.75(m，4H)，1.45-1.80(m，4H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)；MS(ES)m/e 353(M+H)+。e)(±)-3-[3-羧基-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]-环庚烯-10-乙酸乙酯
氩气氛下，将(±)-3-[4-羟基-1-丁基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(342.4mg，0.97mmol)的无水CH2Cl2(19ml)溶液冷却至0℃，向其中一次加入2，2，6，6-四甲氧基氧代哌啶翁氯化物(J.Org.Chem.，1985，50，1332-1334；260mg，1.36mmol)。反应于0℃搅拌1小时，然后加入2-甲基-2-丁烯(1.2ml，11.64mmol)，随后加入冷的NaClO2(0.88g，7.76mmol)和NaH2PO4(0.90g，6.50mmol)的水(26ml)溶液(0℃)。10分钟后用EtOAc(100ml)稀释反应并分层，有机层依次用冷1.0NHCll(10ml)和饱和盐水(20ml)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(梯度：先1∶1 EtOAc/CHCl3，然后9∶9∶2 EtOAc/CHCl3/EtOH)，得不纯标题化合物。用硅胶再层析(7∶3∶0.1甲苯/EtOAc/AcOH)，得纯净标题化合物(233.7mg，66％)。TLC(1∶1 EtOAc/CHCl3)Rf 0.46；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.05-7.22(m，4H)，6.92-7.05(m，3H)，4.34(d，J＝15.0Hz，1H)，4.10-4.25(m，2H)，3.80-3.90(m，2H)，3.33(dd，J＝15.1，4.1Hz，1H)，2.95(dd，J＝15.1，9.4Hz，1H)，2.48-2.60(m，4H)，2.48-2.60(m，4H)，2.37(t，J＝7.4Hz，2H)，1.87-2.00(m，2H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ES)m/e 389(M+Na)+，367(M+H)+。
f)(±)-3-[3-[[(2-氨基苯基)氨基]羰基]丙-1-基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
氩气氛下，将(±)-3-[3-羧基-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(233.7mg，0.64mmol)的无水THF(6.4ml)溶液冷却至0℃，并加入4-甲基吗啉(0.14ml，1.28mmol)。将该溶液于0℃搅拌数分钟，然后滴加氯甲酸异丁酯(0.11ml，0.83mmol)。混浊反应物于0℃搅拌0.5小时，然后迅速加入1，2-苯二胺(138mg，1.28mmol)的无水THF(0.6ml)溶液。温热反应至RT并搅拌3小时，然后用H2O(2ml)稀释并用EtOAc提取，干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(3∶2EtOAc/己烷)，得标题化合物(257.6mg，88％)，为淡黄色泡沫。TLC(3∶2 EtOAc/己烷)Rf＝0.40；1H NMR(250 MHz，CDCl3)δ6.90-7.23(m，10H)，6.72-6.80(m，2H)，4.33(d，J＝15.0Hz，1H)，4.10-4.25(m，2H)，3.71-3.91(m，4H)，3.32(dd，J＝15.1，4.0Hz，1H)，2.95(dd，J＝15.1，9.5Hz，1H)，2.59-2.72(m，3H)，2.54(dd，J＝15.6，9.5Hz，1H)，2.34(t，J＝7.4Hz，2H)，1.98-2.09(m，2H)，1.27(t，J＝7.1Hz，3H)；MS(ES)m/e 457(M+H)+。
g)(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-苯并咪唑基)-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
将(±)-3-[3-[[(2-氨基苯基)氨基]羰基]丙-1-基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(257.6mg，0.56mmol)的冰AcOH(2.8ml)和无水THF(2.8ml)溶液在氩气氛中加热回流。3小时后，浓缩反应物将残留物，并用二甲苯再浓缩。把所余残留物溶于Et2O(30ml)并依次用1.0N NaOH(2ml)、H2O(2ml)和饱和盐水(2ml)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(含2％EtOH的1∶1 EtOAc/己烷)，得标题化合物(236.3mg，96％)，为灰白色泡沫。