一种哥伦比亚血琼脂基础培养基.pdf

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摘要
申请专利号:

CN201410521486.3

申请日:

2014.09.30

公开号:

CN104313116A

公开日:

2015.01.28

当前法律状态:

实审

有效性:

审中

法律详情:

实质审查的生效IPC(主分类):C12Q 1/14申请日:20140930|||公开

IPC分类号:

C12Q1/14; C12Q1/04; C12R1/445(2006.01)N; C12R1/01(2006.01)N; C12R1/19(2006.01)N; C12R1/385(2006.01)N

主分类号:

C12Q1/14

申请人:

青岛康合伟业商贸有限公司

发明人:

王玉静; 高玉成

地址:

266000 山东省青岛市市南区南京路167号

优先权:

专利代理机构:

北京市百伦律师事务所 11433

代理人:

姜莹

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内容摘要

本发明为微生物领域,特别涉及一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,所述培养基的组分包括32.1g/L肉浸液肉汤、10.0g/L酪蛋白胰酶消化物、4.0g/L心胰酶消化物、1.2g/L玉米淀粉、4.5g/L肉胃酶消化物、4.5g/L酵母浸出粉、0.18g/L叠氮化钠、13.0g/L琼脂,pH值为7.1-7.5。所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、胰酪蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。本发明培养基组方简单,制备操作方便,成本低,利于推广应用;菌生长迅速,变异率低;便于观察,分析。

权利要求书

1.  一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,其特征在于所述培养基的组分包括32.1g/L肉浸液肉汤、10.0g/L酪蛋白胰酶消化物、4.0g/L心胰酶消化物、1.2g/L玉米淀粉、4.5g/L肉胃酶消化物、4.5g/L酵母浸出粉、0.18g/L叠氮化钠、13.0g/L琼脂,pH值为7.1-7.5。

2.
  根据权利要求1所述的种哥伦比亚血琼脂基础培养基,其特征在于所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、胰酪蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。

说明书

一种哥伦比亚血琼脂基础培养基
技术领域
本发明为微生物领域,特别涉及一种哥伦比亚血琼脂基础培养基。
背景技术
微生物培养(microculture)是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基,根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作,如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。
肠球菌(Enterococcus)属肠球菌属,是人类和动物肠道正常菌群的一部分,通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现,既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌,但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌,肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。
溶血性链球菌,需氧或兼性厌氧菌,营养要求较高,普通培养基上生长不良,需补充血清、血液、腹水,大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃,在20-42℃能生长,最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链,管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落,不同菌株溶血不一。
粪肠球菌,根据最新分类原则,粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原,根据兰氏(Lancefield)血清学分类,可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌(S.faecalis)、屎链球菌(S.faecium)和坚忍链球菌(S.durans),后者有牛链球菌(S.bovis)和马肠链球菌(S.equinus)。
其营养要求低,在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃pH9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长,并能耐65℃30分钟。它可利用精氨酸为能源,发酵山梨醇,不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNA-DNA杂交结果显示,肠球菌与链球菌属同源程度低,故有学者建议另立肠球菌属,与人类有关者为粪肠球菌(E.faecalis)和屎肠球菌(E.faecium)。
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质, 因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。
培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基;根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基;根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
发明内容
本发明克服现有技术中的不足,提供一种哥伦比亚血琼脂基础培养基。
本发明运用生物化学,微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理,对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选,对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较,研究出了本发明的培养基。
本发明所采用的技术方案为:
一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,所述培养基的组分包括32.1g/L肉浸液肉汤、10.0g/L酪蛋白胰酶消化物、4.0g/L心胰酶消化物、1.2g/L玉米淀粉、4.5g/L肉胃酶消化物、4.5g/L酵母浸出粉、0.18g/L叠氮化钠、13.0g/L琼脂,pH值为7.1-7.5。
在以上方案的基础上,所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、胰酪蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。
酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
称取本品39克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃左右时,加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。
本发明的有益效果:
1、培养基组方简单,制备操作方便,成本低,利于推广应用;
2、菌生长迅速,变异率低;
3、便于观察,分析。
具体实施方式
实施例1:
一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,所述培养基的组分包括32.1g/L肉浸液肉汤、10.0g/L酪蛋白胰酶消化物、4.0g/L心胰酶消化物、1.2g/L玉米淀粉、4.5g/L肉胃酶消化物、4.5g/L酵母浸出粉、0.18g/L叠氮化钠、13.0g/L琼脂,pH值为7.1-7.5。
所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、胰酪蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。
酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。
称取本品39克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷至45-50℃左右时,加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。
在30-35℃培养18-24小时。

质控菌株生长情况其它特征金黄色葡萄球菌良好有黄色色素单增李斯特氏菌良好无色透明小菌落大肠埃希氏菌良好无色透明大菌落沙门氏菌良好无色大菌落铜绿假单胞菌良好有绿色色素

