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1、10申请公布号CN104206277A43申请公布日20141217CN104206277A21申请号201410463184522申请日20140912A01H4/0020060171申请人南京通泽农业科技有限公司地址210046江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号1幢701室72发明人杨存54发明名称一种莪术的快速繁殖方法57摘要本发明研究了一种莪术的快速繁殖方法,包括叶片的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养、炼苗移栽等步骤,本发明方法所制备的莪术成活率高,生产成本低,生长周期短,遗传稳定性好,利于大规模推广种植。51INTCL权利要求书1页说明书2页19中华人民共和国国家知识。
2、产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书2页10申请公布号CN104206277ACN104206277A1/1页21一种莪术的快速繁殖方法,包括叶片的消毒、丛生芽的诱导、丛生芽的增殖、生根培养、炼苗移栽,其主要步骤如下(1)取莪术带叶柄的叶片,对其进行消毒处理;(2)取步骤(1)灭菌处理过的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPMNAA01MG/LTDZ005MG/L玉米素0525MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照10002000LX,温度255;(3)取步骤(2)诱导出来的芽放入培养基改良WPMIBA001MG/L6BA0812MG/。
3、L玉米素1MG/L进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照2500LX,温度255;(4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPMNAA10MG/L200MG/L活性炭蔗糖15G/L琼脂40MG/L,PH585,光照3500LX,温度255;(5)生根后的莪术试管苗进行野外炼苗移栽。2按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法,其特征在于步骤(1)中所述莪术无菌叶片的获得为,取莪术带叶柄的叶片,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗35MIN,超净工作台上01升汞消毒处理7MIN,滴两滴吐温80,无菌水冲洗57遍。3按照权利要求1所述的一种。
4、莪术的快速繁殖方法,其特征在于步骤(2)(3)(4)改良WPM为硝酸氨减少到原来的3/4,含钙物质增加原来的1/4。4按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法,其特征在于步骤(2)和(3)中加入了一定含量的玉米素对莪术丛生芽的诱导和增殖都具有促进作用。5按照权利要求1所述的一种莪术的快速繁殖方法,其特征在于步骤(5)中的炼苗移栽方法为试管苗长约5CM,从培养瓶中取出,栽植于1010CM的营养钵中,营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土,光照10000LX,温度255,湿度80,定期浇水,施肥,30天后统计成活率。权利要求书CN104206277A1/2页3一种莪术的快速繁殖方法技术领域。
5、0001本发明涉及莪术组织培养的快繁方法,属于植物技术领域。背景技术0002莪术,姜科,CURCUMAZEDOARIACHRISTMROSC,又称蓬莪茂、山姜黄、臭屎姜,莪术为姜科、姜黄属多年生宿根草本,株高约1米;根茎圆柱形,肉质,具樟脑般香味,淡黄色或白色;根细长或末端膨大成块根。栽培或野生于林荫下,中国多地、印度至马来西亚有分布。产中国台湾、福建、江西、广东、广西、四川、云南、安徽等省区;印度至马来西亚亦有分布。莪术根茎含挥发油,油中主成分为莪术呋喃烯酮占4493,龙脑占428,大牻牛儿酮占616,还含和蒎烯,樟烯,柠檬烯,L,8按叶素,松油烯,异龙脑,丁香烯,姜黄烯,丁香烯环氧化物,姜。
6、黄酮,芳姜黄酮,莪术二酮以及莪术烯醇,异莪术烯醇等。另含二呋喃莪术烯酮,莪术二醇。又含抗氧化剂活性的姜黄素类化合物。破血行气,消积止痛。用于血瘀腹痛、肝脾肿大、心腹胀痛,积聚,妇女血瘀经闭,跌打损伤作痛饮食积滞。栽培或野生于林荫下,莪术对生态环境要求比较严格,适宜种植区域狭窄,主要采用根茎栽植,成活率低,组培方法成活率高,生产成本低,生长周期短,利于大规模推广种植。发明内容0003本发明所要解决的技术问题是提供一种莪术的快速繁殖方法,由该方法所制备得到的莪术成活率高,生产成本低,生长周期短,遗传稳定性好,利于大规模推广种植。0004本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的取莪术带叶柄的叶。
7、片,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗35MIN,超净工作台上01升汞消毒处理7MIN,滴两滴吐温80,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPMNAA01MG/LTDZ005MG/L玉米素2MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照10002000LX,温度255,诱导出来的芽放入培养基改良WPMIBA001MG/L6BA1MG/L玉米素1MG/L进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照2500LX,温度255,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPMNAA10MG/L20。
8、0MG/L活性炭蔗糖15G/L琼脂40MG/L,PH585,光照3500LX,温度255,试管苗长约5CM,从培养瓶中取出,栽植于1010CM的营养钵中,营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土,光照10000LX,温度255,湿度80,定期浇水,施肥,30天后统计成活率。0005采用本发明制备的莪术成活率为89,周期短,污染小,生产成本低,利于大规模种植。0006下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施方式说明书CN104206277A2/2页40007实施例1取莪术带叶柄的叶片,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲。
9、洗35MIN,超净工作台上01升汞消毒处理7MIN,滴两滴吐温80,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPMNAA01MG/LTDZ005MG/L玉米素05MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照10002000LX,温度255,诱导出来的芽放入培养基改良WPMIBA001MG/L6BA08MG/L玉米素1MG/L进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照2500LX,温度255,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPMNAA10MG/L200MG/L活性炭蔗糖15G/L琼脂40MG/L,P。
10、H585,光照3500LX,温度255,试管苗长约5CM,从培养瓶中取出,栽植于1010CM的营养钵中,营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土,光照10000LX,温度255,湿度80,定期浇水,施肥,30天后统计成活率达84。0008实施例2取莪术带叶柄的叶片,先在漂白粉中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗35MIN,超净工作台上01升汞消毒处理7MIN,滴两滴吐温80,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPMNAA01MG/LTDZ005MG/L玉米素25MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照100。
11、02000LX,温度255,诱导出来的芽放入培养基改良WPMIBA001MG/L6BA12MG/L玉米素1MG/L进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照2500LX,温度255,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPMNAA10MG/L200MG/L活性炭蔗糖15G/L琼脂40MG/L,PH585,光照3500LX,温度255,试管苗长约5CM,从培养瓶中取出,栽植于1010CM的营养钵中,营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土,光照10000LX,温度255,湿度80,定期浇水,施肥,30天后统计成活率达85。0009实施例3取莪术带叶柄的叶片,先在漂白粉。
12、中浸泡3MIN,毛刷去除表面污渍,流水冲洗35MIN,超净工作台上01升汞消毒处理7MIN,滴两滴吐温80,无菌水冲洗57遍,灭菌处理过的莪术带叶柄的叶片接入培养基配方为改良WPMNAA01MG/LTDZ005MG/L玉米素25MG/L诱导培养基中进行芽诱导培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照10002000LX,温度255,诱导出来的芽放入培养基改良WPMIBA001MG/L6BA10MG/L玉米素1MG/L进行增殖培养,附加蔗糖30G/L,琼脂7G/L,PH585,光照2500LX,温度255,增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基改良WPMNAA10MG/L200MG/L活性炭蔗糖15G/L琼脂40MG/L,PH585,光照3500LX,温度255,试管苗长约5CM,从培养瓶中取出,栽植于1010CM的营养钵中,营养钵基质为经过高温消毒并加有有机肥料的粪土,光照10000LX,温度255,湿度80,定期浇水,施肥,30天后统计成活率达85。说明书CN104206277A。