TLC(2％EtOH于1∶1 EtOAc/己烷)Rf 0.34；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ7.30-7.80(m，2H)，7.03-7.80(m，2H)，7.03-7.24(m，6H)，6.80-6.95(m，3H)，4.12-4.28(m，3H)，3.77-3.89(m，1H)，3.74(d，J＝15.1Hz，1H)，3.28(dd，J＝15.2，4.0Hz，1H)，2.90(dd，J＝15.2，9.5Hz，1H)，2.84(t，J＝7.7Hz，2H)，2.65(dd，J＝15.7，4.9Hz，1H)，2.60(t，J＝7.5Hz，2H)，2.52(dd，J＝15.7，9.6Hz，1H)，2.03-2.18(m，2H)，1.28(t，J＝7.1Hz，3H)；MS(ES)m/e 439(M+H)+。
h)(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-苯并咪唑基)-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸，钠盐
将(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-苯并咪唑基)-1-丙基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(236.3mg，0.54mmol)、1.0N NaOH(0.65ml，0.65mmol)和无水EtOH(4.8ml)的混合物在预热至50℃的油浴中温热，16小时后，浓缩反应物至干并将残留物用ODS色谱纯化(梯度：先用35％MeOH/H2O，然后40％MeOH/H2O)，浓缩，继之冷冻干燥，得标题化合物(143mg，58％)，系无色粉末。HPLC(PRP-1R，含0.1％TFA的40％CH3CN/H2O)，K1＝1.5；1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ7.41-7.49(m，2H)6.86-7.27(m，9H)，4.24(d，J＝14.7Hz，1H)，3.87(d，J＝14.7Hz，1H)，3.73-3.85(m，1H)，3.23-3.25(m，1H，部分被残留溶剂信号遮蔽)，2.80-2.93(m，3H)，2.62(t，J＝7.5Hz，2H)，2.46(dd，J＝14.4，5.1Hz，1H)，2.40(dd，J＝14.4，9.7Hz，1H)，2.05-2.17(m，2H)；MS(ES)m/e 411(M+H)+。元素分析C27H25N2O2Na·1.5H2O：计算值C，70.57；H，6.14；N，6.10；实测值：C，70.65；H，5.95；N，5.95。
实施例4
制备(±)-10，11-二氢-3-[[[2-(2-吡啶氨基)乙基]氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸
a)(±)-10，11-二氢-3-[[[2-(2-吡啶氨基)乙基]氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
室温下，将EDC(112.7mg，0.59mmol)一次加到10，11-二氢-3-羧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(157.8mg，0.49mmol)、2-[(2-氨基乙基)氨基]吡啶二盐酸化物(123.5mg，0.59mmol)、HOBt·H2O(79.5mg，0.59mmol)和二异丙基乙胺(0.43ml，2.45mmol)于无水DMF(2.5ml)中的混合物内。反应物于RT搅拌18小时，然后浓缩，残留物用二甲苯再浓缩，然后用H2O(5ml)稀释并依次用EtOAc(2×5ml)和CHCl3(2×5ml)提取。合并有机层并用少量MeOH处理以溶解少量不溶物，干燥(MgSO4)，浓缩，硅胶层析(5％MeOH/CHCl3)，得标题化合物(199.1mg，92％)，为黄色油。TLC(5％MeOH/CHCl3)Rf0.42；1H NMR(400，CDCl3)δ8.10(d，J＝3.5Hz，1H)，8.02(brs，1H)，7.60(app.narrowd，1H)，7.53(app.dd，1H)，7.33-7.42(m，1H)，7.08-7.22(m，5H)，6.57-6.64(m，1H)，6.45(d，J＝8.3Hz，1H)，4.79-4.90(m，1H)，4.36(d，J＝15.1Hz，1H)，4.11-4.26(m，2H)，3.92(d，J＝15.1Hz，1H)，3.80-3.95(m，1H)，3.55-3.72(m，4H)，3.38(dd，J＝152.4，4.1Hz，1H) 3.03(dd，J＝15.2，9.5Hz，1H)，2.66(dd，J＝15.8，4.8Hz，1H)，2.50(dd，J＝15.8，9.6Hz，1H)，1.27(t，J＝7.2Hz，3H)；MS(ES)m/e 444(M+H)+。
b)(±)10，11-二氢-3-[[[2-(2-吡啶氨基)乙基]氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸，钠盐