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资源描述

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1、10申请公布号CN104313116A43申请公布日20150128CN104313116A21申请号201410521486322申请日20140930C12Q1/14200601C12Q1/04200601C12R1/445200601C12R1/01200601C12R1/19200601C12R1/38520060171申请人青岛康合伟业商贸有限公司地址266000山东省青岛市市南区南京路167号72发明人王玉静高玉成74专利代理机构北京市百伦律师事务所11433代理人姜莹54发明名称一种哥伦比亚血琼脂基础培养基57摘要本发明为微生物领域,特别涉及一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,所述培养。

2、基的组分包括321G/L肉浸液肉汤、100G/L酪蛋白胰酶消化物、40G/L心胰酶消化物、12G/L玉米淀粉、45G/L肉胃酶消化物、45G/L酵母浸出粉、018G/L叠氮化钠、130G/L琼脂,PH值为7175。所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。本发明培养基组方简单,制备操作方便,成本低,利于推广应用;菌生长迅速,变异率低;便于观察,分析。51INTCL权利要求书1页说明书3页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页10申请公布号CN104313116ACN104313116A1/1页21一。

3、种哥伦比亚血琼脂基础培养基,其特征在于所述培养基的组分包括321G/L肉浸液肉汤、100G/L酪蛋白胰酶消化物、40G/L心胰酶消化物、12G/L玉米淀粉、45G/L肉胃酶消化物、45G/L酵母浸出粉、018G/L叠氮化钠、130G/L琼脂,PH值为7175。2根据权利要求1所述的种哥伦比亚血琼脂基础培养基,其特征在于所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。权利要求书CN104313116A1/3页3一种哥伦比亚血琼脂基础培养基技术领域0001本发明为微生物领域,特别涉及一种哥伦比亚血琼脂基础培养基。背景技术0002微生物培养MI。

4、CROCULTURE是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基,根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作,如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。0003肠球菌ENTEROCOCCUS属肠球菌属,是人类和动物肠道正常菌群的一部分,通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现,既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌,但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌,肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染。

5、,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。0004溶血性链球菌,需氧或兼性厌氧菌,营养要求较高,普通培养基上生长不良,需补充血清、血液、腹水,大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37,在2042能生长,最适PH为7476。在血清肉汤中易成长链,管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径05075MM的细小菌落,不同菌株溶血不一。0005粪肠球菌,根据最新分类原则,粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原,根据兰氏LANCEELD血清学分类,可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者。

6、包括粪链球菌SFAECALIS、屎链球菌SFAECIUM和坚忍链球菌SDURANS,后者有牛链球菌SBOVIS和马肠链球菌SEQUINUS。0006其营养要求低,在普通营养琼脂上也可生长。能在10或45PH96或含65NACL肉汤培养基中生长,并能耐6530分钟。它可利用精氨酸为能源,发酵山梨醇,不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNADNA杂交结果显示,肠球菌与链球菌属同源程度低,故有学者建议另立肠球菌属,与人类有关者为粪肠球菌EFAECALIS和屎肠球菌EFAECIUM。0007培养基MEDIUM是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮。

7、物质、无机盐包括微量元素以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基如组织培养基,较长时间的贮存,必须放在36的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。0008培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基;根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基;根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。说明书CN104313116A2/3页4发明内容0009本发明克。

8、服现有技术中的不足,提供一种哥伦比亚血琼脂基础培养基。0010本发明运用生物化学,微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理,对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选,对培养基的PH值、离子强度、氧化还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较,研究出了本发明的培养基。0011本发明所采用的技术方案为0012一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,所述培养基的组分包括321G/L肉浸液肉汤、100G/L酪蛋白胰酶消化物、40G/L心胰酶消化物、12G/L玉米淀粉、45G/L肉胃酶消化物、45G/L酵母浸出粉、018G/L叠氮化钠、130G/L琼脂,PH值为71。

9、75。0013在以上方案的基础上,所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。0014酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。0015称取本品39克,加热溶解于1000ML蒸馏水中,分装,121高压灭菌15分钟,冷至4550左右时,加入相当于20MG庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。0016本发明的有益效果00171、培养基组方简单,制备操作方便,成本低,利于推广应用;00182、菌生。

10、长迅速,变异率低;00193、便于观察,分析。具体实施方式0020实施例10021一种哥伦比亚血琼脂基础培养基,所述培养基的组分包括321G/L肉浸液肉汤、100G/L酪蛋白胰酶消化物、40G/L心胰酶消化物、12G/L玉米淀粉、45G/L肉胃酶消化物、45G/L酵母浸出粉、018G/L叠氮化钠、130G/L琼脂,PH值为7175。0022所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉30G、氯化钠50G、胰酪蛋白胨120G、磷酸氢二钾20G。0023酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。0024称取本品39克,加热溶解于1000ML蒸馏水中,分装,121高压灭菌15分钟,冷至4550左右时,加入相当于20MG庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。0025在3035培养1824小时。0026质控菌株生长情况其它特征说明书CN104313116A3/3页5金黄色葡萄球菌良好有黄色色素单增李斯特氏菌良好无色透明小菌落大肠埃希氏菌良好无色透明大菌落沙门氏菌良好无色大菌落铜绿假单胞菌良好有绿色色素说明书CN104313116A。

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