(±)10，11-二氢-3-[[[2-(2-吡啶氨基)乙基]氨基]羰基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(199.1mg，0.45mmol)和1.0N NaOH(0.54ml，0.54mmol)的无水EtOH(4ml)溶液在45℃油浴中温热。23小时后，浓缩反应物并将残留物用ODS色谱纯化(梯度：先用30％MeOH/H2O，然后40％MeOH/H2O)，浓缩并冷冻干燥，得标题化合物(95.8mg，46％)，为基本无色粉末。HPLC(PRP-1R，含0.1％TFA的30％ CH3CN/H2)K′＝2.0；1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ7.92(app.d，J＝4.2Hz，1H)，7.61(d，J＝1.8Hz，1H)，7.53(dd，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.38-7.47(m，1H)，7.01-7.24(m，5H)，6.56(d，J＝7.9Hz，1H)，6.50-6.60(m，1H)，4.34(d，J＝14.9Hz，1H)，3.97(d，J＝14.9Hz，1H)，3.78-3.89(m，1H)，3.44-3.61(m，4H)，3.39(dd，J＝15.4，4.4Hz，1H)，3.00(dd，J＝15.4，10.2Hz，1H)2.61(dd，J＝14.9，5.1Hz，1H)，2.43(dd，J＝14.9，9.5Hz，1H)；MS(ES)m/e 416(M+H)+。元素分析C25H24N3O3Na·1.33H2O：计算值：C，65.07；H，5.82；N，9.11；实测值：C，65.02；H，5.62；N，9.17。
实施例5
制备(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-吡啶氨基)-1-丙氧基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸
a)(±)-10，11-二氢-3-[3-[2-(N-氧代吡啶基)-氨基]-1-丙氧基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
室温，氩气氛下，将2-[(3-羟基-1-丙基)氨基]吡啶-N-氧化物(2mmol)和偶氮二羧酸二乙酯(2mmol)的无水DMF(10ml)溶液缓慢滴加到(±)-10，11-二氢-3-羟基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(1mmol)和三苯膦(2.1mmol)的无水DMF(10ml)溶液内。当反应结束后，用旋转蒸发仪除去溶剂，残留物用二甲苯再浓缩以除去残留DMF。硅胶层析，得标题化合物。
b)(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-吡啶氨基)-1-丙氧基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯
加热回流(±)-10，11-二氢-3-[3-[2-(N-氧代吡啶基)氨基]-1-丙氧基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(1mmol)、环己烯(10mmol)和10％Pd/C(0.1mmol)在异丙醇(10ml)中的混合物。当反应完全后，通过Celite过滤混合物并利用旋转蒸发仪浓缩滤液，残留物用甲苯再浓缩，然后硅胶层析，得标题化合物。
c)(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-吡啶氨基)-1-丙氧基]-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸，钠盐
将(±)-10，11-二氢-3-[3-(2-吡啶氨基)-1-丙氧基-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-乙酸乙酯(1mmol)和1.0N NaOH(1.2mmol)在无水EtOH(10ml)中的混合物在50℃油浴中温热。反应完成后，用旋转蒸发仪除去溶剂并将残留物通过ODS色谱纯化，浓缩并冷冻干燥，得标题化合物。
实施例6
2-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]羰基]-6，11-二氢-5H-二苯并[b，e]氮杂-6-乙酸
a)2-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]-羰基]-6，11-二氢-5H-二苯并[b，e]氮杂-6-乙酸乙酯
采用实施例1(a)的方法，只是用制备16(d)化合物替代制备1(i)的化合物，得标题化合物。
b)2-[[[(1H-苯并咪唑-2-基)甲基]甲氨基]-羰基]-6，11-二氢-5H-二苯并[b，e]氮杂-6-乙酸
采用实施例1(b)的方法，只是用实施例6(a)的化合物替代实施例1(a)化合物，得标题化合物。
上述说明充分公开了如何制备和使用本发明。但本发明并不局限于上述特定实施例，而应包括本发明权利要求范围内的所有变化的形式。本文中引用的各种期刊，专利和其它公开出版物参考文献构成了现有技术，并且所有列出的文献均并入本文用作参考。